Nikon 80i荧光显微镜使用说明
尼康80i研究级正置万能荧光显微镜操作规程
尼康80i研究级正置万能荧光显微镜操作规程一、显微镜操作（不用荧光时）1、移去显微镜防护罩，检查显微镜镜头和滤光片。
2、打开显微镜电源开关。
3、调试显微镜光路。
4、把载玻片放到载物台上，调节聚焦。
在可见光下(荧光选择拨盘位于6)调节显微镜，选择好放大倍数并调节好焦距，找到合适的视野。
5、将视场光阑缩小，然后调节聚光镜高度，直到从目镜中观察到视场光阑的清晰成像。
6、放大视场光阑，使其在目镜中的黑框扩展到视野以外。
7、调试数码相机拍摄照片。
8、在显微镜取景器中对好视野及焦距。
二、荧光显微镜简单操作流程（用荧光时）1、移去显微镜防护罩，检查显微镜镜头和滤光片；2、打开显微镜电源开关。
3、打开汞灯电源开关。
4、放好标本，在可见光下(荧光选择拨盘位于6)调节显微镜，选择好放大倍数并调节好焦距，找到合适的视野。
5、确认SHUTTER处于ON的位置，根据需要选择合适的激发波长(WU: 330~385 nm; WB: 450~480 nm; WG: 510~515 nm)。
6、盖上黑布，根据需要选择拍摄或观察。
7、使用结束后关闭汞灯电源，待汞灯冷却后方可盖上显微镜防护罩。
三、调试数码相机拍摄照片1、开启电脑电源。
2、在显微镜取景器中对好视野及焦距。
3、将显微镜光路选择调节钮推至拍摄档。
4、双击电脑桌面图标“DPController”开启拍摄软件。
5、在Capture选项卡中点击预览按钮进行观察和参数调整，确认后点击拍摄按钮进行拍摄，拍摄过程请避免操作台震动。
6、如果需要添加标尺，请在Scale选项卡中开启并选择相应的放大倍数。
7、拍摄后，照片管理器DPManager将自动开启，在此处选择对照片进行加工或保存。
8、用移动设备取走需要的图片，关闭电脑。
注意事项：1、操作显微镜要注意以下几点（1）汞灯至少用30分钟，不能频繁开关。
（2）灯泡运行45分钟以上，运行3、4个小时后要停1、2个小时再用。
2、拍摄染色体一般用100X油镜，要注意以下几点：（1）将显微镜聚光镜上的孔径光缆关小点，因为是靠100%后退到85%-90%左右，以提高图像的景深。
尼康荧光显微镜
尼康荧光显微镜技术特点一、光学系统：尼康CFI60无限远光学以其卓越的成像质量受到全球市场的高度好评，齐焦距离60mm。
对人眼观察和数字化成像都是最优的物镜：1、提升的边缘性性和平场度2、消渐光晕（亮度的差别小于5%）3、提升的紫外DAPI 和其他滤光片的焦平面的性能。
二、80i主机的标准配置配备了新的复眼透镜系统，“复眼”透镜阵列使视场边缘的光强达到视场中心光强的90%，所以完全能适用数字成像的照明。
使目镜的视场数达到25mm以上。
三、噪声消除器（H i S/N）是80i 荧光装置的标准特征，信噪比提高了5倍，电动快速低噪声马达滤光片转盘。
四、电动控制装置精巧方便，130W高效长寿命荧光装置，无需调中，滤光片电动快速转换，低噪声，使用寿命2000小时以上，同为NIKON产品，提高产品整体性，方便售后服务五、扩展了人机学性能。
新的矩形机械台：固定位手轮、扭力矩手轮调节，可延伸的工作台固定把手位、超硬铝合金工作台表面。
人机学主机。
显微镜构成尼康显微镜80i的主要构成：（如下图所示）1、80i显微镜主机2、聚光镜3、载物台及夹片器4、荧光物镜：10倍40倍100倍5、物镜转盘6、电动荧光装置：包含荧光专用激发块7、C-BOX2控制器8、双目观察镜筒及照像端口9、目镜10、视频接口11、冷CCD12、长寿命荧光光源主要可调节的部分：（如下图所示）长寿命荧光光纤照明器显微观察方法明场显微术：1 打开电源装置的开关。
将显微镜主机后面的电源开关置于“I”的位置。
电源指示灯亮。
2 按预置开关（显微镜前面的绿色按钮）打开明场照明。
3 将显微镜右下部的ND8、ND32 和NCB11 减光片移至光路中。
（NCB11是白光平衡片，ND8、ND32两个减光片分别将光强减弱为原来的1/8和1/32）4 推入目镜筒上面的光路转换杆，对准双目镜筒使光路充满5 转动激发方式转换盘放在没有激发块的空位处（打开显微镜右后面C-BOX2的开关，通过控制器选择没有荧光块的空位转入光路中）6 提升聚光镜到最高位置。
Nikon 80i显微镜操作流程(荧光)
7、荧光在激发光照射下时间不宜过长，否则易淬灭。
8、未照完的荧光切片可在4度避光条件下短暂保存，不超过24h。
9、数据如何拷贝?是否需要预约?
主要仪器信息
设备名称
正置荧光显微镜
厂家型号
Nikon 80i存放Leabharlann 点A103暗室负责人
联系电话
主要功能
病理切片（HE染色、免疫组化及免疫荧光）的图像采集
使用流程
（荧光）
1、开机：从左往右，荧光显微镜稳压器→图像采集系统→显微镜→电脑。双击桌面的拍摄软件，将其打开。
2、按需要转动荧光挡板。1：蓝色，2：绿色，3：红色。拍照时将SHUTTEER调节至O位置。
7、关闭软件。
8、关机：从右往左，电脑→显微镜→图像采集系统→荧光显微镜稳压器。
注意事项
（荧光）
1、荧光显微镜稳压器开启后15min内不得关闭，关闭后3min内不得开启。
2、不要转动粗准焦螺旋内侧的粗调焦扭力矩调节手轮。
3、采集荧光图像时，不得调节白平衡。
4、图像如需后期分析，曝光时间需一致。
5、修改默认目录：File→options。
3、把载玻片放在载物台上，调节聚焦。在镜下用肉眼观察确定拍摄位置，拉出活动杆将视野切换到电脑。
4、在控制窗口点Exposure，观察预览图像的亮度。选择适当的曝光时间预览图片的亮度合适。
5、点Capture按钮拍摄，等待几秒后保存图片，格式为.JPEG或tiff。
6、点Live按钮，继续拍摄下一张照片。
Nikon 80i正置三光源显微镜操作规程
一、透射明视场观察 开机： 1、打开显微镜电源，按下镜座前端电源按钮，将卤素灯调节到合适亮度。 2、确认光路：目镜筒右侧拉杆全部推入，聚光器转盘在“A”档，荧光滤色块转盘在空档， NCB 滤光片被置入光路，其余 ND 置出光路，底部光源上的起偏器置出光路，检偏器置出光 路，落射光闸置于 C。 3、将 5X 物镜置入光路，将样品放入载物台，用粗调对标本进行对焦，微调锁定焦面，找到 观察目标，切换到高倍镜进行观察，同时调节孔径光阑适应物镜 N.A。 关机： 1、旋低载物台高度，将物镜切换到空档位或 5X 物镜位置。 2、将镜座左侧亮度调节旋钮调至最低，并关闭机身电源按钮，关闭变压器电源。 二、反射明场观察 开机： 1、确认光路：双灯室适配器拨杆成“对角线”状态；左侧三片滤光片，ND 拉出光路，NCB11 与 UV/D 置入光路；右侧起偏器及检偏器拉出光路；落射光闸置于 O 档，反射模块置于 BF 档；目镜筒右侧拉杆全部推入， 2、打开反射照明器光源，将卤素灯调节到合适亮度。 3、将 5X 物镜置入光路，将样品放入载物台，用粗调对标本进行对焦，微调锁定焦面，找到 观察目标，切换到高倍镜进行观察。 关机： 1、同明视场观察关机步骤 1；将反射照明器电压调至最低并关闭电源。 2、将反射附件左侧三滤光片、右侧两滤光片拉出光路，落射模块置于空档，光闸置 C 档。 三、荧光观察 开机： 1、确认光路：双灯室适配器拨杆正指向自己，目镜筒右侧拉杆全部推入，荧光光闸置于 C， 荧光附件至物镜间所有明视场光学附件置出光路（左侧三滤光片，右侧两滤光片）。 2、将 5X 物镜置入光路，将样品放入载物台，在明场下对焦，找到合适视野。 4、打开汞灯电源，并激发；将荧光滤色块转盘调至合适的位置，并调整光闸至“O”档。 5、利用荧光附件左侧的减光片 ND 减弱光强（系数为数值的倒数），直至荧光为合适亮度。 6、关闭明场照明，用微调锁定合适的荧光焦面，找到观察目标，切换到高倍镜进行观察。 关机： 1、将荧光滤色块转盘上的光闸调至“C”档，将荧光滤色块转盘调至空档位置。 2、旋低载物台高度，将物镜切换到空档位或 5X 物镜位置，关闭汞灯电源。 四、数码拍照 开机： 1、 打开显示器及主机电源，待系统进入桌面，硬盘灯不再频繁闪烁。 2、 打开 CCD 控制器电源，等 30 秒，待指示灯为绿色常亮。 3、 双击桌面软件图标进入 NIS 软件，点 Live，完全拉出目镜筒右侧拉杆。 关机： 1、完全退出 NIS 软件；关闭 CCD 控制器电源，然后关闭计算机，并关闭显示器电源。 注意事项： 1、 关机后需等半小时以上，待卤素灯或汞灯完全冷却方可罩上防尘罩。 2、 高压汞灯电源开机后至少间隔 30 分钟才能关闭；关闭后至少间隔 30 分钟才能开启。 3、 不用时一定要罩上防尘罩，远离灰尘、潮湿和油脂，切勿用皮肤接触任何玻璃部件。
荧光显微镜基本操作_百替生物
service@ 荧光显微镜基本操作
1． 关闭房间内的电灯，开启显微镜汞灯；
2． 根据样品标记的荧光素选择相应的滤光片；
3． 放好样品，找到合适的视野；
4． 如需拍照，请确认照相机内已装好彩色
胶卷（最好使用27定胶卷）；
5． 开启自拍装置，选择手动档，通常拍摄
速度在0.5---10秒内；
6． 使用结束，关闭所有电源并做好使用记录。
7． 如需详细说明，请借阅说明书。
注：
A．为延长汞灯的使用寿命，汞灯开启不到15分
钟的请在15分钟后关闭汞灯。
B．在荧光状态下观察标本，标本内的荧光染色会较
快的衰减，所以要避免长时间的在荧光下观察。
尼康显微镜操作规范
Nikon Ti-U荧光倒置显微镜操作规范操作前须知：使用荧光显微镜的荧光观察功能需提前填写预约记录，使用后填写使用记录。
普通观察切片和细胞无需登记（只有荧光观察或荧光拍照才需要打开汞灯，明场、相差图像和观察细胞不需要打开汞灯）。
填写预约记录是为避免频繁开、关汞灯，延长汞灯寿命，当操作者看到有人预约在自己后面时间不长时，可以不用关汞灯。
（汞灯打开后40分钟后才能关：汞灯关闭后无论多急，40分钟后才能开）。
彩色相机的开机:1. 首先确认电源连接正常，打开外置灯箱电源控制器开关（2-2）；2. 打开机身底座左侧白色（正方形）卤素灯开关（2-3），通过调节机身左侧开关下方的旋钮（3-1）控制灯泡亮度确认显微镜处于工作状态。
把透射照明器中的“NCB11 滤色片”和“D滤色片”（3-2）插入光路中以保证色彩真实。
明场图像观察：1. 先把显微镜的物镜转盘转到低倍物镜档位，把准备观察的切片（切片的方向应是盖玻片朝下）放到显微镜载物台上；2. 聚光镜（5-1）的选择：（一）聚光镜对应空白挡位A（二）聚光镜孔径光栏：将聚光镜的孔径值设定在物镜数值孔径值的60%—80%之间即可3. 通过目镜观察调节显微镜视野内的亮度，达到最佳位置图像最清晰；4. 将显微镜机座右侧的分光旋钮旋到“L”（相机端口）的位置上，通过计算机进行图像采集保存。
相差图像观察：1. 先把显微镜的物镜转盘转到低倍物镜档位，把准备观察的样本放到显微镜载物台上；2. 聚光镜（5-1）的选择：（一）聚光镜根据物镜选择对应的相差环（注：4倍物镜对应PHL，10倍、20倍物镜对应PH1，40倍物镜对应PH2）（二）可根据物镜倍数的提升结合镜下效果来调整聚光镜上的孔径光阑的数值3. 通过目镜观察调节显微镜视野内的亮度，达到最佳位置图像最清晰。
20,40倍物镜上有较正环，可配合使用获得清晰图像；4. 将显微镜机座右侧的分光旋钮旋到“L”（相机端口）的位置上，通过计算机进行图像采集保存。
电子荧光显微镜使用说明书
电子荧光显微镜使用说明书首部：简介电子荧光显微镜（Electronic Fluorescence Microscope）是一种高性能的显微镜，利用荧光原理实现对样品的观察和分析。
本说明书详细介绍了电子荧光显微镜的结构、操作方法和注意事项，以帮助用户更好地使用该仪器。
第一章：仪器结构电子荧光显微镜由以下部分组成：1. 显微镜主体：包括显微镜支架、光路系统和检测系统。
2. 高分辨率CCD相机：用于捕捉样品荧光图像。
3. 控制系统：包括仪器控制软件和操作面板。
第二章：操作方法2.1 打开电子荧光显微镜在确保仪器连接稳固的情况下，按下电源按钮打开电子荧光显微镜，待仪器启动完成后进入下一步操作。
2.2 放置样品将需要观察的样品放置在样品台上，并根据需要选择合适的镜头。
确保样品与镜头之间的距离适当，以获得清晰的图像。
2.3 荧光染料选择根据样品的性质和目的，选择适当的荧光染料。
确保荧光染料能够与样品相互作用，并在电子荧光显微镜中产生荧光效应。
2.4 调整光源和滤光片在操作软件中选择正确的光源，并根据荧光染料的发射波长选择相应的滤光片。
确保光源和滤光片的设定符合样品要求，以提供最佳的荧光显现效果。
2.5 调整焦距和曝光时间通过操作软件调整焦距和曝光时间，以获得清晰且明亮度适中的荧光图像。
根据需要，可以选择自动对焦和自动曝光功能。
2.6 观察和记录图像在光学系统和检测系统正常工作的情况下，可以开始观察样品，并通过CCD相机捕捉荧光图像。
保存图像时，请使用合适的文件命名和储存路径。
2.7 关闭电子荧光显微镜实验结束后，先停止样品的观察，并在关闭电子荧光显微镜前，将光源调至最低亮度，并关闭电源。
注意避免在关闭电子荧光显微镜时突然断开电源。
第三章：注意事项3.1 安全操作使用电子荧光显微镜时，应注意仪器周围的安全环境，并严格遵守相关实验室操作规范。
在操作过程中，避免直接接触光源和高温部件，以免造成安全风险。
3.2 仪器保养定期清洁电子显微镜的镜片、滤光片和检测系统，以确保观察图像的质量和准确性。
尼康80i显微镜简单操作说明
1 开启电源：显微镜的电源开关，在显微镜后侧。
2 按下照明开关，打开透射显微观察的照明灯。
并将亮度控制旋钮调到预设位置。
3 将ND8、ND32 和NCB11 滤光块切入光路。
4 按下光路切换杆，将双目镜完成切入光路5 转动激发方式切换转盘，将其调节到无滤光块的位置上。
6 将聚光镜升到最高位置。
7 将视场光阑和孔径光阑充分打开8 将10 倍物镜移入光路。
9 放置标本后调节载物台，将标本移入视野中10 对标本对焦。
11 调节屈光度和瞳间距。
12 对聚光镜进行对焦。
13 切换到所需的物镜并观察标本。
14 观察完毕后请关闭电源。
2.4 落射荧光显微观察进行显微观察前必须：•检查照明灯的累计照明时间和落射荧光附件的状态。
如果照明灯己超过其使用寿命，请更换照明灯。
•使用无荧光型的玻片。
•使用非荧光型浸油。
•为防止标本发生褪色，请在不进行显微观察时关闭光闸。
1将明场光源关闭。
注意：A 荧光显微术用于观察荧光染色和荧光标记的样本；B 使用前明确样本荧光激发光波长和发射光波长，了解需要使用的荧光滤光片；C 荧光显微镜光学系统部件在组成以及原理上与前三种显微镜差别很大，在使用时应了解荧光显微镜光程和明场显微镜光程；D 汞灯灯室可产生高温高热，使用完请勿立即盖上防尘罩，而要在关闭电源30 分钟后再盖上防尘罩，防止烧坏显微镜部件和发生火灾E 为延长汞灯使用寿命，应按规范操作：开启汞灯变压器电源预热三分钟后再启动激发按钮，激发后就可以使用，每次使用至少开机30分钟，两次连续使用的时间间隔至少30分钟以上；2将当前所需激发方式的滤光块移入光路。
3放置标本，并调节载物台使标本进入视野。
4 切换到所需的物镜并观察标本。
5 返回明场显微观察。
转动激发方式切换转盘，将其调节到无滤光块的位置上。
拍照软件：NIS图像捕捉软件介绍打开NIS软件包，主菜单中有File Edit Camera Preprocess View Help以下主要介绍各目录下的主要子目录一．File:在此目录下主要是打开，保存，另存，Options(选项),打印，退出等其中重要的是Options点击File/options会出现一个对话框，可设置图片保存路径，前缀，格式（JPEG/TIFF等）还可设置标尺的计量单位（纳米，微米，毫米等）二．Edit：在此目录下主要是Resize(尺寸重设)，Crop（剪裁），Copy（复制）Flip Horizontally （水平翻转），垂直翻转，向左旋转，向右旋转，文件合并（File Merge）其中重要的是File Merge点击Edit／File Merge会出现一个对话框，可以分别输入红，绿，蓝三色荧光图片，点OK，就可实现三色荧光叠加。
荧光显微镜的基本使用方法
Microscopes with an upright-style frame are capable of producing fluorescence illumination either through episcopic or diascopic optical pathways, although the latter is rarely used today. Epi-illuminators usually consist of a mercury or xenon lamphouse coupled to a vertical illuminator that is positioned above the main frame in a separate assembly. The microscope nosepiece and transmitted light components (diascopic illuminator, condenser, field diaphragm, filters, etc.) are built into the main frame, while fluorescence components are housed in the vertical illuminator. These illuminators often contain a revolving or sliding turret that houses four to six "cubes" that contain a mixture of interference filters including a barrier filter, dichroic mirror, and an excitation filter. As illustrated above, light emitted from the lamp positioned in the episcopic lamphouse passes through a collector lens and then the field and aperture diaphragms before entering the first interference filter in the cube set, the emission filter. This light is then directed through the objective and onto the specimen by a special dichroic mirror that reflects certain wavelengths while passing others. Secondary fluorescence, emitted by fluorophores residing in the specimen, travels back through the objective and the dichroic mirror before passing through a barrier filter and into the microscope eyepieces or camera system.
80i荧光显微镜操作流程 明场显微术
明场显微术
北京德源胜佳科技发展有限公司
1.打开电源装置的开关。将显微镜主机后面.按预置开关（显微镜前面的绿色按钮）打 开明场照明。旋转明场光源亮度调节旋钮， 将光源调节到用户所需要的强度。
3.将显微镜右下部的NCB11移至光路中；ND8、 ND32两个减光片依据光强需求移至光路中。
（NCB11是白光平衡片，ND8、ND32两个减光 片分别将光强减弱为原来的1/8和1/32）
4.推入目镜筒上面的光路转换杆，将光路 切换到肉眼观察方式。
5.转滤光片转盘到4号位（无滤光块的空位）。
6.将10 倍物镜置于光路中。
7.放置标本，将需要观察的部位置于光路中
8.调粗/细准焦螺旋对标本调焦
9.转换到需要的物镜并观察标本。
10.调节屈光度和瞳孔距离（根据实 际操作时的个人感受）。
11.观察完毕后，将明场亮度调节旋钮旋到最 暗（左图），关闭显微镜前面的预置开关
（中图），最后关闭电源装置开关（右图）。
80i荧光(操作指引)
NIKON 正置荧光显微镜80i
照相光路切换拉杆
荧光光路
视场光阑
孔径光阑 X 方向平台移动
Y 方向平台移动
色温片NCB11
减光片ND8,ND32
调焦/微调
调焦上限位
透射光视场光阑
聚光器
目镜
荧光光闸
荧光附件
荧光滤光块转盘
照相CCD
CCD 数据线
C 接口 卤素灯开关
NIKON正置荧光显微镜使用方法
一：白光观察
1.打开显微镜主机背面左侧电源开关及正前方卤素灯开关
2.调节左侧光亮度调节旋钮，把光调到合适亮度
3.把荧光滤光块转盘转到没有安装荧光滤光块的空位上。
4.把样品放在载物台上
5.使用低倍率物镜找象，调节调焦旋钮对样品对焦
6.选择观察所需的物镜对样品对焦
7.观察完毕，把亮度调节旋钮调到亮度最低，关闭正前方及背面左
侧开关。
二：荧光观察
1.打开汞灯激发器电源开关
2.把样品放在载物台上
3.转动荧光滤光块转盘，根据需要选择合适的荧光滤光块
4.打开关闸
5. 对焦观察观察，并可通过插入减光片来调节激发光的强度:注意初步找像前
把减光片都拉出来，以免荧光太弱，人眼感觉不到。
6. 观察后关闭汞灯电源开关。
注意事项：
1、确保汞灯工作30分钟以上方可关闭
2、确保汞灯关闭30分钟以上方可再次开启。
NIKON 80i中文说明书
1. 在组装、连接/断开电源线、换灯和维护时，将产品电源断开。 为了防止触电和/或故障，在组装、连接/断开电源线、换灯和清洁产品及物镜时，切记关闭产品的电源开关（按下开关， 至“!”位置）并从仪体插座上拔下电源线。
2. 更换灯注意事项。 为防止烫伤，在关灯后至少等待 30 分钟，使其有足够的时间冷却。为了避免触电或故障，切记在换灯之前先将产品电源 开关和外围设备开关关闭（按下电源开关按钮令其弹出），然后从壁仪体插座拔下电源线。 换灯以后确保灯箱盖牢牢固定到灯箱。切勿在灯箱盖打开时开灯。切勿打碎用过的灯，相反，将其作为特殊工业垃圾或按 照当地法规的规定进行处置。
6
产品搬运处置说明
产品搬运处置说明
1. 搬运产品时动作要轻。 本产品属精密光学仪器，搬运时动作要轻。避免使其受到突然的冲击和振动。. 即便是相对较弱的冲击力也有可能影响物镜的精密度。
2. 弱电磁波。 产品会发出微弱的电磁波。切勿将精密电子仪器放置在产品近旁，以免降低其性能。如果电视或无线电接收受效果到影响， 将电视或无线电移至远离产品的地方。
4. 显微镜的电源线和交流适配器的电源线。 使用规定的电源线中的一种。误用电源线可能会导致起火或其它危险。 该产品属于一级触电保护产品。一定要将其连接到适当的接地端子。 关于规定的电源线，参阅第 8 章。 了防止触电，在拔插电源线之前一定要关闭产品总电源开关（按它至“0”位）。
5. 安全注意事项警告 检查交流适配器（在使用 D-CBC-BOX 集线箱时）D-CB C-BOX 只适用规定的型号交流(AC)适配器供应用。使用任一种其他型 号适配器会导致故障，过热，甚至失火。参阅第 8 章适配器规定。 • 防止故障和失火交流适配器应放通风良好处，为防止热辐射及过热，切勿遮盖和防止东西在适配器上面。 • 为防止故障，在接近交流适配器之前，总是切断 C-BOX 的开关。
Nikon80i免疫荧光显微镜操作要点
Nikon 80i荧光显微镜操作程序1.接通电源，开启计算机。
2.打开明视场光源,选择明视场光路通道（4-6）。
3.点击桌面“ACT-1”图标。
4.调节合适的光源亮度及背景颜色。
5.在“图片”选项中选择合适的图片像素及保存格式。
6.在“保存”选项中选择或建立保存图片的文件夹，并点击“应用”。
7.在“前缀”中输入图片名称。
8.根据所选物镜，在工具栏“μm”中选择对应物镜倍数，确定标尺。
9.选择合适视野，调节焦距呈像清晰后，点击“EXPOSURE”自动拍摄，待保存完毕后，进行下一次拍摄。
10.拍摄完毕后，先关闭软件，将光源调至最暗后关闭显微镜电源，关闭计算机，整理操作台。
11.荧光拍摄过程：打开汞灯光源，选择荧光通道（1-3），其余操作基本与上述相同。
本显微镜荧光通道配置：●UA(EX:330-380,DM:400,BA:420)●B-2A(EX:450-490,DM:505,BA:520)●G-2A(EX:510-560,DM:575,BA:590)12.按实际情况在《精密贵重仪器设备使用记录》本登记。
图像分析操作程序1.点击桌面“形态分析”图标。
2.在“文件”中打开图片。
3.在“处理”下拉菜单或右边的快捷方式中点击“彩色分割”，用“色选取”笔选取阳性细胞，并按“确定”键。
4.在“分析”下拉菜单或左上方的快捷方式中点击“数据计算”，开始计算。
5.在“分析”下拉菜单或左上方的快捷方式中点击“数据统计”，出现空白表，按下方“统计”键，开始统计。
6.右键发送到“word”，保存。
注意事项：1.只有进行荧光观察时才能打开荧光电源，否则不要打开，以免影响高压汞灯的寿命。
2.汞灯开启后至少半小时关闭，关闭后半小时内不要打开。
4.切片应清洁干净，以免污染载玻台。
5.使用油镜时，观察完毕后，应及时清洁油镜镜头及载玻片。
6.勿在显微镜室内吃零食。
Nikon 80i荧光显微镜使用说明
Nikon 80i荧光显微镜使用说明△荧光显微镜属贵重仪器，未经保管人员同意请勿擅自使用。
△严格按照操作步骤进行，在使用过程中如发现问题应及时向保管人员反映。
△因违反操作规程，而导致仪器损坏，根据本中心《损坏仪器赔偿制度》进行赔偿。
△使用者在使用完毕后应进行登记.维护和保养本仪器应定期进行维护和保养。
●防止镜头霉变，定期除湿。
●为防止损坏荧光灯泡，荧光光源关闭后，15分钟内不得再重新开启。
●荧光灯泡的最佳使用期限是200小时，如发现荧光强度明显降低应更换荧光灯泡。
荧光显微镜操作步骤△显微镜系精密仪器，务请不要碰击，要仔细耐心使用。
△荧光光源关闭后，15分钟内不得再开启。
△荧光灯泡的最佳使用期限是200小时，因此每次使用时请尽量缩短时间。
1.插上电源插座，打开主机电源开关。
2. 将待检标本置于载物台上。
3. 用10×物镜对焦点，根据使用者的眼间距调节双目镜筒的间距。
4. 调节光圈及灯光强度至合适位置。
5. 调节粗调和微调使标本至最清晰。
6. 拔出活动杆，使光路通过CCD至显示器。
7.保存图象至电脑中。
8. 使用完毕后关掉电源，如镜头上有指纹或污迹用擦镜纸将其擦除。
●荧光光源操作1.插上荧光光源电源插座，打开荧光光源电源开关。
2. 打开光栅。
3. 根据使用荧光素的不同选择不同的荧光滤光片。
4. 将待检标本置于载物台上。
5. 用10×物镜对焦点，根据使用者的眼间距调节双目镜筒的间距。
6. 调节粗调和微调使标本至最清晰。
7. 拔出活动杆，使光路通过CCD至显示器。
8. 保存图象至电脑中。
9. 使用完毕后关掉电源，如镜头上有指纹或污迹用擦镜纸将其擦除。
10. 登记使用情况。
Nikon 80i主要技术参数：放大倍数40-1000，CFI60无限远光学系统，内置滤色镜，数字成像头。
明场、暗场、简单偏光、荧光/明场、荧光/暗场。
波长：330-380，450-490，510-560。
主电压90~250V。
荧光显微镜操作说明
一、荧光显微镜荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。
它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。
是利用一定波长的光激发标本发射荧光，通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像（一）光源现在多采用200W的超高压汞灯作光源，它是用石英玻璃制作，中间呈球形，内充一定数量的汞，工作时由两个电极间放电，引起水银蒸发，球内气压迅速升高，当水银完全蒸发时，可达50～70个标准大气压力，这一过程一般约需5～15min。
超高压汞灯的发光是电极间放电使水银分子不断解离和还原过程中发射光量子的结果。
它发射很强的紫外和蓝紫光，足以激发各类荧光物质，因此，为荧光显微镜普遍采用。
超高压汞灯也散发大量热能。
因此，灯室必须有良好的散热条件，工作环境温度不宜太高。
新型超高压汞灯在使用初期不需高电压即可引燃，使用一些时间后，则需要高压启动（约为15000V），启动后，维持工作电压一般为50～60V，工作电流约4A左右。
200W超高压汞灯的平均寿命，在每次使用2h的情况下约为200h，开动一次工作时间愈短，则寿命愈短，如开一次只工作20min，则寿命降低50%。
因此，使用时尽量减少启动次数。
灯泡在使用过程中，其光效是逐渐降低的。
灯熄灭后要等待冷却才能重新启动。
点燃灯泡后不可立即关闭，以免水银蒸发不完全而损坏电极，一般需要等15min。
由于超高压汞灯压力很高，紫外线强烈，因此灯泡必须置灯室中方可点燃，以免伤害眼睛和发生爆炸时造成操作。
超高压汞灯（100W或200W）光源的电路和包括变压、镇流、启动几个部分。
在灯室上有调节灯泡发光中心的系统，灯泡球部后面安装有镀铝的凹面反射镜，前面安装有集光透镜。
国产超高压汞灯GCQ-200型性能良好，可以代替HBO-200等型的进口灯泡，平均寿命在200h以上，价格也比较低。
我国研制的一种简易轻便型高色温溴钨荧光光源装置，体积小，重量轻，功率小，交、直流两用（自带直流电源），易于携带，使用方便，已推广应用。
荧光显微镜操作步骤
Axioplan 2 imaging研究级正立显微镜操作步骤一．打开电源插座开关，将计算机电源打开。
二．按下显微镜主机电源绿色开关至“?”位置。
三．打开计算机桌面上Axiovision 4.6 软件。
四．按下显微镜主机HAL灯亮。
五．将载玻片放置载物台上。
1．普通光显微观察(1). 将滤光片调节器调至1位置，转动载物台下的滤光片至I/H。
(2) 用目镜进行观察样品位置，手动进行聚焦。
(3) 调节HAL亮度（一般调到2的位置较好）。
物镜配有6种镜头1，5，10，20， 40， 100为油镜。
2．DIC（微分干涉）显微观察（1）将载物台滤光片调节器调至DIC位置，转动载物台下的滤光片至位置。
（2）选择物镜镜头20或40。
（3）用普通光进行观察样品，手动进行聚焦（不清楚可调节20或40底部旋钮）。
3．相差显微观察（1）.将载物台滤光片调节器调至1或6，7，8位置。
物镜必须选择10。
如物镜镜头选择20或40，载物台滤光片调到2位置。
（2）．用普通光进行观察样品，手动进行聚焦。
4．荧光显微观察(1)．按下荧光显微镜电源power至绿色。
预热5分钟。
（2）用普通光进行观察样品位置，选择物镜镜头（1，5，10，20， 40，100为油镜），手动进行聚焦。
然后关闭HAL灯。
（3）按滤光片调节器根据波长来选择（3紫外，波长360左右；4绿光，波长480左右；5红光，波长543左右）。
（4）打开荧光通道挡板（荧光通道挡板只有在观察或拍照的时候打开，其它时候关闭挡板防止荧光萃灭）。
六．点击图像采集Live键→properties →Adjust→measure键测试照相的亮度。
七．点击Pixel选择图像放大倍数与物镜放大倍数相同。
八．点击Snap进行拍照。
九．点击Scale bar，移动鼠标将标尺加到图像中。
十．点击Save图像保存。
十一.图像拍摄完毕，关闭HAL灯。
十二. 关闭计算机。
十三.按下显微镜绿色开关至“○”位置。
荧光显微镜及其操作
荧光显微镜及其操作荧光显微镜(Fluorescence microscope)及其操作荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。
它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。
是利用一定波长的光激发标本发射荧光，通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。
目录原理荧光显微镜标本制作要求使用荧光显微镜的注意事项荧光图像的记录方法原理某些物质经一定波长的光（如紫外光）照射后，物质中的分子被激活，吸收能量后跃迁至激发态；当其从激发态返回到基态时，所吸收的能量除部分转化为热量或用于光化学反应外，其余较大部分则以光能形式辐射出来，由于能量没能全以光的形式辐射出来，故所辐射出的光的波长比激发光的要长，这种波长长于激发光的可见光部就是荧光(fluorescence)。
所谓荧光就是某些物质在一定波长光（如紫外光）的照射下、在极短时间内所发出的比照射光波长更长的可见光。
由此可见，被照射物质产生荧光必须具备以下两个条件：①物质分子（或所特异性结合的荧光染料）必须具有可吸收能量的生色团；②该物质还必须具有一定的量子产率和适宜的环境（如溶剂、pH、温度等）。
荧光显微术是利用荧光显微镜结可发荧光的物质进行观测的一种实验技术。
某些物质在一定短波长的光(如紫外光)的照射下吸收光能进入激发态，从激发态回到基态时, 就能在极短的时间内放射出比照射光波长更长的光(如见光)，这种光就称为荧光。
有些生物体内的物质受激发光照射后可直接产生荧光, 称为自发荧光(或直接荧光)，如叶绿素的火红色荧光和木质素的黄色荧光等。
有的生物材料本身不能产生荧光，但它吸收荧光染料后同样却能发出荧光，这种荧光称为次生荧光(或间接荧光)，如叶绿体吸附吖啶橙后便可发出桔红色荧光。
荧光显微镜具特殊光源（多为紫外光光源），提供足够强度和波长的激发光，诱发荧光物质发出荧光。
在视场中所所观察到的图像，主要是样品的荧光映像。
（一）光源现在多采用200W的超高压汞灯作光源，它是用石英玻璃制作，中间呈球形，内充一定数量的汞，工作时由两个电极间放电，引起水银蒸发，球内气压迅速升高，当水银完全蒸发时，可达50～70个标准大气压力，这一过程一般约需5～15min。
正置荧光显微镜操作教程
正置荧光显微镜操作教程使用正置荧光显微镜可以按照以下三个步骤并按照先后顺序操作：分别是显微镜主机——显微镜的设定——使用的软件操作。
一.荧光显微镜主机操作步骤1.开显微镜电源2.需使用荧光才开荧光电源（记住：如需要使用荧光观察，开启荧光电源前，若感觉机盒很烫，请稍待10~20分钟，等温度降回室温3.再开启！）4.开CCD开关，CCD亮黄灯5.开电脑，打开电脑桌面上的Piturefram软件，此时CCD会由黄灯变成橘灯（代表CCD与软件连接成功）二. 荧光显微镜的设定1.选择荧光滤镜：1-DAPI、2-FITC、3-Rhod、4-DIC、5-明场视野2.设定位于I / H（明场视野）3.选择蓝色滤片（色温会较接近白光）4.光圈设定在MAX与MIN中间的位置5.橘色镜片在正确位置就定位6.选择光栅：明视野-推到底；荧光-拉出一段三.软件的使用步骤1. 打开软件后先至File，check Snap direct To Disk有ˇ时，必须先点除或改存档至预先设好的资料夹\，以免存档时照片存至上一位使用者的File内2. 重新设定存档File时，务必check File type为JPEG 24-Bit3. 可至View点选Thumbnail Strip，按Snap拍照后会先显示于右方暂存格上，只需将预存档之图片拖曳至窗口即可存档4. 若影像画面跳离主视窗时，只要点击那个由2个长方形叠在一起按钮，即可回到主窗口。
5. 开启工具列的铁锤图型（相机控制工具），可执行的功能有：拍照（Snap键）白平衡（AWB图）-游标箭头尖端移至背景空白处按下，可校正图片颜色局部放大（放大镜图）-将影像放大，并按右键点选Zoom To Fit Window 可复原曝光与增益比连动钮需呈按下状态（连结图型）手动曝光时间（Exposure蓝色调节钮）-调节影像明暗图型，即可回到主视窗手动调整增益（Gain钮）-正常情形下请设定在16. 开启工具列的老虎钳图型（进阶工具），可执行的功能有：设定选取区域（ROI键）-可选取特定的区域放大，而游标会呈手掌状，欲回复原状则按 COLOR与Bin off Color及Gain=1 需为按下状态作者：明美光电参考：/article/f0062228fbe29ffbd3f0c8a4.html。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
Nikon 80i荧光显微镜使用说明
△荧光显微镜属贵重仪器，未经保管人员同意请勿擅自使用。
△严格按照操作步骤进行，在使用过程中如发现问题应及时向保管人员反映。
△因违反操作规程，而导致仪器损坏，根据本中心《损坏仪器赔偿制度》进行赔偿。
△使用者在使用完毕后应进行登记.
维护和保养
本仪器应定期进行维护和保养。
●防止镜头霉变，定期除湿。
●为防止损坏荧光灯泡，荧光光源关闭后，15分钟内不得再重新开启。
●荧光灯泡的最佳使用期限是200小时，如发现荧光强度明显降低应更换荧光灯泡。
荧光显微镜操作步骤
△显微镜系精密仪器，务请不要碰击，要仔细耐心使用。
△荧光光源关闭后，15分钟内不得再开启。
△荧光灯泡的最佳使用期限是200小时，因此每次使用时请尽量缩短时间。
1.插上电源插座，打开主机电源开关。
2. 将待检标本置于载物台上。
3. 用10×物镜对焦点，根据使用者的眼间距调节双目镜筒的间距。
4. 调节光圈及灯光强度至合适位置。
5. 调节粗调和微调使标本至最清晰。
6. 拔出活动杆，使光路通过CCD至显示器。
7.保存图象至电脑中。
8. 使用完毕后关掉电源，如镜头上有指纹或污迹用擦镜纸将其擦除。
●荧光光源操作
1.插上荧光光源电源插座，打开荧光光源电源开关。
2. 打开光栅。
3. 根据使用荧光素的不同选择不同的荧光滤光片。
4. 将待检标本置于载物台上。
5. 用10×物镜对焦点，根据使用者的眼间距调节双目镜筒的间距。
6. 调节粗调和微调使标本至最清晰。
7. 拔出活动杆，使光路通过CCD至显示器。
8. 保存图象至电脑中。
9. 使用完毕后关掉电源，如镜头上有指纹或污迹用擦镜纸将其擦除。
10. 登记使用情况。
Nikon 80i主要技术参数：放大倍数40-1000，CFI60无限远光学系统，内置滤色镜，数字成像头。
明场、暗场、简单偏光、荧光/明场、荧光/暗场。
波长：330-380，450-490，510-560。
主电压90~250V。
频率：50~60HZ。
功率消耗：最大160W。
周围环境温度：10~36℃。
相对湿度：0~80%。
污染级别：2。
应用范围：正置明场、相差及荧光，主要用于细胞及细菌等的观察及荧光摄影。