药物分析讲稿-第十一章 维生素类药物的分析
维生素类药物分析(SYSH)
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第一节 维生素A
维生素A包括有维生素A1（视黄醇）、去 氢维生素A（维生素A2 ）和去水维生素A（ 维生素A3）等，其中维生素A1活性最高，
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一、结构和性质
R:
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-H -COCH3 -COC15H31
维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
11
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（2）波长的选择： ① 1
VitA的max（328nm） ② 2 3
分别在1的两侧各选一点
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第一法 等波长差法
32 8 31 6 34 0 328
A 3校 2 8 3 . 5 正 2 A 2 3 2 A 3 8 1 A 3 6 4
测定对象 VitA醋酸酯
结构分析
CH3
CH3
CH3 CH3
环己烯
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共轭多 烯侧链
CH3 CH2OR
多异构体 UV 易被氧化
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1、为一个具有共轭多烯侧链的环己烯 ❖ （1）具有UV吸收
❖ （2）存在多种立体异构化合物 ❖ （3）易发生脱氢、脱水、聚合反应
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2、不稳定性
VitA紫 外 线 、 O2 、 氧 化 剂 环氧化物 [ O]VViittAA酸 醛
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中国药典收载方法
第一法（维生素A醋酸酯的测定） 将维生素A溶于环己烷，在规定波长测定吸
收度，计算吸收度比值（A/A328 ）
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数据处理
如果λmax在326-329nm之间，且A/A328比值未 超过规定值的±0.02，可直接按下式计算含 量：
维生素药物分析总结
04
维生素药物的副作用
过量摄入的危害
维生素A过量摄入可能导致头痛、恶 心、呕吐、骨痛和皮肤瘙痒等不良反 应，严重时甚至可能导致肝毒性。
维生素E过量摄入可能导致腹泻、恶心、 呕吐、头痛等不良反应，长期大量使 用还可能增加出血风险。
维生素D过量摄入可能导致高血钙症， 表现为恶心、呕吐、腹痛、便秘、头 痛、肌肉无力等，长期过量摄入还可 能对肾脏造成损害。
微囊和纳米微囊
利用微囊和纳米微囊技术，将维 生素包裹在微小囊膜中，以提高 药物的稳定性、延长药物释放时
间。
维生素药物与其他健康产品的结合
维生素与矿物质结合
01
将维生素与矿物质结合在一起，形成复合补充剂，以满足人体
对多种营养素的需求。
维生素与草本提取物结合
02
将维生素与草本提取物结合，发挥协同作用，提高整体健康效
维生素A
β-胡萝卜素
维持视网膜的正常功能，预防夜盲症 和干眼症等视力问题。
可在体内转化为维生素A，对眼睛健 康有益。
维生素C
有助于保护眼睛免受自由基的损害， 预防白内障等眼病。
促进骨骼健康
维生素D
有助于钙的吸收，对骨骼健康至 关重要。
钙
构成骨骼的主要矿物质，缺乏时会 导致骨质疏松和骨折风险增加。
镁
具有重要的现实意义。
02
维生素药物种类
水溶性维生素
维生素C
具有抗氧化和增强免疫力的作 用，有助于维持皮肤和黏膜健 康。
烟酸和烟酰胺
属于维生素B3的水溶形式，有 助于维持皮肤、消化系统和神 经系统健康。
维生素B族
包括维生素B1、B2、B6、 B12等，主要参与能量代谢和 神经系统的正常运作。
【药物分析】第12章 维生素类药物的分析
（三）三氯化锑比色法
维生素A SbCl3 三氯甲烷兰色
在max（620nm）处，测定 吸光度，标准曲线法定量
例1. 维生素A含量用生物效价表示， 其效价单位是 A. IU B. g C. ml D. IU/g
例 2. 计 算 维 生 素 A 吸 光 度 的 校 正 公 式 为 A328(校正后)=3.52(2A328-A316-A340)。如 果校正后的吸光度与未校正的吸光度之差 对未经校正吸光度的百分比为-3.2%，则应 A. 用皂化法测定 B. 用校正后的吸光度计算含量 C. 用未校正的吸光度计算含量 D. 改用另一校正公式计算 E. 以上都不对
（二）紫外分光光度法 BP
VitA 无水乙醇—盐酸（100∶S1）ol1
Sol1 水浴加热30s 冷却 生素A）
λmax326nm Sol2（去水维
λmax348，367，389nm
332处有拐点
CH3
CH3
CH3
9 8
CH2OR
CH3 7 6 5 4 3 2 1
CH3
↓
VitA
CH2
去水VitA（VitA3）
环己烯
CH3
CH3
CH3 CH3
CH3 CH2OR
CH3
CH3
CH3
CH3 CH2OR
CH3
R=H 维生素A醇
R=COCH3 维生素A乙酸 2. 维生酯素A为全反式结构
（二）性质
1. 紫外吸收光谱特征 最大吸收在325～328nm 2. 不稳定性 易氧化变质，密封、凉暗处保存，充氮 或加抗氧剂 3. 与三氯化锑反应呈色 4. 溶解性 易溶于三氯甲烷、乙醚等
② 如果最大吸收波长在326～329nm 之间，则计算各波长下的吸光度与 328nm波长下的吸光度的比值 （即 Ai ）。将计算得到的五个吸
药物分析第11章维生素类药物的分析
04
维生素类药物的质量控制 与标准
各国药典收载情况
中国药典
维生素A、维生素D、维生素E、维生素 K等。
欧洲药典
与美国药典类似，收载了多种维生素 类药物的标准。
美国药典
维生素A、维生素D、维生素E、维生 素B1、维生素B2、维生素B6、维生 素B12、叶酸等。
日本药局方
维生素A、维生素D、维生素E、维生 素B1、维生素B2、维生素B6、泛酸 等。
严重不良反应处理
对严重不良反应进行紧急处理，如停药、采取必要的抢救措施等。
不良反应报告与通报
将不良反应情况及时报告给相关部门，并通报给医生和患者，提高 安全意识。
感谢您的观看
THANKS
药物分析第11章维生素类药 物的分析
目 录
• 维生素类药物概述 • 维生素类药物的分析方法 • 维生素类药物的测定实例 • 维生素类药物的质量控制与标准 • 维生素类药物的安全性与有效性评价
01
维生素类药物概述
维生素的定义与分类
定义
维生素是维持人体正常生理功能所必 需的一类有机化合物，人体无法自行 合成，必须通过食物获取。
维生素B1的测定
总结词
维生素B1的测定通常采用高效液相色谱法 或分光光度法，这些方法均具有较好的准确 性和可靠性，能够满足药物分析的要求。
详细描述
维生素B1的测定可以采用高效液相色谱法 或分光光度法。高效液相色谱法是通过色谱 柱分离维生素B1和其他杂质，然后通过紫 外检测器或荧光检测器检测维生素B1的含 量。分光光度法则利用维生素B1在特定波 长下的吸收特性，通过比色法测定其含量。 这些方法均具有较好的准确性和可靠性，能 够满足药物分析的要求。
色谱分析法
药物分析-维生素类药物的分析28页PPT
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36、自己的鞋子，自己知道紧在哪里。——西班牙
37、我们唯一不会改正的缺点是软弱。——拉罗什福科
xiexie! 38、我这个人走得很慢，但是我从不后退。——亚伯拉罕·林肯
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40、学而不思则罔，思而不学则殆。——孔子
药物分析-维生素类药物的分析
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3、法律是最保险的头盔。——爱·科 克 4、一个国家如果纲纪不正，其国风一 定颓败 。—— 塞内加 5、法律不能使人人平等，但是在法律 面前人 人是平 等的。 ——波 洛克
药物分析维生素类药物的分析
在方法验证的基础上，可构建维生素类药物分析的评价指 标体系，包括定量限、检测限、回收率、重复性、稳定性 等指标，以全面评价分析方法的性能。
持续改进方向和目标设定
持续改进方向
针对维生素类药物分析过程中存在的问题和 不足，可进一步改进样品前处理方法、优化 分析条件、提高检测灵敏度等，以不断提高 分析结果的准确性和可靠性。
数据处理和结果表达技巧分享
数据处理
对HPLC和UV-Vis法得到的数据进行整理、归纳和统计 分析，包括峰面积、保留时间、浓度等参数的计算和 处理。
结果表达
将分析结果以图表形式呈现，如色谱图、标准曲线图、 含量分布图等，使结果更加直观、易于理解。同时，对 分析结果进行解释和说明，提出改进意见和建议。
在选择维生素类药物的标准品时，应确保其 纯度高、稳定性好，且具有代表性。同时， 应关注标准品的来源和溯源性。
使用注意事项
在使用标准品时，需按照规定的条件进行保 存和使用，避免污染和降解。此外，应定期 对标准品进行复验和更新。
检测方法验证及评价指标体系构建
要点一
检测方法验证
要点二
评价指标体系构建
为确保维生素类药物分析方法的准确性和可靠性，需进行 方法学验证，包括专属性、线性、范围、准确度、精密度 等指标的考察。
质量控制体系建立及实施情况介绍
质量控制体系
为确保维生素类药物分析结果的准确性和可靠性，需建立全面的质量控制体系，包括样 品采集、前处理、分析测试、数据处理等各个环节。
实施情况
目前，质量控制体系已在多个实验室得到广泛应用，有效提高了维生素类药物分析的准 确性和一致性。
标准品选择与使用注意事项
标准品选择
通过对该维生素类药物的定性、定量分析，评估其质量 稳定性和一致性，为药物研发、生产和监管提供科学依 据。
药物分析讲稿-第十一章 维生素类药物的分析
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 药物分析讲稿-第十一章维生素类药物的分析第十一章维生素类药物的分析维生素是维持人体正常代谢功能所必需的生物活性物质。
从结构上看，它们并非同属于一类化合物。
其中，有些是醇、酚或酯，有些则是醛、胺或酸类，它们各自具有不同的理化性质和生理作用。
关于维生素的分类，迄今为止，仍沿用其在油脂中和水中的溶解度不同而分为脂溶性和水溶性两大类。
其中，属于脂溶性的有维生素 A、D、E 和 K 等；水溶性的有维生素 B 族、烟酸、泛酸、叶酸及抗坏血酸等。
本类药物的分析方法大多基于其生物特性及理化性质，可分别采用生物、微生物、化学和物理化学的方法进行分析，但目前常用的分析方法是化学和物理化学法。
本章不拟对所有的维生素类药物的分析方法逐一叙述，而只着重介绍维生素 A、E、B1 和 C 四种维生素药物的鉴别、检查和含量测定。
第一节维生素 A 的分析维生素 A(vitamin A)，通常是指维生素 A1(视黄醇，retinol)。
维生素 Al 是一种不饱和脂肪醇，在自然界中，其天然产物主要来源于鲛类无毒海鱼肝脏中提取的脂肪油(即鱼肝油)，其含量高达600000 国际单位/克(U/g)，但目前主要采用人工合成方法制取。
1 / 18从鱼肝油中提取的维生素 A 多为各种酯类的混合物，其中主要为醋酸酯和棕榈酸酯(表 ll-1)。
表 ll-l 天然维生素 A 的主要组分《中国药典》收载的维生素 A，是人工合成的维生素 A 醋酸酯结晶加精制植物油制成的油溶液，其制剂有维生素 A 胶丸、维生素 AD 胶丸和维生素 AD 滴剂三个品种。
一、结构与性质 (一)结构维生素 A 的结构为具有一个共轭多烯侧链的环己烯，因而具有许多立体异构体。
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（三）其他反应
S元素反应
V iN t B aN O P a H A b S c P b
A HN O g 3 N AO g 白 C N H N l H H O O
M H n C O l K 淀 I 粉 蓝 试
Cl-反应
第二十九页，共73页。
三、 含量测定
（一） 非水溶液滴定法
原理：维生素B1分子含有2个碱性的已成 盐的伯胺和季铵基团，在非水溶液中均与
HClO4作用，根据消耗HClO4的量可以计
算维生素B1的含量。
BClHCl2HC4lO H （ g A ） c2BCl4O HC4lO
第三十页，共73页。
电位滴定法指示终点
2、与2，6 - 二氯靛酚反应(ChP2005)
2， 6二氯靛 V 酚 it C 无色的酚亚
氧化型
蓝色
OOHHˉ
第四十三页，共73页。
玫瑰红色
H
还原型
（玫瑰色）
（无色）
3、与碱性酒石酸铜反应 USP
碱性酒 石 V i酸 tC C铜 u O红
4、与KMnO4反应
KM n V O i tM Cn
二烯醇结构
二酮基结构
第三十五页，共73页。
L－抗坏血酸
有活性
去氢抗坏血酸
有活性
二酮古洛糖酸
无活性
第三十六页，共73页。
4 光学活性
手性C（C4、C5）
CH 6
2
O
H
H
C
5*
OH O
4* 1 O
L(+)－抗坏血酸活
性最强
32
HO
OH
第三十七页，共73页。
5 水解性
N a2 C O3单钠盐 N a O H 水 解 酮酸盐
药物分析维生素类药物的分析
国际单位IU=0.344微克维生素Ａ醋酸酯； IU＝0.300微克维生素Ａ醇
换算：1g维生素Ａ醋酸酯相当于：
1106 g 2907000IU 0.344 g / IU
1g维生素Ａ醇相当于：
1106 g 3330000IU 0.300 g / IU
VA1:
2
9'
1
3
8'
4
6
5
7'
5'
6'
4'
三、含量测定 高效液相色谱法，药典收录。
§9.5 维生素E（称为生育酚） 一、结构：苯并二氢吡喃醇衍生物，
CH3
H3C
8
O CH3
1
CH3
CH3
CH3
CH3
H3C C O
5
4
O CH3
名称：消旋α-生育酚醋酸酯（ α-异构体生理活性 最强）
母核：苯骈二氢吡喃衍生物，苯环上有一乙酰化的
酚羟基
侧链：脂肪烷烃 性质：不溶于水，油状，微黄色液体。
VB1分子中含有已成盐的伯胺和季铵基团，在非 水溶液中，在醋酸汞存在下，均可被高氯酸滴定。
溶剂：冰醋酸 / 醋酸汞 指示剂：喹哪定红- 亚甲蓝混合指示液 滴定剂：高氯酸（0.1mol/L) 终点：天蓝色 摩尔比：VB1：高氯酸=1：2 VB1摩尔质量=337.27 滴定度T=0.1×(1/2) ×337.27=16.86mg/ml
E11c%m
0.652 0.010232
1
63.72
IU / g E11c%m 1900 63.72 1900 121068(IU / g) 维生素A的标示含量
标示量%
IU / 丸 标示量
药物分析维生素类药物的分析培训课件
维生素A的简介
是鱼类肝脏中提取的一种不饱和脂 肪醇，又称鱼肝油。目前主要采用 人工合成。
在体内以视黄醇的形式储存，缺乏会 影响视色素的合成，导致夜盲症，视 力减退。
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第一节 维生素A的分析 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不 当之处，请联系本人或网站删除。
（二）UV法
Vi t无 A 水 乙 H 醇 C l 去V 水 it
△
λmax为326nm 一个吸收峰
λmax为350～390nm
三个吸收峰
H3C
CH3
9
CH3
7
8
பைடு நூலகம்
6
5 4
CH3
3 1CH2OR
2
CH2
CH3
五个共轭双键
六个共轭双键
最大吸收峰红移
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维生素A，维生素B，维生素C，维生素D， 维生素E，维生素K，维生素H（生物素）， 维生素P，维生素PP，维生素M，维生素 T，维生素U，水溶性维生素。
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维生素维持正常生理功能所必需的、微量营养 物质，人体不能合成维生素。必须从外界食物中摄 取。
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第十一章维生素类药物的分析维生素是维持人体正常代谢功能所必需的生物活性物质。
从结构上看，它们并非同属于一类化合物。
其中，有些是醇、酚或酯，有些则是醛、胺或酸类，它们各自具有不同的理化性质和生理作用。
关于维生素的分类，迄今为止，仍沿用其在油脂中和水中的溶解度不同而分为脂溶性和水溶性两大类。
其中，属于脂溶性的有维生素A、D、E和K等；水溶性的有维生素B族、烟酸、泛酸、叶酸及抗坏血酸等。
本类药物的分析方法大多基于其生物特性及理化性质，可分别采用生物、微生物、化学和物理化学的方法进行分析，但目前常用的分析方法是化学和物理化学法。
本章不拟对所有的维生素类药物的分析方法逐一叙述，而只着重介绍维生素A、E、B1和C四种维生素药物的鉴别、检查和含量测定。
第一节维生素A的分析维生素A(vitamin A)，通常是指维生素A1(视黄醇，retinol)。
维生素Al是一种不饱和脂肪醇，在自然界中，其天然产物主要来源于鲛类无毒海鱼肝脏中提取的脂肪油(即鱼肝油)，其含量高达600000国际单位/克(U/g)，但目前主要采用人工合成方法制取。
从鱼肝油中提取的维生素A多为各种酯类的混合物，其中主要为醋酸酯和棕榈酸酯(表ll-1)。
表ll-l天然维生素A的主要组分《中国药典》收载的维生素A，是人工合成的维生素A醋酸酯结晶加精制植物油制成的油溶液，其制剂有维生素A胶丸、维生素AD胶丸和维生素AD滴剂三个品种。
一、结构与性质(一)结构维生素A的结构为具有一个共轭多烯侧链的环己烯，因而具有许多立体异构体。
天然维生素A主要是全反式维生素A，尚有多种其它异构体，它们具有相似的化学性质，但各具不同的光谱特性和生物效价(见表)。
维生素A及其异构体性质此外，鱼肝油中尚含有：去氢维生素A(Dehydroretinol，维生素A2)，其生物效价仅为维生素A1的40％；去水维生素A(Anhydroretinol，维生素A3)，其效价亦低于维生素A1；鲸醇(Kitol)系维生素A醇的二聚体，无生物活性。
这些物质也有紫外吸收，并能与显色试剂产生相近颜色。
所以，在测定维生素A含量时必须考虑这些干扰因素。
去氢维生素A(A2，Dehydroretmol)（二）性质维生素A易溶于乙醚、氯仿、异丙醇、环己烷、脂肪和植物油，微溶于乙醇，在水中不溶。
中国药典收载的维生素A为合成维生素A醋酸酯结晶的精制植物油溶液。
维生素A能与三氯化锑作用呈色、在紫外光区呈强吸收，可用于鉴别和含量测定。
二、鉴别试验(一)三氯化锑反应1、原理三氯化锑反应又称Carr-Price反应，反应原理是在三氯甲烷中，维生素A与三氯化锑反应显蓝色，渐变为紫红色。
反应机理为维生素A和氯化锑(Ⅲ)中存在的亲电试剂氯化高锑(V)作用形成不稳定的蓝色正碳离子。
2、鉴别方法取维生素A 1滴，加三氯甲烷lOml振摇使溶解，取出2滴，加三氯甲烷2ml与25％三氯化锑的三氯甲烷溶液0.5ml，即显蓝色，渐变成紫红色。
3、注意事项反应需在无水、无醇条件下进行。
因为水可使三氯化锑水解成氯化氧锑(SbOCl)，而乙醇可与正碳离子作用，使正电荷消失。
(二)紫外-可见分光光度法(三)薄层色谱法三、含量测定维生素A及其制剂的含量测定方法，最初采用生物学方法测定其生物活性，因该法操作繁琐费时、准确度与重现性差，后来被三氯化锑比色法所替代；而三氯化锑法的反应专属性差，呈色极不稳定，测定结果受水分和温度的影响较大，目前各国药典均收载紫外-可见分光光度法作为维生素A的含量测定方法。
下面主要介绍中国药典收载的紫外-可见分光光度法(三点校正法)，并简要介绍高效液相色谱法。
(一)紫外-可见分光光度法维生素A在325～328nm波长范围内有最大吸收，可用于含量测定。
其最大吸收波长随溶剂的不同而变化，表11-2为维生素A醇及其醋酸酯在不同溶剂中的最大吸收波长、吸收系数和换算因数。
本法快速、准确，测定结果能较正确地反映出维生素A的生物效价。
由于维生素A原料中常混有其他物质，如多种异构体、合成中间体、副产物、氧化降解产物；维生素A制剂中含稀释用油。
这些杂质在325～328nm波长范围内也有吸收，对维生素A的测定产生干扰。
为消除非维生素A产生的无关吸收所带来的误差，应用“三点校正法”测定，即在三个波长处测定吸光度后，在规定的条件下用校正公式进行校正，然后计算。
1、方法原理三点校正法是在三个波长处测得吸光度，根据校正公式计算吸光度A校正值后，计算含量，因此称为“三点校正法”。
方法原理主要基于两点：(1)物质对光的吸收具有加和性，即在供试品的吸收曲线中，各波长处的吸光度是维生素A与无关吸收(杂质吸收)的代数和。
(2)杂质的无关吸收在310～340nm波长范围内可视为一条直线，且随波长的增大吸光度下降。
2、波长选择三点波长的选择原则：一点选择在维生素A的最大吸收波长处(即λ1)；其余两点选择在λ1的两侧各选一点(λ2和λ3)。
(1)第一法：即等波长差法。
(2)第二法：即等吸收比法。
3、生物效价及换算因数(1)生物效价的定义维生素A的含量仍沿用生物效价(国际单位，U)表示。
效价(U/g)是指每克供试品中所含维生素A的国际单位数(U/g)维生素A的国际单位规定如下：1国际单位维生素A=0.300ug的全反式维生素A醇=0.344ug的全反式维生素A醋酸酯E与换算因数(见表1l-2)相乘，即得供试品的生物效价。
将计算出的供试品吸收系数%11cm(2)换算因数的含义E数值所相当的生物效价，即：换算因数是单位%11cm(3)维生素A醋酸酯换算因数的计算已知，0.344ug的维生素A醋酸酯相当于1个维生索A单位，则1g维生素A醋酸酯(纯品)所相当的维生素A单位数：又知，维生素A醋酸酯(纯品)的吸收系数E1%1cm (328,环已烷)，为1530，则：4、测定方法中国药典视供试品的纯度，采用不同的测定方法及数据处理对维生素A原料及制剂的生物效价进行测定。
维生素A测定法有两种方法，即“第一法”和“第二法”。
合成的维生素A和天然鱼肝油中的维生素A 均是维生素A酯，如果供试品中干扰测定的杂质较少，能符合第一法测定的规定时，可直接用溶剂溶解供试品后测定；否则应按第二法，经皂化提取除去干扰后测定。
(1)第一法(直接测定法)本法适用于纯度较高的维生素A醋酸酯。
取供试品(维生素A醋酸酯)适量，精密称定，加环己烷溶解并定量稀释成每lml 中含9～15U的溶液，照分光光度法，测定其吸收峰的波长，并在表11-3所列各波长处测定吸光度，计算各吸光度与波长328nm 处吸光度的比值和波长328nm 处的%11cm E 值(由公式，求得)。
①如果最大吸收波长在326～329nm 之间，且5个波长处的差值均不超过±0.02，用下式计算含量：维生素A 醋酸酯占标示量的百分含量：％标示量标示量％1001001900⨯⨯⨯⨯⨯⨯⨯⨯=W l WV n A例1：称取维生素A 供试品（标示量为100万单位/g ）0.1128g ，用环己烷配成100ml 溶液，精密量取此溶液1ml ，用环己烷稀释至100ml ，在波长300，316，328，340和360nm 波长处测定吸收度，分别为0.332，0.533，0.587，0.477和0.176。
计算维生素A 相当于标示量的百分含量？ 解：最大吸收波长在326～329nm 之间，且5个波长处的差值均不超过±0.02，用下式计算含量：％标示量标示量％1001001900⨯⨯⨯⨯⨯⨯⨯=W l V n A%9.98100101128.0100119001001100587.06=⨯⨯⨯⨯⨯⨯⨯=％含量％ 答：维生素A 标示量％为98.9％。
②如果最大吸收波长在326～329nm 之间，分别计算5个波长处的差值，如有一个或一个以上超过±0.02，应按下式计算校正吸光度：(1l-3)然后，计算校正吸光度与(实测)吸光度之差对(实测)吸光度的相对偏差，即：(1l-4)再按以下方法计算含量：如果式(1l-4)的值未超过±3.0％(即在-3.0％～+3.0％范围内)，则不用校正吸光度，而仍用A 328计算含量。
例2：现有标式量为1万/丸的VitA 胶丸(平均每丸内含物为0.2000克),今称取样品内含物0.1920克,溶于环己烷并稀释到1000ml,于下列波长测得吸收度为：波长(nm) 300 316 328 340 360 吸收度 0.265 0.450 0.500 0.410 0.150 求该丸剂中VitA 的标示量百分含量。
换算因素为1900。
解：（1） 波长(nm) 300 316 328 340 360 吸收度比值 0.530 0.907 1.000 0.820 0.300 规定的比值 0.555 0.907 1.000 0.811 0.229 二种比值之差 -0.025 -0.007 0.000 +0.009 +0.071（2）最大吸收波长在326～329nm 之间，分别计算5个波长处的差值，有一个或一个以上超过±0.02，按下式计算校正吸光度：A 328(校正) ＝3.52(2A 328 -A 316 -A 340 )＝0.493 因为％％＝测定测定校正4.1100328328328-⨯-A A A ，未超过-3.0%,故仍以A 328(测定) 计算含量。
（3）用下式计算含量：％标示量标示量％1001001900⨯⨯⨯⨯⨯⨯⨯⨯=W l WV n A %0.99100100001920.010012000.0190010001500.0=⨯⨯⨯⨯⨯⨯⨯⨯=％标示量％ 答：该丸剂中VitA 的标示量百分含量为99.0％。
如果式(1l-4)的值在-15％～-3.0％之间，则以校正吸光度计算含量。
例3：维生素AD 胶丸的测定：精密称取维生素AD 胶丸装量差异项下的内容物重0.1287g （每丸内容物的平均装量0.07985g ），置10ml 烧杯中，加环己烷溶解并定量转移至50ml 量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml ，置另一50ml 量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀。
以环己烷为空白，测得最大吸收波长为328nm ，并分别于300、316、328、340和360nm 的波长处测得吸收度如下。
求胶丸中维生素A 占标示量的百分含量？已知标示量每丸含维生素A 10000单位。
波长（nm ） 300 316 328 340 360 测得吸收度（A ） 0.374 0.592 0.663 0.553 0.228解：最大吸收波长在326～329nm 之间，分别计算5个波长处的差值，有一个或一个以上超过±0.02，按下式计算校正吸光度：637.0)553.0592.0663.02(52.3328=--⨯=校A因为％％＝测定测定校正9.3100328328328-⨯-A A A ，超过-3.0%,故以A 328(校正) 计算含量。