艾滋病梅毒丙肝检测与解释

报告阴性
确证流程
质量控制
• 试剂盒内部对照 ：按照试剂盒要求设置 • 使用室内质控品：外购、阳性对照/样本稀释 • ELISA检测
20次内—即刻法质控 20次后， Levey-Jennings质控图 更换试剂厂家必须重新制作质控图， 同种试剂不同批号可继续使用（注明批号） 发现失控、位移及时查找原因，必要时重新开始质控 • 快速检测 更换批号进行质量验证 注意反应时间、温度、数量控制
HIV、TP、HCV的检验及意义
HIV实验室检测
检测样本
• HIV抗体 酶免--血清/血浆，尿液 快速检测--血清/血浆/全血，唾液
• CD4：抗凝全血 • 病载、基因型、耐药：血浆
样本保存
• 抗体检测：短期（1周）内进行检测的可存放于 2～8℃， 一周以上应存放于-20℃以下。 筛查阴性样品，建议至少保存1～2个月； 筛查阳性样品，无论确证结果如何，均应将剩余 的样品保存至少10年
• 核酸检测：血浆4天内进行检测的可存放于4℃，3 个月以内应存放于-20℃以下，3个月以上应置于70℃以下。
• CD4：室温（18～25℃）保存和运输。要求48小时 内染色，染色后6小时内分析；如采血后24小时内 染色，可在染色后24小时内分析。
HIV抗体检测
• 筛查试验 酶联免疫吸附试验（ELISA） 化学发光或免疫荧光试验 快速检测（RT）
生存条件
• 厌氧寄生物，在人体内可长期生存，体外不易存活 • 干燥、肥皂水及一般消毒剂如1:1000苯酚、新洁尔
灭、酒精均可于短时间将其杀死 • 在血液中4℃经3日可死亡，故在血库冰箱冷藏3日以
上的血液就无传染性 • 温度的影响：41-42℃时可生活1-2小时，在48℃仅
半小时即失去感染力，100℃立即死亡。对寒冷抵抗 力强，在0℃时，可生活48小时，如将梅毒病损标本 置于冰箱内，经1周仍可致病。在低温（-78℃）保 存数年，仍可保持其形态、活动及毒性 • 在封存的生理盐水稀释的组织液中可生活10小时左 右 • 在潮湿的器具或湿毛巾中，亦可生存数小时 • 在干燥环境中可见迅速死亡
为两层膜所围绕 行动缓慢而有规律 - 围绕其长轴旋转中前后移
动 - 伸缩其圈间之距离而移动 - 全身弯曲如蛇行
生物学特性-1
• 免疫性：人对TP产生细胞免疫和体液免疫。 细胞免疫对感染过程的影响尚不清楚。
• 特异性抗体：TP可导致人体产生多种抗体。 其中 TP的脂质激发机体产生的特异性抗 体，在初次感染后产生，保持终生，但对 清除机体内的TP无作用。另一些种特异性 抗体可与很多种非致病性螺旋体发生交叉 反应。
设备检定、维护
• 强检设备 酶标仪、移液器、高压锅、温度计（可自行比对）
• 自行维护 生物安全柜、洗板机、洗眼器、水平（梅毒）旋 转仪
• 温度控制 冰箱、温箱/水浴箱内放置经检定（比对）的温度 计
• 高压灭菌放置指示卡 • 洗眼器定期进行维护
SOP文件
• （1）样品的接收、登记、处理、保存和运输； • （2）检测方法和步骤； • （3）试剂使用和保存； • （4）仪器的使用维护和校准； • （5）质量控制要求及程序； • （6）结果解释与报告； • （7）保密程序； • （8）实验室数据、相关文件记录与保存； • （9）不确定样品追踪和处理； • （10）实验室安全防护及实验室的清理和消毒。
分类：
• 螺旋体目（Spirochaetales） • 螺旋体科（Spirochaetaceae） • 密螺旋体属（Treponema） • 苍白螺旋体种（Treponema pallidum） • 分几个亚种
梅毒螺旋体（TP）
小而纤细的螺旋状微生物 长5～20μ m，粗细<0.2μ m 有6 ～ 12个规则的螺旋 基本结构为一原生质的圆柱体，
• 确证试验 免疫印迹试验（WB） 条带免疫试验 放射免疫沉淀试验（RIPA） 免疫荧光试验（IFA）
初筛和复检流程
均阳性反应
样品
筛查试剂
初筛试验
阳性反应
阴性反应
原有试剂+另一不同原理 （或厂家）试剂或另外两种 不同原理（பைடு நூலகம்厂家）试剂
复检试验
一阴一阳
均阴性反应
确证试验
图 1 HIV 抗体筛查检测流程
实验室记录
• 检测登记表 • 试验原始记录（ ELISA、快速、RPR/TURST ） • 报告单/化验单
复检化验单—筛查阳性填写，信息收集完整 • 仪器使用、维护保养记录 • 质控资料 • 消毒记录 • 废弃物处理登记 • 冰箱温度记录 • 人员健康档案（体检、疫苗接种记录，化验单、体检报告）
实验室生物安全
宿主
• 梅毒螺旋体只感染人类 • 人是梅毒的唯一传染源
传播途径
性接触是主要的传染途径 未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染
性 随着病期的延长，传染性越来越小 到感染后4年，通过性接触一般无传染性 母 婴 传 播 在妊娠7周时，梅毒螺旋体即可通过胎盘传
生物学特性-2
• 反应素：TP破坏机体组织，使组织释放一 种抗原性心磷脂,以及螺旋体自身的磷脂类 物质，可以激发机体产生反应素，能同从 动物如牛心肌中提取的心磷脂发生反应， 通过试验来检测。
反应素水平与梅毒感染过程相平行， 抗梅治疗后约半年转阴，但反应素并非感 染TP后所特有。
生物学特性-3
• 致病性：自然条件下TP只感染人，尚未证明梅毒 螺旋体能产生内毒素和外毒素，致病机理尚不清 楚。
• 传染性：感染早期传染性最强，随着病程的延长 传染性越来越小。临床上未经治疗的病人，在感 染后1～2年内最具有传染性，一般认为4年以上几 乎不通过性接触传染，但保持对胎儿的传染性。
• 抵抗力：TP在体外仅能存活数小时，40℃时失去 传染力，煮沸立即死亡；对干燥特别敏感，一般 的消毒剂均能容易将其杀灭。血库的血液和血浆
• 实验室：Ⅱ级生物安全实验室（BSL-2） • 建立安全制度：S-SOP、意外事故处理预案、
信息安全及保密制度 • 培训和管理：全员培训、标准防护原则 • 个人防护：防护用品与设施、健康监护 • 安全操作：样品采集与管理、仪器设备使
用、利器使用 • 消费与污物处理
梅毒实验室检测技术
梅毒螺旋体--梅毒的病 原体