十四维生素类药物的分析VBPPT课件
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第14章维生素类药物的分析
1830
第四步：求标示量％
标 示 量标 I％ U/丸 示 ＝ 1量 0％ 0 ＝IU/g标 平示均量丸 1重 0％ 0 A W D 10 换 0L算 标因 W 示 1数 量 0％ 0
（2） 第一法 维生素A醋酸酯 • 方法：
S 环 己 烷 9～ 1I5U /m溶 l 液 分别 30、 于 301、 362、 384、 306n0m 处A 测 i
紫红 CH2
-
SbCl5 RCOO
条件 无水无醇 三氯化锑水解生成氯化氧锑 乙醇可与C+作用而使正电荷消失
方法 取维生素A油溶液1d， 加氯仿10 ml，振摇溶解，取 出两滴，加氯仿2 ml，与25% 三氯化锑氯仿液0.5 ml反应， 成蓝色，渐成紫红。
（二） UV法 BP（2019）
Vi t无 A 水 乙 H 醇 C l 去V 水 itA △
（二）为一个具有共轭多烯侧链的 环己烯
具有UV吸收 325-328nm VA主要为全反式VA,存在多种立 体异构化合物,如：新维生素Aa,新 维生素Ab,新维生素Ac,异维生素Aa， 异维生素Ab
维生素A 新维生素Aa 新维生素Ab 新维生素Ac 异维生素Aa 异维生素Ab
max
325.5 328 320.5 310.5 323 324
A32校 8 正 3.52 2A328A316A340 3.52 20.628 0.560 1.52 3
0.605
f A328(校正) A328100% A328
3.7%(15%~3%)
标示% 量A32W 8校*正 1*0D0**L190*0平 标均 示丸 量 1重 0% 0 0.605*250*019000.0826210% 0 0.2399100 10000 99.0%
第四步：求标示量％
标 示 量标 I％ U/丸 示 ＝ 1量 0％ 0 ＝IU/g标 平示均量丸 1重 0％ 0 A W D 10 换 0L算 标因 W 示 1数 量 0％ 0
（2） 第一法 维生素A醋酸酯 • 方法：
S 环 己 烷 9～ 1I5U /m溶 l 液 分别 30、 于 301、 362、 384、 306n0m 处A 测 i
紫红 CH2
-
SbCl5 RCOO
条件 无水无醇 三氯化锑水解生成氯化氧锑 乙醇可与C+作用而使正电荷消失
方法 取维生素A油溶液1d， 加氯仿10 ml，振摇溶解，取 出两滴，加氯仿2 ml，与25% 三氯化锑氯仿液0.5 ml反应， 成蓝色，渐成紫红。
（二） UV法 BP（2019）
Vi t无 A 水 乙 H 醇 C l 去V 水 itA △
（二）为一个具有共轭多烯侧链的 环己烯
具有UV吸收 325-328nm VA主要为全反式VA,存在多种立 体异构化合物,如：新维生素Aa,新 维生素Ab,新维生素Ac,异维生素Aa， 异维生素Ab
维生素A 新维生素Aa 新维生素Ab 新维生素Ac 异维生素Aa 异维生素Ab
max
325.5 328 320.5 310.5 323 324
A32校 8 正 3.52 2A328A316A340 3.52 20.628 0.560 1.52 3
0.605
f A328(校正) A328100% A328
3.7%(15%~3%)
标示% 量A32W 8校*正 1*0D0**L190*0平 标均 示丸 量 1重 0% 0 0.605*250*019000.0826210% 0 0.2399100 10000 99.0%
维生素类药物的分析.ppt
感谢你的欣赏
3
第一节 维生素A的分析
全反式
R : -H -COCH3
维生素A醇 维生素A醋酸酯
-COC15H31 维生素A棕榈酸酯
2019-10-14
感谢你的欣赏
4
一、结构与性质
（一）结构：具有共轭多烯侧链的环己烯
m ax 相对生物效价 顺反异构
维生素A
325.5
100%
全反式
新维生素Aa 328
(
纯
/
)
g）
3330000 1820
2019-10-14
感谢你的欣赏
23
A值的选择：
1、维生素A醋酸酯-第一法（等波长差法）
S 环己烷 9～15IU / ml 溶 液 分 别 于300、316、328、340、360nm 处 测Ai
• 判断 m ax 是否在326～329nm之间
环氧化物
VitA醛
感谢你的欣赏
VitA酸
7
（二）性质
1.溶解性：易溶于有机溶剂和植物油等，不溶于水 2.不稳定性 3.紫外吸收特性 4.与三氯化锑呈色 V itA SbCl 3 蓝 色 紫 红
CHCl3
2019-10-14
感谢你的欣赏
8
二、鉴别试验
（一）三氯化锑反应
V itA SbCl 3 蓝 色 紫 红
脂溶性
S
KO H /乙醇
皂
化
液植 Vit物A 醋 油酸 酯甘油
VitA 醇 和脂肪
酸
盐
水溶性
乙醚提取 除去植物油的干扰挥干乙醚 异丙醇
溶解 稀释至9～15IU / ml 于300、310、325、
维生素类药物分析
A3（ 2校 5 ） 正 A32510% 0 (P) A325
最大吸收波长是否在323～327之间
是 A300/A325是否≤ 0.73
否 色谱法纯化
是
否
A325校正A325100%
A325
A325校正 = 6.815A325-2.555A310-
A 325校正4.260A334 A 325
A 325校正
A3 2 8
A300/A325 ≤ 0.73
超
否
A A3（ 28校正 A3） 2810% 0
A3 2 8
32 8
±3% 之间：A328
-15%～-3%： A328校正
A325校 A正 325A325100% 色法谱 ±3% 之间：A325
<-15%或>+3%:皂化
<-3%或>+3%: A325校
法A328校正
＊相关物质—结构相似,维生素A最大吸收波长 附近也有吸收，对测定有影响。
＊Morton和Stubbs等人在1946年提出了三 点
校正法。
相关物质的吸收
＊a. 维生素A的衍生物（A2、A3） ＊ b. 维生素A的氧化产物 ＊ c. 合成时的中间体
＊ d. 鲸醇：维生素A醇的二聚体， 无生物活性
＊ e. 维生素A异构体 ＊ f. 稀释用油
练习题：维生素A醋酸酯胶丸的含量测定 已知：平均胶丸重为0.0815g 维生素A的标示量为10000IU/丸 取 样 ： 0.1279g→100ml ， 从 中 取 出 2ml →
25ml.
求：维生素A醋酸酯的标示百分含量。
首先计算吸收度比值和吸收度比值差。由结果 知，需计算校正吸收度。
14维生素类药物的分析.ppt
效价IU （ /g） (样)E1% cm (样)换算因子
经过变形可得下式
化学与制药工程学院
测定方法
第四步：求标示量
标示W 量 A 1 D ％ 0 1 L 09 ＝ 标 0 W0 示 10 量 ％ 0
这是因为标示量是以 效价的形式存在的
2021/8/23
化学与制药工程学院
测定方法
A值的选择
判断
二、第一法——纯度高的VitA acetate 合成 Vit A
③ 计算 A 300
A 325
2021/8/23
，选择A
化学与制药工程学院
测定方法
A. 若(A300/A325)≤ 0.73
A325(校正)=6.815A325-2.555A310-4.260A334
◊ A32(校 5 )正 -A3 21 5 0 % 0 3% 3% ,
A325
A325不校正
◊ A3 2 (校 5 )正 -A3 21 5 0 % 03% 3,%
CH3
3
2
CH2
1
CH3
去水维生素A （A3 anhydroretinol)
2021/8/23
化学与制药工程学院
第一节 VitA
CH3
CH39
CH3
75
CH3
3
1
CH2OR
8642
CH3
R= H O
Retinol (Vit A alcohol)
R= C CH3 O
VA acetate
2-Cis Neovitamin Aa R= 4-Cis Neovitamin Ab 2,4-dicis Neovitamin Ac 6-Cis Isovitamin Aa
药物分析第章维生素类药物的分析(ppt)
第三步 求效价
效 价 IU （ /g） (样 )E% 1c m (样 )换 算 因 数
换算因数由纯品计算而得： 换算因数 效＝ 价I（ U/g） E% 1cm(纯)
1IU 0.34g4维 生 A醋 素酸 酯 效价（IU / g） 1106g 2907000
0.344g
换 算 因效 数 E% 1价 c＝ m I(纯 U （ /)g）219503700001900
USP 显色剂 磷钼酸 规定斑点颜色和Rf值
三、含量测定
（一） UV法
立体异构体 氧化产物及光照产物 合成中间体 去氢维生素A（ VitA2） 去水维生素A（ VitA3）
三点校正法 1. 条件： （1）杂质的吸收在310~340nm波长范围内呈一条直
线，且随波长的增大吸收度减小； （2）物质对光的吸收具有加和性。
1IU 0.30g0维生 A醇 素
效价（IU / g） 1106g 3330000 0.300g
换算因效 数 E% 1价 c＝ m I(纯 U （ /)g）313832000001830
第四步：求标示量％
标 示 量标 I％ U/丸 示 ＝ 1量 0％ 0＝IU/g标 平示均量丸 1重 0％ 0
A换 算 因 平数 均 丸 重
C
标示量 10％ 0
（2）第一法 维生素A醋酸酯
• 方法： S 环 己 9～ 烷 1I5U /m溶 l 液
分 别 30、 于 301、 362、 384、 306n0m 处A 测 i
• 判断 max是否在326～329nm之间
max在326～329n8
并与规定值比较
改用第二法
Ai/A328 规定值 差值
A 300 A 328 0 . 555 A 316 A 328 0 . 907 A 328 A 328 1 . 000 0 A 340 A 328 0 . 811 A 360 A 328 0 . 299
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1.原理
维生素B1在碱性溶液中可被铁氰化钾氧化生成硫色素，硫色素溶 于正丁醇（或异丁醇）中显蓝色荧光。
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2019/8/21
CH3 N N
NH2 S CH2CH2OH
HCl
N
CH2 Cl-
CH3
NaOH
CH3
N
NH2 O
H SNa CH2CH2OH
C
N
N
CH2
CH3
-H2O
CH3 N N SNa CH2CH2OH
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18
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19
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三、含量测定
（三）硫色素荧光法（USP所采用的方法）
1.原理 维生素B1在碱性溶液中被铁氰化钾氧化成硫色素，用异 丁醇提取后，在紫外光(λex365m)照射下呈现蓝色荧光 (λem435m)。通过与对照品比较荧光强度，即可求得 供试品含量。
ChP2015收载有维生素B1及其片剂和注射液。
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2019/8/21
一、结构与性质
（一）结构
H3C
N
2 34
N1 6 5
NH2 S 21 5 N34
CH2
CH3
OH Cl , HCl
氨基嘧啶环
亚甲基
噻唑环
季铵
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2019/8/21
一、结构与性质
（二）性质
1.溶解性 维生素B1为白色结晶或结晶性粉末，干燥品在 空气中迅速吸收4%的水分。本品在水中易溶，在乙醇中 微溶，在乙醚中不溶，水溶液呈酸性。
4.与生物碱沉淀试剂反应
分子中具有两个杂环（嘧啶环和噻唑环），故可与某些生物碱沉淀试剂 （如碘化汞钾、三硝基酚、碘溶液、硅钨酸）反应生成组成恒定的沉淀， 可用于鉴别和含量测定。
5.氯化物的特征
维生素B1为盐酸盐，故本品水溶液显氯化物的鉴别反应。
5
2019/8/21
二、鉴别实验
（一）硫色素荧光反应
13
2019/8/21
三、含量测定
（一）非水滴定法
1.原理 维生素B1分子中含有两个碱性的已成盐的伯胺和季 铵基团,在非水溶液中均可与高氯酸作用,以电位指 示终点.根据消耗的高氯酸量即可算出维生素B1的 含量。
14
2019/8/21
三、含量测定
2.方法
取本品约0.12g，精密称定，加冰醋酸20ml微热使 溶解，放冷，加醋酐30ml，照电位滴定法 ，用高 氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定的结果用 空白实验校正。没1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L） 相当于16.86mg的维生素B1。
铁氰化钾 VitB1
NaOH
异丁醇
λex-365nm
硫色素
荧光 λem-435nm
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2019/8/21
三、含量测定
2.方法
1.氧化试剂的制备
取当天配制的1.0%铁氰化钾溶液4.0ml，加3.5mol/L的氢氧化钠 溶液制成100ml，于4h内使用。
2.对照品溶液的制备
精密称取维生素Bl对照品约25mg，溶于300ml的稀醇溶液(1→5)， 用3mol/L盐酸溶液调节至pH4.0，加稀醇稀释成1000ml，作为 贮备液。避光冷藏，每月配制一次。取贮备液适量，用0.2mol/L 盐酸溶液逐步定量稀释至0.2&ug/ml的溶液。
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N
N
CH3
2019/8/21
CH3 N N
N SNa CH2CH2OH
N CH3
环合
CH3 N N
H N S CH2CH2OH
N CH3
[O] －2H
CH3
N
N
S
硫色素 CH2CH2OH
8
N
N CH3
Thiochtome
2019/8/21
二、鉴别实验
2.方法
取本品约5mg，加NaOH T.S. 2.5ml溶解后，加铁氰化钾 T.S. 0.5ml与正丁醇5ml，强力振摇2min，放置使分层， 上层显强烈的蓝色荧光；加酸使呈酸性，荧光即消失； 再加碱使呈碱性，荧光又重现。
2.硫色素反应 噻唑环在碱性介质中可开环，再与嘧啶 环上的氨基环合，经铁氰化钾等氧化剂氧化成具有荧光 的硫色素，后者溶于正丁醇中呈蓝色荧光。
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2019/8/21
Hale Waihona Puke 一、结构与性质 3.紫外吸收特性
本品的12.5ug/ml盐酸溶液（9 1000）在246nm波长处测定吸光度，
故本品的吸光系数（1%cm）为406~436。
2019/8/21
二、鉴别实验
（五）红外分光光度法
取本品适量，加水溶解，水浴蒸干，在105℃干燥2 小时测定。本品的红外光吸收谱图应与应与对照图 谱一致。
12
2019/8/21
三、含量测定
非水溶液滴定法 (Non-aqueous Titrimetry) 紫外分光光度法 (UV) 硫色素荧光法 (Thiochrone Fluoremetry)
10
维生素B1与苦酮酸生成扇形白色结晶
2019/8/21
二、鉴别实验
（三）氯化物反应
本品是盐酸盐,水溶液呈氯化物的鉴别反应
（四）硫元素反应
维生素B1与NaOH共热，分解产生硫化钠，可与硝 酸铅反应生成黑色沉淀，可供鉴别。
VitB NaOH NaS PbAc PbS 11
2019/8/21
第十四章 维生素类药物的分析
1 第二节 维生素B1的分析
2019/8/21
第二节 维生素B1的分析
维生素B1（vitaminB1）广泛存在于米糠、麦麸和酵 母中，此外来源于人工合成。本品具有维持糖代谢 及神经传导与消化的正常功能，主要用于治疗脚气 病、多发性神经炎和胃肠道疾病。
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2019/8/21
二、鉴别实验
（二）沉淀反应
维生素B1结构中有嘧啶环和氨基，显生物碱的特 征，可与多种生物碱沉淀或显色剂反应。
维生素B1与碘化汞钾生成淡黄色沉淀[B].H2HgI4
维生素B1与碘生成红色沉淀[B].HI.I2
维生素B1与硅钨酸反应生成白色沉淀 [B]2.SiO2(OH)2.12WO3.4H2O
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B Cl HCl HClO Hg（Ac） B ClO HClO
喹那啶红－亚甲蓝 （紫红→天蓝）
含量%
V样 V空
TF 100%
W
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三、含量测定
（二）紫外分光光度法
1.原理 维生素B1分子中含有共轭双键结构,在紫外区有吸 收,根据最大吸收波长处的吸光度即可以计算含量. ChP2015收载的维生素B1片剂和注射液均采用本 法测定。
维生素B1在碱性溶液中可被铁氰化钾氧化生成硫色素，硫色素溶 于正丁醇（或异丁醇）中显蓝色荧光。
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CH3 N N
NH2 S CH2CH2OH
HCl
N
CH2 Cl-
CH3
NaOH
CH3
N
NH2 O
H SNa CH2CH2OH
C
N
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CH2
CH3
-H2O
CH3 N N SNa CH2CH2OH
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三、含量测定
（三）硫色素荧光法（USP所采用的方法）
1.原理 维生素B1在碱性溶液中被铁氰化钾氧化成硫色素，用异 丁醇提取后，在紫外光(λex365m)照射下呈现蓝色荧光 (λem435m)。通过与对照品比较荧光强度，即可求得 供试品含量。
ChP2015收载有维生素B1及其片剂和注射液。
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一、结构与性质
（一）结构
H3C
N
2 34
N1 6 5
NH2 S 21 5 N34
CH2
CH3
OH Cl , HCl
氨基嘧啶环
亚甲基
噻唑环
季铵
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一、结构与性质
（二）性质
1.溶解性 维生素B1为白色结晶或结晶性粉末，干燥品在 空气中迅速吸收4%的水分。本品在水中易溶，在乙醇中 微溶，在乙醚中不溶，水溶液呈酸性。
4.与生物碱沉淀试剂反应
分子中具有两个杂环（嘧啶环和噻唑环），故可与某些生物碱沉淀试剂 （如碘化汞钾、三硝基酚、碘溶液、硅钨酸）反应生成组成恒定的沉淀， 可用于鉴别和含量测定。
5.氯化物的特征
维生素B1为盐酸盐，故本品水溶液显氯化物的鉴别反应。
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二、鉴别实验
（一）硫色素荧光反应
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三、含量测定
（一）非水滴定法
1.原理 维生素B1分子中含有两个碱性的已成盐的伯胺和季 铵基团,在非水溶液中均可与高氯酸作用,以电位指 示终点.根据消耗的高氯酸量即可算出维生素B1的 含量。
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三、含量测定
2.方法
取本品约0.12g，精密称定，加冰醋酸20ml微热使 溶解，放冷，加醋酐30ml，照电位滴定法 ，用高 氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定的结果用 空白实验校正。没1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L） 相当于16.86mg的维生素B1。
铁氰化钾 VitB1
NaOH
异丁醇
λex-365nm
硫色素
荧光 λem-435nm
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三、含量测定
2.方法
1.氧化试剂的制备
取当天配制的1.0%铁氰化钾溶液4.0ml，加3.5mol/L的氢氧化钠 溶液制成100ml，于4h内使用。
2.对照品溶液的制备
精密称取维生素Bl对照品约25mg，溶于300ml的稀醇溶液(1→5)， 用3mol/L盐酸溶液调节至pH4.0，加稀醇稀释成1000ml，作为 贮备液。避光冷藏，每月配制一次。取贮备液适量，用0.2mol/L 盐酸溶液逐步定量稀释至0.2&ug/ml的溶液。
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N SNa CH2CH2OH
N CH3
环合
CH3 N N
H N S CH2CH2OH
N CH3
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CH3
N
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硫色素 CH2CH2OH
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N CH3
Thiochtome
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二、鉴别实验
2.方法
取本品约5mg，加NaOH T.S. 2.5ml溶解后，加铁氰化钾 T.S. 0.5ml与正丁醇5ml，强力振摇2min，放置使分层， 上层显强烈的蓝色荧光；加酸使呈酸性，荧光即消失； 再加碱使呈碱性，荧光又重现。
2.硫色素反应 噻唑环在碱性介质中可开环，再与嘧啶 环上的氨基环合，经铁氰化钾等氧化剂氧化成具有荧光 的硫色素，后者溶于正丁醇中呈蓝色荧光。
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Hale Waihona Puke 一、结构与性质 3.紫外吸收特性
本品的12.5ug/ml盐酸溶液（9 1000）在246nm波长处测定吸光度，
故本品的吸光系数（1%cm）为406~436。
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二、鉴别实验
（五）红外分光光度法
取本品适量，加水溶解，水浴蒸干，在105℃干燥2 小时测定。本品的红外光吸收谱图应与应与对照图 谱一致。
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三、含量测定
非水溶液滴定法 (Non-aqueous Titrimetry) 紫外分光光度法 (UV) 硫色素荧光法 (Thiochrone Fluoremetry)
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维生素B1与苦酮酸生成扇形白色结晶
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二、鉴别实验
（三）氯化物反应
本品是盐酸盐,水溶液呈氯化物的鉴别反应
（四）硫元素反应
维生素B1与NaOH共热，分解产生硫化钠，可与硝 酸铅反应生成黑色沉淀，可供鉴别。
VitB NaOH NaS PbAc PbS 11
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第十四章 维生素类药物的分析
1 第二节 维生素B1的分析
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第二节 维生素B1的分析
维生素B1（vitaminB1）广泛存在于米糠、麦麸和酵 母中，此外来源于人工合成。本品具有维持糖代谢 及神经传导与消化的正常功能，主要用于治疗脚气 病、多发性神经炎和胃肠道疾病。
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二、鉴别实验
（二）沉淀反应
维生素B1结构中有嘧啶环和氨基，显生物碱的特 征，可与多种生物碱沉淀或显色剂反应。
维生素B1与碘化汞钾生成淡黄色沉淀[B].H2HgI4
维生素B1与碘生成红色沉淀[B].HI.I2
维生素B1与硅钨酸反应生成白色沉淀 [B]2.SiO2(OH)2.12WO3.4H2O
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2019/8/21
B Cl HCl HClO Hg（Ac） B ClO HClO
喹那啶红－亚甲蓝 （紫红→天蓝）
含量%
V样 V空
TF 100%
W
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2019/8/21
三、含量测定
（二）紫外分光光度法
1.原理 维生素B1分子中含有共轭双键结构,在紫外区有吸 收,根据最大吸收波长处的吸光度即可以计算含量. ChP2015收载的维生素B1片剂和注射液均采用本 法测定。