动物细胞融合与单克隆抗体学案

2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体

一、动物细胞融合

1、概念：也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。

2、杂交细胞：融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。

3、原理：细胞膜具有一定的流动性。

4、过程：

5、诱导动物细胞融合的方法：

a.物理方法（离心、振动、电激）；

b.化学方法（聚乙二醇）。

c.生物方法：灭活的病毒。

特别提醒：灭活是指用物理或化学的手段使病毒或细菌失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。

6、动物细胞融合用途：研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手

段。

7、意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。

二、单克隆抗体

1、抗体：一个B淋巴细胞接受抗原刺激只能分泌一种特异性抗体。

2、传统获取抗体：

(1)方法：向动物体内反复注射抗原，使动物产生抗体，从动物的血清中分离所需抗体。

(2)传统获取抗体方法的缺陷：产量低、纯度低、特异性差。

3、米尔斯坦和柯勒的实验方案:

4、单克隆抗体制备过程中的筛选及原因：

(1)第一次筛选是在B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合之后，因为有三种融合情况：B淋巴

细胞与B淋巴细胞融合、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，而只有B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合细胞才是需要的杂种细胞。

(2)第二次筛选需先在多孔培养皿上培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始

培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。由于该细胞群是由单个杂交瘤细胞克隆来的，所以产生的抗体一定是化学性质单一、特异性强的单克隆抗体。5、常见易错点：

杂交瘤细胞的特点：既能大量繁殖，又能产生专一的抗体。

单克隆抗体特点：化学性质单一、特异性强、灵敏度高。

6、单克隆抗体制备过程图示：

7、单克隆抗体的应用：

①作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，

具有准确、高效、简易、快速的优点。

②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”，也有少量用

于治疗其它疾病。

8、单克隆抗体制备过程中的动物细胞培养方法：

体内培养：将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内，从小鼠腹水中提取单克隆抗体。

体外培养：将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，从细胞培养液中提取单克隆抗体。

9、植物细胞工程与动物细胞工程的比较：

10、植物体细胞杂交与动物细胞融合的区别比较

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