体外定向诱导小鼠胰腺干细胞分化形成胰岛样结构
体外定向诱导人脐带间充质干细胞分化为胰岛样细胞
Ｙｕ Ｙａ — ｂ ｉ ｎ ， Ｃｈ ｅ ｎ Ｗｅ ｉ ， Ｂｉ ａ ｎ Ｊ ｉ ａ ｎ － ｍｉ ｎ
Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｇ ｅ ｎ ｅ ｒ ａ ｌ Ｓ ｕ ｒ ｇ ｅ ｒ ｙ ， Ｎ ａ ｎ ｊ ｉ ｎ ｇ Ｆ ｊ ｒ ｓ ｔ Ａ ｆ ｆ ｉ ｌ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ Ｈ ｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ Ｎ ａ ｎ ｊ ｉ ｎ ｇ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ Ｎ ａ ｎ ｊ ｉ ｎ ｇ ２ １ ０ ０ ０ ０ ， Ｊ ｉ ａ ｎ ｇ ｓ ｕ Ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｎ ｃ ｅ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ｅ
胞 的 成 熟 方 案 。
目的 ：探 讨 人脐带 间充 质干 细胞在 体外 一 定条件 下分 化 为胰 岛样细 胞的可 能性 。
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中图分类 号： Ｒ ３ ９ ４ ２
方法 ： 无 菌条 件下 分离培 养人 脐带 间 充质干 细胞 ， 细 胞传 ３代后 ， 采用 两 步法 诱导其 向胰 岛样 细胞分 化 ： 第１ 步 ，加 入含 １ ０ ０ ｐ ｇ ／ Ｌ ６ 一 神经 生长 因子 ，４ ｎ ｍｏ ｌ ／ Ｌ Ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ｉ ｎ Ａ ，１ ０ ｍｍｏ ｆ ， Ｌ 尼克 酰胺 ，２ ５ ｐ ｇ ／ Ｌ表皮 生 长 因子 ， 体 积分 数 为 １ Ｏ ％胎 牛血清 的 Ｄ ＭＥ Ｍ／ Ｆ １ ２ 培 养基 中培 养 ７ ｄ ； 第２ 步， 将 诱导液 换 为含 １ Ｏ ｍｍｏ Ｉ ／ Ｌ 尼克 酰胺 ， １ ０ ｐ ｇ ／ Ｌ 碱 性 成纤 维细 胞生 长 因子 ，１ ％胰 岛素一 转 铁 蛋 白一 硒的 Ｄ ＭＥ Ｍ ／ Ｆ １ ２ 培 养 基 ，诱导 时 间为 １ ４ ｄ 。对 照组单 纯加 入 Ｄ ＭＥ Ｍ／ Ｆ １ ２培养基 进行 培养 。 结果 与 结论 ：诱导 ２周后脐 带 间充质 干细 胞开 始聚 集成 团 ，诱 导 ３周后 ，葡萄 糖刺 激试 验 阳性 、Ｐ Ｄ Ｘ ． １ 和 Ｉ ｎ ｓ ｕ ｌ ｉ ｎ基因表达 。而对照组细胞无胰岛素分泌，胰岛细胞相关基 因表达阴性。实验成功地将脐带间 充质 干 细胞 诱导成 了胰 岛样 细胞 。
胰腺干细胞治疗糖尿病鼠的实验研究
胰腺干细胞治疗糖尿病鼠的实验研究摘要：本文以胰腺干细胞为试验材料，对细胞的表达特征、生长特性、体内外分化能力进行了较为系统的鉴定，以进一步完善其生物学特性的检测，同时将其体外定向分化为胰岛样细胞团并植入糖尿病大鼠模型体内，观察其能否改善糖尿病症状，旨在为糖尿病的临床治疗研究提供一株背景清楚的种子细胞。
关键词：胰腺干细胞糖尿病鼠实验研究【中图分类号】r4 【文献标识码】a 【文章编号】1008-1879（2012）12-0028-02胰腺干细胞具有特定的分化潜能，在医学和生物学上能够表现出全能性、多能性。
现阶段，胰腺干细胞的研究虽尚处于早期阶段，但是它却以迅猛的速度发展着，经过多年的分离培养与研究，胰腺干细胞已成为一种有广阔前景的实验及治疗源细胞。
糖尿病是由遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等等各种致病因子作用于机体导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征，临床上主要表现为高血糖。
1 资料与方法在实验中分别选取三组生理状况相同的大鼠，标为a、b和c三组。
a为正常对照组、b为患糖尿病组、c为干预对照组，每组九只大鼠。
实验分为3个阶段，分别于造模后的第3、7、14、21天时（摸索中四个时间是血糖变化的四个时相），采用光化学血糖监测仪，每组随机抽取三只大鼠，采鼠尾静脉取血、测血糖、c-肽水平测定。
1.1 研究方法。
胰岛干细胞的转分化研究，在现在的有关胰腺干细胞治疗糖尿病的医学研究中，医学研究人员通过一些特殊的分化（转分化）就可以很简单的得到降低血糖的有关细胞的分泌细胞（胰岛素分泌细胞），该类特殊的分化转具体指的是两种毫无关联的组织细胞在特定的条件下经过特定的技术进行由一种组织细胞到另一种组织细胞分化的过程。
最开始的研究表明，成体的胰腺干细胞的分化的能力是最差的，然而就现在的研究看来，胰腺干细胞的分化具有扩散性。
一些医学研究者的研究实验中，首先从大鼠的胰腺中分离出胰岛分泌细胞，接着在体外进行长时间的细胞培养，在培养的过程中增加适量的化学剂就能转分化出中间源细胞，这样就可以分化成为胰岛b细胞。
大鼠胰腺提取液体外诱导肌源性干细胞分化为胰岛素分泌细胞
ＤＴＺ ａ ｄ ｉ ｎ ｍｍｕ ｏ ｙ ｏ ｈ ｍｉａ ｔ ｉ ｉｇ ｗｅ ｅｕ ｅ ｏ ｅ ａ ｎ ｈ ｒ ｄ ｃｉ ｎ ｏ ｎ ｕ ｉ ｎ ｌ ｃ ｇ ｎ ．Ｇｌ ｃ ｓ ｈ ｌ ｎ ｅｔ ｓ ｎ ｃ ｔ ｃ ｅ ｃ ｌ ａｎ ｎ ｒ ｓ ｄ ｔ ｘ ｍｉ ｅ ｔ ｅ ｐ ｏ ｕ ｔｏ ｆ ｓ ｌ ａ ｄ ｇ ｕ ａ ｏ ｓ ｓ ｉ ｎ ｕ ｏ ｅｃ ａ ｌ ｇ ｅ ｔ ｅ ａ ｄ ｒ ｄ ｏｍｎ ｎ ａ ｓ ｙ ｗｅ ｅ ｐ ｒｏ ｍ ｅ Ｏ ｅ ａ ｕ ｔ ｈ ｕ ｃ ｉ ｎ ｏ ｈ ｇ ｒ ｇ ｔ ｓ ｎ ｎ ａ ｉ ｉ ｍ ｏ ｓ ａ ｒ ｅ ｆ ｒ ｄ ｔ ｖ ｌａ ｅｔ ｅ ｆ ｎ ｔ ｆｔ ｅ ａ ｇ ｅ ａ ｅ ，ａ ｄ ＲＴ－ ＣＲ ｗａ ｏ ｄ ｃ ｅ Ｏ ｄ ｔｃ ｈ ｏ Ｐ ｓ ｃ ｎ ｕ ｔ ｄ ｔ ｅｅ ｔｔ ｅ
关键 词 肌 源性 干 细 胞 ； 化 ； 鼠胰 腺 提 取 液 ； 岛素 分 大 胰
Ｒａ ａ ｃ ｅ ｔｃ ｅ ｔ ａ ｔｉ ｄ ｃ ｓｒ ｔｍ ｕ ｃ ｅｄ ｒｖ ｄ ｓｅ ｅｌ ｏ ｔｐ ｎ ｒ ａ ｉ ｘ ｒ ｃ ｎ ｕ ｅ ａ ｓ ｌ － ｅ ｉ ｅ ｔ ｍ ｃ ｌｓｔ ｄ ｆｅ ｅ ｔａ ｅ ｉ ｔ ｎ ｕ ｉ －ｅ ｒ ｔｎ ｅｌ ｎ ｖ ｔ ｏ ｉｆ ｒ ｎ ｉ ｔ ｎ ｏ ｉ ｓ ｌｎ ｓ ｃ ｅ ｉ ｇ ｃ ｌｓｉ ｉｒ
Ａｆ ｉ ａ ｅ ｓ ｉ ｌ ３ ｎ ｔ ｕｅ ｆ Ａｎｈ ｏ ｏｏ ｙ， ｉｏ ｉｇＭｅ ｉ ｌ ｏｌｇ ， ｉ ｚ ｏ ２ ０ １ Ｃ ｉａ ｆ ｌ ｔ Ｈｏ ｐ ｔ ； ．Ｉ ｓ ｔｔ ｏ ’ ｔ ｒｐ ｌｇ Ｌ ａ ｎ ｎ ｄ ｃ ｌ ｅ Ｊ ｎ ｈ ｕ １ １ ０ ， ｈｎ ） ｉ ｄ ａ ｉ ａ Ｃ ｅ
（ 宁 医学 院 ，１附 属 第 一 医 院 内分 泌科 ． 辽 ２附属 第 一 医 院骨 科 ，３人 类 学 研 究所 ， 州 １ １０ ） 锦 ２ ０ ０
干细胞向胰岛细胞的诱导分化及其在实验性糖尿病治疗中的应用
干细胞向胰岛细胞的诱导分化及其在实验性糖尿病治疗中的应用吴为;李静;许世清;娄晋宁【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2004(033)006【摘要】胰岛移植是治疗糖尿病的一种有效方法,然而,供体的缺乏极大地限制了胰岛移植的临床应用.如何解决胰岛移植所需的细胞来源是当今医学研究的一个重要问题.虽然异种胰岛移植是一种可能的解决途径,但它所伴随的免疫排斥和病毒感染等问题至今还没有得到解决.干细胞具有自我增生的能力和分化成为各种组织细胞的潜能.通过体外培养干细胞并将其诱导分化成为胰岛的内分泌细胞,将有可能解决糖尿病治疗所需要的细胞来源.干细胞由于组织起源的不同在增生和分化能力上存在很大差别.将干细胞诱导分化成为胰岛的内分泌细胞并形成适合于细胞移植的胰岛样结构涉及到许多关键技术.虽然,国际上已经在此研究领域取得了一些令人鼓舞的研究结果,但将干细胞技术应用于糖尿病的治疗还有许多问题有待解决.本文就这方面的研究进展及有待解决的问题作一扼要的综述.【总页数】5页(P33-36,29)【作者】吴为;李静;许世清;娄晋宁【作者单位】中国协和医科大学/中国医学科学院病理生理学系,100730;卫生部北京中日友好医院临床医学研究所;卫生部北京中日友好医院临床医学研究所;卫生部北京中日友好医院临床医学研究所【正文语种】中文【中图分类】R45【相关文献】1.人脐带间充质干细胞向胰岛样分泌细胞的诱导分化及胰岛样分泌细胞治疗效果评价 [J], 朱旅云;赵芳;郝永蕾;李晓玲;孙蕾蕾2.IGF2基因印记丢失对胚胎干细胞向胰岛样细胞诱导分化的影响 [J], 刘峰;彭宇环;汤佳珍;姜杉;3.干细胞诱导分化与糖尿病治疗 [J], 刘华;薛武军;冯新顺4.糖尿病患者血液细胞来源多能干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞 [J], 黄红莉;梁淑贞;林茂;陈继冰;牛立志5.多能干细胞来源的胰岛细胞及其在糖尿病治疗中的应用 [J], 付天龙; 聂螣騛; 殷浩; 程新因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
曲古抑菌素A促进小鼠骨髓间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞
曲古抑菌素A促进小鼠骨髓间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞李佳萦;冯烈【摘要】AIM:To investigate whether trichostatin A ( TSA) , a new revulsant ,can induce mouse mesenchy-mal stem cells to differentiate into insulin-secreting cells and to explore the appropriate concentration of TSA .METHODS:The mesenchymal stem cell line from C57BL/6 mice was cultured in vitro and divided into 5 groups before treated with dif-ferent concentrations of TSA , ( group A:DMSO;group B~E:treated with 25 nmol/L, 50 nmol/L, 100 nmol/L and 200 nmol/L of TSA, respectively).After exposed to different cultured media for 10 d during the 2 stages, the cells were detec-ted by the following methods:the insulin-secreting cells in each group were identified by dithizone staining and the results were calculated with immunohistochemical half quantitative analysis .The insulin secreted by insulin-secreting cells in each group was identified by immunofluorescence , and the mean fluorescence intensity of insulin was compared .The content of insulin in each group was quantified byELISA .The appropriate concentration of TSA was determined according to the above results .RESULTS:TSA treatment for 10 d promoted the mouse bone marrow mesenchymal stem cells to differenti-ate into insulin-secreting cells which produced insulin .The immunohistochemistry and immunofluorescence imaging analysis of insulin-secreting cells showed that the insulin staining positive area , positive ratio , total density ofinsulin expression and mean fluorescence intensity of insulin in group B were significantly higher than those in the other TSA -treatedgroups .When the concentrations of TSA gradually increased , the contentof insulin reduced accordingly .The content of insulin in group B was significantly higher than that in the other TSA-treatedgroups .CONCLUSION:TSA treatment for 10 d promotes bone marrow mesenchymal stem cells from C57BL/6 mice to differentiate into insulin-secreting cells and the appropriate concen-tration of TSA is 25 nmol/L.%目的：观察曲古抑菌素A（ TSA）诱导小鼠骨髓间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞的适宜浓度。
胚胎干细胞体外定向诱导分化的研究进展
胚胎干细胞体外定向诱导分化的研究进展（姓名：李翔单位：宁夏师范学院化学与化学工程学院11级科学教育班）摘要：胚胎干细胞是从早期胚胎内细胞团分离培养出来的具有发育全能性或多能性的干细胞,具有多向分化潜能和自我更新的特性。
胚胎干细胞可以定向诱导分化生产组织和细胞,可为细胞移植提供无免疫原性的材料,为难以治愈的疾病的细胞移植治疗提供可能。
本文介绍了胚胎干细胞的诱导分化方法和应用。
关键词：胚胎干细胞;定向诱导分化;分化潜能;自我更新胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)是从早期胚胎(桑椹胚、囊胚)或原始生殖细胞(primordial germ cell,PGCS)分离出来的能在体外永久培养的、具有多方向分化潜能和种系嵌合能力的细胞系。
ES细胞具有多向分化潜能,可分化形成外胚层、中胚层和内胚层细胞的谱系干细胞,再成长为不同的神经、造血、肌肉,骨骼等各种细胞基于其特性,目前普遍认为,ES细胞对体外研究动物和人胚胎的发生发育,基因表达调控,药物的筛选和致畸实验及作为组织细胞移植治疗,克隆治疗和基因治疗的细胞源及产生克隆和转基因动物等领域将产生重要的影响。
1998年,T homson和Gearhart2个研究组分别从人ICM和PGCS建立了人类ES细胞系,在国际上引起了轰动。
Science杂志将人类ES细胞研究成果评为1999年世界十大科技进展之首,美国《时代》周刊将其列为20世纪末世界十大科技成就之首,并认为ES细胞和人类基因组将同时成为新世纪最具发展和应用前景的领域,由此掀起了ES细胞研究的高潮。
1体外诱导ES细胞的原理在体胚胎分化过程中，组织发生和身体构造的形成具有时空顺序性和相互诱导性。
在个体发育过程中，细胞分化是程序控制的有序有规律过程，程序的运行结果表现为不同发育阶段、不同组织部位的细胞表现出不同的形态、不同的生长方式和不同的生理功能。
从分子水平上来看，这一结果取决于细胞在基因表达上的时空差异。
胰岛干细胞移植研究进展
干 细胞 分 子标 志 、 腺 干 细 胞 临 床 应 用 前 景 、 题 及 展 望 进 胰 问
行综述 。 １ 胰 岛 干 细 胞 研 究
干 细 胞 是 体 内存 在 的 一 类 特 殊 细 胞 ， 最 显 著 的 生 物 学 其
于细 胞 、 髓 问 充 质 细 胞 【 骨 ， 有 其 他 组织 干 细 胞 的 转 分 化 还
胞 能 在 体 外 再 表 达 胰 岛 素促 进 因 子 １表 明 ｃ ， Ｋ一 １ ９可 能 为 胰 腺 前 体 细 胞 的 分 子 标 志 之 一 。 ３ 巢 蛋 白 ： 可 能 起 着 促 进 胰 ） 它
口 胞功能 ， 够降低血糖 。 细 能 另外 ， 因工程 的联合 应用 也 已得 到胰 岛素分 泌 细胞 。 基 Ｒ ｃｅ等 。 现 ， 人 胰 岛素 原 基 因 转 染 的 小 鼠胚 胎 干 细 胞 ｏｈ 发 用 可 以定 向 分 化 为 胰 岛 素 分 泌 细 胞 ， 示 胚 胎 干 细 胞 可 定 向 分 提 化为胰腺 内分泌细胞 。 １ ２ 胰 岛 干 细 胞 分 子 标 志 通 过 识 别 胰 腺 干 细 胞 表 面 特 异 ． 的分 子 标 志 ． 仅 可 以从 众 多 其 他 细 胞 中鉴 定 、 离 及 纯 化 出 不 分 胰 腺 干 细 胞 ； 时 还 将 对 研 究 胰 腺 干 细 胞 膜 内外 信 号 传 导 机 同 制 、 号 因 子 与 膜 受 体 之 间 的 相互 作 用 、 腺 干 细 胞 发 育 机 制 信 胰
及 诱 导过 程 等 ， 有 重要 意 义 。 目前 ， 究 较 多 的 胰 腺 干 细 胞 均 研 分子标 志有以下几种 ：） 十 二指肠 同源 异型盒基 因 （ｄ 一 １胰 ｐｘ
胚胎干细胞体外定向诱导分化的研究进展
胚胎干细胞体外定向诱导分化的研究进展（姓名：李翔单位：宁夏师范学院化学与化学工程学院11级科学教育班）摘要：胚胎干细胞是从早期胚胎内细胞团分离培养出来的具有发育全能性或多能性的干细胞,具有多向分化潜能和自我更新的特性。
胚胎干细胞可以定向诱导分化生产组织和细胞,可为细胞移植提供无免疫原性的材料,为难以治愈的疾病的细胞移植治疗提供可能。
本文介绍了胚胎干细胞的诱导分化方法和应用。
关键词：胚胎干细胞;定向诱导分化;分化潜能;自我更新胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES 细胞)是从早期胚胎( 桑椹胚、囊胚) 或原始生殖细胞(primordial germ cell, PGCS)分离出来的能在体外永久培养的、具有多方向分化潜能和种系嵌合能力的细胞系。
ES 细胞具有多向分化潜能, 可分化形成外胚层、中胚层和内胚层细胞的谱系干细胞, 再成长为不同的神经、造血、肌肉,骨骼等各种细胞基于其特性,目前普遍认为, ES细胞对体外研究动物和人胚胎的发生发育, 基因表达调控, 药物的筛选和致畸实验及作为组织细胞移植治疗, 克隆治疗和基因治疗的细胞源及产生克隆和转基因动物等领域将产生重要的影响。
1998 年,T homson和Gearhart2 个研究组分别从人ICM和PGCS建立了人类ES细胞系, 在国际上引起了轰动。
Science 杂志将人类ES 细胞研究成果评为1999 年世界十大科技进展之首, 美国《时代》周刊将其列为20世纪末世界十大科技成就之首, 并认为ES 细胞和人类基因组将同时成为新世纪最具发展和应用前景的领域, 由此掀起了ES细胞研究的高潮。
1体外诱导 ES 细胞的原理在体胚胎分化过程中，组织发生和身体构造的形成具有时空顺序性和相互诱导性。
在个体发育过程中，细胞分化是程序控制的有序有规律过程，程序的运行结果表现为不同发育阶段、不同组织部位的细胞表现出不同的形态、不同的生长方式和不同的生理功能。
人脂肪间充质干细胞体外定向诱导分化为胰岛样细胞的实验研究
（ａｅ １ ｉ ｕａｉ — ＭＥ ｕ ｐｅ ｅｔｄｗｔ ｂｓ ： ｂｏｌｓ ｇｏ ｔ ｆ ｔ ｂ Ｇ ） ｅｉｅｍａ ｇｏ ｔ ｃｏ ｓ ｇ ） ｎ ｂｔ ｎｉ ＨＧ Ｄ Ｍ ｓｐ ｌ ｎｅ ｉ ａｉ ｆ ｒｂａｔ ｒｗｈ ａ ｏ Ｆ Ｆ， ｐｄｒ ｌ ｒｗｈｆ ｔｒ ｔ ， ｃ ｏ ｎ ｍ ｈ ｃｉ ｃ ｒ（ ａ
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ｄ 第 二 阶 段 在 含适 当浓 度 的 Ｂ ７、 性 成 纤 维 细胞 生 长 冈子 （Ｆ Ｆ 及 表 皮生 长 子 （ Ｇ ） Ｈ — ＭＥ 培养 基 ， ２ 碱 ｂＧ ） Ｅ Ｆ的 Ｇ Ｄ Ｍ
中诱导 ６ｄ 第 阶段在 含适当浓度的 ２ 巯基乙醇和 Ｂ ７和尼克酰胺高糖 无血清 Ｄ Ｍ培 养基诱导 细胞 向胰 岛 ， 一 ２ ＭＥ 样细胞分化。 对照组用 ＨＧ Ｄ Ｍ培养。 — ＭＥ 在相差显 微镜下观察细胞的形态 ； 用反转 录～ 聚合酶链反应 （ Ｔ Ｐ Ｒ） Ｒ － Ｃ 法 榆测诱 导前后 ｎ ｓｎ 胰岛素基因的表达 ； 免疫 荧光 染色法检测诱 导前后 ｎｓ ｎ胰 岛素的表达 ： ｅｔ 、 ｉ 用 ｅｔ 、 ｉ 诱导第 ＿阶段 二 进行双硫 腙染色鉴定胰 岛 Ｂ样细胞 团。结果 未经诱导的脂肪问充质１ 细胞呈长梭彤贴壁生长 ， － 诱导后 细胞逐 ２ 巯基 乙醇 、 Ｇ 、Ｆ Ｆ及尼克酰胺等可在体 外诱导 一 Ｅ ＦｂＧ
干细胞分化及定向分化的基本方法研究
干细胞分化及定向分化的基本方法研究干细胞具有自我更新和分化为多种细胞类型的能力，被认为是治疗许多疾病和损伤的潜在治疗方法。
在干细胞研究领域中，干细胞分化和定向分化是两个重要的研究方向。
本文将重点讨论干细胞分化及定向分化的基本方法研究。
干细胞分化是指干细胞转变为成熟细胞的过程，这一过程包括细胞增殖、细胞周期调控、细胞命运决定等关键步骤。
干细胞分化的基本方法研究主要包括以下几个方面：1. 体外培养条件优化：干细胞分化需要特定的培养条件来模拟体内环境。
优化培养基、细胞培养条件和生长因子添加剂等因素对于干细胞分化非常重要。
研究人员通过不断改良培养条件和添加特定的生长因子，可以促进干细胞朝特定细胞类型分化。
2. 诱导分化：通过添加特定的诱导剂或调控干细胞微环境，可以使干细胞朝着特定细胞系分化。
这些诱导剂可以是小分子化合物、蛋白质因子或基因转染等方式。
例如，使用特定的小分子化合物可以使干细胞向神经元分化，而使用不同的诱导剂则可以使干细胞分化成心肌细胞或肝细胞。
3. 转录因子调控：转录因子是调控基因表达的关键分子。
通过使用不同的转录因子，研究人员可以操纵干细胞的基因表达，从而对其分化方向进行定向控制。
例如，使用特定的转录因子组合可以将干细胞转化为胰岛素产生细胞，以治疗糖尿病。
4. 信号通路调控：干细胞分化受到许多信号通路的调控，包括Wnt、Notch、BMP和Hedgehog等通路。
通过调控这些信号通路的活性，可以控制干细胞的命运和分化。
研究人员可以通过添加特定的激动剂或抑制剂来调节这些信号通路，从而影响干细胞分化的方向。
干细胞定向分化是指将干细胞有选择地定向分化为特定细胞类型的过程。
干细胞定向分化的基本方法研究主要包括以下几个方面：1. 定向分化介导因子筛选：研究人员通过筛选和鉴定特定的介导因子，可以实现对干细胞定向分化的控制。
这些介导因子可以是细胞因子、生长因子或化合物等。
通过添加这些介导因子，可以促进干细胞向特定细胞类型定向分化。
干细胞是一种具有自我复制能力的多潜能细胞具有再生各种组织器官
干细胞是一种具有自我复制能力的多潜能细胞，具有再生各种组织器官的潜在功能，医学界称之为“万用细胞”。
在一定的条件下，通过诱导可以进行自我复制，是具有多向分化潜能的原始细胞，可以形成人体各种组织和器官，可以对病变、衰老、损伤的组织器官进行修复或替代、是未来医学领域治疗多种疑难杂症的主要来源和手段。
干细胞技术一、干细胞的分类干细胞是一类具有自我更新、自我复制和多向分化潜能的细胞群体。
这些干细胞可通过诱导，进一步分化成多种功能细胞，具有再生各种组织器官和人体的潜在功能，在医学界称为“万用细胞”。
1、按照发育潜能来分类，可分为：全能干细胞、多能干细胞、单能干细胞。
1.1全能干细胞(totipotent stem cell,TSC)能够发育成为具有各种组织器官的完整个体潜能的细胞，如胚胎干细胞。
全能干细胞是指受精卵到卵裂期32细胞前的所有细胞，具有无限分化潜能，能分化成所有组织和器官的干细胞。
换句话说，也就是具有形成完整个体分化潜能。
1.2多能干细胞（pluripotent stem cell）多能干细胞，具有分化出多种细胞组织的潜能，但失去了发育成完整个体的能力，发育潜能受到一定的限制。
骨髓多能造血干细胞是典型的例子，它可分化出至少十二种血细胞，但不能分化出造血系统以外的其它细胞。
1.3单能干细胞（unipotent stem cell）单能干细胞也称专能、偏能干细胞，只能向单一方向分化、产生一种类型的细胞。
许多已分化组织中的成体干细胞是单能干细胞。
这类干细胞只能向一种类型或密切相关的两种类型的细胞分化，如上皮组织基底层的干细胞、肌肉中的成肌细胞。
单能干细胞是发育等级最低的干细胞。
2、按照组织发生学来分类，可分为：胚胎干细胞和成体干细胞（包括造血干细胞、间充质干细胞、神经干细胞、胰腺干细胞、肿瘤干细胞等）。
2.1胚胎干细胞（ES细胞）在受精卵发育成囊胚时，内细胞层的细胞即为胚胎干细胞。
与成体来源的多能干细胞不同，ES细胞是一种高度未分化细胞。
【备考2024】生物高考一轮复习：第13讲 细胞的分化、衰老和死亡
【备考2024】生物高考一轮复习第13讲细胞的分化、衰老和死亡[课标要求] 1.说明在个体发育过程中，细胞在形态、结构和功能方面发生特异性的分化，形成了复杂的多细胞生物体2.描述在正常情况下，细胞衰老和死亡是一种自然的生理过程[核心素养] (教师用书独具)1.运用结构与功能观等观念，说明细胞物质和结构的变化与细胞分化的关系。
(生命观念)2.通过归纳与概括等方法，举例说明细胞衰老的原因及特征。
(生命观念)3.联系生活实际，了解干细胞的应用前景，倡导健康的生活方式。
(社会责任)考点1细胞的分化和全能性一、细胞分化及其意义二、细胞的全能性1．概念：细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。
2．原因：细胞内含有形成完整个体所需的全部基因。
3．证明实例：(1)植物组织培养→植物细胞具有全能性。
(2)动物体细胞核移植→动物体细胞的细胞核具有全能性。
4．干细胞(1)概念：动物和人体内少数具有分裂分化能力的细胞。
(2)类型项目胚胎干细胞成体干细胞来源来自早期胚胎或原始性腺组织来自各种各样的组织功能可以分化成各种组织和器官甚至个体具有分化成特定功能细胞的能力举例来自囊胚的内细胞团细胞骨髓干细胞、造血干细胞、神经干细胞1．断尾壁虎长出新尾巴过程中发生了细胞分化。
(√) 2．同一个体的小肠上皮细胞和平滑肌细胞所含基因不同。
(×)提示：同一个体的小肠上皮细胞和平滑肌细胞所含基因相同。
3．同一细胞内往往含有不同的蛋白质，这是基因选择性表达的结果。
(×)提示：基因选择性表达是指同一个体的不同细胞中基因表达的情况不同。
4．成熟个体体内的所有细胞都已经高度分化。
(×)提示：成熟个体内也有分化程度低的干细胞。
5．同一植物个体茎尖分生组织细胞的全能性比叶肉细胞更容易表达。
(√) 6．克隆猴“中中”和“华华”的诞生证明了动物体细胞仍然具有全能性。
(×)提示：动物细胞的细胞核具有全能性。
干细胞治疗糖尿病进展论文
干细胞治疗糖尿病的进展【关键词】糖尿病干细胞诱导分化治疗中图分类号：r587.1文献标识码：b文章编号：1005-0515（2011）10-047-02近几年来，我国糖尿病病人人数不断增多，对人们的正常生活造成了很大的影响。
由于医疗技术的不断进步，对干细胞的认知水平不断提升，使得干细胞移植对糖尿病的治疗价值更加显著。
针对这一点，本文对干细胞对糖尿病治疗的进展作综述。
从细胞学角度看，干细胞是一种多功能的细胞组织，能够发挥出自我更新、自我复制等多方面的能力。
若处于相应的条件下，干细胞会展现出自己独特的特性。
胰岛功能受损导致胰岛素分泌量异常，这是造成糖尿病的主要因素。
因而，在临床治疗过程中我们利用体内或体外诱导干细胞定向分化为具有胰岛素分泌能力的细胞，才是彻底治疗糖尿病的根本。
1 胚胎干细胞移植胚胎干细胞主要是由囊胚的内细胞团和桑椹胚的早期胚胎形成，这种细胞在功能上相对齐全，能够不断演变为胰岛素分泌细胞而成为替代治疗的最佳种子细胞。
医学资料分析得出[1]，能够操作人的胚胎干细胞定向分化为胰岛素分泌细胞。
国外有关专家直接通过人的胰岛素诱导子转染esd3细胞直接分化细胞，分化的细胞对链脲佐菌素所致的糖尿病小鼠胰岛素和c肽排出有良好的促进作用，对糖尿病小鼠的血糖指标可进行有效调控[2]。
转接利用“5步法”诱导小鼠胚胎干细胞分化为特殊的细胞团，其与胰岛素结构存在一定的相似点。
通过把这类细胞团植入糖尿病小鼠皮下，观察后得知细胞团互相作用后出现类似胰岛样的结构，同时发现产生了血管。
类胰岛结构在胰岛素分泌能力上具有优势，能将小白鼠的症状显现出来。
而有的学者采用基因β-geo转染小鼠胚胎干细胞，再根据情况添加相应的诱导剂，顺利诱导小鼠胚胎干细胞分化为胰岛素分泌细胞。
胚胎干细胞能转变成胰岛素分泌细胞，并有体内外部产生合成和分泌胰岛素的能力，该种细胞在干细胞移植的种子细胞中得到了广泛的运用。
但考虑到胚胎干细胞的推广还存在相应的阻碍，导致胚胎干细胞的运用较少见。
娄晋宁：做研究要锲而不舍
科研的创新性意味着曲高和寡，大多时候，研究者只能独享孤独，也只有本着对知识和生命敬畏的人，才懂得如何沿着科学的路径登攀。而要做到这一点，娄晋宁觉得，最基本的素质是锲而不舍。
娄晋宁，国家卫生计生委中日友好临床医学研究所所长，中国医学科学院、中国协和医科大学和北京大学医学部博士生导师。教授。主要从事胰岛移植治疗糖尿病，干细胞技术治疗糖尿病和生物人工肝等方面的研究。主持国家自然科学基金重点课题，国家“973”计划和国家“863”计划等研究课题。主要研究工作：1.胰岛移植治疗2型糖尿病；2.干细胞技术治疗糖尿病：应用人胚胎胰腺组织来源的干细胞，通过体外扩增和定向诱导分化技术，大规模地制备干细胞分化的胰岛，并应用于糖尿病大鼠和糖尿病恒河猴的治疗。3.生物人工肝治疗急性肝功能衰竭：通过大规模微载体培养永生化人肝细胞，建立新型生物灌流反应器，建立了一种新型的生物人工肝支持系统。
实验研究的成功并不意味临床应用的开始。在干细胞技术治疗糖尿病临床应用前必须解决一系列的技术问题如：采用多大胚胎的干细胞？干细胞体外扩增到多少数量？如何筛选分化后的功能胰岛？如何评价分化胰岛的安全性？干细胞分化胰岛移植到什么部位？移植多少胰岛数量？移植后进行哪些指标监控？等等。除此之外，还要申请通过医学伦理委员会的审批以及病人签署知情同意书。这些问题的解决都涉及主管部门、基础研究团队，临床研究团队和病人之间的密切合作和沟通。
干细胞是体内存在的一类具有自我更新的能力，又有分化成为其他组织细胞潜能的特殊细胞可以用来制备各种功能细胞并应用于疾病的治疗。干细胞的研究也因此在全世界范围内如火如荼。
干细胞的定向分化和功能培养
干细胞的定向分化和功能培养干细胞是一类能够无限分裂并能够分化成各种细胞类型的细胞，被广泛应用于生物医学领域。
其中，干细胞的定向分化和功能培养技术被认为是实现组织工程和再生医学的重要途径。
一、干细胞的定向分化技术定向分化是指通过特定的信号模拟体内环境来促使干细胞向特定的细胞类型分化，从而实现组织修复和再生的目的。
定向分化技术主要包括两种：一是内源性定向分化，通过体外培养环境和细胞因子等方式刺激干细胞向特定的细胞类型分化；二是外源性定向分化，通过重编程技术改变细胞命运决定基因的表达，从而实现分化成特定细胞类型的目的。
内源性定向分化技术在干细胞的功能培养和组织修复领域得到了广泛的应用。
例如，肌肉干细胞可以通过在细胞培养环境中加入肌肉细胞因子和信号来促进其分化成肌肉细胞，用于治疗肌肉萎缩和肌肉缺失等疾病。
另外，胰岛素细胞可以通过内源性定向分化技术从干细胞中分化出来，用于治疗糖尿病。
外源性定向分化技术是目前热门的干细胞定向分化技术之一。
该技术主要利用转录因子、类似因子和代表性蛋白等无限制性物质重编程的原理，通过在培养环境中加入特定的成分，达到在干细胞中诱导特定的基因表达，从而实现外源性定向分化。
二、干细胞的功能培养技术功能培养是指利用体外培养环境和信号，激发干细胞的分化能力，使其分化成具有特定功能的细胞，从而实现多种组织和器官的修复和再生。
功能培养技术与定向分化技术不同，定向分化技术主要注重诱导干细胞向特定细胞类型分化，而功能培养技术则侧重于强化干细胞的某种功能。
目前，干细胞的功能培养主要以肝细胞、心肌细胞和神经细胞等方向为主。
例如，在功能培养的过程中，可以通过特定的细胞培养环境和信号，将干细胞分化成功能类似肝细胞的初级细胞，并自我复制。
这种功能培养后的细胞可以用于治疗肝病，对于肝移植和肝细胞治疗等有着广泛的应用前景。
另外，干细胞的功能培养技术在神经细胞的治疗方向也有着重要的应用价值。
近年来，针对帕金森病、脊髓损伤和脑损伤等神经系统疾病，科学家利用干细胞功能培养技术培育出类似神经细胞的细胞，这些细胞具有很高的生存能力和分泌神经因子的能力，可打击神经系统的损伤，弥补神经系统的功能缺陷。
小鼠胚胎干细胞体外诱导分化成GABA能神经元
小鼠胚胎干细胞体外诱导分化成GABA能神经元目的探讨小鼠胚胎干细胞在体外培养向GABA能神经元定向诱导分化的可能性。
方法将小鼠胚胎干细胞以“无血清”方法培养,用DMEM/F12、N2、B27及NT4作为诱导分化剂定向诱导分化,分化好的细胞利用免疫荧光技术、流式细胞技术和RT-PCR鉴定。
结果在胚胎干细胞诱导分化成神经元后期,免疫荧光显示有GABA能神经元存在;RT-PCR结果证实有GABA能神经元正确分化的重要调控基因Viaat、Gad1和Gad2基因表达;流式细胞仪计数结果显示GABA阳性细胞约占总细胞数的(11.49±6.86)%。
结论小鼠胚胎干细胞经体外培养可以定向诱导分化成GABA能神经元,可作为神经移植的新来源。
[Abstract] ObjectiveTo investigate the possibilities of in vitro culture and differentiation of mouse embryonic stem cell to GABAergic neurons. MethodsMouse embryonic stem cells were cultured and induced into GABAergic neurons in serum-free cultural condition. Immunofluorescence,reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR) and flow cytometer assay were used to identify the properties of the differentiated cells. ResultsIn the later period of differentiation of embryonic stem cells into neurons,immunofluorescence showed that GABAergic neurons existed,RT-PCR results confirmed the important regulatory genes Viaat,Gad1 and Gad2 gene expression due to the correct differentiation of GABAergic neurons and flow cytometry analysis showed the GABA-positive cells accounted for about(11.49±6.86)% of the total cell number. ConclusionMouse embryonic stem cells can be induced into GABAergic neurons in vitro in serum-free cultural condition,providing a new source of nerve graft.[Key words]Embryonic stem cell; Induce; Differentiate; GABA干细胞移植治疗中枢神经系统疾病的研究方兴未艾,且取得了一定成果,但由于其多取材于胚脑的神经干细胞,为日后临床应用埋下了伦理道德问题之患,并且受到供体来源短缺的限制[1]。
成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞体外定向诱导分化为胰岛样细胞
成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞体外定向诱导分化为胰岛样细胞房佰俊;宋永平;曹莹;林全德;买玲【期刊名称】《西安交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2007(28)2【摘要】目的体外定向诱导成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞向胰岛样细胞分化.方法首先将成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞培养在含适当浓度的B27、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及表皮生长因子(EGF)的培养基中诱导,接着更换诱导培养基,用含适当浓度的β细胞调节素、尼克酰胺等高糖无血清培养基诱导细胞向胰岛样细胞分化.用RT-PCR法检测诱导前后nestin、ngn3、胰岛素启动子因子1(IPF-1)、胰岛素及胰高血糖素基因的表达;免疫荧光染色法检测诱导前后nestin、胰岛素及胰高血糖素的表达;放射免疫分析法检测诱导前后细胞分泌胰岛素情况.结果成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞经第一阶段的诱导后可分化成nestin 阳性的祖细胞,继续诱导6d后变圆的细胞逐渐增多,并最终聚集成团.免疫荧光实验证明经诱导后的细胞表达胰岛素、胰高血糖素、生长抑素等内分泌激素;放免分析结果表明,诱导的胰岛样细胞团可以分泌胰岛素.结论成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞具有胰腺干祖细胞的固有特征,极有可能作为种子细胞用糖尿病的细胞治疗.【总页数】4页(P138-141)【作者】房佰俊;宋永平;曹莹;林全德;买玲【作者单位】河南省肿瘤医院、河南省血液病研究所,河南郑州,450008;河南大学医学院,河南开封,475200;河南省肿瘤医院、河南省血液病研究所,河南郑州,450008;河南大学医学院,河南开封,475200;河南省肿瘤医院、河南省血液病研究所,河南郑州,450008;河南省肿瘤医院、河南省血液病研究所,河南郑州,450008;河南省肿瘤医院、河南省血液病研究所,河南郑州,450008【正文语种】中文【中图分类】Q254;R322.57【相关文献】1.成人骨髓间充质干细胞体外定向诱导分化为胰岛样细胞团的研究 [J], 李艳华;白慈贤;谢超;陈琳;裴雪涛2.体外定向化学诱导成人脂肪源性间充质干细胞分化为心肌样细胞 [J], 张卫泽;陈跃武;陈永清;哈小琴;马凌;秦勉;洪志斌3.人脂肪间充质干细胞体外定向诱导分化为胰岛样细胞的实验研究 [J], 武晓佳;任刚;边云飞;何军华;肖传实4.成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞体外定向诱导分化为胰岛样细胞观察 [J], 李玉富;宋永平;房佰俊;汪萍;林全德;马丽;张(龙天)莉5.成人脂肪间充质干细胞体外定向诱导分化为心肌样细胞的实验观察 [J], 张卫泽;陈跃武;哈小琴;陈永清;秦勉;马凌;郭建巍;洪志斌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
生物(广东B卷) 学易金卷：2023年高考第二次模拟考试卷(全解全析)
2023年高考生物第二次模拟考试卷生物·全解全析一、选择题：共16小题，共40分。
第1～12小题，每小题2分；第13～16小题，每小题4分。
在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1.人感染COV ID-19(新型冠状病毒)后常见体征有发热、咳嗽、气促和呼吸困难等，在较严重病例中，感染可导致肺炎。
此外某些支原体和细菌感染也可导致肺炎。
下列相关叙述正确的是()A．细菌和支原体都不具备细胞核和细胞器B．支原体和新冠病毒的核酸彻底水解得到的碱基都是四种C．细菌和新冠病毒的蛋白质都是在宿主细胞的核糖体上合成的D．抑制细胞壁合成的药物对支原体肺炎和新冠病毒引起的肺炎均无效【答案】D【解析】细菌和支原体是原核生物，有一种细胞器——核糖体，A错误；支原体有两种核酸DNA 和RNA，水解以后有五种碱基，B错误；细菌利用自身的核糖体合成蛋白质，C错误；支原体没有细胞壁，新冠病毒没有细胞结构，所以抑制细胞壁合成的药物对支原体肺炎和新冠病毒引起的肺炎均无效，D正确。
2.“结构与功能观”是重要的生命观念之一，其内涵是：结构是功能的基础，功能的实现一般依赖于特定的结构。
下列相关叙述正确的是()A．动物卵细胞的体积一般较大，有利于提高卵细胞的物质运输效率B．衰老细胞的细胞体积和细胞核体积均变小，其新陈代谢速率减慢C．核膜上核孔的存在，可实现核质之间频繁的物质交换和信息交流D．叶绿体内膜面积比外膜面积更大，有利于其进行光合作用【答案】C【解析】细胞体积越大，相对表面积越小，物质运输效率越低，A错误；衰老细胞的细胞核体积变大，B错误；核膜上核孔的存在，可实现核质之间频繁的物质交换和信息交流，C正确；叶绿体内膜面积与外膜面积几乎相同，D错误。
3.植物接受过多光照会对叶绿体造成损害，因此植物需要“非光化学淬灭”(NPQ)的机制来保护自身，在NPQ的作用下多余的光能会以热能的形式散失。
该机制的启动和关闭特点如图所示。
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摘要 ： 目的 体外探讨胰腺干细胞形成胰岛样结构并对其进行相关检测， 探寻胰腺干细胞分化为胰岛样结构可行
性及初步鉴定 的技术方法 。方法 从新 生小 鼠胰腺组 织 中通 过原位传 代扩增 培养获 得富足数量 Ｐ Ｓ Ｃ， 以尼 克酰胺 定向诱导 Ｐ Ｓ Ｃ， 观察细胞的形态变化 、 形成 的细胞 团双硫腙染色 、 免疫 荧光组织化学染色及 Ｍ ａ ｌ ｌ ｏ ｒ ｙ染色鉴定 。结果 Ｐ Ｓ Ｃ集落 分布 ， 细胞为单个大核 、 胞质折光透亮 ， 巢蛋 白（ ｎ ｅ ｓ ｔ ｉ ｎ ） 及碱 性磷 酸酶 （ Ａ Ｋ Ｐ） 染 色 阳性 ； 诱导后 聚集成 冈 ， 最终 形成具被膜包 裹的细胞团 ； 双硫晾染色 阳性 ， 胰 岛素 免疫荧 光染色可 见胞 质被 激发 出绿色荧 光的胰 岛素阳性 细胞 ； 细胞 团中央 Ｂ样细胞及周 围 样细胞 ， 形成类似 正常胰 岛细胞组成 的胰 岛样结构 。结论 胰腺 干细胞在适宜
ｂｉ ｇ ｎ ｕｃ ｌ ｅ ａ ｒ ，ｒ ｅ ｆ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｈｉ ｎ ｉ ｎ ｇ ｂ ｒ ｉ ｌ ｌ ｉ ａ ｎｔ ｌ ｙ，ｍｏ ｒ ｐｈ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ｗａ ｓ ｓ ｔ ａ ｂｌ ｅ，ｎ ｅ ｓ ｔ ｉ ｎ ａ ｎｄ ＡＫＰ ｗｅ ｒ ｅ ｂｏ ｔ ｈ ｐｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ． Ａｆ ｔ ｅ ｒ ｉ ｎ ｄｕ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ，ｔ ｈｅ ｐ ａ ｎ ｃ ｒ ｅ ａ ｔ ｉ ｃ ｓ ｔ ｅ ｍ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｇ ａ ｔ ｈｅ ｒ ｅ ｄ ｔ ｏ ｇ ｅ ｔ ｈｅ ｒ ａ ｎ ｄ ｆ ｏ ｒ ｍｅ ｄ ｃ ｅ ｌ ｌ ｃ ｌ ｕｓ ｔ ｅ ｒ ｓ ，ｐ ａ ｃ ｋ ｅ ｄ ｗｉ ｔ ｈ ｉ ｎ ｔ ａ ｃ ｔ ｍｅ ｍｂ ｒ ａ ｎｅ ．
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研 究 论 文
体 外定 向诱 导 小 鼠胰 腺 干 细胞 分化 形 成胰 岛样 结 构
吴丽 情 ，寇 亚丽 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ，赵 文婧 ，吴 卓 ，徐亦辰 ，陈维平
（ １ ．广西 医科大学 组织胚胎学教研室 ， 广西 南宁 ５ ３ ０ ０ ２ １ ；２ ．广西卫生 职业技术学 院 人体形态学教研室 ， 广西 南 宁 ５ ３ ０ ０ ２ ３ ）
条件下可定向分化 ， 形 成 胰 岛样 结 构 。
关 键词 ： 胰腺干细胞 ； 体外培养； 定向诱导 ； 胰岛样结构
中 图分 类 号 ： Ｑ ８ １ ３ ． １ 文献 标 志 码 ： Ａ
Ｄｉ ｒ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ ｉ ｎ ｄ ｕ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｍｏ ｕ ｓ ｅ ｐ ａ ｎ ｃ ｒ ｅ ａ ｔ ｉ ｃ ｓ ｔ ｅ ｍ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｉ ｎ ｔ ｏ ｉ ｓ ｌ ｅ ｔ — ｌ ｉ ｋ ｅ ｓ ｔ ｒ ｕ ｃ ｔ ｕ ｒ ｅ ｓ ｉ ｎ ｖ ｉ ｔ ｒ ｏ
２ ０ １ ５年
１ ２月
基础 医学 与临床
Ｂａ ｓ ｉ ｃ ＆ Ｃｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎｅ
Ｄｅ ｃ ｅ ｍｂ ｅ ｒ ２ ０１ ５
Ｖ０ １ ． ３ ５ Ｎｏ ． １ ２
第３ ５卷
第 ｌ ２期
文章编号：１ ０ ０ １ — ６ ３ ２ ５ （ ２ ０ １ ５ ） ｌ ２ — １ ６ １ ２ — ０ ５