氨基柱简单说明注意
氨基柱使用及维护常识
氨基柱的使用:
需要注意的是,氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8要容易水解,所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。
反相条件下使用时,要特别注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。所以,在使用后以及准备长时间放置该柱时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。
95%水/5%乙腈
THF四氢呋喃
95%乙腈/5%水
并保持95%乙腈/5%水继续冲洗,以低流速0.2-0.5mL/min过夜冲洗。
6.3
方案3:柱子使用一定时间后,柱效下降,老化,也可清洗一下柱子恢复柱性能,清洗时依次用10倍柱体积的下列溶液冲洗:
95%水/5%乙腈
THF四氢呋喃
95%乙腈/5%水
氨基柱使用及维护常识
2007年7月2日 评论 发表评论 氨基柱是同时可以用于正相条件和反相条件的这一点很多用户都已经知道;但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,对这一点的忽略可能会带给使用者一些麻烦。
对于新购买到的柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速即可。如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。
3.2
以0.5ml/min的流速用30倍柱体积的pH11.0的氢氧化钠(LUNA)水溶液冲柱子(注意pH值切不可超过11.0),立即用水(
0.5ml/min的流速,30倍柱体积)冲洗,再换成流动相。
氨基柱的使用和保养
氨基柱的使用和保养氨基柱是同时可以用于正相和反相条件的一种色谱柱。
但正相溶剂和反相溶剂是不互溶的,这一点不能忽略。
对于新购柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。
如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。
过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速。
如果流动相中还有缓冲盐类,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,避免缓冲盐的析出。
柱效检测:我用于判断一个用户是否有经验的指标之一,是用户是否习惯配制一些柱效检测标准溶液。
说到柱效检测,我可以向大家提供一个方法,而且很通用,你也可以用同样的标准溶液和流动相来检测硅胶柱和氰基柱。
流动相:10%乙酸乙酯+90%正己烷流速1.0标准溶液:乙苯(或甲苯)+苯甲酸甲酯检测波长254nm这个方法特别适用于新购柱子(新购柱子往往保存在正相溶剂中)时即进行检测,如有问题,可及时与供应商沟通。
也适合柱子在准备放置相当长一段时间之前,进行充分清洗后进行检测作为记录留档。
在平常的使用过程中,如果分析物是固定重复的,我们当然可以从对分析物的分离分析情况来作出判断;但如果分析物和分析条件不同时,定期检测柱效可以避免柱效下降导致分离不佳再分析查找原因这样浪费人力物力的过程。
特别要注意的是,当氨基柱(或氰基柱)在反相条件中使用时,如用该条件检测,请注意流动相的换相过渡问题。
氨基柱的使用:氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8容易水解,所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。
反相条件使用时,要特别注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。
所以,在使用后以及准备长时间放置时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是必需的。
当使用氨基柱进行酸性物质如果汁中糖份的分析时,酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,使用一段时间后对于某类的分析物保留性质有所改变或表现为柱效下降。
丙酰氨基键合色谱柱
丙酰氨基键合色谱柱丙酰氨基键合色谱柱是以高纯度具有良好机械稳定性的硅胶为基质,采用高纯度的键合试剂,通过运用独特的匀浆装填技术装填得到的HILIC柱,可保证具有较高的柱效。
该色谱柱适合分离极性药物、多肽以及氨基酸等,pH稳定范围为1.5-8.0。
对于普通硅胶以及C18以及氨基分离不开的化合物,丙酰氨基键合色谱柱是一种特殊的选择,适合一些大极性化合物的分离。
使用丙酰氨基键合色谱柱时,需要注意以下几点:1.注意控制pH值范围:在反相条件下使用时,pH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高也越有发生水解的危险。
2.清洗和保存:在使用后以及准备长时间放置该柱时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。
3.酸性物质分析:酸性物质的存在可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。
此时,建议用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0% NH₄的50-50乙腈-水溶液冲洗该柱,再用不含碱的流动相洗去多余氨,之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨(如0.1%)。
在使用丙酰氨基键合色谱柱时,建议仔细阅读色谱柱的说明书,并根据实验需求和条件进行优化和调整。
如遇到复杂的分离问题,可以咨询专业的色谱柱供应商或色谱专家。
判断丙酰氨基键合色谱柱是否需要更换,可以从以下几个方面进行考虑:1.色谱柱的使用寿命:色谱柱的使用寿命取决于许多因素,如使用频率、流动相组成、样品类型等。
一般来说,色谱柱的使用寿命为数百到数千次分离。
当色谱柱的分离效果不再满足实验需求时,就需要考虑更换色谱柱。
2.色谱柱的损坏程度:色谱柱在使用过程中可能会出现损坏,如色谱峰拖尾、峰形异常、柱压升高、保留时间变化等。
如果色谱柱出现了明显的损坏,就需要及时更换。
3.色谱柱的分离效率:色谱柱的分离效率是衡量色谱柱性能的重要指标之一。
如果色谱柱的分离效率下降,无法再有效地分离样品,就需要考虑更换色谱柱。
kromasil-氨基柱说明书
Kromasil是瑞典AKZO NOBEL公司生产的高性能硅胶基质液相色谱柱填料品牌。
Kromasil是一种高纯度球形硅胶填料,金属杂质含量极低,降低了有些金属螯合物在硅胶基质上的络合效应。
Kromasil硅胶的表面由独特的硅羟基基团组成,硅烷的覆盖率高,在较高或较低的pH条件下不易水解和分解,可在pH=1.5~9.5条件下稳定使用。
瑞典原装进口Kromasil液相色谱柱是目前国际市场上广受欢迎的色谱柱品牌,具有重现行性好,适用性广泛,使用寿命更长的特点,更好的满足制药企业和药物研发对液相色谱柱的严格要求。
Kromasil是一种高纯度、大比表面积、高机械强度、较高的碳链覆盖率的新一代球形硅胶填料。
金属不纯物含量极低,减少了有些螯合物在硅胶基质柱上的络合作用。
Kromasil的表面有独特的硅羟基基团组成,硅烷的覆盖率高,在高或低的pH条件下不易水解和分解。
它允许流动相pH为1.5-9.5。
Kromasil含碳量高,表面极性小,分离效能高。
把几乎所有的羟基钝化,并大大降低了胺性或碱性物质在硅胶基质上的严重拖尾现象。
Kromasil能在6000psi(400bar)的高压下正常运行,具有稳定的柱效及长久的寿命。
Kromasil所有尺寸的柱子,特别是制备柱,都同样具有很高的柱效。
色谱柱品种包括:Kromasil C4液相色谱柱,Kromasil C8液相色谱柱,Kromasil C18液相色谱柱,Kromasil NH2液相色谱柱,Kromasil CN液相色谱柱,Kromasil 300Å大孔填料分析柱,Kromasil AmyCoat手性分析柱, Kromasil CelluCoat手性分析柱,Kromasil DMB 手性分析柱, Kromasil TBB 手性分析柱;Kromasil半制备柱, Kromasil制备柱。
氨基柱使用注意事项
氨基柱使用注意事项氨基柱是一种被广泛使用于分析化学实验中的试剂,它为实验室提供了大量的氨基和其他相关物质,是高纯度的碱性氨基溶解器,通过化学反应能够快速提取有效成分。
为了防止试剂中的有毒物质对人体造成危害,使用氨基柱时需要特别注意以下几点:一、注意操作安全使用氨基柱时,首先要注意安全操作。
氨基柱是一种强碱性物质,如果不慎接触到皮肤,会对皮肤造成严重的刺激,因此,在操作氨基柱时应穿戴安全手套,并且要注意眼睛和皮肤的安全。
二、合理使用,控制用量在实验室中,氨基柱的用途非常广泛,如果不合理使用可能会对实验结果产生负面影响,因此,在使用氨基柱时要控制用量,以免影响实验结果。
三、正确存放氨基柱是一种高碱性化学试剂,具有一定的毒性,如果放置不当可能会对人体造成危害。
因此,在存放氨基柱时,必须避免阳光直射,并将其存放在干燥、通风、阴凉处,避免高温和潮湿环境。
四、正确处理废弃物氨基柱是一种有毒物质,一旦实验完成,必须对剩余的氨基柱予以正确处理,以避免其对人体造成危害。
另外,废弃氨基柱应分类处理,绝不能随意排放,也不能将其倒入下水道中。
总之,使用氨基柱,操作者必须特别注意以上几点,以防止氨基柱中的毒性物质对人体造成危害,保证实验室安全。
首先,应做好安全防护措施,在操作氨基柱时必须穿戴安全手套,并且要避免将氨基柱直接接触到皮肤。
其次,要合理使用氨基柱,以免影响实验结果,并且要控制用量,以免浪费试剂。
此外,在存放氨基柱时一定要避免阳光直射,将其放置在干燥、通风、阴凉处,以避免潮湿和高温环境。
最后,应将废弃氨基柱分类处理,绝不能随意排放,也不能倒入下水道中。
总之,在使用氨基柱时一定要遵循上述规定,以保证实验室的安全,并且有效的提高实验效率。
只有遵循使用规范,才能让氨基柱工作在最佳状态,达到预期的效果。
UniSil-NH2系列HPLC氨基色谱柱使用说明书
UniSil®-NH2系列HPLC氨基色谱柱使用说明书尊敬的用户,非常感谢您购买和使用UniSil®系列HPLC氨基色谱柱。
UniSil®系列色谱柱由苏州纳微科技有限公司(Nano-Micro Tech)研发生产并采用全球领先的单分散超高纯硅胶微球填料。
UniSil®氨基柱可提供5μm(分析型)和10μm(制备型),并提供不同的孔径和尺寸选择。
UniSil®色谱柱制备工艺严格,从单分散微球填料、基团键合、装柱和填装性能测试等环节,均依照本公司严格质控标准,可靠性和重现性得到保障,您可安心使用。
为了更好地使用UniSil®系列NH2氨基柱,请您仔细阅读本产品说明书。
您选择纳微科技UniSil®-NH2氨基柱,可以获得:-全球唯一的单分散微球填料带来的品质保证,柱效更高,结果稳定性更好,柱寿命更长-多重保留机理,同时适用于正相、反相和离子交换分离-反相模式下分离亲水性和极性化合物,如碳水化合物和单糖、寡糖、糖醇等糖类化合物-正相模式下分离酸性物质、烃类化合物、维生素A和D1.使用前的检查和须知-打开包装检查色谱柱的填料名称、尺寸规格、连接形式及出厂检验报告(COA)- 出厂检验报告(COA):填料批号、柱系列号、柱性能、测试流动相等内容,阅后请妥善保管。
- 新色谱柱内有流动相(正己烷/乙酸乙酯=9:1),在存储或运输中可能有少量溶剂挥发,请您在使用前充分平衡色谱柱。
- 如需自行评价色谱柱的柱效或基本性能,可按检验报告中的操作条件来测试并保存。
- 在接入HPLC系统之前,确保系统洁净、无污染或无颗粒残留,建议用新配置的经过0.2μm过滤的流动相充分冲洗系统温馨提示:UniSil®系列氨基色谱柱产品提供柱效、对称因子及保留时间等数据作为色谱性能参考。
不同HPLC设备的柱效测试可能会有差异,柱效和柱压值如有较大异常,请联系苏州纳微科技有限公司售后服务部,以便按规范的流程处理或更换。
氨基柱的使用和保养
氨基柱的使用和保养氨基柱是同时可以用于正相和反相条件的一种色谱柱。
但正相溶剂和反相溶剂是不互溶的,这一点不能忽略。
对于新购柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。
如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。
过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速。
如果流动相中还有缓冲盐类,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,避免缓冲盐的析出。
柱效检测:我用于判断一个用户是否有经验的指标之一,是用户是否习惯配制一些柱效检测标准溶液。
说到柱效检测,我可以向大家提供一个方法,而且很通用,你也可以用同样的标准溶液和流动相来检测硅胶柱和氰基柱。
流动相:10%乙酸乙酯+90%正己烷流速1.0标准溶液:乙苯(或甲苯)+苯甲酸甲酯检测波长254nm这个方法特别适用于新购柱子(新购柱子往往保存在正相溶剂中)时即进行检测,如有问题,可及时与供应商沟通。
也适合柱子在准备放置相当长一段时间之前,进行充分清洗后进行检测作为记录留档。
在平常的使用过程中,如果分析物是固定重复的,我们当然可以从对分析物的分离分析情况来作出判断;但如果分析物和分析条件不同时,定期检测柱效可以避免柱效下降导致分离不佳再分析查找原因这样浪费人力物力的过程。
特别要注意的是,当氨基柱(或氰基柱)在反相条件中使用时,如用该条件检测,请注意流动相的换相过渡问题。
氨基柱的使用:氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8容易水解,所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。
反相条件使用时,要特别注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。
所以,在使用后以及准备长时间放置时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是必需的。
当使用氨基柱进行酸性物质如果汁中糖份的分析时,酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,使用一段时间后对于某类的分析物保留性质有所改变或表现为柱效下降。
氨基柱使用注意事项
氨基柱使用注意事项氨基柱是一种常用的色素柱,广泛应用于实验室中的色谱分析。
使用氨基柱时需要注意以下几个方面:1. 柱选取:根据实验需要选择合适的氨基柱。
氨基柱有不同的填充材料和尺寸,如C18、C8等。
不同的柱填充材料适用于不同的分析物质,因此在选择时要根据待测物质的特性来决定。
2. 储存:氨基柱在不使用时要妥善保存。
柱子需要放置在干燥、阴凉的地方,避免阳光直射和高温。
同时,要确保柱子封口良好,以防止填充材料的污染或水分的进入。
3. 进样方式:氨基柱的进样方式多样,可以通过液相自动进样器或手动进样器等方式进行。
不同的进样方式会对分析结果产生一定影响,因此要根据实验要求进行选择,并保证进样的准确性和重复性。
4. 流速选择:在进行氨基柱分析时,流速的选择非常重要。
过高的流速会导致分离不完全,而过低的流速则会延长分离时间。
一般来说,流速应根据样品特性和分离效果进行调整,以获得最佳结果。
5. 柱温控制:柱温也是氨基柱分析中需要注意的因素之一。
柱温过高会导致填充材料的退化或损坏,而柱温过低则会影响分析效果。
因此,在进行氨基柱分析时应根据实验要求控制好柱温。
6. 封堵保养:长时间使用的氨基柱可能会出现封堵的情况,这会影响其分离效果。
因此,在柱使用一段时间后,要及时进行封堵或保养。
可以使用一些特殊的溶剂和方法来清洗柱子,以保持其良好的状态。
7. 数据分析:在氨基柱分析后,要对得到的结果进行准确的数据分析。
可以使用一些专业的色谱分析软件来进行数据处理和解读。
同时,要对分析结果进行准确地记录和文档保存,以备后续的研究和参考。
综上所述,使用氨基柱需要注意柱的选择、储存、进样方式、流速选择、柱温控制、封堵保养以及数据分析等方面。
只有正确使用和保养氨基柱,才能保证色谱分析结果的准确性和可靠性。
这些注意事项对于开展实验室的氨基柱分析非常重要。
氨基柱使用及维护常识
氨基柱使用及维护常识
2007年7月2日 评论 发表评论 氨基柱是同时可以用于正相条件和反相条件的这一点很多用户都已经知道;但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,对这一点的忽略可能会带给使用者一些麻烦。
平时在正相条件下使用:
首先用50倍柱体积的异丙醇清洗,因异丙醇粘度较大可适当放低流速;之后,用50倍的甲醇清洗;之后,用异丙醇过渡回到平常使用的正相流动相,即可。
平时在反相条件下使用:
缓冲盐应及时冲洗,以及不能直接用纯甲醇冲洗缓冲盐等,属常识就不作特别交待了。
用50倍纯甲醇冲洗;之后,用异丙醇过渡后,用二氯甲烷冲洗色谱柱;之后,再用异丙醇过渡回来到甲醇条件下。
3.0-7.0
3.5
如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。
3.6
有一种情况是,当使用氨基柱进行酸
性物质的分析时,酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。建议:用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨),之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1%。
检测波长254nm
这个方法特别适用于新购柱子(新购柱子往往保存在正相溶剂中)时即进行检测,如有问题,可及时与供应商沟通。也适合在柱子在准备放置相当长一段时间之前进行充分清洗后进行检测作为记录留档。在平常的使用过程中,如果分析物是固定重复的,我们当然可以从对分析物的分离分析情况来作出判断;但如果分析物和分析条件不同时,定期检测柱效可以避免柱效下降导致分离不佳再分析查找原因这样浪费人力物力的过程。不过特别要注意的是,当氨基柱(或氰基柱)在反相条件中使用时,如用该条件检测,请注意流动相的换相过渡问题。
NH2柱使用说明书
⑤ 以下使用方法一般会导致色谱柱劣化,故应避免此类操作。 频繁变更流动相的组成和直接变更相溶性差的流动相 色谱柱入口压力的急剧变化 选用粘度高的流动相而导致色谱柱压升高 长时间通水 pH(为了使样品充分离子化,流动相 pH 最好与样品的 pKa 相差 2.0 以上。 ) 盐浓度 有机溶剂量 盐的种类
尾端接头
锥箍 螺头
図-1 过滤筛板
カラムの接続 配管
图 1 色谱柱的连接图 ※ 频繁更换色谱柱,可能会导致螺头的锥箍损坏而发生漏液现象。这种情况下若拧得过紧,螺母的头部 可能会断裂。 使用 PEEK 规格的配管时,请确保配管的前端已插入接头里侧。 6. 尾端接头 ① 内径为 3.0~8mm 的分析用色谱柱采用了过滤筛板埋入式尾端接头,无法只更换过滤筛板。
资生堂(中国)投资有限公司 先端科学事业推进部 地址:北京市建国门外大街甲 6 号 SK 大厦 2208 室 邮编:100022 电话:010-65633288 传真:010-85670598
③ 尿囊素的分析 尿囊素在 pH 2~8 范围内未离子化,但在流动相中采用磷酸缓冲液,按照 HILIC 模式能够实施分析。 流动相例:25 mmol/L KH2PO4 / CH3CN = 20 / 80,pH=2(H3PO4)
4. 色谱柱的保存 ① 请用附带的堵头密封,保存在温差小的阴冷处。 ② 若是一个月以内的保存,请使用与所选用的流动相组成相同的有机溶剂和水的混合溶液(不含酸、 无机盐)进行置换(禁止只用水来进行置换)。 ③ 若是一个月以上的长期保存,在进行了②的处理之后,用出厂时的溶剂置换并保存起来(参照色谱 柱报告)。 5. 色谱柱的连接 按照图 1 所示进行配管连接。 若配管不适合, 特别是直接使用其他类型色谱柱所用配管(SUS 规格)时, 锥箍前端的长度(图 1 中的 V)与尾端接头的长度(图 1 中的 L)经常会不同,因而引发故障。 若 L>V,会产生死体积,甚至出现色谱峰展宽或拖尾现象,并且分离变差。 若 L<V,由于锥箍无法密封,所以会导致漏液。
氨基柱使用方法
Luna NH2 PH:1.5-11氨基柱的使用注意事项:说明:.氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,正常情况新氨基柱保存在正相环境中,例如LUNA氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中。
而我们做糖分析是用反相流动相,所以要先用异丙醇过渡。
反相使用1先用异丙醇冲洗管路(此时不接色谱柱);然后接上色谱柱,以低流速(0.1ml/min)用30倍柱体积的异丙醇过渡(差不多一夜) 。
(必须用异丙醇过渡,否则会发生乳化现象,导致色谱柱使用效果变差。
)2再换成流动相,流动相平衡时间要长一些(为以后色谱柱的稳定打好基础)。
3 配制流动相时,应各组分分别量取,比例较小的组分要精密量取,需调pH值时要精密到0.1。
4反相条件下使用时,要特别注意控制pH值范围,pH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。
最理想的pH范围在pH3.0-7.0 5如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用80%水做流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。
色谱柱的冲洗:乙腈:水(95:5),过渡到乙腈:水(50:50),最后保存在乙腈:水(95:5)中。
色谱柱的保存反相使用时,如短期不用,可用95%甲醇或乙腈保存;长期不用时需将甲醇依次用异丙醇、氯仿置换,最后用正己烷保存。
再生:再生方案1:NH2柱用于反相条件时,NH2键会水解,尤其是在该柱子pH范围以外,在极端酸性和碱性条件下柱寿命会下降很快,如果在这个条件下使用需要清洗一下,需要用10倍柱体积溶液冲洗,如下:先用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨),再进行下面操作:95%水/5%乙腈THF四氢呋喃95%乙腈/5%水并保持95%乙腈/5%水继续冲洗,以低流速0.2-0.5mL/min过夜冲洗。
安捷伦氨基柱说明书
安捷伦Zorbax氨基柱数据表(Agilent Zorbax NH2 datasheet)一般描述(General Description)Zorbax NH2is a polar bonded-phase packing used for normal-phase,reversed-phase,or anion-exchange high performance liquid chromatography.This packing is produced by reacting 3-aminopropyltriethoxysilane with Zorbax SIL particles.If not strictly controlled,the use of a polyfunctional reagent can yield uneven surface coverage,difficult to reproduce from column to column.The reaction conditions used to produce Zorbax NH2were specifically developed to minimize reagent polymerization and to maximize surface coverage with a monolayer bonded phase.The uniform,spherical,Zorbax NH2 particles in 4.6 and 9.4 mm ID columns are about 5 μm in diameter,and have a controlled pore size to give optimum column efficiency.The 21.2 mm ID column contains particles of about 7 μm diameter.Columns are packed to a uniform bed density using a proprietary,high-pressure,slurry-loading technique.Zorbax NH2氨基柱是一种极性键合相填料,该填料用于正相、反相、阴离子交换高效液相色谱。
氨基柱的使用和保养
氨基柱的使用和保养氨基柱是同时可以用于正相条件和反相条件的这一点很多用户都已经知道;但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,对这一点的忽略可能会带给使用者一些麻烦。
对于新购买到的柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。
如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。
过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速即可。
如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。
柱效检测:我用于判断一个用户是否有经验的指标之一,是用户是否习惯配制一些柱效检测标准溶液。
说到柱效检测,我可以向大家提供一个方法,而且很通用,你也可以用同样的标准溶液和流动相来检测硅胶柱和氰基柱。
流动相:10%乙酸乙酯+90%正己烷流速1.0标准溶液:乙苯(如乙苯找不动就用甲苯代替呗)+苯甲酸甲酯检测波长254nm这个方法特别适用于新购柱子(新购柱子往往保存在正相溶剂中)时即进行检测,如有问题,可及时与供应商沟通。
也适合在柱子在准备放置相当长一段时间之前进行充分清洗后进行检测作为记录留档。
在平常的使用过程中,如果分析物是固定重复的,我们当然可以从对分析物的分离分析情况来作出判断;但如果分析物和分析条件不同时,定期检测柱效可以避免柱效下降导致分离不佳再分析查找原因这样浪费人力物力的过程。
不过特别要注意的是,当氨基柱(或氰基柱)在反相条件中使用时,如用该条件检测,请注意流动相的换相过渡问题。
氨基柱的使用方法1.氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,正常情况新氨基柱保存在正相环境中,例如LUNA氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中。
2. 正相使用2.1新柱子可直接用流动相。
推荐先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积,再根据流动相选用极性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速冲10倍柱体积,最后换成流动相。
氨基柱色谱柱
氨基柱色谱柱
氨基柱色谱柱(Amino column)是一种常用的柱色谱分离技术。
该柱是由一种含有氨基官能团的固定相填充在柱子中的。
氨基官能团可以与样品中的化合物发生氢键、极性作用力、疏水作用力等相互作用,从而实现对样品的分离。
氨基柱色谱柱常用于生物分析和药物分析等领域。
它可以有效地分离极性化合物、氨基化合物、酚类化合物、氨基酸等。
氨基柱色谱柱通常具有较好的稳定性和重现性,适用于高效液相色谱(HPLC)和超高效液相色谱(UHPLC)等色谱系统。
氨基柱色谱柱的选择可以根据待分离样品的性质和需求来进行。
常见的氨基柱色谱柱包括氨基硅胶柱、氨基硅胶凝胶柱和氨基硅胶包被柱等。
选择适合的氨基柱色谱柱,可以实现对复杂样品的高效分离和分析。
液相氨基柱填料-概述说明以及解释
液相氨基柱填料-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述:液相氨基柱填料是一种常用的色谱填料,广泛应用于分离和纯化化合物的过程中。
液相色谱技术是一种重要的分析方法,广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。
填料作为液相色谱的核心部分,对分离效果和分析速度有着至关重要的影响。
本文将从理论基础、填料的物理性质、填料的制备方法以及填料的应用领域等方面,对液相氨基柱填料进行探讨与分析。
通过对液相氨基柱填料的研究,我们可以更好地理解填料的性质和特点,进一步优化液相色谱的分离条件,提高分离效果和分析速度。
在理论基础方面,我们将介绍液相色谱的原理和分离机制,深入了解液相色谱分析中填料的作用和重要性。
在填料的物理性质方面,我们将重点讨论液相氨基柱填料的化学组成、表面特性以及吸附和分离机理等方面的内容。
此外,文章还将详细介绍液相氨基柱填料的制备方法、性能测试以及性能优化的技术。
液相氨基柱填料在不同领域有着广泛的应用。
我们将重点介绍其在生物医药、环境监测和食品安全等领域的应用案例。
通过这些实际应用案例,我们可以了解到液相氨基柱填料在解决实际问题中的价值和作用,以及其在不同领域中的应用前景。
通过本文的研究,我们对液相氨基柱填料有了更深入的了解,对填料的制备方法和应用领域也有了更全面的认识。
希望本文能够为液相色谱研究提供一定的参考和指导,进一步推动和促进该领域的发展。
1.2文章结构1.2 文章结构本文将围绕液相氨基柱填料展开深入的研究和探讨。
下面将对文章的各个部分进行简要介绍:引言部分将首先对液相氨基柱填料的概念和背景进行概述,引出液相氨基柱填料的重要性和应用前景。
正文部分将详细介绍液相氨基柱填料相关的理论基础,包括填料的结构、化学性质以及其在液相色谱等领域中的应用原理。
同时,将探讨液相氨基柱填料的物理性质,如比表面积、孔隙度等指标的测定方法和对填料性能的影响。
此外,还将介绍液相氨基柱填料的制备方法,包括传统的合成方法和新兴的改性方法。
氨基色谱柱怎么活化
氨基色谱柱怎么活化
氨基色谱柱是一种常用的分离柱,通常用于对带有酸性官能团的化合物进行分析和纯化。
活化氨基色谱柱可以提高其对目标化合物的吸附能力和分离效果。
下面是一种常见的氨基色谱柱活化方法:
1. 硅胶活化法:
a. 将氨基色谱柱置于干燥的玻璃管中。
b. 用干燥剂如硅胶填充玻璃管,使柱内外保持干燥。
c. 在玻璃管中加入少量的二氯甲烷或二氯乙烷,并封闭玻璃管。
d. 将玻璃管放入恒温槽中,在室温下静置12-24小时。
e. 取出玻璃管,将其中的溶剂蒸发至干燥,这样就完成了氨基色谱柱的活化。
2. 1,2-二氯乙烷活化法:
a. 将氨基色谱柱置于干燥的容器中。
b. 在容器中加入适量的1,2-二氯乙烷,使得柱子完全浸泡在溶剂中。
c. 盖上容器盖,让柱子在室温下静置12-24小时。
d. 取出柱子,用氮气吹干表面的残余溶剂。
需要注意的是,活化后的氨基色谱柱应尽快进行使用,避免柱子再次暴露在湿气中。
此外,不同型号和厂家的氨基
色谱柱可能有不同的活化方法,请参考柱子的技术说明书或咨询相关厂家获取更准确的活化方法。
液相氨基柱方法范文
液相氨基柱方法范文液相氨基柱是一种常见的色谱柱,常用于氨基酸、肽类和其他带有氨基功能团的化合物的分离、富集和分析。
在液相氨基柱方法中,样品溶液经过柱子时,氨基柱上的固相填料表面上的氨基功能团会与溶液中的化合物发生相互作用,从而实现它们之间的分离。
液相氨基柱方法在生物、医药、环境和食品等领域具有广泛的应用。
液相氨基柱最常用的填料是含有氨基功能团的硅胶。
硅胶是一种二氧化硅固体,具有很强的亲水性。
为了增加柱子的稳定性,硅胶表面经常进行化学修饰,以引入更多的氨基功能团。
这些功能团可以是弱碱性的,例如二乙烯三胺、二乙烯四胺等;也可以是强碱性的,例如四乙烯戊胺等。
在柱子表面的氨基功能团上,可以发生一系列的化学反应,例如氧化、烷基化、酰化、硝化等。
这些表面化学修饰可以使柱子具有更强的选择性和更好的分离效果。
在液相氨基柱方法中,样品溶液通过柱子时,它们会与氨基功能团发生吸附或交换反应。
不同化合物与氨基功能团之间的相互作用会导致它们在柱子上停留的时间不同,从而实现它们的分离。
在实际应用中,可以通过控制溶液的流速、温度、溶剂成分和溶剂pH值等条件来调节样品分离的效果。
此外,也可以通过改变氨基柱的填料大小和填充度来影响分离效果。
液相氨基柱方法在氨基酸、肽类和其他带有氨基功能团的化合物的分离和富集方面具有独特的优势。
首先,液相氨基柱可以实现对复杂样品的高效分离。
例如,对于含有多种氨基酸的混合物,氨基柱可以将它们分离成单个成分,从而方便后续的分析。
其次,液相氨基柱可以实现对微量目标化合物的富集。
由于氨基功能团具有较强的吸附性能,可以利用氨基柱对样品中微量的目标化合物进行有效的富集,从而提高检测的灵敏度。
此外,液相氨基柱还可以与其他检测技术相结合,如紫外-可见吸收光谱法、荧光光谱法、质谱法等,实现对目标化合物的快速定性和定量分析。
尽管液相氨基柱方法具有很多优势,但在实际应用中仍然存在一些挑战。
首先,填料表面的氨基功能团对溶剂的pH值敏感,因此样品的pH值需要控制在一定范围内,否则可能会导致分离效果的变差。
氨基柱使用说明
氨基柱使用说明氨基柱是同时可以用于正相条件和反相条件的一点很多用户都已经知道;但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,对这一点的忽略可能会带给使用者一些麻烦。
对于新购买到的柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。
如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。
过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速即可。
如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。
柱效检测:我用于判断一用户是否有经验的指标之一,是用户是否习惯配制一些柱效检测标准溶液。
说到柱效检测,我可以向大家提供一个方法,而且很通用,你也可以用同样的标准溶液和流动相来检测硅胶柱和氰基柱。
流动相:10%乙酸乙酯+90%正己烷流速1.0标准溶液:乙苯(如乙苯找不动就用甲苯代替呗)+苯甲酸甲酯检测波长254nm这个方法特别适用于新购柱子(新购柱子往往保存在正相溶剂中)时即进行检测,如有问题,可及时与供应商沟通。
也适合在柱子在准备放置相当长一段时间之前进行充分清洗后进行检测作为记录留档。
在平常的使用过程中,如果分析物是固定重复的,我们当然可以从对分析物的分离分析情况来作出判断;但如果分析物和分析条件不同时,定期检测柱效可以避免柱效下降导致分离不佳再分析查找原因这样浪费人力物力的过程。
不过特别要注意的是,当氨基柱(或氰基柱)在反相条件中使用时,如用该条件检测,请注意流动相的换相过渡问题。
氨基柱的使用:需要注意的是,氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8要容易水解,所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。
反相条件下使用时,要特别注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。
所以,在使用后以及准备长时间放置该柱时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。
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Luna NH2 PH:1.5-11
氨基柱的使用注意事项:
说明:.氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,正常情况新氨基柱保存在正相环境中,例如LUNA氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中。
而我们做糖分析是用反相流动相,所以要先用异丙醇过渡。
反相使用
1先用异丙醇冲洗管路(此时不接色谱柱);然后接上色谱柱,以低流速(0.1ml/min)用30倍柱体积的异丙醇过渡(差不多一夜) 。
(必须用异丙醇过渡,否则会发生乳化现象,导致色谱柱使用效果变差。
)
2再换成流动相,流动相平衡时间要长一些(为以后色谱柱的稳定打好基础)。
3 配制流动相时,应各组分分别量取,比例较小的组分要精密量取,需调pH值时要精密到0.1。
4反相条件下使用时,要特别注意控制pH值范围,pH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。
最理想的pH范围在pH3.0-7.0
5如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用80%水做流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。
色谱柱的冲洗:
乙腈:水(95:5),过渡到乙腈:水(50:50),最后保存在乙腈:水(95:5)中。
色谱柱的保存
反相使用时,如短期不用,可用95%甲醇或乙腈保存;长期不用时需将甲醇依次用异丙醇、氯仿置换,最后用正己烷保存。
再生:
再生方案1:NH2柱用于反相条件时,NH2键会水解,尤其是在该柱子pH范围以外,在极端酸性和碱性条件下柱寿命会下降很快,如果在这个条件下使用需要清洗一下,需要用10倍柱体积溶液冲洗,如下:
先用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨),
再进行下面操作:
95%水/5%乙腈
THF四氢呋喃
95%乙腈/5%水
并保持95%乙腈/5%水继续冲洗,以低流速0.2-0.5mL/min过夜冲洗。
(此方法很多人尝试)
再生方案2:柱子使用一定时间后,柱效下降,老化,也可清洗一下柱子恢复柱
性能,清洗时依次用10倍柱体积的下列溶液冲洗:
95%水/5%乙腈
THF四氢呋喃
95%乙腈/5%水
再走流动相即可
氨基柱的活化
方案1:依次用甲醇、异丙醇、氯仿、正己烷、氯仿、异丙醇、甲醇冲柱子(各以
0.5ml/min的流速,20倍柱体积),再换流动相。
这些清洗方法,主要是针对当样品中有杂质逐步吸附累积到填料上时的处理方法,色谱柱表现行为为诸如柱压增高柱效降低等。
6.2
方案2:NH2柱用于反相条件时,NH2键会水解,尤其是在该柱子pH范围以外,在极端酸性和碱性条件下柱寿命会下降很快,如果在这个条件下使用需要清洗一下,需要用10倍柱体积溶液冲洗,如下:95%水/5%乙腈
THF四氢呋喃
95%乙腈/5%水
并保持95%乙腈/5%水继续冲洗,以低流速0.2-0.5mL/min过夜冲洗。
6.3
方案3:柱子使用一定时间后,柱效下降,老化,也可清洗一下柱子恢复柱性能,清洗时依次用10倍柱体积的下列溶液冲洗:
95%水/5%乙腈
THF四氢呋喃
95%乙腈/5%水
再走流动相即可。