南瓜多糖提取方法

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南瓜多糖提取方法

摘要:本文介绍了南瓜多糖的提取方法,如水提醇沉法、碱液提取法、超声波提取法、微波辅助提取法、酶提取法等等。

关键词:南瓜;多糖;多糖提取

南瓜又称番瓜、倭瓜、金瓜等,系葫芦科南瓜属一年生蔓性草本植物,是重要药食两用植物之一。南瓜营养丰富,不仅含有甘露醇,多种氨基酸,维生素C、E 及微量元素Fe、Se、Zn、Mn 等,还含有大量生物碱、南瓜子碱、果胶等活性成分。

南瓜多糖呈棕色粉末,是南瓜活性成分中最重要、最具潜力功能因子之一。不仅具有复杂、多方面生物活性,作为广谱免疫促进剂,且具有免疫调节,抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂、促进核酸与蛋白质生物合成,控制细胞分裂、分化,调节细胞生长、衰老等作用。因此,对南瓜多糖分离提取,日益引起人们重视。

1 提取方法的研究现状

1.1 水提醇沉法

水提醇沉法是通过在天然产物的浓缩的水提取液中加入数倍量高浓度乙醇,利用南瓜多糖溶于水而不溶于高浓度的乙醇的性质,使其生成沉淀而与其他水溶性的杂质分离的方法。

水提醇沉法提取南瓜多糖的工艺,工艺流程如下:市购南瓜洗净、去皮切丁并配水榨汁→加热浸提→过滤→提取液→浓缩→乙醇沉淀→南瓜粗多糖。通过四因素三水平正交试验法优选,研究发现南瓜多糖提取的最优条件为:南瓜丁的质量与水的体积比为1(g):5(ml),90℃条件下浸提2h,浓缩水浸提液与乙醇的体积比为1:4,南瓜粗多糖提取率为1.5%左右,纯度可达到21.02%。

1.2 碱液提取法

由于D- 葡萄糖醛酸的存在,南瓜多糖为酸性多糖,故可采用稀碱液如氢氧化钠、氢氧化钾等来提取。由于稀碱液有助于解除植物细胞壁分子间的化学和物理作用,故可增加南瓜多糖的提取率。

利用氢氧化钠溶液提取南瓜多糖的工艺,实验表明:随着碱液浓度的升高,多糖的提取率增加,当达到0.3mol/L 之后,碱液浓度的升高对提取率无显著影

响,而且由于碱性条件下,其中的还原糖会分解成分子量更小的色素分子,从而使的产品的色泽加深。经过正交实验,确定了碱提法的最佳生产工艺:80℃的条件下提取,提取时间为2h,综合考虑时间对提取率的影响和生产周期因素,可以缩短为1h,液固比为5:1,氢氧化钠的浓度为0.4mol/L。

1.3 超声波提取法

超声波是频率大于20KHz 以上的声波,具有频率高、波长短、功率大、穿透力强等特点。它在液体介质中传播时,能产生空化作用及一系列特殊效应具有搅拌、分散成雾、凝聚、冲击破碎和加热等作用。超声波提取是利用超声波具有的空化效应、机械效应及热效应,通过增大介质分子的运动速度,增强介质的穿透力以提取天然产物有效成分的方法。

利用超声波提取南瓜多糖的方法。赵二劳等[10]使用KQ-100DB 型数控超声波清洗器(超声波频率为40kHz),研究了预浸时间、超声功率、提取温度、时间以及占空比对南瓜多糖提取率的影响水平:以水为提取溶剂,经过10min 预浸后,在60℃的提取温度下,用功率为80W、占空比为1 的超声波作用20min,样品中南瓜多糖的提取率最高可达4.26%。

1.4 微波辅助提取法

微波辅助提取指在天然产物有效成分提取过程中加入微波场,利用微波场的特点来强化有效成分浸出的新型提取技术。微波可导致天然产物细胞内的极性物质尤其是水分子吸收微波能产生大量的热量,胞内温度迅速上升,从而使细胞内部的压力超过细胞壁膨胀所能承受的能力,结果细胞破裂,有效成分自由流出并溶解于提取介质中,通过进一步的过滤和分离,即可获得所需的提取物。

1.5 复合酶提取法

酶提取法的原理是利用酶反应的高度专一性,将天然产物细胞壁及细胞间质中的纤维素、半纤维素等大分子物质水解或降解,破坏细胞壁,加快有效成分溶出细胞的速度,从而提高有效成分的提取率。采用酶法提取天然产物有效成分,反应条件温和,是一种较为先进有效的提取方法。

使用纤维素酶(1%)、果胶酶(1.5%)和木瓜蛋白酶(1%)组成的复合酶,在pH 为5.5、温度为40℃的条件下提取30min,南瓜多糖的粗产率可高达28.8%左右。

利用微波协同酶法来提取南瓜多糖,先利用1.0%纤维素酶和1.5%果胶酶组成的复合酶,在磷酸氢二钠- 柠檬酸组成的pH=5.5 的缓冲溶液中,于40℃水浴中

振荡30min,然后将酶解后的多糖提取液用功率为500W 的微波,在料液比为1g:30 mL、温度为60℃条件下微波加热3min,可达到11.9%的粗提取率。

2.展望

我国南瓜资源丰富,价廉易得,从南瓜中提取具有降糖等生物活性的南瓜多糖具有广阔的应用前景。就提取工艺来说,水提醇沉法耗时长,且提取率偏低,碱提法虽然在一定程度上提高了提取率,但使得产品质量下降,超声波法和微波辅助法耗时短、提取率亦得到了大幅度的提高,但是由于条件限制,很难用于工业生产。复合酶提取法由于其高度专一性、条件温和、提取时间短、提取率高等已引起关注,必将成为南瓜多糖开发的一个重要手段,具有较大的应用潜力。

总的来说,目前最基础的工作便是要改进提取工艺,找到一条简单、价廉、提取率和纯度高的工艺流程。

参考文献:

[1]中国农业百科全书编辑部. 中国农业百科全书(蔬菜卷)[M].北京:农业出版社,1990. 713.

[2]江璐,何计国,范慧红. 南瓜多糖的研究进展[J]. 食品与药品,2007,9(8):51― 53.

[3]邹宇晓,肖更生. 南瓜的功能性成分及保健食品开发与研究[J].果菜与健康,2004,(4):47― 48.

[4]赵二劳,李满秀,梁兴红. 超声提取南瓜多糖的研究[J]. 声学技术,2008,27(1):58― 60.

[5]李军生,何仁,伍时华,等. 超声波处理对提高南瓜多糖提取率的影响[J]. 农业科技通迅,2003,(9):33.

[6]张拥军,徐晓晖,李昌敏,等. 活性南瓜多糖的提取与分析[J].食品工业科技,2002,23(11):19― 21.

[7]吕炜锋,王兆富,陈捷,等. 南瓜多糖的提取纯化及其复方口服液的降血糖作用研究[J]. 药学进展,2004,28(1):515―518.

[8]孙俊,邓红,仇学农. 南瓜多糖超声提取工艺的优化[J]. 西北农业学报,2007,16(2):192― 202.

[9]王洪伟,徐雅琴.南瓜功能成分研究进展[J].食品与机械,2004(4):55-57.

[10]孔庆胜,蒋滢.南瓜多糖的组成及摩尔比测定[J].中国现代应用药学杂志,2000,17(2):138-140.

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