凯氏定氮蒸馏装置-高效液相色谱法同时测定蚝油等食品中丙酸钠(钙)和双乙酸钠
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270 2017, Vol.38, No.04
食品科学
※安全检测
凯氏定氮蒸馏装置-高效液相色谱法同时测定 蚝油等食品中丙酸钠（钙）和双乙酸钠
赖国银，林建忠，曾 琪，林立毅，丁亦男，张志刚，徐敦明
（厦门出入境检验检疫局技术中心，福建 厦门 361026）
摘 要：利用凯氏定氮蒸馏装置，建立同时检测蚝油、酱油、鱼露中丙酸钠（钙）和双乙酸钠的高效液相色谱法。 蚝油等食品中的丙酸钠（钙）和双乙酸钠经过磷酸酸化后转化为相应的酸，通过凯氏定氮蒸馏装置，水蒸气蒸馏法 提取，加磷酸调节蒸馏液pH值至3.0，采用高效液相色谱法进行测定。丙酸钠（钙）和双乙酸钠在0.005～1.000 mg/mL 内线性良好，相关系数为0.999 9。丙酸钠（钙）（以丙酸计）、双乙酸钠的回收率分别为88.5%～108.3%和 86.5%～108.7%，相对标准偏差为2.13%～6.42%和2.02%～6.37%（n=6）。方法简便快捷、稳定可靠，适用于蚝 油、酱油和鱼露中丙酸钠（钙）和双乙酸钠含量的测定。 关键词：凯氏定氮蒸馏装置；丙酸钠（钙）；双乙酸钠；蚝油；高效液相色谱
Abstract: Using a Kjeldahl distillation apparatus, a methodFra Baidu bibliotekfor the simultaneous determination of sodium (or calcium)
propionate and sodium diacetate in oyster sauce, soy sauce and fish sauce by high performance liquid chromatography (HPLC)
diacetate in oyster sauce and other similar seasonings by high performance liquid chromatography using Kjeldahl distillation
apparatus[J]. Food Science, 2017, 38(4): 270-274. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-
蚝油[5]、酱油[6]、鱼露[7]是人们餐桌上倍受欢迎的 调味品。丙酸钠（钙）、双乙酸钠作为化学防腐剂，被 广泛应用于糕点、酱油等食品中。GB 2760—2014中规 定，丙酸及其钠盐、钙盐在酱油中的最大允许使用量为 2.5 g/kg，而蚝油、鱼露中不得使用；双乙酸钠在蚝油、 酱油和鱼露中的最大使用量均为2.5 g/kg[4]。食品中丙酸的 检测方法有气相色谱法[2,8-15]和高效液相色谱法等[11,16-18]。 双乙酸钠的检测方法有高效液相色谱法[19-21]和离子色谱 法[22]等。林清河[23]、吴忠兴[24]和项林敏[25]等报道了高效 液相色谱同时测定糕点中丙酸钠（钙）和双乙酸钠的方 法。向文娟等[26]报道了全自动固相萃取-高效液相色谱法 测定食品中的丙酸钠（钙）和双乙酸钠。朱洪亮等[27]报 道了高效液相色谱同时测定食品中丙酸钠（钙）和双乙 酸钠的方法。李敏等[28]报道了高效液相色谱法同时测定 苍山蒜米中双乙酸钠和丙酸钙含量。2014年9月29日，我 国收到了韩国通报的厦门某企业蚝油检测出丙酸的不合 格食品信息，GB 2760—2014[4]也规定蚝油中不得使用丙 酸，但有关蚝油等食品中丙酸钠（钙）和双乙酸钠含量 的检测方法尚未见报道。
作者简介：赖国银（1984—），男，工程师，博士，研究方向为食品安全检测。E-mail：gylai_ustc@163.com
※安全检测
食品科学
2017, Vol.38, No.04 271
和过量添加防腐剂会使消费者有过敏反应和慢性中毒风 险。因此，GB 2760—2014《食品添加剂使用标准》规定 了所有防腐剂的最大允许添加量[4]。
色谱柱：Sapphire C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）， 柱温：30 ℃；流动相：1.5 g/L磷酸二氢铵溶液（溶剂为 甲醇-水（10∶90，V/V）），用1 mol/L磷酸溶液调节pH值 至2.7～3.5；流速：1 mL/min；进样量：10 μL。
Recoveries of sodium (or calcium) propionate and sodium diacetate were 88.5%–108.3%% and 86.5%–108.7% with relative
standard deviations (RSDs) of 2.13%–6.42% and 2.02%–6.37% (n = 6), respectively. This method is simple, rapid, easy to
Simultaneous Determination of Sodium (or Calcium) Propionate and Sodium Diacetate in Oyster Sauce and Other Similar Seasonings by High Performance Liquid Chromatography Using Kjeldahl Distillation Apparatus
LAI Guoyin, LIN Jianzhong, ZENG Qi, LIN Liyi, DING Yinan, ZHANG Zhigang, XU Dunming (Technical Center of Xiamen Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Xiamen 361026, China)
Key words: Kjeldahl distillation apparatus; sodium (or calcium) propionate; sodium diacetate; oyster sauce;
high performance liquid chromatography (HPLC)
GB/T 5009.120—2003《食品中丙酸钠、丙酸钙的 测定》[8]、GB/T 23382—2009《食品中丙酸钠、丙酸钙 的测定 高效液相色谱法》[16]及GB/T 23383—2009《食 品中双乙酸钠的测定 高效液相色谱法》[19]中有关丙酸钠 （钙）和双乙酸钠含量检测的蒸馏法均是称取25 g样品于 500 mL蒸馏瓶中，蒸馏至250 mL容量瓶中，最终定容体 积为250 mL。该检测方法需样品量大，定容体积较大， 且较为费时。本实验参考国标[16,19]规定方法基础上改进， 以蚝油、酱油和鱼露为基质，采用凯氏定氮蒸馏装置， 利用高效液相色谱技术，建立了可同时检测蚝油、酱油 和鱼露中丙酸钠（钙）和双乙酸钠的方法，需用样品量 仅为5 g，定容体积为25 mL。该方法在丙酸钠（钙）和 双乙酸钠含量检测中运用凯氏定氮蒸馏装置，快速、简 便、准确、实用。
The pH of the distillates was then adjusted to around 3.0 by adding phosphoric acid. Finally, the analysis was completed with
HPLC. A good linear relationship was gained in the range from 0.005 to 1.000 mg/mL with a correlation coefficient of 0.999 9.
科学, 2017, 38(4): 270-274. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201704044. http://www.spkx.net.cn
LAI Guoyin, LIN Jianzhong, ZENG Qi, et al. Simultaneous determination of sodium (or calcium) propionate and sodium
201704044. http://www.spkx.net.cn
食品添加剂的使用在加工食品和方便食品中的应用 已经越来越广泛。加工食品，如蚝油、酱油、鱼露在制
作过程中添加防腐剂以抑制微生物生成，维持营养价值 和其他特性，进而延长食品保质期[1-3]。然而，非法添加
收稿日期：2016-06-05
基金项目：福建省自然科学基金项目（2016J05045）；国家质量监督检验检疫总局科技计划项目（2016IK186）
operate, stable, reliable, and suitable for the determination of sodium (or calcium) propionate and sodium diacetate in oyster
sauce, soy sauce, fish sauce and other liquid seasonings.
1 材料与方法
1.1 材料与试剂 蚝油 厦门洋江食品有限公司；酱油 佛山市海
天（高明）调味食品有限公司；鱼露 厦门洋江食品有 限公司。
甲醇为色谱纯；磷酸氢二铵（纯度99.0%） 德国
Sigma公司；丙酸钠（纯度98.0%）、双乙酸钠（纯度 98.0%） 日本TCI公司；其余试剂均为分析纯；实验室 用水为超纯水。 1.2 仪器与设备
DOI:10.7506/spkx1002-6630-201704044
中图分类号：TS207.3
文献标志码：A
文章编号：1002-6630（2017）04-0270-05
引文格式：
赖国银, 林建忠, 曾琪, 等. 凯氏定氮蒸馏装置-高效液相色谱法同时测定蚝油等食品中丙酸钠(钙)和双乙酸钠[J]. 食品
准确称取试样5.00 g（精确到0.01 g）于凯氏定氮蒸 馏装置中，加入1 mL 1 mol/L的磷酸溶液，进行水蒸气蒸 馏，蒸馏液经过冷凝后，用25 mL比色管作为接收装置， 待蒸馏出约24 mL时停止接收，用1 mol/L的磷酸溶液调 pH值至3左右，加水定容至25 mL，摇匀。经0.22 μm微孔 滤膜过滤后，供高效液相色谱测定。 1.3.3 高效液相色谱条件
1260液相色谱仪（配有二极管阵列检测器） 美国 Agilent公司；电子天平（感量0.1 mg和0.01 g） 德国 赛多利斯公司；凯氏定氮蒸馏装置。 1.3 方法 1.3.1 标准混合溶液配制
准确称取1.3 g（精确至0.000 1 g）丙酸钠，用水定 容至100 mL，配制成相当于含10 mg/mL丙酸的丙酸钠 标准储备液。准确称取1.0 g（精确至0.0001 g）双乙酸 钠，用水定容至100 mL，配制成10 mg/mL的双乙酸钠标 准储备液。依次吸取0.012 5、0.05、0.125、0.5、1.25、 2.5 mL丙酸钠及双乙酸钠标准储备液于凯氏定氮蒸馏装 置，加入1 mol/L的磷酸溶液1 mL，蒸馏出约24 mL时， 用1 mol/L的磷酸溶液调pH值至3左右，定容至25 mL。得 到丙酸钠（相当于丙酸）、双乙酸钠的混合工作液质量 浓度分别为0.005、0.02、0.05、0.2、0.5、1.0 mg/mL。经 过0.22 μm微孔滤膜过滤，浓度由低到高进样，以质量浓 度为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。 1.3.2 样品处理
was established. The sodium (or calcium) propionate and sodium diacetate in samples were converted to the corresponding
acids by treatment with phosphoric acid. After that, both acids were collected by steam distillation using a Kjeldahl apparatus.
食品科学
※安全检测
凯氏定氮蒸馏装置-高效液相色谱法同时测定 蚝油等食品中丙酸钠（钙）和双乙酸钠
赖国银，林建忠，曾 琪，林立毅，丁亦男，张志刚，徐敦明
（厦门出入境检验检疫局技术中心，福建 厦门 361026）
摘 要：利用凯氏定氮蒸馏装置，建立同时检测蚝油、酱油、鱼露中丙酸钠（钙）和双乙酸钠的高效液相色谱法。 蚝油等食品中的丙酸钠（钙）和双乙酸钠经过磷酸酸化后转化为相应的酸，通过凯氏定氮蒸馏装置，水蒸气蒸馏法 提取，加磷酸调节蒸馏液pH值至3.0，采用高效液相色谱法进行测定。丙酸钠（钙）和双乙酸钠在0.005～1.000 mg/mL 内线性良好，相关系数为0.999 9。丙酸钠（钙）（以丙酸计）、双乙酸钠的回收率分别为88.5%～108.3%和 86.5%～108.7%，相对标准偏差为2.13%～6.42%和2.02%～6.37%（n=6）。方法简便快捷、稳定可靠，适用于蚝 油、酱油和鱼露中丙酸钠（钙）和双乙酸钠含量的测定。 关键词：凯氏定氮蒸馏装置；丙酸钠（钙）；双乙酸钠；蚝油；高效液相色谱
Abstract: Using a Kjeldahl distillation apparatus, a methodFra Baidu bibliotekfor the simultaneous determination of sodium (or calcium)
propionate and sodium diacetate in oyster sauce, soy sauce and fish sauce by high performance liquid chromatography (HPLC)
diacetate in oyster sauce and other similar seasonings by high performance liquid chromatography using Kjeldahl distillation
apparatus[J]. Food Science, 2017, 38(4): 270-274. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-
蚝油[5]、酱油[6]、鱼露[7]是人们餐桌上倍受欢迎的 调味品。丙酸钠（钙）、双乙酸钠作为化学防腐剂，被 广泛应用于糕点、酱油等食品中。GB 2760—2014中规 定，丙酸及其钠盐、钙盐在酱油中的最大允许使用量为 2.5 g/kg，而蚝油、鱼露中不得使用；双乙酸钠在蚝油、 酱油和鱼露中的最大使用量均为2.5 g/kg[4]。食品中丙酸的 检测方法有气相色谱法[2,8-15]和高效液相色谱法等[11,16-18]。 双乙酸钠的检测方法有高效液相色谱法[19-21]和离子色谱 法[22]等。林清河[23]、吴忠兴[24]和项林敏[25]等报道了高效 液相色谱同时测定糕点中丙酸钠（钙）和双乙酸钠的方 法。向文娟等[26]报道了全自动固相萃取-高效液相色谱法 测定食品中的丙酸钠（钙）和双乙酸钠。朱洪亮等[27]报 道了高效液相色谱同时测定食品中丙酸钠（钙）和双乙 酸钠的方法。李敏等[28]报道了高效液相色谱法同时测定 苍山蒜米中双乙酸钠和丙酸钙含量。2014年9月29日，我 国收到了韩国通报的厦门某企业蚝油检测出丙酸的不合 格食品信息，GB 2760—2014[4]也规定蚝油中不得使用丙 酸，但有关蚝油等食品中丙酸钠（钙）和双乙酸钠含量 的检测方法尚未见报道。
作者简介：赖国银（1984—），男，工程师，博士，研究方向为食品安全检测。E-mail：gylai_ustc@163.com
※安全检测
食品科学
2017, Vol.38, No.04 271
和过量添加防腐剂会使消费者有过敏反应和慢性中毒风 险。因此，GB 2760—2014《食品添加剂使用标准》规定 了所有防腐剂的最大允许添加量[4]。
色谱柱：Sapphire C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）， 柱温：30 ℃；流动相：1.5 g/L磷酸二氢铵溶液（溶剂为 甲醇-水（10∶90，V/V）），用1 mol/L磷酸溶液调节pH值 至2.7～3.5；流速：1 mL/min；进样量：10 μL。
Recoveries of sodium (or calcium) propionate and sodium diacetate were 88.5%–108.3%% and 86.5%–108.7% with relative
standard deviations (RSDs) of 2.13%–6.42% and 2.02%–6.37% (n = 6), respectively. This method is simple, rapid, easy to
Simultaneous Determination of Sodium (or Calcium) Propionate and Sodium Diacetate in Oyster Sauce and Other Similar Seasonings by High Performance Liquid Chromatography Using Kjeldahl Distillation Apparatus
LAI Guoyin, LIN Jianzhong, ZENG Qi, LIN Liyi, DING Yinan, ZHANG Zhigang, XU Dunming (Technical Center of Xiamen Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Xiamen 361026, China)
Key words: Kjeldahl distillation apparatus; sodium (or calcium) propionate; sodium diacetate; oyster sauce;
high performance liquid chromatography (HPLC)
GB/T 5009.120—2003《食品中丙酸钠、丙酸钙的 测定》[8]、GB/T 23382—2009《食品中丙酸钠、丙酸钙 的测定 高效液相色谱法》[16]及GB/T 23383—2009《食 品中双乙酸钠的测定 高效液相色谱法》[19]中有关丙酸钠 （钙）和双乙酸钠含量检测的蒸馏法均是称取25 g样品于 500 mL蒸馏瓶中，蒸馏至250 mL容量瓶中，最终定容体 积为250 mL。该检测方法需样品量大，定容体积较大， 且较为费时。本实验参考国标[16,19]规定方法基础上改进， 以蚝油、酱油和鱼露为基质，采用凯氏定氮蒸馏装置， 利用高效液相色谱技术，建立了可同时检测蚝油、酱油 和鱼露中丙酸钠（钙）和双乙酸钠的方法，需用样品量 仅为5 g，定容体积为25 mL。该方法在丙酸钠（钙）和 双乙酸钠含量检测中运用凯氏定氮蒸馏装置，快速、简 便、准确、实用。
The pH of the distillates was then adjusted to around 3.0 by adding phosphoric acid. Finally, the analysis was completed with
HPLC. A good linear relationship was gained in the range from 0.005 to 1.000 mg/mL with a correlation coefficient of 0.999 9.
科学, 2017, 38(4): 270-274. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201704044. http://www.spkx.net.cn
LAI Guoyin, LIN Jianzhong, ZENG Qi, et al. Simultaneous determination of sodium (or calcium) propionate and sodium
201704044. http://www.spkx.net.cn
食品添加剂的使用在加工食品和方便食品中的应用 已经越来越广泛。加工食品，如蚝油、酱油、鱼露在制
作过程中添加防腐剂以抑制微生物生成，维持营养价值 和其他特性，进而延长食品保质期[1-3]。然而，非法添加
收稿日期：2016-06-05
基金项目：福建省自然科学基金项目（2016J05045）；国家质量监督检验检疫总局科技计划项目（2016IK186）
operate, stable, reliable, and suitable for the determination of sodium (or calcium) propionate and sodium diacetate in oyster
sauce, soy sauce, fish sauce and other liquid seasonings.
1 材料与方法
1.1 材料与试剂 蚝油 厦门洋江食品有限公司；酱油 佛山市海
天（高明）调味食品有限公司；鱼露 厦门洋江食品有 限公司。
甲醇为色谱纯；磷酸氢二铵（纯度99.0%） 德国
Sigma公司；丙酸钠（纯度98.0%）、双乙酸钠（纯度 98.0%） 日本TCI公司；其余试剂均为分析纯；实验室 用水为超纯水。 1.2 仪器与设备
DOI:10.7506/spkx1002-6630-201704044
中图分类号：TS207.3
文献标志码：A
文章编号：1002-6630（2017）04-0270-05
引文格式：
赖国银, 林建忠, 曾琪, 等. 凯氏定氮蒸馏装置-高效液相色谱法同时测定蚝油等食品中丙酸钠(钙)和双乙酸钠[J]. 食品
准确称取试样5.00 g（精确到0.01 g）于凯氏定氮蒸 馏装置中，加入1 mL 1 mol/L的磷酸溶液，进行水蒸气蒸 馏，蒸馏液经过冷凝后，用25 mL比色管作为接收装置， 待蒸馏出约24 mL时停止接收，用1 mol/L的磷酸溶液调 pH值至3左右，加水定容至25 mL，摇匀。经0.22 μm微孔 滤膜过滤后，供高效液相色谱测定。 1.3.3 高效液相色谱条件
1260液相色谱仪（配有二极管阵列检测器） 美国 Agilent公司；电子天平（感量0.1 mg和0.01 g） 德国 赛多利斯公司；凯氏定氮蒸馏装置。 1.3 方法 1.3.1 标准混合溶液配制
准确称取1.3 g（精确至0.000 1 g）丙酸钠，用水定 容至100 mL，配制成相当于含10 mg/mL丙酸的丙酸钠 标准储备液。准确称取1.0 g（精确至0.0001 g）双乙酸 钠，用水定容至100 mL，配制成10 mg/mL的双乙酸钠标 准储备液。依次吸取0.012 5、0.05、0.125、0.5、1.25、 2.5 mL丙酸钠及双乙酸钠标准储备液于凯氏定氮蒸馏装 置，加入1 mol/L的磷酸溶液1 mL，蒸馏出约24 mL时， 用1 mol/L的磷酸溶液调pH值至3左右，定容至25 mL。得 到丙酸钠（相当于丙酸）、双乙酸钠的混合工作液质量 浓度分别为0.005、0.02、0.05、0.2、0.5、1.0 mg/mL。经 过0.22 μm微孔滤膜过滤，浓度由低到高进样，以质量浓 度为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。 1.3.2 样品处理
was established. The sodium (or calcium) propionate and sodium diacetate in samples were converted to the corresponding
acids by treatment with phosphoric acid. After that, both acids were collected by steam distillation using a Kjeldahl apparatus.