胃癌中Bmi-1的表达及意义
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ｐｎ ｏ ｉ ｈｔ ｅ ｒ德 国 Ｅ ｐ ｎｏｆ 司 ） 总 Ｒ Ａ ｅｄｒ Ｂｏ ｏ ｍ ｔ ｆ ｐ ｏ ｅ ｐｅ ｄｒ公 、 Ｎ 提取 试 剂 Ｔｉ ｌ Ｉｖ ｒ ｅ ｒ ｏ（ｎｉｏ ｎ公 司 ） 逆 转 录 试 剂 盒 ｚ ｔｇ 、 （ ｏｏｏ 司） Ｔｙｂ 公 。 １３ 总 Ｒ Ａ提 取 和逆转 录 ． Ｎ ． 将 组 织标本 用 组织 碾
锭染色后于凝胶成像仪紫外透射观察结果 。
１６ 统计 学处理 ． 每 个样本 均 重复 测定 ３次 ， 临床
膜组织作为对照组 ， 年龄 和性别与 胃癌组相 比均有 可 比性 。
１２ 仪 器 和 试 剂 ． Ｐ Ｒ 仪 为 Ｐ Ｒ ｔ ｒ ａ ｃｃ Ｃ Ｃ ｈ ｍ ｌ ｙｌ ｅ ｅ
２１ Ｒ Ａ 电泳 ． Ｎ
Ｒ Ａ电泳后 琼 脂糖 凝 胶 电泳 成 像 Ｎ
系统显 示清 晰 的 ２ ８ｓ和 １ ８Ｓ条带 和 ５Ｓ条带 ， 明 表
Ｒ Ａ完 整性 好见 图 １ Ｎ 。
１ ２ ３ ４
磨器碾碎成细胞悬液 ， 过滤得单细胞悬液 ， 离心后取 沉淀 ， １ ｌ ｒｏ 混匀后置室温 ５ｍｎ 充分裂解 加 ｉｌ ｍ Ｔｚ ， ｉ， 核蛋 白复合物 ， 三氯 甲烷 分层 ， 经 异丙 醇沉淀 ， 用
・－－—
—
３ ６ ・— ２ － － —
Ｃｈｎ ＪＬ ｂ Ｄｉ￣ Ｆｅｒｆｖ ２ １， １１ Ｎｏ． ｉ ａ ａｎ， ｂｕｒቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ，０１ Ｖ０ ５， ２ ｉ
文 章 编 号 ：０７ ２７ ２ １）２ ０ ２ —０ １０ —４ ８（０ １０ — ３６ ２
胃癌中 Ｂ ｉ 的表达及意义 ｍ一 １
陈 忠 步 雪锋 毛 须平 毛 ， ， ， 飞
（． 阳市人 民医院 检验科 ， １丹 江苏 丹阳 ２２０； ． １ ０ ２镇江市第一人 民医院 ； ． ３ ３江苏大学基础 医学与 医学技术学 院）
胃癌 是 我 国常 见 的恶 性 肿 瘤 之 一 。 胃癌 的 侵 袭 、 移 是 影 响其 预 后 的 主要 因素 。Ｂ ｉ 基 因 （ 转 ｍ一 １ Ｂ ｃ！ｓｅｉｃＭＬ ｔ ｒｔｎｓｅ１属 于多梳 基 因家 族 ｅ— ｃ Ｖ ｉｅ ａｏ ｉ．） ｌｐ ｆ ｉ ｎｇ ｉ ｔ
达， 主要 是通 过调 节 细 胞周 期 在 肿 瘤 的 发 生发 展 中 起 作用 … 。我们 应用 Ｒ ．Ｃ １ ＴＰ Ｒ技术 检测 Ｂ ｉ Ｒ Ａ ｍ一 ｍ Ｎ １
物 长 度 ： ４ ｐ －ｃｎ 上 游 引 物 序 列 ： Ｃ Ｃ ３ ８ ｂ 。￣ａｔ ｉ ５一Ａ —
Ｇ
Ｃ Ａ Ｃ ＦＡ Ｃ Ｃ 一 ， 游 引 物序 列 ： Ｃ Ｔ Ｔ Ｃ Ｔ Ｃ Ａ Ｔ Ｃ３ 下 ５．Ａ ．
浓度 为 ２ ｍ ｌＬ ． ｌ１ ｍ ｌＬｄ ， ． 、 ５ｍ ｏ ）２ ５ 、０ｍ ｏ Ｎ Ｐ０ ５ ／ ／ Ｉ
１ ｍ ｌ／ ０ｐ ｏ Ａ的上 下游 引物各 ０５ ， ／ ｌ ａ ０２ ／ ． ｌ５Ｕ ｑ酶 ． Ｔ
ｌｃ Ｎ ，Ｄ Ａ模 板 １ ， ｄ Ｈ Ｏ至 ２ ， 增 条件 为 ： ｌ加 ｄ ２ ０ 扩
（６Ｃ）退 火 ３ ，２Ｃ 伸 ３ ，５个 循环 ；２ １ ５￣ ０Ｓ７ ￣延 ０Ｓ３ ７℃ ０ ａ 。取 ５ 扩 增产 物 １ ｒｎ ｉ ｌ ％琼 脂 糖凝 胶 电泳 ， 化 乙 溴
手术切除标本 。术前均未接受化 疗及放疗。其 中
男 ：５例 ， ：５例 ， 龄 ３ ３ 女 ２ 年 ４—８ ３岁 ， 中位 年 龄 ５ ８ 岁 。另取 胃镜 检查 及 病 理 学 确 证 的 ２ 正 常 胃黏 ０例
在胃癌 中的表达 ， 并评估其与临床病理参数的相关 性及其 临床意义 。
１ 材 料与方 法 １１ 研 究 对 象 ． ６ ０例 胃癌患 者成 对 的癌 组 织 和癌
Ａ Ｔ ｃ ｌ １１ＣＩＡ Ｃ３， Ｃ Ｃ Ｔ ｃ］ １ Ｔ ． 产物 长度 ：６ ｐ Ｇ Ｇ Ｇ ． ２５ｂ 。 １５ Ｒ ．Ｃ ． ＴＰ Ｒ 扩 增 反 应 体 系为 １ ０×ｂｆｒ（ ｕｆ Ｍｇ ｅ
９ ℃ ５ ｍ ｎ ９ 变 性 ３ ， ｍ ． ５ ℃） Ｊａｔ ４ ｉ；４ ０ｓＢ ｉ １（ ５ 、 ｃｉ ３ ｎ
旁组织 （ 距癌变部位边界 ５ 厘米以外且经病理证实 无癌变的组织）取 自２０ 年 １ ， ０９ 月至 ８ 月镇江市第
一
人 民医院普外科收治并经病理组织学确诊 胃癌的
序 列 ：＇ Ｃ Ａ Ｃ Ｇ Ａ ＡＡ Ｔ Ｇ Ｔ Ａ Ｇ Ｃ Ｃ３ ， ５－ Ａ Ｃ Ａ Ａ Ｇ ＿ Ｔ Ｃ Ｇ Ｔ Ａ Ｃ ． 产 Ｔ Ｇ
（ｏ ｃ ｂｏ ｇ ｅ，Ｃ ） ｐｌ ｏ ｎｓＰ Ｇ 成员 ， Ｃｍ ｃ 同作用引 ｙ ｍ ｆｅ 与 —ｙ 协
起细胞转化和肿瘤形成。Ｂ ｉ 在多种肿瘤 中高表 ｍ． １
７ ％乙 醇 （ ０ １ Ｄ Ｐ ５ 用 ． ％ Ｅ Ｃ配 制 ） 涤 ， 燥 后 所 得 洗 干 Ｒ Ａ溶于 含 ０ １ Ｅ Ｃ的 ｄＨ ０ 中。用 核 酸蛋 白 Ｎ ．％Ｄ Ｐ ｄ２
病理参数组问 Ｂ ｉ Ｒ Ａ阳性表达率的差异 比较 ｍ． ｍ Ｎ １ 用 检验 ， 采用 ＳＳ （３０ 软件 ， ＰＳ １ ．） Ｐ＜００ （ ．５ 双侧 ） 为 差异 有统计 学意 义 。
２ 结果
（Ｃ ｘｒ ｓ ｈｒｏ ｙａ ）核 酸 蛋 白测 定 仪 （ ｐ Ｐ Ｒ Ｅｐｅ ｅ ｎｈｂｉ 、 ｓＴ ｍ ｄ Ｅ．
１４ 引物 设 计 ．
用 Ｐ ｍ ｒＰｅｉ ． ｉ ｒ ｅ ｒ ｅ ５０引物 设 计 软 ｍ ｒ
件跨 外 显 子设 计 Ｂ ｉ ｍ． １与 Ｊ ａｔ ３ ｃｎ基 因上 下 游 引 物 ． ｉ （ 上海 生工公 司合 成 ）Ｂ ｉ 上游 引 物序 列 ：＇ Ｔ — ，ｍ． １ ５－ Ｇ Ａ Ｃ Ｔ Ｇ ｃ Ａ Ｃ Ｇ Ａ Ｃ Ａ Ａ Ｃ ｃ 一 下 游 弓 物 Ａ Ｃ ＡＡ Ａ Ｃ Ａ Ａ Ｔ Ａ Ｇ Ｔ Ａ Ｔ３ ， Ｉ
锭染色后于凝胶成像仪紫外透射观察结果 。
１６ 统计 学处理 ． 每 个样本 均 重复 测定 ３次 ， 临床
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１２ 仪 器 和 试 剂 ． Ｐ Ｒ 仪 为 Ｐ Ｒ ｔ ｒ ａ ｃｃ Ｃ Ｃ ｈ ｍ ｌ ｙｌ ｅ ｅ
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磨器碾碎成细胞悬液 ， 过滤得单细胞悬液 ， 离心后取 沉淀 ， １ ｌ ｒｏ 混匀后置室温 ５ｍｎ 充分裂解 加 ｉｌ ｍ Ｔｚ ， ｉ， 核蛋 白复合物 ， 三氯 甲烷 分层 ， 经 异丙 醇沉淀 ， 用
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胃癌 是 我 国常 见 的恶 性 肿 瘤 之 一 。 胃癌 的 侵 袭 、 移 是 影 响其 预 后 的 主要 因素 。Ｂ ｉ 基 因 （ 转 ｍ一 １ Ｂ ｃ！ｓｅｉｃＭＬ ｔ ｒｔｎｓｅ１属 于多梳 基 因家 族 ｅ— ｃ Ｖ ｉｅ ａｏ ｉ．） ｌｐ ｆ ｉ ｎｇ ｉ ｔ
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浓度 为 ２ ｍ ｌＬ ． ｌ１ ｍ ｌＬｄ ， ． 、 ５ｍ ｏ ）２ ５ 、０ｍ ｏ Ｎ Ｐ０ ５ ／ ／ Ｉ
１ ｍ ｌ／ ０ｐ ｏ Ａ的上 下游 引物各 ０５ ， ／ ｌ ａ ０２ ／ ． ｌ５Ｕ ｑ酶 ． Ｔ
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手术切除标本 。术前均未接受化 疗及放疗。其 中
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在胃癌 中的表达 ， 并评估其与临床病理参数的相关 性及其 临床意义 。
１ 材 料与方 法 １１ 研 究 对 象 ． ６ ０例 胃癌患 者成 对 的癌 组 织 和癌
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起细胞转化和肿瘤形成。Ｂ ｉ 在多种肿瘤 中高表 ｍ． １
７ ％乙 醇 （ ０ １ Ｄ Ｐ ５ 用 ． ％ Ｅ Ｃ配 制 ） 涤 ， 燥 后 所 得 洗 干 Ｒ Ａ溶于 含 ０ １ Ｅ Ｃ的 ｄＨ ０ 中。用 核 酸蛋 白 Ｎ ．％Ｄ Ｐ ｄ２
病理参数组问 Ｂ ｉ Ｒ Ａ阳性表达率的差异 比较 ｍ． ｍ Ｎ １ 用 检验 ， 采用 ＳＳ （３０ 软件 ， ＰＳ １ ．） Ｐ＜００ （ ．５ 双侧 ） 为 差异 有统计 学意 义 。
２ 结果
（Ｃ ｘｒ ｓ ｈｒｏ ｙａ ）核 酸 蛋 白测 定 仪 （ ｐ Ｐ Ｒ Ｅｐｅ ｅ ｎｈｂｉ 、 ｓＴ ｍ ｄ Ｅ．
１４ 引物 设 计 ．
用 Ｐ ｍ ｒＰｅｉ ． ｉ ｒ ｅ ｒ ｅ ５０引物 设 计 软 ｍ ｒ
件跨 外 显 子设 计 Ｂ ｉ ｍ． １与 Ｊ ａｔ ３ ｃｎ基 因上 下 游 引 物 ． ｉ （ 上海 生工公 司合 成 ）Ｂ ｉ 上游 引 物序 列 ：＇ Ｔ — ，ｍ． １ ５－ Ｇ Ａ Ｃ Ｔ Ｇ ｃ Ａ Ｃ Ｇ Ａ Ｃ Ａ Ａ Ｃ ｃ 一 下 游 弓 物 Ａ Ｃ ＡＡ Ａ Ｃ Ａ Ａ Ｔ Ａ Ｇ Ｔ Ａ Ｔ３ ， Ｉ