大鼠血糖(blood glucose)说明书
大鼠胰高血糖素样肽1(Glp-1)ELISA试剂盒说明书
大鼠胰高血糖素样肽1(Glp-1)酶联免疫分析试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂盒仅供研究使用检测范围：0.78 ng/ml - 50 ng/ml最低检测限：0.195 ng/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的大鼠Glp-1，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中Glp-1含量。
说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗Glp-1抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗Glp-1抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的Glp-1呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate )：一块（96孔）。
2.标准品（Standard）：2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent)：1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）7.辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）8.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
胰岛素毫微球肺部给药对正常大鼠的降血糖作用
胰岛素毫微球肺部给药对正常大鼠的降血糖作用3沈赞聪 张 强 魏树礼(北京医科大学药剂研究室,北京 100083)主题词 胰岛素/投药和剂量 微球体 血糖/药物作用 给药,呼吸摘 要 目的:研究胰岛素毫微球(insulin 2loaded nanoparticles ,INS 2NP )经大鼠肺部给药后的降血糖作用。
方法:建立大鼠肺部给药的动物模型,通过葡萄糖氧化酶法测定血糖质量浓度来评价INS 2NP 经肺部给药后对大鼠的降血糖作用。
结果:大鼠肺部分别给与5、10、20u ・kg -1的INS 2NP ,以血糖下降至给药前的70%以下所持续的时间(duration below 70%level ,DBL 70%)为考察指标,5u ・kg -1的INS 2NP 的DBL 70%与其对照溶液相近,而10、20u ・kg -1的INS 2NP 的DBL 70%均明显大于各自的对照溶液。
INS 2NP 肺部给药的相对药理生物利用度达到59.2%。
结论:与胰岛素溶液相比,INS 2NP 经大鼠肺部给药后能显著延长其血糖下降的时间。
中国图书资料分类法分类号 R977115H ypoglycemic effects of insulin 2loaded nanoparticles bypulmonary delivery to normal ratsSHEN Zan 2Cong #,ZHAN G Qiang ,WEI Shu 2Li(#Department of Pharmaceutics ,Beijing Medical University ,Beijing 100083)MeSH Insulin/admin Microspheres Blood glucose/drug eff Drug administration ,respira 2tory routesABSTRACT Objective :To investigate the hypoglycemic effects of insulin 2loaded nanoparticles (INS 2N P )after pulmonary delivery to rats.Methods :The pulmonary delivery model was established in nor 2mal rats.Blood glucose levels were measured using glucose oxidase method (GOD )to evaluate the hy 2poglycemic effects .R esults :After 5,10,and 20u ・kg -1of INS 2N P were administered from the lung ,The duration below 70%level (DBL 70%)of 5u ・kg -1INS 2N P was approximately the same as that of its control solution ,while 10u ・kg -1and 20u ・kg -1INS 2N P had greater DBL 70%values than their con 2trol (INS 2SOL ).The relative pharmacological bioavailability of INS 2N P reached 59.2%.Conclusion :Pulmonary delivery of INS 2N P to rats can significantly prolong the duration of hypoglycemic effect.(J Beiji ng Med U niv ,1999,31:4362438) 目前,胰岛素(Insulin ,INS )的非注射给药途径的研究引起人们的广泛关注,由于口服给药研究没有重大的突破,肺部给药途径已经成为人们研究的新焦点[1]。
甲状腺功能亢进症模型大鼠心肌细胞PI3KAkt通路与胰岛素抵抗的关系
甲状腺功能亢进症模型大鼠心肌细胞PI3K/Akt 通路与胰岛素抵抗的关系+王万民，田涛三门峡市中心医院内分泌科（河南三门峡472000)【摘要】目的探讨甲状腺功能亢进症模型大鼠心肌细胞P B K/A k t通路与胰岛素抵抗的关系方法 建立甲状腺功能亢进症模型大鼠，随机分为模型组、LY294002组（P13K抑制剂）、740Y _P组（P13K激动 剂），每组12只；另取12只S D大鼠设为对照组分组处理后，酶联免疫吸附法（ELISA)检测甲状腺功能指标血清游离三碘甲状腺原氨酸（F T3)、游离甲状腺素（F T4)、促甲状腺素（T S H)、肿瘤坏死因子-a(T N F-a)、白细胞介素-6(丨L-6)水平；测定空腹血糖水平（F B G)、胰岛素抵抗指数（IR[) ;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡情况；蛋白免疫印迹法检测大鼠心肌组织PI3K/A kt通路蛋白表达结果与对照组比较，模型组大鼠血清FT3、FT4、TNF —〇(及I L-6水平、心肌细胞凋亡比例、FBG、1R1显著升高（P<0. 05)，TSH、心肌组织p — P13K/ P I3K及p-A k l/A k t显著降低（P<0.05);与模型组比较，LY294002组大鼠血清FT3'FT4、T N F-a及I L-6水 平、心肌细胞凋亡比例、FBG、i m升高（P<0.05),T S H、心肌组织p-P I3K/P13K及p-A k i/A k t降低（f< ().05) ;740Y -P组大鼠血清m、hT4、T N F-c t及I L-6水平、心肌细胞凋亡比例、FBG、IK I降低（P<0. 05), TSH、心肌组织p-P I3K/P丨3K及p-A k t/A k〖升高（P<0.05)结论丨W K/A k t通路可调控甲状腺功能亢进症模型大鼠胰岛素抵抗，激活该通路，可使甲状腺功能恢复正常，减轻炎症反应，抑制心肌细胞凋亡，改善胰岛素抵抗。
大鼠血糖测定方法
大鼠血糖测定方法引言：血糖是人体能量代谢的重要指标之一，血糖水平的变化与多种疾病的发展密切相关。
因此，准确测定大鼠血糖水平对于研究人类疾病模型以及药物研发具有重要意义。
本文将介绍几种常用的大鼠血糖测定方法。
一、口服葡萄糖耐量试验（OGTT）口服葡萄糖耐量试验是一种常用的测定大鼠胰岛功能和糖代谢的方法。
实验操作步骤如下：1. 饲养大鼠至试验前12小时内禁食，但可以饮水。
2. 在试验开始前，取大鼠空腹血样测定胰岛素和葡萄糖基线水平。
3. 给予大鼠口服葡萄糖溶液（2g/kg），记录给药时间点为0分钟。
4. 在给药后的30、60、90和120分钟，分别采集大鼠血样，测定血糖水平。
5. 同时测定各时点的胰岛素水平。
6. 通过分析血糖曲线和胰岛素水平变化，评估大鼠胰岛功能和糖代谢状态。
二、静脉注射葡萄糖耐量试验（IVGTT）静脉注射葡萄糖耐量试验是一种常用的测定大鼠胰岛素敏感性和胰岛功能的方法。
实验操作步骤如下：1. 饲养大鼠至试验前12小时内禁食，但可以饮水。
2. 在试验开始前，取大鼠空腹血样测定胰岛素和葡萄糖基线水平。
3. 通过尾静脉注射葡萄糖溶液（1g/kg），记录给药时间点为0分钟。
4. 在给药后的1、3、5、7和10分钟，分别采集大鼠血样，测定血糖水平。
5. 同时测定各时点的胰岛素水平。
6. 通过分析血糖曲线和胰岛素水平变化，评估大鼠胰岛素敏感性和胰岛功能状态。
三、糖化血红蛋白测定法（HbA1c）糖化血红蛋白测定法是一种常用的长期血糖控制指标的测定方法。
实验操作步骤如下：1. 取大鼠全血样本。
2. 提取血红蛋白，去除干扰物质。
3. 通过高效液相色谱法（HPLC）或离子交换色谱法分离和测定糖化血红蛋白（HbA1c）的百分比。
4. 根据HbA1c的百分比，评估大鼠长期血糖控制状态。
四、血糖仪法血糖仪法是一种常用的快速测定大鼠血糖水平的方法。
实验操作步骤如下：1. 取大鼠尾静脉血样或耳朵尖血样。
2. 使用血糖仪将血样放入试纸上，等待血糖仪读数。
大鼠(Rat)糖化血红蛋白(GHb)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断大鼠（Rat）糖化血红蛋白（GHb）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被糖化血红蛋白（GHb）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的糖化血红蛋白（GHb）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、25、50、100、200、400ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
1型糖尿病大鼠模型制备经验.
第18卷第3期2010年9月四川解剖学杂志SICHUAN JOURNAL OF ANATOMYVol.18No.3September2010d oi:10.3969/j.is sn.1005-1457.2010.010Ñ型糖尿病大鼠模型制备经验李娜娜1马淑君2周立11(新乡医学院人体解剖学教研室,新乡45300322(新乡医学院检验系,新乡4530032=摘要>目的探讨Ñ型糖尿病大鼠模型制作方法和注意事项。
方法一次性大剂量注射链脲佐菌素(ST Z诱导Ñ型糖尿病大鼠模型。
结果一般情况观察:大鼠多饮、多食、多尿、消瘦明显。
体重:实验组在1、2、4、8、12周和对照组同期组比较有显著差异(P<0105;实验组内1、2、4、8、12周两两比较有显著差异(P<0105。
尾静脉血糖:实验组在1、2、4、8、12周和对照组同期组比较有显著差异(P<0105;实验组诱导前与1、2、4、8、12周比有显著差异(P<0105。
结论通过腹腔一次大剂量注射ST Z(55mg/kg可以严重损伤胰岛,引起与Ñ型糖尿病相似的症状。
=关键词>链脲佐菌素;糖尿病;动物模型=中图分类号>R332=文献标识码>A=文章编号>1005-1457(201003-30-03Experience of Prepation for TypeÑDiabetic Rat ModelLi Nana1Ma Shujun2Zhou Li11(Dep artment of H uman Anatomy,X inx iang M ed ica l Colleg e,X inxiang4530032,Ch ina2(Dep artment of Insp ection,X inx iang M ed ic al Colleg e,X inx iang4530032,China=Abstract>Objective T o ex plor e t he metho d of establishing ty peÑdiabetic rat mo del.Methods SD r ats w ere injec-ted intraper itoneally w ith55mg/kg st reptozotocin(ST Zonce to induce the ty peÑdiabetes models.Results T he rats in ex per imenta l gr oups had ty pical t ypeÑdiabetic symptoms,such as the incr ease of diet,drinking,urine and t he decrease of body w eig ht.Co mpa red w ith no rmal g ro ups,the weig ht o f rats was decreased sig nificantly in ex per imental gr oups(P<pared w ith no rmal g ro ups,the blo od sug er of rats in ex per imental gr oups was increased signif-icantly(P<0105.T here w ere signif icant differences betw een each ex per imental g roup(P<0105.C onclusion Rat model w ith typeÑdiabetes mellitus could be induced by injecting intraperit onea lly hig h dose ST Z into rats.=K ey w or ds>Str epto zo tocin(ST Z;Diabetes mellitus;A nima l modelÑ型糖尿病是具有一定遗传基础,在多种环境因素触发下,由T淋巴细胞介导的自身免疫系统疾病。
糖尿病大鼠指标
糖尿病⼤⿏指标实验流程1、末次灌胃后，⼤⿏禁⾷不禁⽔12h，与⿇醉前进⾏称重，⾏腹腔注射3%戊巴⽐妥钠，0.3ml/100g2、腹主动脉取⾎，留取全⾎标本。
3、取肝、脾、肾、胃、⼼脏及脑。
4、称肝、脾、肾、胃、⼼脏及脑组织，并分装各个组织，放⼊-80℃冻存。
其中肝组织剪取1g肝脏，送⾄肝均浆；肝10%甲醛固定做HE染⾊，每组5只；肝4%戊⼆醛固定做电镜，每组⼀只；5、⼩肠10%甲醛固定做HE染⾊，每组5只；⼩肠4%戊⼆醛固定做粪便电镜，每组1只；其余肠组织-80℃冻存。
6、肝；制成肝均浆，1g肝脏加⼊9ml冰⽣理盐⽔，制成肝均浆液，离⼼后，取上清液，于-80℃冻存。
7、全⾎标本静置30min后，进⾏离⼼，分离⾎清，⾎清和⾎浆均放⼊-80℃冻存。
检测指标：1、肝脏组织1.1HE染⾊观察肝脏组织的病理学改变。
1.2透射电镜观察肝脏超微结构变化1.3电感耦合等离⼦体质谱（ICP-MS）1.4试剂盒测肝均浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙⼆醛（MDA）、⾕胱⽢肽过氧化酶（GSH-Px）、ROS活性氧⽔平1.5检测肝脏组织中Western blot、NF-kB、COX-2表达情况，计算其阳性表达率2、⾎清（⾎浆）2.1全⾃动化分析仪测⾕草转氨酶（AST）、⾕丙转氨酶（ALT）、⾕氨转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶TG2.2酶联免疫吸附法检测⾎浆中肠结合脂肪酸蛋⽩（FABp2）、D-乳酸（D-LA）及⼆胺氧化酶（DAO）⽔平评价⼤⿏⼤肠粘膜损伤2.3试剂盒测⾎浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙⼆醛（MDA）、4-HNE（羟基壬烯醛）、⾕胱⽢肽过氧化酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）评价⼤⿏氧化应激⽔平2.4酶联免疫吸附试验（ELISA）检测⼤⿏⾎浆中α肿瘤坏死因⼦（TNF α）、肿瘤坏死因⼦β（TNF-β）、⽩细胞介素-1β(IL-1β)、⽩细胞介素-6(IL-6)、⽩细胞介素-10(IL-10)、单核细胞趋化因⼦-1(MCP-1)、细胞间粘附因⼦-1(ICAM-1)浓度3、肠道菌群采⽤实时荧光定量PCR技术对粪便⼤肠杆菌、粪肠球菌、双歧杆菌和嗜酸乳杆菌、脆弱拟杆菌和柔嫩梭菌16SrDNA V3 可变区进⾏定量分析4肾脏组织4.1超氧化物歧化酶（SOD）、丙⼆醛（MDA）、还原型⾕胱⽢肽（ GSH）、过氧化氢酶（ CAT）及内⽪素（ ET-1）和肿瘤坏死因⼦（ TNF-α）的影响。
血糖Blood Glucose
低血糖Байду номын сангаас其治疗
低血糖症是指人体内血糖低于正常低限（一般是血糖低于2.8mmol/L）引起相应症 状与体征的一种生理或病理状况。注意区别几个概念：低血糖症 = 临床症状 + 生化 指标；低血糖 = 生化指标；低血糖反应 = 临床症状
一、低血糖症的分类
（1）按病因： 器质性：肝脏疾病、内分泌疾病、恶性肿瘤、严重营养不良等等 功能性：多为进食后胰岛素分泌过多所致 外原性：由于摄入某些药物或营养物质所致 （2）按与进食的关系：空腹性、餐后性 （3）按进展的速度：急性、亚急性、慢性
四、诊断低血糖症的注意事项
（1）器质性与功能性低血糖的鉴别 （2）寻找器质性低血糖的原因 （3）低血糖发生的规律性 （4）无症状性低血糖的发现 （5）注意夜间低血糖
低血糖及其治疗
五、警惕夜间低血糖
（1）成人及儿童糖尿病患者夜间经常发生生化性低血糖而无症状，并且这些低血糖 通常可以维持数小时而不惊醒患者 （2）夜间低血糖可以导致患者猝死 （3）当患者睡前血糖低于6.0-7.0 mmol/L,则患者在睡前需要加餐
2.胰岛素的应用—肌肉注射法或皮下注射
适用于血糖＜300mg/dl或无条件静脉应用胰岛素的患者使用剂量 成人 儿童 首次剂量 20u 0.25/kg 此后剂量 5～10u 0.1u/h 2～4h后，血糖下降＜原水平的10%者，宜改用静脉滴注法
3.胰岛素的应用—静脉滴注法
当血糖＞33.3mmol/L时，先静脉用冲击量，成人12～20u，儿童0.25u/kg ,静脉输入小剂量胰岛 素成人剂量为0.1u/kg/h，约降低血糖4.2～6.1mmol/h ,如2～4h后血糖下降＜原水平的30%或无 明显下降者，可将胰岛素的剂量加倍
正常大鼠及糖尿病大鼠血糖昼夜节律性研究
正常大鼠及糖尿病大鼠血糖昼夜节律性研究
付雪艳;于福生;董琳;张义伟;马学琴
【期刊名称】《时珍国医国药》
【年(卷),期】2007(18)9
【摘要】目的观察正常大鼠与糖尿病大鼠在血糖方面是否存在昼夜节律性。
方法用链脲佐菌素腹腔注射制备糖尿病大鼠模型,通过正常大鼠与模型大鼠不同时间血糖值的不同,探索一天中大鼠血糖变化情况。
结果正常大鼠的血糖存在昼夜节律变化,18:00时血糖达到峰值,6:00时血糖值降至低谷;糖尿病大鼠一天中的血糖值无明显差异。
结论疾病状态下大鼠的昼夜节律的协调受到了破坏,导致糖尿病大鼠的血糖昼夜节律调节紊乱。
【总页数】2页(P2216-2217)
【关键词】血糖;糖尿病;昼夜节律性
【作者】付雪艳;于福生;董琳;张义伟;马学琴
【作者单位】宁夏医学院;黑龙江农垦总医院
【正文语种】中文
【中图分类】R587.1
【相关文献】
1.基于1型糖尿病大鼠模型的呼吸丙酮与血糖及血β-羟基丁酸相关性研究 [J], 袁渊;陈珠英;黄河;赵晓萌;王振南;孙美秀
2.体外孵育的非酶糖基化终产物诱导正常大鼠类糖尿病性视网膜血管病变研究 [J],
李治平;许迅;黄宇峰;朱剑锋;王晓珏;胡宏慧;何志平
3.糖脉康颗粒对糖尿病模型小鼠血糖、糖耐量及正常大鼠糖耐量的影响研究 [J], 陈晓蕾
4.微透析法研究酮康唑经正常大鼠和糖尿病大鼠皮肤透过性的差异 [J], 庄志铨;苏碧雅;沈勇刚;李国锋
5.绞股蓝皂苷降低2型糖尿病并非酒精性脂肪性肝病大鼠血糖、血脂的机理研究[J], 贺琴;雷飞飞;李儒贵;谭华炳
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STZ诱导糖尿病肾病大鼠模型的建立
111 实验动物和试剂 雄性 Wistar 大鼠( 第一军医大学实验动物中心
提供, 合格证号: 粤检证字第 2001B023 号) , 体重 180 ~ 230 g, 普通级。Streptozotocin( STZ, Sigma 公司, 美
[ 基金项目] 广东省自然科学基金资助课题( 编 号: 013040); 广东 省中医药局科研基金资助课题( 编号: 101004) 。
实验结束时, 模型组血肌酐、血尿素氮较对照组 显著升高( P > 0105) ( 结果见表 1) 。
211 一般情况及血糖、尿糖变化 模型组成模率 8510% , 成模后病死率 519% 。
表 1 实验结束时两组 大鼠尿蛋 白、尿 白蛋白、肾功 能、 相对肾重比较( x- ? s)
Tab. 1 The final urine protein, urine albumin, renal function and relative kidney weight in the rats( x- ? s)
= Abstr act> Objective To establish a diabetic nephropathic rat model and to study it. s kidney lesions. Methods 40 male Wistar rats were randomly divided into control and experimental diabetic groups, 20 per each group. Diabetic rats were induced by one intraperitoneal injection of streptozotocin ( STZ) in a dose of 65 mgPkg. The rats were breed for 14 weeks. During the experiment, the blood glucose and urine glucose were measured and gross health status was observed. Finally, serum creatinine ( SCr) , blood urea nitrogen ( BUN) , urine protein and urine albumin were assayed, and renal pathological changes were examined by light and electron microscopy. Results The diabetic rats showed increased SCr, BUN, urine protein and urine albumin levels and hypertrophy of the kidneys. The renal pathology exhibited glomerular and tubulo2interstitial alterations. Conclusion The STZ2induced rat diabetic model have certain glomerulus and tubulo2 interstitial lesions and can be used in diabetic
急性低血糖大鼠血清FT_3、FT_4、TSH水平及下丘脑组织TRH表达变化
光定量 Ｐ Ｃ Ｒ法分别检测各组大鼠下丘脑组织中的 Ｔ Ｒ Ｈ蛋 白及 ｍ Ｒ Ｎ Ａ 。结果 正常血糖组 、 轻度低血糖组 、 重度低血糖组
分别为（ ５ ． ０ ５－ ４ － １ ． ４ ０ ） 、 （ ４ ． ８ ２ － ４ － １ ． ２ ２ ） 、 （ ４ ． ９ ２±１ ． ０ ８ ） ｐ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ ， 分别为 （ ２ ． ４ ５± ０ ． ２ ６ ） 、 （ ２ ． １ ９ ４ － ０ ． １ １ ） 、 （ ２ ． ３ ０ －０ ４ ． ２ １ ）
中图分类号 ： Ｒ ３ ６ ３ ． １
文献标志码 ： Ａ
文章 编 号 ： １ ０ ０ ２ － ２ ６ ６ Ｘ（ ２ ０ １ ５ ） ３ １ － ０ ０ ３ ０ － ０ ３
应激是一种机体多系统共同参与的全身性适应反
应， 在应激原的刺激下 ， 机体过度分泌 或抑制相关应激 激素。在创伤应激相关激素 中最有 特异性 的指标 为皮
摘要 ： 目的 观察急性低血糖大鼠血清游离三碘甲状腺原氨酸（ ｆ Ｔ Ｉ ） 、 游离甲状腺素（ Ｆ Ｆ ） 、 促 甲状腺激素（ Ｔ Ｓ Ｈ） 水
平及下丘脑组织促甲状腺激素释放激素（ Ｔ ｒ ｔ Ｈ） 表达的变化。方法 Ｗｉ ｓ ｔ ａ ｒ 大鼠 ２ １只， 根据血糖水平分为正常血糖组 、
组 ７只。后两组采用胰岛素腹腔注射诱导大鼠低血 糖 的方法 Ｊ ， 腹腔注射短效胰 岛素 （ 生物合成人 胰
岛素 ， 诺 和诺 德 公 司 ， ５ ０ Ｕ ／ ｋ ｇ ） 。 以微 型血 糖 仪 （ 德 国罗 康全 ） 断尾 法 测 量 血 糖 ， 并 记 录所 有 大 鼠腹 腔 注射 胰 岛素后 每隔 ３ ０ ｍ ｉ ｎ的血糖 值 ， 直 至 达到 目标 血糖 。轻度 低 血糖组 血 糖 ２ ． ０～ ２ ． ６ ４ ｍ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ， 大 鼠 兴奋 、 身体 发抖 、 四处 觅食 ； 重 度低 血糖 组血 糖 ＜ ２ ． ０ ｍ ｍｏ ｌ ／ Ｌ ， 大 鼠神 志恍 惚 甚 至全 身 抽搐 。大 鼠称 体 质 量， １ ０ ％ 水合 氯 醛 腹 腔麻 醉 后 ， 上 腹正 中切 口 ， 游 离 肋骨 ， 心脏 采血 ， ３ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍ ｉ ｎ离 心 １ ０ ｍｉ ｎ ， 分 离 血 浆， 存人 Ｅ ｐ ｐ ｅ ｎ ｄ ｏ ｒ ｆ 管中 ， 一 ８ ０ ｃ Ｃ冰箱 中保 存 。大 鼠 经 心脏采 血 后 ， 断头， ３ ｍｉ ｎ内取 脑 ， 分 离 脑 组 织 后 迅速 置 于 一 ４ ０℃ 干冰异 戊烷 中 ３ ０ Ｓ ， 快 速冷 冻 脑 组 织， 后于 一８ ０ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ冰 箱冻存 。
糖尿病大鼠在不同血糖浓度下伤口愈合情况实验研究
糖尿病大鼠在不同血糖浓度下伤口愈合情况实验研究曾文超;巩茹;郭洪敏;巩超;王福宁;赵阳;岳震【摘要】Objective To study the effect of blood glucose level on the wound healing of diabetic rats.Methods Diabetes mellitus model was built by streptozotocin injection in male rats aged 3～4 months.The diabetes mellitus rats were divided into four groups according to the level of blood gulcose regulated by insulin.The wound model was formed by operation.Afterwards, rats were killed at 0 (the same day of injury), 3, 7 and 14 days after injury.The wound healing area was measured, in combination with the observation of the pathological changes of wound tissues.Results When the blood sugar concentration was controlled at 160～190 mg/dL, the wound healing rate was the fastest, followed by at the level lower than 160 mg/dL with no significant difference in macrophages.At higher blood sugar levels, the healing rate of wounds was delayed obviously, and macrophages in surrounding tissues exhibited remarkabledecrease.Conclusion It is beneficial to wound healing at low levels of high blood sugar concentration in diabetic rats.%目的探讨不同血糖浓度对糖尿病大鼠伤口愈合的影响.方法选取普通3～4个月龄雄性大白鼠,通过链唑霉素诱导大白鼠糖尿病模型.将诱导成功的大白鼠根据胰岛素调控血糖水平分为四组,I组:糖尿病诱导后给予胰岛素控制血糖在160～190mg/dL;Ⅱ组:糖尿病诱导后给予胰岛素控制血糖在190～240mg/dL;Ⅲ组:糖尿病诱导后给予胰岛素控制血糖在240mg/dL以上;Ⅳ组:糖尿病诱导后给予胰岛素控制血糖在160mg/dL以下.手术形成创面模型.分别于伤后0(伤后当天)、3、7、14d处死大鼠.测量伤口愈合面积,观察创面组织病理学改变.结果血糖浓度控制在160～190mg/dL时,伤口愈合速度最快,其次为血糖低于160mg/dL时,巨噬细胞无明显差异.血糖在更高水平时,伤口愈合速度明显减慢,伤口周围组织的巨噬细胞明显减少.结论糖尿病大鼠在低水平高血糖浓度下有利于伤口愈合.【期刊名称】《实用骨科杂志》【年(卷),期】2019(025)002【总页数】3页(P140-142)【关键词】糖尿病大鼠;血糖浓度;病理学改变;伤口愈合【作者】曾文超;巩茹;郭洪敏;巩超;王福宁;赵阳;岳震【作者单位】山东省济宁市第一人民医院手足踝外科, 山东济宁 272000;山东省济宁市第一人民医院手足踝外科, 山东济宁 272000;山东省济宁市第一人民医院手足踝外科, 山东济宁 272000;山东省济宁市第一人民医院手足踝外科, 山东济宁272000;山东省济宁市第一人民医院手足踝外科, 山东济宁 272000;山东省济宁市第一人民医院手足踝外科, 山东济宁 272000;山东省济宁市第一人民医院手足踝外科, 山东济宁 272000【正文语种】中文【中图分类】R649.9糖尿病及其相关并发症已经成为一个公共健康问题，因为有较高的致残率及死亡率，积极预防、治疗糖尿病及其并发症成为一个至关重要的课题。
实验大鼠血糖正常范围的估算
实验大鼠血糖正常范围的估算血糖是影响机体健康的重要生理指标之一，对糖尿病、糖代谢异常和某些疾病的诊断和治疗都有重要意义。
尽管血糖的正常范围在不同的实验动物（人类、犬类、猫类、小鼠等）中不同，但大多数研究表明，实验大鼠血糖的正常范围在4mmol/L-7mmol/L之间。
尽管血糖的正常范围在实验动物中不同，但大多数研究发现，大鼠的血糖值在4mmol/L-7mmol/L之间。
同时，血糖受多种因素的影响，包括个体状况、营养、睡眠、运动等，它们都有可能影响血糖水平。
因此，评估实验大鼠血糖正常范围的最佳方法是将实验条件和实验大鼠进行评估，以测定实验大鼠血糖正常范围的估算值。
第一步是选择大鼠样本。
一般情况下，根据研究的目的，应选择同年龄，性别，体重，种族等的健康大鼠样本。
另外，除了关注这些个体基础之外，为了确保样本的可靠性，同一个研究中所有大鼠应来自同一来源。
第二步是检查样本健康状况。
检查大鼠健康状况是估算血糖正常范围的重要环节，对于每只大鼠，应检查体温，体重，营养状况，精神状态，眼球状态，胃肠系统健康状况，皮肤状况，口腔状况等。
第三步，收集大鼠血液样本。
进行血糖测量前，首先应取血。
一般情况下，取血量以每只大鼠0.5ml为宜，应从大鼠腕部取血，并用血液采集系统进行收集。
第四步，进行血糖测量。
取得血样后，应立即进行血糖测量，使用血糖测量仪将血糖浓度进行测量，并将血糖值在大鼠测量的记录表中记录下来。
第五步，分析大鼠血糖测量结果。
血糖测量结果的分析是估算大鼠血糖正常范围的关键，通常情况下，应使用统计学方法，进行总体数据分析，以确定血糖正常范围估算值。
以上描述了如何估算实验大鼠血糖正常范围的步骤和方法，但是，仅根据血糖测量结果确定大鼠血糖正常范围是不够的，应考虑到大鼠的个体状况，环境因素等，以更准确准确地评估大鼠血糖正常范围的估算值。
实验大鼠血糖正常范围的估算是一项复杂的工作，要根据实验大鼠的个人状况，实验条件，以及血糖测量结果，合理进行估算，以获得更准确的估计值。
大鼠血糖实验汇总2
检测流程
正常组
SD大鼠
糖尿病组
正常饥饿组3 只（禁食12小 时）
正常饱食组三 只（正常饮食）
尾部取血
实验饥饿组11 只（禁食12小 时）
实验饱食组8 只（正常饮食）
肝脏组织匀浆， 去除蛋白，提 取糖原
血糖仪测血糖， 记录结果
碘液反应鉴定 肝糖原
蒽酮比色法测 定肝糖原含量
实验分组
分组
编号
正常
饱食 1
2.糖尿病饱食大鼠血糖值与糖尿病饥饿组血糖值有明显差别，明显高于 饥饿组；但肝糖原含量无明显差别。
血糖均值
血糖标准差 肝糖原均值 肝糖原标准差
糖尿病饱食大 鼠
30.329
4.563
1.287
1.464
糖尿病饥饿大 鼠
9.150
7.693
0.476
0.318
t=6.491>t0.05/2
t=1.718<t0.05/215=2.131,p>0.05,
2
3
组
正常
饥饿 4
5
6
组
糖尿
病饱 2
3
5
6
7
8
16
食组
糖尿
病饥 9 饿组
10 11 12 13 14 15 19 21 22 23
实验结果分析：1、正常饱食大鼠血糖与正常饥饿大鼠血糖值 的无明显差别；肝糖原的含量也无明显差别。
血糖均值
血糖标准差 肝糖原均值 肝糖原标准差
正常饱食大鼠 8.100
1.375
启示：理论上正常饥饿大鼠的血糖能从肝糖原转化得到补充而不会太低， 但为什么正常饥饿大鼠与糖尿病饥饿大鼠的血糖不存在差别呢？
进食状态对糖尿病大鼠血糖及肝糖原的影响
5.8
4.6
4.7
4.8
实验前 4.1 4.1 4.0 4.5
血糖（mmol/L） 成模确定 32.7 32.7 33.3 22.6
处死前 8.4 6.2 24.4 32.8
各项数据汇总
正常饱食
正常饥饿
加碘液颜色
红褐色
浅黄色
血糖值 (mmol/L)
吸光度均值
7.9 0.634
4.8 0.071
肝糖原值 (g/100g)
进食状态对糖尿病大鼠血糖 及肝糖原的影响
实验汇报
实验流程
正常组
SD大鼠
糖尿病组
正常饥饿组 （禁食12小 时）
正常饱食组 （正常饮食）
实验饥饿组 （禁食12小 时）
实验饱食组 （正常饮食）
尾部取血
摘眼球取血 分离血清
肝脏组织匀 浆，去除蛋 白，提取糖原
血糖仪测血 糖，记录结果
ELASA测 血清胰岛素 水平
4号
日期（月/日）
11/30
12/1
12/2
大鼠平均饮食量对比
饮食量对比(g/只)
45.0
40.0
35.0
30.0
28.7
24.6 25.0
20.3 20.0
15.0
28.8 21.4 16.2
27.0 25.0
19.4
38.3 31.2
18.6
10.0
5.0
0.0 造模第一天
造模第二天
造模第三天 正常组 糖尿病组 第6组
血清胰岛素
含量 （mmol/L）
4.8
浅黄色 0.314
2.48
7.9
红褐色
3.41
大鼠血糖测定方法
大鼠血糖测定方法大鼠血糖测定方法是评估和监测大鼠体内葡萄糖水平的重要工具。
血糖水平的测定对于研究大鼠糖代谢的生理和病理变化至关重要，因为它能提供有关糖尿病、胰岛素抵抗以及其他代谢紊乱的信息。
以下是大鼠血糖测定的一般步骤：准备工作：1.获取大鼠和相应的实验设备，包括血糖测定仪、取血针、血液收集管、鼠夹、酒精消毒剂等。
2. 高血糖模型实验：如果需要研究高血糖状态，可以使用多种方法建立高血糖模型，比如注射一些药物（如低剂量 Streptozotocin）或改变动物的饮食。
步骤：1.术前准备：为了最小化动物痛苦和压力，应用合适的麻醉剂或麻醉药物给大鼠诱导麻醉。
注射麻醉剂后，等待几分钟以确保大鼠完全麻醉。
2.血液收集：选择大鼠尾部作为血液采集点，用酒精消毒针刺的部位。
在细长的小管中擦拭尾巴，以增加血流。
快速将收集管放在尾部，以收集2-3滴血液。
当血液浮现时，用绷带或棉花球轻轻涂抹尾部，以止血。
3.血糖测定：将血液收集管的血液滴在血糖仪上。
等待仪器进行测量并记录读数。
4.睡眠状态下的血糖测定：对于不麻醉的大鼠，可以让它们进入睡眠状态，通过使用鼠夹或类似的设备来保持大鼠静止，然后按照上述步骤进行血糖测定。
注意事项：1.血液采集时应注意使用无菌技术，以避免感染。
2.在选取麻醉剂和药物剂量时，应考虑到其对大鼠血糖水平的影响。
3.必须避免应激因素（如麻醉剂和采血对大鼠的应激）影响血糖水平的测定结果。
4.应根据实验需要，选择合适的时间点和重复测量，以获得更准确的血糖测定结果。
总结：大鼠血糖测定方法是评估和监测大鼠糖代谢的重要工具。
正确选择麻醉剂、采血技术以及注意采集无菌血液样本等是确保测定结果准确可靠的关键因素。
通过血糖测定，可以获取有关大鼠糖代谢变化的重要信息，为糖尿病等相关疾病的研究提供有价值的数据。
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然后再加待测样品 10μl（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽 量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。 4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同 3。 8. 洗涤：操作同 5。 9. 显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 15 分钟. 10. 终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。 操作程序总结：
3 酶标包被板
12 孔×8 条
9 标准品稀释液
1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液
6ml×1 瓶
10 说明书
1份
5 显色剂 A 液
6ml×1 瓶
11 封板膜
2张
6 显色剂 B 液
6ml×1/瓶
12 密封袋
1个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
大鼠血糖(blood glucose)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围： 30μmol/L -850μmol/L
96T
使用目的：
本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中血糖(blood glucose)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠血糖(blood glucose)水平。用纯化的大鼠血
用完，板条应装水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值
糖(blood glucose)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入血糖(blood
glucose)，再与 HRP 标记的血糖(blood glucose)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，
经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下
200μmol/L
3 号标准品
150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
100μmol/L
2 号标准品
150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
50μmol/L
1 号标准品
150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl，待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，
大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计 算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。 保存条件及有效期 1．试剂盒保存：；2-8℃。 2．有效期：6 个月
计算 以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标 准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，
即为样品的实际浓度。 注意事项 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
800μmol/L
5 号标准品
150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液
400μmol/L
4 号标准品
150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血糖(blood glucose)呈正相关。用酶标仪在 450nm
波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠血糖(blood glucose)浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液
20ml×1 瓶
7 终止液
6ml×1 瓶
2 酶标试剂
6ml×1 瓶
8 标准品（1600μmol/L） 0.5ml×1 瓶