培养基成分
简述培养基的营养要素
简述培养基的营养要素培养基的成分非常复杂，其组成一般都是由：基本营养物质、维生素、无机盐和有机物四部分构成，其中前三者的作用如下： 1、营养要素在培养基中所起到的作用就是物质代谢与化学反应对菌体生长发育所提供的营养物质。
2、它们在某种程度上影响着细菌的生长发育，其营养成分包括蛋白质、核酸、碳水化合物、脂类、生长因子等。
3、这些营养成分都属于宏量元素和微量元素，并且它们之间有明显的相互制约作用。
4、氮、磷、硫等无机元素不能大量缺乏，但是过多时会造成培养基恶化而降低其利用价值。
5、但是缺少氨基酸会影响菌体生长繁殖。
6、添加钙可增强微生物的耐高温能力；添加铜能防止酸性腐败产生，添加硫能增强硝化作用；添加氯化钠或氯化钾则主要用来消毒灭菌。
7、有机物通常是指来自动植物和微生物的有机残体或代谢物。
8、有机物不仅为微生物生长繁殖提供碳源和能源，同时也参与物质转化与能量代谢，促进其新陈代谢。
9、通过正确的设计培养基及原料选择，可以最大限度地满足各种微生物对营养的需求。
营养物质对微生物生长繁殖的影响主要表现在两个方面：一是对某种微生物有利，可刺激它生长；二是抑制它生长，从而使培养基混浊变质，所以我们必须采取适当措施补充有关营养物质，才能保证微生物正常生长繁殖。
培养基的营养要素可以根据需要进行合理调整，达到生长平衡。
从微生物营养生理上讲，为了取得一定量的代谢产物，必须摄入足够数量的碳源、氮源、生长因子等，否则微生物就会停止生长或衰弱。
微生物生长繁殖过程中所需要的营养物质很多，尤其对微生物活性和稳定性有重要意义的某些营养物质，微生物所需要的这类物质就叫做限制性营养物质。
如各种无机盐，在微生物体内大多数是作为辅酶来参与代谢过程的，同时还参与氨基酸的合成，在微生物体内是极为重要的；而有机酸类物质在许多代谢过程中都是起作用的，是一种必需的微量营养素。
在正常情况下，一种微生物只有在特定条件下才能进行特殊的代谢，微生物的这种特殊性状称之为限制性。
培养基名词解释
培养基名词解释
培养基是一种提供生物细胞增殖和发育必要条件的独立生命系统，它包括一定的水平的温度，光照，湿度，pH值和养料组成。
培
养基由多种成分组成，通常由氨基酸、糖类、脂肪酸和微量元素组成。
此外，还可能包括一些添加剂，如补偿剂，抑制剂等。
培养基能提供细胞所需的核酸、蛋白质以及其他有机体所需的物质，能够延长细胞存活时间，提供有利的生长条件，并且可以使细胞在更大规模上生长。
这些特殊的化学性质可以使细胞保持稳定的增殖和发育状况。
培养基还可以帮助细胞抵抗外界的有害物质，使其能够长期增殖和发育。
培养基可以用于皮肤细胞培养，以及用于哺乳动物细胞培养。
研究人员可以通过用各种不同的培养基来研究细胞增殖和发育的机制，这些机制通常是研究生物过程和制药研究中的重要部分。
除了细胞培养外，培养基还用于微生物的发酵，这种发酵是制造酿造酒精、芝士和一些日常生活的食物的必要环节。
培养基也可以用于病毒的增殖，抑制其发酵或细胞增殖的力量，这是研究病毒的重要方面。
培养基的组成成分具有复杂的化学性质，它们能够提供必需的营养，促进细胞的生长。
组成成分中的各种特定成分通常是从食物或天然物质中获取的，然后经过化学改造而成。
这些原料可以在实验室条件下进行配制，以生产出特定的培养基组合。
总之，培养基是一个可以提供细胞所需营养物质的独立生命系统，
对于细胞增殖和发育起到重要作用。
它的组成成分由食物或天然物质经过化学改造而成，目的是为了为细胞提供有利的生长条件和稳定的增殖和发育状况。
这些特殊的化学性质使得培养基在科学研究、药物研究、发酵技术等领域都有着广泛的应用。
培养基的主要成分
培养基的主要成分培养基是一种特定的化学组合物，用于在实验室条件下培养和繁殖细胞、微生物和组织。
它提供了微生物或细胞生长所需的营养物质、水分和适宜的温度、pH等环境条件。
1.碳源：培养基必须提供适当的碳源供细胞或微生物进行能量代谢和生物合成。
常见的碳源包括葡萄糖、果糖、麦芽糖等单糖，以及淀粉、纤维素等多糖。
2.氮源：氮是生物体中构成蛋白质、核酸等生物大分子的重要元素。
培养基中通常需要提供适当的氮源，如氨基酸、无机盐类、尿素等。
3.矿质盐：培养基中需要添加适当浓度的无机盐类，如钠、钾、钙、镁、磷等。
这些矿质盐是微生物或细胞进行生理代谢和细胞结构的基本组成部分。
4.生长因子：一些微生物或细胞需要特定的生长因子才能生长和繁殖，比如一些维生素、激素、胆红素等。
5.辅助物质：培养基中还需要添加一些辅助物质，如胶体或琼脂等固定剂，用于固化培养基使其成为固体或凝胶状，以便于细胞或微生物的生长和观察。
此外，pH缓冲剂、染料等也是常用的辅助物质。
6.水分：水是培养基的基本成分，提供细胞或微生物生长所需的水分。
除了上述主要成分，培养基还需要控制适当的温度、pH值、氧气浓度等环境条件，以提供最佳的生长环境。
这些环境因素对微生物或细胞的生长和生物化学反应起着重要的调控作用。
特定类型的培养基根据应用需求和研究目的，还可以添加抗生素、激素、酶等其他辅助成分，以实现特定的实验目标。
总之，培养基的主要成分包括碳源、氮源、矿质盐、生长因子、辅助物质和水分。
这些成分为微生物或细胞提供了适宜的营养和环境条件，使其能够在实验室条件下生长和繁殖。
不同类型的培养基根据具体研究目的和需求，可以有所差异。
各种培养基配方
146种培养基配方【1】1、牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL2、2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用）可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH 7.2～7.4121查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。
4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红（rose bengal，玫瑰红水溶液）100mL琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）马铃薯200g蔗糖（或葡萄糖）20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制： (1)、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(4)、将滤液稀释到5—6波美度，pH约6.4，加入2%琼脂即成。
各种培养基的配方
各种培养基的配方（全）培养基编号培养基名称培养基组份SICC0009 醋酸菌培养基(Ⅰ) 豆芽汁20%，葡萄糖1%，碳酸钙2%，乙醇2%，琼脂2%。
乙醇：杀菌后加入。
SICC0010 醋酸菌培养基(Ⅱ) 酵母膏0.5%，葡萄糖1%，碳酸钙2%，乙醇2%，琼脂2%。
乙醇：杀菌后加入。
SICC0011 乳酸菌培养基(Ⅰ) 蛋白胨1%，牛肉膏1%，酵母膏0.5%，葡萄糖1%，番茄汁20%，土温-80 0.05%，PH 5.4( 0.4M醋酸钠缓冲液或醋酸调节)，琼脂2 %。
SICC0012 乳酸菌培养基(Ⅱ) 牛肉膏0.5%，酵母膏0.5%，蛋白胨1%，葡萄糖1%，乳糖0.5%，氯化钠0.5%，琼脂2%。
SICC0013 乳酸菌培养基(Ⅲ) 100 Bx麦芽汁中加入酵母膏0.5%,无菌碳酸钙0.6%,琼脂1.5～2.0%。
SICC0014 脱脂牛奶培养基12%脱脂奶粉溶液于0.6㎏/cm2灭菌20分钟后,将灭过菌的脱脂牛奶置于30℃保温箱中培养3天,经检查确实无菌即可使用。
培养基编号培养基名称培养基组份SICC0001 60 Bx麦芽汁琼脂暂时无数据SICC0002 100 Bx麦芽汁琼脂暂时无数据SICC0003 120 Bx麦芽汁琼脂暂时无数据SICC0004 100 Bx米曲汁琼脂暂时无数据SICC0005 120 Bx米曲汁琼脂暂时无数据SICC0006 丁二醇培养基牛肉膏1%，葡萄糖1%，氯化钠0.5%，蛋白胨1%，PH7，琼脂1.5～2.0%。
SICC0007 异Vc钠培养基葡萄糖1%,磷酸氢二钾0.6%,磷酸二氢钾0.3%,硫酸镁0.02%,玉米浆0.3%,氯化钠0.05%,蛋白胨0.5%, PH 6.7－7.0, 琼脂2%。
SICC0008 己酸菌培养基醋酸钠0.5%,磷酸氢二钾0.04%,硫酸镁0.02%,硫酸铵0.05%,酵母膏0.5%,乙醇2%,碳酸钙1%,琼脂2%。
乙醇：杀菌后加入。
各种培养基成分
1．营养肉汤成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，pH7.4。
制法：按上述成分混合，溶解后校正pH，121℃高压灭菌15min。
2．营养琼脂培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂17g，蒸馏水1000mL，pH7.2。
制法：将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH，加入琼脂，分装于烧瓶内，121℃，15min高压灭菌备用。
3．MRS培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，K2HPO4 2g，柠檬酸二铵2g，乙酸钠5g，葡萄（琼脂15~20g），蒸馏水1000mL。
糖20g，吐温80 1mL，MgSO4 .7H2O 0.58g，MnSO4 4H2O 0.25g，制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.2~6.4，分装于三角瓶中，121℃,灭菌15min。
4．脱脂乳培养基成分：牛奶，蒸馏水。
制法：将适量的牛奶加热煮沸20~30min，过夜冷却，脂肪即可上浮。
除去上层乳脂即得脱脂乳。
将脱脂乳盛在试管及三角瓶中，封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min，即得脱脂乳培养基。
5．培养基A成分：蛋白胨10.0g，酵母提取物1.0g，葡萄糖10.0g，NaCL5.0g，琼脂15.0g，水1000mL。
制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至7.0~7.2，分装于三角瓶中，121℃，灭菌15min。
6．PTYG培养基成分：胰胨Tryptone（Oxoid）5g，大豆蛋白胨5g，酵母粉（Oxoid）10g，葡萄糖10g，吐温80 0 1mL，琼脂15~20g，L-半胱氨酸盐酸盐0.05g，盐溶液4mL。
制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.8~7.0，分装于三角瓶中，115℃灭菌30min。
盐溶液制备：无水氯化钙0.2g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，MgSO4 。
7H2O 0.48g，NaCO310g，NaCL 2g，蒸馏水1000mL，溶解后备用。
各种培养基配方
1．营养肉汤成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，pH7.4。
制法：按上述成分混合，溶解后校正pH，121℃高压灭菌15min。
2．营养琼脂培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂17g，蒸馏水1000mL，pH7.2。
制法：将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH，加入琼脂，分装于烧瓶内，121℃，15min高压灭菌备用。
3．MRS培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，K2HPO4 2g，柠檬酸二铵2g，乙酸钠5g，葡萄糖20g，吐温80 1mL，MgSO4 .7H2O 0.58g，MnSO4 4H2O 0.25g，（琼脂15~20g），蒸馏水1000mL。
制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.2~6.4，分装于三角瓶中，121℃,灭菌15min。
4．脱脂乳培养基成分：牛奶，蒸馏水。
制法：将适量的牛奶加热煮沸20~30min，过夜冷却，脂肪即可上浮。
除去上层乳脂即得脱脂乳。
将脱脂乳盛在试管及三角瓶中，封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min，即得脱脂乳培养基。
5．培养基A成分：蛋白胨10.0g，酵母提取物1.0g，葡萄糖10.0g，NaCL5.0g，琼脂15.0g，水1000mL。
制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至7.0~7.2，分装于三角瓶中，121℃，灭菌15min。
6．PTYG培养基成分：胰胨Tryptone（Oxoid）5g，大豆蛋白胨5g，酵母粉（Oxoid）10g，葡萄糖10g，吐温80 0 1mL，琼脂15~20g，L-半胱氨酸盐酸盐0.05g，盐溶液4mL。
制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.8~7.0，分装于三角瓶中，115℃灭菌30min。
盐溶液制备：无水氯化钙0.2g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，MgSO4 。
7H2O 0.48g，NaCO3 10g，NaCL 2g，蒸馏水1000mL，溶解后备用。
各种培养基配方
146种培养基配方1、牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL2、2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用）可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH 7.2～7.4配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。
4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红（rose100mLbengal，玫瑰红水溶液）琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）马铃薯200g蔗糖（或葡萄糖）20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1)、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
培养基的一般常用成分
（一）水制备培养基必须使用纯净的，无微量金属，杀菌性和抑菌性化学物质的蒸馏水。
注意，以加氯的水进行蒸馏所得的蒸馏水，即使在使用前通过离子交换树脂，也偶含有显著量的游离氯．所以应进行测试，如正联甲苯胺试验显色。
测试后，以硫代硫酸钠中和后或进行重复蒸馏后才能使用。
（二）琼脂琼脂俗称洋菜，英文名agar ，为由海藻类（主要足石花菜）提取出来的一种胶体多糖，即半乳聚糖水解后，产生半乳糖及少量五烷糖和有机硫。
其化学性质系为一种不带侧链的半乳聚糖甙，含有90%右旋半乳糖和10％左旋半乳糖。
在约每10个吡喃半乳糖单位有一个首位或次位的羟基被硫酸脂化。
其阴离子脂组（-SO2 -OH ）主要是与钙结合，但也有少数是和镁、钠、或钾结合。
其制造方法，一般是在每年7-9 月收集海中石花菜，洗涤并经晒干后保存。
于冬季冰冻开始时，按1：30 比例将干藻放入水中煮沸，然后加入硫酸少许并煮沸5-6 小时。
过滤后待冷，用“漏子”推成粗条，再经日晒夜冻2-3 周后，即成条状琼脂。
除少数菌种外，绝大多数细菌都不能分解琼脂，因而琼脂在培养某中无营养价值，只是在液体培养基中凝结成半固体或固体培养基而已。
国外商售琼脂一般比较纯净，国内琼脂则含有杂质较多，故在使用前应先用冷水浸泡洗涤后才能使用。
供细菌培养使用的品质优良的琼脂应具有下列特性：( l ）凝固点不超过2 ℃，通常范围在34～38 ℃。
( 2 )1L 的1.5%琼脂，在蒸汽浴中重新完全溶化，不超过45 分钟。
( 3 ）在98 ℃能完全溶解子水。
( 4 ）在45 ℃仍保待足够的液态，以利于试验时的混合均匀。
( 5 ）与水的结合水平至少在50%以上，以保证完全的溶解性。
（6）含水量不超过原重17%。
( 7 ）燃烧残余物不超过3 %。
（8）金属最高允许含量，铅0.0005%，铁0.001%，镁0.1%，钙0.2%，钠0.4%，并不得含有抗菌物质。
( 9 ）透明度：在蒸馏水中加热溶解后，呈微乳白色透明凝块。
培养基的组成
培养基的组成1 前言培养基是人工配制的供微生物或动植物细胞生长、繁殖、代谢和合成人们所需产物的营养物质和原料，同时，培养基也为微生物等提供除营养外的其它生长所必须的环境条件。
常用的培养基都应符合一些基本要求：1 ) 都必须含有作为合成细胞组成的原料；2 ) 满足一般生化反应的基本条件，如碳源、氮源、无机盐、生长因素；3 ) 一定的pH等条件。
2 培养基的组成2.1 碳源碳源是组成培养基的主要成分之一。
常用的碳源有糖类、油脂、有机酸和低碳醇。
在特殊情况下( 如碳源贫乏时) ，蛋白质水解产物或氨基酸等也可被某些菌种作为碳源使用。
葡萄糖是碳源中最易利用的糖，几乎所有的微生物都能利用葡萄糖，所以葡萄糖常作为培养基的一种主要成分，并且作为加速微生物生长的一种有效的糖。
但是过多的葡萄糖会过分加速菌体的呼吸，以致培养基中的溶解氧不能满足需要，使一些中间代谢物不能完全氧化而积累在菌体或培养基中，如丙酮酸、乳酸、乙酸等导致pH下降，影响某些酶的活性，从而抑制微生物的生长和产物的合成。
2.2 氮源氮源主要用于构成菌体细胞物质( 氨基酸、蛋白质、核酸等) 和含氮代谢物。
常用的氮源可分为两大类：有机氮源和无机氮源。
2.2.1 有机氮源常用的有机氮源有玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉和酒糟等。
它们在微生物分泌的蛋白酶作用下，水解成氨基酸，被菌体吸收后再进一步分解代谢。
有机氮源除含有丰富的蛋白质、多肽和游离氨基酸外，往往还含有少量的糖类、脂肪、无机盐、维生素及某些生长因子，因而微生物在含有机氮源的培养基中常表现出生长旺盛，菌丝浓度增长迅速的特点。
大多数发酵工业都借助于有机氮源，来获得所需氨基酸。
玉米浆是一种很容易被微生物利用的良好氮源。
因为它含有丰富的氨基酸( 丙氨酸、赖氨酸、谷氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸等) 、还原糖、磷、微量元素和生长素。
玉米浆是玉米淀粉生产中的副产物，其中固体物含量在50％左右，还含有较多的有机酸，如乳酸，所以玉米浆的 pH在4左右。
培养基有哪些成分组成？它们有什么作用？
培养基有哪些成分组成？它们有什么作用？1 无机营养物无机营养物即无机盐是植物生长发育所必需的，根据植物对无机盐需要的多少，将其分为大量元素和微量元素。
1.1 大量元素大量元素在植物体内含量占干物重的0.1-10%，其浓度一般大于0.5mmol/L，包括氮（N）、磷（P）、钾（K）、钙（Ca）、镁（Mg）、硫（S），若加上碳（C）、氢（H）、氧（O），则有9种元素。
在离体培养中，其C、H、O三元素是从人工加入的糖类获得的，H、O 元素也可以从培养基所含的水分中获得，而其余6种矿质元素要从加入的适量的无机盐类来获取。
无机氮常以硝态氮（如KNO3）和铵态氮（如NH4NO3）两种形式供应，多数培养基都是二者兼而有之。
1.2 微量元素植物所需的微量元素包括铁（Fe）、硼（B）、锰（Mn）、铜（Cu）、锌（Zn）、钼（Mo）、氯（Cl）等。
植物对其需要量极微，在植物体内含量占干物重的0.01%以下，起生长发育所需的浓度一般小于0.5mmol/L，稍多则产生毒害。
碘（I）虽不是植物生长的必需元素，但几乎在所有的培养基中都含有碘元素，有些培养基还加入了钴（Co）、镍（Ni）、钛（Ti）、铍（Be），甚至铝（Al）等元素。
1.3 铁盐铁是用量较多的一种微量元素，是许多重要氧化还原酶的组成成分，在植物叶绿素的合成过程中起到重要的作用。
若以硫酸铁和氯化铁为供铁源，培养基的pH值会达到5.2以上，形成氢氧化铁沉淀，使培养物无法吸收而出现缺铁症，故在培养基配制时，常用硫酸亚铁和EDTA二钠配成螯合态铁，成为有机态铁方被培养物吸收和利用；也可用EDTA铁盐，作为铁的供应源。
这些元素参与培养物机体的建造，构成植物细胞中的核酸、蛋白质、叶绿体、酶系统和生物膜所必需的元素。
2 有机营养成分在配制培养基时，不仅要加入无机营养成分，还要加入一定量的有机营养物质，以利于培养物的生长和分化。
2.1 糖类在组织快繁中，被培养的培养物大多不能进行光合作用，能进行的也不能满足其对糖类的需求，因此必须在培养基中添加糖作为碳源和能源，同时对维持培养基一定的渗透压也有重要作用。
培养基成分及其作用
培养基成分及其作用植物生长发育需要多种营养和生长调节物质，当其缺乏时，生长发育受阻，形态不正常。
在植物组织快繁过程中，培养物生长发育所需的营养和生长因子，主要靠培养基供给。
因此，完全培养基的成分除了水分外，还要包括无机营养、有机物营养、生长调节物质及其他附加物等。
一、无机营养物无机营养物即无机盐是植物生长发育所必需的，根据植物对无机盐需要的多少，将其分为大量元素和微量元素。
1. 大量元素大量元素在植物体内含量占干物重的0.1-10%，其浓度一般大于0.5mmol/L，包括氮(N)、磷(P)、钾(K)、钙(Ca)、镁(Mg)、硫(S)，若加上碳(C)、氢(H)、氧(O)，则有9种元素。
在离体培养中，其C、H、O三元素是从人工加入的糖类获得的，H、O元素也可以从培养基所含的水分中获得，而其余6种矿质元素要从加入的适量的无机盐类来获取。
无机氮常以硝态氮(如KNO3)和铵态氮(如NH4NO3)两种形式供应，多数培养基都是二者兼而有之。
2. 微量元素植物所需的微量元素包括铁(Fe)、硼(B)、锰(Mn)、铜(Cu)、锌(Zn)、钼(Mo)、氯(Cl)等，植物对其需要量极微，在植物体内含量占干物重的0.01%以下，起生长发育所需的浓度一般小于0.5mmol/L，稍多则产生毒害。
碘(I)虽不是植物生长的必需元素，但几乎在所有的培养基中都含有碘元素，有些培养基还加入了钴(Co)、镍(Ni)、钛(Ti)、铍(Be)，甚至铝(Al)等元素。
3. 铁盐铁是用量较多的一种微量元素，是许多重要氧化还原酶的组成成分，在植物叶绿素的合成过程中起到重要的作用。
若以硫酸铁和氯化铁为供铁源，培养基的pH值会达到5.2以上，形成氢氧化铁沉淀，使培养物无法吸收而出现缺铁症，故在培养基配制时，常用硫酸亚铁和EDTA二钠配成螯合态铁，成为有机态铁方被培养物吸收和利用;也可用EDTA铁盐，作为铁的供应源。
这些元素参与培养物机体的建造，构成植物细胞中的核酸、蛋白质、叶绿体、酶系统和生物膜所必需的元素。
基本培养基配方
基本培养基配方
基本培养基配方是生物学实验中必不可少的一部分，它提供了细胞生长所需的营养物质和环境。
下面我将详细介绍基本培养基配方的组成和作用。
基本培养基配方通常包括以下成分：水、碳源、氮源、矿物质盐和生长因子。
其中，水是培养基的主要成分，它提供了溶解其他成分所需的介质。
碳源和氮源是细胞合成有机物质所需的营养物质，矿物质盐则提供了微量元素和离子，如钾、钠、钙等。
最后，生长因子则是激活细胞增殖和代谢所必需的。
在具体实验中，不同类型的细胞需要不同类型的培养基配方。
例如，动物细胞通常需要含有葡萄糖或乳糖等碳源、氨基酸或蛋白质等氮源以及多种矿物质盐和生长因子的培养基；而微生物则需要含有简单碳水化合物如葡萄糖或果糖等作为碳源、硝酸盐或铵盐等作为氮源以及多种无机盐和生长因子的培养基。
除了基本培养基配方外，还有一些特殊的培养基，如选择性培养基、差异性培养基等。
选择性培养基可以通过添加抗生素或其他化合物来选择性地促进某些细菌或真菌的生长，从而分离出某一特定菌株。
差异性培养基则是在不同的营养条件下促进不同细菌种类的生长，从而
实现对不同细菌种类的鉴定。
总之，基本培养基配方是生物学实验中必不可少的一部分，它提供了细胞生长所需的营养物质和环境。
在具体实验中需要根据实验需要选择适当类型和组成的培养基。
(整理)各种培养基成分
1．营养肉汤成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，pH7.4。
制法：按上述成分混合，溶解后校正pH，121℃高压灭菌15min。
2．营养琼脂培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂17g，蒸馏水1000mL，pH7.2。
制法：将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH，加入琼脂，分装于烧瓶内，121℃，15min高压灭菌备用。
3．MRS培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，K2HPO4 2g，柠檬酸二铵2g，乙酸钠5g，葡萄（琼脂15~20g），蒸馏水1000mL。
糖20g，吐温80 1mL，MgSO4 .7H2O 0.58g，MnSO4 4H2O 0.25g，制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.2~6.4，分装于三角瓶中，121℃,灭菌15min。
4．脱脂乳培养基成分：牛奶，蒸馏水。
制法：将适量的牛奶加热煮沸20~30min，过夜冷却，脂肪即可上浮。
除去上层乳脂即得脱脂乳。
将脱脂乳盛在试管及三角瓶中，封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min，即得脱脂乳培养基。
5．培养基A成分：蛋白胨10.0g，酵母提取物1.0g，葡萄糖10.0g，NaCL5.0g，琼脂15.0g，水1000mL。
制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至7.0~7.2，分装于三角瓶中，121℃，灭菌15min。
6．PTYG培养基成分：胰胨Tryptone（Oxoid）5g，大豆蛋白胨5g，酵母粉（Oxoid）10g，葡萄糖10g，吐温80 0 1mL，琼脂15~20g，L-半胱氨酸盐酸盐0.05g，盐溶液4mL。
制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.8~7.0，分装于三角瓶中，115℃灭菌30min。
盐溶液制备：无水氯化钙0.2g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，MgSO4 。
7H2O 0.48g，NaCO3 10g，NaCL 2g，蒸馏水1000mL，溶解后备用。
imdm培养基成分
imdm培养基成分
IMDM培养基是一种常用的细胞培养基，其基础配方包括：
1. 氨基酸：包括谷氨酰胺、天冬氨酸、精氨酸、甘氨酸等。
2. 维生素：包括维生素B1、B2、B6、B12、泛酸、烟酸、叶酸等。
3. 微量元素和矿物质：包括氯化钠、氯化钾、钙离子、镁离子、锌离子等。
4. 渗透压调节剂：如NaCl等。
5. 生长因子和细胞因子：如EGF、bFGF等。
6. 其他成分：如HEPES、丙酮酸钠等。
与DMEM培养基相比，IMDM培养基在成分上进行了改良，添加了一系列重要成分，包括硒、HEPES、丙酮酸钠以及额外的氨基酸和维生素，营养非常丰富，非常适合于快速增殖，高密度细胞培养。
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応用微生物学実験 実験書2004年度版1. 微生物の形態学実験1.1. 微生物の培養1.2. 微生物の形態観察1.3. かびのスライド培養法1.4. 自然界からの放線菌の単離1.5. 細菌のグラム染色1.6. 菌数の計測2. 微生物の探索と単離2.1. メタノール資化性菌の分離（集積培養）とその生育2.2. 放線菌による抗生物質生産とバイオアッセイによる抗生物質の定量 3. 微生物の代謝・生理学3.1. Laccaseの生産と精製4. 微生物生産-酵素法4.1. L-チロシンの酵素合成5. 微生物生産-発酵法5.1. 清酒醸造5.2. ワイン醸造5.3. アルコール濃度の定量 頁 1 4 6 7 81011 1316 21 232627- 1 -1 微生物の形態学実験 1.1. 微生物の培養目的とする微生物を大量に得るためには微生物の生育に適した培養材料と条件のもとで微生物を培養しなければならない。
1.1.1. 培地の調製培養基（culture medium, 培地）は微生物を生育させるために用いる各種栄養物の混合物で、目的とする微生物に対する栄養素を完備していなければならない。
微生物の種類や生理的条件によって、その栄養成分の組み合わせや pH は異なる。
通常、液体培養基と固体培養基に大別され、固体培養基は液体培養基に寒天などを加えて固めた培養基である。
また、培養基は天然物質を材料とする天然培養基と化学的組成が明らかな合成培養基とに分けられ、主成分の一部が天然物質で、その他の成分を化学薬品とする半合成培養基も良く用いられる。
細菌用培地 Glucose 0.5 % (w/v) Peptone 1 Meat extract 1 Yeast extract 0.2 NaCl 0.5 （Agar 2 %） Tap water （水道水） pH 7.0 - 7.5 （BTB 試験紙で調整）酵母・かび用培地 Glucose 5 % (w/v) Peptone 0.5 Yeast extract 0.2 K 2HPO 4 0.4 KH 2PO 4 0.2 MgSO 4・7H 2O 0.02 （Agar 2 %） Tap water （水道水） pH 5.6 - 5.8 （MR 試験紙で調整）放線菌用培地 Soluble starch 0.4 % (w/v) Yeast extract 0.4 Malt extract 1 （Agar 2 %） Tap water （水道水） pH 7.0 - 7.5 （BTB 試験紙で調整）乳酸菌用培地 Glucose 0.5 % (w/v) Peptone 1 Meat extract 1 Yeast extract 0.2 NaCl 0.5 （Agar 2 %） Tap water （水道水） pH 7.0 （BTB 試験紙で調整）穿刺培養用高層培地を調製する場合は、あらかじめCaCO 3 を小スパテルに一杯程度の量を添加した試験管に上記培地を加える。
- 2 -【調製操作】1. 試薬を秤量し、 培地を調製する。
2. 培地のpH を調整（1 N HCl または 1 N NaOH で）した後、試験管に分注する。
寒天を入れた培地についてはオートクレーブ（５分間程度）または湯煎によって寒天を溶解して、試験管に分注する（分注器使用）。
3. シリコセン（あるいは綿栓）をした後、オートクレーブによって加圧蒸気殺菌する（121℃、1.0 気圧、20 分）。
4. 固体斜面培地（スラント）を調製する場合は寒天が固まるまで斜面に静置しておく（図１）。
高層培地を調製する場合は直立させたまま放冷し、凝固させる（図１）。
斜面培地を凝固した後、直立させると斜面の下部に凝縮水ができるが、これは菌の十分な生育増殖に重要な役目を持つ。
図１ 固体培地1.1.2. 植菌培養器に分注した固体または液体培地に目的の菌を純培養するために菌の移植（接種、inoculation ）を行う。
この際には、雑菌の混入を防ぐために細心の注意が必要である。
微生物を移植するためには白金耳を用いる。
白金耳には白金線の先端部をループ状にしたものとカギ状にしたものとがある。
カギ状にした白金耳はカビの植菌に用いられ、その他の細菌や酵母などはループ状の白金耳で植菌する。
また、嫌気性菌である乳酸菌などを穿刺培養する場合は白金線をそのまま用いる。
白金鈎（カビなど） 白金線（乳酸菌など） 白金耳（細菌、酵母など）図２ 種々の白金耳【植菌操作】1. 菌が生えている培養基と新しい培養基との二本の試験管を、前者を内側にし、後者を外側にして左手親指と人さし指の間にしっかりと持ち、中指を両方の試験管の間に軽くそえる。
そして、シリコセン（あるいは綿栓）の頭部を火炎で軽く焼く。
2. 白金耳を右手に持って火炎殺菌する。
3. シリコセンを右手の自由な指の間にはさみ、試験管から静かに回しながら抜く。
この時、両方の試験管の口は火炎から外さない。
4 火炎殺菌した白金耳をまず新しい培養基中に入れて冷却し、菌が生えている培養基から微生物を一白金耳量採って新しい培養基中に移す。
菌を移す時のみ、両試験管を火炎から外す。
5. 移植した後、試験管口を火炎中にて殺菌しながら、火炎で焼いたシリコセンを試験管に軽く挿入して、管外のシリコセン部分を焼いた後、十分に挿入する。
6. 白金耳を火炎で殺菌する。
新しく植えた培養基の試験管をインキュベーターに入れて培養する。
液さ行下行n液シo耳混き際タn生防がn生うコぐさuコn生t側c性行際液3i新nそた部液さ行下行n液シ防 う鈎ぐビc状o植細溶防 う鈎ぐビn生t側c性た部入トて液解う- 3 -図３ 植菌操作【使用菌株】 細菌グラム陰性菌 Escherichia coli (AKU 0008) グラム陽性菌 Bacillus subtilis (AKU 0209)酵母子のう酵母 Saccharomyces cerevisiae (AKU 4111) 無胞子酵母 Candida maltosa (AKU 4624)かび接合菌類 Mucor javanicus (AKU 3010)Rhizopus oryzae (AKU 3119) 子のう菌類 Aspergillus niger (AKU 3333)Penicillium chrysogenum (AKU 3401) 放線菌 土壌より分離した菌株乳酸菌 Lactobacillus plantarum (AKU 1130)1.1.3. 培養菌体の培養方法としては固体培養法と液体培養法がある。
１. 固体培養菌の保存やかび・放線菌などの胞子を必要とする際には寒天を加えた固体培地を用いて菌を培養する。
固体培養は試験管の固体斜面培養基を用いた斜面培養や、滅菌したシャーレに寒天培地を流し込んで固めた培養基に菌液を注ぐ平板培養が行なわれる。
平板培養は微生物の純粋分離法として広く用いられている。
同じ原理に従って、微生物の細胞数を計測するのにも応用されている。
すなわち、試料を希釈して平板の固体培養基で培養し、個々の細胞より独立した集落（コロニー）を作らせてその数を菌数とする（1.6. 菌数の計測参照）。
図４ 平板培地への植菌操作 図５ 微生物単離のための画線法（例）ャ・れすれぐャp平数純天生 ぐい粋液ぐい広粋微P広・行Pぐいわ 板ニれ生ャz注単ぐ独U際のャ・れすれぐャp粋 微照広個板ち平んく類行釈物ど注 広U dU粋 微照広個ぐいわ 板ニU際の無胞ャM微基y子胞母U行え物どわ—母Umn胞1ャな２. 液体培養多量の菌体を得ようとする場合は液体培養基を用いた液体培養を行う。
静置培養法と振とう培養法が行われる。
振とう培養は微生物を好気的に培養する方法である。
1.2. 微生物の形態観察微生物 microorganism という言葉は決して正確な学術用語ではない。
しいて定義を与えれば、顕微鏡の助けを借りなければ肉眼では見ることができないような微小な生物、ということになるであろう。
通常、微生物と呼ばれるものには菌類（かび、酵母、きのこ）、細菌（放線菌を含む）、原生動物、ウイルス、及び一部の単細胞藻類が含まれる。
これらの微生物は細胞内の核膜の有無によって原核生物（prokaryote）と真核生物（eukaryote）に大きく分けることができる。
前者には細菌（bacteria）と藍藻類（cyanobacteria）が含まれ、後者には酵母（yeast）、かび（mold）、藻類（algae）などが含まれる。
1.2.1. 肉眼観察微生物のおおよその大きさは、細菌が0.5 ～ 1 μm、酵母が ５～７μm、かびの菌糸の幅が ５～６μmで、ウイルスは 0.01 ～ 0.3 μmである。
このような微小な菌体でもそれが旺盛に増殖し、コロニーを形成すれば肉眼でも見ることができる。
とりわけ、かびについては菌糸体の色や形を肉眼で観察することにより区別することが可能である。
かびの肉眼観察におけるポイントRhizopus属： 綿毛状あるいはクモの巣状に菌糸体を形成する。
クモノスカビと呼ばれる。
Mucor属： 菌糸は白色ないしは灰色で短い毛のように繁殖する。
ケカビと呼ばれる。
Penicillium属： 分生胞子が緑色ないしは褐色で、アオカビと呼ばれる。
Aspergillus属： 分生胞子の色は黄色、緑色、褐色あるいは黒色とさまざまである。
コウジカビ と呼ばれる。
細菌や酵母でも色素を生じる菌についてはコロニーや周辺の培地を肉眼観察することによって区別することができる。
1.2.2. 顕微鏡の扱い方顕微鏡は微生物の研究において最も重要な道具の一つである。
一つ一つの部分の構造と機能を十分に理解して、その取り扱い方を習熟しなければならない。
１. 顕微鏡の構造顕微鏡は光学的な部分と器械的な部分とに分かれている。
２. 器械的な部分器械系部分は光学系部分を支え、光学系に適正な光軸を与え、試料に対する焦準を行う。
試料台（stage）は検鏡試料を載せる装置で、中央に穴があり、試料台の下にある光源から光を試料にあてる。
試料台に載せられた試料に対する焦準合わせは試料台を粗動ネジ及び微動ネジで上下することによって行う。
３. 光学的な部分光学系部分は接眼レンズと対物レンズ、及び照明装置からなる。
接眼レンズは対物レンズによって拡大された実像をさらに拡大するレンズである。
観察に際して、レンズにごみがあるように見えるのは接眼レンズにごみが付いている場合が多い。
これは顕微鏡をのぞきながら接眼レンズをまわして、それに従ってごみも移動するようであれば接眼レンズのごみと考えることができる。