培养基的配制方法
培养基的配制
培养基的配制：由粉针车间按大豆胰蛋白胨每30g加1L纯化水的比例配制培养基(每批分装应＞3000瓶，每瓶灌装5ml，每批至少配制18L-19L培养基)。
培养基：乳糖＝5ml:1g 在百级下用规格为50ml的无菌针管分装8.2.1调整分装机步数，使分装装量为1.0g，分装于灭菌后的管制瓶中。
8.2.2在无菌分装室百级层流罩下，把准备好的无菌培养基用无菌注射器（规格为5ml）分装到各管制瓶中，每瓶分装5ml，然后加塞，轧盖。
8.2.3阴性对照：在模拟分装过程的前、中、后段，随机抽取10支装有培养基的管制瓶与试验样品同条件培养一起培养，作为阴性对照。
8.2.4阳性对照：在模拟分装过程的前、中、后段，随机抽取10支分装有培养基的管制瓶，其中5支接种浓度<100cfu/ml的枯草芽孢杆菌液，另5支接种浓度<100cfu/ml 的白色念珠菌液，作为阳性对照。
培养基的配制：由粉针车间按大豆胰蛋白胨每30g加1L纯化水的比例配制培养基(每批分装应＞3000瓶，每瓶灌装5ml，每批至少配制18L-19L培养基)。
培养基：乳糖＝5ml:1g 在百级下用规格为50ml的无菌针管分装8.2.1调整分装机步数，使分装装量为1.0g，分装于灭菌后的管制瓶中。
8.2.2在无菌分装室百级层流罩下，把准备好的无菌培养基用无菌注射器（规格为5ml）分装到各管制瓶中，每瓶分装5ml，然后加塞，轧盖。
8.2.3阴性对照：在模拟分装过程的前、中、后段，随机抽取10支装有培养基的管制瓶与试验样品同条件培养一起培养，作为阴性对照。
8.2.4阳性对照：在模拟分装过程的前、中、后段，随机抽取10支分装有培养基的管制瓶，其中5支接种浓度<100cfu/ml的枯草芽孢杆菌液，另5支接种浓度<100cfu/ml 的白色念珠菌液，作为阳性对照。
培养基的配制：由粉针车间按大豆胰蛋白胨每30g加1L纯化水的比例配制培养基(每批分装应＞3000瓶，每瓶灌装5ml，每批至少配制18L-19L培养基)。
培养基配方
1、PDA培养基（用于分离、培养植物内生真菌）：马铃薯（去皮）200g , 葡萄糖20g , 蒸馏水1000 ml , 琼脂粉15g。
用于分离内生真菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的氯霉素和硫酸链霉素各50 µ g/ml，用于抑制细菌的生长。
2、NA培养基（用于分离、培养植物内生细菌）：牛肉膏3g，蛋白胨5g，葡萄糖2.5g，琼脂粉15g，蒸馏水1000ml，pH 7.0。
用于分离内生细菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的放线菌酮50µg/ml，用于抑制真菌生长。
115℃，20min 灭菌。
3、LB培养基：胰蛋白胨10 g，酵母提取物5 g，NaCl 10 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0；4、DSM1培养基：磷酸三钾26.631 g（pH=7.0)，二水柠檬酸三钠9.999 g，硫酸镁0.2465 g，硫酸铵19.821 g，牛肉膏3 g，NaCl 5 g，胰蛋白胨10 g，葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL，pH=7.0；5、DSM2培养基：磷酸三钾26.631 g（pH=7.0)，二水柠檬酸三钠9.999 g，硫酸镁0.2465 g，硫酸铵19.821 g，牛肉膏3 g，NaCl 5 g，细菌学蛋白胨10 g，葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0；6、Msgg培养基：磷酸钾5 mmoL/L(pH7.0)，MOPs 100 mmoL/L（pH7.0），MgCl2 2 mmoL/L，CaCl2 700 mmoL/L，MnCl2 50 µM，FeCl3 50 µM，ZnCl2 1 µM，VB1 2 µM，甘油0.5 %，谷氨酸0.5 %，色氨酸50 µg/mL，苯丙氨酸50 µg/mL，蒸馏水1000 mL，pH 7.0。
7、N%NA培养基：牛肉膏3.0 g，细菌学蛋白胨10 g，NaCl 5 g，琼脂粉N*10 g，8、BGM1培养基：牛肉膏3 g，胰蛋白胨10 g，NaCl 5 g，磷酸三钾26.631 g（pH7.0），二水柠檬酸三钠9.999 g，硫酸镁0.2465 g，硫酸铵19.821 g，葡萄糖1 g，蒸馏水1000 mL，pH 7.0。
常用培养基的配制成分及方法
一、常用培养基1、LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1NNaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。
注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
2、SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1mol/L氯化钾2.5ml用水补足体积到1L。
分成100ml的小份，高压灭菌。
培养基冷却到室温后，再在每100ml 的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。
3、SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外，再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml，用0.22um的滤膜过滤除菌）。
4、TB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。
冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/LKH2PO4/0.72mol/LK2HPO4的溶液（2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml。
高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌）。
5、2×YT培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨16g酵母提取物10g氯化钠4ml如果需要用1NNaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。
注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
6、YPD培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物10g葡萄糖20g用水补足体积为1L后，高压灭菌。
建议在高压灭菌之前，对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1.6g色氨酸，因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。
为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。
二、常用抗生素氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
实验一培养基的配制与灭菌
实验一培养基的配制与灭菌一、目的掌握培养基母液的配制方法；培养基的配制和灭菌技术；不同质地实验用品的灭菌方法。
二、方法步骤1、母液配制一般大量元素、微量元素和其它成分分别配制成100－200倍母液，使用时按比例稀释即可。
配好的母液需贮存于2～4℃的冰箱中，定期检查有无沉淀和微生物污染，如果出现沉淀或微生物污染，则不能使用。
2、植物激素配制植物激素一般配制成浓度为0.1—1.0mg/ml的溶液，贮存在2～4℃下备用。
由于多数激素难溶于水，所以配制时应按下面步骤进行：IAA：先用少量95%乙醇使之充分溶解，再加蒸馏水定容至需要浓度的体积。
NAA：可溶于热水中，也可采用与IAA同样的方法配制。
2,4-D：先用少量1mol/L的NaOH溶液充分溶解，然后缓慢加入蒸馏水定容至需要浓度体积。
细胞分裂素类：KT和BA等细胞分裂素类物质均溶于稀盐酸，应先用少量1mol/L的HCl溶解后再稀释至需要浓度。
赤霉素：赤霉素的水溶液稳定性较差，一般用95%的乙醇配制成5～10mg/ml的母液低温保存，使用时再稀释。
3、培养基配制按实际配制培养基体积，取各母液的需要量加入一适当体积的烧杯或其它配制培养基的容器中，再加入实际配制培养基体积约2/3—3/4的蒸馏水，然后以每升所用蔗糖的量称取放入培养基并使其溶化。
用0.1mol/L的NaOH或0.1mol/L的HCl调整pH至5.6—5.8，以0.6%—0.8%的比例加入琼脂，并搅拌加热使琼脂完全溶化，用蒸馏水定容至终体积，混合均匀后分装于培养器皿中，然后进行高压灭菌。
4、培养基灭菌分装好的培养基置于高压蒸汽灭菌锅中灭菌，灭菌条件为温度121℃，压力0.105MPa，灭菌时间与培养基容量的关系如下表所示。
培养基体积与灭菌时间的关系三、结果与分析1、培养基的母液配制情况。
2、培养基配制时的注意事项。
四、提交实验报告附：MS培养基配方。
培养基配制
茎尖培养可看作是这方面较为特殊的一种方式。它采用极其幼嫩的顶芽的茎 尖分生组织作为外植体进行接种。在实际操作中，采用包括茎尖分生组织在内 的一些组织来培养，这样便保证了操作方便以及容易成活。 用靠培养定芽得到的培养物一般是茎节较长，有直立向上的茎梢，扩繁时主要 用切割茎段法，如香石竹、矮牵牛、菊花等。但特殊情况下也会生出不定芽，形 成芽丛。 2）不定芽的发育 在培养中由外植体产生不定芽，通常首先要经脱分化过程，形成愈伤组织的细 胞。然后，经再分化，即由这些分生组织形成器官原基，它在构成器官的纵轴 上表现出单向的极性（这与胚状体不同）。多数情况下它形成芽，后形成根。 另一种方式是从器官中直接产生不定芽，有些植物具有从各个器官上长出不 定芽的能力如矮牵牛、福禄考、悬钩子等。当在试管培养的条件下，培养基中 提供了营养，特别是提供了连续不断植物激素的供应，使植物形成不定芽的能 力被大大地激发起来。许多种类的外植体表面几乎全部为不定芽所覆盖。在许 多常规方法中不能无性繁殖的种类，在试管条件下却能较容易地产生不定芽 而再生，如柏科，松科，银杏等一些植物。许多单子叶植物储藏器官能强烈地 发生不定芽，用百合鳞片的切块就可大量形成不定鳞茎。 在不定芽培养时，也常用诱导或分化培养基。用靠培养不定芽得到的培养物， 一般采用芽丛进行繁殖，如非洲菊、草莓等。
配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。
（4）配制MS铁盐母液
一般配制成100倍MS铁盐母液。 依次称取 EDTA二钠 3.73g FeSO4·7H2O 2.78g
配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。 所以MS母液有5种大量元素母液，加上MS微量元素母液、MS有机母液和MS铁盐 母液，共8种母液。 激素母液的配制 各种生长素和细胞分裂素要单独配制，不能混合在一起，生长素类一般要先用
培养基的配制
培养基的配制培养基是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。
一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。
培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。
1. 成分配方转换—在容器中加入少量水(蒸馏水、天然水)—按配方称各种药物(依次添加)—加入足够的水(一药一勺，服完药后立即盖上瓶子)。
2. 解散淀粉溶解:少量的冷水进粘贴琼脂融化温度为95-97℃，加热时需搅拌以防烧焦。
3.调整pH值用1n盐酸或1n氢氧化钠将培养基调至所需值。
4. 过滤滤纸或棉。
(有时可以省略)5. 分装一般在烧瓶或试管中灭菌。
(1)三角瓶静态培养时，100ml培养基/ 250ml烧瓶的最大值不应超过150ml 培养基/ 250ml否则，在灭菌过程中，培养基的煮沸极易污染棉塞，造成细菌污染;如果进行瓶培养，15-20ml培养基/ 250ml三角瓶应通风良好。
(2)试管包装液体培养基通常填充4-5ml，约为试管高度的1 / 4;一般固体斜培养基为3-4ml，约为试管高度的1 / 5。
6. 用绷带包扎包装完毕后，塞好棉塞，用牛皮纸包好棉塞，防止灭菌时湿气进入，弄湿棉塞。
7. 灭菌高压蒸汽灭菌按照配方中要求的温度和压力进行。
如果灭菌温度过高，营养成分就会被破坏培养基中的糖和氨基酸会使培养基的颜色变深。
8. 斜灭菌后，需要倾斜的试管应在加热过程中倾斜放置，使其固化成一个斜坡，约占试管长度的1 / 2。
9. 存储中可以使用不污染被放置在30℃后一天。
通常用牛皮纸包好，置于2-8℃冰箱中保存。
常用培养基配制方法
常用培养基配制方法：（1）基础盐培养基（MSM）：(NH4)2SO42.0g，MgSO4·7H2O0.2g，CaCl2·2H2O 0.01g，FeSO4·7H2O0.001g，Na2HPO4·12H2O1.5g，KH2PO41.5g，蒸馏水1000 mL。
（2）LB培养基：蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠5g，蒸馏水1000 mL，pH7.5。
（3）高氏合成1号培养基：硝酸钾1g，磷酸氢二钾0.5g，硫酸镁0.5g，氯化钠0.5g，硫酸亚铁0.01g，可溶性淀粉20g，蒸馏水1000mL。
（4）查彼氏培养基：硝酸钠2g，氯化钾0.5g，硫酸镁0.5g，磷酸氢二钾1g，硫酸亚铁0.01g，蔗糖30g，蛋白胨0.5g，蒸馏水1000mL。
（5）马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20 g，蒸馏水1000mL。
将无病马铃薯洗净去皮切碎，加蒸馏水1000mL，煮沸0.5 h，纱布过滤，滤液加蒸馏水补足1000mL，再加入葡萄糖，然后分装三角瓶灭菌备用。
（6）铵察氏琼脂培养基：氯化铵2g，氯化钾0.5g，硫酸镁0.5g，磷酸氢二钾1g，硫酸亚铁0.01g，蔗糖30g，蛋白胨0.5g，琼脂20g，蒸馏水1000 mL。
（7）克氏合成1号琼脂培养基：磷酸氢二钾1g，碳酸镁0.3g，氯化钠0.2 g，硝酸钾1g，硫酸亚铁0.01g，碳酸钙0.5g，葡萄糖20g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。
（8）葡萄糖天门冬素琼脂培养基：葡萄糖10g，天门冬素0.5g，磷酸氢二钾0.5g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。
（9）葡萄糖酵母膏琼脂培养基：葡萄糖10g，酵母膏10g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。
（10）瓦氏肉汁琼脂培养基：蛋白胨5g，葡萄糖10g，牛肉膏10g，氯化钠5g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。
（11）淀粉琼脂培养基：可溶性淀粉10g，碳酸镁1g，磷酸氢二钾0.3g，氯化钠0.5g，硝酸钠1g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法Ampicillin(氨卡青霉素)(100 mg/ml)组份浓度100 mg/ml Ampicillin配制量50 ml配制方法 1.称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中。
2.加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。
3.用0.22 µm过滤膜过滤除菌。
4.小份分装(1 ml/份)后，-20℃保存。
IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)(24 mg/ml)组份浓度24 mg/mL IPTG配制量50 mL配制方法 1.称1.2 g IPTG置于50 ml离心管中。
2.加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。
3.用0 22 µm过滤膜过滤除菌。
4小份分装(1 ml，份)后，-20℃保存。
X-Gal (20 mg/ml)组份浓度20 mg/ml X-Gal配制量50 ml配制方法 1.称量l g X-Gal置于50 ml离心管中。
2.加入40 ml DMF(二甲基甲酰胺)，充分混合溶解后，定容至50 ml。
3.小份分装(1 ml/份)后，-20℃避光保存。
LB培养基组份浓度1%(W/V)Tryptone(胰蛋白胨)，0.5%(W/V)Y east Extract(酵母提取物)，1%(W/V)NaCl配制量1 L配制方法3.滴加5 N NaOH(约0.2 m1)，调节pH值至7.0。
4.加去离子水将培养基定容至1 L。
5高温高压灭菌后，4℃保存。
组份浓度配制量1L配制方法 1.配制磷酸盐缓；中液(0.17 M KH2PO4，0.72 M K2HPO4)100 ml。
溶解2.31 g KH2PO4和l2.54 g K2HPO4于90 ml的去离子水中，搅拌溶解后，加去离子水定容至100 ml，高温高压灭菌。
4.加去离子水将培养基定容至1 L后，高温高压灭菌。
5.待溶液冷却至60℃以下时，；加入100 ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液。
实验室常用培养基的配制方法.
Glycerol
17mM
KH2PO4
72mM
K2HPOa
配制量1.L
配制方法1.配制磷酸盐缓；中液(0.17 M KH2PO4,0.72 M K2HPO4)100 ml。溶解2.31 g KH2PC4和l2.54 g K2HPO4于90ml的去离子水中，搅
拌溶解 后，加去离子水定容至100ml，咼温咼压火菌2.称取下列试剂，置于l L烧杯中。
在90ml的去离子水中溶解1.86 g KCl后，定容至100ml。
2.配制2M MgCl2溶液。
在90ml去离子水中溶解19g MgCl2后，定容至100ml，高温高
4.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。
5.量取10m1250mM KCl溶液，加入到烧杯中。
6.滴加5N NaOH溶液(约0.2 m1)，调节pH值至7.0。
配制方法1.称取下列试剂，置于l L烧杯中。
Trypt one
16 g
Yeast Extract
10 g
NaCl
5 g
2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解
3.滴力卩5N NaOH,调节pH值至7.0。
4.加去离子水将培养基定容至1Lo
5.咼温咼压火菌后，4C保存。
①bxbroth
组份浓度2%(W/V)Tryptone，0.5%(W/V)Yeast Extract，o
7.加入去离子水将培养基定容至l L0
8.高温高压灭菌后，4C保存。
9. 使用前加入5ml灭菌的2M MgCl2溶液。
2%(W/V)
Trypt one
0.5%(W/V)
Yeast Extract
0.05%(W/V)
培养基配方及配制方法
培养基配方及配制方法培养基是一种用于寄养和培养细胞、微生物、组织等生物体的基质。
其配方的选择和配制方法对于不同的生物体和研究目的有很大的差异。
以下是一般常用的培养基配方及简单的配制方法：1. LB培养基（Luria-Bertani）LB培养基是常见的用于大肠杆菌等细菌的培养基，其配方包括：- 1% 蛋白胨（tryptone）: 添加营养源和能量- 0.5% 酵母粉（yeast extract）: 提供维生素和生长因子-1%NaCl（氯化钠）:调节渗透压-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法：将蛋白胨、酵母粉和NaCl加入蒸馏水中，调整pH至7.0，将混合液体加热至溶解，过滤杂质，如需固化则加入1.5%的琼脂。
2. YPD培养基（Yeast extract-Peptone-Dextrose）YPD培养基常用于酵母菌的培养，其配方包括：- 1% 酵母提取物（yeast extract）: 提供维生素和生长因子- 2% 蛋白胨（peptone）: 为细菌提供碳源和能量- 2% 葡萄糖（dextrose）: 为细菌提供碳源和能量-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法：将酵母提取物、蛋白胨和葡萄糖加入蒸馏水中，调整pH至7.0，将混合液体加热至溶解，过滤杂质，如需固化则加入2%的琼脂。
3. DMEM培养基（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）DMEM培养基是常用的哺乳动物细胞培养基，其配方包括：-10%胎牛血清（FBS）:提供生长因子和营养物质- 1% 青霉素-链霉素溶液（Penicillin-Streptomycin Solution）: 防止细菌污染- 1% L-谷氨酰胺（L-Glutamine）: 提供细胞代谢所需的基础物质-DMEM基础培养液:包括氨基酸、维生素等成分-蒸馏水：使混合液体稀释至所需体积配制方法：将胎牛血清、青霉素-链霉素溶液、L-谷氨酰胺和DMEM基础培养液加入蒸馏水中，调整pH值至7.4，混合均匀即可。
实验室36种微生物培养基配制方法
实验室36种微生物培养基配制方法实验室养菌基是为微生物的培养和研究提供合适营养和条件的培养基质。
不同微生物对培养基的要求各不相同，因此实验室通常需要配制多种不同的培养基。
下面是36种常用的微生物培养基的配制方法。
一、通用培养基1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）营养琼脂培养基是一种通用的培养基，适用于大多数微生物的培养。
其配方为：蛋白胨10克、葡萄糖5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，加入琼脂，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
2. 营养肉膏培养基（Nutrient Broth）营养肉膏培养基是一种通用的液体培养基，适用于大多数微生物的培养。
其配方为：蛋白胨10克、牛肉提取物5克、葡萄糖5克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，高压灭菌，分装，即可使用。
3. 大肠杆菌选择性培养基（MacConkey Agar）大肠杆菌选择性培养基是一种常用的培养基，用于选择和鉴定大肠杆菌。
其配方为：蛋白胨17克、葡萄糖1.5克、恶瓜胆汁5克、硼酸紫0.5克、亮矾0.09克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，加入琼脂，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
4. Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基（Sabouraud Dextrose Agar）Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基是用于真菌的培养和鉴定。
其配方为：脱氧胆汁10克、蔗糖40克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至5.6-6.4，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
二、选择性培养基1. VC菌属选择性平皿培养基（Vogel-Johnson Agar）VC菌属选择性平皿培养基是用于选择和鉴定Voges-Proskauer菌属（如克雷伯菌）的培养基。
其配方为：葡萄糖1克、琼脂15克、盐酸75克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、加热煮沸，冷却至55-60°C，加入胆盐酯高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
简述配制培养基的基本步骤及注意事项
简述配制培养基的基本步骤及注意事项配制培养基是微生物学实验中必不可少的步骤，它直接影响到实验结果的准确性和可重复性。
下面将详细介绍配制培养基的基本步骤及注意事项。
一、基本步骤1.准备原料：根据所需培养菌种的不同，选择相应的培养基成分，并准备好所需量的水、试剂瓶、量筒、称量器等。
2.称量成分：按照配方比例，精确地称取各种成分，并放入干燥无菌容器中。
3.溶解成分：向称取好的各种成分中加入适量的水，进行溶解。
在此过程中应注意搅拌均匀，以防止产生团块。
4.调节pH值：根据所需菌种对pH值的要求，在溶液中加入适当量的盐酸或氢氧化钠等试剂进行调节。
调节后应使用pH计检测pH值是否达到所需范围。
5.加水至定容：将调节好pH值的溶液加入干燥无菌容器中，并用蒸馏水加至定容。
在此过程中也要注意搅拌均匀，以确保各种成分均匀分布。
6.灭菌：将配制好的培养基进行灭菌处理。
常用的方法有高压蒸汽灭菌和过滤灭菌等。
二、注意事项1.选择合适的培养基成分：不同的微生物对于营养成分的需求不同，因此在配制培养基时应选择合适的成分，以保证微生物能够正常生长和繁殖。
2.精确称量各种成分：在称量各种成分时应精确到毫克级别，以确保配方比例正确。
3.搅拌均匀：在溶解成分和加水至定容时应注意搅拌均匀，以防止产生团块或不均匀混合导致部分培养基无法使用。
4.严格控制pH值：微生物对于pH值的要求非常严格，因此在调节pH值时应精确控制，并使用pH计检测是否达到所需范围。
5.注意灭菌处理：在培养基配制完成后，必须进行灭菌处理。
如果没有进行有效的灭菌处理，则可能会导致细菌污染，从而影响实验结果。
6.注意无菌操作：在培养基配制过程中，应严格遵守无菌操作规范，以防止微生物污染。
例如，使用无菌器皿、试剂瓶等，并在无菌操作台上进行操作。
7.注意保存条件：配制好的培养基应存放于干燥、阴凉、避光处，并尽快使用。
如果需要长期保存，则应冷藏或冷冻保存。
总之，在配制培养基时，应根据实验需要选择合适的成分和比例，并严格控制各种操作步骤和条件，以保证培养基的质量和可靠性。
常用培养基配方范文
常用培养基配方范文培养基配方是微生物学研究的基础，它们提供了养分和条件，促进微生物的生长和繁殖。
常用培养基配方有多种，以下是几个常用的配方范文。
一、莱文斯坦－鲍德尔培养基（Luria-Bertani agar）配方：成分：1.蛋白胨：10克2.酵母提取物：5克3.食盐：10克4.琼脂：15克5.蒸馏水：1000毫升6.高氯酸钠（0.1M）：2毫升（pH7.2）制备方法：1.将蛋白胨、酵母提取物和食盐加入蒸馏水中，加热至溶解。
2.加入琼脂并搅拌均匀，再加入高氯酸钠调节pH值。
3.煮沸1~2分钟，然后分装入培养皿中。
注意事项：1.注意消毒操作，以防止污染。
2.琼脂的煮沸时间通常为15~20分钟。
二、营养琼脂培养基（Nutrient agar）配方：成分：1.蛋白胨：5克2.细胞色素：1克3.维生素B1：0.1克4.卵黄：10克5.食盐：5克6.琼脂：15克7.蒸馏水：1000毫升制备方法：1.将蛋白胨、细胞色素、维生素B1、卵黄和食盐加入蒸馏水中并加热溶解。
2.加入琼脂并搅拌均匀。
3.煮沸1~2分钟，然后分装入培养皿中。
注意事项：1.注意消毒操作，以防止污染。
2.煮沸时间可根据需要适当延长，但不要超过20分钟。
三、马尿素琼脂培养基（MacConkey agar）配方：成分：1.蛋白胨：17克2.硼砂：1.5克3.细胞色素：2.5克4.氯化钠：5克5.水合甲基红：0.03克6.钴绿：0.015克7.红绿二色砂：0.15克8.琼脂：13.5克9.蒸馏水：1000毫升制备方法：1.将蛋白胨、硼砂、细胞色素、氯化钠、水合甲基红、钴绿和红绿二色砂加入蒸馏水中并加热溶解。
2.加入琼脂并搅拌均匀。
3.煮沸1~2分钟，然后分装入培养皿中。
注意事项：1.注意消毒操作，以防止污染。
2.此培养基适用于选择肠道革兰氏阴性杆菌。
以上是常用的几个培养基配方范文，供参考使用。
在制备培养基时，需要注意消毒操作，以防止污染。
另外，不同微生物对培养基的要求也有所不同，可以根据实际需要进行配方的修改和优化。
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法实验室中常用的培养基种类繁多，每一种培养基的配方也各有不同。
下面将介绍几种常见的培养基的配制方法。
1. Luria-Bertani (LB) 培养基：LB培养基通常用于大肠杆菌等细菌的培养。
其主要成分包括蛋白胨、酵母浸膏和食盐。
下面是LB培养基的配制方法：-将10克蛋白胨、10克酵母浸膏和10克食盐加入到1升蒸馏水中。
-用玻璃棒搅拌溶解，然后倒入培养瓶中。
-使用自动压力灭菌器或高压灭菌锅将培养基置于121摄氏度下高压下灭菌20分钟。
-灭菌后，培养基冷却至室温后即可使用。
2.孟德尔培养基：孟德尔培养基常用于植物细胞培养。
其主要成分包括盐类、碳源和维生素。
下面是孟德尔培养基的配制方法：-将所需的盐类（例如硫酸镁、硝酸钾）按照指定比例称量，并加入到1升蒸馏水中。
-添加适量的碳源（例如葡萄糖或蔗糖）以提供能量。
-加入维生素溶液，通常可以购买到已配制好的维生素混合液。
-搅拌溶解后，用自动压力灭菌器或高压灭菌锅将培养基置于121摄氏度下高压下灭菌20分钟。
-灭菌后，培养基冷却至室温后即可使用。
3.YPD培养基:YPD培养基可以用于酵母菌的培养。
其主要成分包括酵母提取物、葡萄糖和酵母浸膏。
下面是YPD培养基的配制方法：-将10克酵母提取物、20克葡萄糖和20克酵母浸膏加入到1升蒸馏水中。
-使用玻璃棒搅拌溶解，然后倒入培养瓶中。
-使用自动压力灭菌器或高压灭菌锅将培养基置于121摄氏度下高压下灭菌20分钟。
-灭菌后，培养基冷却至室温后即可使用。
4. Brain Heart Infusion (BHI) 培养基：BHI培养基可以用于细菌和真菌的培养。
其主要成分包括脑提取物、心脏提取物、肉浸膏和葡萄糖。
-将37克BHI粉末加入到1升蒸馏水中。
-使用玻璃棒搅拌溶解，然后倒入培养瓶中。
-使用自动压力灭菌器或高压灭菌锅将培养基置于121摄氏度下高压下灭菌20分钟。
-灭菌后，培养基冷却至室温后即可使用。
培养基配方及配制方法
培养基配方及配制方法一、培养基配方常用的培养基是复合培养基，包含有机成分和无机成分两部分。
其中，有机成分提供微生物所需的碳源、氮源和能源等，无机成分提供微生物所需的无机盐和微量元素等。
以下是一个典型的复合培养基配方：有机成分：1.蛋白胨：提供氮源和碳源；2.葡萄糖：提供碳源和能源；3.酵母提取物：提供维生素和微量元素。
无机成分：1.磷酸盐缓冲液：提供pH缓冲效果；2.硝酸盐：提供氮源和无机盐；3.氯化钠：提供无机盐；4.磷酸氢二钾：提供缓冲效果和无机盐；5.硫酸镁：提供镁离子。
二、培养基配制方法1.准备容器：使用无菌烧瓶、试管、培养皿等容器，并用高压蒸汽灭菌器进行灭菌处理。
2.称量成分：按照配方中的比例，准确称量有机成分和无机成分。
3.溶解有机成分：将蛋白胨、葡萄糖和酵母提取物分别加入适量的蒸馏水中，通过搅拌或加热溶解均匀。
4.准备无机成分溶液：将磷酸盐缓冲液、硝酸盐、氯化钠、磷酸氢二钾和硫酸镁按照配方中的比例加入适量的蒸馏水中，通过搅拌溶解均匀。
5.校正pH值：使用pH计测定培养基的pH值，如有需要，可以用盐酸或氢氧化钠调节pH值至合适的范围。
6.加入蛋白胨溶液：将溶解好的蛋白胨溶液加入无机成分溶液中，并通过搅拌均匀。
7.加入葡萄糖溶液：将溶解好的葡萄糖溶液加入已配制好的培养基中，并通过搅拌均匀。
8.加入酵母提取物：将酵母提取物溶液加入培养基中，并通过搅拌均匀。
9.调节体积：根据实验需要，可以添加蒸馏水或其他添加剂来调节培养基的体积和浓度。
10.灭菌处理：将配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌处理，保证培养基的无菌状态。
以上就是一个典型的培养基配方及配制方法的示例，只是其中的一个例子，不同的微生物可能需要不同的培养基配方和配制方法。
在实验中，根据具体的需求调整培养基的配方，确保能满足微生物的生长需求，并通过灭菌处理保证培养基的无菌状态。
配制培养基的方法
配制培养基的方法
配制培养基的方法可以分为以下几个步骤：
1. 准备所需材料：培养基成分包括水、碳源、氮源、矿质元素、生长因子等。
根据不同的微生物需要，选择合适的成分。
2. 称量和溶解：根据配方将各成分称量出来，然后用适量的去离子水溶解。
3. 调整pH值：使用pH计将培养基的pH值调整到合适的范围内，通常为7.0左右。
4. 加热和消毒：将溶解后的培养基加热至沸腾，保持沸腾1-2分钟以杀灭可能存在的微生物。
然后，使用高压灭菌器或高温灭菌法将培养基灭菌。
5. 倾倒和分装：将已灭菌的培养基倒入无菌培养瓶或培养皿中，然后密封好。
6. 检查和保存：检查培养基是否有异常，如变色或发霉等。
将已制备好的培养基保存在合适的温度和条件下，以防止污染。
以上是一般的培养基制备方法，具体的步骤和条件可以根据不同的微生物和实验需要进行调整。
实验室36种微生物培养基配制方法
实验室36种微生物培养基配制方法1.牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，pH7.4～7.6。
2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉20g，KNO₃ 1g，NaCl 0.5g，K2HPO4•3H2O 0.5g，MgSO4•7H2O0.5g，FeSO4•7H2O0.01g•水1000mL•pH7.4～7.6。
配制时注意：可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。
3.马丁氏（Martin）培养基（用于从土壤中分离真菌）K2HPO 41g，MgSO4•7H2O 0.5g，蛋白胨 5g，葡萄糖 10g，1/3000孟加拉红水溶液100mL，水900mL，自然pH，121℃湿热灭菌30min。
待培养基融化后冷却55～60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。
4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮) 200g，蔗糖(或葡萄糖)20g，水1000mL，配制方法如下：将马铃署去皮，切成约2cm²的小块，放入1500mL的烧杯中煮沸30min，注意用玻棒搅拌以防糊底，然后用双层纱布过滤，取其滤液加糖，再补足至1000mL，自然pH，霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。
5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖 30g，NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4•7H2O 0.5g，KCl 0.5g，FeSO4•7H2O 0.1g，水1000mL，pH7.0～7.2。
6.Hayflik培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液) 1000mL，蛋白胨 10g，NaCl 5g，琼脂15g，pH7.8～8.0，分装每瓶 70mL，121℃湿热灭菌15min，待冷却至80℃左右，每70mL中加入马血清20mL，25%鲜酵母浸出液10mL，15醋酸铊水溶液2.5mL，青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上) 0.5mL，以上混合后倾注平板。
培养基配方及配制方法
培养基配方1 斜面菌种保存培养基1.1PDA培养基〔马铃薯葡萄糖琼脂培养基〕称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加水1000ml煮沸0.5h，纱布过滤，滤液补足1000ml，再加15g葡萄糖和15-20g琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，分装试管，每试管约5-10ml〔视试管大小而定〕，121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。
1.2麦芽汁琼脂培养基麦芽汁的制备：干麦芽首先进展粉碎〔不能太粗，也不必太细。
太粗影响糖化效率，过细影响过滤速度〕，按麦芽重量的3~4倍加水，搅拌均匀后，37℃左右浸泡1小时，然后缓缓加温至55~63℃〔在升温过程中应不断搅拌使温度均匀〕，保温4~6小时〔用0.02摩尔/升碘液测定为黄色至无色时〕，糖化完毕。
在糖化过程中，应每小时搅拌一次。
取过滤后的清液，加1.8%琼脂，分装试管，每试管约5-10ml 〔视试管大小而定〕，121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。
2 基菌落总数检测2.1平板计数琼脂培养基将胰蛋白胨5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、琼脂15.0g参加蒸馏水1000ml中，煮沸溶解后，调pH，然后在121℃下灭菌15min，取出，稍微冷却后，带热倒入培养皿中。
3志贺氏菌检测3.1 GN增菌液成分：胰蛋白胨：20g，葡萄糖：1g，甘露醇：2g，柠檬酸钠：5g，去氧胆酸钠0.5g，磷酸二氢钾4g，磷酸氢二钾1.5g，氯化钠5g，蒸馏水1000ml。
pH7.0制法：将上述物品参加蒸馏水中，加热溶解煮沸，调pH为7.0，分装，在115℃高压灭菌15min。
3.2 HE琼脂成分：胨：12g，牛肉膏3g，乳糖12g，蔗糖12g，水杨素2g，胆碱20g，氯化钠5g，琼脂18~20g，蒸馏水1000ml0，0.4%溴麝香草酚蓝溶液16ml，Andrade指示剂20ml.，甲液20ml，乙液20ml。
pH7.5 制法：将上述前七种成分参加400ml蒸馏水中作为根底液，将琼脂参加到600ml蒸馏水中加热溶解，参加甲液乙液到根底液中，调pH，再参加指示剂，并与琼脂液合并，待冷却至50~55℃，倾注浇平板。
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实验一培养基的配制
生科三班李林40608143 2008.9.16 周二上午
一.实验目的：
1.明确配制微生物培养基的原理；
2.掌握配制微生物通用培养基的一般方法和操作步骤；
3.掌握是湿热灭菌法的原理和操作。
二.实验原理：
膏蛋白胨培养基是一种天然培养基。
牛肉膏是牛肉浸液的浓缩物，含有丰富的营养物质，不仅能为微生物提供碳源、氮源，还含有多种维生素。
蛋白胨是酪蛋白、大豆蛋白或鱼粉等经过蛋白酶水解后，中间产物，含有胨和氨基酸等丰富的含氮素营养物，再加入的NaCl为细菌所需的无机盐，加入的自来水可提供微量元素。
配置好的培养基用湿热灭菌法进行灭菌。
三.材料和仪器：
1.试剂：牛肉膏，蛋白胨，氯化钠，1mol/L NaOH,1mol/L HCl
2.器皿：台秤，玻璃烧杯，搪瓷烧杯，三角瓶，量筒，沙漏，试管，玻棒等
3.其他：PH试纸，牛角匙，牛皮纸，棉花，沙绳，灭菌锅等。
四.实验步骤：
1.配方及配量：牛肉膏0.9g蛋白胨3g，氯化钠 1.5g，琼脂条 4.5g,水
300mL,PH7.2~7.4。
2.称取药品：按培养基配方及配量分别称取各药品，取少量水于烧杯中，将各
培养基成分（除琼脂）逐一加入水中待溶。
3.加热溶解：将搪瓷杯放到电热炉上，用文火加热，病不断搅拌，促使各药品
快速溶解，然后补充水分至所需培养基的量。
4.调节PH:初配好的牛肉膏蛋白胨，培养液是微酸性的，故需用1mol/L NaOH
调PH7.2~7.4。
5.加琼脂：向调好的培养基中加入琼脂条。
6.加棉塞：用8层纱布纸杯成通气塞，灭菌前将方形纱布盖在瓶口，将其中间
部位用手指塞入瓶口内，再将四角折叠成塞子状后加纸套包扎好，然后灭菌。
7.包扎：在棉塞外再包上一层牛皮纸，以防灭菌时冷凝水直接沾湿棉塞及存放
中防止尘埃等污染。
8.灭菌：将待灭菌的培养基放入加压灭菌锅内，于121℃灭菌20min.
五.实验结果：
按照实验方法配制的培养基透明但有些发黄，说明说有物质均完全溶解，基本符合实验要求，颜色有些发黄可能是因为加入牛肉膏，也可能是因为加入牛肉膏的时候所用火温较高，使牛肉膏粘底了，稍有烧糊或烧焦了，致使培养基较黄。
一周以后观察, 配制的无菌牛肉膏蛋白胨固体培养基中,无菌落生成,说明配制的培养基符合要求.
六.思考题：配制牛肉膏蛋白胨斜面培养基有哪些操作步骤，哪几步易出差错?如何防止
答：配方及配量，称取药品，加热溶解，调PH，加琼脂，加棉塞，包扎，灭菌。
易出差错的步骤：
（1）称药品的牛角匙不要混用，称完药品应及时盖紧瓶盖，瓶盖切莫张冠李戴，
尤其是易吸潮的蛋白胨等更应注意及时盖紧瓶盖与旋紧瓶盖。
（2）调PH时要小心操作，尽量避免回调而带入过多的无机离子。
（3）包扎时，在棉塞外再包上一层牛皮纸，以防灭菌时冷凝冰直接粘湿棉塞。