第八章
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第八章微生物的遗传
遗传:亲代与子代相似。
变异:亲代与子代、子代间不同个体不完全相同。
遗传(inheritance)和变异(variation)是生命的最本质特性之一。
遗传型:生物的全部遗传因子及基因。
表型(表现型):具有一定遗传型的个体,在特定环境条件下通过生长发育所表现出来的形态等生物学特征的总和。
表型饰变:表型的差异只与环境有关。
特点:暂时性、不可遗传性、表现为全部个体的行为。
遗传型变异(基因变异、基因突变):遗传物质改变,导致表型改变。
特点:遗传性、群体中极少数个体的行为
自发突变频率通常为10-6---10-9
微生物是遗传学研究中的明星:
微生物细胞结构简单,营养体一般为单倍体,方便建立纯系。
很多常见微生物都易于人工培养,快速、大量生长繁殖。
对环境因素的作用敏感,易于获得各类突变株,操作性强。
第一节遗传的物质基础
一、DNA作为遗传物质
Griffith的转化实验(DNA);T2噬菌体感染实验(DNA);植物病毒重建实验(DNA\RNA)。
二、RNA作为遗传物质
生化提取分别获得含RNA的烟草花叶病
毒蛋白质外壳(病毒1)和核酸(病毒2)
抗血清处理,证明杂种病毒的蛋
白质外壳来自病毒1,而非病毒2
杂种病毒的后代的蛋白质外壳表现
为病毒2,而非病毒1
遗传物质是核酸(RNA)而非蛋白质
三、朊病毒的发现与思考
(一)发现:朊病毒是亚病毒的一种,是一种具有传染性的蛋白质致病因子,迄今为止尚未发现该蛋白内含有核酸。
致病机理:其致病作用是由于动物体内正常的蛋白质PrP c改变折叠状态为PrP sc所致,而这二种蛋白质的一级结构并没有改变。
引起人与动物的致死性中枢神经系统疾病,如羊搔痒症(scrapie),牛海绵状脑病(spongiform encephalopathy),人的库鲁病(kuru)、克雅氏病(Creutzfeldt Jakob disease, CJD)等。
Stanley B. Prusiner (1982)提出羊搔痒病因子是一种蛋白质侵染颗粒(proteinaceous infectious particle),并将之称做Prion或Virino,即朊病毒。1997年,Stanley B. Prusiner荣获诺贝尔奖。
(二)思考
1)蛋白质是否可以作为遗传物质?prion是生命的一个特例?还是仅仅为表达调控的一种形式?
2)蛋白质折叠与功能的关系,是否存在折叠密码?
3)DNA→RNA→肽链→蛋白质
第二节质粒和转座因子
质粒(plasmid):一种独立于染色体外,能进行自主复制的细胞质遗传因子,主要存在于各种微生物细胞中。
转座因子(transposable element):位于染色体或质粒上的一段能改变自身位置的DNA序列,
广泛分布于原核和真核细胞中。
质粒和转座因子是细胞中除染色体以外的另外二类遗传因子
一、质粒的分子结构
1、结构
通常以共价闭合环状(covalently closed circle,简称CCC)的超螺旋双链DNA分子存在于细胞中;也发现有线型双链DNA质粒和RNA质粒;
质粒分子的大小:从1kb左右到1000kb,(细菌质粒多在10kb以内)。
2、质粒的检测
1)提取所有胞内DNA后电镜观察;
2)超速离心或琼脂糖凝胶电泳后观察;
3)对于实验室常用菌,可用质粒所带的某些特点,如抗药性初步判断。
对于由于三种构型同时存在时造成的多带现象(提取质粒时造成
或自然存在),可以进行特异性单酶切,使其成为一条带。
特定的质粒提取方法和后处理使染色体和RNA均被除掉。
二、质粒的主要类型
作用:在某些特殊条件下,质粒有时能赋予宿主细胞以特殊的机能;质粒所含的基因对宿主细胞一般是非必需的,从而使宿主得到生长优势。
根据质粒所编码的功能和赋予宿主的表型效应,质粒包括下列主要类型:
致育因子(Fertility factor,F因子)
抗性因子(Resistance factor,R因子)
产细菌素的质粒(Bacteriocin production plasmid)
毒性质粒(virulence plasmid)
代谢质粒(Metabolic plasmid)
隐秘质粒(cryptic plasmid
1、致育因子(Fertility factor,F因子)
又称F 质粒,其大小约100kb ,这是最早发现的一种与大肠杆菌的有性生殖现象(接合作用)有关的质粒。
F 因子能以游离状态(F+)和以与染色体相结合的状态(Hfr)存在于细胞中,所以又称之为附加体(episome)。
携带F 质粒的菌株称为F+菌株(相当于雄性),无F 质粒的菌株称为F-菌株(相当于雌性)。
2、 抗性因子(Resistance factor ,R 因子)
包括抗药性和抗重金属二大类,简称R 质粒。
抗性质粒在细菌间的传递是细菌产生抗药性的重要原因之一。
R100质粒(89kb)可使宿主对下列药物及重金属具有抗性:汞(mercuric ion ,mer )、四环素(tetracycline ,tet )、链霉素(Streptomycin, Str)、磺胺(Sulfonamide, Su)、氯霉素(Chlorampenicol, Cm)、夫西地酸(fusidic acid ,fus ),并且负责这些抗性的基因是成簇地存在于抗性质粒上。
3、 产细菌素的质粒(Bacteriocin production plasmid )
细菌素结构基因、涉及细菌素运输及发挥作用(processing )的蛋白质的基因以及赋予宿主对该细菌素具有“免疫力”的相关产物的基因一般都位于质粒或转座子上,因此,细菌素可以杀死同种但不携带该质粒的菌株。
细菌素一般根据产生菌的种类进行命名:
大肠杆菌(E. coli )产生的细菌素为colicins (大肠杆菌素),而质粒被称为Col 质粒。 由G+细菌产生的细菌素或与细菌素类似的因子与colicins 有所不同,但通常也是由质粒基因编码,有些甚至有商业价值,例如一种乳酸细菌产生的细菌素NisinA 能强烈抑制某些G+细菌的生长,而被用于食品工业的保藏。 4、 毒性质粒(virulence plasmid )
许多致病菌的致病性是由其所携带的质粒引起的,这些质粒具有编码毒素的基因,其产物对宿主(动物、植物)造成伤害。
产毒素大肠杆菌是引起人类和动物腹泻的主要病原菌之一,其中许多菌株含有为一种或多种肠毒素编码的质粒。
苏云金杆菌含有编码δ内毒素(伴孢晶体中)的质粒
根癌土壤杆菌所含Ti 质粒是引起双子叶植物冠瘿瘤的致病因子。 5、 代谢质粒(Metabolic plasmid )
质粒上携带有有利于微生物生存的基因,如能降解某些基质的酶,进行共生固氮,或产生抗生素(某些放线菌)等。
降解质粒:将复杂的有机化合物降解成能被其作为碳源和能源利用的简单形式,环境保护方面具有重要的意义。 假单胞菌:具有降解一些有毒化合物,如芳香簇化合物(苯)、农药(2,4dichlorophenoxyacetic
细菌素
抗生素
抑制或杀死近缘,甚至同种不同株的细菌 较广的抗菌谱 通过核糖体直接合成的多肽类物质 一般是次级代谢产物
编码细菌素的结构基因及相关的基因一般位
于质粒或转座子上 一般无直接的结构基因,相关酶的基因多在
染色体上