彩色马蹄莲组培试验研究

彩色马蹄莲组培试验研究
摘要彩色马蹄莲组培试验结果表明，可以利用组织培养这一快速繁殖技术快速繁殖彩色马蹄莲，该技术在缩短植物繁殖时间、降低经济成本的同时，还能创造出较好的经济效益。

关键词彩色马蹄莲；组织培养；快速繁殖；外植体
为了缩短彩色马蹄莲快速繁殖新的植体生育年限，降低经济成本，进行了彩色马蹄莲组培试验研究，现将研究结果总结如下。

1 材料与方法
1.1 试验材料
试验对象为彩色马蹄莲的外植体茎芽。

试验药剂有：50%多菌灵500倍液、肥皂水、75%酒精、0.1%升汞、50%多菌灵粉剂500倍液等；培养基类型有初代培养基（MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L）、继代培养基（MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L）。

1.2 试验方法
1.2.1 试验材料处理。

选取芽长0.5～1.0 cm的块茎，将块茎洗去泥土，并剥去最外层的褐色表皮，用利刀围绕芽眼切下芽块，直径0.5 cm左右，放入50%多菌灵500倍液中浸泡4 h。

用肥皂水浸泡15 min，然后用清水冲洗30 min。

直接转入超净工作台上进行消毒，先用75%酒精消毒30 s，再用0.1%升汞泡10～15 min，用无菌水冲洗3～5次后，放在吸水纸上吸干后，即可接种。

注意：以上消毒过程中要不断搅动或晃动消毒液中的外植体以确保消毒彻底[1-3]。

1.2.2 接种。

将处理好的外植体接种到起始培养基上，每瓶接1～2个茎芽。

有些丛生芽不必分开，一起接入培养基即可。

注意：接种速度要快，以降低污染[4-6]。

1.3 试验实施
2011年11月11日17：00—18：30对外植体进行处理后接种到初代培养基中（1 L培养基可倒20瓶），瓶标为A，按照每瓶1芽共接种20瓶。

3 d后观察。

11月12日分别配制20瓶初代培养基和继代培养基，后者瓶标为B。

13日9：00—11：10按照每瓶1芽在A、B培养基上分别接种16、14瓶，共计30瓶。

注意观察记录生长情况。

2 结果与分析
2011年11月11日接种的A培养基在3 d后观察，大部分出现植物褐化现象，分析原因，可能是升汞处理的时间过长。

13日接种的30瓶培养基，17日9：00观察，A培养基上的马蹄莲外植体有4瓶中的部分大芽开始萌动。

20日10：30观察有部分马蹄莲外植体下部被培养基潮水浸白，没有污染症状。

截至22日，30瓶中有24瓶全部萌动，但仍有6瓶无任何反应，无污染。

24日8：00—9：00，继代培养基（MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L）上的长势较强、典型马蹄莲外植体见图1。

在长势强的培养基中，外植体的高可达1 cm、宽0.5 cm，弱的有刚萌芽，此时观察有活动芽体（带萌动及长势强的）的培养基共29瓶。

无活动并带有干枯失水症状的有1瓶（无污染）。

26日20：10观察，马蹄莲大多数芽体已有型，又有几瓶带失水现象。

29日观察马蹄莲芽体长势挺好，失水的几瓶基本已恢复。

31日10：30观察马蹄莲，长势很好。

2012年1月1日19：30把马蹄莲移至恒温箱内并各自编上号，分4层摆放，调制温度为25 ℃。

1月3日12：30观察马蹄莲，发现恒温箱内中间2层长势明显好于上下2层，中间2层大的芽体高1.5 cm 左右、宽1.0 cm，有1瓶失水的芽体有萌动现象（图2）。

30瓶培养基中马蹄莲外植体生长情况见表1。

由表1可知，通过对比试验，马蹄莲外植体在继代培养基上生长效果比在初代培养基的效果好。

因此，可以开展彩色马蹄莲的组织培养繁殖过程，不仅可以缩短植物的繁殖时间，降低经济成本，还可以产生较好的经济效益。

3 结论与讨论
彩色马蹄莲组培试验研究结果表明，可以通过组织培养的方式快速繁殖彩色马蹄莲，且马蹄莲外植体在继代培
养基上生长效果比在初代培养基的效果好，利用该方法，不仅可以缩短植物的繁殖时间，降低经济成本，还可以产生较好的经济效益。

4 参考文献
[1] 彭星元.植物组织培养技术[M].北京：高等教育出版社，2006.
[2] 龚一富.植物组织培养实验指导[M].北京：科学出版社，2011.
[3] 黄普乐，孙崇波，谢鸣.彩色马蹄莲组培快繁体系优化[J].浙江农业学报，2009（3）：234-237.
[4] 何俊蓉，吴洁，袁宁，等.彩色马蹄莲组培快繁的研究[J].西南农业学报，2008（3）：775-778.
[5] 赵培飞，吴丽芳.云南彩色马蹄莲的生产与发展前景[J].湖南农业科学，2002（3）：69-70.
[6] 钱丽华，孙坚红.彩色马蹄莲的组培快繁技术初探[J].杭州农业科技，2004（1）：7-8.。