流式细胞内染色方法
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
Intracellular staining protocol
1. 收集细胞,经100-200ul的2%多聚甲醛避光固定15-20min。
2. PBS洗涤细胞,离心弃上清。
3. 打孔:加入10ul 1% saponine及90 ul PBS,及1:100的FCR blocking(我们配置的saponine 储存浓度为1%,使用浓度为0.1%),室温避光放置10min。(固定和打孔避光与否不是很必要哈,我在国外的实验室用的protocol是特意标明了避光。)切记勿洗。
4. 染色:直接在上述打孔buffer中加入你需要染色的抗体,避光孵育即可。
5. 洗涤后,重悬细胞沉淀上机检测。