革兰染色
革兰氏染色名词解释
革兰氏染色名词解释
革兰氏染色是一种针对微生物的染色法，由彼得·革兰（Paul Ehrlich）于1883年发明。
它的主要原理是利用染料的化学色素物质在微生物细胞表皮上形成不同的染料沉积，从而使微生物细胞得到彩色，以此来对微生物进行分类和分析。
革兰氏染色法与其它染色方法相比有三大优势：1.可实现多种不同样式的染色，它可以在一次染色中实现多种染色方式，如单色、双色、三色染色等；2.染色效果很好，革兰氏染色能够将微生物细胞表面染得很彩艳，即使在低倍镜下也非常清晰，能更好的反映微生物的特征；3.染色速度快，革兰氏染色的染色速度比传统的染色方法快几倍，可以在几分钟内完成一次染色。
革兰氏染色是生物学实验中采用最多的染色方法之一，它的法则和技巧都相当成熟，应用范围也广泛。
革兰氏染色技术广泛应用于细菌生理学、药物耐药性研究、病原鉴定、细菌分类学研究以及细胞学研究等多个研究领域，它也被用于食品行业、环境污染检测、放射性检测、肿瘤检测等多个领域。
细菌革兰氏染色步骤
细菌革兰氏染色步骤
革兰氏染色是一种常用的细菌分类鉴定方法。
步骤如下：
1.准备细胞液片：将待染菌液滴在干净玻璃片上，并用火炉或灯火加热使其干燥。
2.固定菌液：用无定形火烧的镊子将玻璃片持在火炉/灯火上，烧过3-4次，让菌液固定在玻璃片上。
3.染色：将玻璃片浸入染色剂——紫晶染液中，静置1分钟。
4.漂洗：立即用水把紫晶染剂冲洗掉。
5.涂酒精：用乙醇涂抹菌液，使不产生色素复合物的细胞膜变性。
6.漂洗：用水把酒精冲洗掉。
7.染色：将玻璃片浸入染色剂——碘化钾液中，静置1分钟。
8.漂洗：用水把碘酸盐冲洗掉。
9.溶解：滴一两滴乙醚或丙酮，使不固定的染色剂冲出来，然后用热空气烘干涂片。
10.观察镜检：在显微镜下观察细胞的颜色和形态，区分不同的细菌群体。
革兰氏染色后，属于革兰氏阴性细菌的菌落呈现出红色或粉红色，而属于革兰氏阳性细菌的菌落呈现出蓝紫色或崩溃的黑色。
革兰染色的原理及意义
革兰染色的原理及意义
革兰染色是一种常用的细菌染色方法，原理是利用革兰氏染色剂对细菌细胞壁的结构差异进行染色。
革兰氏阳性菌染色后呈紫色或蓝色，革兰氏阴性菌染色后呈红色或粉红色。
革兰染色的原理是基于细菌细胞壁的不同构成。
革兰氏阳性菌的细胞壁主要由厚壁的胞外多聚糖和胞内的肽聚糖组成，其内部由大量的穿孔蛋白质穿过；而革兰氏阴性菌的细胞壁则相对薄且由较少的胞外多聚糖构成，胞内也缺乏穿孔蛋白质。
在革兰染色过程中，首先用碘溶液将革兰氏阳性菌的紫色染料紧密地固定在细菌细胞壁上，然后用酒精洗去多余的染料，再用蓝色染料对革兰氏阴性菌进行染色。
最终，经过适当的处理和洗涤后，革兰氏阳性菌呈紫色或蓝色，革兰氏阴性菌呈红色或粉红色。
革兰染色的意义在于对细菌进行初步分类和鉴定。
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在形态、结构和代谢特性上存在差异，例如革兰氏阳性菌通常较大、形状多样，而革兰氏阴性菌多为小杆菌状。
通过革兰染色可以快速地初步识别细菌的类别，并为进一步的鉴定提供重要的信息。
此外，革兰染色也对指导药物敏感性试验有一定的参考价值，因为革兰氏阳性菌对抗生素的敏感性通常较差，而革兰氏阴性菌相对较容易受到抗生素的影响。
总之，革兰染色是一种简单而有效的细菌染色方法，能够提供有关细菌类型和某些生理特性的初步信息，对微生物学和临床医学起着重要的作用。
简述革兰氏染色机理
简述革兰氏染色机理
革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法，通过这种方法可以将细菌分为两大类：革兰氏阳性（G+）和革兰氏阴性（G-）。
以下是革兰氏染色的机理：
1、脱色：革兰氏染色过程中的关键步骤之一是脱色。
在经过结晶紫初染和碘液媒染后，G+菌和G-菌都呈现深紫色。
此时，通过在酒精或其他脱色剂中短暂停留，可以将G-菌的细胞壁中的脂质成分溶解，使得脱色剂更容易进入细胞内部，将其染成无色或浅色。
而G+菌由于其细胞壁结构较为坚韧，不易被脱色剂渗透，因此保持深色。
2、复染：在脱色后，通过施加沙黄或其他染料进行复染，使所有细菌都被染上颜色。
由于G-菌已被脱色至无色或浅色，因此沙黄会使其呈现红色。
而G+菌由于未被脱色或仅被部分脱色，呈现深紫色或蓝黑色。
3、结果观察：通过显微镜观察染色后的细菌，可以看到G+菌呈蓝紫色，而G-菌呈红色。
这一差异是由于革兰氏染色过程中对细胞壁脂质成分的处理和脱色剂的渗透能力不同所致。
革兰氏染色的机理主要基于细菌细胞壁的差异，特别是脂质含量的差异。
G+菌的细胞壁富含肽聚糖，不易被脱色剂渗透，而G-菌的细胞壁中含有较多的脂质，使得脱色剂能够更好地进入细胞内部。
此外，革兰氏染色还涉及到结晶紫和碘液等染料的结合和吸附性质的不同，进一步增强了G+菌和G-菌在染色过程中的颜色差异。
总之，革兰氏染色的机理主要基于细菌细胞壁的结构和化学成分差异，通过脱色和复染等步骤，将细菌分为G+和G-两大类，为后续的细菌鉴定和分类提供重要依据。
革兰氏染色法实验报告共5篇
革兰氏染色法实验报告篇一革兰氏染色法是一种常用的细菌染色方法，可用于鉴定细菌的类型和形态。
以下是一份革兰氏染色法的实验报告范例，包含实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果和结论等部分。
实验目的： 1.了解革兰氏染色法的原理和步骤； 2.掌握细菌的革兰氏染色方法； 3.观察细菌在革兰氏染色中的反应，并进行鉴定。
实验原理：革兰氏染色法是根据细菌细胞壁的特性而设计的一种染色方法。
细菌细胞在染色过程中会根据细胞壁的结构不同，分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
革兰氏阳性菌具有较厚的细胞壁，含有较多的革兰氏染色阳性物质（如染色时用的紫檀碱），因此在染色后会呈现紫色。
革兰氏阴性菌细胞壁较薄，不含有革兰氏染色阳性物质，染色时使用的碘酒（革兰氏碘化酒）能使它产生复合革兰氏染色阳性物质（碘靛紫），再用酒精脱色，再用洋红着色，使其产生颜色变化，最终呈现红色。
实验步骤： 1.准备好菌液：选取需检测的菌株，用无菌盘收集少量菌落，用少量生理盐水悬浮，制备菌液。
2.片玻璃片：在清洁无菌玻璃片上滴上一滴菌液。
3.烘干：将玻璃片架起，自然风干。
4.固定：将玻璃片的细菌涂片在火焰上迅速烘烤，使其牢固地附着在玻璃片上。
5.染色：将烘烤后的玻璃片放入紫檀液中，染色1分钟。
6.脱色：用酒精脱色10-30秒。
7.洗净：用自来水清洗片上的超染色剂。
8.再染：将片浸入碘靛紫溶液中，染色1-2分钟。
9.脱色：用酒精脱色10-30秒。
10.洗净：用自来水清洗片上的超染色剂。
11.观察：利用显微镜观察和比较细菌的形态和染色情况。
12.记录：记录细菌的形态、颜色等观察结果。
实验结果：通过观察细菌的形态和颜色，我们可以得出以下结论：•革兰氏阳性菌在染色后呈现紫色；•革兰氏阴性菌在染色后呈现红色。
结论：革兰氏染色法是一种常用的细菌染色方法，通过染色反应可以初步鉴定细菌的类型。
本次实验中，我们成功地使用革兰氏染色法对细菌进行了染色和鉴定，观察到了不同细菌的染色结果，并且将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。
简述革兰染色的方法,结果和意义
简述革兰染色的方法,结果和意义革兰染色的方法：取适量的细胞悬液，用酒精灯火焰高温加热。
当细胞处于离体状态时，会出现溶解度降低而溶解于酒精的情况，这是因为细胞内原生质中的水分减少，渗透压升高，使细胞发生质壁分离。
（ 1）加热的方法要均匀、缓慢。
因为只有不断搅拌，使染液与细胞充分接触，并受到高温作用才能获得正确的结果。
（ 2）此方法是用于对植物细胞进行细胞组织分离的。
其实质是通过玻片和盖玻片之间形成的气液界面来观察样品中所含的细胞成分，从而了解它们的形态结构。
结果：在电镜下观察：根据微生物大小来判断细菌类别及种，根据细胞壁有无和厚薄，细胞核有无及位置，以此来鉴别细菌。
意义：证明了根据细胞形态结构可以区别细菌种类的道理。
同时也揭示了一个道理，即一切微生物都具有与其形态相适应的结构。
（ 1）取数滴菌液，滴在载玻片的水滴中。
若细胞核较小，且在细胞中央，说明该菌是单细胞菌落；若细胞核较大且居于细胞边缘，说明该菌是多细胞菌落；若细胞核居中，说明该菌是菌丝状菌落。
（ 2）若菌落呈云雾状，则说明该菌是放线菌；若菌落呈绒毛状，则说明该菌是毛霉；若菌落呈结晶状，则说明该菌是曲霉。
（ 3）由于某些环境条件的限制或人为的挑选，所得到的菌落形态往往不同于实际的形态。
本实验也证明了这个观点，如对比草莓上的草莓生长点细胞的结构和艾氏腹水瘤病患者的癌细胞结构就有许多不同。
还有大肠杆菌和枯草杆菌的抗药性等问题，在以后的学习中我们还会涉及。
革兰染色不仅在鉴定细菌方面有重要价值，而且在工业、医学和科学研究等方面也有广泛的应用。
1．分离和培养细菌有两种基本方法：从土壤或其他培养基中挑选单个的细菌；从液体培养基中分离和鉴定细菌。
2．检查菌种的纯度(1)目测法：把待检的细菌接种到培养基上，若产生的菌落周围无杂菌生长，而且菌落表面光滑、湿润、粘稠，这说明所检查的细菌纯度高；反之，所检查的细菌纯度低。
(2)化学法：将所需要的细菌挑选出来，分别接种到固体或半固体的营养培养基中，在37 ℃培养48 h，若发现有的细菌繁殖了，而有的没有，那么，用肉眼就可以看出哪种细菌繁殖了。
(新编)革兰染色法
（新编）革兰染色法革兰染色法是一种常用的细菌分类方法，根据细菌的细胞壁成分和结构差异，将细菌分为革兰阳性菌（G+）和革兰阴性菌（G-）两大类。
革兰染色法的原理是利用细菌细胞壁上的特异性染料——革兰染料，将细菌分为两类。
革兰阳性菌的细胞壁主要由肽聚糖和磷壁酸组成，而革兰阴性菌的细胞壁则主要由外膜和脂多糖组成。
革兰染色法包括初染、媒染、脱色和复染四个步骤。
初染时，用结晶紫溶液对细菌进行染色，结晶紫能够与细菌的细胞壁结合，形成紫色的着色层。
媒染时，用碘溶液与结晶紫结合形成复合物，进一步增强着色层的颜色。
脱色时，用酒精或丙酮溶液处理细菌，去除染料和结晶紫，但不同与革兰阳性菌和革兰阴性菌的细胞壁结构和组成不同，酒精或丙酮溶液对革兰阳性菌的细胞壁影响较小，不能将其脱色，而革兰阴性菌的细胞壁则易被脱色。
最后进行复染，用稀释后的番红溶液将未被脱色的革兰阳性菌染成红色，而革兰阴性菌则呈现红色背景。
革兰染色法的具体操作步骤如下：1.初染：用结晶紫溶液滴加到涂片上，染色3-5分钟，然后用自来水冲洗。
结晶紫能够与细菌的细胞壁结合，形成紫色的着色层。
2.媒染：用碘溶液与结晶紫结合形成复合物，加强着色层的颜色。
媒染时需要注意控制媒染时间，时间过短会使着色层颜色过浅，时间过长则会使着色层颜色过深。
3.脱色：用酒精或丙酮溶液处理涂片，去除染料和结晶紫。
革兰阳性菌的细胞壁较厚，酒精或丙酮不易渗透进去将其脱色，因此革兰阳性菌保持紫色，而革兰阴性菌的细胞壁较薄，酒精或丙酮容易渗透进去将其脱色，呈现红色背景。
4.复染：用稀释后的番红溶液将未被脱色的革兰阳性菌染成红色，而革兰阴性菌则呈现红色背景。
复染时需要控制时间，避免出现过度染色或染色不足的情况。
革兰染色法具有较高的准确性和重复性，是细菌分类学中常用的方法之一。
通过革兰染色法可以将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌两大类，对于临床治疗、药物选择、食品工业等领域具有重要意义。
例如在医学领域中，医生可以根据感染菌的革兰染色结果来选择合适的抗生素；在食品工业中，革兰染色法可用于检测食品中的细菌种类和数量。
革兰氏染色名词解释
革兰氏染色名词解释革兰氏染色（Gram staining）是一种常用的细菌鉴定和分类方法，由丹麦细菌学家克里斯蒂安·格拉默（Christian Gram）于1884年首次提出，并被广泛应用于临床微生物学和实验室研究中。
革兰氏染色的原理是通过对细菌细胞壁的染色特性进行区分。
细菌的细胞壁在结构上分为两种类型：革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
革兰氏阳性菌具有厚实的胞壁，其细胞壁主要由多聚肽和多糖组成，对革兰氏染色染料结构相对稳定。
而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄，含有一个内膜和一个较薄的胞壁，对革兰氏染色染料结构不稳定，容易被清洗脱色。
革兰氏染色方法通常由紫晶染液（crystal violet)、碘液（iodine）、酒精脱色液（ethyl alcohol）和洗净液（wash buffer）组成。
以下是革兰氏染色的步骤：1. 取一块无菌玻璃片，用手套或钳子夹住，然后在玻璃片上滴加一滴样本（可以是细菌培养物或分离纯培养的菌液），将细菌均匀涂抹于玻璃片上形成细菌涂片。
2. 将预先烘干的细菌涂片放置在静止的温和热环境中，使菌液完全固定在玻璃片上。
3. 将预热的紫晶染液倒在细菌涂片上，让染液覆盖整个细菌涂片，静置片上1分钟。
4. 倒掉多余的紫晶染液，用洗净液将染液冲干净。
5. 加一倍稀释的碘液在细菌涂片上，静置片上1分钟。
6. 倒掉多余的碘液，用洗净液将碘液冲洗干净。
7. 用酒精脱色液滴在细菌涂片上，进行制片人定时（通常为15-30秒），直到底色变得非常浅。
8. 倒掉酒精脱色液，用洗净液将细菌涂片冲干净。
9. 加入红粉溶液，让染料覆盖细菌涂片，静置片上1分钟。
10. 倒掉多余的红粉溶液，用洗净液将细菌涂片洗净，待片子晾干。
观察结果时，革兰氏阳性菌会呈现出紫色或蓝色，因为其细胞壁能够保留紫晶染料和碘复合物的结晶。
而革兰氏阴性菌则会呈现出红色或粉红色，因为其细胞壁无法保留紫晶染料和碘复合物的结晶，在酒精脱色过程中已经被去除。
细菌的革兰染色法
80%
环境科学的应用
革兰染色法也可用于环境科学中 ，对水样、土壤等环境样品中的 细菌进行分类和鉴定。
05
革兰染色法在医学领域的应用
临床标本中细菌的分离与鉴定
细菌种类的鉴别
革兰染色法可用于区分革兰阳 性菌和革兰阴性菌，帮助医生 快速确定感染病原体的种类。
细菌数量的评估
通过观察革兰染色后细菌的形 态和数量，医生可以评估感染 的程度和病情的严重程度。
观察
将染色后的涂片放在显微镜下进 行观察。革兰氏阳性菌呈现紫色 ，而革兰氏阴性菌呈现红色。
记录
记录观察到的细菌形态、颜色以 及分布情况等信息，以便后续分 析和研究。
03
革兰染色法实验材料与方法
实验材料准备
01
02
细菌样品
待检测的细菌样品，可以是纯 培养物或混合培养物。
革兰染色液
包括结晶紫染液、碘液、 95%乙醇和番红染液。
耐药性的监测
革兰染色法可用于监测细菌耐药性 的变化，及时发现并控制耐药菌株 的传播。
医学研究中革兰染色法的意义
细菌分类学的研究
新药研发中的应用
革兰染色法是细菌分类学的基础之一， 通过对细菌进行革兰染色和形态观察， 可以对细菌进行分类和鉴定。
革兰染色法可用于新药研发过程中的 药物筛选和药效评价，为新药的开发 提供实验依据。
革兰染色法发展历程
革兰染色法最初由丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰于 1884年发明，当时他使用了一种简单的染色方法将 细菌分为紫色和红色两大类。
后来经过不断改进和完善，革兰染色法逐渐成为一 种常用的细菌分类和鉴别方法，并在医学、生物学 等领域得到广泛应用。
随着科学技术的不断发展，革兰染色法也在不断改 进和完善。例如，近年来出现了一些自动化革兰染 色仪器和数字化图像处理技术，使得革兰染色法更 加准确、快速和便捷。
革兰染色名词解释
革兰染色名词解释革兰染色是一种细菌分类和鉴定方法，在细菌学和临床医学中得到广泛的应用。
它是以细胞壁组成和结构差异为基础，将细菌分为两大类：革兰氏正染菌和革兰氏阴染菌。
革兰染色不仅可以用于快速鉴别细菌种类，而且还能推断细菌的结构和生长特性，为细菌分类提供了理论和实践基础。
第一、革兰染色的原理革兰染色的依据是细胞壁在外观和组成上的差异，通过不同的染色方式，使细胞壁的不同特性显现出来。
革兰染色主要使用了两种基本染料，即染成紫色的靛紫和染成红色的碘高锰酸钾。
细菌在染色时，先被染成紫色，然后被浸泡在碘高锰酸钾溶液中，去除多余的染料，最后再进行脱色和染色，阴性菌会被染成粉红色，而阳性菌保持为紫色。
第二、革兰染色结果的解释细菌革兰染色的结果分为两大类：革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌。
革兰氏阴性菌因为细胞壁薄且不含多量壁多糖，无法抵御碘高锰酸钾的脱色作用，因此会被染成红色或粉红色。
革兰氏阳性菌由于细胞壁厚且含有多量的壁多糖和多肽，更加耐脱色，因此仍然保持染色紫色。
除了这两种基本结果，还有一些细菌表现出革兰染色不典型，如革兰氏变染菌和革兰氏不定菌，这些菌对染色的解释需要更多的实验和观察数据。
第三、革兰染色的应用革兰染色是细菌鉴定和分类常用的方法。
通过革兰染色的结果，可以初步判断细菌属于哪一类，从而推断它的感染特性、药敏性和生长特点。
革兰氏阴性菌常常与医院感染和疾病有强相关性，例如大肠杆菌、克雷伯杆菌和拟杆菌等；革兰氏阳性菌则更多表现出各种产生毒素和分泌酶的能力，例如链球菌、葡萄球菌和炭疽菌等。
此外，由于革兰染色相对简单易行，可以直接观察到细胞形态和细胞壁特征，因此被广泛应用于临床检测、食品卫生和环境卫生等领域。
第四、革兰染色的局限性革兰染色虽然具有很高的可靠性和快速性，但它并不是百分百准确可靠的。
有些细菌由于结构或者环境等原因，可能表现出革兰染色不典型的特点，使得它们和其他细菌的区分变得复杂和模糊。
例如，钩端螺旋体即不属于革兰氏正染菌也不属于阴染菌，而是一种具有特殊性质的菌类。
简述革兰氏染色法
简述革兰氏染色法革兰氏染色法是由19世纪德国医学家威廉革兰发展的一种医学染色方法，是一种利用化学特性显示细胞中各种结构的常用技术。
1882年，威廉革兰开创了这种技术，被公认为医学染色的先驱。
革兰氏染色法也称革兰染色法，简称革兰氏染色。
革兰氏染色是一种化学反应技术，通过配制特定的染料与植物、细菌细胞或血液中的其他活体物质发生反应，其反应结果是使得特定的染料在物体表面形成明亮的染色，从而可以简单准确地观察、分类和研究植物、细菌、血液、病毒等活体结构的特性。
革兰氏染色的原理是，活体的细胞结构具有固有的电荷，当染料与活体细胞发生反应时，染料就会因为电荷的作用而在活体细胞表面结合，产生染色。
根据染料结合细胞表面的类型和强度，可以得出不同的深浅程度和颜色。
革兰氏染色法的应用非常广泛，它不仅可以用来研究细胞的结构，而且还可以用于检测血液中的疾病，如感染性疾病、肿瘤等，还可以检测细菌的抗药性，以及病毒、血液中抗原和抗体的存在。
此外，由于革兰氏染色法反应和结果都很明显，也常常用于活体组织学研究，如病理检查、局部病原学研究和病理病理学研究。
在革兰氏染色法中，染料是细胞杂质检测的关键因素，它们必须是安全、可以长期存储，具有良好的抗氧化性和可溶性，能够在活体组织中稳定存在，同时能够与活体细胞中的其他物质发生反应，以达到染色的效果。
常用的染料包括绿唑酮（Gram）、南方染料（Safranin）、血蛋白（Haematoxylin）和紫色素（Purple）等。
革兰氏染色法在19世纪被发明出来，是一种广泛应用于医学检测、医学研究和病理学研究的重要技术。
它有助于研究细胞结构特性，进一步提高活性物质的筛选，提高疾病的检测效率，也有助于解决很多医疗难题，为现代医学技术提供了重要的帮助。
革兰氏染色法
Ⅱ、革兰氏染色法一、实验原理革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C．Gram所创立的。
革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类，是细菌学上最常用的鉴别性染色法。
革兰氏染色法的主要步骤是先用结晶紫进行初染；再加媒染剂--碘液，以增加染料与细胞间的亲和力，使结晶紫和碘在细胞膜上形成分子量较大的复合物；然后用脱色剂(乙醇或丙酮)脱色；最后用蕃红复染。
凡细菌不被脱色而保留初染剂的颜色(紫色)者为革兰氏阳性菌，如被脱色后又染上复染剂的颜色(红色)者为革兰氏阴性菌。
该染色法所以能将细菌分为G+菌和G-菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。
G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。
G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色。
二、实验器材1、菌种牛肉膏琼脂斜面28℃培养24h的大肠杆菌(Escherichia coli)斜面菌种，牛肉膏琼脂斜面28℃培养16h的枯草杆菌(Bacillussubtilis)斜面菌种；2、仪器显微镜；3、材料载玻片，香柏油，二甲苯，擦镜纸，吸水纸，染色缸等。
4、染料草酸铵结晶紫染色液，路哥氏(Lugol)碘液，95%乙醇，0.5%番红染色液；三、操作步骤1、涂片在一张载玻片上加两滴蒸馏水后，分别涂布枯草芽孢杆菌和大肠杆菌(注意涂片切不可过于浓厚)。
2、固定将制成的涂片干燥固定，固定时通过火焰1-2次即可，不可过热，以载玻片不烫手为宜。
3、染色⑴初染将玻片置于玻片搁架上，加草酸铵结晶紫染色液(加量以盖满菌膜为度)，染色1-2min。
倾去染色液，用自来水小心地冲洗。
⑵媒染滴加(Lugol)碘液，染1-2min，水洗。
革兰氏染色
实验步骤（油镜的使用）
1. 准备：将所用低倍物镜拉下，上抬载物台使玻片 靠近物镜最近
2. 聚焦：先用粗调螺旋，往下调节载物台，使玻片 缓慢远离物镜，找到物象，再用细调螺旋，聚焦
3. 先用低倍镜，并将所要观察部分移至视野的中央。 4. 移开低倍镜，换用高倍镜（20X；40X）进一步聚
焦，并把所要观察部分移至视野中央。 5. 移开高倍镜，并将油镜转玻片一侧备用。 6. 在盖玻片上滴一滴香柏油，然后将油镜转正对准
细菌细胞壁结构
革兰氏阴性
革兰氏阳性
染色结果
G＋菌
G－菌
•仔细观察（染色性，形态，排列），绘图
❖ 革兰氏染色法由丹麦医生Hans Christian Gram (1853-1938) 于1884年创立，是细菌 学中重要的鉴别染色法。
❖ 通过此法染色，可将细菌鉴别为革兰阳性 菌（G+）和革兰阴性菌（G-）两大类。
法国生物梅里埃全自动革兰氏染色系统
PREVI™ Color Gram
•操作简便，只需手工加载涂片 •5分钟内即可得到标准化结果 •显著提高结果重复性、可靠性 •操作完成后涂片已干燥，可直接镜检 •减少接触感染性标本，提高生物安全性 •高通量设计，每小时可处理180/450张涂片
革兰氏染色
PREVI™ Color Gram
❖ G＋菌胞壁结构致密，肽聚糖层厚，脂质含量少， 乙醇不易透入。同时乙醇使细胞壁脱水形成一道 屏障，阻止结晶紫—碘复合物从胞内渗出，故细 菌仍保留初染时的紫色。
❖ G－菌胞壁结构较为疏松，肽聚糖层很薄，外膜含 大量脂质，易被乙醇溶解，致使细胞壁通透性变 大，使结晶紫--碘复合物被乙醇பைடு நூலகம்解析出而脱色， 故细菌呈复染时的红色。
革兰氏染色法
细菌学中鉴别染色法
01 染色原理
03 常见种类
目录
02 操作流程 04 主要作用
革兰氏染色法，是指细菌学中广泛使用的一种重要的鉴别染色法，属于复染法。这种染色法是由丹麦医生革 兰于1884年所发明，最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷伯肺炎菌。革兰染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等 四个步骤。未经染色的细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难区别。经染色后，阳性菌呈 紫色，阴性菌呈红色，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，从而用以分类鉴定。染色原理：通 过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，再用95%乙醇脱色。Fra bibliotek常见种类
常见的革兰氏阳性菌有葡萄球菌（Staphylococcus）、链球菌（Streptococcus）、肺炎双球菌、炭疽杆菌、 白喉杆菌、破伤风杆菌等。
常见的革兰氏阴性菌有痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、百日咳杆菌及霍乱弧菌等及 脑膜炎双球菌等。
主要作用
革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌，把众多的细菌分为两大类，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
在治疗上，大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感（结核杆菌对青霉素不敏感）：大多数化脓性球菌都属于革 兰氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，可以选择青霉素族，头孢曲松钠等。
革兰氏阴性菌，大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们产生内毒素，靠内毒素使人致病。而革兰氏阴性菌 则对青霉素不敏感（但奈瑟氏菌中的流行性脑膜炎双球菌和淋病双球菌对青霉素敏感），可以选择氟喹诺酮类药 物如诺氟沙星，左氧氟沙星等，也可以选择大环内酯类比如克拉霉素、罗红霉素等。所以首先区分病原菌是革兰 氏阳性菌还是阴性菌，在选择抗生素方面意义重大。
革兰氏染色法的过程及原理
革兰氏染色法的过程及原理
细菌培养：首先，把细菌样本放入一种适合细菌生长的培养基中。
细
菌可以在培养基中繁殖，并在培养基表面形成一个厚厚的菌膜。
︰等待培养、灭菌：然后等待培养。
一般培养4-24小时，直到细菌
厚度达到均匀的状态。
之后，用70％的乙醇或氯仿灭菌。
分离细菌：之后，用称重的方法将培养基向玻片上移动，或者用分离
到新的玻片上，以便后期染色分析。
染色：最后，细菌玻片进行染色。
革兰氏染色分为单色染色和复合染色。
单色染色使用单一物质染色，复合染色使用一种物质的多种染色剂来
染色细菌。
革兰氏染色的原理主要是应用染色剂对细菌的形态特征，如质壁厚度，膜厚度，细菌颗粒形状，胞素和细菌颗粒大小，以及细菌的生理特性，如
环境的Tolerance，抗生素的Tolerance，等给予染色。
染色剂会在细菌
的膜和质壁上积聚，从而形成不同的染色环境，形成细菌的不同形态及染
色特征。
常用细菌染色方法
常用细菌染色方法常用的细菌染色方法主要包括革兰氏染色法、培养基染色法、酸碱快速染色法和特殊染色法等。
下面将对这些方法进行详细阐述。
1. 革兰氏染色法：革兰氏染色法是最常用的细菌染色方法之一。
革兰氏染色分为四个步骤：固定、染色、洗涤和显色。
首先，用热炙或炉火将菌液固定在载片上。
然后，将菌液投入到革兰染色液中，革兰染色液包括紫罗兰晶体染液和碘溶液。
之后，用乙醇洗涤，去除多余的染色液。
最后，用苏木精染液进行显色，细菌会变成紫色，而波尔多红会成为背景颜色。
通过这种染色方法，我们可以根据细菌的染色结果将其分为革兰阳性和革兰阴性。
革兰阳性菌会显色为紫色，革兰阴性菌则在淡粉红色或红色。
2. 培养基染色法：培养基染色法是一种将细菌培养在含有染料的培养基上的染色方法。
这种方法的优点是可以通过直接观察培养基的颜色来判断细菌的类型，而不需要进行染色操作。
通常会根据菌落形状、大小和颜色等特征来判断不同菌种。
例如，大肠杆菌产生灰绿色的金属光泽菌落，金黄色葡萄球菌产生金黄色菌落等。
这种方法简便易行，通常用于常规实验室工作中。
3. 酸碱快速染色法：酸碱快速染色法又称为朗斯快速染色法，是一种通过酸碱反应来进行细菌分类的染色方法。
根据细菌细胞壁的化学成分，结合酸碱染色原理，可以将细菌分为两类，即酸染菌和碱染菌。
酸染菌在酸性条件下显色，呈现出红色或粉红色，碱染菌在碱性条件下显色，呈现出蓝色、紫色或黑色。
这种方法被广泛应用于快速分类细菌，特别是在細菌在临床应用方面有重要意义。
4. 特殊染色法：特殊染色法包括Ziehl-Neelsen染色、抗酸杆菌染色、吉姆萨染色、印度墨染色等。
这些染色方法主要用于检测一些特殊类型的细菌，如结核杆菌、抗酸杆菌等。
其中，Ziehl-Neelsen染色是一种用来检测酸快杆菌的染色方法，通过使用染色剂将细菌显色为红色，而其他细菌则显色为蓝色。
这种方法可以帮助医生诊断和治疗结核病。
细菌染色方法的选择取决于实验目的和需要。
简述革兰染色法的步骤
简述革兰染色法的步骤
1、涂片：将待测细菌培养物制成涂片，将其均匀地涂在洁净的载
玻片上，然后自然晾干或用加热等方法烘干。
2、结晶紫染色：将涂片用草酸铵结晶紫染色液染色，染色时间根
据涂片厚度和情况而定，一般在1-3分钟之间。
3、冲洗：将涂片用自来水或蒸馏水冲洗，直到冲洗液不再有紫色
残留为止。
4、碘液媒染：将涂片用碘液媒染，作用是增强细菌和结晶紫之间
的亲和力，使染色更为稳定和明显。
5、冲洗：再次用自来水或蒸馏水冲洗，直到冲洗液不再有碘残留
为止。
6、脱色：将涂片用乙醇脱色，作用是将已经染色的细菌中的结晶
紫和碘解离出来，从而使细菌呈现出不同的颜色。
7、冲洗：最后用自来水或蒸馏水冲洗，直到冲洗液不再有乙醇残
留为止。
8、观察：将涂片晾干，用显微镜观察细菌的颜色变化，根据颜色
变化判断细菌革兰氏阴性和阳性。
革兰氏染色
革兰氏染色编辑革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师Gram创立。
未经染色之细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难观察。
染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。
革兰氏染色属复染法。
中文名革兰氏染色外文名Gram stain所属学科细菌学发明时间1884年发明人汉斯·克里斯蒂安·革兰结果呈紫色，呈红色是否有误差是目录1. 1方法简介2. 2相关3. 3实验方法4. ▪步骤1. ▪原理2. ▪染色结果3. 4临床意义4. 5特性1. 6鉴定原理2. 7实验流程3. 8可能误差方法简介编辑革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，这种染色法是由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰（Hans Christian Gram，1853年－1938年）于1884年所发明，最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系。
未经染色之细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难观察阳性紫色阴性红色。
染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。
相关编辑致病菌与抗菌药选择革兰氏阳性菌：葡萄球菌属（主要是金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等）、链球菌属（肺炎链球菌、草绿色链球菌、肠球菌等）、白喉杆菌、炭疽杆菌、破伤风杆菌、蜡样芽孢杆菌等，其中，金黄色葡萄球菌、肠球菌等为临床重要的病原菌革兰氏阳性菌通常对青霉素类、第一（或第二）代头孢菌素、万古霉素、克林霉素等高度敏感，但是因为抗生素的滥用，MRSA/MRSE、VRSA/VISA、PISP/PRSP、VRE等多重耐药菌已经严重威胁着人类的生命，这些细菌感染时，可以考虑使用万古霉素、共杀素（奎奴普丁/达福普丁）、利奈唑胺、达托霉素、泰利霉素、夫西地酸（建议与耐酶的青霉素类或利福平联用）等。
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革兰染色
革兰染色原理
通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。
革兰染色步骤及结果
1. 涂片：首先在载玻片上滴一小滴蒸馏水，用灼烧过的接种针挑取少量细菌，置载玻片的水滴中与水混合并涂抹开，注意涂抹要均匀平坦，涂抹后直径约为1 cm的薄层。
2.固定：将载玻片在火焰上方快速来回通过一两次，以载玻片的加热面接触手背皮肤，不觉过烫为佳，待冷却后再在火焰上方来回通过一两次，再冷却，这样重复操作直到薄层干了为止。
3.染色：在制好的片上滴一滴草酸铵结晶紫，染色1 min后用水洗，注意水流不要直接对准薄层。
4.媒染：加碘液一滴，染1 min后用水冲洗，用过滤纸吸干。
5.脱色：用95%乙醇脱色，一般脱色时间大概为30 s。
这一步是革兰氏染色的关键，必须严格掌握好，如果脱色时间过长则会把阳性菌误认为阴性菌；如果脱色不够则容易被误认为是阳性菌。
水洗后用过滤纸吸干。
6.复染：滴加番红染色液一滴，染色10～30 s后，用自来水冲洗。
7.观察：干燥后，用油镜镜检观察，染成紫色的是革兰阳性菌，染成红色的是革兰阴性菌。
革兰染色的意义
1.鉴别细菌:用此染色法可将所有细菌分为两大类，便于初步识别细菌，缩小检查范围，并确定进一步的鉴定方法。
2.选择药物:革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌在细胞壁等结构上有很大差别,因而对抗菌素等药物的敏感性不同，如大多数革兰阳性菌对青霉素、红霉素、头孢菌素等敏感；而大多数革兰阴性菌对链霉素、氯霉素、庆大霉素等敏感。
可供临床实践中选用抗菌药物的参考.
3.与致病性的关系:大多数革兰氏阳性菌的致病物质主要为外毒素;而大多数革兰氏阴性菌的致病物质主要为内毒素.
革兰染色的影响因素
1. 涂片太厚在涂片时细菌挑的太多，没法分开，在脱色时就不能将第一步染上的结晶紫的颜色脱去，可能会使革兰阴性菌也出现紫色，误认为革兰阳性菌。
2.脱色时间阳性菌透性小，不易被脱色，阴性菌透性大，易脱色；但这是在固定的时间条件下的结果，如果延长脱色时间，也会使脱色剂渗透进阳性菌的细胞壁中，使染上的结晶紫脱去颜色，最后染上复红的颜色，变成革兰阴性菌。
而脱色时间太短的话又会使阴性菌染上的结晶紫不能完全脱色，出现紫色，误认为革兰阳性菌。
3. 固定方法固定不仅能杀死细菌，改变细菌对染料的通透性，还能使细菌吸附在玻片上，保持原有的形态结构。
固定方法是将干燥后的细菌涂片以中等速度通过火焰三次，以玻片触及手背皮肤热而不烫为宜。
如果玻片在火焰上烤的太久、温度过高，改变了细菌原有的通透性，会使细菌的染色性发生变化。
影响了染色的结果。
4. 细菌培养时间细菌的典型形态、染色性是在对数生长期，取这时的细菌做革兰染色可以反应细菌的真实的染色性。
如果细菌培养时间太长，变成了老龄菌，
染色性就会发生变化，可能会使革兰阳性菌染成革兰阴性菌。
5. 碘液碘液作为媒染剂能增加染料与被染物的亲和力。
如果碘液放置时间太长，或经日光照射失效，失去媒染剂的作用，就可能使结晶紫与细菌结合的不牢固，容易被脱色，使革兰阳性菌染成革兰阴性菌。