植物病原细菌研究方法 ppt课件
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第三章 第二节植物病原原核生物_PPT幻灯片
▪ 病菌大多借切刀的伤口传染， 病株维管束组织被破坏，横 切可见环状维管束组织坏死 并充满黄白色菌脓，稍加挤 压，薯块即沿环状的维管束 内外分离，故称环腐病。
四、植物病原细菌的侵染传播与病害诊断
（一）、植物病原细菌侵染途径
植物病原细菌不能直接侵入植物
原核生物
▪是指含有原核结构的单细胞生物。无内质网、线粒 体等细胞器。 ▪植物病原原核生物: ▪细菌、无细胞壁的菌原体（植原体和螺原体）等， ▪以植物病原细菌为代表重点讲述
第一部分 植物病原细菌
一、植物病原细菌形态和结构
▪ (一)、形态 ▪ 杆状，少数为球状。 ▪ 细菌大都单生，也有双生、
串生和聚生的。
▪ 裂殖。20分钟分裂一次。 ▪ 适温为26—30℃左右，少数例外。如茄青枯菌35℃。
1、细菌的繁殖：
细 菌 的 繁 殖 过 程
2、原核生物的遗传和变异 ▪ 遗传物质是DNA、质粒 ▪ 质粒：独立于核质之外的呈环状结构的遗传因子， 称为质粒，它编码细菌的抗药性或致病性等性状)。 ▪ 核质和质粒共同构成了原核生物的遗传信息库一 基因组。
5.黄单胞菌属(Xanthomonas)
▪ 黄单胞菌属是薄壁菌门一 个成员。
▪ 严格好气性，代谢为呼吸 型。
▪ 黄单胞菌属的成员都是植 物病原菌，模式种是野油 菜黄单胞菌。俗称甘蓝黑 腐病菌，还可引起辣椒细 菌性疮痂病。
十字花科蔬菜黑腐病
厚壁菌门
6.棒形杆菌属 (Clavibacter)
▪ 可侵害5种茄属植物，如马 铃薯环腐病。
三、植物病原细菌分类
植物界
菌物界
动物界
原生生物界
原核生物界
病毒界
（一）、原核生物界分类系统
▪ 原核生物界通常分为4个门，7个纲，35个组群。 ▪ 薄壁菌门：有壁较薄。G-，包括大多数植物病原细菌。 ▪ 厚壁菌门：有壁较厚。G+，包括棒杆菌属、芽孢菌属和链霉菌属。 ▪ 软壁菌门：菌体无壁。包括菌原体、类菌原体。 ▪ 疵壁菌门：属于没有进化的原细菌或古细菌。包括产甲烷细菌和
四、植物病原细菌的侵染传播与病害诊断
（一）、植物病原细菌侵染途径
植物病原细菌不能直接侵入植物
原核生物
▪是指含有原核结构的单细胞生物。无内质网、线粒 体等细胞器。 ▪植物病原原核生物: ▪细菌、无细胞壁的菌原体（植原体和螺原体）等， ▪以植物病原细菌为代表重点讲述
第一部分 植物病原细菌
一、植物病原细菌形态和结构
▪ (一)、形态 ▪ 杆状，少数为球状。 ▪ 细菌大都单生，也有双生、
串生和聚生的。
▪ 裂殖。20分钟分裂一次。 ▪ 适温为26—30℃左右，少数例外。如茄青枯菌35℃。
1、细菌的繁殖：
细 菌 的 繁 殖 过 程
2、原核生物的遗传和变异 ▪ 遗传物质是DNA、质粒 ▪ 质粒：独立于核质之外的呈环状结构的遗传因子， 称为质粒，它编码细菌的抗药性或致病性等性状)。 ▪ 核质和质粒共同构成了原核生物的遗传信息库一 基因组。
5.黄单胞菌属(Xanthomonas)
▪ 黄单胞菌属是薄壁菌门一 个成员。
▪ 严格好气性，代谢为呼吸 型。
▪ 黄单胞菌属的成员都是植 物病原菌，模式种是野油 菜黄单胞菌。俗称甘蓝黑 腐病菌，还可引起辣椒细 菌性疮痂病。
十字花科蔬菜黑腐病
厚壁菌门
6.棒形杆菌属 (Clavibacter)
▪ 可侵害5种茄属植物，如马 铃薯环腐病。
三、植物病原细菌分类
植物界
菌物界
动物界
原生生物界
原核生物界
病毒界
（一）、原核生物界分类系统
▪ 原核生物界通常分为4个门，7个纲，35个组群。 ▪ 薄壁菌门：有壁较薄。G-，包括大多数植物病原细菌。 ▪ 厚壁菌门：有壁较厚。G+，包括棒杆菌属、芽孢菌属和链霉菌属。 ▪ 软壁菌门：菌体无壁。包括菌原体、类菌原体。 ▪ 疵壁菌门：属于没有进化的原细菌或古细菌。包括产甲烷细菌和
植物病理学实验课PPT课件
20 第20页/共23页
21 第21页/共23页
课堂作业
--什么是细菌的喷菌现象？ --喷菌现象的意义？ --简要写出观察喷菌现象的一般步骤？
第22页/共23页
感谢您的观看！
第23页/共23页
--水稻白叶枯病（Xanthomonas oryzae pv. oryzae） --西瓜细菌性果斑病（Acidovorax avenae subsp. citrulli） --梨火疫病菌（Erwinia amylovora） --大白菜软腐病菌（Erwinia carotovora）
（2）细菌喷菌现象
细菌革兰氏染色结果
G-
G+
第17页/共23页
喷菌现象
• 材料：水稻白叶枯病叶片
18 第18页/共23页
实验步骤
• 载玻片上滴加一滴水 • 剪取水稻条斑病菌叶片病健交界处组织块 • 将组织块放于水中 • 盖上盖玻片 • 静置1分钟后于显微镜下观察 • 对光仔细观察组织块周围的变化
19 第19页/共23页
大白菜软腐病
第14页/共23页
• 病原：大白菜软腐病菌（G-）
• 拉丁文：Pectobacterium carotovorum
第15页/共23页
细菌的革兰氏染色
1、初染剂结晶紫 复染
碘液媒染
复染剂(如番红)
结果：蓝紫色的细菌为革兰氏阳性菌；红色的细菌属 于革兰氏阴性菌。
2、革兰氏阳性细菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构 组成，壁厚、类脂质含量低，用乙醇(或丙酮)脱色时细胞 壁脱水、使肽聚糖层的网状结构孔径缩小，透性降低，从 而使结晶紫-碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内，经 脱色和复染后仍保留初染剂的蓝紫色。革兰氏阴性菌则不 同 ， 由 于 其 细 胞 壁 肽 聚 糖第层16页较/共薄23页、 类 脂 含 量 高 ， 所 以 当 脱
第二章 植物病原物ppt课件
原生动物界 根肿菌门：根肿菌属（危害植物根部引起指状肿大）
色菌界 卵菌门：绵霉属、腐霉属、疫霉属、霜霉属、白锈 属 真菌界 壶菌门：节壶菌属 接合菌门：根霉属 子囊菌门 担子菌门 无性真菌类
五界分类系统：真菌界 Ainsworth分类方法 类别 鞭毛菌亚门 接合菌亚门 子囊菌亚门 担子菌亚门 半知菌亚门 营养体 无隔菌丝 无隔菌丝 有隔菌丝 有隔菌丝 有隔菌丝 无性孢子 有性孢子
孢子囊：由菌丝或孢囊梗的顶端细胞膨大而成。
②孢囊孢子：形成于孢子囊内，有细胞壁，没有鞭毛 的无性孢子。 风传 ③分生孢子：产生于菌丝分化而形成的分生孢子梗上 的孢子。 外生 脱落 风传
分生孢子梗直接着生在寄主表面 分生孢子梗聚生在球状而有孔口 的结构——分生孢子器 分生孢子梗聚生在盘状结构—— 分生孢子盘 数量大 寿命短 多次产生 容易传播 病害大量侵染 的器官
分生孢子梗 着生方式
黑根霉
2.有性生殖 有性生殖过程分三步：质配、核配、减数分裂
常见的有性孢子有： 休眠孢子囊、卵孢子、子囊孢子、接合孢子、担孢子。 ① 休眠孢子囊：由两个游动配子配合形成的合子发育 而成，萌发时发生减数分裂释放出单倍体的游动孢子。
②卵孢子：由两个异形（少数同型）配子囊（藏卵器和 雄器）经过质配和核配形成厚壁、双倍体的卵孢子。
三、生活史：是指从一种孢子萌发开始，经过一定的营养生
长和繁殖阶段，最后又产生同一种孢子的过程。
孢子
萌发
营养生长
无性生殖 无性孢子
有性生殖
孢子
萌发
菌丝体
萌发
有性器官
有性孢子
四、真菌的主要类群： 动物界 植物界 原核生物界 原生生物界 植物界 真菌界 动物界
原核总界（细菌总界）：古细菌界、真细菌界 真核总界：原始动物界、原生动物界、色菌界、真菌界、 植物界、动物界
植物病原菌物PPT精品文档
数弱寄生。
.
4
1． 形态特点
1） 营养体：发达无 隔的菌丝体，老菌丝 或受伤的菌丝可产生 分隔。细胞壁成分主 要为几丁质。有时可 产生假根。联结两丛 假根的菌丝称为匍匐 丝。
.
5
2） 无性繁殖：产生孢子囊，孢子囊内产生孢子 囊孢子—静孢子。靠气流传播。
3）有性生殖：接合孢子。
.
6
同宗配合：在单一菌体上产生配子囊结合产生接 合孢子。
.
24
子囊盘(apothecium)：典型的呈盘状或杯状，上部 敞开，子囊排列成子实层。
.
25
四）分类特征
分类根据： 子囊果的有无； 子囊果的类型； 子囊壁的特点和子囊排列方式等。
分为6纲。
.
26
三、半子囊菌纲(Hemiascomycetes)
营养体单细胞或不发达的菌丝体。无产囊丝，子 囊直接由合子或单细胞形成。不形成子囊果， 子囊裸生，壁薄，无孔□以壁胀裂或消解方式 释放子囊孢子。
子囊菌门的主要特点：有性生殖产生子囊，子囊 中产生子囊孢子。
.
16
生活史明显区分为两个阶段： 有性阶段（sexual stage）和无性阶段(asexual
stage) 完全时期(perfect stage)、不完全时期
(imperfect stage) 有性态(teleomorph)、无性态(anamorph)。
产囊体 产囊丝钩 子囊母细胞 幼子囊
有丝分裂
产囊丝 双核分裂 核配（2N） 减数分裂
子囊孢子（N）
.
19
2.子囊的类型：
原壁子囊(prototunicate)：具有一层很薄的囊膜，子囊 孢子通过囊壁的破裂或消解释放。
•单壁子囊（unitunicate）：囊膜单层，子囊孢子通过囊顶部小 孔、狭缝或囊盖而主动释放。
.
4
1． 形态特点
1） 营养体：发达无 隔的菌丝体，老菌丝 或受伤的菌丝可产生 分隔。细胞壁成分主 要为几丁质。有时可 产生假根。联结两丛 假根的菌丝称为匍匐 丝。
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5
2） 无性繁殖：产生孢子囊，孢子囊内产生孢子 囊孢子—静孢子。靠气流传播。
3）有性生殖：接合孢子。
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6
同宗配合：在单一菌体上产生配子囊结合产生接 合孢子。
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24
子囊盘(apothecium)：典型的呈盘状或杯状，上部 敞开，子囊排列成子实层。
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25
四）分类特征
分类根据： 子囊果的有无； 子囊果的类型； 子囊壁的特点和子囊排列方式等。
分为6纲。
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三、半子囊菌纲(Hemiascomycetes)
营养体单细胞或不发达的菌丝体。无产囊丝，子 囊直接由合子或单细胞形成。不形成子囊果， 子囊裸生，壁薄，无孔□以壁胀裂或消解方式 释放子囊孢子。
子囊菌门的主要特点：有性生殖产生子囊，子囊 中产生子囊孢子。
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生活史明显区分为两个阶段： 有性阶段（sexual stage）和无性阶段(asexual
stage) 完全时期(perfect stage)、不完全时期
(imperfect stage) 有性态(teleomorph)、无性态(anamorph)。
产囊体 产囊丝钩 子囊母细胞 幼子囊
有丝分裂
产囊丝 双核分裂 核配（2N） 减数分裂
子囊孢子（N）
.
19
2.子囊的类型：
原壁子囊(prototunicate)：具有一层很薄的囊膜，子囊 孢子通过囊壁的破裂或消解释放。
•单壁子囊（unitunicate）：囊膜单层，子囊孢子通过囊顶部小 孔、狭缝或囊盖而主动释放。
实验四 植物病原菌物PPT课件
子囊果为子囊壳，均为节肢动物寄生菌
2
• 半子囊菌纲
• 外囊菌属(Taphrina)
子囊长圆筒形，平行排列在植物表面，无子囊 果，子囊孢子通过芽殖产生芽孢子
引起叶扭曲，缩叶，丛枝等症状
代表种畸形外囊菌(T. deformans) 引起桃缩叶病（Peach leaf curl）
3
桃缩叶病症状
4
5
Байду номын сангаас整囊菌纲-散囊菌属(曲霉)
A. Severely infected leaves and shoots of C. arborescens; B. general view of powdery mildew infection of C. arborescens; C. numerous2c9hasmothecia on the leaf lower surface; D. chasmothecia at different stages of development.
• 闭囊壳上菌丝状附属丝短，闭囊壳内含多 个子囊，子囊内含4-8个子囊孢子，分生孢 子梗基部膨大，分生孢子串生。
12
13
无性时期
14
有性时期
15
吸器
16
• 单丝壳属(Sphaerotheca)
附属丝菌丝状，闭囊壳内只有一个子囊 S. fuliginea 引起瓜类、豆类白粉病
17
• 叉丝单囊壳属 (Podosphaera)
实验四 植物病原菌物（四）
子囊菌门真菌 Ascomycotina
1
分为6个纲（Ainsworth系统）
纲名 半子囊菌纲 不整囊菌纲
特征 无子囊果，子囊裸生 子囊果为闭囊壳，子囊散生，后期子囊消解
《普通植物病理学》课件
05
植物病理学应用与前景
植物病理学在农业生产中的应用
植物病害防治
通过研究植物病害的病原、发生 规律和防治方法，有效控制病害 的传播和危害，保障农业生产的
高产、优质和高效。
植物检疫
对植物和植物产品进行检验和检 疫，防止危险性植物病原体的传 入和扩散，保护农业生产安全。
抗病育种
利用植物病理学的理论和方法， 培育抗病性强的作物品种，提高 农作物的抗病能力，减少农药使
生理生化鉴定法
总结词
利用生理生化指标进行鉴定。
详细描述
通过测定病原菌的生理生化特性，如酶活性、代谢产物等，进行病原菌的分类和鉴定。
分子生物学鉴定法
总结词
基于分子生物学技术进行鉴定。
详细描述
利用分子生物学技术，如DNA指纹图谱、PCR等，对病原菌的基因组进行分析和比对，进行病原菌的 精确鉴定和分类。
寄生性种子植物的分类
01
根据寄生方式和习性，将寄生性种子植物分为全寄生和半寄生
两种类型。
寄生性种子植物的传播方式
02
主要通过鸟类和其他动物传播。
寄生性种子植物的致病机制
03
它们通常寄生在寄主的根部或茎部，吸取寄主的养分和水分，
导致寄主生长受阻或死亡。
03
植物病害的流行与防治
植物病害的流行
植物病害流行的基本要素
抗病品种的选育和应用
通过选育和应用抗病品种，提高植物自身的抗病能力，减少化学药剂的使用和环境污染。
加强植物检疫和监测
通过加强植物检疫和监测，及时发现和防止植物病害的传播和扩散，保护农业生产的安全 和稳定。
04
植物病理学研究方法
形态学鉴定法
总结词
基于植物病状的形态特征进行鉴 定。
2-植物病原真菌PPT课件
菌丝在各菌种之间差异有限，透明、有色、暗 色、有无隔、直径大小、横隔的构造和隔膜处是否 小于菌丝直径，表面有无疣状物，是否等径等。
真菌的营养体没有根、茎、叶的分化，没有维 管组织，可直接从环境中吸收养分，具有输送和贮 存养分的功能。
隔膜的类型：
全 封 闭 型 ： 多 数 无 隔 菌 丝 当 菌
丝形成繁殖器官、衰老或受伤时常 形成完全封闭的隔膜。
种类多：全世界约有150万种，只有约7 万种为文献所记载。中国：8-10万种，已 知8000种。
进化史长：４亿多年。
分布广： 地球表面到处都有
繁殖快：锈菌夏孢子堆有1000个夏孢子， 在一个生长季节，可繁殖4-5代，夏孢子数 可达1012个。
二、真菌与人类的关系
1、益处
（1）食品与食品加工：
菌丝断裂成短段或 菌丝细胞相互脱 离产生孢子
节孢子（粉孢 子）
厚垣孢子 无规则断裂
无性繁殖：断裂
厚垣孢子（Chlamydospore）
外生孢子：外生
在特化的菌丝上 的无性孢子，称 作分生孢子。
内生孢子（细胞质割裂产生）
孢囊孢子(Sporangiospores)：接合菌的孢子囊内 的孢子没有鞭毛，称作孢囊孢子。
子实体都是由两部分组成的，一为子实层，一为 由菌丝组成的支持保护结构。
子囊菌纲的子实体特称为子囊果，并分为球 形的闭囊壳，瓶状的子囊壳和子囊腔,盘状 或杯状的子囊盘4种类型。
在担子菌纲中，子实体也特称为担子果，其
形状、大小、质地、颜色更是形形色色。如伞 状、半圆形、马蹄形、喇叭形、球形、头状、 耳状、笔状、珊瑚状等。许多为肉质，如蘑菇， 也有的木质或木栓质，如灵芝、树舌；还有的 为革质，如云芝；胶质的如木耳、银耳等。
3植物病原物：细菌ppt课件
✓重要成员：柑橘螺原体(S. citri)，引起柑橘等植物的僵化
病。柑橘受害后表现为枝条直立，节间缩短，叶变小，丛枝或 丛芽，树皮增厚，植株矮化，且全年可开花，但结果小而少， 多畸形，易脱落。
49
50
11．植原体属(Phytoplasma)
✓即原来的类菌原体(Mycoplasma-like organism，MLO)。 ✓菌体的基本形态为圆球形或椭圆形，但在韧皮部筛管中或 在穿过细胞壁上的胞间连丝时，可以成为变形体状，如丝状、 杆状或哑铃状等。 ✓目前还不能人工培养。 ✓早期的分类和鉴定主要依据生物学特征，如寄主、症状、 介体专化性等。 ✓1993年，Kirkpatrick和Sears建议成立植原体属。 ✓常见的植原体病害有桑萎缩病、泡桐丛枝病、枣疯病等。
periplasmic space =LPS layers
G+ 细菌: 厚肽聚糖层使结晶紫和碘复合物不易被酒精洗掉
G- 细菌: LPS（脂多糖）层和薄肽聚糖层使结晶紫和碘复合物易
被酒精洗掉
15
(四)培养性状 1.植物病原细菌： 多数为死体营养生物，可人工培养，在固体培养基上形成白
色、灰白色或黄色菌落；好氧； 培 养 基 pH ： 中 性 偏 碱 ； T ： 26—30℃ ， 33 ～ 40℃ 停 止 生 长 ，
2-细胞壁（成分：肽聚糖、脂类和蛋白质）
• 问题-卵菌的细胞壁成分是什么？ 真菌的细胞壁成分是什么？
9
3-细胞壁内结构：
1-细胞质膜 2-鞭毛(flagellum)：细胞质膜下粒状鞭毛基体上产 生，穿过细胞壁和黏质层延伸到体外，鞭毛基部有鞭 毛鞘。
据着生位置分为： 极鞭：着生在菌体一端或两端的鞭毛 周鞭：着生在菌体四周的鞭毛 鞭毛数目和着生位置在属的分类上有重要意义。
病。柑橘受害后表现为枝条直立，节间缩短，叶变小，丛枝或 丛芽，树皮增厚，植株矮化，且全年可开花，但结果小而少， 多畸形，易脱落。
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11．植原体属(Phytoplasma)
✓即原来的类菌原体(Mycoplasma-like organism，MLO)。 ✓菌体的基本形态为圆球形或椭圆形，但在韧皮部筛管中或 在穿过细胞壁上的胞间连丝时，可以成为变形体状，如丝状、 杆状或哑铃状等。 ✓目前还不能人工培养。 ✓早期的分类和鉴定主要依据生物学特征，如寄主、症状、 介体专化性等。 ✓1993年，Kirkpatrick和Sears建议成立植原体属。 ✓常见的植原体病害有桑萎缩病、泡桐丛枝病、枣疯病等。
periplasmic space =LPS layers
G+ 细菌: 厚肽聚糖层使结晶紫和碘复合物不易被酒精洗掉
G- 细菌: LPS（脂多糖）层和薄肽聚糖层使结晶紫和碘复合物易
被酒精洗掉
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(四)培养性状 1.植物病原细菌： 多数为死体营养生物，可人工培养，在固体培养基上形成白
色、灰白色或黄色菌落；好氧； 培 养 基 pH ： 中 性 偏 碱 ； T ： 26—30℃ ， 33 ～ 40℃ 停 止 生 长 ，
2-细胞壁（成分：肽聚糖、脂类和蛋白质）
• 问题-卵菌的细胞壁成分是什么？ 真菌的细胞壁成分是什么？
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3-细胞壁内结构：
1-细胞质膜 2-鞭毛(flagellum)：细胞质膜下粒状鞭毛基体上产 生，穿过细胞壁和黏质层延伸到体外，鞭毛基部有鞭 毛鞘。
据着生位置分为： 极鞭：着生在菌体一端或两端的鞭毛 周鞭：着生在菌体四周的鞭毛 鞭毛数目和着生位置在属的分类上有重要意义。
植物病理学 第三讲 植物病原菌物 图文
6.大多数植物上的寄生(地上和地下)， 部分霜霉目水生或土壤中 腐生；
7.低等霜霉菌孢子囊不脱落，高等的霜霉菌容易脱落，借风雨传 播，在病害远距离传播中具有重要作用；
8. 在自由水中，游动孢子囊可通过释放游动孢子萌发；
9. 在无水、高湿时游动孢子囊可直接萌发成芽管。
2、霜霉目菌物的分类
可分4个科（根据孢囊梗的特征）。 ① 腐霉科：孢子囊长在营养菌丝上，孢囊梗形态和菌丝无
第三节 卵菌门菌物(Oomycota)
一、卵菌的基本特征 1. 共同特征：有性繁殖产生卵孢子，这类菌物统称卵菌; 2. 营养体大多是发达的无隔菌丝体，少数低等的为多核有
细胞壁的单细胞； 3. 营养体为二倍体； 4. 细胞壁主要成分为纤维素； 5. 无性繁殖形成游动孢子囊，内生多个异型双鞭毛(1根茸
个种( P. litchii)
荔枝霜疫霉病(P. litchii)
5、霜霉科
① 孢子囊长在特殊分化的孢囊梗上，有限生长型； ② 均为活体营养型(专性寄生菌)； ③ 侵染植物，在植物表面形成霜状霉层霜霉病霜霉菌 ④ 含有7个属,其中5个属为重要的植物病原菌物。
（1）单轴霉属(Plasmopara)
差别，孢囊梗无限生长型 ② 霜疫霉科：孢囊梗多级有限生长型； ③ 霜霉科：孢子囊长在有特化的孢囊梗上，孢囊梗有限生
长； ④ 白锈菌科：孢囊梗短棍棒形，顶生一串孢子囊，无限生
长
3、腐霉科
• 孢子囊长在营养菌丝上，孢囊梗 形态和菌丝无区别；
• 孢囊梗为无限生长型(通过无限的 层出产生孢子囊)
① 腐霉属(Pythium)
dissemination (1°)
overwintering
dissemination (2°)
病原微生物检测方法 27页PPT文档
直接法是在检测样品上直接滴加已知特异性荧 光标记的抗血清,经洗涤后在荧光显微镜下观 察结果。间接法是在检测样品上滴加已知的细 菌特异性抗体,待作用后经洗涤,再加入荧光标 记的第二抗体。
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11
酶联免疫技术
酶联免疫技术是根据抗原- 抗体的免疫反应与 酶的高效催化作用原理有机结合,通过酶催化 底物进而发生一系列的化学反应,使溶液呈现 出颜色变化,从而显示抗原抗体特异性反应的 存在。
可以分析得出SARS与非SARS 病人血清中的 蛋白质成分变化。该技术不是利用单独的蛋白 质峰的出现和消失来判断SARS ,而是用5 个蛋 白质峰的出现和消失来判断,好比刑侦破案中 甄别5 个手指的指纹,故此称为“指纹图谱”。
8
八，LAMP技术
环介导等温扩增(loop—mediated isothermal amplification，LAMP)技术是近年来发展出的一 种敏感、特异、方便快捷的核酸扩增技术。与传 统PCR方法相比，LAMP不需要热循环，为等温 扩增。且由于LAMP反应中产生大量的副产物一 白色焦磷酸钾沉淀，扩增产物可不经过电泳，通 过肉眼观察或浊度计即可判定结果。
2
二，血清免疫学方法
免疫学技术是利用特异性抗原抗体反应,观察和研究 组织细胞、特定抗原(抗体)的定性和定量技术。为了 显示和观察这种抗原抗体反应,需要预先将某种标记 物结合到抗体上,借标记物的荧光或酶的有色反应、 放射性或高电子密度,在光镜或电镜下进行定性、定 位或定量研究。
荧光抗体技术 酶联免疫技术
用于检测：丙型肝炎病毒(HCV) 、严重急性呼吸 综合征冠状病毒(SARS—CoV) 、乙脑病毒(JEV) 、 甲型流感病毒(AIV) 、 腮腺炎病毒(MV)等。
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酶联免疫技术
酶联免疫技术是根据抗原- 抗体的免疫反应与 酶的高效催化作用原理有机结合,通过酶催化 底物进而发生一系列的化学反应,使溶液呈现 出颜色变化,从而显示抗原抗体特异性反应的 存在。
可以分析得出SARS与非SARS 病人血清中的 蛋白质成分变化。该技术不是利用单独的蛋白 质峰的出现和消失来判断SARS ,而是用5 个蛋 白质峰的出现和消失来判断,好比刑侦破案中 甄别5 个手指的指纹,故此称为“指纹图谱”。
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八，LAMP技术
环介导等温扩增(loop—mediated isothermal amplification，LAMP)技术是近年来发展出的一 种敏感、特异、方便快捷的核酸扩增技术。与传 统PCR方法相比，LAMP不需要热循环，为等温 扩增。且由于LAMP反应中产生大量的副产物一 白色焦磷酸钾沉淀，扩增产物可不经过电泳，通 过肉眼观察或浊度计即可判定结果。
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二，血清免疫学方法
免疫学技术是利用特异性抗原抗体反应,观察和研究 组织细胞、特定抗原(抗体)的定性和定量技术。为了 显示和观察这种抗原抗体反应,需要预先将某种标记 物结合到抗体上,借标记物的荧光或酶的有色反应、 放射性或高电子密度,在光镜或电镜下进行定性、定 位或定量研究。
荧光抗体技术 酶联免疫技术
用于检测：丙型肝炎病毒(HCV) 、严重急性呼吸 综合征冠状病毒(SARS—CoV) 、乙脑病毒(JEV) 、 甲型流感病毒(AIV) 、 腮腺炎病毒(MV)等。
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谢谢
植物病原细菌 ppt课件
晕斑病
丁香假单胞菌菜豆生致病变种
45
丁香假单胞菌流泪致病变种
46
4 布克氏菌属（Berkholderia）Yabuueni,1993 是从假单胞菌属第2组独立出来的。G+C 64-
68mol%。 模 式 种 是 引 起 洋 葱 腐 烂 病 的 洋 葱 布 克 氏 菌 （ B. cepacia）.
20
三）侵入后的扩展 1 侵染薄壁细胞组织病害:病菌先在薄壁组织的
细胞间隙蔓延，当寄主细胞受到损伤或死亡 后再进入细胞内。 原因：
分泌果胶酶，产生酸性物质，挤向四周 使细胞死亡或由于胶状物质渗透压高，使四 周细胞产生质壁分离而死亡；
分泌毒素，使四周细胞中毒而死。
21
2 维管束组织病害:通过薄壁组织或水孔后再 进入维管束，在木质部或韧皮部扩展。 稻白叶枯病菌在薄壁细胞中蔓延很慢， 形成局部的枯斑，进入维管束组织后，蔓 延加快，形成长条形叶枯症状。
18
二）决定侵入途径的因素
1 寄生性的强弱：寄生性弱的细菌一般都是从伤 口侵入;寄生性强的细菌，较能适应寄生的生活， 就不一定要从伤口侵入。
2 引起叶斑、叶枯症状的病原细菌，多可从自然 孔口侵入，而引起萎蔫、腐烂和瘤肿等症状的则 多是从伤口侵入。
19
3 不同分类地位的细菌侵入途径有所不同。 如假单胞菌属和黄单胞菌属，自然孔口侵入 为主; 土壤杆菌属、棒形杆菌属和欧文氏菌属的以 伤口侵入为主。
笨，没有学问无颜见爹娘 ……” • “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
4
真菌
无性 生殖
有性 生殖
游动
孢子
胞囊 孢子
分生 孢子
厚垣 孢子
休眠 孢子囊
卵孢子
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除了球菌、杆菌、蛆旋菌三种基本形态外，还有许多 具其他形态的细菌。例如柄杆菌细胞上有柄、菌丝、附 器等细胞质伸出物，细胞呈杆状或梭状，并有特征性的 细柄；球衣菌能形成衣峭，杆状的细胞呈链状排列在衣 鞘内而成为丝状,而支原体由于只有细胞膜，没有纫胞壁， 故细胞柔软，形态多变，具有高度多形性。另外，人们 还发现了细胞呈星形和方形的细菌。
细菌的三种基本形态: 球状、杆状和螺旋状
1. 球 菌
单球菌
双球菌
链球菌四联球菌ຫໍສະໝຸດ 八叠球菌葡萄球菌2.杆菌
杆菌是细菌中种类最多的类型,因菌种不同, 菌体细胞的长短、粗细等都有所差异。
杆菌的形态：短杆状、长杆状、棒杆状、梭 状、梭杆状、月亮状、分枝状、竹节状等；按 杆菌细胞的排列方式则有链状、栅状、“八” 字状以及有鞘衣的丝状等。
2.杆 菌
短杆菌
长杆菌 梭状芽孢杆菌
2.杆 菌
单杆菌
链状杆菌
2.杆 菌 杆菌细胞两端的形态特征
3、螺旋菌
螺旋状的细菌称为螺旋菌。 根据其弯曲情况分为： 弧菌：螺旋不满一圈，菌体呈弧形或逗号形
例：霍乱弧菌、逗号弧菌 螺旋菌：螺旋满2—6环，螺旋状
例：干酪螺菌 螺旋体：旋转周数在6环以上，菌体柔软。
①革兰氏染色法：
革兰氏染色法是细菌细胞的复合染色法，由丹麦
医生Hans Christian Gram于1884年创立。
基本步骤： 涂片固定—— 结晶紫初染1min—— 碘液媒染
1min——95%乙醇脱色0.5min—— 番红复染 min 结果:
革兰氏阳性菌——紫色； 革兰氏阴性菌——红色。
实验材料
1500个大肠杆菌头尾相接等于3mm;
109个大肠杆菌重1 mg.
由于菌种不同，细菌的大小存在很大的差异；对于同一 个菌种，细胞的大小也常随着菌龄变化。另外，对于同一 个菌种染色前后其细胞大小都有所不同。所以，有关细菌 大小的记载，常是平均值或代表性数值。
细菌细胞的大小
菌名
乳链球菌 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 霍乱弧菌
直径或宽×长 （ μm × μm ）
0.5 ~1 0.8 ~1 0.5 × (1 ~3) (0.8 ~1.2) ×( 1.2~3) (0.2 ~ 0.6) ×(1 ~ 3)
（二）、 细菌的形态
不同细菌的形态可以说是千差万别，丰富多彩，但就 单个有机体而言，其基本形态可分为球状、杆状与螺旋 状三种.
植物病原细菌的革兰氏染色
（细菌的革兰氏染色反应是细菌分类鉴定的一个重要特征）
细菌细胞壁的结构
❖革兰氏阳性菌细胞壁：由肽聚糖和磷壁酸组成
磷壁酸：占40%。G+
菌所特有,其主链由数十 个磷酸甘油或磷酸核糖 醇组成,有的还有由D— Ala和还原糖组成的侧链。
肽聚糖:
占30~70% ,不同菌种中肽 聚糖(肽链)组分不同。
第三步：酒精脱色，细胞壁成分和构造不同，出现不同的反 应；
G+ 菌：细胞壁厚，肽聚糖含量高，交联度大，当乙醇脱色 时，肽聚糖因脱水而孔径缩小，故结晶紫-碘复合物被阻留 在细胞内，细胞不能被酒精脱色，仍呈紫色；
Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩， 因其含脂量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物 溶出细胞壁，酒精将细胞脱色，细胞无色，沙黄复染后呈红 色。
毛发状的结构。 鞭毛具有运动功能，一般认为鞭毛靠鞭毛丝旋转而 动，它们是细菌的“运动器官”。
植物保护学研究方法系列专题
植物病原细菌研究方法
内容提纲：
➢ 细菌的基本形态特征 ➢ 常规细菌生理生化检测方法 ➢ 细菌种类鉴定方法 ➢ 植物病原细菌检测和细菌病害诊断方法 ➢ 有益细菌的利用研究
细菌的基本形态特征
细菌（bacteria）是单细胞原核微生物， 个体微小，形态简单，以二等分裂方式繁殖。 在自然界中，细菌分布最广、数量最多。
例：梅毒密螺旋体
3、螺旋菌
弧菌
螺旋菌
螺旋体
细菌的特殊形态： 柄细菌、肾形菌、臂微菌、网格硫细
菌、贝日阿托氏菌(丝状)、具有子实体的粘 细菌、三角形、方形等特殊形态的细菌。
细菌的特殊形态
二、细菌的细胞结构
基本结构包括： 细胞壁、细胞膜、细胞质、核区、 间体、核糖体、气泡和储藏物。 特殊结构包括： 荚膜、鞭毛、纤毛、芽孢。
①革兰氏染色法
阳性菌 阴性菌
革兰氏染色阴性——大肠杆菌
革兰氏染色阳性——枯草芽孢杆菌
注：
（1）、实验细菌为活跃生长期的培养物； （2）、菌液不能太浓，涂片不宜过厚，造成假阳性； （3）、火焰固定涂片，以载玻片不烫手为宜； （4）、脱色时间把握好，过长，假阴性；过短，假阳性。
✓细菌鞭毛染色
鞭毛：某些细菌表面由细胞内生出的细长、波曲、
待测细菌 枯草芽孢杆菌（G+） 甘蓝黑腐病菌（G-） 染液：结晶紫草酸铵染剂、鲁戈尔碘液、复染剂（番红O） 用具：移植饵、清洁无脂载玻片
示范图
清洁无脂载玻片
阳性对照菌
（紫色或蓝黑色）
待测菌
阴性对照菌
（红色）
对照菌呈现正确颜色，实验才为成功
简单染色
制备涂片标本→染色
涂片
干燥
固定
镜检
水洗、吸干
染色1min
细菌的形态和大小 细菌的细胞结构 细菌的繁殖与群体形态
（一）细菌的大小
细菌大小的测定： (1)测量： 测微尺
(2)长度单位：微米(μm)
(3)表示：
球菌：直径 杆菌： 宽×长 螺菌： 宽、长、螺距
通常球菌直径：0.2 — 1.5 μm，
杆菌:长1— 5 μm, 宽0.5— 1 μm。
例如：大肠杆菌：平均长度：2 μm ； 宽度0.5μm
细菌细胞结构
1.固体斜面培养
2. 液体培养基
3. 半固体培养
植物病原细菌概述
绝大多数为好气性细菌；生长温度大多为2528℃，少数可以20℃或在35℃中（如青枯菌） 生长。
植物病原细菌都不产生芽孢，因此对高温比较 敏感，一般在50℃左右的热水中处理10分钟即失 活，适宜的pH为6-7。
常规细菌生理生化检测方法
❖革兰氏阴性菌细胞壁：分内壁层和外壁层。
外壁层：位于肽聚糖层的外
部。 脂多糖; 脂蛋白、
包括: 蛋白质层: 基质蛋白、 外壁蛋白;
磷脂.
内壁层：紧贴胞膜,仅由
1—2层肽聚糖分子构成,占细 胞壁干重5-10%,无磷壁酸。
❖革兰氏染色的原理
❖革兰氏染色原理：
第一步：结晶紫使菌体着上紫色；
第二步：碘和结晶紫形成大分子复合物，分子大，能被细胞 壁阻留在细胞内；
细菌的三种基本形态: 球状、杆状和螺旋状
1. 球 菌
单球菌
双球菌
链球菌四联球菌ຫໍສະໝຸດ 八叠球菌葡萄球菌2.杆菌
杆菌是细菌中种类最多的类型,因菌种不同, 菌体细胞的长短、粗细等都有所差异。
杆菌的形态：短杆状、长杆状、棒杆状、梭 状、梭杆状、月亮状、分枝状、竹节状等；按 杆菌细胞的排列方式则有链状、栅状、“八” 字状以及有鞘衣的丝状等。
2.杆 菌
短杆菌
长杆菌 梭状芽孢杆菌
2.杆 菌
单杆菌
链状杆菌
2.杆 菌 杆菌细胞两端的形态特征
3、螺旋菌
螺旋状的细菌称为螺旋菌。 根据其弯曲情况分为： 弧菌：螺旋不满一圈，菌体呈弧形或逗号形
例：霍乱弧菌、逗号弧菌 螺旋菌：螺旋满2—6环，螺旋状
例：干酪螺菌 螺旋体：旋转周数在6环以上，菌体柔软。
①革兰氏染色法：
革兰氏染色法是细菌细胞的复合染色法，由丹麦
医生Hans Christian Gram于1884年创立。
基本步骤： 涂片固定—— 结晶紫初染1min—— 碘液媒染
1min——95%乙醇脱色0.5min—— 番红复染 min 结果:
革兰氏阳性菌——紫色； 革兰氏阴性菌——红色。
实验材料
1500个大肠杆菌头尾相接等于3mm;
109个大肠杆菌重1 mg.
由于菌种不同，细菌的大小存在很大的差异；对于同一 个菌种，细胞的大小也常随着菌龄变化。另外，对于同一 个菌种染色前后其细胞大小都有所不同。所以，有关细菌 大小的记载，常是平均值或代表性数值。
细菌细胞的大小
菌名
乳链球菌 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 霍乱弧菌
直径或宽×长 （ μm × μm ）
0.5 ~1 0.8 ~1 0.5 × (1 ~3) (0.8 ~1.2) ×( 1.2~3) (0.2 ~ 0.6) ×(1 ~ 3)
（二）、 细菌的形态
不同细菌的形态可以说是千差万别，丰富多彩，但就 单个有机体而言，其基本形态可分为球状、杆状与螺旋 状三种.
植物病原细菌的革兰氏染色
（细菌的革兰氏染色反应是细菌分类鉴定的一个重要特征）
细菌细胞壁的结构
❖革兰氏阳性菌细胞壁：由肽聚糖和磷壁酸组成
磷壁酸：占40%。G+
菌所特有,其主链由数十 个磷酸甘油或磷酸核糖 醇组成,有的还有由D— Ala和还原糖组成的侧链。
肽聚糖:
占30~70% ,不同菌种中肽 聚糖(肽链)组分不同。
第三步：酒精脱色，细胞壁成分和构造不同，出现不同的反 应；
G+ 菌：细胞壁厚，肽聚糖含量高，交联度大，当乙醇脱色 时，肽聚糖因脱水而孔径缩小，故结晶紫-碘复合物被阻留 在细胞内，细胞不能被酒精脱色，仍呈紫色；
Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩， 因其含脂量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物 溶出细胞壁，酒精将细胞脱色，细胞无色，沙黄复染后呈红 色。
毛发状的结构。 鞭毛具有运动功能，一般认为鞭毛靠鞭毛丝旋转而 动，它们是细菌的“运动器官”。
植物保护学研究方法系列专题
植物病原细菌研究方法
内容提纲：
➢ 细菌的基本形态特征 ➢ 常规细菌生理生化检测方法 ➢ 细菌种类鉴定方法 ➢ 植物病原细菌检测和细菌病害诊断方法 ➢ 有益细菌的利用研究
细菌的基本形态特征
细菌（bacteria）是单细胞原核微生物， 个体微小，形态简单，以二等分裂方式繁殖。 在自然界中，细菌分布最广、数量最多。
例：梅毒密螺旋体
3、螺旋菌
弧菌
螺旋菌
螺旋体
细菌的特殊形态： 柄细菌、肾形菌、臂微菌、网格硫细
菌、贝日阿托氏菌(丝状)、具有子实体的粘 细菌、三角形、方形等特殊形态的细菌。
细菌的特殊形态
二、细菌的细胞结构
基本结构包括： 细胞壁、细胞膜、细胞质、核区、 间体、核糖体、气泡和储藏物。 特殊结构包括： 荚膜、鞭毛、纤毛、芽孢。
①革兰氏染色法
阳性菌 阴性菌
革兰氏染色阴性——大肠杆菌
革兰氏染色阳性——枯草芽孢杆菌
注：
（1）、实验细菌为活跃生长期的培养物； （2）、菌液不能太浓，涂片不宜过厚，造成假阳性； （3）、火焰固定涂片，以载玻片不烫手为宜； （4）、脱色时间把握好，过长，假阴性；过短，假阳性。
✓细菌鞭毛染色
鞭毛：某些细菌表面由细胞内生出的细长、波曲、
待测细菌 枯草芽孢杆菌（G+） 甘蓝黑腐病菌（G-） 染液：结晶紫草酸铵染剂、鲁戈尔碘液、复染剂（番红O） 用具：移植饵、清洁无脂载玻片
示范图
清洁无脂载玻片
阳性对照菌
（紫色或蓝黑色）
待测菌
阴性对照菌
（红色）
对照菌呈现正确颜色，实验才为成功
简单染色
制备涂片标本→染色
涂片
干燥
固定
镜检
水洗、吸干
染色1min
细菌的形态和大小 细菌的细胞结构 细菌的繁殖与群体形态
（一）细菌的大小
细菌大小的测定： (1)测量： 测微尺
(2)长度单位：微米(μm)
(3)表示：
球菌：直径 杆菌： 宽×长 螺菌： 宽、长、螺距
通常球菌直径：0.2 — 1.5 μm，
杆菌:长1— 5 μm, 宽0.5— 1 μm。
例如：大肠杆菌：平均长度：2 μm ； 宽度0.5μm
细菌细胞结构
1.固体斜面培养
2. 液体培养基
3. 半固体培养
植物病原细菌概述
绝大多数为好气性细菌；生长温度大多为2528℃，少数可以20℃或在35℃中（如青枯菌） 生长。
植物病原细菌都不产生芽孢，因此对高温比较 敏感，一般在50℃左右的热水中处理10分钟即失 活，适宜的pH为6-7。
常规细菌生理生化检测方法
❖革兰氏阴性菌细胞壁：分内壁层和外壁层。
外壁层：位于肽聚糖层的外
部。 脂多糖; 脂蛋白、
包括: 蛋白质层: 基质蛋白、 外壁蛋白;
磷脂.
内壁层：紧贴胞膜,仅由
1—2层肽聚糖分子构成,占细 胞壁干重5-10%,无磷壁酸。
❖革兰氏染色的原理
❖革兰氏染色原理：
第一步：结晶紫使菌体着上紫色；
第二步：碘和结晶紫形成大分子复合物，分子大，能被细胞 壁阻留在细胞内；