细胞染色方法总结

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细胞染色方法大全

细胞染色方法大全 The manuscript was revised on the evening of 2021

Hoechst染色:hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合 (主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色. Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察

效果.hoechst有hoechest33342和hoechst33258两种 hoechsts33258，

hoechst33342二者区别不大，但是hoechst33342对细胞的毒性作用更小一些，所以一般来说hoechsts33258用于细胞固定后再染色，而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色！

染色步骤

PI (Propidium Iodide碘化丙啶)染色:是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，常用于细胞凋亡检测.碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种核酸染料(红色），它不能透过完整的细胞膜，但凋亡中晚期的细胞和坏死细胞由于细胞膜通透性的增加，PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红.用PI单一染色观测培养细胞，只能表示细胞的坏死情况，而不是凋亡（当然晚期凋亡PI亦可着色）。但是如果您只是想知道细胞的死亡情况，而不是仔细区分坏死或凋亡，那么PI单一染色也可以。但是如果您一定要认定细胞的凋亡，那么PI单一染色显然不够！

annexin-v染色细胞凋亡早期,细胞膜标志发生改变.其中,磷脂酰丝氨酸(Annexin-V,PS)外翻 ,Annexin-V 在Ca+存在的条件下与其高亲和力特异性结合.这样,Annexin-v 染色阳性,表示细胞处于早期凋亡状态.Annexin-V结合不同的荧光抗体,就可以利用流式细胞仪、荧光显微镜以及共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡的发生。Annexin V用FITC标记发绿色荧光；如果用PE标记就发红色荧光。

细胞染色操作步骤及注意事项

概述

细胞染色是一种常用的实验手段，它可以通过标记细胞的某些

特定结构或分子，帮助研究者观察和研究细胞的结构和功能。本文

档将介绍细胞染色的常用操作步骤及注意事项。

操作步骤

步骤一：细胞固定

1. 取出培养皿中的细胞载玻片。

2. 用PBS缓冲溶液洗涤细胞载玻片，去除培养基中的残留物质。

3. 使用细胞固定液（如4%的甲醛溶液）固定细胞，通常固定

时间为15-30分钟。

4. 用PBS缓冲溶液洗涤细胞载玻片，去除固定液中残留的甲醛。

步骤二：细胞渗透

1. 取出细胞载玻片中的细胞。

2. 用PBS缓冲溶液洗涤细胞载玻片，去除固定剂中的残留物质。

3. 在细胞载玻片上滴加渗透液（如0.1% Triton X-100），孵育10-15分钟。

4. 用PBS缓冲溶液洗涤细胞载玻片，去除渗透液中的残留物质。

步骤三：染色

1. 取出细胞载玻片中的细胞。

2. 在细胞载玻片上滴加适当浓度的染色液（如DAPI染料），

孵育时间根据实验需要而定（通常为5-15分钟）。

3. 用PBS缓冲溶液洗涤细胞载玻片，去除染色液中的残留物质。

步骤四：显微观察

1. 将细胞载玻片翻转到显微镜载玻片上。

2. 加入一滴适当的封片液（如甘油/丙酮溶液）。

3. 用显微镜观察和拍摄细胞。

注意事项

1. 操作时要注意佩戴实验手套和眼部防护设备，避免接触有毒

或有害物质。

2. 细胞固定液需要根据实验需要和细胞类型进行选择，避免使

用具有细胞毒性的固定液。

3. 染色液要根据需要选择，确保染色剂与研究对象的亲和力。

4. 操作过程中要注意细胞的温度和湿润度，避免细胞损伤。

细胞染色方法大全

欢迎阅读Hoechst染色:hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合(主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色.Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果.hoechst有hoechest33342和hoechst33258两种hoechsts33258，hoechst33342二者区别不大，但是hoechst33342对细胞的毒性作用更小一些，所以一般来说hoechsts33258用于细胞固定后再染色，而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色！

染色步骤

用于细

核染红.用PI

PI单一

外

翻

色荧光。

JC-1染色JC-1是一种阳离子染料，可以在线粒体内聚集，低浓度时主要以单体(monomer)存在，发射光以绿光(～525nm)为主；而在高浓度时则可以形成多聚体(aggregation)，发射光以红光(-590nm)为主。线粒体本身存在一定的极性(polarization)，其外膜为负极，内膜为正极。电位差由Ca2+、Na+和H+流调控。当线粒体状态良好时对JC-l摄取量少，因而在线粒体内主要以单体的形式存在绿光强度/红光强度的比值较高。在线粒体发生去极化(depolarization)时，线粒内JC-l的浓度较高，多以

欢迎阅读

多聚体的形式存在，绿光强度/红光强度的比值降低。JC-1染色的绿光强度/红光强度仅取决于线粒体的膜电势(membranepotential)，而与线粒体的形态、体积和密度都无关，因而能更好地反映线粒体的功能状态。由于凋亡发生的早期存在线粒体的去极性，因此，JC-1染色被用于检测凋亡的早期发生。其实验方法如下。

细胞染色方法及原理

细胞染色是生物学的一个基础技术，它是在光学显微镜下观察和研究细胞形态和结构的重要手段。细胞染色方法主要有两种：直接染色和间接染色。直接染色是指将染料直接应用于细胞样本上，以染色剂与细胞内各种成分产生化学反应，使细胞的结构和形态得以显现。间接染色则是先将染料应用于载玻片上的细胞样本，通过染色剂与样本内成分的亲和性，使样本中的目标分子标记出来，再用荧光显微镜等方法进行观察和分析。

直接染色

直接染色法有许多种，其中比较常用的为H&E染色、吉姆萨染色、利伯曼染色、朗格(KOH)染色等。

H&E染色

H&E染色是一种组织染色方法，通常用于病理学中观察组织切片的形态和结构。这种染色方法基于酸性和碱性染料的亲和性，将形态和结构不同的细胞和组织的成分染色成不同的颜色，从而使它们在显微镜下易于区分和观察。

1. 组织切片烘干，清洁去除蜡垢。

2. 组织切片在浓甲醛中进行固定处理。

3. 组织切片在乙醇溶液中逐渐脱水。

6. 组织切片在染色盒中加入碱性染料碧基苏丹、酸性染料伊红，进行染色。

吉姆萨染色

1. 细胞的悬液或细胞涂片，经过风干处理。

2. 片上加吉姆萨染色液。

3. 让染色液在室温下静置10-15分钟。

4. 加入相同容量的蒸馏水。

5. 充分洗去染色液。

6. 用红色染色液对细胞进行染色增强。

7. 最后再次漂洗片子。

利伯曼染色

利伯曼染色方法基于利伯曼氏液体染色剂在酸性环境下与细胞成分之间的化学反应，此反应使得不同细胞成分在显微镜下呈现不同的颜色，从而可以隔离和观察各种细胞成分。

1. 细胞经过固定处理，去除胆碱酯酶和脂肪酶的影响。

病理学技术——特殊染色最全总结

特殊染色是病理学中常用的一种技术手段，用于染色并可视化细胞、

组织或病理标本中特定的结构、细胞成分或病理损伤，从而帮助诊断人员

更准确地判断疾病类型和病理变化程度。特殊染色的种类繁多，下面将对

一些常见的特殊染色进行全面总结。

一、银染色法

银染色法是通过化学反应使待染物质与银盐结合，生成黑色或褐色沉淀，并在显微镜下观察变化。常见的银染色方法有：Reticulin（網狀纖維）染色、Gomori银染色、Grocott-Methenamine银染色。

二、PAS染色

PAS染色（Periodic Acid-Schiff染色）是一种常见的特殊染色技术，用于检测糖原以及其他多糖类物质。通常使用的PAS染色是将待染物标本

与过氧化铬酸溶液（Periodic Acid）处理后再使用Schiff试剂进行染色

的方法。PAS染色为酸性物质染成红色，大多为胞浆染色。常见的应用包

括鉴别肝细胞变性、神经纤维、肾小管等结构。

三、 Masson三色染色法

Masson三色染色法是一种多彩染色方法，通过染色剂的组合可染出

细胞核、胶原纤维和细胞质等不同组织成分。Masson三色染色方法包括

酸性区域以绿色染色显示胶原纤维，细胞核以黑色或暗蓝色染色显示，胞

质以红色染色显示。该染色法在组织纤维化、炎症反应等病变的检测中应

用广泛。

四、Mallory三色染色法

Mallory三色染色法和Masson三色染色法类似，可以用于显示胶原

纤维、细胞核和胞质等组织成分。其区别在于Mallory三色染色法标本在

染色前需用盐酸处理，使染色剂更易于沉积在纤维上，能更清晰地显示组

常用细胞染色方法

常用的细胞染色方法包括：

1.吉姆萨染色法：使用吉姆萨染料染色，可用于观察细胞核和细胞质的形态结构。

2.荧光染色法：使用荧光染料，通过荧光显微镜观察细胞内的特定结构、蛋白质或核酸等。

3.伊诺金染色法：使用伊诺金染料，主要用于显微镜下观察和鉴别细菌和真菌等微生物。

4.嗜酸染色法：使用嗜酸染料，能够染色细胞内的酸性结构和胞质。

5.嗜碱染色法：使用嗜碱染料，能够染色细胞内的碱性结构和胞质。

6.免疫组化染色法：利用特异性抗体与细胞中的特定蛋白质结合，再使用染料标记抗体来观察和定位细胞内的特定蛋白质。

7.核酸染色法：使用DNA或RNA特异性的染料，能够染色细胞内的核酸，常用于细胞周期和细胞分裂等研究。

8.血液细胞染色法：包括委氏染色法、中日染色法等，用于观察和鉴定血液细胞

类型和形态变化。

以上是一些常用的细胞染色方法，根据需要和研究目的的不同，可以选择合适的方法来观察和研究细胞。

血细胞的染色方法

血细胞的染色方法有以下几种：

1. Wright染色法：这是最常用的一种染色方法。首先将薄片

经过固定、脱水、清洁等处理，然后放置在含有Wright染料

的溶液中染色，之后再用清水洗去多余的染料。这种方法可以使红细胞呈粉红色，细胞核呈紫色。

2. Giemsa染色法：这种染色方法与Wright染色法类似，但染

料的浓度和染色时间稍有不同。这种方法可以使红细胞呈橙红色，细胞核呈紫色。

3. 苏木精-伊红染色法：首先将薄片经过固定、脱水、清洁等

处理，然后将薄片放入苏木精溶液中染色，之后再用酒精漂洗，最后用伊红染料染色。这种方法可以使红细胞呈红色，细胞核呈蓝色。

4. 嗜酸性染色法：这种方法可以用来染色嗜酸性粒细胞。常用的嗜酸性染料有尤伯霉素、柠檬酸镉等。

5. 免疫染色法：这是一种利用抗体与细胞特定抗原的特异性结合来标记细胞的染色方法。它可以用来检测一些特定的细胞类型或疾病标志物。

以上是一些常用的血细胞染色方法，在实际应用中选择染色方法会根据具体需要和目的来决定。

细胞染色方法大全

Hoechst染色:hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合(主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色. Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果.hoechst 有hoechest33342和hoechst33258两种hoechsts33258，hoechst33342二者区别不大，但是hoechst33342对细胞的毒性作用更小一些，所以一般来说hoechsts33258用于细胞固定后再染色，而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色！

染色步骤

annexin-v染色细胞凋亡早期,细胞膜标志发生改变.其中,磷脂酰丝氨酸(Annexin-V,PS)外翻,Annexin-V 在Ca+存在的条件下与其高亲和力特异性结合.这样,Annexin-v 染色阳性,表示细胞处于早期凋亡状态.Annexin-V结合不同的荧光抗体,就可以利用流式细胞仪、荧光显微镜以及共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡的发生。Annexin V用FITC标记发绿色荧光；如果用PE标记就发红色荧光。

细胞染色方法大全

之迟辟智美创作

Hoechst染色:hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合(主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色. Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果.hoechst 有hoechest33342和hoechst33258两种hoechsts33258，hoechst33342二者区别不年夜，可是hoechst33342对细胞的毒性作用更小一些，所以一般来说hoechsts33258用于细胞固定后再染色，而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色！

染色步伐

PI(Propidium Iodide碘化丙啶)染色:是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，经常使用于细胞凋亡检测. 碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种核酸染料(红色），它不能透过完整的细胞膜，但凋亡中晚期的细胞和坏死细胞由于细胞膜通透性的增加，PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红.用PI单一染色观测培养细胞，只能暗示细胞的坏死情况，而不是凋亡（固然晚期凋亡PI亦可着色）.可是如果您只是想知道细胞的死亡情况，而不是仔细区分坏死或凋亡，那么PI单一染色也可以.可是如果您一定要认定细胞的凋亡，那么PI单一染色显然不够！

annexin-v染色细胞凋亡早期,细胞膜标识表记标帜发生改变.其中,磷脂酰丝氨酸(Annexin-V,PS)外翻 ,Annexin-V 在Ca+存

在的条件下与其高亲和力特异性结合.这样,Annexin-v 染色阳性,暗示细胞处于早期凋亡状态.Annexin-V结合分歧的荧光抗体,就可以利用流式细胞仪、荧光显微镜以及共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡的发生.Annexin V用FITC标识表记标帜发绿色荧光；如果用PE标识表记标帜就发红色荧光.

细胞染色知识点总结

一、细胞染色的基本原理

1. 细胞染色的概念

细胞染色是指利用染色剂将生物细胞的各种器官、细胞核和细胞质等成分着色，以便于观

察和研究的一种实验技术。

2. 细胞染色的基本原理

细胞染色的基本原理是利用染色剂对细胞中的某些结构或化合物有选择地着色，从而突出

目标结构，使之能够被观察。

3. 细胞染色的目的

细胞染色的目的是为了使细胞各部分或特定结构在显微镜下能够清晰的观察到，并且可以

研究细胞的结构、功能和动态变化。

二、常用的细胞染色方法

1. 基本染色技术

基本染色技术主要包括HE染色、Giems染色和PAP染色等，这些染色方法可以将细胞核、细胞质以及其他不同的细胞结构在显微镜下清晰的观察到，是细胞学研究中最常用的染色

方法。

2. 免疫组化染色

免疫组化染色是利用抗体-抗原特异性反应原理，通过特定的抗体将被检测的分子或结构

着色的方法。这种方法可以用于检测细胞中特定的蛋白质、细胞器等，广泛应用于细胞生

物学和病理学研究中。

3. 分子生物学标记法

分子生物学标记法主要是利用特定的标记分子对细胞中的遗传物质进行标记，如荧光标记、辐射标记等，通过显微镜观察能够清晰的观察到目标分子的位置和表达情况，是现代生物

学研究中的重要技术。

4. 着色体分析

着色体分析主要是通过对染色体进行着色，观察染色体的结构、数量和变化等，包括有丝

分裂图像分析、FISH法、G带分析法等，是细胞遗传学研究的重要手段。

5. 细胞动力学标记法

细胞动力学标记法主要是通过对细胞内特定结构或分子进行标记，如微管标记、细胞骨架

标记等，可以研究细胞的运动、分裂和形态变化等过程。

细胞染色方法总结

Hoechst染色:hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合（主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色. Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果.hoechst有hoechest33342和hoechst33258两种hoechsts33258,hoechst33342二者区别不大，但是hoechst33342对细胞的毒性作用更小一些,所以一般来说hoechsts33258用于细胞固定后再染色,而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色！

染色步骤

PI（Propidium Iodide碘化丙啶)染色：是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，常用于细胞凋亡检测。碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一种核酸染料(红色），它不能透过完整的细胞膜，但凋亡中晚期的细胞和坏死细胞由于细胞膜通透性的增加，PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红.用PI单一染色观测培养细胞，只能表示细胞的坏死情况,而不是凋亡(当然晚期凋亡PI亦可着色）。但是如果您只是想知道细胞的死亡情况，而不是仔细区分坏死或凋亡,那么PI单一染色也可以。但是如果您一定要认定细胞的凋亡,那么PI单一染色显然不够！

annexin—v染色细胞凋亡早期,细胞膜标志发生改变。其中,磷脂酰丝氨酸

（Annexin-V，PS）外翻，Annexin-V 在Ca+存在的条件下与其高亲和力特异性结合。这样，Annexin—v 染色阳性,表示细胞处于早期凋亡状态.Annexin—V 结合不同的荧光抗体，就可以利用流式细胞仪、荧光显微镜以及共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡的发生。Annexin V用FITC标记发绿色荧光;如果用PE标记就发红色荧光。

细胞染色方法大全

染色步骤

annexin-v染色细胞凋亡早期,细胞膜标志发生改变.其中,磷脂酰丝氨酸(Annexin-V,PS)外翻,Annexin-V 在Ca+存在的条件下与其高亲和力特异性结合.这样,Annexin-v 染色阳性,表示细胞处于早期凋亡状态.Annexin-V结合不同的荧光抗体,就可以利用流式细胞仪、荧光显微镜以及共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡的发生。Annexin V用FITC标记发绿色荧光；如果用PE标记就发红色荧光。

细胞染色方法

一、形态学观察方法

1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出

芽”现象。

2、丫啶橙（AO)染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色

质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。

3、台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、破裂，台盼蓝染料进入细胞，细胞变蓝，即为坏死。如果细胞膜

完整，细胞不为台盼蓝染色，则为正常细胞或凋亡细胞。此方法对反映细胞膜的完整性，区别坏死细胞有一定的帮助。

4、透射电镜观察：可见凋亡细胞表面微绒毛消失，核染色质固缩、边集，常呈新月形，核膜皱褶，胞

质紧实，细胞器集中，胞膜起泡或出“芽”及凋亡小体和凋亡小体被临近巨噬细胞吞噬现象。

二、DNA凝胶电泳

（一）、检测原理

细胞发生凋亡或坏死，其细胞DNA均发生断裂，细胞内小分子量DNA片断增加，高分子DNA减少，胞质内出现DNA片断。但凋亡细胞DNA断裂点均有规律的发生在核小体之间，出现180－200bpDNA片断，而坏死细胞的DNA断裂点为无特征的杂乱片断，利用此特征可以确定群体细胞的死亡，并可与坏死细胞区别。

（二）结果判断

正常活细胞DNA 电泳出现阶梯状（LADDER)条带；坏死细胞DNA电泳类似血抹片时的连续性条带。

三、酶联免疫吸附法（ELISA)核小体测定

凋亡细胞的DNA断裂使细胞质内出现核小体。核小体由组蛋白及其伴随的DNA片断组成，可由ELISA 法检测。

（一）检测步骤

1、将凋亡细胞裂解后高速离心，其上清液中含有核小体；

2、在微定量板上吸附组蛋白体’

细胞染色方法

一、形态学观察方法

二、1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出

芽”现象。

三、2、丫啶橙（AO)染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色

质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。

四、3、台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、破裂，台盼蓝染料进入细胞，细胞变蓝，即为坏死。如果细胞

膜完整，细胞不为台盼蓝染色，则为正常细胞或凋亡细胞。此方法对反映细胞膜的完整性，区别坏死细胞有一定的帮助。

五、4、透射电镜观察：可见凋亡细胞表面微绒毛消失，核染色质固缩、边集，常呈新月形，核膜皱褶，

胞质紧实，细胞器集中，胞膜起泡或出“芽”及凋亡小体和凋亡小体被临近巨噬细胞吞噬现象。

六、二、DNA凝胶电泳

七、（一）、检测原理

八、细胞发生凋亡或坏死，其细胞DNA均发生断裂，细胞内小分子量DNA片断增加，高分子DNA减少，胞

质内出现DNA片断。但凋亡细胞DNA断裂点均有规律的发生在核小体之间，出现180－200bpDNA片断，而坏死细胞的DNA断裂点为无特征的杂乱片断，利用此特征可以确定群体细胞的死亡，并可与坏死细胞区别。

九、（二）结果判断

十、正常活细胞DNA 电泳出现阶梯状（LADDER)条带；坏死细胞DNA电泳类似血抹片时的连续性条带。

十一、三、酶联免疫吸附法（ELISA)核小体测定

十二、凋亡细胞的DNA断裂使细胞质内出现核小体。核小体由组蛋白及其伴随的DNA片断组成，可由ELISA法检测。

十三、（一）检测步骤

十四、1、将凋亡细胞裂解后高速离心，其上清液中含有核小体；

细胞染色方法总结

Hoechst染色：hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合（主要为凋亡活细胞）在紫

外光下将核染为蓝色。Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果。hoechst有hoechest33342和hoechst33258两种hoechsts33258，hoechst33342二者区别不大，但是hoechst33342对细胞的毒性作用更小一些,所以一般来说hoechsts33258用于细胞固定后再染色,而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色!

染色步骤

PI (Propidium Iodide碘化丙啶)染色：是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，常用于细胞凋亡检测.碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种核酸染料(红色），它不能透过完整的细胞膜，但凋亡中晚期的细胞和坏死细胞由于细胞膜通透性的增加,PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红。用PI单一染色观测培养细胞,只能表示细胞的坏死情况,而不是凋亡(当然晚期凋亡PI亦可着色)。但是如果您只是想知道细胞的死亡情况，而不是仔细区分坏死或凋亡,那么PI单一染色也可以。但是如果您一定要认定细胞的凋亡，那么PI单一染色显然不够！

annexin—v染色细胞凋亡早期，细胞膜标志发生改变.其中,磷脂酰丝氨酸(Annexin-V，PS）外翻，Annexin-V 在Ca+存在的条件下与其高亲和力特异性结合。这样,Annexin—v 染色阳性，表示细胞处于早期凋亡状态。Annexin-V结合不同的荧光抗体，就可以利用流式细胞仪、荧光显微镜以及共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡的发生.Annexin V用FITC标记发绿色荧光；如果用PE标记就发红色荧光。

细胞染色方法大全

Hoechst染色:hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合(主要为凋亡活细胞)在紫外光下

将核染为蓝色、Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其她荧光的观察效果、hoechst有hoechest33342与hoechst33258两种hoechsts33258,hoechst33342二者区别不大,但就是hoechst33342对细胞的毒性作用更小一些,所以一般来说hoechsts33258用于细胞固定后再染色,而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色！染色步骤

PI (Propidium Iodide碘化丙啶)染色:就是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,常用于细胞凋亡检测、碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)就是一种核酸染料(红色),它不能透过完整的细胞膜,但凋亡中晚期的细胞与坏死细胞由于细胞膜通透性的增加,PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红、用PI单一染色观测培养细胞,只能表示细胞的坏死情况,而不就是凋亡(当然晚期凋亡PI亦可着色)。但就是如果您只就是想知道细胞的死亡情况,而不就是仔细区分坏死或凋亡,那么PI单一染色也可以。但就是如果您一定要认定细胞的凋亡,那么PI单一染色显然不够！

annexin-v染色细胞凋亡早期,细胞膜标志发生改变、其中,磷脂酰丝氨酸(Annexin-V,PS)外翻,Annexin-V 在Ca+存在的条件下与其高亲与力特异性结合、这样,Annexin-v 染色阳性,表示细胞处于早期凋亡状态、Annexin-V结合不同的荧光抗体,就可以利用流式细胞仪、荧光显微镜以及共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡的发生。Annexin V用FITC标记发绿色荧光;如果用PE标记就发红色荧光。