[医药]急性毒性试验

有毒（LD50 25～ 200）
非啮齿类
（发现毒理学研究）
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5
怎么做？
急性毒性试验的基本要求
※两种动物 ※两种性别 ※两种给药途径
啮齿类 非啮齿类
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两种动物：充分暴露受试物毒性, 若未采 用非啮齿类动物进行急性毒性试验，应 阐明其合理性。
两种给药途径：通常，给药途径应至少 包括临床拟用途径和一种能使原形药物 较完全进入循环的途径（如静脉注射）。 如果临床拟用途径为静脉给药，则仅此 一种途径即可。
个途径 ※如不能静脉给药可改为其它途径
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怎么做？
剂量
※化学药物最高剂量 静脉给药：2 g/kg 口服给药：2-5 g/kg
※临床拟用剂量的100-300倍
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怎么做？
给药容量：各剂量组应按等容量，不等浓 度的给药原则
最大给药容量：可参考相关的文献
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怎么做？
口服（包括灌胃）给药前通常禁食过夜 （至少小鼠3-4 h），但不禁水，给药后 仍需禁食2-4 h（小鼠1-2 h）
原因： ※胃内容影响给药容积 ※胃内容可能会影响药物的吸收
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怎么做？
观察期限
※一般给药后连续观察14天
※如给药第2周内发生动物死亡或出现新的 毒性反应时，应延长观察期限
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怎么做？
观察终点 ※死亡 ※明显毒性征状
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怎么做？
观察指标
※死亡情况 ※体重等一般情况 ※征状（Sign） ※实验室等检查
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近似致死计量法
※方法： 选取剂量序列表中的某个区段，每个剂 量（也可每隔一个剂量）给一个动物
※结果： 近似致死剂量范围—最高非致死剂量与 最低致死剂量间的范围
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累积剂量法（金字塔法）
※动物 ●种类：非啮齿类 ●数量：8只 ●性别：雌、雄各半 ●分组：分对照、给药2组 ※观察终点：死亡
hபைடு நூலகம்
急性毒性试验 （单次给药毒性试验）
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1
定义
研究动物一次或在24小时内多次 给予受试物后，一定时间内所产 生的毒性反应。
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2
目的
※观察药物毒性及其毒性靶器官
※为其它安全性试验的剂量和观察项目的 设计提供信息
※为I期临床起始剂量的设计提供信息
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什么时候进行？
※药物安全性研究中首先进行的试验
※啮齿类
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累积剂量法
※剂量：
1、3、10、30、100、300、1000、 3000 mg/kg
或10、20、40、80、160、320、640、 1280 mg/kg
※方法：
从低剂量开始，隔日给予下一剂量， 直至动物死亡
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累积剂量法
※结果
●无动物死亡：MLD（minimum lethal dose 最
他方法
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半数致死剂量法（LD50）
经典的急性毒性实验方法
※LD50值的意义 ●用于比较药物毒性大小 ●用于计算TI（治疗指数）LD50/ED50 ●为设置I期临床试验的起始剂量提供依据
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LD50法
※LD50法的不足 ●动物用量大 ●观察重点—死亡 ● LD50值受较多因素的影响，差别可达
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固定剂量法
※预试 ●两剂量间隔至少24小时 ●观察期至少7天
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固定剂量法
※正式实验 ●动物：至少10只，雌、雄各半 ●剂量：根据预试，选择可产生明显毒性但
不引起死亡的剂量
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固定剂量法
※正式实验 ●结果判断
剂量
5
50
存活<100%
高毒
有毒或高毒用
（LD50≤ 25） 5 mg实验
存活100%毒 性明显
小致死剂量）和LD50大于最高剂量
●某一剂量动物全部死亡：MLD和LD50在该剂 量和前一剂量间
●某一剂量动物部分死亡，MLD在该剂量和 前一剂量间，LD50位于首次出现死亡和全 部动物死亡的剂量间
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23
累积剂量法
※结果 ●如无动物死亡，常以最高剂量给予动物5-
7天，以确定后续的重复给药试验中高剂 量的选择
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动物选择
怎么做？
种类
※对受试物敏感的动物 ※啮齿类和非啮齿类各一种 ※非啮齿类动物种类应与长期毒性试验一
致
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怎么做？
动物选择
年龄
※通常选用健康成年动物
小鼠 5-6周龄
大鼠 6-8周龄
犬 6-8月龄
猴 3-4岁
※拟用于儿童的药物可选用幼年动物
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9
怎么做？
给药途径
※如临床拟用静脉给药则可仅此一种途径 ※一般采用临床给药途径加上静脉给药两
2.44∼8.38倍 ● LD50的意义不如NOAEL和MLD
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LD50法
※动物 ●种类：小鼠 ●体重：18∼22 g/只 ●分组：一般6组 ●每组动物数：10∼20只（每组动物数相等） ●性别：雌、雄各半
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29
LD50法
※剂量组 ●最高剂量：达到或接近使动物100%死亡 ●最低剂量：达到或接近动物0%死亡 ●中间设3个剂量组 ●另设对照组
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24
最大给药量法（限度试验）
※适用条件 ●在合理的最大给药浓度和合理的最大给药
容量的条件下仍达不到上述剂量要求 ●更高的剂量所产生的信息不具有更进一步
的价值
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最大给药量法
※方法 ●一般使用10-20只动物 ●连续观察14天 ※结果 ●无动物死亡—MLD大于限度剂量 ●动物死亡<50%--LD50>限度剂量 ●动物死亡>50%需要重新设置限度剂量或改用其
症状(symptom)
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16
怎么做？
病理指标 ※病理学检查
●所有动物（计划处死、濒死、死亡）都 应进行大体解剖 ●大体解剖发现异常时应进行组织病理学 检查
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近似致死剂量法
※动物 ●种类：非啮齿类 ●数量：一般6只
※观察终点：死亡
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近似致死剂量法
※剂量： 根据文献和啮齿类动物急性毒性试验结 果，估计可能出现明显毒性反应到发生 死亡的剂量范围，按50%递增法列出剂量 序列表
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LD50法
※剂距：0.60∼0.90，常用0.70 ∼0.8 各组间成等比级数
※给药容量：0.2 mL／10gBW 灌胃最大容量可达0.8 mL/只
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LD50法
※观察—观察期14天 ●观察重点：死亡 ●体重 ●征状 ※结果：分性别根据各剂量组的死亡率用
Bliss法计算LD50
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固定计量法
●动物：首选大鼠
●剂量：5、50、500和2000 mg/kg
●观察终点：明显的毒性反应
●实验：
预试
正式实验
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固定剂量法
※预试 ●动物：雌性，每次1只 ●剂量：根据资料选择初试剂量或
存活
500 mg/kg 2000 mg/kg 死亡 50 mg/kg 存活 50和500的中间剂量
死亡 5 mg/kg