2.2.2_(公开课学案修改)动物细胞融合与单克隆抗体
2[1].2.2动物细胞融合与单克隆抗体导学案
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编号：whgzswxx3—0082.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体班级：________ 小组名称：_______ 学生姓名：_______ 评价： 编写：周民 审核：李厚亮 审核时间：2014∕04∕17学习目标：1、理解并掌握动物细胞融合技术的原理、过程和意义。
2、理解掌握单克隆抗体制备的过程和应用。
学习重点： 动物细胞融合过程和单克隆抗体制备的过程和应用。
学习难点： 单克隆抗体的制备过程及应用。
学习过程：导入：20世纪90年代初，英国科学家成功地利用“生物导弹”单克隆抗体瞄准并杀死了癌细胞，使患血癌的一名67岁退休教授与一名女患者的癌细胞奇迹般消失了。
被称为“生物导弹”的单克隆抗体，能够跟踪和杀死细菌、病毒或癌细胞。
神奇的单克隆抗体是如何制备出来呢？又有哪些神奇的应用功能呢？ 一、动物细胞融合：阅读教材P52相关内容，思考并讨论：1、动物细胞融合也称___________，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
2、结果：形成________细胞。
其特点是 。
3、原理：_______________。
实质： 。
4、过程：不同_________的两个细胞 杂交细胞。
5、意义：突破了有性杂交方法的局限性，克服了__________的不亲合性，成为研究细胞遗传、_________、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。
思考与探究1：6、○1诱导动物细胞融合的方法有哪几种？特有的方法是什么？ 。
○2灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的 和一些酶能够与细胞膜上的 发生作用，使细胞互相凝集，依赖细胞膜的 （结构特性），细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。
○3 “灭活”与“灭菌”相同吗？为什么要对病毒进行“灭活”？○4动物细胞融合的方式有_________种，融合完成的标志是：细胞核融合成一个核。
杂交细胞中含有 个 灭活的仙台病毒PEG 、电激等染色体组。
7、动物体细胞融合与植物体细胞杂交的比较。
高中生物选修3优质学案：2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体目标导航 1.掌握动物细胞融合的原理和方法。
2.结合图2－24，归纳单克隆抗体的制备过程及应用。
重难点击 1.动物细胞融合的原理和方法。
2.单克隆抗体的制备过程。
一、动物细胞融合1.概念：________或________动物细胞结合形成____________的过程，也称细胞杂交。
2.原理：________________。
3.诱导融合的方法(1)物理、化学方法：与植物体细胞杂交相同，如聚乙二醇、电激等。
(2)生物方法：____________。
________细胞。
4.过程：具有不同____________的两个或多个细胞――→PEG、电激等5．结果：形成________细胞。
6．意义：突破了____________方法的局限，使____________成为可能。
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和________________等的重要手段。
如：利用________________，为制造单克隆抗体开辟了新途径。
合作探究1．关于动物细胞融合过程与结果的思考：(1)融合处理后的细胞是否可以直接用于培养，为什么？(2)动物细胞融合完成的标志是什么？(3)动物细胞融合与植物原生质体融合所用的诱导方法有何不同？2．细胞融合技术与有性杂交相比有哪些优点？3．动物细胞融合与植物体细胞杂交的对比1．判断正误(1)动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程()(2)动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的双核或多核细胞称为杂交细胞()(3)常用的诱导动物细胞融合的因素有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激、离心等()(4)动物细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能()2．如图表示将人成纤维细胞与小鼠细胞进行融合，获得部分杂种细胞的过程(注：杂种细胞中人类的染色体会随机丢失，各种杂种细胞保留人类染色体的种类和数量是不同的)。
2.2.2-动物细胞融合与单克隆抗体·教案
人教版高中生物选修3 专题二 2.2 动物细胞工程2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗教学设计李琼（仁怀一中生物组）1、三维目标：1.1 知识目标⑴掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。
⑵简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。
⑶了解单克隆抗体在医学实践中的应用，并说其应用实例。
1.2 能力目标⑴由植物体细胞杂交技术导出动物细胞融合过程，培养学生的知识迁移能力、思维能力。
⑵让学生尝试设计单克隆抗体的制备过程，指导学生掌握获取知识和探索生物科学的基本方法，使学生了解生物科学认识模式以发展学生的创造性能力。
（3）分析动物细胞融合技术的意义和应用，逐步提高学生独立获取知识、分析问题和解决问题的能力。
1.3 情感目标⑴初步培养学生勇于探索，不断创新的精神和合作精神。
（2）关注动物细胞融合与单克隆抗体技术的发展和应用前景。
2、教学重难点：2.1 重点：单克隆抗体的制备2.2 难点：单克隆抗体的制备3、教学方法：讲授、自学、讨论等相结合、或生讲师评、补充4、教学手段：动物细胞融合、单克隆抗体制备过程的教学课件ppt5、教学课时：45分钟6、教学过程【复习导入新课】 2002年12月30日，两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，两批新人同时在“产房”—电融合仪内孕育新生命。
师：这两场“太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技术？生：植物体细胞杂交技术动物细胞融合技术师：动物细胞融合还有其他融合的例子吗？动物细胞是怎么融合的？下面就让我们一起来看看有关动物细胞融合的基础知识。
【板书】动物细胞的融合[请大家翻开课本P52，花5分钟的时间对学案的答案，并且能记忆] 问：动物细胞融合是怎么一回事？生：动物细胞融合cell fusion，也叫细胞杂交，指的是两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
【板书】[强调概念要点]1、概念：“2个或多个动物细胞”→“1”、“杂交单核细胞”师：动物细胞融合的基本原理是什么？与植物原生质体融合的基本原理是否相同？生：细胞膜的流动性。
高中生物选修3精品学案：2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体【目标导航】 1.掌握动物细胞融合的原理和方法。
2.结合图2－24，归纳单克隆抗体的制备过程及应用。
一、动物细胞融合(阅读P 52－53)1．概念：两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交。
2．原理：细胞膜的流动性。
3．诱导融合的方法：(1)物理、化学方法：与植物体细胞杂交相同，如聚乙二醇、电激等。
(2)生物方法：灭活的病毒。
4．过程：不同遗传信息的两个或多个细胞――――→灭活的病毒PEG 、电激等杂交细胞。
5．结果：形成杂交细胞。
6．意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。
如：利用动物细胞融合技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。
二、单克隆抗体(阅读P 52－54) 1．传统抗体的获得(1)方法：①向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体；②从动物血清中分离所需抗体。
(2)缺陷：产量低、纯度低、特异性差。
2．单克隆抗体的制备 (1)制备原理①浆细胞特点：一种B 淋巴细胞产生一种单一抗体，B 淋巴细胞在体外不能(能/不能)无限增殖。
②骨髓瘤细胞特点：能无限增殖。
③杂交瘤细胞特点：B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到杂交瘤细胞，既能无限增殖，又能产生特异性抗体。
(2)制备过程制备特异性B 淋巴细胞⎩⎪⎨⎪⎧①向小鼠注射特定抗原蛋白②从小鼠脾脏中获取相应B 淋巴细胞⇓获得杂交瘤细胞⎩⎪⎨⎪⎧①将鼠的骨髓瘤细胞与脾中形成的B 淋巴细胞融合②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞 既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体⇓克隆化培养和抗体检测 ⇓将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔中增殖 ⇓提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取 (3)单克隆抗体优点：特异性强、灵敏度高、并可大量制备。
(4)单克隆抗体的应用①作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点。
②用于治疗疾病和运载药物。
2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体拓展
细胞膜的流动性 制备单克隆抗体
5、最有价值的应用
#抗体是由何种细胞产生的？ 效应B细胞（浆细胞）。 #一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？ 每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。 抗体的化学本质是免疫球蛋白。
B淋巴细胞与抗体的关系：
１．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生 抗体。 ２．每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。 ３．动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种 以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异 性免疫作用。4.抗体主要分布于动物血清中， 在外分泌液中有少量抗刺激
动物体内
效应B
抗体 抗体不纯
血清抗体（也称多克隆抗体） 由血清中提取的抗体是由不同浆细胞产生的 多种抗体的混合物，可达百万种以上，称为多克
隆抗体。
特点：产量低、纯度低、特异性差、反应不够灵 敏。
3、过程
不同DNA的两个细胞
灭活的病毒 PEG等
杂交细胞
细胞融合完成的标志:细胞核融合成一个核 4、原理
2020-2021学年生物人教版选修3学案：2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体
2．2.2 动物细胞融合与单克隆抗体知识点一 动物细胞融合1．概念：两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交。
2．结果：形成单核杂交细胞。
3．原理：细胞膜的流动性。
4．过程：不同动物的两个或多个细胞――→灭活的病毒或PEG杂交细胞5．诱导方法物理法——离心、振动、电激；化学法——聚乙二醇(PEG)；生物方法——灭活的病毒。
注意：灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。
6．灭活病毒诱导细胞融合的原理病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。
这一过程既能反映出糖蛋白在细胞识别中的重要作用，又能反映出细胞膜结构的流动性特点。
7．动物细胞融合的优点与应用(1)优点：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。
目前，已有种间、属间、科间，甚至动物与植物之间的细胞融合获得了成功。
(2)应用：是研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。
特别是利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。
植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性和植物细胞的全能性细胞膜的流动性步骤酶解法去掉细胞壁后，诱导原生质体融合，形成杂种体细胞，再经过植物组织培养形成杂种植株分散成单个细胞后诱导细胞融合诱导方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、灭活病毒结果形成杂种植株形成杂种细胞【典题精练1】下列有关植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较，正确的是()A．两者应用的原理都是高度分化的细胞具有全能性B．两者都可用聚乙二醇(PEG)诱导细胞融合C．两者细胞融合成功的标志都是形成融合细胞核D．两者的目的都是用于大量生产分泌蛋白【解析】植物体细胞杂交的原理是细胞膜具有流动性和植物细胞具有全能性，动物细胞融合的原理是细胞膜具有流动性，A错误；聚乙二醇(PEG)既可诱导动物细胞融合，又可诱导植物原生质体融合，B正确；植物体细胞融合成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁，动物细胞融合成功的标志是形成融合细胞核，C错误；植物体细胞杂交的目的是产生杂种植株，动物细胞融合可用于大量生产分泌蛋白，D错误。
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
2．2.2动物细胞融合与单克隆抗体理一理判一判1.常用于诱导动物细胞融合的手段有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射。
(×)2．杂交瘤细胞进行体内培养，是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎。
(×)3．在动物细胞融合过程中，使用胰蛋白酶处理有利于杂交瘤细胞的形成。
(×)4．将抗原注入小鼠体内，以获得相应的B淋巴细胞。
(√) 5．细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，创造出了许多动物、植物的新物种。
(×)6．筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞时，需要运用到抗原—抗体杂交的方法。
(√)7．经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产。
(×)8．生物导弹是指将单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合。
(√)悟一悟1.动物细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合。
其中细胞膜融合是细胞融合的先导，细胞核融合是细胞融合的实质。
2．融合处理后的细胞不可以直接用于培养，还需要筛选。
因为诱导融合的手段只是促使细胞间的融合，不能保证所有的细胞都发生融合，形成的融合细胞也有多种，因此需要进行筛选。
3．细胞融合技术与有性杂交不同。
有性杂交有着十分严格的时空关系和物种界限；动物细胞融合则不同，它通过人工的方法克服了存在于物种之间的遗传屏障，从而能够按照人们的意愿，把不同物种的不同组织类型的细胞融合在一起。
4．对动物进行免疫的原因：B淋巴细胞要经过免疫过程，即接触抗原，增殖分化为有特异性免疫功能的B淋巴细胞，才能产生相应的抗体，所以，与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞实际上是浆细胞。
5．融合过程中，有同种细胞间的融合和不同种细胞间的融合，还有未融合的细胞。
6．杂交瘤细胞的特点：既能无限增殖，又能产生专一性抗体。
7．能产生特定抗体的杂交瘤细胞在小鼠腹腔内培养与体外培养相比，优点是不需特定的培养基，不需严格的外界环境条件。
感悟体会：练一练1.[2019·江苏卷](多选)如图为细胞融合的示意图，下列叙述正确的是()A．若a细胞和b细胞是植物细胞，需先去(脱)分化再诱导融合B．a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现C．c细胞的形成与a、b细胞膜的流动性都有关D．c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因解析：若a细胞和b细胞是植物细胞，应先用酶解法去掉它们的细胞壁再诱导融合，A错误；无论是动物细胞还是植物细胞，两个细胞的融合都需要促融处理后才能实现，B正确；两个细胞融合成一个细胞，利用了细胞膜的流动性，C正确；c细胞同时具备了a细胞和b细胞中的所有基因，但是基因是选择性表达的，因此c细胞中基因不一定都能够表达，D错误。
2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体导学案二
源
②用于治疗疾病和 二、深入学习
知识点一、单克隆抗体
，使动物产生抗体；②从动物血清 【自主学习】阅读课本 P52-54 相关内容，尝试写出单克隆抗体的制备过程 单克隆抗体的制备过程：
C．②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞 D．抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性 3.某研究者用抗原(A)分别免疫 3 只同种小鼠(X、Y 和 Z)，每只小鼠免疫 5 次，每次免疫一周后 测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)，结果如下图所示。
筛选 方法 若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的 B 淋巴细胞(染色体数目为 40 条)，并将该细胞与体外 筛选 目的 得到杂交瘤细胞 得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目为 60 条)按一定比例加入试管中， 再加入聚乙二醇诱导细胞 融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗 A 抗体的杂交瘤细胞。 回答下列问题： 3.利用生物导弹治疗癌症 (1)组成：“生物导弹”＝抗癌细胞的单克隆抗体＋化学药物(或放射性同位素或细胞毒素)。 (2)原理：单克隆抗体和癌细胞表面的特定抗原专一性结合，使药物定向作用于癌细胞。 (3)优点：用药量小、疗效高、毒副作用小。 (1)制备融合所需的 B 淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到 16 000 以上，则小鼠 最少需要经过________次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的 X、Y、Z 这 3 只免疫小鼠中， 最适合用于制备 B 淋巴细胞的是________小鼠，理由是___________________。 (2) 细 胞融 合实 验 完成 后， 融 合体 系 中除 含有 未融 合 的细 胞 和杂 交瘤 细胞 外 ，可 能 还有 __________________________________________________，体系中出现多种类型细胞的原因是 ___________________________________。 (3)杂交瘤细胞中有________个细胞核，染色体数目最多是________条。 (4)未融合的 B 淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是____________________ 四、课后反思
高中生物选修3精品学案：2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体[学习目标] 1.掌握动物细胞融合的原理和方法。
2.归纳单克隆抗体的制备过程及应用。
[核心素养] 1.科学思维：通过学习单克隆抗体的制备过程，养成独立思考和独立学习的习惯，培养自学能力。
2.社会责任：了解单克隆抗体技术在实际生产与生活中的应用。
一、动物细胞融合1.概念：两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交。
2.原理：细胞膜的流动性。
3.诱导融合的方法(1)物理、化学方法：与植物体细胞杂交相同，如聚乙二醇(PEG)、电激等。
(2)生物方法：灭活的病毒。
4.过程：具有不同遗传信息的两个或多个细胞――――――→灭活的病毒PEG 、电激等杂交细胞。
5.结果：形成单核细胞，具有原来两个或多个细胞的遗传信息，可表现出两个或多个亲本的特点。
6.意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。
如：利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。
归纳总结1.对动物细胞融合的理解(1)动物细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合。
其中细胞膜融合是细胞融合的先导，细胞核融合是细胞融合的实质。
(2)融合处理后的细胞不可以直接用于培养，还需要筛选。
因为诱导融合的手段只是促使细胞间的融合，不能保证所有的细胞都发生融合，形成的融合细胞也有多种，因此需要进行筛选。
(3)细胞融合技术与有性杂交不同。
有性杂交有着十分严格的时空关系和物种界限；动物细胞融合则不同，它通过人工的方法克服了存在于物种之间的遗传屏障，从而能够按照人们的意愿，把不同物种的不同组织类型的细胞融合在一起。
2.生物工程技术产生后代个体的遗传物质或基因来源(1)转基因生物：目的基因来自外源生物，绝大多数基因来自两个亲本。
(2)杂种植株：遗传物质来自融合的两个亲本细胞。
(3)经细胞培养获得的动物细胞：遗传物质只来自一个亲本。
人教版生物选择性必修三学案：2.2.2-动物细胞融合技术与单克隆抗体-【含解析】
二动物细胞融合技术与单克隆抗体必备知识·素养奠基一、动物细胞融合技术1.概念:使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
2.原理:细胞膜的流动性。
3.诱导融合常用的方法:(1)物理:电融合法。
(2)化学:PEG融合法。
(3)生物:灭活病毒诱导法。
4.判一判:基于细胞融合的技术及其应用,判断下列说法的正误: (1)在动物细胞融合过程中,既有细胞膜的融合,也有细胞核的融合过程。
(√)(2)细胞融合突破物种间的生殖隔离,实现了远缘杂交。
(√)(3)目前细胞融合只能在动物和动物之间、植物和植物之间进行,不能实现动物和植物的细胞融合。
(×)提示:至今,动物和植物之间的细胞融合也获得了成功。
(4)动物细胞融合为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤等提供重要的手段。
(√)(5)二倍体动物细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞。
(×)提示:杂交细胞具有4个染色体组,应该是四倍体细胞。
诱导动物细胞融合与植物体细胞杂交融合的方法有什么不同?提示:动物细胞融合能用灭活的病毒进行诱导,植物体细胞杂交融合不能采用此方法。
二、单克隆抗体及其应用1.制备原理:(1)B淋巴细胞的特点:一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体,B淋巴细胞在体外不能(填“能”或“不能”)无限增殖。
(2)骨髓瘤细胞的特点:能无限增殖。
(3)杂交瘤细胞的特点:既能大量增殖,又能产生特异性抗体。
2.制备过程:填一填:基于单克隆抗体制备的过程,完成下列问题。
(1)A操作注射特定的抗原,目的是可以从小鼠的脾中得到产生特定抗体的B淋巴细胞。
(2)杂交瘤细胞技术选择融合的两种细胞:细胞①多种B淋巴细胞,细胞②骨髓瘤细胞。
(3)过程B和C为诱导细胞融合的过程,获得的细胞③是多种(填“一种”或“多种”)。
(4)细胞③到细胞④的过程使用特定的选择培养基进行筛选,只有细胞④杂交瘤细胞才能生长,其他细胞不能生长。
(5)细胞⑤来源于细胞④(填数字序号),细胞⑤为抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞,其分泌的抗体能与特定的抗原结合。
专题2.2.2学案
专题2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体【学习目标】1.对比植物体细胞杂交，掌握动物细胞融合技术。
2.掌握单克隆抗体技术。
3.举例说出动物细胞融合与单克隆抗体应用。
【重点难点】单克隆抗体的制备和应用【课时安排】一课时【自主预习及检测】阅读课本52—55页，完成练习册【自主预习】中的内容【合作探究】1.什么叫动物细胞融合？2.动植物细胞在结构上有何区别？这对它们杂交或融合过程有什么影响？3.动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？两者的融合过程是否也一样？4.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合有什么不同呢？5.为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？不灭活行吗？灭活的病毒PEG 杂交细胞6.什么是抗体？什么是单克隆抗体？抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。
由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。
7.如何大量生产单克隆抗体？8.单克隆抗体制备过程是什么？9.根据单克隆抗体制备过程回答以下问题：①本过程利用了哪些原理？②为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？【当堂检测】一、动物细胞融合1．概念：＿＿＿＿＿＿动物细胞结合形成一个细胞的过程，又叫细胞杂交。
2．结果：形成＿＿＿＿细胞。
3．过程：不同＿＿＿＿＿的两个细胞选择 B 淋巴细胞 抗原 刺激 骨髓瘤细胞克 隆 检测 ＿＿＿＿＿ 浆细胞 杂交瘤细胞 单克隆抗体 B －B 细胞 瘤－瘤细胞 杂交瘤细胞 体外培养 4．意义：克服了＿＿＿＿杂交的不亲和性。
二、单克隆抗体1．抗体的产生：＿＿＿＿＿＿产生的抗体具有特异性。
2．单克隆抗体的制备：（1）过程：（2）杂交瘤细胞特点：既能（3）单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、产量大。
3．单克隆抗体的应用：（1）作为诊断试剂：准确识别各种＿＿＿＿＿物质并特异性结合。
（2）用于治疗疾病和运载药物：制成“＿＿＿＿＿＿”。
高中生物选修3优质教学设计12：2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 教案
动物细胞融合之单克隆抗体
师：如果只考虑细胞两两融合的话，过程中总共可以获得三种融合细胞，分别是B细胞间的融合，骨髓瘤细胞间的融合以及B细胞与骨髓瘤细胞间的融合，在这里我们通过选择性培养基筛选出B细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞，也叫杂交瘤细胞。
这些杂交瘤细胞具有既能无限增殖，又能产生专一抗体的特点。
师：由于小鼠体内存在着产生其它抗体的B淋巴细胞，我们筛选出来的杂交瘤细胞可能有多种，而要获得只产生一种抗体的杂交瘤细胞，这里还需要一次筛选，方法是将每一个杂交瘤细胞进行克隆化培养同时进行抗体检测。
师：获得杂交瘤细胞后，我们可以将杂交瘤细胞在体外大规模培养，从细胞培养液中就能提取大量的单克隆抗体；或者是把杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖，再从小鼠腹腔中提取单克隆抗体。
师：通过这种方法生产出来的抗体由于是单个B淋巴细胞产生的，所以具有特异性强，灵敏度高的优点，目前在我们的临床医学上已经广泛使用。
（学生阅读教材“单克隆抗体的应用”，归纳总结单克隆抗体的用途。
高中生物 专题2 细胞工程 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体名师公开课省级获奖课件 新人教版选修3
A.①表示已免疫的 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提 取的
B.②促进细胞融合的方法可以利用聚乙二醇诱导 C.④中的筛选是通过抗原—抗体反应进行的 D.⑤可以无限增殖
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J 基础知识 ICHU ZHISHI
Z 重点难点 HONGDIAN NANDIAN
S 随堂练习 UITANG LIANXI
单克隆抗体
●问题导引●
长期以来,人们生产抗体的常规方法是向动物体内反复注射某种抗原, 使动物产生抗体,然后,从动物血清中分离所需抗体。思考:(1)生产抗体的常 规方法有何不足?(2)单克隆抗体制备技术弥补了常规生产抗体技术的不足, 单克隆抗体主要有哪些优点?(3)简述制备单克隆抗体的大致思路。
探究一
S 随堂练习 UITANG LIANXI
探究一
探究二 易错点排查
变式训练单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生
命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述,错误的是
() A.特异性强、灵敏度高 B.与抗癌药物结合可制成“生物导弹” C.体外培养 B 淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体 D.由效应 B 细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌 解析:单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高,与抗癌药物结合可制
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S 随堂练习 UITANG LIANXI
探究一
探究二 易错点排查
4.单克隆抗体制备过程的几个问题分析 (1)对动物免疫的原因:B 淋巴细胞要经过免疫过程,即接触抗原,增殖分 化为有特异性免疫功能的 B 淋巴细胞,才能产生相应的抗体,所以,最后筛选 出的与骨髓瘤细胞融合的 B 淋巴细胞实际上是效应 B 细胞。 (2)对杂交瘤细胞的选择:经过免疫的 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞杂交获 得三种融合细胞(仅考虑两个细胞融合的情况),即 B 淋巴细胞与 B 淋巴细胞 融合形成的融合细胞、B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞、 骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合形成的融合细胞,然后用选择培养基筛选获 得杂交瘤细胞。杂交瘤细胞可发挥其繁殖快、产生特异性抗体的优点。 (3)杂交瘤细胞具备双亲的遗传物质,不仅具有效应 B 细胞产生特异性 抗体的能力,还具有骨髓瘤细胞在体外培养条件下无限增殖的能力,从而可 以克服单纯 B 淋巴细胞不能无限增殖的缺点,而大量生产单克隆抗体。
2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体——导学案
专题二细胞工程——动物细胞工程2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体学案班级姓名学号学习目标1.说出动物细胞融合原理、过程和方法。
2.掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。
3.简述单克隆抗体制备的过程，了解单克隆抗体的应用。
课前预习一、动物细胞融合1.概念：_______或_______动物细胞结合形一个细胞的过程，也称细胞杂交。
2.动物细胞融合的原理是什么？3.诱导动物细胞融合的方法有哪些? 与诱导植物原生质体融合的方法完全一样吗？4.尝试用必要的文字和箭头写出植物体细胞杂交的过程。
5.尝试用必要的文字和箭头写出动物细胞融合的过程。
融合成功的标志是？融合成一个核6.意义：克服了___________的不亲和性，成为研究___________、___________、肿瘤和_______________培育的重要手段。
当堂练习1图3-9人的基因型为Aa与鼠的基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞( )A.AAaaB.AaBbC.AabbD.BBbb7.植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较（学生填下表）二、单克隆抗体1.抗体的传统生产方法及缺陷是什么？a.方法：b.缺陷：2.抗体是由哪种细胞产生的？抗体的化学本质是什么？3.制备单克隆抗体的设想：利用产生特异性抗体的功能。
利用无限增殖的特性。
利用____________________技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞。
利用____________________技术大量培养杂交瘤细胞。
4.产生单克隆抗体的是什么细胞？该细胞是由哪两种细胞融合而成的？该细胞有什么特点？5..尝试用必要的文字和箭头总结制备单克隆抗体的过程。
制备产生特定抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的，然后从小鼠内获得B淋巴细胞获得杂交瘤细胞：将小鼠的细胞与细胞融合，用特定的进行筛选细胞，该杂种细胞既能又能产生抗体。
克隆化培养和抗体检测：筛选出能杂交瘤细胞。
2.2.2_(公开课)动物细胞融合与单克隆抗体
1.3动物细胞融合技术的意义和应用
突破有性杂交方法的局限，使远 缘杂交成为可能
最主要用途：制造单克隆抗体
1.4 比较动、植物细胞杂交技术
比较项目
原理
植物体细胞杂交
细胞膜的流动性 细胞的全能性 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 纤维素酶、果胶酶
动物细胞融合
细胞膜的流动性 使细胞分散后 诱导细胞融合 胰蛋白酶
• 单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学 性质单一、特异性强的抗体
2.2单克隆抗体的制备
问题：如何大量生产单克隆抗体？请尝试设 计一个方案。 提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？ 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？
1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验 设计方案： 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 单克隆 动物细胞培养技术 杂交瘤细胞 动物细胞融合技术 抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞
（3）大量制备单克隆抗体的方法主要有两种： ①体外培养法，可获得10μg/mL的抗体；②动物体内 诱生法可获得5~20mg/mL的抗体。你选择的方法及原 因是 大量生产选①，小规模生产选② 。
（4）用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限性，因 效应B 细胞制备的，其化学本质是 为它是用小鼠的_______ 蛋白质 ，应用于人体，会作为 异物 产 ___________ 生 免疫反应，解决这个问题的方法是 采用人的效应B细胞制备 _____________________________ 。
融合前处理 使用的酶
诱导方法
物理方法 物理、化学方法 （离心、振荡、电激） 生物法（灭活的病 化学方法（PEG） 毒）
主要用途
获得杂种植株
制备单克隆抗体
2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体
因此可以利用小鼠骨髓瘤细胞与之融合， 就可获得既能无限增殖又能产生单一抗 体的细胞。
单克隆抗体的制备
• 单克隆抗体:单个细胞克隆产生的化学性质
单一特异性强的抗体
设计方案思路：
利用效应B细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得杂
交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞
6、动物细胞融合有什么意义？
一、动物细胞融合
1.概念：
动物细胞融合（cell fusion）也成细胞杂 交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细 胞的过程。 融合和形成的具有原来两个或多个细胞遗传 物质的单核细胞，称为杂交细胞。
2、原理：细胞膜的流动性
有些细胞的融合是正常的生命活动。如 精子与卵细胞的结合。
保留融合活性（诱导细胞融合）
因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和
脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合
病毒的使用？
病毒在免疫调节中是抗原，在基因工程中可为
载体，在细胞工程中可为诱导剂。 灭活病毒是动物细胞融合的诱导剂，一般不用 植物体细胞融合过程。
两个核的融 合是在杂种 细胞第一次 有丝分裂时 进行的
受精作用
两个细胞正在融合
离心、振动、 物理方法： 电激等 3.诱导方法： 化学法： 聚乙二醇（PEG)
生物法： 灭活的病毒
4.融合过程：
为什么灭活的 病毒能作诱导剂？
什么是病毒的灭活？ 灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能 力，但是并不破坏病毒的抗原结构。
仙台病毒
紫外线
灭活
丧失感染活性（不感染细胞）
单克隆抗体的制备
那么，如何大量获得化学性质单一、特异 性强的抗体？（即单克隆抗体）
人教版高中生物选修三学案：2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体【导学目标】1．举例说出动物细胞融合技术及其应用。
2．举例说出单克隆抗体技术及其应用。
【自主学习】一、动物细胞融合1.概念： 动物细胞结合形成 细胞的过程，也称细胞杂交。
2．过程：含不同DNA 的两个或多个细胞――→灭活的病毒PEG ，电激 细胞。
3．结果：形成 细胞。
4．意义：细胞融合技术突破了 方法的局限，使 成为可能。
二、单克隆抗体1.传统获得的抗体(1)方法：①向动物体内反复注射某种 ，使动物产生 ；②从动物 中分离所需抗体。
(2)缺点：产量低、纯度低、 。
2．单克隆抗体的制备(1)过程（见教材图解2-24）(2)杂交瘤细胞的特点： ，产生 。
(3)单克隆抗体的优点： ， ，产量大。
3．单克隆抗体的应用(1)作为诊断试剂，具有准确、 、简易、 的优点。
(2)用于 和 。
思考交流1．动物细胞融合与植物原生质体融合所依据的原理是什么？2．“生物导弹”中借助于单克隆抗体的导向作用，能将药物定向带入癌细胞内，其中药物的进入是什么方式？为什么？正误判断1．动物细胞融合与植物原生质体融合都可以用灭活的病毒促进融合。
( )2．制备单克隆抗体时，必需选用免疫过的小鼠。
( )3．单克隆抗体具备纯度高、特异性强等特点，在诊断的应用上具有准确、高效、快速的优点。
( )4．“生物导弹”杀死癌细胞的同时，对正常细胞也同样有杀伤力。
( )【合作探究】例1如图所示为细胞融合技术的一些过程：(1)从A、B细胞到C细胞的过程中，必须用________处理。
(2)若A、B细胞为植物细胞，那么这样的细胞已经用酶降解脱掉了________，这种酶可能是________酶，由此生成的A和B细胞称为________。
(3)若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为B淋巴细胞，那么D细胞称为________细胞，由D 细胞连续分裂产生大量细胞的过程称为________过程。
这种细胞既能无限繁殖，又能产生________。
(完整)动物细胞融合与单克隆抗体 学案
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专题二细胞工程——.动物细胞工程2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体课前预习学案一、预习目标预习动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程，了解单克隆抗体在医学实践中的应用,并说其应用实例。
“二、预习内容㈠、动物细胞融合1、概念：_______或_______动物细胞结合形一个细胞的过程,也称细胞杂交.2、结果：形成___________。
3、过程：两个或多个细胞___________________________________. 4、意义：克服了___________的不亲和性，成为研究___________、___________、肿瘤和 _______________培育的重要手段.㈡、单克隆抗体1、抗体⑴产生细胞：_________________。
⑵成分：__________。
⑶特点：从__________中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。
2、单克隆抗体的制备(1）过程⑵杂交瘤细胞的特点：____________________、____________________。
⑶单克隆抗体的优点:____________、____________、____________。
㈢、单克隆抗体的应用1、作为诊断试剂，具有__________、__________、__________、__________的优点。
2、用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗_______、可制成___________。
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【学习目标】
1理解和掌握动物细胞融合的原理、过程和意义。
2、列表比较动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同。
3、理解和掌握单克隆抗体制备的过程的步骤和应用。
【预习案】
一、动物细胞融合
1、概念：动物细胞融合也称_________________ 就是指________________ 物细胞结合形成____________ ■勺过程。
结果：_____________
2、动物细胞融合过程：
复习植物体细胞杂交过程，自学书P52,完成下表。
二、复习免疫调节
1 抗原：能够引起机体产生___________________ ■勺物质；
抗体：能够与抗原发生特异性结合的_____________________________ o能产生抗体的细胞是
2、体液免疫过程直接刺激
抗原与抗体结合，抗原失去活性，最终被吞噬细胞清除。
三、单克隆抗体
1原理：一种B淋巴细胞只分泌一种____________ , B淋巴细胞在体外__________ 殖，而肿瘤细胞具有_________ 曾殖的特点，将单个B淋巴细胞与__________________ 4合，可以使杂种细胞具有两个亲本的遗传特性，既能__________ 曾殖，又能产生 ____________ ，即单克隆抗体。
2、_______________________________________________ 单克隆抗体：
3、单克隆抗体的制备过程
（1）__________________________________________过程：B淋巴细胞+骨髓瘤细胞 - ____ 田胞、田胞、 ____________________________________田胞、
_________ 田胞、_________ 田胞一____________ 一杂交瘤细胞-克隆化培养和专—抗体检测—_________ —单克隆抗体
（2）杂交瘤细胞的特点：既能在体外大量___________ 又能产生______________ 体。
（3）单克隆抗体的优点：_____________ 、 ___________ 并能大量制备。
4、在生产上的应用：（1）作为诊断试剂，准确识别各种_____________ 质并特异性结合。
（2）用于治疗疾病和运载药物，制成“ ________________ 。
【探究案】
探究一：动物细胞的融合
1为什么灭活的病毒能作为诱导剂？不灭活的病毒能作为诱导剂吗？
2融合后细胞的类型？杂种细胞遗传物质有什么特点?
探究二：单克隆抗体制备的原理和过程
1传统的抗体生产方法及缺陷是什么？
2怎样筛选出杂交瘤细胞，有几次筛选，杂交瘤细胞有何优点？原因?
3单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确
顺序连接起来。
顺序是？
已免疫B淋巴细胞注船特定抗原培养骨飽瘤细胞杂交角细胞体外培养
骨髓瘤细胞
F
阳性细胞
E
单克隆抗体
G
抗体检验呈
H
用阳性细胞
注射小鼠
I
(1) _________________________ 若A 细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则 前，应给小鼠注射
(2) d 过程是一个 _____________ 过程，该过程的进行常用 ________________ 或 ______________ 的诱导。
(3) 假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成 _____________ 种类型的C 细胞，因此需用 _____________ 培养基筛选 出D 细胞用于培养，D 细胞的名称是 _____________ ，其特点是 ____________________________________________ (4) 在培养时通过 _________ 分裂方式大量繁殖。
D 细胞体外培养需要注意的条件是(要求答
5项)
(5)
单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是 __________________ 。
板上培养，筛选。
④ 这样获得的杂交瘤细胞既具有
B 淋巴细胞 _____________ 的能力，又具有 _____________________ 的本领。
【训练案】 1能使动物细胞融合的特有的诱导因子是
A.离心
B. 灭活的病毒
C.电刺激
D. ) 振动
2融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点( A.具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B. 能无限增殖 C.可形成新个体 D.培养过程会贴壁 3动物细胞融合的作用中最重要的是( A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D. 生产杂种细胞
4科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细 胞融合的是( ) A.经过免疫的B 淋巴细胞 C.经过免疫的T 淋巴细胞 B.不经过免疫的T 淋巴细胞D.不经过免疫的B 淋巴细胞 5单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的 A 淋巴细胞 C .骨髓瘤细胞 D .杂交瘤细胞 6用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是( ) A •将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的 B 淋巴细胞
B •用纤维素酶处理 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C •用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的
B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D •筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体 7、 F 图是单克隆抗体制备过程示意图，据图回答: 体内培养 小鼠
C D 单克隆 抗体 B 细胞是取自小鼠体内的 类物质。
休外培养
______ 细胞，从小鼠体内提取分离该细胞之
⑤检测和分离带有抗X抗体的阳性细胞，培养板中每孔放一个细胞进行培养。
⑥将阳性细胞进行增殖，从而制备出大量抗该抗原的单克隆抗体。
8、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法， 设计的
生产破伤风杆菌抗体的实验方案。
据图回答： (1)该方案能达到预期效果吗？ _________ 。
原
因是 O (2 )图中②为_
作为诱导剂。
该细胞继承了 因此不仅能分泌 _____ 本领。
过程，常用
___________ ?
，还有
(3) 该方案的目的是 骨骸廂细胞
a w
培养的杂
交靖细胞 ⑥**克隆后分离的
杂交瘤细胞
抗体。