大肠菌群和大肠埃希氏菌
[资料]酶底物法（科立得）检测总大肠菌和大肠埃希菌（或粪大肠菌）技巧参数
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酶底物法（科立得）检测总大肠菌群和粪大肠杆菌（或大肠埃希菌）一、适用范围：用于水样中的总大肠菌群和粪大肠杆菌（或大肠埃希菌）的同步定量分析。
二、工作环境：(a)室内使用：环境温度 -10°C～50°C(b)电源供给：220V±10%，50HZ(c）相对湿度：25%～85%，无凝结三、原理：1，大肠菌群细菌能特异性产生β-半乳糖苷酶（β-D-galactosidase），该生物酶可以分解ONPG（Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside，β-半乳糖醛苷），使培养液呈黄色。
（注：检测粪大肠菌的培养温度为44.5°C;检测总大肠菌的培养温度为：36±1℃）2，大肠埃希氏菌能特异性产生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase），分解MUG（4-甲基-伞形葡萄糖苷酸，4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide）,使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光。
利用该原理，来判断水样中是否含有大肠菌群及大肠埃希氏菌（或粪大肠菌）。
四、仪器技术参数：1、国产程控定量封口机# 技术指标性能（1）可靠性无漏液，无破孔（2）噪音 <50 dba @ 2 ft.（3）重量 <17公斤.（4）处理速度 <15秒/样品（5）预热时间 <15分钟（6）加热温度(内辊) 200°C +/- 10°C（7）外罩温度 <40°C（8）工作电压 220V±10%（9）工作环境温度 -10°C～50°C（10）带51孔及97孔定量盘橡胶托垫2、紫外灯（1）6W 365 nm长波紫外灯，含灯管.（2）尺寸：(9 cm x 7 cm x 27 cm)（3）电源：220V四、技术参数指标：（1）量程范围： 0－200个/100mL 或0－2419个/100mL（2）绝对检出限：0个（3）培养基：ONPG-MUG（4）样品体积： 100mL（5）检测周期： 24小时五、系统配置及性能指标：本配置能够简单快捷地同时测定水中总大肠菌群和粪大肠菌群（或大肠埃希菌）；应包括所有能正常分析的仪器设备及消耗品：1 、消耗品：应能保证1000个水样常规检测所需的消耗品（1）DST酶底物法24小时Colilert试剂（ ONPG-MUG培养基）：200个/盒；（2）取样瓶：独立密封包装；（3）定量盘：51孔或97孔；2 、程控定量封口机（带51孔及97孔定量盘橡胶托垫）；3 、6瓦特紫外灯，220v，366nm；。
大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的从属关系及介绍[2]
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总大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌的从属关系及介绍相互关系总大肠菌群> 耐热大肠菌群> 大肠埃希氏菌一、大肠菌群介绍大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界广泛存在。
调查研究表明，大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。
粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。
大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。
大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。
粪便是人类肠道排泄物，其中有健康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除一般正常细菌外，同时也会有一些肠道致病菌存在（如沙门氏菌、志贺氏菌等），因而食品中有粪便污染，则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，必须看作对人体健康具有潜在的危险性。
大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作中。
二、总大肠菌群所谓总大肠菌群系指一群在37℃培养24小时能发酵乳酸、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
三、耐热大肠菌群与粪大肠菌群的比较北美国家一般使用“粪大肠菌群”概念，如AOAC、FDA。
SN中的“粪大肠菌群”概念为等同采用AOAC方法，故而使用粪大肠菌群概念；而欧洲使用“耐热大肠菌群”概念，较少使用“粪大肠菌群”。
一般欧洲学者认为，“粪大肠菌群”的提法不太科学，耐热大肠菌群的范围比粪大肠菌群范围大。
两种方法对水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌检测的对比论述
两种方法对水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌检测的对比论述发布时间：2021-03-23T04:11:47.963Z 来源：《学习与科普》2020年19期作者：邱磊[导读] 文章首先分析了实验时所使用的材料和试验方法，其次阐述了试验结果，最后对试验结果进行了总结。
谱尼测试集团江苏有限公司摘要：文章首先分析了实验时所使用的材料和试验方法，其次阐述了试验结果，最后对试验结果进行了总结。
通过结果，得出结论，在水中，对总大肠菌、大肠埃希氏菌进行实际试验检测的过程中，通过两种方法来对其检测，这两种方法是酶底物法和多管发酵法。
通过试验检验结果来看，酶底物法检测的时间比较短，操作简单，方便进行观察，是值的普及和推广的一种检测方法。
关键词：大肠埃希氏菌；总大肠菌；酶底物法；多管发酵法1.材料和方法1.1使用材料、仪器试验检测的过程中，使用材料及仪器有MMO-MUG培养基，EC-MUG、乳糖蛋白胨培养基。
还有培养箱36℃±1、44.5℃±0.5℃；紫外灯，其波长是366m.1.2方法（1）试验前准备在试压之前，要先做好相应的准备工作，试验正式开始前，准备好实用性菌株和加标水样等，同时还要准备培养基粉末（2.7±0.4）g；然后在结合配置有关要求，将EC-MUG、乳糖白胨培养液制作好。
（2）方法原理在检测总大肠菌的时候，应用MMO-MUG来检测，能够产生胨半乳糖苷酶，其能够分解ONPG，分解完成后，这个时候，会出现颜色上的变化，在检测大肠埃希氏菌的时候，应用MMO-MUG及EC-MUG培养基来检测，这个时候会产生β-葡萄糖醛酸酶，然后在进行分解，分解后挥释放荧光，而且通过紫外线照射，特征性荧光也十分的明显[1]。
（3）试验方法在进行适用性实验的时候，要先把分装好的MMO-MUG以及EC-MUG等培养液取出来，取出来后，将混悬液分别加入到各个管中，其结果要在二十四小时后来进行观察。
①灵敏度试验在试验之前，将培养后的侵袭性培养物取出来，这种培养物培养了二十四个小时，取出来之后，在将制成0.5适度菌液，然后在进行稀释，稀释的时候要对其菌液进行十倍稀释，一直稀释到1500MPN/100mL～1MPN/100mL，在开始灵敏度试验。
微生物基本知识：大肠菌群的分类！
微⽣物基本知识：⼤肠菌群的分类！
微⽣物基本知识：⼤肠菌群的分类！
1、⼤肠菌群
GB 4789.3：⼀群能发酵乳糖、产酸产⽓、需氧和兼性厌氧的⾰兰⽒阴性⽆芽孢杆菌。
该菌主要来源于⼈畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价⾷品的卫⽣质量，推断⾷品中有否污染肠道致病菌的可能。
2、粪⼤肠菌群
GB/T4789.39-2008 ⼀群在44.5°C培养24-48h能发酵乳糖、产酸产⽓、需氧和兼性厌氧的⾰兰⽒阴性⽆芽孢杆菌。
该菌群来⾃⼈和温⾎动物的粪便，作为粪便污染指标评价⾷品的卫⽣状况，推断⾷品中肠道致病菌污染的可能性。
AOAC、FDA⼀般使⽤“粪⼤肠菌群”概念，GB4789的“粪⼤肠菌群”概念为等同采⽤AOAC⽅法，故⽽使⽤粪⼤肠菌群概念；⽽欧洲使⽤“耐热⼤肠菌群”概念，较少使⽤“粪⼤肠菌群”。
⼀般欧洲学者认为，“粪⼤肠菌群”的提法不太科学，耐热⼤肠菌群的范围⽐粪⼤肠菌群范围⼤。
3、⼤肠埃希⽒菌
GB4789.38-2012 ⼴泛存在于⼈和温⾎动物的肠道中，能够在44.5°C发酵乳糖、产酸产⽓，IMViC(靛基质、甲基红、VP试验、柠檬酸盐）⽣化试验为++--或-+--的⾰兰⽒阴性杆菌。
以此作为粪便污染指标来评价⾷品的卫⽣状况，推断⾷品中肠道致病菌污染的可能性。
⼤肠埃希⽒菌的不同菌株间DNA相关性为80% ，⽽与同科的志贺⽒菌属除鲍⽒志贺⽒菌外的DNA相关性可达80-87%。
⼤肠埃希⽒菌为⼈和动物肠道中的常居菌，⼀般多不致病，在⼀定条件下可引起肠道外感染。
4、致泻⼤肠埃希⽒菌
⼤肠埃希⽒菌为⼈和动物肠道中的常居菌，⼀般多不致病，在⼀定条件下可引起肠道外感染。
水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌(酶底物法)分析原始记录
接种量 （mL）
阳性孔数（个） 大孔 小孔
查表结果 （MPN/100mL）
检测结果 （MPN/L)
备注 XXXX-04-J071
分析人：
校核人：
审核人：
分析日期及时间：
XXXXXX 有限公司
2021 年 09 月 09 日颁布
水质总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌（酶底物法）分
析原始记录（续表）
培养温度℃培养时间 h 大肠埃希氏菌 黄色 无色
金黄色葡萄球菌 无色
培养温度℃培养时间 h 大肠埃希氏菌 黄色 无色
金黄色葡萄球菌 无色
培养温度℃培养时间 h 大肠埃希氏菌（耐热型） 黄色有荧光 无荧光
产气肠杆菌 无色
样品空白对照
样品编号
接种量 （mL）
阳性孔数（个） 大孔 小孔
接种量 （mL）
阳性孔数（个） 大孔 小孔
查表结果
（MPN/100mL）
检测结果
（MPN/L)
样品编号
接种量 （mL）
阳性孔数（个） 大孔 小孔
接种量 （mL）
阳性孔数（个） 大孔 小孔
接种量 （mL）
阳性孔数（个） 大孔 小孔
查表结果
（MPN/100mL）
检测结果
（MPN/L)
样品编号
接种量 （mL）
阳性孔数（个） 大孔 小孔
接种量 （mL）
检出限
10MPN/L
采样日期
样品描述
液态色澄清浑浊
样品种类 分析步骤
地表水地下水工业废水 生活污水 其他
环境条件
温度℃；湿度 RH%
1. 样品稀释：根据样品污染程度确定接种量，接种量为 10mL 时，取 10mL 样品加入到盛有
7-3第七章食品微生物检验-大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌计数
（一）大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌
1、大肠菌群
在一定培养条件下(一般是37℃24小时)能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌 氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。（GB4789.3—2010）
大肠菌群不是细菌学上的分类命名，而是根据卫生学方面的要求，提出的与 粪便污染有关的细菌，即作为食品、水体等是否受过人畜粪便污染的指示菌， 这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。根据进一步的生化试验，可将这 群细菌再分为大肠艾希氏菌（俗称大肠杆菌）、枸橼酸杆菌、肺炎克雷伯氏菌 和阴沟肠杆菌等。
2、粪大肠菌群
• 根据生长温度的差异，将能在37C生长的称为总 大肠菌群，而在44.5C仍能生长的大肠菌群称为 耐热大肠菌群(thermo-tolerant coliform group) 或 粪大肠菌群（faecal coliform Fc），在人和动物 粪便中所占的比例较大，而且在自然界容易死亡。 因此，粪大肠菌群对粪便污染的指示作用更为直 接和贴切，主要就是大肠艾希氏菌，但也包括克 雷伯氏菌属，正是由于包括了克雷伯氏菌属，使 其与粪便污染的相关性受到了影响。
3)大肠艾希氏菌在外界存活时间与一些主要肠道致病菌接近，它的出现预示 着某些肠道病原菌的存在，因此该菌是国际上公认的卫生监测指示菌。近 年来，有些国家在执行HACCP管理中，将大肠艾希氏菌检测作为微生物污 染状况的监测指标和HACCP实施效果的评估指标。
4)大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌这三个指标在实际工作中都在应用，但 用途有所不同，一般认为大肠菌群是水源的卫生指标和食品加工卫生状况 的通用指标，粪大肠菌群主要用于贝类和贝类养殖用水的卫生指标，大肠 杆菌用于指示食品受到近期粪便污染或不卫生加工。作为粪便污染的指示 菌，大肠埃希菌检出的意义最大，其次是耐热大肠菌群，总大肠菌群的检 出意义略差一些。
大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的从属关系及介绍[2]
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大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的从属关系及介绍相互关系大肠菌群（总大肠菌群）>粪大肠菌群&耐热大肠菌群>大肠杆菌一、大肠菌群介绍大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界广泛存在。
调查研究表明，大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。
粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。
大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。
大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。
粪便是人类肠道排泄物，其中有健康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除一般正常细菌外，同时也会有一些肠道致病菌存在（如沙门氏菌、志贺氏菌等），因而食品中有粪便污染，则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，必须看作对人体健康具有潜在的危险性。
大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作中。
二、总大肠菌群所谓总大肠菌群系指一群在37℃培养24小时能发酵乳酸、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
三、耐热大肠菌群与粪大肠菌群的比较北美国家一般使用“粪大肠菌群”概念，如AOAC、FDA。
SN中的“粪大肠菌群”概念为等同采用AOAC方法，故而使用粪大肠菌群概念；而欧洲使用“耐热大肠菌群”概念，较少使用“粪大肠菌群”。
一般欧洲学者认为，“粪大肠菌群”的提法不太科学，耐热大肠菌群的范围比粪大肠菌群范围大。
《微生物与实验技术》食品中大肠埃希菌的检验实验
《微生物与实验技术》食品中大肠埃希菌的检验实验一、实验目的1.熟悉大肠埃希菌的检验原理2.熟悉大肠埃希菌检验的基本操作二、实验原理1.大肠杆菌，又叫大肠埃希氏菌是条件致病菌，在一定条件下可以引起人和多种动物发生胃肠道感染或尿道等多种局部组织器官感染。
因此，检查食品中是否存在治病大肠埃希氏菌具有实际意义。
2. 在TSI琼脂中,典型菌株为斜面与底层均呈黄色，产气或不产气，不产生硫化氢(H2S)。
置MUG-LST肉汤管于长波紫外灯下观察,MUG阳性的大肠埃希氏菌株应有荧光产生,MUG阴性的应无荧光产生，大肠埃希氏菌O157:H7/NM为MUG试验阴性,无荧光。
三、试剂及器材1 月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤：2 EC肉汤（E.coli broth）：3 蛋白胨水：4磷酸盐缓冲液：5伊红美蓝（EMB）琼脂：6 营养琼脂斜面：7结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）：8革兰氏染色液：9无菌1mol/LNaOH：10无菌1mol/LHCl：四、操作方法样品的稀释1. 固体和半固体样品：称取25g样品，放入盛有225mL磷酸盐缓冲液的无菌均质杯内，8000r/min~10000r/min均质1min~2min，制成1:10的样品匀液或放入盛有225mL磷酸盐缓冲液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min~2min制成1:10的样品匀液。
2.液体样品：以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1.10的样品匀液。
3. 样品匀液的pH值应在6.5~7.5之间，必要时分别用1mol/LNaOH或1mol/LHCl 调节。
4 .用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL，沿管壁缓缓注入9mL 磷酸盐缓冲液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面）振摇试管或换用1支1mL无菌吸管或吸头反复吹打，使其混合均匀，制成1：100的样品匀液。
大肠菌群、粪大肠、大肠埃希氏菌检验的相关知识总结
大肠菌群、粪大肠、大肠埃希氏菌检验的相关知识总结1、大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌检验方法（1）大肠菌群（colifoms）在36°C培养48h可发酵乳糖产酸产气、需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
该菌主要来源自人畜粪便，作为粪便污染指标评价食品的卫生状况，推断食品中肠道致病菌污染的可能。
（2）粪大肠菌群（Fecal colifoms）也称耐热大肠菌群。
指大肠菌群中能在44.5℃生长、发酵乳糖产生气体的一群细菌。
与大肠菌群一样，并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某-一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的-组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。
食品卫生学意义：作为粪便污染食品的指标菌，MPN值愈低则说明食品受粪便污染程度及对人体健康危害程度愈低。
作为肠道致病菌污染食品的指针，大肠菌群数量越多则肠道致病菌存在的可能性就越高，但两者之间并不总是呈平行关系。
（3）大肠埃希氏菌（Escherichia coli）分类学概念：肠杆菌科、埃希氏菌属。
是人和温血动物肠道内普遍存在的细菌，是粪便中的主要菌种。
一般生活在人大肠中并不致病，但它侵入人体一些部位时，可引起感染。
主要有：O抗原(菌体抗原，150个)；K抗原(荚膜抗原，90个)；H抗原( 鞭毛抗原，50个)（4）致泻性大肠埃希氏菌能侵入肠粘膜上皮细胞,引起食物中毒的大肠埃希氏菌。
产毒性大肠埃希氏菌(ETEC)-肠胃炎、旅行性腹泻。
致病性大肠埃希氏菌(EPEC)-婴儿腹泻；肠出血性大肠埃希氏菌(EHEC)--出血性结肠炎；(O157：H7；O104：H4；O111；O126等)侵袭性大肠埃希氏菌(EIEC)—杆菌性痢疾；粘附性大肠埃希氏菌(EAEC)—急慢性腹泻。
2、大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌的关系3、相关检验方法标准GB4789.3-2016食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数GB 4789.38-2012食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数GB 4789.39- -2013食品安全国家标准食品微生物学检验粪大肠菌群计数GB4789.6- 2016 食品安全国家标准食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验GB4789.36-2016食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏O157:H7/NM检验。
致泻大肠埃希氏菌与大肠杆菌
一、大肠菌群是指：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
一般认为该菌群细菌可包括、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
二、大肠杆菌是大肠菌群众多细菌的一个种类而已。
大肠杆菌（E. coli）为埃希氏菌属(Escherichia)代表菌。
一般多不致病，为人和动物肠道中的常居菌，在一定条件下可引起肠道外感染。
某些血清型菌株的致病性强，引起腹泻，统称致病性大肠杆菌。
三、致泻大肠埃希氏菌生物学特性大肠埃希氏菌更习惯称为大肠杆菌，分类于肠杆菌科，归属于埃希氏菌属，统称为致泻性大肠杆菌，一般包括五种：即肠毒素性大肠杆菌（ETEC）、致病性大肠杆菌（EPEC）、出血性大肠杆菌（EHEC）、侵袭性大肠杆菌（EIEC）和粘附性大肠杆菌（EAEC）。
大肠埃希氏菌为两端钝圆的短小杆菌，一般大小约μμm*μμm,因生长条件不同，个别菌体可呈近似球状或长丝状。
此菌多单独存在或成双，但不呈长链状排列。
约有50%左右的菌株具有周生鞭毛而能运动，但多数菌体只有1-4根，一般不超过10根，故菌体动力弱；多数菌株生长有比鞭毛细、短、直且数量多的菌毛，有的菌株具有荚膜或微荚膜；不形成芽胞，对普通碱性染料着色良好，革兰氏染色阴性。
此菌合成代谢能力强，在含无机盐、胺盐、葡萄糖的普通培养基上生长良好。
最适生长温度为37℃，在42-44℃条件下仍能生长，生长温度范围为15-46℃。
在普通营养琼脂上生长表现3种菌落形态：光滑型、粗糙型、粘液型。
大肠埃希氏菌兼性厌氧，在有氧条件下生长良好，最适生长pH为，所用培养基pH为若pH值低于或高于则生长缓慢。
大肠埃希氏菌发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖和甘露醇产酸产气，分解蔗糖因菌株而异，录素酶试验阴性，IMVi试验++--，有些菌株如碱性异型菌群，微产碱，不产气，无动力，易与志贺菌混淆。
大肠埃希氏菌的抗原构造主要由菌体抗原(O)，鞭毛抗原(H)和荚膜抗原(K)三部分组成。
现巳知有171个O抗原、99个K抗原和56个H抗原。
大肠埃希菌微生物学知识
大肠埃希菌微生物学知识
大肠埃希菌（Escherichia coli）是一种革兰氏阴性杆菌，属
于肠道菌群中的一种常见细菌。
它通常存在于人和动物的肠道中，
是肠道菌群中的重要成员之一。
首先，让我们从微生物学的角度来了解大肠埃希菌。
大肠埃希
菌是一种厌氧菌，意味着它可以在缺氧的环境中生存。
它是革兰氏
阴性菌，这意味着它的细胞壁不会保留革兰氏染色的紫色染色剂。
大肠埃希菌的形态为短小的杆状细胞，通常在显微镜下呈现出单个
或成对的形式。
其次，大肠埃希菌在微生物学中的重要性不言而喻。
它在肠道
内起着重要的生理功能，帮助消化和吸收营养物质。
此外，它还能
够产生维生素K和B群维生素，对维持肠道微生态平衡起着重要作用。
除此之外，大肠埃希菌也具有一定的致病性。
某些菌株可能引
起食物中毒或感染，导致腹泻、腹痛等症状。
其中一些菌株还可能
携带耐药基因，对抗抗生素的能力增强，对公共卫生构成一定威胁。
另外，大肠埃希菌也在科学研究和工业生产中发挥着重要作用。
科学家们利用大肠埃希菌作为模式生物，进行基因工程、蛋白表达
等研究。
在工业上，大肠埃希菌也被用来生产重要的生物药品和化
学品。
总的来说，大肠埃希菌作为一种常见的微生物，在微生物学、
医学、生物工程等领域都具有重要的意义。
它的存在既有益于人类
健康，又需要引起我们的关注和管理。
希望这些信息能够全面回答
你关于大肠埃希菌的微生物学知识。
总大肠菌群和大肠埃希氏菌检测方法的对比分析
当代化工研究Modern Chemical Research 2020・08百家争鸣总大肠菌群和大肠埃希氏菌检测方法的对比分析*陈翠玲(东营市胜丰职业卫生检测评价有限责任公司山东257000)摘耍：为了探究酶底物法、多管发酵法用于水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌餉检测中的效果.通过加标试验检测和实际水样检测等方式，比较酶底物法和多管发酵法对水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌的检测效果算，结果显示两种检测方式在不同菌株检测适用性方面存在一定差异.针对水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌的检测选择酶底物法和多管发酵法结果一致，说明两种方式均可用于水质微生物检测中，均有较为理想的应用效果.关键词：酶底物法；多管发酵法；总大肠菌群；大肠埃希氏菌中EB分类号：T文献标识码：AComparative Analysis of Total Coliform and Escherichia Coli Detection MethodsChen Cuiling(Dongying Shengfeng Occupational Health Inspection and Evaluation Co.,Ltd.,Shandong,257000) Abstracts In order to explore the effect of enzyme substrate method and multi-tube fermentation method on the detection of total coliforms and Escherichia coli in water Comparison of the detection results of the total coliform and Escherichia coli in water by enzyme substrate method and multi-tube f ermentation method by means of s tandard addition test detection and actual water sample detection.The results show that the two detection methods are detected in different strains.There are some differences in applicability.For the detection of t otal coliforms and Escherichia coli in water,the results of t he enzyme substrate method and the multi-tube f ermentation method were consistent,indicating that both methods can be used for detection of w ater quality microorganisms,and both have ideal application effects.Key words t enzyme substrate method；multi-tube f ermentation method；total coliform；Escherichia coli引言试验菌混悬液，MM0-MUG和EC-MUG培养基培养液分别放置在近年来，我国人民生活质量得到了不断的提升和改善，为了健康的考虑，人们对于自来水的水质也有了更加严格的要求，当前全球范围内大部分地区和国家均存在不同程度的自来水微生物污染问题，由于其关系着生命的健康，因此得到了社会各界人士的关注切。
水中总大肠菌、大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群的测定 光度法
水中总大肠菌、大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群的测定光度法
水中总大肠菌、大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群的测定是一项重要的环境监测工作，对于保障水质安全具有重要意义。
光度法是一种常用的测定方法，通过测定样品中细菌的光学密度来间接反映其浓度，具有操作简便、结果准确等优点。
本文将介绍水中总大肠菌、大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群的光度法测定方法。
一、实验仪器与试剂
1. 实验仪器：分光光度计
2. 试剂：含有氯化铁的培养基、无菌水
二、样品处理
1. 取水样：从待测水体中取得一定体积的水样，使用无菌容器收集。
2. 过滤处理：将水样通过0.45μm的微孔滤膜过滤，以去除大颗粒悬浮物和杂质。
3. 稀释处理：取适量过滤后的水样，用含有氯化铁的培养基进行适当稀释，以提高细菌在培养基中的生长适应性。
三、菌落计数
1. 培养条件：将处理后的水样接种在含有氯化铁的培养基上，进行37℃培养24小时。
2. 计数方法：取适量培养好的菌落涂布在琼脂平板上，进行菌落计数。
四、光度法测定
1. 光学密度测定：取适量经过稀释处理的水样，用分光光度计在特定波长下进行吸光度测定。
2. 细菌浓度计算：根据吸光度值和标准曲线，计算出水样中细菌的浓度。
五、结果分析
根据测定得到的数据，可以对水样中总大肠菌、大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群进行浓度分析，为水质安全评价提供参考依据。
通过光度法测定水中总大肠菌、大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群的浓度，可以及时了解水质情况，为环境保护和公共卫生安全提供重要数据支持。
希望本文介绍的光度法测定方法对相关工作人员有所帮助。
总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌的关系
在人体肠道系统中，存在着各种微生物，其中最为人熟知的就是总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌。
它们之间的关系非常复杂，而又十分重要。
本文将在深度和广度的要求下，对这三者之间的关系进行全面评估，并进行深入探讨。
一、总大肠菌群总大肠菌群是指存在于人体肠道的所有细菌的总称，它们的种类繁多，其中包括许多有益的益生菌，如乳酸菌、双歧杆菌等。
总大肠菌群在保持肠道微生态平衡、促进食物消化和吸收等方面发挥着重要作用。
它们对于维持人体健康至关重要。
二、粪大肠菌群粪大肠菌群是指存在于肠道中下段并生长繁殖的细菌。
它们主要分布在大肠和直肠部位，是肠道微生态系统中的重要组成部分。
粪大肠菌群中主要包括大肠埃希氏菌、变形杆菌、大肠杆菌等。
在正常情况下，它们可以协助消化、参与维持肠道生理机能，并且抑制有害菌的生长。
三、大肠埃希氏菌大肠埃希氏菌是一类属于革兰氏阴性菌的细菌，其种类繁多，有些种类对人体健康有害，有些则是有益的益生菌。
大肠埃希氏菌在肠道中具有重要的功能，不仅可产生有益的代谢产物，维持肠道的微生态平衡，还可参与肠道内的免疫调节。
在人体肠道系统中，总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌之间存在着密切的关系。
它们相互作用、共同促进了肠道微生态平衡的维持，并对人体健康起着重要作用。
然而，有时候这些菌群会出现失衡的情况，如肠道菌群失调、大肠埃希氏菌感染等，这些情况可能会对人体健康带来不利影响。
总结回顾一下，总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌之间的关系十分复杂而又重要。
在日常生活中，我们要重视饮食均衡、生活规律，保持肠道微生态平衡的健康。
要注意个人卫生，预防大肠埃希氏菌感染，保持肠道健康。
个人观点和理解：我认为，肠道微生态系统对人体健康具有极其重要的作用，而其中总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌是不可或缺的重要组成部分。
我们应该重视肠道健康，通过良好的生活习惯和饮食习惯来培养健康的肠道微生态系统，从而促进身体健康。
至此，我们对总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的关系有了更深入的了解。
大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群关系
大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群关系大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群都是肠道常见的菌群，二者有着密切的关系。
大肠埃希氏菌是一种肠道生活的细菌，它存在于人类和其他动物肠道中。
某些菌株具有致病性，能引起呕吐、腹泻、发热等症状，严重时甚至会危及生命。
而耐热大肠菌群是一类广泛存在于环境中的菌群，其中既有潜在致病菌也有非致病菌。
这两者之间的关系在于，耐热大肠菌群通过测试来代表肠道细菌的总数，而大肠埃希氏菌是其中的一部分。
因此，当进行大肠埃希氏菌检测时，通常也会检测耐热大肠菌群。
同时，当环境中大肠埃希氏菌暴露时，也有可能伴随着耐热大肠菌群。
总之，大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群有一定的关系，但它们又具有不同的特性和功能，需要在不同的检测和治疗中进行区分。
大肠菌群及其食品卫生学意义
大肠菌群及其食品卫生学意义大肠菌群主要包括肠杆菌科中的埃希氏菌属、柠檬酸细菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属。
这些属的细菌均来自于人和温血动物的肠道，需氧与兼性厌氧。
不形成芽泡，在35—39℃条件下，48h内能发酵乳糖产酸产气，革兰氏阴性。
大肠菌群中以埃希氏菌属为主，埃希氏菌属被俗称为典型大肠杆菌。
大肠菌群都是直接或间接地来自人和温血动物的粪便。
本群中典型大肠杆菌以外的菌属，除直接来自粪便外，也可能来自典型大肠杆菌排出体外7—30d后在环境中的变异。
所以食品中检出大肠茵群，表示食品受到人和温血动物的粪使污染，其中典型大肠杆菌为粪便近期污染，其他菌属则可能为粪便的陈旧日污染。
大肠菌群最初作为肠道致病菌而被用于水质检验，现已被我国和国外许多国家广泛用做食品卫生质量检验的指示菌。
大肠菌群的食品卫生学意义是作为食品被粪便污染的指示菌，食品中粪便含量只要达到10-3mg/kg即可检出大肠菌群。
一股认为，作为食品被粪便污染的理想指示菌应具备以下特征：①仅来自于人或动物的肠道，并在肠道中占有极高的数量。
②在肠道以外的环境中，具有与肠道病原菌相同的对外界不良因素的抵抗力，能生存一定时间，生存时间应与肠道致病菌大致相同或稍长。
③培养、分离、鉴定比较容易。
大肠菌群比较符合以上要求。
然而由于大肠菌群在低温条件不适宜生长，特别是在冰冻条件下容易死亡，所以用大肠菌群作为冷冻食品的粪便污染指示菌并不理想。
由于肠球菌对冷冻条件有强的抵抗力，因而有人主张以它作为冷冻食品的粪便污染指示菌更为合适。
肠道致病菌如沙门氏菌属和志贺氏菌属是引起食物中毒的重要致病菌、然而对食品经常进行逐批逐件地检验又不可能，鉴于大肠茵群与肠道致病菌来源相同，而且一般在外环境中生存时间也与主要肠道病原茵一致，所以大肠茵群的另一个重要食品卫生学意义是作为肠道病原菌污染食品的指示菌。
当然食品中检出大肠菌群，只能说明有肠道病原茵存在的可能性，两者并非一定平行存在，但只要食品中检出大肠菌群，则说明有粪便污染，即使无病原菌．该食品仍可被认为是不卫生的。
化妆品大肠杆菌检测标准
化妆品大肠杆菌检测标准一、菌落总数菌落总数是指一定条件下培养后，在样品中生长的微生物菌落的总数。
它是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，可以反映化妆品的污染程度和加工过程的卫生情况。
按照国家标准方法规定，化妆品中菌落总数的限量值不得超过1000 CFU/g。
二、大肠菌群大肠菌群是指在一定条件下培养后，能发酵乳糖、产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
它是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，可以反映肠道细菌污染的情况。
按照国家标准方法规定，化妆品中大肠菌群的限量值不得检出。
三、肠杆菌属肠杆菌属是指在一定条件下培养后，能发酵乳糖、产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
它是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，可以反映肠道细菌污染的情况。
按照国家标准方法规定，化妆品中肠杆菌属的限量值不得检出。
四、大肠埃希氏菌大肠埃希氏菌是指在一定条件下培养后，能发酵乳糖、产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
它是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，可以反映肠道细菌污染的情况。
按照国家标准方法规定，化妆品中大肠埃希氏菌的限量值不得检出。
五、沙门氏菌沙门氏菌是指在一定条件下培养后，能发酵乳糖、产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
它是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，可以反映肠道细菌污染的情况。
按照国家标准方法规定，化妆品中沙门氏菌的限量值不得检出。
六、志贺氏菌志贺氏菌是指在一定条件下培养后，能发酵乳糖、产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
它是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，可以反映肠道细菌污染的情况。
按照国家标准方法规定，化妆品中志贺氏菌的限量值不得检出。
七、金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌是指在一定条件下培养后，能产生金黄色色素的革兰氏阳性球菌。
它是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，可以反映皮肤细菌污染的情况。
按照国家标准方法规定，化妆品中金黄色葡萄球菌的限量值不得超过100 CFU/g。
八、溶血性链球菌溶血性链球菌是指在一定条件下培养后，能产生溶血作用的革兰氏阳性球菌。
耐热大肠菌群国标
耐热大肠菌群国标【最新版】目录1.耐热大肠菌群的概念和来源2.耐热大肠菌群在饮用水中的影响3.耐热大肠菌群超标的原因4.如何处理和预防耐热大肠菌群超标5.耐热大肠菌群与大肠埃希氏菌的区别正文一、耐热大肠菌群的概念和来源耐热大肠菌群是一种生活在人和动物肠道中的细菌，它可以在高温下生存，因此被称为耐热大肠菌群。
水源污染、饮水不洁、食品加工不当等因素都可能导致耐热大肠菌群的传播和繁殖。
二、耐热大肠菌群在饮用水中的影响耐热大肠菌群在饮用水中的存在，可能会对人体健康造成一定的危害。
因为它们可以在水中存活和繁殖，并且可能产生致病菌。
如果人们喝了这种污染的水，就有可能引发肠道疾病。
三、耐热大肠菌群超标的原因耐热大肠菌群超标的原因有很多，主要包括水源地污染、水处理不当、输水管道污染、贮水设备污染等。
在水源地附近有家禽、野兽等动物，它们的粪便可能会污染水源。
此外，如果水处理工艺不达标，或者输水管道和贮水设备没有定期清洗和消毒，也可能导致耐热大肠菌群超标。
四、如何处理和预防耐热大肠菌群超标处理和预防耐热大肠菌群超标的方法有以下几点：1.加强水源地的保护，避免水源地被污染。
2.提高水处理工艺，确保水处理过程中的消毒效果。
3.定期清洗和消毒输水管道、贮水设备等。
4.饮用水必须充分煮沸，以杀死大部分细菌。
5.提高饮用水的检测频率，及时发现和处理污染问题。
五、耐热大肠菌群与大肠埃希氏菌的区别耐热大肠菌群和大肠埃希氏菌都是大肠菌群的一种，但它们之间有一些区别。
大肠埃希氏菌是耐热大肠菌群中的一种，具有更强的致病性。
水中总大肠菌、大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群的测定 光度法 -回复
水中总大肠菌、大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群的测定光度法-回复水中总大肠菌、大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群的测定- 光度法1. 引言水是生命中不可或缺的重要资源，然而水中存在着许多潜在的细菌污染。
其中，大肠菌群中的大肠埃希氏菌在水体中的检测尤为重要，因为它们可以作为病原体或指示性微生物，反映水体是否受到了粪便污染。
耐热大肠菌群的测定则是为了评估水体中存在的耐热菌的数量，以考察水体的卫生质量。
2. 实验步骤2.1 样品收集与处理从水源中收集所需样品，并确保样品容器是消毒干净的。
将水样转移到试管中，透过120目的筛布过滤以去除杂质。
将筛布冲洗，大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群的检测要求分别使用两个筛布。
2.2 媒介培养基的制备大肠埃希氏菌的培养基制备：使用大肠埃希氏菌选择液增殖大肠埃希氏菌菌种，然后按照制造商的说明添加适量的大肠埃希氏菌生长培养基。
将培养基搅拌均匀后，分装到培养皿中，并进行灭菌处理。
耐热大肠菌群的培养基制备：使用耐热大肠菌选择液增殖耐热大肠菌菌种，然后按照制造商的说明添加耐热大肠菌生长培养基。
将培养基搅拌均匀后，分装到培养皿中，并进行灭菌处理。
2.3 样品处理与菌落计数取一定体积的水样（一般为10ml），均匀地加入到含有大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群培养基的两个培养皿中。
在分发前使用三倍无微生物水进行稀释，确保每个培养皿中的细菌数量适合计数。
将含样品的培养皿进行培养，在适当的温度条件下孵育一定的时间（一般为37摄氏度，大肠埃希氏菌为48小时，耐热大肠菌群为24小时）。
之后，观察并数计培养皿中的菌落形成单位（CFU）。
3. 结果与数据分析根据菌落计数的结果，可以得到大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群在水样中的数量。
将每个培养皿中的菌落计数相加，并乘以稀释倍数，即可计算出水中大肠菌的浓度。
4. 结论光度法是一种常用的快速测定水中总大肠菌、大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群的方法。
通过观察和计数菌落形成单位，我们可以得到这些细菌在水中的相对数量。
常见细菌特征性菌落形态描述
常见细菌特征性菌落形态描述微生物检测试验分离可疑菌落时不清楚待检测菌落特征？小编我来给你普及一下1大肠菌群在固体培养基中发酵乳糖产酸,在指示剂的作用下形成可计数的红色或紫色,带有或不带有沉淀环的菌落。
典型菌落为紫红色,菌落周围有红色的胆盐沉淀环,菌落直径为0.5mm或更大。
2致泻大肠埃希氏菌一类能引起人体以腹泻症状为主的大肠埃希氏菌,可经过污染食物引起人类发病。
常见的致泻大肠埃希氏菌主要包括肠道致病性大肠埃希氏菌、肠道侵袭性大肠埃希氏菌、产肠毒素大肠埃希氏菌、产志贺毒素大肠埃希氏菌(包括肠道出血性大肠埃希氏菌)和肠道集聚性大肠埃希氏菌。
在MAC琼脂平板上,分解乳糖的典型菌落为砖红色至桃红色,不分解乳糖的菌落为无色或淡粉色;在EMB琼脂平板上,分解乳糖的典型菌落为中心紫黑色带或不带金属光泽,不分解乳糖的菌落为无色或淡粉色。
3大肠埃希氏菌O157:H7/NM在CT-SMAC平板上,典型菌落为圆形、光滑、较小的无色菌落,中心呈现较暗的灰褐色4沙门氏菌属在不同选择性琼脂平板上的菌落特征不同BS琼脂菌落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色,菌落周围培养基可呈黑色或棕色;有些菌株形成灰绿色的菌落,周围培养基不变HE琼脂蓝绿色或蓝色,多数菌落中心黑色或几乎全黑色;有些菌株为黄色,中心黑色或几乎全黑色XLD琼脂菌落呈粉红色,带或不带黑色中心,有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心,或呈现全部黑色的菌落;有些菌株为黄色菌落,带或不带黑色中心5单核细胞增生李斯特氏菌典型菌落在PALCAM琼脂平板上为小的圆形灰绿色菌落,周围有棕黑色水解圈,有些菌落有黑色凹陷6金黄色葡萄球菌在Baird-Parker平板上呈圆形,表面光滑、凸起、湿润、菌落直径为2mm~3mm,颜色呈灰黑色至黑色,有光泽,常有浅色(非白色)的边缘,周围绕以不透明圈(沉淀),其外常有一清晰带。
当用接种针触及菌落时具有黄油样黏稠感。
有时可见到不分解脂肪的菌株,除没有不透明圈和清晰带外,其他外观基本相同。
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4-甲基伞形酮-D-葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbelliferyl b-D-glucuronide hydrate MUG)
β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)
酶反应：结合的β-D-葡糖苷酸+H2O=醇+D-葡糖醛酸。
迅速水解甾类葡糖苷酸和其他葡糖苷酸，但不水解α或β葡糖苷。
最适pH4.5～5.0。
等电点pI5.1。
吸光系数（E1%280）17.0。
抑制剂有D-葡糖醛酸、D-半乳糖醛酸、有机过氧化物。
4℃保存12个月，活力下降约20%；6个月活力下降10%，可能有浑浊，但并不影响活力。
单位定义：37℃，pH5.0，每小时释放出1μg酚酞的酶量为1单位。
用于生化研究，尿甾体和血中甾体轭合物的检定。
本品应密封于4℃干燥保存。
邻硝基酚β－D-半乳糖苷酶(2-Nitrophenyl β-D-galactopyranoside)
β- 半乳糖苷酶(β- D - galactosidase)
ONPG也称2-Nitrophenyl β-D-galactopyranoside或o-Nitrophenyl β-D-galactopyranoside。
分子式为C12H15NO8，分子量为301.25，CAS Number 369-07-3。
本产品为接近白色的晶状粉末。
用于检测β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)活性，是β-半乳糖苷酶的显色底物。
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∙无色=阴性
∙黄色格子=总大肠菌群
∙黄色＋荧光格子=大肠埃希氏菌
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∙注：耐热大肠菌群（粪大肠菌群）需
44.5
℃培养24h后，观察黄色格子，为
阳性结果，对照MPN表
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∙无色=阴性
∙黄色格子=总大肠菌群
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∙注：耐热大肠菌群（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色格子，对照MPN表。