三种针法对对氯苯丙氨酸诱导失眠大鼠海马5-HT_(1A)、5-HT_(2A)基因表达影响研究

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中药治疗对氯苯丙氨酸失眠模型大鼠影响的基础研究进展

中药治疗对氯苯丙氨酸失眠模型大鼠影响的基础研究进展失眠作为一种常见的疾患，给人们的正常工作和生活带来严重的不良影响，甚至会诱发或加重多种身体疾病。

目前催眠镇静的药物以苯二氮卓类和巴比妥类为主，虽起效快，但均可引起不可避免的不良反应。

大量研究表明中药治疗失眠具有无成瘾性、依赖性等特点。

腹腔注射氯苯丙氨酸是目前常用的失眠造模方法，通过搜集、整理中药对PCPA诱导失眠模型大鼠影响的实验文献，从动物行为学改变及作用机制等方面进行阐述，以期为研究者更深入地研究中药治疗失眠的机制提供参考。

[Abstract] As a common disorder，insomnia often brings serious effects on people′s normal work and life，and even induces a variety of physical diseases. Although sedative-hypnotic drugs like benzodiazepine and barbiturate effect quickly，they can cause unavoidable side effects. Treatment of insomnia with Chinese medicine has characteristics of no addiction and dependence. PCPA is a universal drug used in insomnia model. This article collects and arranges the experimental literature documents about treatment with Chinese medicine for insomnia rats induced by PCPA，and discuss from animal behavior，and mechanism of action in order to provide reference for researchers.[Key words] Chinese medicine；PCPA；Insomnia；Fundamental research失眠是以频繁而持续的入睡困难和/或睡眠维持困难并导致睡眠感不满意为特征的睡眠障碍。

针刺对抑郁症睡眠障碍大鼠行为学和海马5-羟色胺受体表达水平的影响

眠剥夺造模。针刺组每天在应激前１进行针刺，连续２。２后，计算行为得分，取大鼠海马检测５Ｈ。体、５ＨＴｈ１ｄ１ｄ－Ｔ受－受体ｍＲＮＡ水平。结果模型组大鼠自主活动较正常组明显减少（＜．１；针刺组大鼠的自主活动较模型组明显增加（＜．１。与正常Ｐ００）尸００）针刺可能通过调整５Ｈ－Ｔ受体间不平衡而发挥
ｍｏｅｇｏｐｃｍｐｒｄｗｔｔｅｏｍａｇｏｐｒ＜．１．ｈｕｏｏｃｅａｉｒｎａｕｕｃｒｇｏｐｉｃｅｓｄｃｍｐｒｄｗｔｔｅｄｌｄｌｒｕｏａｅｉｒｌｒｕ００）Ｔｅａｔｎｍｉ－ｈｖｏｃｐｎｔｅｒｕｒａｅｏａｅｉｅｈｈｎＰｂｉｕｎｈｈｍｏｇｏｐｒ＜．１．ｈｘｒｓｉｎｏ－ＴＡＮｉｉｐｃｍｐｓｆｄｌｒｕｅｒａｅｎｅ５ＨＴＡＮＡｉｃｅｓｄｃｍｐｒｄｒｕＯ０）ＴｅｅｐｅｓｆＨ１ｍＲＡｈｐｏａｕｅｇｏｐｄｃｅｓｄａｄｔ－２ｍＲｒａｅｏａｅＰｏ５ＲｎｏｍｏｈＲｎｗｉｅｏａｇｏｐｆ＜．１．ｈｘｒｓｉｎｏＨＴＡＮＡｉｃｅｓｄａｄｔｅ－ＴＡＮｅｒａｅｅｉｏａｕｆｃ — ｔｔｒｌｒｕ００）Ｔｅｐｅｓｆ－１ｍＲｒａｅＨ２ｍＲＡｄｃｅｓｄｉｔｐｃｍｐｓｕｈｈｎｍＰｅｏ５Ｒｎｎｈ５Ｒｎｈｈｐｏａ

五味子对对氯苯丙氨酸致失眠大鼠Toll样受体7信号通路相关基因mRNA表达的影响

五味子对对氯苯丙氨酸致失眠大鼠Toll样受体7信号通路相关基因mRNA表达的影响梁可;乔铁;李芳潇;郑冰元;朱明丹【期刊名称】《中国民间疗法》【年(卷),期】2023(31)1【摘要】目的:研究五味子对对氯苯丙氨酸(PCPA)致失眠大鼠Toll样受体7(TLR7)信号通路相关基因mRNA表达的影响。

方法:将32只大鼠随机分为空白组、模型组、五味子组、安定组,每组8只。

模型组、五味子组、安定组大鼠腹腔注射PCPA建立失眠模型。

五味子组给予五味子提取物灌胃,安定组给予地西泮混悬液灌胃,余组不予处理。

采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测各组大鼠脾脏TLR7、干扰素调节因子7(IRF7)、干扰素α(IFN-α)的mRNA水平。

结果:造模后,模型组大鼠体质量下降,出现毛少无光、易受惊、烦躁易怒、昼夜节律消失等现象。

模型组、安定组大鼠体质量均低于空白组(P<0.05)。

给予五味子提取物灌胃后,五味子组与空白组大鼠体质量比较,差异无统计学意义(P>0.05),两组大鼠身体状态均相对较好,毛发有光泽,白天安静倦卧,无烦躁、易怒等症状。

荧光定量PCR仪检测结果显示,模型组TLR7、IRF7、IFN-α的mRNA表达水平均明显高于空白组(P<0.01);五味子组、安定组TLR7、IRF7 mRNA表达水平均明显低于模型组(P<0.01);安定组IFN-α mRNA水平低于模型组(P<0.05)。

结论:五味子能改善PCPA诱导失眠大鼠的睡眠,其机制可能是通过下调TLR7信号通路的相关基因发挥治疗作用。

【总页数】3页(P101-103)【作者】梁可;乔铁;李芳潇;郑冰元;朱明丹【作者单位】辽宁中医药大学【正文语种】中文【中图分类】R256.23;R91【相关文献】1.当归多糖对点带石斑鱼Toll样受体22信号通路相关基因表达的影响2.当归多糖对点带石斑鱼Toll样受体22信号通路相关基因表达的影响3.电针对氯苯丙氨酸致失眠大鼠Toll样受体/核因子-κB信号通路的影响4.电针对 PCPA 致失眠大鼠脾脏TLR7信号通路关键基因 mRNA 表达的影响5.Urantide对动脉粥样硬化大鼠氧化应激及Toll样受体4、髓样分化因子88、核因子κB信号通路表达的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

佛手宁神方改善睡眠作用的机制

佛手宁神方改善睡眠作用的机制黄杰聪;谢炜;邓宁;梁雯琳;胡冬蓉;洪雨;周扬【摘要】目的评价佛手宁神方镇静催眠作用并研究其对失眠大鼠海马5-羟色胺(5-HT)、5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)表达的影响.方法雄性昆明小鼠随机分为空白组,艾司唑仑组[0.4 mg/(kg·d)],佛手宁神方低、中、高剂量组[12,24,48g/(kg·d)];连续给药1周,末次给药后进行阈下剂量和阈剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠实验.雄性SD大鼠随机分为空白组,模型组,艾司唑仑组[0.2 mg/(kg·d)],佛手宁神方低、中、高剂量组[6,12,24 g/(kg·d)],每组8只;采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)350 mg/(kg·d)制作失眠大鼠模型;造模完成后第1天开始灌胃给药,连续1周.旷场实验测试各组大鼠运动总路程和站立次数;酶联免疫吸附法测定海马5-HT 的含量;免疫组化法和实时荧光定量PCR分别检测海马5-HT1AR蛋白和mRNA 的表达.结果与空白组相比,佛手宁神方高剂量组阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠入睡只数增加(P<0.05),阈剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠潜伏期缩短(P<0.01),睡眠持续时间延长(P<0.01).与空白组比较,模型组大鼠在旷场实验中运动总路程增加(P<0.05),海马5-HT含量减少(P<0.01),海马5-HT1AR蛋白和mRNA表达水平下降(P<0.01).与模型组相比,艾司唑仑组和佛手宁神方高剂量组运功总路程减少(P<0.05),海马5-HT含量增加(P<0.05),海马5-HT1AR蛋白和mRNA表达水平上升(P<0.01).结论佛手宁神方可能通过提高海马5-HT的含量,上调海马5-HT1AR蛋白和mRNA的表达,从而起到治疗失眠的作用.%Objective To evaluate the sedative and hypnotic effects of Foshouningshen decoction (FSNSD) and study its effects on expressions of 5-hydroxy tryptamine (5-HT) and 5-HT1A receptor (5-HT1AR) in the hippocampus in a rat model of insomnia. Methods Male KM mice were divided into control group, estazolam (0.4mg/kg daily) group, and low-, moderate-, and high-dose FSNSD groups (daily dose of 12, 24, and 48 g/kg, respectively). After corresponding treatments for 1 week, the mice underwent sleep-inducing test with subthreshold and threshold doses of sodium pentobarbital. Forty-eight male SD rats were randomized into control group, insomnia model group, estazolam group (0.2 mg/kg daily), and low-, moderate-, and high-dose FSNSD groups (with daily dose of 6, 12, and 24 g/kg, respectively). Rat models of insomnia were established by intraperitoneal injection of 4-cholro-dl-phenylalanine (PCPA) at the daily dose of 350 mg/kg for 3 days, after which the rats received corresponding treatments via gavage for 1 week. The performance of the rats in open field test was recorded and the hippocampal expression of 5-HT was detected using ELISA; the expressions of 5-HT1AR protein and mRNA in the hippocampus were detected using immunohistochemistry and real-time PCR, respectively. Results In the sleep-inducing test with a subthreshold dose of sodium pentobarbital, the mice treated with high-dose FSNSD showed a significantly higher rate of sleep onset than the control mice (P<0.05); in the test with a threshold dose of sodium pentobarbital, treatment with moderate- and high-dose FSNSD resulted in significantly prolonged sleeping time (P<0.01) and shortened sleep latency (P<0.05) in the mice. The rats in insomnia model group showed increased total distance in open field test (P<0.05) with significantly decreased content of 5-HT (P<0.01) and expressions of 5-HT1AR protein and mRNA in the hippocampus (P<0.01). Treatment of the rats with estazolam or high-dose FSNSD obviously decreased the totaldistance in open field test (P<0.05) and increased the content of 5-HT (P<0.05) and expressions of 5-HT1AR (P<0.01) in the hippocampus of rats with insomnia. Conclusion FSNSD can produce therapeutic effects on insomnia possibly by increasing 5-HT content and expressions of 5-HT1AR in the hippocampus.【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2017(037)008【总页数】5页(P1116-1120)【关键词】失眠;佛手宁神方;5-羟色胺;5-羟色胺1A受体【作者】黄杰聪;谢炜;邓宁;梁雯琳;胡冬蓉;洪雨;周扬【作者单位】南方医科大学中医药学院,广东广州 510515;南方医科大学中医药学院,广东广州 510515;南方医科大学中医药学院,广东广州 510515;南方医科大学中医药学院,广东广州 510515;南方医科大学中医药学院,广东广州 510515;南方医科大学中医药学院,广东广州 510515;南方医科大学中医药学院,广东广州510515【正文语种】中文中医药治疗失眠有很长的历史，张仲景《金匮要略》中“虚劳，虚烦不得眠，酸枣仁汤主之。

针灸治疗对氯苯丙氨酸(PCPA)失眠模型大鼠基础研究进展

针灸治疗对氯苯丙氨酸(PCPA)失眠模型大鼠基础研究进展王红;吴建丽;王晓磊;杜冬梅;王天琪;王薇【摘要】针灸干预治疗对氯苯丙氨酸(PCPA)诱导失眠模型大鼠的实验文献进行搜集、整理,发现与针灸改善失眠作用相关的基础研究主要集中在动物行为学、免疫功能、神经递质系统、氧化应激反应等方面,研究表明针灸是通过对这些异常的生物学行为或微观分子产生良性调节作用,以神经-体液调节为基础的多靶点、多途径发挥改善睡眠作用.本研究对这些研究文献进行综述,一方面表明了针灸促眠作用的有效性,为临床治疗提供依据,另一方面分析了当前探索针灸改善睡眠机制研究中存在的问题和不足,并对今后的研究提出了建议和期望.%This article collects and arranges the experimental literature documents about acupuncture treatment for insomnia rats induced by PCPA.The results show that the fundamental research of acupuncture for treating insomnia mainly focuses on the basis of animal behavior,immune function,neurotransmitter systems,oxidative stress,etc.These studies show that acupuncture has the effect on improving sleep based on nervous-humoral regulation of multiple targets and pathways by producing benign adjustment to abnormal biological behavior or microscopic molecular.This literature review not only shows the effect of acupuncture on promoting sleep and provides the basis for clinical treatment,but it also analyzes the currently existing problems and shortcomings in the research of the mechanism of acupuncture and puts forward some suggestions and expectations for the future research.【期刊名称】《针灸临床杂志》【年(卷),期】2017(033)002【总页数】4页(P76-79)【关键词】针灸;对氯苯丙氨酸;基础研究;失眠;综述【作者】王红;吴建丽;王晓磊;杜冬梅;王天琪;王薇【作者单位】黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨150040【正文语种】中文【中图分类】R246.1失眠(Insomnia)是指入睡困难、睡眠时间过短、睡眠深度过浅或无法维持睡眠状态，导致较长时间内睡眠的质和量都不能令人满意，身体的精力和体力不能及时恢复而影响日常活动的一种主观体验[1]，中医学称为“不寐”“不得眠”等。

蛇麻草精油香薰法对氯苯丙氨酸诱导失眠大鼠的助眠作用研究

蛇麻草精油香薰法对氯苯丙氨酸诱导失眠大鼠的助眠作用研究田英姿;胡飞雪;王文博;庄文会;杜思鸿;刘思瑶;陈朋杰;赵培源【期刊名称】《中国现代医学杂志》【年(卷),期】2022(32)21【摘要】目的探究蛇麻草精油香薰法对氯苯丙氨酸(PCPA)诱导失眠大鼠的行为学、部分神经递质含量及松果体的影响。

方法腹腔注射PCPA复制失眠大鼠模型,随机分为模型组、薰衣草精油组(0.2%)、蛇麻草精油低浓度组(0.05%)、蛇麻草精油中浓度组(0.10%)及蛇麻草精油高浓度组(0.20%),每组12只,另设空白组12只。

模型复制后,各治疗组分别以相应浓度精油香薰治疗,空白组和模型组熏蒸馏水。

每天8 h,连续5 d。

观察并记录各组大鼠一般状况;戊巴比妥钠协同睡眠实验观察大鼠睡眠潜伏期和睡眠持续期;旷场实验检测大鼠自发活动;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清褪黑素(MT)、γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)含量;高效液相色谱仪测定各组大鼠下丘脑中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、五羟色胺(5-HT)含量;HE 染色观察大鼠松果体病理学改变。

结果与空白组比较,模型组睡眠潜伏期延长、睡眠持续期缩短(P<0.05);水平运动和垂直运动均减少(P<0.05)。

与模型组比较,蛇麻草精油高浓度组睡眠潜伏期缩短、睡眠持续期延长(P<0.05);水平运动和垂直运动增加(P<0.05);血清MT、GABA含量上升,Glu含量下降,Glu/GABA下降(P<0.05);下丘脑中5-HT含量上升,NE和DA含量下降(P<0.05)。

松果体细胞和神经胶质细胞形态结构正常、排列均匀、数目明显恢复。

结论蛇麻草精油香薰法对失眠大鼠具有一定助眠作用,可能与改善松果体结构,促进MT、抑制性递质GABA及5-HT的分泌,以及抑制兴奋性递质Glu、NE、DA的分泌有关。

【总页数】7页(P39-45)【作者】田英姿;胡飞雪;王文博;庄文会;杜思鸿;刘思瑶;陈朋杰;赵培源【作者单位】河南中医药大学第一临床医学院;河南中医药大学医学院【正文语种】中文【中图分类】R965【相关文献】1.大鼠失眠模型造模中对氯苯丙氨酸混悬液改良法的探讨2.五味子木脂素对氯苯丙氨酸致失眠大鼠的催眠作用3.沉香提取物对PCPA(对氯苯丙氨酸)致失眠大鼠的镇静催眠作用4.酸枣仁汤对氯苯丙氨酸诱导失眠大鼠模型治疗机制的研究5.交泰丸干预对氯苯丙氨酸致大鼠失眠的作用机制研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

3种针法对PCPA诱导的失眠大鼠海马5-HT_(1A)、5-HT_(2A)蛋白表达的影响

ＰＣＰＡ模型大鼠海马５－ＨＴＡ蛋白表达下降，而５一ＨＴ２Ａ蛋白表达上调；３种
针刺脐内环穴组、针刺失眠方加脐内环穴组、针刺非穴组；另设正常组（６只）。治疗６ｄ后取大鼠海马匀浆，采用免疫印迹法检测５－ＨＴＡ、５－ＨＴｚＡ蛋白含量。结果
ｉｎＨｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｏｆＰａｒａ－ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ－ｉｎｄｕｃｅｄＩｎｓｏｍｎｉａＲａｔｓ
ＬｕｏＢｅｎｈｕａ，ＣｈｅｎＺｈｏｕｊｉｎｇ，ＷａｎｇＹａｎｅｔａｌ
ＥｆｆｅｃｔｏｆＴｈｒｅｅＫｉｎｄｓｏｆＡｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅｏｎＰｒｏｔｅｉｎＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆ５一ＨＴ１Ａａｎｄ５一ＨＴ２Ａ
ｔｕｒｅｏｆｕｍｂｉｌｉｃａｌｉｎｎｅｒａｃｕｐｏｉｎｔｓ，ｃｏｍｂｉｎｅｄｍｅｔｈｏｄｏｆａｃｕｐｏｉｎｔ＿ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｏｆｉｎｓｏｍｎｉａａｎｄａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅｏｆｕｍｂｉｌｉｃａｌｉｎｎｅｒａｃｕ — ｐｏｉｎｔｓ）ｏｎｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆ５－ＨＴｌＡａｎｄ５－ＨＴ２Ａｉｎｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｏｆｐａｒａ — ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ（ＰＣＰＡ）一ｉｎｄｕｃｅｄｉｎｓｏｍｎｉａｒａｔｍｏｄｅｌ，ａｎｄｔｏｓｅｌｅｃｔｔｈｅｏｐｔｉｍａｌａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅｍｅｔｈｏｄ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｏｔａｌｌｙ，３０ＰＣＰＡ－ｉｎｄｕｃｅｄｉｎｓｏｍｎｉａｍａｌｅｒａｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｆｉｖｅｇｒｏｕｐｓ，ａｎｄｔｈｅｒｅｗａｓｓｔｉｌｌａｎｏｔｈｅｒｎｏｒｍａｌｇｒｏｕｐ（６ｏｆｅａｃｈｇｒｏｕｐ）．Ｔｈｅｎｏｒｍａｌｇｒｏｕｐａｎｄｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ

三种针法对PCPA失眠大鼠海马5-HT、5-HIAA含量的影响

三种针法对PCPA失眠大鼠海马5-HT、5-HIAA含量的影响罗本华;王燕;张亚飞;罗梅桂【摘要】目的:观察针刺失眠方、脐内环穴及失眠方合脐内环穴对PCPA失眠大鼠海马5-HT、5-HIAA含量影响,并对3种针法优选.方法:70只大鼠经随机、PCPA 失眠造模及筛选后共分6组各10只,正常组、模型组无特殊处理,3个观察组分别给予针刺失眠方、针刺脐内环穴、针刺失眠方合脐内环穴干预,非穴组给予针刺非穴处理,治疗6d后取大鼠海马匀浆,ELISA法检测5-HT和5-HIAA含量.结果:PCPA模型大鼠海马5-HT和5-HIAA明显降低,3种针法均显著升高5-HT、5-HIAA含量;而失眠方合脐内环穴针刺作用更好,优于2种单一方法并显示其叠加作用.结论:3种针法可能通过升高海马内5-HT、5-HIAA含量而改善失眠,实验支持失眠方合脐内环穴针刺为失眠症的优选干预方法.【期刊名称】《中国中医基础医学杂志》【年(卷),期】2016(022)011【总页数】3页(P1517-1519)【关键词】失眠;脐内环针;失眠方;5-HT;5-HIAA【作者】罗本华;王燕;张亚飞;罗梅桂【作者单位】广西中医药大学,南宁 530001;广西中医药大学,南宁 530001;广西中医药大学,南宁 530001;广西中医药大学,南宁 530001【正文语种】中文【中图分类】R245.35-羟色胺(5-HT)在睡眠的调节过程中起着重要作用，是睡眠机制研究的重点之一。

针刺失眠方、脐内环穴针刺是流行于广西地域治疗失眠症临床常用且有效的方法。

笔者近年常用二者结合治疗失眠症，取得较好的疗效。

为了解其对睡眠活动的调节机理，探讨了3种针刺方法的差异。

本实验研究3种针刺对PCPA失眠模型大鼠海马5-HT和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的含量影响，旨在为其临床运用、方法优选提供实验依据。

1.1 材料与试剂1.1.1 动物健康SPF级Wistar雄性大鼠70只，体质量(250±15)g，由广西医科大学动物实验中心提供;室温20～25℃饲养，室内采光按照白昼循环模式，定时喂食，自由饮水，适应性喂养15 d。

210978244_酸枣仁茯苓粉、大豆肽粉对失眠模型小鼠的改善睡眠作用

魏嵘，王振，李怀平，等. 酸枣仁茯苓粉、大豆肽粉对失眠模型小鼠的改善睡眠作用[J]. 食品工业科技，2023，44（7）：359−366. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022050374WEI Rong, WANG Zhen, LI Huaiping, et al. Study on the Effect of Ziziphi spinosae Semen Poria cocos Powder and Soybean Peptide Powder on Improving Sleep in Insomnia Model Mice[J]. Science and Technology of Food Industry, 2023, 44(7): 359−366. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022050374· 营养与保健 ·酸枣仁茯苓粉、大豆肽粉对失眠模型小鼠的改善睡眠作用魏　嵘1，王　振2，李怀平2，郭　豫3, *，赵　建3,*（1.北京联合大学应用文理学院保健食品功能检测中心，北京 100191；2.金诃藏药（山东）健康产业有限公司，山东济南 250104；3.北京联合大学生物活性物质与功能食品北京市重点实验室，北京 100191）摘　要：目的：研究酸枣仁茯苓粉和大豆肽粉对对氯苯丙氨酸（PCPA ）诱导的失眠模型小鼠的睡眠改善作用。

方法：180只SPF 级雄性BALB/c 小鼠，先选取90只随机分为6组（正常对照组，模型对照组，酸枣仁茯苓粉低、中、高剂量组，大豆肽粉组），进行戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠实验，另选90只随机分为6组（分组同上），进行旷场实验并测定下丘脑5-羟色胺（5-HT ）、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA ）、去甲肾上腺素（NE ）以及海马中的γ-氨基丁酸（GABA ）和谷氨酸（Glu ）的含量。

针剌对虚劳失眠大鼠大脑海马单氨类受体水平的影响

针剌对虚劳失眠大鼠大脑海马单氨类受体水平的影响闵晓莉张林挺【期刊名称】《成都医学院学报》【年(卷),期】2012(007)002【摘要】目的：通过动物试验从单氨类神经受体角度探讨虚劳失眠的产生及针刺治疗虚劳失眠的机制。

方法：50只SPF级别SD系列大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、中药组和针剌组，每组10只。

采用大鼠跑台训练＋Y型迷宫＋PCPA注射法制作复合型虚劳失眠动物模型，对模型组、西药组、中药组大鼠分别采用生理盐水、安定和滋肾宁神丸灌胃．对针剌组大鼠针刺百会穴并埋线。

处死大鼠并取材，检测测大脑海马内5-HT、Glu、GABA水平。

试验数据采用SPSS13．0进行方差分析。

结果：和模型组相比，治疗组大鼠大脑海马部位5-HT 含量明显偏高（P〈0．05）、GABA含量明显偏低（P〈0．05），但Glu含量则无明显差异（P〉0．05）；西药组、中药组和针刺组之间各指标无显著差别。

结论：针刺可能通过提高大鼠大脑内5-HT水平，降低GABA水平，使各单氨类受体的比例发生变化，减轻神经细胞的损伤，起到保护大脑，改善睡眠作用，和药物治疗效果相当。

【总页数】1页(P172-172)【作者】闵晓莉张林挺【作者单位】广东省中医院传统疗法中心广东510500 广州体育学院运动与健康系广东广州510500【正文语种】中文【中图分类】R245.31【相关文献】1.中汇川黄液对癫痫大鼠海马和大脑皮质糖皮质激素受体的影响 [J], 吴冰洁;顾平;王铭维;龚淑英2.亚低温对心肺复苏大鼠大脑海马神经元内N-甲基-D-天门冬氨酸受体1表达的影响 [J], 孙志扬;李光;孙庆文;黄兴华;刘娜3.缬草波春对非炎症性结肠致敏大鼠模型大脑海马旁回GABA-B受体表达的影响[J], 周小雕;汪晓珍;冉茂熙;叶建明;薛存宽;何学斌;蒋朋4.穹隆海马伞切断与卵巢切除大鼠大脑皮质和海马CA1区雌激素受体α与淀粉样β蛋白前体β位点裂解酶共存观察 [J], 金丽英;郭宗君;崔红波5.针刺对虚劳失眠大鼠大脑神经因子的影响 [J], 闵晓莉; 张林挺因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

五味子木脂素对氯苯丙氨酸致失眠大鼠的催眠作用

〔摘要〕目的观察五味子总木脂素对氯苯丙氨酸( ＰＣＰＡ) 所致失眠大鼠的催眠作用并探讨相关机制ꎮ 方法将雄
性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为４组ꎬ空白对照组( ＣＯＮ组ꎬ灌胃蒸馏水ꎬ注射生理盐水) ꎬ模型组( ＭＯＤ组ꎬ灌胃蒸馏水ꎬ注射ＰＣＰＡ) ꎬ
ＳＣＬ组( 灌胃ＳＣＬꎬ注射ＰＣＰＡ) 及ＰＣＰＡ＋ＳＣＬ组( 灌胃ＳＣＬꎬ注射ＰＣＰＡ) ꎮ 连续灌胃给药７ｄꎬ每天１次ꎮ 通过阈下剂量戊巴比
００１)ꎮ 结论五味子木脂素对ＰＣＰＡ所致失眠大鼠具有催眠作用ꎬ该作用与其调节大鼠下丘脑５￣ＨＴ及５￣ＨＩＡＡ水平有关ꎮ
〔关键词〕五味子木脂素ꎻ催眠ꎻ５￣羟色胺
〔中图分类号〕Ｒ２８５５〔文献标识码〕Ａ〔文章编号〕１００５￣９２０２(２０２０)０４￣０８６１￣０３ꎻｄｏｉ:１０３９６９ / ｊｉｓｓｎ１００５￣９２０２２０２００４０５８
具有镇静和催眠的作用ꎬ该作用与其升高小鼠体内
１３主要仪器设备ＬＤ５￣１０Ｂ高速离心机( 北京市
ꎮ 研究表明ꎬ参与失眠和催眠的中枢神经递
司) ꎻ全自动酶标仪( 瑞士ＴＥＣＡＮ集团公司) ꎻＦＳＨ￣２
γ￣氨基丁酸 ( ＧＡＢＡ) 和降低谷氨酸 ( Ｇｌｕ ) 水平有
关
〔３ꎬ４〕
第一作者:张羽翀(１９９３￣) ꎬ男ꎬ硕士在读ꎬ主要从事神经药理学研究ꎮ
１４３ＳＣＬ协同戊巴比妥钠睡眠实验于末次给
和３５ｍｇ / ｋｇ) ꎬ 此为阈下和阈剂量ꎮ 观察时间为
３０ｍｉｎꎬ以实验大鼠翻正反射消失１ｍｉｎ以上为阳
性指标ꎮ 记录各组大鼠的睡眠只数、睡眠潜伏期及

针刺通过调节GABA-Gln代谢对失眠大鼠症状的改善及对自发活动的影响

2021年5月第31卷㊀第5期中国比较医学杂志CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINEMay,2021Vol.31㊀No.5邢春蕊,陈应奇,孙曌,等.针刺通过调节GABA-Gln 代谢对失眠大鼠症状的改善及对自发活动的影响[J].中国比较医学杂志,2021,31(5):47-52.Xing CR,Chen YQ,Sun Z,et al.Improvement of symptoms and spontaneous activity of insomniac rats by regulating GABA-Gln metabolism [J].Chin J Comp Med,2021,31(5):47-52.doi:10.3969/j.issn.1671-7856.2021.05.008[基金项目]国家自然科学基金资助项目(81860880)㊂[作者简介]邢春蕊(1981 ),女,本科,主治医师,研究方向:大内科㊂E-mail:chon4521g@[通信作者]陈应奇(1980 ),男,硕士研究生,副教授,研究方向:中药方剂教学及中医肝胆病中药临床诊疗㊂E-mail:chon4521g@针刺通过调节GABA-Gln 代谢对失眠大鼠症状的改善及对自发活动的影响邢春蕊1,陈应奇2∗,孙㊀曌2,刘英莲2(1.海口市人民医院健康管理体检科,海口㊀570802;2.海南医学院中医学院,海口㊀570802)㊀㊀ʌ摘要ɔ㊀目的㊀研究针刺对失眠大鼠症状的改善及对自发活动的影响,并探讨其可能作用机制㊂方法㊀腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)建立失眠大鼠模型,随机分为失眠组㊁针刺组和西药组,各10只,另设对照组10只㊂针刺组和西药组分别采用针刺及灌胃地西泮片进行干预,失眠组和对照组固定后灌胃生理盐水,干预7d㊂旷场实验检测自发活动;戊巴比妥钠协同睡眠实验检测睡眠潜伏期和睡眠时间;RT-qPCR 检测视交叉上核生物钟基因clock 和period 2(per 2)水平;高效液相检测下丘脑γ-氨基丁酸(GABA)㊁谷氨酸(Glu)含量;Western blot 检测下丘脑GAD㊁GS 蛋白表达水平㊂结果㊀模型组大鼠出现失眠典型症状㊂与模型组比较,针刺组和西药组水平运动和垂直运动得分升高,睡眠潜伏期缩短㊁睡眠时间延长,视交叉上核clock ㊁per 2mRNA 相对表达量升高,下丘脑Glu 水平降低㊁GABA 水平升高㊁Glu /GABA 降低,GAD 蛋白相对表达量升高㊁GS 蛋白相对表达量降低(P <0.001,P <0.01,P <0.05);针刺组与西药组上述指标比较,差异无统计学意义(P >0.05)㊂结论㊀针刺对失眠大鼠症状及自发活动具有一定改善作用,可能通过调节GABA-Gln 发挥作用㊂ʌ关键词ɔ㊀失眠;针刺;γ-氨基丁酸;谷氨酸ʌ中图分类号ɔR-33㊀㊀ʌ文献标识码ɔA㊀㊀ʌ文章编号ɔ1671-7856(2021)05-0047-06Improvement of symptoms and spontaneous activity of insomniac rats byregulating GABA-Gln metabolismXING Chunrui 1,CHEN Yingqi 2∗,SUN Zhao 2,LIU Yinglian 2(1.Department of Health Management and Physical Examination of Haikou People s Hospital,Haikou 570802.2.College of Traditional Chinese Medicine,Hainan Medical College,Haikou 570802)㊀㊀ʌAbstract ɔ㊀Objective ㊀To investigate the role of microRNA (miR)-20a-5p regulating vascular endothelial growthfactor (VEGF)pathway in mice with oxygen-induced retinopathy (OIR).Methods ㊀The experiment was divided intonormal group,model group,hyperoxia control group,miR-20a-5p high expression group,with 24mice in each group.In addition to the normal group,the rest of the mice were placed in the oxygen tank with (75.00ʃ2.00)%oxygen concentration from the 7th day after birth to establish the OIR mice model,and after 5days of continuous hyperoxia environment,they were fed in normoxia,at 1day before the end of hyperoxia environment,1μL phosphate buffered saline (PBS)was injected into the vitreous cavity of the hyperoxia control group,1μL miR-20a-5p agomir (1μmol /L)wasinjected into the vitreous cavity of the high expression group,and the model group did nothing.After the end of hyperoxia, the normal group was kept in the air for normal feeding.The experiment was carried out after normal air feeding for more5 days.The expressions of miR-20a-5p,VEGF,vascular endothelial growth factor receptor(VEGFR)-1and VEGFR-2were detected by real-time fluorescence quantitative PCR(qRT-PCR);retinal vascular morphology was observed by retinal patch;hematoxylin eosin(HE)staining was used to count the endothelial cells of retinal neovascularization;and VEGF positive cells were detected by immunohistochemistry.Results㊀In the model group and hyperoxia control group,on the 17th day of life,the radial large blood vessels from the optic disc extended roundly and irregularly,there were a lot of new blood vessels,the structure and distribution of neovascularization were disordered and the capillary network was occluded; and compared with the model group and the hyperoxia control group,the miR-20a-5p high expression group had no obvious radial vascular circuitous,less irregular vascular expansion and less pared with those in the normal group,the level of miR-20a-5p in retina in model group and hyperoxia control group was lower(P<0.05),and the number of nuclei in retinal vascular endothelium,VEGF protein positive area percentage,expressions of VEGF,VEGFR-1 and VEGFR-2mRNAs in retina were higher(P<0.05);meanwhile,compared with those in the model group and the hyperoxia control group,the level of miR-20a-5p in retina in miR-20a-5p high expression group was lower(P<0.05), and the number of nuclei in retinal vascular endothelium,VEGF protein positive area percentage,expressions of VEGF, VEGFR-1and VEGFR-2mRNAs in retina were higher(P<0.05).Conclusions㊀Increasing miR-20a-5p can inhibit VEGF pathway and decrease retinal neovascularization in OIR mice,so as to protect the retina of OIR mice.ʌKeywordsɔ㊀insomnia;acupuncture;γ-aminobutyric acid;glutamic acid㊀㊀随着社会快速发展,生活节奏不断加快以及工作压力的增加,现代人失眠发病率不断上升㊂失眠是一种睡眠障碍类疾病,表现为入睡困难㊁睡眠维持时间短㊁早醒等[1]㊂长时间失眠可导致一系列健康和心理问题,可诱发心脑疾病㊁糖尿病等,并可伴发抑郁症,严重影响患者身体健康和生活质量[2-3]㊂目前临床上治疗失眠主要有药物疗法和非药物疗法,长期使用药物治疗,易产生耐药性及药物成瘾性,存在较大隐患㊂中医认为,睡眠是一个节律性生理过程,正常睡眠与人体阴阳及五脏气血密切相关,失眠主要由机体阴阳失衡㊁气血不足㊁脏腑功能失调及痰淤阻滞所致[4]㊂针灸可以调虚实㊁平阴阳㊁通经脉,通过针刺特定穴位治疗失眠,经济㊁安全,且无副作用,被患者广泛接受[5]㊂针刺治疗失眠临床疗效显著,但其具体作用机制报道较少,本研究采用针刺特定穴位,评价其对对失眠大鼠症状的改善及自发活动的影响,并对其具体作用机制进行探讨,以期为临床治疗失眠提供理论基础㊂1㊀材料和方法1.1㊀实验动物45只SD大鼠,雄性,SPF级,7周龄,体重(200ʃ20)g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司[SCXK(京)2016-0006],饲养于海南斯达制药有限公司实验动物中心[SYXK(琼)2016-0006],保持环境温度20ħ~25ħ,相对湿度45%~65%,适应性饲养1周㊂本研究经海南医学院中医学院动物伦理委员会批准(201803060027),实验过程给予人道关怀,符合3R原则㊂1.2㊀主要试剂与仪器地西泮片(批准文号:国药准字H11020898,北京益民药业有限公司,每片2.5mg);对氯苯丙氨酸(p-chlorophenylalanine,PCPA)㊁谷氨酸(glutamate, Glu)㊁γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)标准品(美国Sigma公司);质谱级甲醇(美国Fisher公司);兔抗大鼠谷氨酸脱羧酶(glutamate decarboxylase,GAD)多抗㊁谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)多抗[英国艾博抗(上海)贸易有限公司];HRP标记的山羊抗兔IgG(北京中衫金桥生物技术有限);Synapt G2超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱仪(美国Water公司);实时荧光定量PCR仪㊁Varioskan LUX酶标仪(美国Thermo Fisher公司);DYY-6C电泳仪(美国Bio-RAD公司)㊂1.3㊀实验方法1.3.1㊀建模及分组取35只大鼠,采用腹腔注射PCPA法[6]建立失眠大鼠模型,按400mg/kg大鼠体重称取PCPA,研磨成细粉,加入适量生理盐水,待研磨成泡沫状后,用生理盐水配制成100mg/mL的混悬液备用,临用前震荡调匀㊂造模开始后,于每日上午8ʒ00~10ʒ00腹腔注射PCPA,每天1次,连续2d㊂模型判定标准[7]:第一次注射PCPA后28~30h,大鼠出现性情烦躁㊁昼夜节律紊乱㊁兴奋性和攻击性增强,大便灰白等表示造模成功㊂造模成功大鼠30只随机分为失眠组㊁针刺组㊁西药组,每组各10只㊂剩余10只为对照组,腹腔注射等量生理盐水㊂1.3.2㊀干预方法造模成功后12h开始干预㊂所有大鼠,每日上午8:00~10:00,进行治疗㊂对照组和失眠组:仅抓取㊁固定,灌胃生理盐水㊂针刺组:抓取固定大鼠后,取穴位置参照‘实验针灸学“[8],将局部皮肤消毒,取针于双侧申脉㊁照海穴平刺,针有下沉感后捻转补泻,先补照海,后泻申脉,留针15min㊂灌胃生理盐水㊂西药组:仅抓取㊁固定,根据人与大鼠体表面积计算给药量,灌胃地西泮0.9mg/kg㊂各组大鼠均每日干预1次,连续7d㊂1.3.3㊀旷场实验检测大鼠自发活动末次干预后24h,旷场实验检测大鼠自发活动㊂采用100cmˑ100cmˑ50cm旷箱,底面分成25个边长4cm的正方形,旷场上方放置摄像头,将大鼠放在正中格,观察大鼠5min水平活动情况和垂直活动情况,水平活动得分以爬行总格数计;垂直活动得分以直立次数计㊂每只大鼠测试前使用乙醇喷洒旷箱消除上只气味㊂1.3.4㊀戊巴比妥钠协同睡眠实验通过预实验确定戊巴比妥钠引起100%大鼠睡眠的阈上剂量为45mg/kg,以翻正反射消失1min 为睡眠,30s内翻转3次为睡眠结束,记录大鼠睡眠潜伏期(从注射开始至大鼠入睡所需的时间)和睡眠持续时间㊂1.3.5㊀RT-qPCR法检测视交叉上核生物钟基因水平末次干预12h,麻醉大鼠,断头取脑,用生理盐水冲洗干净,分离下丘脑,取出视交叉上核,保存于液氮中㊂取液氮中保存视交叉上核50mg,冰上研磨,加入TRIzol裂解液,裂解细胞,提取总RNA,检测RNA的浓度和纯度,按照逆转录试剂盒说明书逆转录cDNA,进行实时荧光定量PCR㊂反应体系:模板cDNA2μL,2ˑqPCR Mix10μL,上下游引物各0.5μL,加双蒸水至总体积20μL㊂反应条件:95ħ预变性10min,95ħ变性5s,55ħ退火30s,72ħ延伸30s,45个循环,以β-actin为内参基因,采用2-әәCT法计算目的基因相对表达水平㊂引物序列: clock上游序列:5ᶄ-CTGACTATGCTAGCTAGCTAG-3ᶄ;下游序列:5ᶄ-AGTAGCTAGCTGATCGTAGCT-3ᶄ㊂per2上游序列:5ᶄ-CGTGATGCTGCTAGCTGAC-3ᶄ;下游序列:5ᶄ-ACATGTCCTAAGCTCAGCC-3ᶄ㊂β-actin 上游序列:5ᶄ-ATAGATAGTGCACTGTACA-3ᶄ;下游序列:5ᶄ-ACTAAGTGCATGCATGCAT-3ᶄ㊂1.3.6㊀高效液相检测下丘脑GABA㊁Glu含量处死大鼠后[9],分离下丘脑,用生理盐水冲洗干净,-80ħ保存㊂取0.1g下丘脑组织,加入甲醇进行匀浆,加入10μL内标静置30min,去除蛋白㊂将组织匀浆2000r/min离心10min,取上清,加入0.1mL甲醇,2000r/min离心10min,取上清㊂采用高效液相色谱法检测脑中GABA㊁Glu含量㊂色谱条件:色谱柱为Acquity UPLC HSS PFP柱(2.1mm ˑ100mm,1.8μm);柱温:30ħ;流动相:含0.1%甲酸的5mmol/L乙酸铵水溶液-甲醇溶液;流速为0.4mL/min;进样量2μL㊂质谱条件:电喷雾离子源,正离子模式,选择离子扫描(m/z)104.072 (GABA),203.035(Glu),离子源温度为120ħ,脱溶剂温度为500ħ,脱溶剂气体流速为800mL/min㊂1.3.7㊀Western blot法检测下丘脑GAD㊁GS蛋白表达水平一部分下丘脑保存于液氮中㊂取液氮保存下丘脑50mg,加入RIPA裂解液,冰上裂解,离心后去上清,用BCA法蛋白定量,100ħ水浴10min,蛋白变性,蛋白上样,进行SDS-PAGE电泳,电泳结束后将蛋白转至PVDF膜,5%脱脂奶粉室温封闭2h,加入1ʒ2000稀释的GAD㊁GS㊁β-actin一抗,4ħ孵育过夜,TBST洗膜,加入HRP标记的山羊抗兔二抗(1ʒ5000),室温孵育2h,TBST洗膜,加入ECL显影㊁定影,采用Image图像软件分析蛋白灰度值,结果以目的蛋白/β-actin表示㊂1.4㊀统计学方法采用SPSS24.0统计学软件分析数据,计量资料以平均数ʃ标准差( xʃs)表示,多样本计量资料比较采用单因素方差分析,两两样本比较采用LSD-t检验㊂P<0.05为差异有统计学意义㊂2㊀结果2.1㊀各组大鼠一般情况对照组大鼠精神活泼,活动规律;失眠组出现明显失眠特征,表现为白天夜晚活动频繁㊁睡眠减少㊁精神疲惫,对外界声光刺激异常敏感;针刺组和西药组一般行为状态较失眠组有所改善,精神较好㊁活动较规律㊂2.2㊀各组大鼠自发活动比较水平运动和垂直运动得分比较,差异有统计学意义(P<0.001,P<0.001)㊂与对照组比较,失眠组㊁针刺组和西药组水平运动和垂直运动得分降低(P< 0.001,P<0.01,P<0.01,P<0.001,P<0.001,P< 0.01);与模型组比较,针刺组和西药组水平运动和垂直运动得分升高(P<0.001,P<0.001,P<0.001,P< 0.001);针刺组和西药组水平运动和垂直运动得分比较,差异无统计学意义(P>0.05,P>0.05)㊂见表1㊂2.3㊀各组大鼠睡眠潜伏期和睡眠时间比较各组大鼠睡眠潜伏期和睡眠时间组间比较,差异有统计学意义(P<0.001,P<0.001)㊂与对照组比较,失眠组㊁针刺组和西药组大鼠睡眠潜伏期延长,睡眠时间缩短(P<0.001,P<0.001,P<0.01,P< 0.001,P<0.05,P<0.05);与失眠组比较,针刺组和西药组大鼠睡眠潜伏期缩短,睡眠时间延长(P< 0.001,P<0.001,P<0.01,P<0.001);针刺组和西药组大鼠睡眠潜伏期和睡眠时间比较,差异无统计学意义(P>0.05,P>0.05)㊂见表2㊂2.4㊀各组大鼠生物钟基因mRNA水平比较视交叉上核clock㊁per2mRNA相对表达量组间比较,差异有统计学意义(P<0.001,P<0.001)㊂与对照组比较,失眠组㊁针刺组和西药组视交叉上核clock㊁per2mRNA相对表达量降低(P<0.001,P< 0.001,P<0.001,P<0.001,P<0.01,P<0.05);与失眠组比较,针刺组和西药组视交叉上核clock㊁per2 mRNA相对表达量升高(P<0.001,P<0.001,P< 0.001,P<0.001);针刺组和西药组视交叉上核clock㊁per2mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05,P>0.05)㊂见表3㊂2.5㊀各组大鼠下丘脑Glu㊁GABA㊁Glu/GABA水平比较下丘脑Glu㊁GABA㊁Glu/GABA水平组间比较,差异有统计学意义(P<0.001,P<0.001,P<0.001)㊂与对照组比较,失眠组㊁针刺组和西药组下丘脑Glu 水平升高,GABA水平降低,Glu/GABA升高(P< 0.001,P<0.001,P<0.001,P<0.001,P<0.05,P< 0.05,P<0.001,P<0.05,P<0.05);与失眠组比较,针刺组和西药组下丘脑Glu水平降低,GABA水平升高,Glu/GABA降低(P<0.001,P<0.001,P< 0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.01);针刺组与西药组下丘脑Glu㊁GABA㊁Glu/GABA比较,差异无统计学意义(P>0.05,P>0.05)㊂见表4,图1㊂2.6㊀各组大鼠下丘脑GAD㊁GS蛋白水平比较下丘脑GAD㊁GS蛋白相对表达量组间比较,差异有统计学意义(P<0.001,P<0.001)㊂与对照组比较,失眠组㊁针刺组和西药组下丘脑GAD蛋白相对表达量降低,GS蛋白相对表达量升高(P<0.001, P<0.001,P<0.01,P<0.001,P<0.001,P<0.001);与失眠组比较,针刺组和西药组下丘脑GAD蛋白相对表达量升高㊁GS蛋白相对表达量降低(P<0.001, P<0.001,P<0.01,P<0.001);针刺组和西药组下丘脑GAD㊁GS蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05,P>0.05)㊂见表5,图2㊂表1㊀各组大鼠水平运动和垂直运动得分比较( xʃs,n=10,min)Table1㊀Comparison of the horizontal and verticalmovement scores of rats in each group组别Groups跨格数/5分钟Number of grids/5min次数/5分钟Times/5min对照组Control group76.10ʃ7.7512.10ʃ1.35失眠组Insomnia group43.20ʃ5.61∗∗∗ 6.30ʃ1.07∗∗∗针刺组Acupuncture group62.40ʃ6.78∗∗###9.70ʃ1.16∗∗∗###西药组Western medicine group63.10ʃ6.27∗∗###9.80ʃ1.24∗∗### F值F value41.55439.033P值P value<0.001<0.001注:与对照组比较,∗∗P<0.01,∗∗∗P<0.001;与失眠组比较,###P< 0.001㊂下表同㊂pared with the control group,∗∗P<0.01,∗∗∗P<0.001. Compared with insomnia group,###P<0.001.The same as below.表2㊀各组大鼠睡眠潜伏期和睡眠时间比较( xʃs,n=10,min)Table2㊀Comparison of sleep latency andsleep time of rats in each group组别Groups睡眠潜伏期Sleep latency睡眠时间Sleeping time对照组Control group 2.43ʃ0.31103.57ʃ11.45失眠组Insomnia group 3.85ʃ0.39∗∗∗73.46ʃ8.53∗∗∗针刺组Acupuncture group 3.13ʃ0.35∗∗∗###90.18ʃ9.67∗##西药组Western medicine group 3.02ʃ0.36∗∗###91.74ʃ10.12∗### F值F value27.14315.358P值P value<0.001<0.001表3㊀各组大鼠生物种基因mRNA水平比较( xʃs,n=10) Table3㊀Comparison of mRNA levels of biologicalspecies in each group of rats组别Groups clock per2对照组Control group0.35ʃ0.030.72ʃ0.08失眠组Insomnia group0.12ʃ0.02∗∗∗0.31ʃ0.05∗∗∗针刺组Acupuncture group0.26ʃ0.03∗∗∗###0.62ʃ0.06∗∗###西药组Western medicine group0.24ʃ0.02∗∗∗###0.64ʃ0.08∗### F值F value137.82168.765P值P value<0.001<0.0013㊀讨论睡眠是人体正常生理过程重要组成部分,具有解除疲劳和恢复体力作用,是维持身体健康和巩固记忆表4㊀各组大鼠下丘脑GABA㊁Glu㊁Glu /GABA水平比较(x ʃs ,n =10)Table 4㊀Comparison of GABA,Glu and Glu /GABA levels in hypothalamus of rats in various groups组别Groups 谷氨酸Glu(ng /g)γ-氨基丁酸GABA(ng /g)谷氨酸/γ-氨基丁酸Glu /GABA对照组Control group 0.112ʃ0.0204.121ʃ0.4200.030ʃ0.022失眠组Insomnia group0.240ʃ0.022∗∗∗3.142ʃ0.352∗∗∗0.080ʃ0.031∗∗针刺组Acupuncture group0.173ʃ0.021∗∗∗###3.610ʃ0.381∗#0.051ʃ0.020∗#西药组Western medicinegroup0.181ʃ0.030∗∗∗###3.623ʃ0.412∗#0.050ʃ0.013∗#F 值F value 82.51810.393 6.538P 值P value<0.001<0.001<0.001图2㊀下丘脑GAD㊁GS 蛋白表达Figure 2㊀GAD and GS protein expressionlevels inhypothalamus图1㊀下丘脑色谱图Figure 1㊀Chromatogram of hypothalamus表5㊀生物种基因蛋白水平比较(x ʃs ,n =10)Table 5㊀Comparison of mRNA levels of biological species组别Groups谷氨酸脱羧酶GAD 谷氨酰胺合成酶GS 对照组Control group0.81ʃ0.080.43ʃ0.06失眠组Insomnia group0.52ʃ0.06∗∗∗0.71ʃ0.07∗∗∗针刺组Acupuncture group0.65ʃ0.07∗∗∗###0.59ʃ0.06∗∗∗##西药组Western medicine group0.67ʃ0.08∗∗###0.61ʃ0.07∗∗∗##F 值F value 26.46331.608P 值P value<0.001<0.001的重要环节㊂中医认为,人体五脏阴平阳秘,气机升降条达,营卫运行通畅,方可心神得养㊁寐寤正常㊂失眠发病机制复杂,导致失眠的病因包括情志失调㊁劳倦㊁体虚等多种因素,但其基本病机与阴阳失衡及脏腑功能失调扰乱心神有关,治疗失眠当补虚泻实,以平衡阴阳㊁调理气血㊁清心安神为主要原则[10-11]㊂中医治疗失眠主要有中药方剂㊁针灸及推拿等方法,针灸疗法具有诸多优点,已成为临床治疗失眠的主要手段之一㊂目前认为针刺具有特异性和非特异性生物学效应,而针刺的特异性生物学效应尚不十分明确,安慰/假针刺作为针刺对照研究,须不具备针刺特异性疗效,其合理性尚存在争议,故本研究未设置安慰/假针刺组,而将未针刺的失眠大鼠作为针刺组的对照,通过比较针刺组与失眠组相关指标变化,探讨针刺对失眠大鼠的改善作用㊂睡眠-觉醒周期是人体最基本的生物节律,在一定年龄阶段,人类睡眠-觉醒周期相对恒定,失眠患者由于存在睡眠障碍,睡眠相对不足且觉醒时间相对延长,导致睡眠-觉醒周期发生紊乱㊂clock 基因是重要的生物钟基因,发生突变可导致神经高度兴奋引起睡眠减少㊂per 2是哺乳动物体内重要的节律因子,其表达与长周期有关,该基因突变可引起睡眠时间减少,觉醒时间延长㊂临床研究显示,针刺对机体昼夜节律具有一定调整作用,失眠患者通过针灸治疗,睡眠时间相对延长[12]㊂动物模型实验也证实针灸可恢复倒相活动大鼠的自发活动节律,使其失眠症状得到一定程度恢复[13]㊂中医认为,失眠与阴阳跷脉失调㊁卫气运行不畅有关, 申脉㊁照海均与跷脉相交,申脉通阳跷脉,照海通阴跷脉,阴阳跷脉分别于照海㊁申脉而出,终会于目,司目之开合㊂针刺二穴,阴阳相应,跷脉功能得以恢复,从而调节失眠[14]㊂本研究基于跷脉理论,通过针刺申脉㊁照海二穴位,调和阴阳,促进跷脉功能恢复,结果显示针刺组较失眠组大鼠自发活动改善明显,戊巴比妥钠协同镇静实验显示针刺治疗后睡眠潜伏期明显缩短,睡眠时间明显延长,同时生物钟基因clock和per2表达明显升高,与西药改善大鼠失眠效果相当,提示针刺对失眠大鼠具有一定改善作用,可调节其自发活动节律,促使紊乱的睡觉-觉醒周期得以恢复㊂Glu㊁GABA分别是是哺乳动物中枢神经系统最重要的兴奋性/抑制性神经递质,其代谢主要通过Glu/GABA-谷氨酰胺(glutamine,Gln)代谢环路进行循环[15]㊂Glu不能透过血脑屏障,通过三羧酸循环合成Gln,参与神经调节,Glu可通过Glu-Gln循环灭活,也可通过脱羧生成GABA,共同维持睡眠-觉醒周期㊂GAD是Glu/GABA-Gln代谢环路中将Glu 转化为GABA的主要代谢酶,GAD表达降低,引起Glu向GABA转化出现障碍;GS负责将Glu转化为Gln,维持不同神经元之间Glu的突触传递㊂Glu/ GABA代谢平衡是维持大脑正常生理活动的基础, Glu与GABA神经兴奋/抑制功能失调,Glu过度积累易引起兴奋性神经毒性,与神经疾病疾病密切相关[16]㊂研究显示,失眠患者体内Glu/GABA失衡,失眠动物模型体内Glu㊁GABA含量较正常组明显改变[17-18]㊂本研究失眠组大鼠Glu含量较正常组明显升高,GABA含量降低,Glu/GABA升高,提示失眠大鼠体内存在Glu/GABA失衡现象;经针刺治疗后,Glu/GABA有一定程度恢复,且GAD表达降低, GS表达升高,提示针刺对失眠大鼠的改善作用可能是通过调节Glu/GABA-Gln代谢环路中GAD和GS 蛋白表达,从而恢复Glu/GABA-Gln代谢平衡发挥作用㊂综上所述,针刺对失眠大鼠具有一定改善作用,其可能是通过调节GAD和GS蛋白表达,恢复Glu/GABA-Gln代谢平衡,从而改善睡眠状态,为临床治疗失眠提供一定理论基础㊂参考文献:[1]㊀Akram M,Daniyal M,Munir N,et al.Medicinal plantscombating against insomnia:a green anti-insomnia approach[J].J Nerv Ment Dis,2019,207(11):927-935.[2]㊀Javaheri S,Reid M,Drerup M,et al.Reducing coronary heartdisease risk through treatment of insomnia using web-basedcognitive behavioral therapy for insomnia:a methodologicalapproach[J].Behav Sleep Med,2020,18(3):334-344.[3]㊀Alshehri MM,Alenazi AM,Hoover JC,et al.Effect of cognitivebehavioral therapy for insomnia on insomnia symptoms forindividuals with type2diabetes:protocol for a pilot randomizedcontrolled trial[J].JMIR Res Protoc,2019,8(12):e14647.[4]㊀杨帆,刘国华,祖娜,等.浅析阳虚失眠的病因病机与治疗思路[J].中医杂志,2018,59(4):295-298. [5]㊀洪秋阳,杨惠民,王世广,等.贺氏三通法治疗亚急性失眠:随机对照研究[J].中国针灸,2018,38(12):1283-1287.[6]㊀Shen CY,Wan L,Zhu JJ,et al.Targets and underlyingmechanisms related to the sedative and hypnotic activities ofsaponin extracts from semen Ziziphus jujube[J].Food Funct,2020,11(5):3895-3903.[7]㊀韩金美,王树梅,萨础拉.苏格木勒-3汤水提物对小鼠镇静㊁催眠及失眠模型大鼠催眠的作用机制研究[J].中国药房,2018,29(23):3232-3235.[8]㊀李忠仁.实验针灸学[M].北京:中国中医药出版社,2008:33-35.[9]㊀郭晓,郭蓉娟,邢佳,等.宁心安神方调控失眠大鼠Glu/GABA-Gln代谢环路失衡的机制研究[J].北京中医药大学学报,2017,40(5):413-419.[10]㊀曾雪爱,周春权,王秀峰,等.左归丸㊁右归丸对失眠和多睡模型大鼠血浆中单胺类神经递质的影响[J].中医杂志,2018,59(7):612-616.[11]㊀邹婷婷,马界,陈星宇,等.针灸调理脾胃治疗失眠症探析[J].辽宁中医杂志,2018,45(8):1718-1719. [12]㊀齐苗.针灸治疗失眠症的临床效果研究[J].中国全科医学,2019,22(S1):185-187.[13]㊀魏歆然,魏高文,郑雪娜,等.不同经穴组合针刺对失眠大鼠下丘脑生物钟基因Clock和Bmal1表达的影响[J].针刺研究,2017,42(5):429-433.[14]㊀王卓慧,刘婧,郭保君,等.针刺补泻跷脉对失眠大鼠5-HT㊁NE及IL-1β含量的影响[J].中华中医药杂志,2017,32(3):1321-1323.[15]㊀Gao F,Yin X,Edden RAE,et al.Altered hippocampal GABAand glutamate levels and uncoupling from functional connectivityin multiple sclerosis[J].Hippocampus,2018,28(11):813-823.[16]㊀Hjelmervik H,Craven AR,Sinceviciute I,et al.Intra-regionalGlu-GABA vs inter-regional Glu-Glu imbalance:A1H-MRSstudy of the neurochemistry of auditory verbal hallucinations inschizophrenia[J].Schizophr Bull,2020,46(3):633-642.[17]㊀蔡艳,叶玉妹,张涛,等.桂枝甘草龙骨牡蛎汤加减治疗阴虚火旺型更年期失眠疗效及对患者睡眠质量㊁神经递质的影响[J].中国实验方剂学杂志,2019,25(9):38-42. [18]㊀Xu H,Wang Z,Zhu L,et al.Targeted neurotransmittersprofiling identifies metabolic signatures in rat brain by LC-MS/MS:application in insomnia,depression and alzheimer s disease[J].Molecules,2018,23(9):2375.收稿日期 2020-08-06。

针刺不同腧穴对失眠模型大鼠脑内神经递质5-HT、DA影响的实验研究

针刺不同腧穴对失眠模型大鼠脑内神经递质5-HT、DA影响的实验研究周艳丽【期刊名称】《中国中医基础医学杂志》【年(卷),期】2012(018)008【摘要】目的:比较针刺不同腧穴对失眠大鼠脑内5-HT、DA阳性表达的影响.方法:将70只大鼠随机分为7组,每组10只,分别为模型对照组、空白对照组、神门组、内关组、三阴交组、足三里组、申脉、照海组.大鼠腹腔注射PCPA造模成功后,于次日进行针刺治疗,各治疗组针刺相应腧穴.结果:针刺各组与模型组相比,大鼠脑内5-HT免疫阳性细胞数量明显增多,有显著性差异(P＜0.05)；与空白组相比,神门组、申脉、照海组、三阴交组大鼠脑内5-HT免疫阳性细胞数量明显增多,有显著性差异(P＜0.05)；模型对照组与空白对照组相比,大鼠脑内DA阳性细胞数明显增多,有显著性差异(P＜0.05).结论:提示针刺各组可能通过提高大鼠脑内5-HT含量促进睡眠,而非抑制DA合成.【总页数】2页(P887-888)【作者】周艳丽【作者单位】河南中医学院针灸推拿学院,郑州 450008【正文语种】中文【中图分类】R245.31【相关文献】1.针刺不同腧穴对失眠模型大鼠脑内细胞因子IL-1、TNF-α含量影响的实验研究[J], 周艳丽;叶险峰2.电刺激单、双侧迷走神经对肝郁证大鼠模型脑内NE、DA、5-HT和5-HIAA的影响 [J], 赵彬元;李玉霞;明海霞;陈彦文;梁永林;李杨;吴玉宏3.舒肝解郁胶囊对抑郁模型大鼠脑内5-HT、DA及其代谢产物水平的影响 [J], 傅锦华;刘勇4.针刺不同腧穴对失眠模型大鼠脑组织增食素mRNA表达的影响 [J], 周艳丽;高希言;任珊;王培育5.加味酸枣仁汤对慢性应激抑郁模型大鼠脑组织单胺类神经递质NE、DA及5-HT 影响的实验研究 [J], 封倩;冯来会;杨新年因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

针刺对失眠大鼠血清去甲肾上腺素、多巴胺及5-羟色胺含量的影响

针刺对失眠大鼠血清去甲肾上腺素、多巴胺及5-羟色胺含量的影响郭鑫;岳增辉;谢菊英;吴雪芬;郑雪娜【期刊名称】《中国中医药信息杂志》【年(卷),期】2018(025)004【摘要】目的观察循经选穴针刺对失眠大鼠外周血清单胺类神经递质5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)含量及腧穴配伍效应的影响,探讨针刺治疗失眠症的作用机制.方法将60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、百会+神门组、百会+三阴交组和百会+非经非穴组,每组12只,腹腔注射对氯苯丙氨酸混悬液制作大鼠失眠模型,各针刺组针刺相应腧穴,每次30 min,连续7 d.ELISA 检测大鼠血清NE、DA、5-HT的含量.结果与空白组比较,模型组大鼠血清5-HT、DA、NE 含量明显升高(P<0.01);与模型组比较,各针刺组大鼠血清DA、NE含量明显降低(P<0.05,P<0.01),百会+三阴交组大鼠血清5-HT含量明显降低(P<0.05);各针刺组间比较,百会+神门组总体疗效优于百会+三阴交组及百会+非经非穴组.结论针刺改善大鼠睡眠结构可能与血清单胺类神经递质含量有关,循经选穴针刺可能是影响腧穴配伍效应的因素之一.【总页数】5页(P46-50)【作者】郭鑫;岳增辉;谢菊英;吴雪芬;郑雪娜【作者单位】湖南中医药大学,湖南长沙 410208;湖南中医药大学,湖南长沙410208;湖南中医药大学,湖南长沙 410208;湖南中医药大学,湖南长沙 410208;湖南中医药大学,湖南长沙 410208【正文语种】中文【中图分类】R245【相关文献】1.桂附地黄丸对大鼠肺纤维化形成阶段肺与脑组织中去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺的影响 [J], 宋建平;谢忠礼;杨美凤;李伟;李瑞琴;张瑞2.不同产地三叶青提取物解热作用及对大白鼠下丘脑5-羟色胺、去甲肾上腺素、多巴胺含量的影响 [J], 杨雄志;王翰华3.三叶青提取物解热作用及对大白鼠下丘脑5-羟色胺、去甲肾上腺素、多巴胺含量的影响 [J], 杨雄志;王翰华4.丹莪妇康煎膏对愤怒模型大鼠下丘脑多巴胺、去甲肾上腺素及5-羟色胺含量的影响 [J], 余霞;王建5.不同镇痛方法对产痛及血浆5-羟色胺,多巴胺,去甲肾上腺素表达的影响 [J], 尚翠玲;潘莹;熊艳红;时捷;赵敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

甲基苯丙胺对大鼠海马DA、5-HT及TNF-α表达的影响

甲基苯丙胺对大鼠海马DA、5-HT及TNF-α表达的影响杨金凤; 蒙国懿; 隋念含; 边立功; 洪仕君; 李利华; 赵永娜【期刊名称】《《昆明医科大学学报》》【年(卷),期】2017(038)010【摘要】目的研究甲基苯丙胺(methamphetamine,MA)对大鼠海马多巴胺(Dopamine、DA)、5-羟色胺(5-Hydroxytryptophan,5-HT)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响.方法 (1)通过连续腹腔注射甲基苯丙胺15 mg/(kg·次),5 d,每天2次,建立甲基苯丙胺体内中毒模型.采用甲基苯丙胺伴药培养混合海马神经元/小胶质细胞24h,建立甲基苯丙胺体外中毒模型;(2)采用酶联免疫法检测大鼠海马及细胞培养上清液多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的变化.结果在第5天,甲基苯丙胺处理大鼠毛发树立,体重下降,快速的摇头、转圈或头的背腹运动,刻板行为评分5分.其海马DA(P<0.05)、5-HT(P<0.05)水平下降及TNF-α含量升高(P<0.05).甲基苯丙胺处理混合海马神经元/小胶质细胞24 h细胞培养上清液DA(P<0.05)、5-HT(P<0.05)水平下降及TNF-α含量升高(P<0.05).结论DA、5-HT及TNF-α的变化参与了甲基苯丙胺对大鼠海马的损伤.【总页数】5页(P6-10)【作者】杨金凤; 蒙国懿; 隋念含; 边立功; 洪仕君; 李利华; 赵永娜【作者单位】昆明医科大学药学院暨天然药物药理重点实验室云南昆明650500; 昆明医科大学生物工程中心云南昆明650500; 昆明医科大学法医学院云南昆明650500【正文语种】中文【中图分类】R971【相关文献】1.甲基苯丙胺对大鼠海马DA、5-HT及TNF-α表达的影响 [J], 杨金凤;蒙国懿;隋念含;边立功;洪仕君;李利华;赵永娜;;;;;;;2.甲基苯丙胺对大鼠海马TNF-α、IL-1β及CD22表达的影响 [J], 蒙国懿;隋念含;杨金凤;边立功;洪仕君;李利华;赵永娜;3.甲基苯丙胺对大鼠海马TNF-α、IL-1β及CD22表达的影响 [J], 蒙国懿;隋念含;杨金凤;边立功;洪仕君;李利华;赵永娜;4.甲基苯丙胺对大鼠海马5-HT、IL-6及NF-κB表达的影响 [J], 杨金凤;蒙国懿;黄兆奎;洪仕君;李利华;邢豫明;赵永娜5.甲基苯丙胺对大鼠海马5-HT、IL-6及NF-κB表达的影响 [J], 杨金凤;蒙国懿;黄兆奎;洪仕君;李利华;邢豫明;赵永娜;;;;;;;;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

对氯苯丙氨酸在动物失眠模型中的应用概述

对氯苯丙氨酸在动物失眠模型中的应用概述郭海波;王慧【摘要】对氯苯丙氨酸作为色氨酸羟化酶抑制剂,可以阻断和耗竭脑内5-羟色胺的合成,导致失眠.近年来,使用对氯苯丙氨酸建立失眠动物模型,因其简单实用、造模效果确切等因素在动物实验中越来越受到学者的认可并被广泛使用.但对氯苯丙氨酸在水中的溶解度较低、悬浮液不易注射,以及在不同动物中使用的剂量和方法不统一等因素阻碍了实验的进展.本文查阅了对氯苯丙氨酸相关研究和使用对氯苯丙氨酸造模的文献,概述了对氯苯丙氨酸在实验中的使用,试图找出使用对氯苯丙氨酸建立失眠动物模型的最佳方法.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2019(029)006【总页数】6页(P135-140)【关键词】对氯苯丙氨酸;实验;制备;用法;概述;动物模型【作者】郭海波;王慧【作者单位】贵州中医药大学,贵阳550002;贵州中医药大学,贵阳550002【正文语种】中文【中图分类】R-33中枢神经机制的研究离不开动物模型，睡眠-觉醒的研究更是如此。

失眠模型的建立和复制，能否成功尤为关键。

利用药物建立失眠动物模型，因效果确切、操作方便受到诸多学者的青睐，而对氯苯丙氨酸是建立失眠动物模型中最常用的药物之一。

对氯苯丙氨酸，又称芬克洛宁，英文名称：4-Chloro-DL-phenylalanine, Fenclonine，简称PCPA，CAS编号：7424-00-2，其它化学或英文名称还有：para-chlorophenylalanine， Fencloninum， DL-4-chlorophenylalanine， 2-amino-3-(4-chlorophenyl)propanoic acid， P-chlorophenylalanine 等。

它是5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)生物合成中的起始酶和限速酶—色氨酸羟化酶(tryptophan hydroxylase, TPH)的选择性和不可逆抑制剂[1]。

针刺对运动性失眠大鼠大脑内一氧化氮及谷氨酸含量的影响

针刺对运动性失眠大鼠大脑内一氧化氮及谷氨酸含量的影响李裕和;张林挺【期刊名称】《河南中医》【年(卷),期】2009(29)6【摘要】目的:通过对运动性失眠大鼠进行针刺治疗,探讨针刺疗法治疗运动性失眠的机理。

方法:SPF级别SD系列大鼠40只,随机分为正常组、对照组、西药组和针刺组,每组10只。

对照组予生理盐水灌胃,针刺组从头部百会穴处沿督脉方向进行皮下针刺,西药组予安定灌胃,并进行大鼠跑台力竭训练和Y型迷宫训练。

1周后,对照组、西药组、针刺组腹腔注射对氯苯丙氨酸,30h后将所有大鼠断头处死,取大脑,测试各组大鼠大脑内NO及GLU含量。

结果:与正常组对比,所有失眠大鼠大脑内的NO及GLU均升高(P<0.05);针刺能够降低失眠大鼠大脑内的NO及GLU水平(P<0.05)。

结论:针刺疗法可能是通过调节大脑内NO和GLU的含量来治疗运动性失眠,是治疗失眠的理想方法。

【总页数】3页(P554-556)【关键词】针刺疗法;失眠;一氧化氮;谷氨酸;大鼠【作者】李裕和;张林挺【作者单位】广州体育学院运动与健康系;广州体育学院【正文语种】中文【中图分类】R256.23;R338.63【相关文献】1.针刺不同腧穴对失眠模型大鼠脑内细胞因子IL-1、TNF-α含量影响的实验研究[J], 周艳丽;叶险峰2.针刺对运动性失眠大鼠大脑5-HT和NGF水平的影响 [J], 李裕和;张林挺3.针刺五脏俞调五脏神针法对失眠大鼠脑内抑制性递质GABA及GABAA的含量影响 [J], 邵丹;刘洋;胡金凤4.褪黑素对谷氨酸钠致痫大鼠脑内一氧化氮含量的影响 [J], 卢敏;王从荣;周厚纶5.针刺对运动性失眠大鼠大脑c-fos及c-jun含量的影响 [J], 张林挺;李裕和因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱法测定大鼠海马中5-羟色胺含量的方法学研

究高效液相色谱法测定大鼠海马中5-羟色胺含量的方法学研究一、研究背景5-羟色胺（5-HT）是一种主要的神经递质，在中枢神经系统中起着重要的作用。

海马是大脑中一种重要的神经元区域，与记忆、情绪调控等方面密切相关。

因此，研究海马中5-HT含量的变化，对于理解种种精神疾病的发生机制，以及神经递质与行为之间的关系，具有重要的临床应用价值。

目前，常用的测定5-HT含量的方法有多种，如高效液相色谱法、气相色谱法、电化学法、放射性免疫法等。

各种方法的优缺点不尽相同，选择最合适的方法有助于提高测定结果的准确率和可靠性。

二、研究目的本研究旨在利用高效液相色谱法，测定大鼠海马中5-HT含量，探究该方法在海马中5-HT含量测定方面的应用。

三、实验设计3.1 试验物品•高效液相色谱仪•液相色谱柱•标准品 5-羟色胺（5-HT）溶液•正常盐水、氯化己铵等常规试剂3.2 实验步骤3.2.1 试验前的准备•取大鼠海马组织，清洗后置于常温下。

•各种试剂及检测设备洗净并放入试验准备好的实验房间。

3.2.2 样品的处理根据体重，以每克0.2mL生理盐水为基础，将每只动物海马切取，立即离心2min，冰乙醇提取5-HT，离心后上清液即为样品。

样品折稀，随即进入色谱分析。

3.2.3 色谱分析根据离心液中5-HT的含量，制定梯度洗脱程序，根据梯度洗脱，逐一将色谱柱洗脱并在检测器上检测峰高。

同时，将标准品溶液按同样的程序进行实验，并制作5-HT标准曲线。

3.2.4 数据分析和统计将样品检测得到的峰高值与标准曲线进行比较，计算出样品中5-HT的含量，通过SPSS进行数据的统计分析。

四、试验结果与讨论实验结果表明，本研究所采用的高效液相色谱法，能够准确测定大鼠海马中5-HT含量。

实验数据经过多次测定和比对后，具有较高的可信度和稳定性，与其他现有方法相比，具有一定的优势。

但需要注意的是，该方法对于样品中5-HT的浓度和稳定性要求较高，有时需要深入实验室操作和调节仪器参数，才能得到满意的结果。

中缝背核注射对氯苯丙氨酸观察睡眠的变化及5-羟色胺神经元形态学的改变

中缝背核注射对氯苯丙氨酸观察睡眠的变化及5-羟色胺神经元形态学的改变章功良;赵乐章;高隽;张景行;刘巧琼;范一菲【期刊名称】《安徽医科大学学报》【年(卷),期】2002(037)003【摘要】目的观察大鼠中缝背核(DRN)微量注射对氯苯丙氨酸(PCPA)后睡眠的变化及5-羟色胺(5-HT)能神经元的形态学改变.方法采用核团微量注射、多导睡眠描记和免疫组织化学技术.结果DRN内微量注射PCPA(10μg)引起睡眠时间增加,尤以深慢波睡眠增加明显;免疫组织化学显示DRN内5-HT阳性神经元明显减少.结论大鼠DRN微量注射PCPA后睡眠增加且5-HT阳性神经元明显减少,提示5-HT 神经元参与睡眠调节.【总页数】3页(P175-177)【作者】章功良;赵乐章;高隽;张景行;刘巧琼;范一菲【作者单位】安徽医科大学生理教研室,合肥,230032;安徽医科大学生理教研室,合肥,230032;安徽医科大学生理教研室,合肥,230032;安徽医科大学生理教研室,合肥,230032;安徽医科大学生理教研室,合肥,230032;安徽医科大学生理教研室,合肥,230032【正文语种】中文【中图分类】R338.8;R338.63【相关文献】1.大鼠中缝背核5—HT能神经元树突的形态学观察：细胞内HRP注射之研究 [J], 孔天翰;范天生2.豚鼠中脑中缝背核和中缝正中核5-羟色胺能神经元向视交叉上核的直接投射 [J], 苏军达;刘世熠3.中缝背核5-羟色胺能神经元在睡眠调节中的作用研究 [J], 赵乐章;章功良;高隽;张景行;钟明奎;张瑾4.帕金森病大鼠中缝背核5-羟色胺能神经元放电频率和放电形式的变化 [J], 褚玉霞;刘健;冯洁;王勇;张巧俊;李强5.帕金森病大鼠中缝背核5-羟色胺能神经元电活动的变化 [J], 张巧俊;高蕊;刘健;刘娅萍;王爽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。