南瓜多糖提取方法
南瓜多糖的提取加工技术
,
4 南瓜含有淀粉 、 . 多种氨基酸 、 维生素、 纤维素、 经浸提出南瓜多糖后的南瓜残 用最广 , 南瓜作为“ 消渴药” 在祖国医药典籍 中早有记 蛋 白质和微量元素等 , 载。据称健康 的人及 Ⅱ型糖尿病患者食用南瓜粉后 , 渣 , 仍然营养丰富, 有较高的综合利用价值 , 也可直接 7 %~ 0 0 9 %的人血糖降低 。中医认为南瓜味甘性温 , 主治脾 胃虚弱 、 哮喘、 肺痈疮肿等病。 南 瓜多糖 ,系 由南瓜 中提 取 的一类 混合 多糖 , 已 做为优质饲料使用 , 属既有经济价值 , 又无环境污染
技 术 与 市 场
遴 孺 参 谎
雨 磊
技 市
它具有分离效能高 、 常温操作 、 设备简单等特点 , 南瓜为葫芦科植物南瓜的果实 ,南瓜别名北瓜 、 番瓜 、 窝瓜 、 饭瓜、 金瓜、 金冬瓜等 , 南瓜多糖是从南瓜 特别适合于天然生物成分的提取与纯化 , 是一种先进 中浸提出来的活性物质 。南瓜不仅 营养丰富, 而且能 的无污染 的绿 色技术 。
个三通管, 在三通管下各接一个引风机 , 在引风机下 高档、 豪华轿车都配备了座椅加热装置 , 如德国奔驰 、 各接一个软管直通汽车座椅下方并与气垫相连( 气垫 宝马、 奥迪 、 大众 、 保时捷 等 , 虽然加热椅和按摩椅已 内用软簧支撑 , 外用真皮包裹)如需冷气或暖气时只 普遍应用于汽车产品, 。 但冷热兼备的汽车座椅在汽车 须打开空调或暖气 , 气垫就会 自动鼓起 , 不需要时则 和普通座椅一样。
葡萄糖 醛酸 、 鼠李糖 等组成 。文 献报 道南 瓜 多糖 平 均 分子量 为 100 60 ,另 有文 献报 道平 均 分子 量 为 11 . 6×
l 0。
提 取 加 工 技 术
南瓜多糖提取方案
1.南瓜粗多糖的提取:准确称取100g 新鲜南瓜,加入200ml蒸馏水,在榨汁机中搅拌5min,置于烧杯,放入70℃恒温水浴中加热2h,搅拌提取多糖,然后抽虑,滤液80℃真空浓缩至固形物含量约30%,在浓缩液中加入5倍体积95%酒精搅拌均匀,冰箱放置过夜,离心得沉淀物。
沉淀物以水溶解重复醇析1次,然后将沉淀物用无水酒精、丙酮、乙醚洗涤,冷冻干燥得南瓜粗多糖。
2.Sevag法除蛋白质取粗多糖的样品,用蒸馏水溶解,按多糖水溶液体积的1/3-1/4加入氯仿:正丁醇(4:1)混合液剧烈震荡,离心分离30min,除蛋白质,反复操作5次,直至紫外光谱分析在蛋白质280nm和核酸260nm处无特征吸收峰,说明含氮物质已除去。
3. 南瓜多糖降糖组分的分离、纯化(三氯乙酸)将南瓜多糖粗品饱和溶解至0.1 mol/L 氯化钠溶液中,4 ℃放置24 小时,离心,弃去沉淀,滤液中加入40 %三氯乙酸使其终浓度达到10 % ,4 ℃冷藏24小时, 离心, 沉淀用0.1 mol/L NaCl 溶液溶解, 经Sepharose CL24B 柱层析,用0.1 mol/L 氯化钠溶液洗脱、分离,采用硫酸- 蒽酮法跟踪检测,收集含多糖的组分,再用0.1 mol/L NaOH 中和,将洗脱液适当浓缩,透析,用Sephadex A2200 柱层析分离、纯化, 用0.1 mol/L 氯化钠溶液洗脱(洗脱液流速: 0.55 mL/min) ,收集洗脱液,减压浓缩,冷冻干燥得白色粉末状南瓜多糖精品,测定其多糖含量。
4.南瓜多糖精品的纯度鉴定柱层析法将多糖精品溶解在0.05 mol/L磷酸缓冲液(PH=7.0 的PBS 2mol/l 的91.4ml磷酸一氢钠+8.6ml磷酸二氢钠为100mlPBS) 中, 质量浓度为0.3g/dL , 经用0.05 mol/L PBS 平衡后的Sephadex G2200 层析柱洗脱,体积流量为4.8 mL/h ,每管收集洗脱液2 mL ,硫酸- 苯酚法部分收集检测,分析多糖组分。
南瓜多糖中药提取物
南瓜多糖中药提取物南瓜多糖【提取来源】本品为葫芦科植物南瓜Cucurbita moschnta(Duch.ex Lam.) Poiret的果实提取的多糖类成分,总多糖含量≥60%。
【制法】南瓜切片水煮提取,沉淀,精滤,浓缩液加乙醇沉淀,粗多糖透析,脱蛋白,喷雾干燥,最后加入10%水提干粉混合而成。
【性状】本品为浅黄色至棕黄色粉末,可溶于热水。
【鉴别】取本品加热水制成46.0%的溶液作供试液。
取南瓜标准对照药材1.0g加热水40ml,80℃超声提取30分钟,滤液蒸干,残渣加40%甲醇1ml,热溶滤过作对照液。
取上述两液各10μl,分别点于同一硅胶G板,一次点三板。
(1)乙酸乙酯-甲醇-水(8:1:1)展开,喷5%三氯化铝乙醇溶液,紫外灯365nm下检视。
(2)乙酸乙酯-异丙醇(7:13)展开,喷茴香醛硫酸试液,热风吹显。
(3)正丁醇-乙醇-水(5:3:2)展开,喷茴香醛硫酸试液,热风吹显。
以上三板荧光斑点和可见光斑点对应率≥80%。
取本品与南瓜多糖对照品各20mg,分别加入2 mol/L硫酸2ml,110℃水解8小时,BaCO3中和至pH=6~7,离心,上清液浓缩至1ml,各取10μl,分别点于同一硅胶G板,以正丁醇-二甲基吡啶-水(6:3:1)展开,喷茴香醛硫酸试液,热风吹显,斑点对应率≥80%。
【检查】水分:不得过5. 0%(附录Ⅸ H)灰分:不得过3.0%(附录Ⅸ K)重金属:不得过10ppm(附录Ⅸ E)砷盐:不得过2ppm(附录Ⅸ F)糊精:不得过0.5%(附录Ⅳ)【含量测定】照多糖含量测定法(附录Ⅲ)测定。
【功能】降血糖,降血脂,抗肿瘤。
【贮藏】阴凉,干燥,避光。
3种南瓜的多糖提取及旋光检测
the polysaccharide average extraction percentage of the dry pumpkin(2.14%)was higher than the wet one(1.07%). The dry
队(KYTD2013001)
作者简介:陈
萍,女,教授,研究方向为生物科学。E-mail: jxmqiang@
通信作者:贾晓梅,女,副教授,主要从事植物生理和次生代谢的研究。E-mail: bdxiaomeij@
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of pumpkin,we carried out the experimental research on the polysaccharide extraction and the polarimetric determination in
three types of common pumpkin. The polysaccharide was extracted from the dry and the wet pumpkin respectively by ultra⁃
Key words: Pumpkin; Polysacharide;Extraction;Polarimetric determination
南瓜,属葫芦科草本植物,性温味甘,具有润
[1]
条 件 和 旋 光 法 测 定 条 件 的 研 究 ,以 期 建 立 快 速
南瓜多糖提取分离条件的优化
食品科学农村经济与科技2020年第31卷第1期(总第477期)南瓜多糖提取分离条件的优化王志高,罗红宇(浙江海洋大学,浙江 舟山 316022)[摘要] 试验选用锦州当地南瓜为原料,对其中的南瓜多糖进行提取。
以投料比、提取温度、提取时间、碱液的浓度为因素进行正交试验,确定提取纯化南瓜多糖的最佳工艺参数,试验结果表明,提取温度为80℃,提取时间为2h,液料比为5:1,碱液浓度在0.4mol/L时为最佳。
纯化时采用糖液与乙醇比例为1:3的的沉淀条件,温度62℃,加热32min,活性炭添加量为3%的脱色条件,10%三氯乙酸除蛋白方法和2~3天的透析时间为最佳。
[关键词]南瓜多糖;提取;纯化[中图分类号]R284.2 [文献标识码]A南瓜葫芦科南瓜属中一年生蔓性草本植物。
南瓜多糖主要在两大方面有应用,一是医药方面,二是普通食品及保健品方面。
此外,多糖特殊的食品加工性能,例如增稠性、稳定性。
同时将其添加到肉制品中能提高肉制品的保水力,使肉具有较高的嫩度。
同时,保健品的研发也是层出不穷,好比以枸杞、银耳等为多糖原料开发的功能饮料已出现在市场上。
南瓜多糖不仅可防治糖尿病并发症,而且还具有较好的抗动脉粥样硬化的作用。
南瓜多糖有协助清除体内氧化自由基的作用,减少脂类物质过氧化反应,预防心血管疾病的发生。
此外它还具有减缓与抑制肿瘤生长的作用。
目前南瓜多糖的主要提取方法有水提醇沉法、微波辅助提取法、复合酶提取法、碱液提取法、超声波提取法等方法。
本课题研究的目的是把在原有的基础上改进提取工艺,确定南瓜多糖提取纯化的最佳工艺参数,找到一条快速、性价比高、得率和纯度高的工艺流程,以便获得更多的南瓜多糖并以此提高南瓜利用率,降低南瓜在工业化生产中的损失。
1 实验材料与方法1.1 实验材料、试剂及设备南瓜(购买自锦州石桥子早市)乙醇,丙酮,石油醚,氢氧化钠,苯酚,乙醚,浓硫酸,葡萄糖,浓盐酸,三氯乙酸,酒石酸钾钠,乙酸锌,硫酸铜,亚铁氰化钾,活性炭,(均为分析纯)。
南瓜多糖的提取
1.3试验方法1.3.1 南瓜多糖的制备南瓜切片后置于80 ℃烘箱中烘24 h,粉碎,过100目筛即得南瓜粉。
取一定量的南瓜粉置于250 mL烧瓶中,加水适当的蒸馏水,在适当的温度下恒温加热一定的时间,然后3000 r/min离心15 min,取上清液,上清液用饱和乙酸铅除去蛋白质、色素,再次离心取上清液,去除上清液中剩余铅,过滤,得南瓜多糖提取液,最后蒸发浓缩即得南瓜多糖。
1.3.2 单因子试验1.3.2.1 浸提取时间的影响在温度为80℃,瓜液比或加水量为1:20的条件下,分别在不同的 5 个时间(60 min、90 min、120 min、150 min、180 min)下进行提取,考察浸提时间对多糖提取的影响,以确定最佳浸提时间。
1.3.2.2 浸提取温度的影响选取60℃,70℃,80℃,90℃,100℃,5个温度水平,在上步中最佳浸提时间的基础上加水量为1:20的条件下进行提取,考察温度对多糖得率的影响,以确定最佳浸提取温度。
1.3.2.3 料液比(加水量)的影响选用l:10、l:15、l:20、l:25、l:30,5个料液比水平,在上两步的最佳浸提时间和最佳浸提温度的条件下进行提取,考察料液比对多糖得率的影响。
1.4多糖的测定蒽酮-硫酸法[15]据文献报道检测南瓜多糖主要是蒽酮-硫酸法,即酸性糖在蒽酮及浓硫酸的作用下显色,于620nm处检测,得到其多糖的含量。
1.4.1 标准曲线的绘制葡萄糖标准液的配制:精确称取干燥的葡萄糖100mg置于100 mL容量瓶中用蒸馏水定容,得浓度为1 mg/mL葡萄糖标准溶液。
蒽酮溶液的配制[17]:取0.2 g蒽酮溶解到80% 硫酸中,以80% 硫酸定容到100 mL现用现配。
取葡萄糖标准液1 mL、2mL、3mL、4mL、5mL、6 mL,于100 mL容量瓶,以蒸馏水稀释至刻度,摇匀。
分别取1 mL上述溶液于具塞的试管中,各自加入4 mL蒽酮试剂,定容至10mL,以1 mL蒸馏水作空白对照,立即摇匀,置沸水浴中加热8 min,迅速冷却至室温,于620 nm 处测定吸光度值,以吸光度对葡萄糖浓度作回归处理,得到葡萄糖浓度(C)与吸光度(A)的曲线列出直线回归方程。
南瓜多糖提取方法研究
食品辅料
食品工业
南瓜多糖
提取方法研究
徐雅琴 1 ;崔崇士 1 ;王洪伟 2 ;
1. 东北农业大学 (哈尔滨 150030) 2. 西南农业大学 (重庆 400716)
摘 要 通过正交试验确定南瓜多糖热水浸提法 最佳提取工艺 ,然后以提取液中多糖含量为指标 , 对热水浸提法 、超声波法和复合酶法提取南瓜多 糖进行了比较研究 。结果表明 , 三种方法中复合 酶法不仅提取率最高 ,工艺最简易 ,而且制得的粗 多糖中蛋白质含量低 ,不需要进行脱蛋白工艺 ,是 较佳的南瓜多糖提取方法 。 关键词 南瓜多糖 提取方法
黄原胶
0. 005 % 六偏磷酸钠
0. 02 %
不分层 , 状态均一
开始出现 轻微分层
分层明显 有部分 沉淀
,
分层明显 , 较多沉淀
由表 2 可以看出 ,通过多次试验 ,发现羧甲基纤维
素钠 01005 % + 六偏磷酸钠 0102 %的稳定剂组合对低 乳糖牛奶的组织状态 ,起到了较好的保护作用 ,产品在
稳定剂组成 5天
10天
15天
20天
藻酸丙二醇酯
0. 005 %
不分层 ,
六偏磷酸钠 状态均一
0. 02 %
碱法提取南瓜多糖的研究
实验 2 温度 4 时间 号 (’ ) (" )
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材料与仪器
南瓜 从广州市场购得, 挑选刚成熟、 无霉变、 均为分析纯。
葡萄糖、 苯酚、 肉质较硬的南瓜; *, $) 二硝基水杨酸、 硫酸、 氢氧化钠等
关键词 : 南瓜多糖, 提取, 正交法
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南瓜多糖提取工艺优化研究
㊀第9期㊀㊀收稿日期:2021-02-06㊀㊀基金项目:云南省教育厅科学研究基金项目(2019J0376)㊀㊀作者简介:蒋高华(1982 ),安徽巢湖人,高校讲师,研究方向:有机资源综合利用㊂南瓜多糖提取工艺优化研究蒋高华,赵江,彭兴华,杨文坪(云南能源职业技术学院资源与环境工程学院,云南曲靖㊀655001)摘要:南瓜多糖是南瓜中具有重要活性的功能成分㊂通过实验研究了提取温度㊁超声功率㊁提取时间和液料比对提取南瓜多糖的影响㊂结果表明:在提取温度70ħ,超声功率80W,提取时间15min,液料比1ʒ20下进行南瓜多糖的提取,南瓜多糖的提取率为35.6mg/g㊂关键词:南瓜多糖;提取;工艺优化中图分类号:TQ281;TS201㊀㊀㊀㊀文献标识码:A㊀㊀㊀㊀文章编号:1008-021X(2021)09-0013-02StudyonOptimizationofExtractionTechnologyofPumpkinPolysaccharideJiangGaohua,ZhaoJiang,PengXinghua,YangWenping(CollegeofResourcesandEnvironmentalEngineering,YunnanVocationalInstituteofEnergyTechnology,Qujing㊀655001,China)Abstract:PumpkinpolysaccharidewasanimportantfunctionalcomponentinPumpkin.Inthispaper,theeffectsofextractiontemperature,ultrasonicpower,extractiontimeandratioofliquidtomaterialonextractionofPumpkinpolysaccharidewerestudied.TheresultsshowedthattheextractionrateofPumpkinpolysaccharidewas35.6mg/gatthetemperatureof70ħultrasonicpowerof80W,extractiontimeof15minandratioofliquidtomaterialof1ʒ20.Keywords:pumpkinpolysaccharide;extraction;processoptimization㊀㊀南瓜系葫芦科南瓜属植物果实㊂南瓜富含南瓜多糖㊁氨基酸㊁蛋白质㊁纤维素及维生素等多种营养成分,其中南瓜多糖具有抗氧化㊁降血糖㊁降血脂㊁抗肿瘤㊁增强免疫等功效[1-5]㊂对南瓜多糖的研究引起人们的高度关注㊂本文以曲靖本地产南瓜为原材料,采用热水浸提加以超声方式来提取南瓜多糖,研究了提取温度㊁超声功率㊁提取时间和液料比对南瓜多糖提取的影响,为南瓜多糖的开发利用提供理论依据㊂1㊀材料与方法1.1㊀实验材料原料与试剂:菜市场购置本地南瓜;无水乙醇㊁丙酮㊁乙醚㊁双氧水㊁正丁醇㊁氯仿㊁浓硫酸㊁苯酚㊁葡萄糖标准品,均为分析纯.实验设备:鼓风干燥箱㊁100目筛子㊁离心机㊁TU-1901双光束紫外可见分光光度计㊁SK2510LHC数控超声波清洗器㊁分析天平㊂1.2㊀实验方法1.2.1㊀南瓜多糖提取新鲜南瓜洗净处理后,将其切成薄片,在60ħ鼓风干燥箱烘干㊂将烘干的南瓜片研磨成粉,过100目筛,制成南瓜粉㊂南瓜粉末按比例加水混合ң超声波浸提ң离心ң上清液浓缩ңSevage法除蛋白ң活性炭脱色ң醇沉㊁洗涤㊁干燥ң南瓜粗多糖㊂1.2.2㊀标准曲线建立主要采用硫酸-苯酚比色法进行测定多糖得率[6]㊂分别准确量取100mg/L的葡萄糖标准溶液0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mL放入10mL比色管,加蒸馏水至2.0mL,再加入5%苯酚溶液1.0mL,混合均匀后加入5.0mL浓硫酸,摇匀后置于沸水浴中12min,取出冷却时室温㊂在最大吸收波长490nm处测其吸光度,得到线性回归方程A=8.33C+0.500,R2=0.9942㊂结果表明具有良好的线性关系㊂1.2.3㊀单因素实验与参数优化称取2.0g南瓜粉4份,分别在研究提取温度㊁超声功率㊁提取时间和液料比等参数对多糖得率影响㊂根据实验结果,在其他条件相同的情况下,先后改变提取温度㊁超声功率㊁提取时间和液料比,比较各因素对南瓜多糖得率的影响㊂在单因素实验的基础上选取提取温度㊁超声功率㊁提取时间和液料比4个因素为考察因素,选择L9(34)正交表设计试验,优化南瓜多糖提取工艺㊂2㊀结果与分析2.1㊀单因素实验2.1.1㊀提取温度对南瓜多糖提取率的影响由图1可以看出,当提取温度升高到60ħ时,多糖得率明显增加;后面温度继续升高,多糖得率会下降㊂结果表明,随着提取温度升高,南瓜多糖提取率会逐渐增加㊂一般来说,温度升高会增加溶剂分子和溶质分子的运动,促进扩散作用,有利于提高提取率[7]㊂所以选择提取温度为60ħ㊂图1㊀提取温度的影响2.1.2㊀超声功率对南瓜多糖提取率的影响由图2可以看出,超声功率变大时,南瓜多糖得率出现先增加后降低的情况㊂结果表明,超声功率在80W的时候,南瓜多糖的提取率最大㊂主要原因可能是因为超声的空化作用和机械振动作用,导致南瓜细胞破坏越来越容易,才会出现南瓜㊃31㊃蒋高华,等:南瓜多糖提取工艺优化研究山㊀东㊀化㊀工多糖提取率增加㊂所以选择提取功率为80W㊂图2㊀超声功率的影响2.1.3㊀提取时间对南瓜多糖提取率的影响由图3可以看出,随着提取时间变化,南瓜多糖得率出现先增后降的情况㊂结果表明,提取时间在20min的时候,南瓜多糖的提取率最高㊂主要原因是从南瓜中提取多糖属于固液提取过程,只要有足够时间就能保证固相和液相充分接触,使得溶剂渗入到南瓜细胞中并有利于传质过程㊂所以选择提取时间为20min㊂图3㊀提取时间的影响2.1.4㊀液料比对南瓜多糖提取率的影响由图4可以看出,随着液料比的变化,南瓜多糖得率出现先升高后降低的情况㊂结果表明,液料比在1ʒ20的时候,南瓜多糖的提取率最高㊂主要原因是液料比可以使得固相和液相充分结合,从而提高南瓜多糖的提出率,液料比再增加不会对提出率有明显提升㊂所以选择液料比为1ʒ20㊂图4㊀液料比的影响2.2㊀正交试验设计根据2.1的单因素实验结果,选用L9(34)正交表,以提取温度㊁超声功率㊁提取时间和液料比为考察因素,因素水平见表1,实验结果见表2㊂表1㊀正交试验因素水平表水平因素A提取温度/ħB超声功率/WC提取时间/minD液料比/(g/mL)15070151ʒ1526080201ʒ2037090251ʒ25表2㊀正交试验结果试验编号因素ABCD多糖提取率/(mg/g)1111128.42122231.63133329.54212328.65223129.86231230.67313234.58321335.89332136.4K14.5665.2465.2154.875K24.5974.9864.4984.766K34.4344.8914.7894.881R0.1630.3550.7260.115㊀㊀从表2可以得知㊂极差大小顺序为:提取时间>超声功率>提取温度>液料比㊂极差越小说明该因素对南瓜多糖提取的影响越小,极差越大说明该因素对南瓜多糖提取的影响越大㊂由此可以得出各因素对南瓜多糖的影响程度由大到小顺序为:提取时间>超声功率>提取温度>液料比,最佳提取条件为:提取温度70ħ㊁超声功率80W㊁提取时间15min㊁液料比1ʒ20,即最佳组合为:A3B2C1D2,此时南瓜多糖的得率为35.6mg/g㊂3㊀结论在提取温度70ħ,超声功率80W,提取时间15min,液料比1ʒ20下进行南瓜多糖的提取,结果南瓜多糖的提取率为35.6mg/g㊂为南瓜多糖提取及应用提供理论依据㊂参考文献[1]中国农业百科全书编辑部.中国农业百科全书(蔬菜卷)[M].北京:农业出版社,1990:713.[2]罗双群,张桂红,陈海伟,等.南瓜功能特性研究进展[J].粮食与油脂,2012(4):47-49.[3]任永新.浅谈南瓜的保健功能及药理作用[J].食品工程,2007(2):10-12.[4]赵婧,袁驰,周春丽,等.南瓜多糖降血糖作用研究进展[J].食品研究与开发,2014,35(7):108-110.[5]毕新颖,王建南,姜玲玲,等.南瓜多糖的多重生理效用研究进展[J].生物学杂志,2014,31(1):78-81.[6]向东,赖凤英,梁平.植物性多糖的强化提取[J].食品与发酵工业,2004,30(5):81-84.[7]赵二劳,李满秀,梁兴红.超声提取南瓜多糖的研究[J].声学技术,2008,27(1):58-60.(本文文献格式:蒋高华,赵江,彭兴华,等.南瓜多糖提取工艺优化研究[J].山东化工,2021,50(9):13-14.)㊃41㊃SHANDONGCHEMICALINDUSTRY㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀2021年第50卷。
南瓜多糖清洁生产提取工艺
精品整理
南瓜多糖清洁生产提取工艺
南瓜多糖是一种非特异性免疫增强剂,具有丰富的活性功能,多项研究表明南瓜多糖对免疫系统有重要的调节作用,同时具有降血糖、降血脂、抗癌等作用,南瓜多糖作为长效、无毒、降血糖,调血脂药物或食疗剂,因此它在保健食品与医药上的广泛使用。
它的开发利用和研究越来越受到人们的关注,然而目前南瓜多糖的提取存在产品的纯度不高,有机溶剂的使用量比较大等多方面问题。
针对目前南瓜多糖提取工艺中存在的问题,通过正交试验设计进行提取操作单元优化,使用膜分离技术进行有效分离和纯化,从而进行南瓜多糖清洁。
通过南瓜多糖清洁生产工艺研究,先采用正交试验找到提取条件:温度40℃、浸提时间0.5h、料液比1∶3,此条件下多糖提取率达到95.6%。
提取液离心调节pH值后,依次经过微滤膜N100除杂,可使南瓜多糖透过率达97.3%、杂质截留率为21.6%;然后经纳滤膜DLC浓缩,浓缩后南瓜多糖截留率达94.5%,南瓜多糖的纯度为67.5%,其品质明显高于传统工艺提取的多糖。
整个新工艺过程,分离效率高、能耗低的特点充分体现的清洁生产的“节能、降耗、减污、增效”的宗旨,企业采用此清洁生产工艺可降低成本,减少污染,大大提高经济效益。
南瓜多糖的提取、分离、纯化和活性鉴定
南瓜多糖的提取、分离、纯化和活性鉴定实验原料:南瓜粉实验试剂:蒸馏水 95%乙醇 Sevage试剂 4%H2O2溶液 0.1-0.5mol/lNaCl1mmol/L H2O2 2 mmol/L FeSO4 6 mmol/ L 水杨酸溶液 1%铁氰化钾0.2 mol/L 、pH=6.6 的磷酸盐缓冲液 10%三氯乙酸 0.1%FeCl3 Vc实验仪器:500ml烧杯(4个) 10ml量筒(2个) 1ml移液枪(枪头一盒)玻璃搅拌棒胶头滴管(2个) 25ml试管(12支)玻璃比色皿(6个) 50ml离心管(4支)温度计(1支)透析袋D36mm(8000-14000)DEAE-纤维素离子交换柱层析(2cm×80cm) Sephadex G-100柱层析(90cm×2cm)电子天平电热恒温水浴锅紫外分光光度计离心机超声波破碎仪磁力搅拌器(没有亦可用别的搅拌器代替)真空冷冻干燥机电导率测量仪实验步骤:1.准确取100.0g 南瓜粉置于烧杯中2.按料液比1∶4 (g / mL)加入蒸馏水,预浸15min3.在50℃条件下用500W 超声波进行处理21min(作用间隔时间3s)4.然后将提取液过滤,收集滤液5.加入95%的乙醇沉淀多糖,直到几乎再无更多沉淀析出,记录加入的体积6.过滤,取沉淀得粗提取物7.脱蛋白:取粗提取物样品,用少量蒸馏水溶解,按多糖水溶液体积1/ 3~1/ 4 加入Sevage 试剂,混合震荡20min ,在离心机中以4000r/ min 离心20min ,去除多糖溶液层与有机溶液层交界处的变性蛋白质,重复操作8~12次,直至中间无混浊沉淀. 再用紫外光谱分析在蛋白质280nm和核酸260nm处无特征吸收峰,说明含氮物质已除去8.脱色:按多糖液与H2O2体积比为4:1加入4%过氧化氢,40 ℃磁力搅拌2h 脱色,去除多余色素.9.最后用95 %的乙醇沉析,直到几乎再无更多沉淀析出(或者直接按2-3倍体积添加),离心得沉淀物10.将沉淀物加蒸馏水使其溶解,对蒸馏水透析48h,将袋内物取出测定电导率均小于250μS,说明杂质离子已基本除去,离心分离得南瓜粗多糖11.取适量(按结果决定取量)粗多糖按第14到15步骤进行活性研究,剩余多糖按第12到13步进行进一步纯化12. 将南瓜粗多糖采用DEAE-纤维素离子交换柱层析(2cm×80cm)进行多糖分离。
南瓜多糖的提取与分离
分类号 密级 作者姓名 指导教师 学科门类 提交论文日期 专业名称 成绩评定 理 科 孙 家 娟 2011年6月摘要摘要分别使用乙醇乙醚混合液和石油醚处理南瓜粉。
然后在90℃,固液比40:1的条件下使用传统的热水浸法提取4小时,过滤,用甲醇沉淀滤液中的多糖,通过Sevage法脱蛋白,得到精制的南瓜多糖。
最后以葡萄糖为标准对照品,使用苯酚—硫酸法测定南瓜多糖吸光度,计算后得到多糖含量。
关键词:南瓜;多糖;提取;分离AbstractAbstractSeparately using ethanol ether mixture and petroleum ether processing pumpkin powder. Then in 90 ℃, solid-liquid ratio under the condition of chains, the use of traditional hot water leaching extraction four hours, filtering, with methanol precipitation of polysaccharides, through the filtrate Sevage method refined, get off protein pumpkin polysaccharide. Finally with glucose for standard reference substance, the use of phenol hydrate-sulfuric determination - pumpkin polysaccharide absorbency, calculated get polysaccharide.Key words:Pumpkin; Polysaccharide; Extraction; Separation目录摘要 (I)前言 (1)1 文献综述 (2)1.1南瓜介绍 (2)1.1.1 南瓜的生物特性 (2)1.1.2 南瓜的营养价值 (2)1.1.3 南瓜多糖的组成及性状 (2)1.1.4 南瓜多糖的应用前景 (2)1.2南瓜多糖组成的研究方法 (3)1.2.1 南瓜多糖提取方法 (3)1.2.2 除蛋白 (3)1.2.3 多糖的分析方法 (4)1.3拟采取研究方法 (4)2 实验部分 (5)2.1药品试剂与仪器设备 (5)2.1.1 药品试剂 (5)2.1.2 仪器设备 (5)2.2南瓜多糖的提取 (5)2.2.1 南瓜的脱脂 (5)2.2.2 南瓜多糖的提取 (5)2.2.3 粗多糖的纯化 (6)2.2.4 待测液的配制 (6)2.3苯酚—硫酸法测多糖含量 (6)2.3.1 测定方法 (6)2.3.2葡萄糖标准液的配制及测定 (6)2.3.3 样品溶液的测定 (6)2.3.4 多糖含量计算 (6)3 结果与讨论 (7)3.1结果 (7)3.1.1 最大吸收波长的确定 (7)3.1.2 标准工作曲线的绘制 (8)3.1.3 样品的测定结果 (8)3.1.4 南瓜多糖的提取率 (8)3.2讨论 (8)结论 (9)致谢 (10)参考文献 (11)南瓜多糖的提取与分离前言南瓜,俗名倭瓜、番瓜、北瓜。
低分子量南瓜多糖的提取、纯化、结构及抗氧化功能研究的开题报告
低分子量南瓜多糖的提取、纯化、结构及抗氧化功能研究
的开题报告
一、研究背景和意义
南瓜是一种常见的食品以及药用植物,其中含有丰富的多糖,已被证实具有多种生物活性,如抗氧化、免疫调节、降血糖等作用。
然而,南瓜多糖的生物活性与其分子量密切相关,因此低分子量南瓜多糖具有更好的生物活性和生物利用度。
低分子量南瓜多糖的提取、纯化及其活性研究,将具有重要的理论研究价值和应用前景。
二、研究内容和方法
1.提取低分子量南瓜多糖:采用水提法和超声提法提取南瓜多糖,对提取条件进行优化,得到低分子量南瓜多糖。
2.纯化低分子量南瓜多糖:采用凝胶过滤层析、离子交换层析等方法对提取的南瓜多糖进行纯化,得到高纯度的低分子量南瓜多糖。
3.结构分析:采用高效液相色谱仪(HPLC)、气相色谱仪(GC)、质谱仪(MS)等手段对低分子量南瓜多糖进行结构分析。
4.生物活性评价:采用自由基清除能力、对脂质过氧化的保护能力、对DNA损伤的保护能力等指标评价低分子量南瓜多糖的抗氧化功能。
三、研究预期成果和意义
1.成功提取了高纯度的低分子量南瓜多糖。
2.揭示了低分子量南瓜多糖的结构特点。
3.揭示了低分子量南瓜多糖的抗氧化功能。
4.为开发和利用南瓜多糖作为天然抗氧化剂提供了理论依据。
四、研究进展和计划
目前,已完成了南瓜多糖的提取和初步的纯化工作,正在进行低分子量南瓜多糖的进一步分离和纯化。
下一步将进行结构分析和生物活性评价,并进一步探索低分子量南瓜多糖的应用前景。
计划在1年内完成本次研究。
南瓜多糖提取分离纯化及其抗氧化活性的研究展解读
南瓜多糖提取分离纯化及其抗氧化活性的研究展摘要:南瓜多糖是一类具有重要生物活性的功能性成分,其具有广泛的开发前景。
对南瓜多糖的提取、分离纯化及抗氧化活性的研究现状进行综述,并展望了其今后研究方向及开发应用前景。
关键词:南瓜多糖;提取;分离纯化;抗氧化活性南瓜为葫芦科南瓜属一年生蔓性草本植物,其营养成分丰富,具有很高的食疗保健作用[1-2]。
而南瓜中的多糖具有降血脂、降血糖、防癌等多种功能[3]。
对南瓜多糖的研究及相应功能食品的开发逐渐受到重视,其中南瓜多糖抗氧化活性的研究是人们普遍关注的问题之一。
文章对南瓜多糖的提取、分离纯化方法及对其抗氧化活性的研究做一综述。
1 南瓜多糖的提取方法1.1 热水浸提法由于多数多糖在热水中的溶解度较大且性质稳定,热水浸提法是提取多糖最常用的方法。
李俊丽[4]等采取热水浸提法对南瓜多糖的提取进行了研究,提取工艺的最佳条件为:1:40的料液比,在70℃水浴条件下提取3次,每次提取4 h 。
向东[5]等在用热水提取南瓜多糖的研究中发现,热处理对致密的南瓜组织有疏松作用,从而使细胞内的多糖更容易浸提出来。
热水浸提法是一种常用的提取植物多糖的传统方法,操作简便,所得多糖生物活性好,但多糖得率低,费时费工。
1.2 碱法提取法由于碱液能减弱植物细胞壁分子间的作用以增加多糖的提取率,所以碱法也常用于提取多糖。
向东[6]等采取碱法提取法提取南瓜多糖,得出最佳的提取工艺条件为:提取温度80℃,提取时间2 h,液固比5:1,NaOH 浓度0.4 mol/L 。
碱处理对致密的南瓜组织有疏松作用,能提高多糖的提取率,但由于在碱液的作用下还原糖会因发生反应使获得的南瓜提取液色泽较深,呈棕色,很难除去。
1.3 超声提取法超声提取法是利用超声波的热效应、机械效应和空化作用破坏细胞,使水溶性多糖更易提取。
赵二劳[7]等采用超声提取法对南瓜多糖的提取进行了研究,得出最佳的提取工艺条件为:以水为提取剂,预浸时间10 min ,超声作用时间20min ,提取温度60℃,超声波功率80 w ,占空比1, 此时多糖的提取量最大可达42.6 mg /g 。
一种南瓜多糖及其制备方法[发明专利]
专利名称:一种南瓜多糖及其制备方法专利类型:发明专利
发明人:卢照凯,卢昶年
申请号:CN200810302942.X
申请日:20080723
公开号:CN101314621A
公开日:
20081203
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明公开了一种南瓜多糖及其制备方法,它是以南瓜为原料,经前处理,加水提取0.5~3h,过滤,滤液离心,上清液过树脂柱进行柱层析,收集洗脱液;洗脱液浓缩后,加入乙醇进行沉淀;沉淀物用水溶解后加入三氯醋酸离心脱蛋白,上清液经浓缩,干燥,粉碎,即得南瓜多糖。
本发明采用先进的树脂层析技术对南瓜多糖进行纯化,减少了洗涤次数,简化了工艺流程;并对提取条件和工艺参数进行了优化,使得整个提取、纯化过程耗时较短;因而本发明工艺流程简单,生产周期短,生产易于控制,生产成本低且产品纯度及提取率高。
用本发明方法制备得到的南瓜多糖,产品纯度可达80%以上,收率可达到25%以上。
申请人:卢照凯,卢昶年
地址:546600 广西壮族自治区桂林市荔浦荔城镇篓园工业区158号
国籍:CN
代理机构:桂林市持衡专利商标事务所有限公司
代理人:马兰
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从南瓜中制取多糖,果胶和南瓜粉的工艺研究
从南瓜中制取多糖,果胶和南瓜粉的工艺研究下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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复合酶法提取南瓜多糖及其抗氧化性的研究
复合酶法提取南瓜多糖及其抗氧化性的研究孙婕,尹国友,陈兰英,刘瑞芳,朱艳青,牛美艳,王宁(河南城建学院生物工程系,河南平顶山467044)摘要 [目的]优化复合酶法提取南瓜多糖的工艺条件,研究南瓜多糖的抗氧化性。
[方法]采用单因素试验设计研究了不同提取时间、温度、料液比、p H 值对南瓜多糖提取率的影响,并通过正交试验确定了提取南瓜多糖的最佳复合酶配比和最佳提取条件。
采用水杨酸法检测南瓜多糖对羟基自由基( OH)和改进的邻苯酚自氧化法检测其对超氧阴离子自由基(O -2)的清除效果。
[结果]当纤维素酶的浓度为1.0%、果胶酶为1.5%、木瓜蛋白酶为1.0%时,以及温度为40 、p H=4.6、料液比为1!30、提取时间为30m i n 的条件下南瓜多糖的提取率最高;南瓜多糖对 OH 具有较好的清除效果,对O -2有部分清除作用。
[结论]该研究为南瓜多糖的研究及应用提供了基础资料。
关键词 复合酶法;南瓜多糖;提取;抗氧化活性中图分类号 S642.1 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2010)32-18064-03Extractio n of Pu mpk i n Pol ys acchari de by Co mp lex Enzy m eM ethod a nd ItsAntioxi da n t Research S UN Jie et al (Biolog i cal Eng i neeri ng D epart men,t H enan Co llege ofU rban Constrction ,P i ngdi ngshan ,Henan 467044)Abstract [Ob j ective]This paper a m i s to st udy a ne w m et hod of ex tracting pu mpki n po l ysacchar i de fro m pu mpk i n .S i ng l e factor experm i ents were conduct ed to exam i ne t he effects o f ex tracti ng tm i e ,t empera t ure ,t he so li d liqui d ra tio and p H va l ue on the extracti on yiel d o fpolysaccha ride fro m pu mpkin .[M et hod]The best enz yme rati o and ex traction cond i ti ons for complex enzy m es extracti onw ere de t er m ined t hrough orthogonal tests .Scavengi ng OH and O -2acti v ities of pu m pki n po l ysacchari deswere also i nvesti ga t ed by sa licy lic aci d and m i proved self ox i da ti on of o pheno methods respecti vely .[Result]The results s ho w ed that the biggest ex tracti on y i e l d of pol y s acchari de fro m pu mpki n can be go twhen adding 1%cell u l ose enzy m e ,1.5%pecti nase ,1.0%papa i n and N a 2HPO 4-c itric aci d buff er sol uti on (p H w as 4.6),and osc ill a ti ng for 30m i n under wa t er at 40 w it h t he s o lid li qui d ra tio o f 1!30.In additi on ,pu mpki n po l ysacchar i des had a strong acti v it y of e lm i i na ti ngo OH,but very weak activity to scavenge O -2.[Concl usi on]This study prov i ded basi c data for research and application o f Pu m p k i n po l ysac chari de .K ey words Co mplex enzy m esm et hod ;Pu m pki n po l ysacchar i de ;Extracti on ;Anti ox i dant activity基金项目 河南省科技计划重点科技攻关项目(102102110157);河南城建学院科学研究基金项目(2010J ZD008)。
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南瓜多糖提取方法
摘要:本文介绍了南瓜多糖的提取方法,如水提醇沉法、碱液提取法、超声波提取法、微波辅助提取法、酶提取法等等。
关键词:南瓜;多糖;多糖提取
南瓜又称番瓜、倭瓜、金瓜等,系葫芦科南瓜属一年生蔓性草本植物,是重要药食两用植物之一。
南瓜营养丰富,不仅含有甘露醇,多种氨基酸,维生素C、E 及微量元素Fe、Se、Zn、Mn 等,还含有大量生物碱、南瓜子碱、果胶等活性成分。
南瓜多糖呈棕色粉末,是南瓜活性成分中最重要、最具潜力功能因子之一。
不仅具有复杂、多方面生物活性,作为广谱免疫促进剂,且具有免疫调节,抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂、促进核酸与蛋白质生物合成,控制细胞分裂、分化,调节细胞生长、衰老等作用。
因此,对南瓜多糖分离提取,日益引起人们重视。
1 提取方法的研究现状
1.1 水提醇沉法
水提醇沉法是通过在天然产物的浓缩的水提取液中加入数倍量高浓度乙醇,利用南瓜多糖溶于水而不溶于高浓度的乙醇的性质,使其生成沉淀而与其他水溶性的杂质分离的方法。
水提醇沉法提取南瓜多糖的工艺,工艺流程如下:市购南瓜洗净、去皮切丁并配水榨汁→加热浸提→过滤→提取液→浓缩→乙醇沉淀→南瓜粗多糖。
通过四因素三水平正交试验法优选,研究发现南瓜多糖提取的最优条件为:南瓜丁的质量与水的体积比为1(g):5(ml),90℃条件下浸提2h,浓缩水浸提液与乙醇的体积比为1:4,南瓜粗多糖提取率为1.5%左右,纯度可达到21.02%。
1.2 碱液提取法
由于D- 葡萄糖醛酸的存在,南瓜多糖为酸性多糖,故可采用稀碱液如氢氧化钠、氢氧化钾等来提取。
由于稀碱液有助于解除植物细胞壁分子间的化学和物理作用,故可增加南瓜多糖的提取率。
利用氢氧化钠溶液提取南瓜多糖的工艺,实验表明:随着碱液浓度的升高,多糖的提取率增加,当达到0.3mol/L 之后,碱液浓度的升高对提取率无显著影
响,而且由于碱性条件下,其中的还原糖会分解成分子量更小的色素分子,从而使的产品的色泽加深。
经过正交实验,确定了碱提法的最佳生产工艺:80℃的条件下提取,提取时间为2h,综合考虑时间对提取率的影响和生产周期因素,可以缩短为1h,液固比为5:1,氢氧化钠的浓度为0.4mol/L。
1.3 超声波提取法
超声波是频率大于20KHz 以上的声波,具有频率高、波长短、功率大、穿透力强等特点。
它在液体介质中传播时,能产生空化作用及一系列特殊效应具有搅拌、分散成雾、凝聚、冲击破碎和加热等作用。
超声波提取是利用超声波具有的空化效应、机械效应及热效应,通过增大介质分子的运动速度,增强介质的穿透力以提取天然产物有效成分的方法。
利用超声波提取南瓜多糖的方法。
赵二劳等[10]使用KQ-100DB 型数控超声波清洗器(超声波频率为40kHz),研究了预浸时间、超声功率、提取温度、时间以及占空比对南瓜多糖提取率的影响水平:以水为提取溶剂,经过10min 预浸后,在60℃的提取温度下,用功率为80W、占空比为1 的超声波作用20min,样品中南瓜多糖的提取率最高可达4.26%。
1.4 微波辅助提取法
微波辅助提取指在天然产物有效成分提取过程中加入微波场,利用微波场的特点来强化有效成分浸出的新型提取技术。
微波可导致天然产物细胞内的极性物质尤其是水分子吸收微波能产生大量的热量,胞内温度迅速上升,从而使细胞内部的压力超过细胞壁膨胀所能承受的能力,结果细胞破裂,有效成分自由流出并溶解于提取介质中,通过进一步的过滤和分离,即可获得所需的提取物。
1.5 复合酶提取法
酶提取法的原理是利用酶反应的高度专一性,将天然产物细胞壁及细胞间质中的纤维素、半纤维素等大分子物质水解或降解,破坏细胞壁,加快有效成分溶出细胞的速度,从而提高有效成分的提取率。
采用酶法提取天然产物有效成分,反应条件温和,是一种较为先进有效的提取方法。
使用纤维素酶(1%)、果胶酶(1.5%)和木瓜蛋白酶(1%)组成的复合酶,在pH 为5.5、温度为40℃的条件下提取30min,南瓜多糖的粗产率可高达28.8%左右。
利用微波协同酶法来提取南瓜多糖,先利用1.0%纤维素酶和1.5%果胶酶组成的复合酶,在磷酸氢二钠- 柠檬酸组成的pH=5.5 的缓冲溶液中,于40℃水浴中
振荡30min,然后将酶解后的多糖提取液用功率为500W 的微波,在料液比为1g:30 mL、温度为60℃条件下微波加热3min,可达到11.9%的粗提取率。
2.展望
我国南瓜资源丰富,价廉易得,从南瓜中提取具有降糖等生物活性的南瓜多糖具有广阔的应用前景。
就提取工艺来说,水提醇沉法耗时长,且提取率偏低,碱提法虽然在一定程度上提高了提取率,但使得产品质量下降,超声波法和微波辅助法耗时短、提取率亦得到了大幅度的提高,但是由于条件限制,很难用于工业生产。
复合酶提取法由于其高度专一性、条件温和、提取时间短、提取率高等已引起关注,必将成为南瓜多糖开发的一个重要手段,具有较大的应用潜力。
总的来说,目前最基础的工作便是要改进提取工艺,找到一条简单、价廉、提取率和纯度高的工艺流程。
参考文献:
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