实验动物学实验动物基本操作技术

大鼠固定盒固定
二、豚鼠的抓取固定法
三、家兔的抓取固定法
第二节 性别鉴定
一、大、小鼠的性别鉴定
一般情况下，哺乳动物性别依据动物的肛门与外生殖器 之间的距离来区分。雄性要比雌性的距离更长。
第三节 年龄的大致判断
一、大、小鼠
1. 根据形态鉴定日龄（大、小鼠情况基本一样）
日龄/d 1 3 4 5 8
2．个体耳号标记法 3. 个体断趾标记法 4. 耳号钳标记法 5. 挂牌法
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第六节 常规采血方法
一、大、小鼠的采血方法 1．颈静脉或颈动脉采血 2．股静脉或股动脉采血 3．心脏采血 4．尾部采血 5．眼眶采血 6．断头取血
后肢影静脉采血
心脏采血 眼眶采血
剪尾采血
二、豚鼠的采血方法
1．耳缘剪口采血 2．心脏采血方法同大、小鼠。 3．股动脉采血方法同大、小鼠。 4．后肢背中足静脉采血
采血时注意
① 采血场要有充足的光线；室温夏季最好保持在25～ 28℃，冬季，15～20℃为宜；
② 采血用具有采用部位一般需要进行消毒； ③ 采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥； ④ 若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝
第四节 妊娠检查
雌性动物妊娠后会发生一系列的复杂变化。为了在配 种以后能及时掌握雌性动物是否妊娠、妊娠的时间及 胎儿和生殖器官的异常情况，采用临床和实验室的方 法进行检查，称为妊娠检查，又称妊娠诊断 (pregnancy diagnosis)。通过妊娠检查，可以及时地 对雌性动物加强护理或再次配种，以保护母体和胎儿 的正常发育，避免胎儿早期死亡和流产及减少繁育时 间的损失。妊娠检查不但要求准确，且及早确诊更为 重要。
30
60
60～80 100～120 150～200 170～220 240～300
90
120
180
330～400 400～470 520～600
三、家兔
家兔的门齿和爪随年龄增长而增长，是年龄鉴别的 重要标志。青年兔门齿洁白，短小，排列整齐；老年兔 门齿暗黄，厚而长，排列不整齐，有时破损。白色家兔 趾小基本呈红色，尖端呈白色。1岁家兔红色与白色长度 相等；1岁以下，红多于白；1岁以上，白多于红。还可 根据趾爪的长度与弯曲度来区别。青年兔趾爪较短，直 平，隐在脚毛中，随年龄的增长，趾爪露出于脚毛之外 ，而且爪尖钩曲。另外，家兔皮薄而紧，眼神明亮，行 动活泼的为青年兔；皮厚而松，眼神颓废，行动迟缓的 为老年兔。
三、家兔的采血方法
1．心脏采血 2．耳中央动脉采血 3．耳静脉采血
四、狗、猫的采血方法
1．后肢外侧跗外静脉、内侧隐静脉、前肢内侧皮下 头静脉采血 2．股动脉采血 3. 心脏采血同大、小鼠心脏采血 4．耳缘静脉采血同兔耳缘静脉采血
采血方法的选择，决定于实验目的所需血量 以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细 胞计数、血红蛋白的测定，血液涂片以及酶活性 微量分析法等，可刺破组织取毛细血管的血。当 需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时，若需 反复多次，应自远离心脏端开始，以免发生栓塞 而影响整条静脉。而研究毒物对肺功能的影响、 血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱，需要比较动、静 脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及 K+ 、Na+、Cl-离子浓度，必须采取动脉血液。
滞，行动迟缓。而年轻豚鼠牙齿短白，爪短软，眼睛圆亮 ，行动敏捷，被毛有光泽，且紧贴身体。同样，也可根据 体重来推断大致年龄。同日龄豚鼠，雌性体重略高于雄性 。与大鼠一样，其体重受多种因素的制约。实验对年龄要 求比较严格时，必须由卡片记录提供准确年龄。
日龄/d 体重/g 日龄/d 体重/g
初生 7
20
五、犬 犬的年龄主要以牙齿的生长情况、磨损程度、外形
颜色等情况综合判定。仔犬在出生后十几天即开始生 出乳齿，2个月以后开始由门齿→犬齿→臼齿顺序逐渐 更换为恒齿，8～l0个月齿换齐。但犬齿需要1岁半以后 才能长坚实。饲养场饲养的品种犬，可以根据记录， 明确了解年龄，而收购的杂种犬就无法知道确切年龄 。实际中，可根据犬齿更换和磨损情况，估计犬的年 龄。
妊娠检查方法有:
① 外部检查法 ② 摸胎法 ③ 阴道检查法 ④ 直肠检查法 ⑤ 超声波检查法 ⑥ 孕酮含量测定法
第五节 分组与编号
动物实验之前，必须对实验动物进行随机分组和编 号标记，这是做好实验和实验记录的前提。 一、随机分组 抽签、抓阄、随机数字表
二、编号标记方法 实验动物分组后，为了区分、观察并记录每个个体
第六章 实验动物的基本操作技术
第一节 实验动物的抓取与固定 第二节 性别鉴定 第三节 年龄的大致判断 第四节 妊娠检查 第五节 分组与编号 第六节 常规采血方法 第七节 给药途径与方法 第八节 麻醉方法 第九节 处死方法
第一节 实验动物的抓取与固定
一、大、小鼠的抓取固定
小 鼠 固 定 盒 固 定
外观形态特征 仔鼠裸体鲜红 耳壳露出表皮 脐带瘢痕脱落
能翻身 能爬行
日龄/d 10
9～11 13～15 18以后
外观形态特征 能听到声音
全身被白毛，门齿长出 眼皮张开，能跳跃，能抓取东西
能自行采食，独立生活
2. 根据体重鉴定日龄
⑴ 小鼠日龄与体重的对应
⑵ 大鼠日龄与体重的对应
二、豚鼠 一般老年豚鼠牙齿和趾爪长，被毛稀疏无光泽，眼神呆
年龄 2个月以下 2～4个月 4～6个月 6～10个月 1岁 2岁 3岁 4～5岁 6～8岁 9～10岁 10岁以上
犬齿更换和磨损情况 仅有乳齿(白、细、尖) 更换门齿 更换犬齿(白，牙尖圆钝) 更换臼齿 牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突 下门齿尖突部分磨乎 上、下门齿尖突大部分磨平 上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄 门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损 唇部、胡须发白 门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白
的反应情况，必须给每只动物进行编号标记。 1．体表颜料着色法 一般对短期试验的白色动物
可用颜料涂搽被毛的方法标记。常用的涂染化学药品有 ：
红色：0.5％中性红或品红溶液； 黄色：3％～5％苦味酸溶液或80％～90％苦味酸酒 精饱和液； 咖啡色：2％硝酸银溶液； 黑色：煤焦油酒精溶液。
左前腿上部为1，左 腰部为2，左后腿为 3，头部为4，背部 为5，尾基部为6， 右侧从前至后依次 为7、8、9。用黄色 表示个位数，红色 表示十位数。