流式细胞内染色方法

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Intracellular staining protocol

1. 收集细胞,经100-200ul的2%多聚甲醛避光固定15-20min。

2. PBS洗涤细胞,离心弃上清。

3. 打孔:加入10ul 1% saponine及90 ul PBS,及1:100的FCR blocking(我们配置的saponine 储存浓度为1%,使用浓度为0.1%),室温避光放置10min。(固定和打孔避光与否不是很必要哈,我在国外的实验室用的protocol是特意标明了避光。)切记勿洗。

4. 染色:直接在上述打孔buffer中加入你需要染色的抗体,避光孵育即可。

5. 洗涤后,重悬细胞沉淀上机检测。

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