公开课动物细胞融合与单克隆抗体
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动物细胞融合与单克隆抗体(讲课课件)
谢
谢
动物细胞融合与单克隆抗体
黄冈中学
屈泽兵
动物细胞融合（细胞杂交） 一、动物细胞融合（细胞杂交） 概念分解： 概念分解：
人工诱导
两个或多个细胞 杂交细胞： 杂交细胞： 融合形成 具有多个细胞遗传信息 单核细胞 融合原理： 融合原理：细胞膜具有流动性 诱导方法：物理、化学、 诱导方法：物理、化学、生物方法
（2）单克隆抗体的应用
优点： 单一成分的抗体，特异性强，灵敏度高， 优点：是单一成分的抗体，特异性强，灵敏度高， 的抗体 可大量制备。 可大量制备。 诊断剂：疾病诊断、病原体鉴定、 诊断剂：疾病诊断、病原体鉴定、肿瘤诊断等 治疗或运载药物：单独使用，清除抗原 治疗或运载药物：单独使用， 与其他药物结合使用， 与其他药物结合使用，利用抗体 进行准确导向 准确导向。 进行准确导向 讨论一下： 讨论一下： 什么样的情况下需要用到“生物导弹”技术？ 什么样的情况下需要用到“生物导弹”技术？ 如何利用“生物导弹”技术对癌细胞进行定位？ 如何利用“生物个细胞作为祖细胞， 单克隆：用一个细胞作为祖细胞，通过分裂得 作为祖细胞 很多相同的细胞。 到很多相同的细胞。 （1）单克隆抗体的制备
原理：一个B细胞分泌一种抗体， 原理：一个B细胞分泌一种抗体，瘤细胞能无限增殖
抗原 B淋巴细胞 体外培养 杂交瘤细胞 克 筛 选 骨髓瘤细胞 合 、 的 细 胞 产 生 体内培养 特 细 隆 胞 融 群 培 养 定 抗 体 选 出 能 单克隆抗体
杂交细胞
融合过程
病毒颗粒
细胞核
灭活病毒黏附 于细胞表面
细胞膜被病 毒颗粒穿通
细胞膜连接
形成杂种细胞
应用： 应用：最重要的用途是制备单克隆抗体
带问题看书： 带问题看书：
公开课动物细胞融合与单克隆抗体ppt课件
目的获：得产生
相应抗体的B 细胞
（二选）：选 能产生所需专
一抗体的杂 交瘤细胞
体外培养 小鼠腹腔内培养
ppt课件.
√ BB 、B瘤 、瘤瘤
（B、瘤）
（一选）选 择性培养基：
只有杂交 瘤细胞才
能存活
14
2.2单克隆抗体的应用 特异性强
单克隆抗体最主要的优点：灵敏度高
并能大量制备
诊断试剂——最广泛应用
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合，形成杂交细胞
（细胞膜具有一定的流动性）
ppt课件.
8
1.2动物细胞融合过程
为什么灭活的 病毒能作诱导剂？
灭活丧失感染性 保留融合活性
ppt课件.
9
1.3动物细胞融合技术的意义和应用
意义：
Hale Waihona Puke 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交 成为可能
应用： 制备单克隆抗体（最主要的应用）
但是体外
怎样大量
？ 获得单一 抗体
培养的细胞 不能无限增
殖
癌细胞
既能产生特异性抗体，
又pp能t课件大. 量增殖的细胞 12
你的设想
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖
单克隆 动物细胞培养技术 杂交瘤细胞
抗体
动物细胞融合技术
既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞
ppt课件.
13
细胞继承了_双__亲__细__胞__的__遗__传__物__质____ ，因此不仅能分泌 特异__性__抗__体_____ ，还有 大量增殖 本领。
（3）该方案的目的是__制__备__单__克__隆__抗__体___________。
动物细胞融合与单克隆抗体上课课件
对单克隆抗体的研究、生产和应用进行伦 理审查，确保符合伦理原则和法律法规。
05
动物细胞融合与单克隆抗体的研 究进展
动物细胞融合技术的最新研究进展
诱导剂研究
科研人员不断探索新的诱导剂，以提高动物细胞融合的效率，降低融合过程中的副作用。
基因编辑技术在动物细胞融合中的应用
基因编辑技术如CRISPR-Cas9为动物细胞融合提供了更精确的遗传修饰手段，有助于产生具有特定功能的融合细 胞。
单克隆抗体技术的最新研究进展
人源化抗体技术
通过基因工程技术，将动物来源的单 克隆抗体进行人源化改造，以提高其 与人体免疫系统的相容性。
单克隆抗体药物优化
针对单克隆抗体药物的稳定性、半衰 期、亲和力等关键指标进行优化，以 提高其治疗效果和降低副作用。
动物细胞融合与单克隆抗体技术的未来发展方向
新型动物细胞融合方法的探索
02
融合后的细胞通常保留了亲代细 胞的某些生物学特性，并有可能 表现出新的生物学特性。
动物细胞融合的方法
化学法
利用化学物质（如聚乙二醇）诱导细胞融合。
电融合法
通过电场作用诱导细胞融合。
生物法
利用病毒（如仙台病毒）诱导细胞融合。
动物细胞融合的意义
生产单克隆抗体
动物细胞融合技术是制备单克隆 抗体的关键步骤，通过将免疫细 胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交 瘤细胞，进而产生单克隆抗体。
参考标准品
02
03
标准化流程
建立并使用参考标准品，为单克 隆抗体的质量控制和标准化提供 依据。
制定标准化的生产流程，确保从 细胞融合、筛选到抗体纯化、检 测的每一步都符合标准。
单克隆抗体生产中的伦理问题
动物福利
在单克隆抗体生产过程中，应关注动物 福利，采取适当的措施减少动物的痛苦 和不适。
05
动物细胞融合与单克隆抗体的研 究进展
动物细胞融合技术的最新研究进展
诱导剂研究
科研人员不断探索新的诱导剂，以提高动物细胞融合的效率，降低融合过程中的副作用。
基因编辑技术在动物细胞融合中的应用
基因编辑技术如CRISPR-Cas9为动物细胞融合提供了更精确的遗传修饰手段，有助于产生具有特定功能的融合细 胞。
单克隆抗体技术的最新研究进展
人源化抗体技术
通过基因工程技术，将动物来源的单 克隆抗体进行人源化改造，以提高其 与人体免疫系统的相容性。
单克隆抗体药物优化
针对单克隆抗体药物的稳定性、半衰 期、亲和力等关键指标进行优化，以 提高其治疗效果和降低副作用。
动物细胞融合与单克隆抗体技术的未来发展方向
新型动物细胞融合方法的探索
02
融合后的细胞通常保留了亲代细 胞的某些生物学特性，并有可能 表现出新的生物学特性。
动物细胞融合的方法
化学法
利用化学物质（如聚乙二醇）诱导细胞融合。
电融合法
通过电场作用诱导细胞融合。
生物法
利用病毒（如仙台病毒）诱导细胞融合。
动物细胞融合的意义
生产单克隆抗体
动物细胞融合技术是制备单克隆 抗体的关键步骤，通过将免疫细 胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交 瘤细胞，进而产生单克隆抗体。
参考标准品
02
03
标准化流程
建立并使用参考标准品，为单克 隆抗体的质量控制和标准化提供 依据。
制定标准化的生产流程，确保从 细胞融合、筛选到抗体纯化、检 测的每一步都符合标准。
单克隆抗体生产中的伦理问题
动物福利
在单克隆抗体生产过程中，应关注动物 福利，采取适当的措施减少动物的痛苦 和不适。
动物细胞融合与单克隆抗体(教案)
动物细胞融合与单克隆抗体(教案)第一章：动物细胞融合概述1.1 动物细胞融合的定义与意义1.2 动物细胞融合的方法1.3 动物细胞融合的应用第二章：细胞融合的诱导方法2.1 物理方法2.1.1 电融合法2.1.2 超声波融合法2.2 化学方法2.2.1 聚乙二醇(PEG)融合法2.2.2 灭活病毒融合法2.3 生物方法2.3.1 细胞表面分子的诱导2.3.2 细胞内信号传导途径的诱导第三章：单克隆抗体的制备与鉴定3.1 杂交瘤技术的原理及流程3.1.1 杂交瘤技术的原理3.1.2 杂交瘤细胞的筛选与克隆化3.1.3 单克隆抗体的生产与纯化3.2 单克隆抗体的性质鉴定3.2.1 抗体特异性鉴定3.2.2 抗体亲和力鉴定3.2.3 抗体效价测定第四章：单克隆抗体的应用4.1 诊断方面4.1.1 酶联免疫吸附试验(ELISA)4.1.2 免疫荧光技术4.1.3 免疫组化技术4.2 治疗方面4.2.1 抗体药物4.2.2 抗体介导的免疫治疗4.2.3 抗体工程第五章：动物细胞融合与单克隆抗体的研究进展5.1 重组抗体技术5.1.1 重组抗体的制备方法5.1.2 重组抗体的应用5.2 抗体的人源化5.2.1 人源化抗体的制备方法5.2.2 人源化抗体的优势及应用5.3 抗体生物制药的发展趋势5.3.1 抗体药物的联合应用5.3.2 纳米抗体技术5.3.3 抗体药物的个性化治疗第六章：细胞融合的效率与优化6.1 影响细胞融合效率的因素6.1.1 细胞类型与状态6.1.2 诱导方法的选择与优化6.1.3 融合条件与时间的控制6.2 提高细胞融合效率的策略6.2.1 细胞预处理技术6.2.2 融合诱导剂的浓度与处理时间6.2.3 融合过程中的物理和化学条件控制第七章：杂交瘤细胞的筛选与克隆化7.1 筛选杂交瘤细胞的方法7.1.1 选择性培养基的筛选7.1.2 HAT选择性培养基的原理与应用7.1.3 筛选过程中的计数与纯度评估7.2 克隆化培养技术7.2.1 有限稀释法7.2.2 显微镜手工分离法7.2.3 自动化克隆化技术第八章：单克隆抗体的生产与纯化8.1 单克隆抗体的生产8.1.1 体外培养体系的设计8.1.2 培养条件的优化8.1.3 细胞株的生产能力评估8.2 单克隆抗体的纯化8.2.1 纯化方法的选择8.2.2 蛋白质A/G纯化法8.2.3 离子交换色谱和凝胶过滤色谱第九章：单克隆抗体的特性分析与质量控制9.1 抗体特异性分析9.1.1 抗原结合实验9.1.2 交叉反应分析9.1.3 抗体竞争实验9.2 抗体亲和力测定9.2.1 生物素-亲和力实验9.2.2 酶联免疫吸附实验(ELISA)9.2.3 表面等离子共振(SPR)技术9.3 抗体质量控制9.3.1 抗体产量与纯度的控制9.3.2 抗体稳定性的评估9.3.3 抗体生物安全性检测第十章：实验操作指南与常见问题解析10.1 实验操作指南10.1.1 实验材料与设备准备10.1.2 实验步骤与操作流程10.1.3 实验结果记录与分析10.2 常见问题解析10.2.1 细胞融合失败的原因10.2.2 杂交瘤细胞筛选困难的原因10.2.3 单克隆抗体产量低的原因10.2.4 抗体质量问题的排查与解决第十一章：动物细胞融合与单克隆抗体的实验设计11.1 实验目的与意义的确定11.2 实验步骤的设计与优化11.3 实验条件的控制与调整11.4 实验数据的采集与分析第十二章：动物细胞融合与单克隆抗体的研究案例分析12.1 案例一：治疗性抗体的研发与应用12.1.1 案例背景与问题陈述12.1.2 实验设计与方法12.1.3 结果分析与讨论12.2 案例二：诊断用单克隆抗体的开发12.2.1 案例背景与问题陈述12.2.2 实验设计与方法12.2.3 结果分析与讨论第十三章：动物细胞融合与单克隆抗体技术的拓展应用13.1 抗体偶联药物(ADCs)13.1.1 ADCs的制备与性质13.1.2 ADCs的应用与挑战13.2 免疫调节剂的研究13.2.1 免疫调节剂的类型与作用机制13.2.2 免疫调节剂的应用前景13.3 疫苗研发与免疫预防13.3.1 疫苗设计与制备13.3.2 疫苗的临床试验与评价第十四章：动物细胞融合与单克隆抗体技术的未来趋势14.1 基因编辑技术在抗体研究中的应用14.1.1 CRISPR/Cas9技术在抗体基因克隆中的应用14.1.2 基因编辑技术在抗体亲和力增强中的应用14.2 与高通量技术在抗体发现中的应用14.2.1 在抗体设计中的应用14.2.2 高通量筛选技术在抗体筛选中的应用14.3 细胞治疗与组织工程中的应用14.3.1 利用抗体技术促进细胞治疗的发展14.3.2 抗体技术在组织工程中的应用第十五章：教学总结与评价15.1 教学目标的回顾与评估15.2 学生反馈与教学改进15.3 教学资源的整合与优化15.4 课程考核与评价标准重点和难点解析本文主要介绍了动物细胞融合与单克隆抗体的相关知识，重点包括细胞融合的方法、诱导手段、单克隆抗体的制备与鉴定、应用以及研究进展。
动物细胞培养与单克隆抗体制备 公开课
杂交细胞具有 两个或多个细胞的遗传物 质 突破_________________，使 有性杂交局限 远缘杂交 __________成为可能。获得杂
单克隆抗体制备 交细胞，用于_______
二、单克隆抗体制备的过程
问题导引：1.抗体从何而来？ 2.传统抗体制备的方法是什么？弊端有哪些？ 3.能否通过单独体外培养浆细胞的方式大量 获得相应抗体?
2013年3月20日
骨髓瘤细胞
杂交细胞
5.淘汰后的细胞所 产抗体是单一的吗？ 若不是，下一步如 何操作？
6.如何获得大量 的单克隆抗体？
单克隆抗体
B淋巴细胞
细胞融合
骨髓瘤细胞
杂交细胞
5.淘汰后的细胞所 5.不是，下一步应 产抗体是单一的吗？ 进行杂交细胞的克 若不是，下一步如 隆化培养与“专一 抗体检测” 何操作？
1.注射特定抗 1.如何获得特 （浆细胞） 定的浆细胞？ 原 （选择培养基）筛选
2.浆细胞与浆细胞、骨髓瘤 2.融合过程中会出现几种类 细胞与骨髓瘤细胞、浆细胞 型的细胞？若只考虑两两融 与骨髓瘤细胞 合呢？ 筛选（专一抗体检测阳性）克隆
3.该过程得到的细胞 哪种是我们所需要 的？其特点是？ 4.如何淘汰掉我 们不需要的细胞？
【本节知识梳理】
要求：
1.以“单克隆抗体制备”为主线，自 己进行本节知识梳理。 2.完成当堂检测
2013年3月20日
单克隆抗体的制备（小结）
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞
体外培养 小鼠腹腔内增殖
克隆化 诱导 选择 产生所需 融合 多种杂 培养 杂交瘤 培养
交细胞
细胞
抗体 检测
抗体的杂 交瘤细胞
单克隆抗体
应用
体外培养 体内培养
(展示课)动物细胞融合与单克隆抗体(上课)ppt课件
检验阳性细胞
单克隆抗;体.
体外培养 特异性强，灵敏度高
7
单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母 按正确顺序连接起来。顺序是？
;.
8
课堂小结：
现在你能主持“太空婚礼”动物科研项目了吗？
比较项目
植物体细胞杂交
单克隆抗体的制备
原理 融合前处理
促融方法
第一步 过 第二步 程
比较项目植物体细胞杂交单克隆抗体的制备原理融合前处理促融方法用途过程第一步第二步第三步第四步细胞膜的流动性细胞的全能性酶解法去壁物理法化学法膜的流动性细胞增殖小鼠免疫处理细胞分散物理化学生物法原生质体的制备原生质体的融合与筛选杂种细胞的形成与培养杂种植株的鉴定融合亲本细胞的准备动物细胞融合与两次筛选产特定抗体的杂交瘤细胞培养单克隆抗体的分离提纯单抗有助于疾病的诊断治疗预防获得具优良性状的杂种植株课堂小结
培养液中融合细胞
有几种类型？
多种杂交细胞 注射到小鼠体内
骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞
B淋巴细胞--- B淋巴细胞 能产在杂第生该专具交1专细次一有瘤一胞筛抗筛细B抗继淋选体选胞体承巴目检作有又双细的验用何能亲胞：阳的特无细-得性培点-限胞-到养？骨增的杂基髓殖遗交上瘤。传瘤培细特细养胞性胞，。既
克隆上述杂交细胞 第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛 选出能产分生开所不需同抗杂体交的细杂胞交，瘤克细隆胞专。一抗 体，
;.
5
2. 单克隆抗体的制备 问题：如何大量生产单克隆抗体？请尝试设计一个方案。
提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？ 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？
提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增 殖能力同时具备呢？
单克隆抗;体.
体外培养 特异性强，灵敏度高
7
单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母 按正确顺序连接起来。顺序是？
;.
8
课堂小结：
现在你能主持“太空婚礼”动物科研项目了吗？
比较项目
植物体细胞杂交
单克隆抗体的制备
原理 融合前处理
促融方法
第一步 过 第二步 程
比较项目植物体细胞杂交单克隆抗体的制备原理融合前处理促融方法用途过程第一步第二步第三步第四步细胞膜的流动性细胞的全能性酶解法去壁物理法化学法膜的流动性细胞增殖小鼠免疫处理细胞分散物理化学生物法原生质体的制备原生质体的融合与筛选杂种细胞的形成与培养杂种植株的鉴定融合亲本细胞的准备动物细胞融合与两次筛选产特定抗体的杂交瘤细胞培养单克隆抗体的分离提纯单抗有助于疾病的诊断治疗预防获得具优良性状的杂种植株课堂小结
培养液中融合细胞
有几种类型？
多种杂交细胞 注射到小鼠体内
骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞
B淋巴细胞--- B淋巴细胞 能产在杂第生该专具交1专细次一有瘤一胞筛抗筛细B抗继淋选体选胞体承巴目检作有又双细的验用何能亲胞：阳的特无细-得性培点-限胞-到养？骨增的杂基髓殖遗交上瘤。传瘤培细特细养胞性胞，。既
克隆上述杂交细胞 第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛 选出能产分生开所不需同抗杂体交的细杂胞交，瘤克细隆胞专。一抗 体，
;.
5
2. 单克隆抗体的制备 问题：如何大量生产单克隆抗体？请尝试设计一个方案。
提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？ 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？
提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增 殖能力同时具备呢？
高二生物动物细胞融合和单克隆抗体1省名师优质课赛课获奖课件市赛课一等奖课件
阳性孔中旳细胞还不能 确保是来自单个细胞，挑选 阳性孔旳细胞继续进行有限 稀释，一般需进行3～4次， 直至确信每个孔中增殖旳细 胞为单克隆细胞。该过程即 为杂交瘤细胞旳克隆化培养。
单克隆抗体
单克隆抗体旳应用： ①作为诊疗试剂：精确辨认多种抗原 物质，并与特异性结合
治疗疾病：主要用于癌症治疗 ②用于
融合过程中两个细胞膜从彼此接触到破裂形成细 胞桥旳变化过程图解
• 为何灭活旳病毒能作为诱导剂？ • 不灭活旳病毒能作为诱导剂吗？
生物法：灭活旳病毒
仙台病毒 紫外线
丧失感染性 （不感染细胞）
保存融合活性
动物细胞融合
动物细胞融合技术旳意义
➢打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能； ➢广泛应用多种学科领域； ➢主要用途：制备单克隆抗体。
单克隆抗体旳制备
２、设计思绪：
一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖
单克隆抗体动物细胞培养技术 杂种细胞 动物细胞融合 既能产生特异性抗 体，又能大量繁殖
单克隆抗体旳制备
制备过程：
1.注射抗原旳目旳是什么？ 2.诱导其融合旳措施有哪些？ 3.融合后培养液中有几种细胞？ 4.怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有 何优点？ 5.为何要进行克隆化培养和专一抗体检测， 屡次筛选？ 6.大量增殖杂交瘤细胞取得单抗旳措施?
动物细胞融合
原理： 细胞膜旳流动性 诱导融合措施：
物理法: 离心、振动、电刺激 化学法: 聚乙二醇（PEG） 生物法：灭活旳病毒
• 为何灭活旳病毒能作为诱导剂？ • 不灭活旳病毒能作为诱导剂吗？
灭活旳病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合，形成杂种细胞 （细胞膜具有一定旳流动性）
单克隆抗体
单克隆抗体旳应用： ①作为诊疗试剂：精确辨认多种抗原 物质，并与特异性结合
治疗疾病：主要用于癌症治疗 ②用于
融合过程中两个细胞膜从彼此接触到破裂形成细 胞桥旳变化过程图解
• 为何灭活旳病毒能作为诱导剂？ • 不灭活旳病毒能作为诱导剂吗？
生物法：灭活旳病毒
仙台病毒 紫外线
丧失感染性 （不感染细胞）
保存融合活性
动物细胞融合
动物细胞融合技术旳意义
➢打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能； ➢广泛应用多种学科领域； ➢主要用途：制备单克隆抗体。
单克隆抗体旳制备
２、设计思绪：
一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖
单克隆抗体动物细胞培养技术 杂种细胞 动物细胞融合 既能产生特异性抗 体，又能大量繁殖
单克隆抗体旳制备
制备过程：
1.注射抗原旳目旳是什么？ 2.诱导其融合旳措施有哪些？ 3.融合后培养液中有几种细胞？ 4.怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有 何优点？ 5.为何要进行克隆化培养和专一抗体检测， 屡次筛选？ 6.大量增殖杂交瘤细胞取得单抗旳措施?
动物细胞融合
原理： 细胞膜旳流动性 诱导融合措施：
物理法: 离心、振动、电刺激 化学法: 聚乙二醇（PEG） 生物法：灭活旳病毒
• 为何灭活旳病毒能作为诱导剂？ • 不灭活旳病毒能作为诱导剂吗？
灭活旳病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合，形成杂种细胞 （细胞膜具有一定旳流动性）
动物细胞融合与单克隆抗体 课件
胰蛋白酶或胶原蛋 白酶
物理法：离心、电激、 振动 化学法：聚乙二醇等 试剂诱导
除物理法和化学法 外，也可用灭活的 病毒诱导
过程
结果
杂种植株
杂交细胞
应用
培育植物新品种 主要用于制备单克隆抗体
意义
克服了远缘杂交不亲和的障碍，打破了生殖隔离， 扩展了杂交的亲本组合
1．关于动物细胞融合的说法，错误的是( ) A．动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动 物细胞结合形成一个细胞的过程 B．动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物 细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞 C．常用的诱导动物细胞融合的因素有：聚乙二醇、 灭活的病毒、电激、紫外线照射 D．细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远 缘杂交成为可能
2．融合的结果 形成单核杂交细胞，具有原来两个或多个细胞的 遗传信息，可表现出两个或多个亲本的特点。
3．植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较
比较项目 原理 融合前 处理
使用的酶
诱导手段
植物体细胞杂交
细胞膜的流动性、细 胞的全能性
动物细胞融合
细胞膜的流动性、 细胞的增殖
先除去细胞壁
先使细胞分散开
纤维素酶和果胶酶
从小鼠体内提取的B淋巴 细胞有很多种，形成的 杂交瘤细胞也有很多种
筛选 方法
筛选 目的
用特定的选择培养基筛 选：未融合的细胞和同 种细胞融合后形成的细 胞都会死亡，只有融合 的杂交瘤细胞才能生长
得到杂交瘤细胞
用多孔培养皿培养，在 每个孔只有一个杂交瘤 细胞的情况下开始克隆 化培养和抗体检测，经 多次筛选得到能产生特 异性抗体的细胞群
答案：(1)Ab1、Ab2、Ab3、Ab4 特异性强、 灵敏度高 (2)流动性 3 (3)杂交瘤细胞 能产 生所需抗体的杂交瘤细胞 选择性 (4)单克隆 抗体上连接抗癌药物 不损伤正常细胞，且用药 剂量少，毒副作用小 (5)动物细胞融合 动物 细胞培养
高中生物人教版2019选修三公开课动物细胞融合技术与单克隆抗体
2．制备原理 (1)B淋巴细胞特点： 一种B淋巴细胞分泌一种特异性抗体。
(2)骨髓瘤细胞特点： 能在体外大量______增__殖__________。 (3)杂交瘤细胞特点：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂交瘤
细胞，既能_______无__限__增__殖_________又能产生大 量____特__定___抗__体_____。
(2)杂交瘤细胞具备双亲的_______遗__传__物__质_______，不仅具有浆细胞 产生_______特__异__性__抗__体_________的能力，还具有骨髓瘤细胞在体外培 养条件下_______大__量__增___殖________的能力，从而可以克服单纯B淋巴 细胞不能无限增殖的缺点，而大量生产单克隆抗体。
思考与讨论
1. ADC的抗体和药物各具有什么作用? 提示：抗体主要发挥靶向运输作用，即通过特异性结合靶细胞表面的 抗原，将连接的药物输送到靶细胞:药物发挥治疗效应，如杀伤靶细胞。
2.除了细胞毒素，还有哪些物质理论上可以作为ADC偶联的药物? 提示：可以用放射性同位素标记单克隆抗体进行靶向放疗。一些 作用于细胞信号转导通路的药物可以通过阻断肿瘤细胞的信言号 通路来抑制其生长，理论上也可以将这些药物与单克隆抗体结合 进行治疗。
4.单克隆抗体的优点 能准确地识别_____抗__原__的__细___微__差__异_______，与特定抗原发生特异性 结合，并且可以_____大__量___制__备_______。
5.单克隆抗体的应用 (1)作为______诊__断__试__剂_______，具有准确、高效、简易、快速的优点。
防御呼吸道合胞病毒感染 注射单克隆抗体效果好
阅读P48—49页
什么是动物细胞融合技术？
动物细胞融合与单克隆抗体 课件人教版高中生物选修三ppt
一 动物细胞融合技术
杂交细胞：具有原来两个 或多个细胞的遗传信息
使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
细胞膜的流动性
动物细胞融合特有
PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。 （化学法 物理法 生物法 ）
灭活的病毒诱导动物细胞融合的原理
1.什么是病毒的灭活？
灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏病毒的抗原结构。
三 单克隆抗体的应用
1.单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，可以大量制备。 单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性 结合，并且可以大量制备。
2.单克隆抗体的应用 （1）广泛用作诊断试剂
（2）运载药物：如ADC（抗体 - 接头 - 药物）
（3）用于治疗疾病。
2(2020全国卷)为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了 以下实验流程。
2.2.2 动物细胞融合技术与单克隆抗体
本节聚焦： 1.什么是动物细胞融合技术？ 2.单克隆抗体是如何制备的？
在临床上有哪些应用？
知识回顾：植物体细胞杂交的过程
植物细胞融合
植物组织培养
运用植物体细胞杂交技术，可以跨越不同植物之间的生殖隔离的屏障
那么，有没有技术能让不同种动物的体细胞进行杂交，培育出集不同细胞 的优势于一身的动物细胞呢？
单克隆抗体制备的过程：
能产生所需抗体的杂交瘤细胞
注射到小鼠腹腔内 从小鼠腹水中提取
体外培养 从细胞培养液中提取
单克隆抗体
两次筛选的比较
第一次筛选
第二次筛选
原因
诱导融合后得到的细胞中，除 杂交瘤细胞之外，还有未融合 的亲本细胞，也有融合的具有 同种核的细胞
最新(公开课)动物细胞融合与单克隆抗体课件PPT
【例4】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下
列实验步骤中错误的是（ B ）
A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋 巴细胞
B．用纤维素酶×处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋 巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D．筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的 细胞群，培养后提取单克隆抗体
(公开课)动物细胞融合与单克 隆抗体
番茄-马铃薯 （理想图）
1.1动物细胞融合的概念
A细胞
B细胞
人工诱导
动物细胞融合（也称细胞杂
交）：是指两个或多个细胞融
合形成一个单核细胞的过程。
杂交细胞
原理： 细胞膜的流动性 （与植物细胞融合的基本原理相同）
物理法： 离心、电激、振动 诱导方法 化学法： 聚乙二醇(PEG)
应用： 制备单克隆抗体（最主要的应用）
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生 物新品种培育等的重要手段
抗体的传统生产方法
抗原 反复注射动物
该法制备抗体的缺点： 产量低 纯度低
特异性差 灵敏度低
从动物的血清中分离抗体
1975年的实验室
一个美丽的发现
每个B淋巴细胞——只能分泌一种特异性抗体
进行无性繁殖（克隆）
学习要点
一、肺水肿的分类
二、诊断鉴别 三、临床表现 四、治疗原则 五、抢救与护理 六、健康指导
一、肺水肿的分类
(一)按临床病因分类
1.心源性肺水肿 2.非心源性肺水肿
(二)按发病机理分类
1. 肺循环压力失衡性肺水肿 2. 肺泡-毛细血管膜通透性增加性肺水肿 3. 淋巴引流功能不全及其它肺水肿
3. 淋巴引流功能不全及其它肺水肿：癌性、纤维性 淋巴管炎，其它如麻醉剂过量、过敏、休克等 肺水肿常为上述3种机理的混合存在。
动物细胞融合和单克隆抗体(公开课)
一、动物细胞融合
1、定义：指两个或多个动物 细胞结合成一个细胞的过程。 也称细胞杂交。
◆杂交细胞：融合后形成的具
有原来两个或多个细胞遗传 信息的单核细胞成为杂交细 胞。
细胞融合是正常的生命活动
受精作用
两个细胞正在融合
二.动物细胞融合
2、诱导融合的因素
• 生物法：灭活的病毒诱导融 合.(利用灭活仙台病毒是动物细
1.
动物特异性免疫
2.
3. 4.
分离B淋巴细胞（B）；找到骨髓瘤细胞（G）。注意B淋巴细
胞是一个系列。（B1,B2,B3,---Bn） 细胞融合——三种融合方式:（BB;BG;GG） 第一次筛选：在“选择培养基培养”上培养筛选杂交瘤细胞 （只有BG杂交瘤细胞存活。但BG杂交瘤细胞也是一个系列：
如B1G,B2G---BnG。而BB,GG在此培养基上不能存活。）
胞位置，原位杀死癌细胞。）
小结
两个过程 动物细胞培养过程
单克隆抗体制备过程
一个诱导细胞融合的新方法－－灭活 病毒 三个“一” 一个新细胞－－杂交瘤细胞 一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势
下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤 风杆菌单克隆抗体的实验方案 A 制备单克隆抗体 1、该实验方案的目的是__________ B 骨髓瘤细胞
２．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正 确的是（ Ｂ ） A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同
C．操作过程中酶的作用相同
D．诱导融合的手段相同
３. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ C ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A． ②④ C． ①②③④ B．①③⑤ D．②③
1、定义：指两个或多个动物 细胞结合成一个细胞的过程。 也称细胞杂交。
◆杂交细胞：融合后形成的具
有原来两个或多个细胞遗传 信息的单核细胞成为杂交细 胞。
细胞融合是正常的生命活动
受精作用
两个细胞正在融合
二.动物细胞融合
2、诱导融合的因素
• 生物法：灭活的病毒诱导融 合.(利用灭活仙台病毒是动物细
1.
动物特异性免疫
2.
3. 4.
分离B淋巴细胞（B）；找到骨髓瘤细胞（G）。注意B淋巴细
胞是一个系列。（B1,B2,B3,---Bn） 细胞融合——三种融合方式:（BB;BG;GG） 第一次筛选：在“选择培养基培养”上培养筛选杂交瘤细胞 （只有BG杂交瘤细胞存活。但BG杂交瘤细胞也是一个系列：
如B1G,B2G---BnG。而BB,GG在此培养基上不能存活。）
胞位置，原位杀死癌细胞。）
小结
两个过程 动物细胞培养过程
单克隆抗体制备过程
一个诱导细胞融合的新方法－－灭活 病毒 三个“一” 一个新细胞－－杂交瘤细胞 一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势
下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤 风杆菌单克隆抗体的实验方案 A 制备单克隆抗体 1、该实验方案的目的是__________ B 骨髓瘤细胞
２．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正 确的是（ Ｂ ） A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同
C．操作过程中酶的作用相同
D．诱导融合的手段相同
３. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ C ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A． ②④ C． ①②③④ B．①③⑤ D．②③
高二生物山选修课件动物细胞融合与单克隆抗体
单克隆抗体
单克隆抗体是由单一B淋巴细胞克隆产 生的高度均一的抗体。它具有高度的 特异性和亲和力，能够准确地识别并 结合到特定的抗原上。
02
动物细胞融合技术
动物细胞融合的原理
细胞膜的流动性
细胞质的交融
动物细胞融合是基于细胞膜具有一定 的流动性，使得两个或多个细胞能够 融合形成一个细胞。
在细胞膜融合后，两个细胞的细胞质 交融在一起，形成一个具有双核或多 核的细胞。
细胞膜的识别与结合
细胞膜上的糖蛋白具有识别功能，能 够识别并结合其他细胞，形成细胞间 的连接。
动物细胞融合的方法
病毒诱导法
利用某些病毒（如仙台病毒）能 够感染细胞并促进细胞融合的特 性，将病毒与动物细胞混合培养
，诱导细胞融合。
化学诱导法
使用某些化学物质（如聚乙二醇 PEG）能够改变细胞膜的通透性 ，使得细胞易于融合。将化学物 质与动物细胞混合培养，诱导细
关注生物技术的伦理和法规问题，确保动物细胞融合与单 克隆抗体技术的研究和应用符合社会道德和法律规定。
THANK YOU
感谢观看
的细胞。
融合细胞培养
在适宜的培养条件下， 对融合细胞进行扩大培
养。
单克隆抗体实验方法与步骤
01
02
03
04
免疫小鼠
将特定抗原免疫小鼠，激发其 免疫反应。
细胞融合
取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤 细胞进行融合，形成杂交瘤细
胞。
杂交瘤细胞筛选
利用HAT培养基筛选杂交瘤细 胞，去除未融合的细胞和自身
融合的细胞。
06
结果分析与讨论
动物细胞融合实验结果分析
融合细胞形态观察
01
在显微镜下观察，可见到不同形态的融合细胞，包括多核细胞
单克隆抗体是由单一B淋巴细胞克隆产 生的高度均一的抗体。它具有高度的 特异性和亲和力，能够准确地识别并 结合到特定的抗原上。
02
动物细胞融合技术
动物细胞融合的原理
细胞膜的流动性
细胞质的交融
动物细胞融合是基于细胞膜具有一定 的流动性，使得两个或多个细胞能够 融合形成一个细胞。
在细胞膜融合后，两个细胞的细胞质 交融在一起，形成一个具有双核或多 核的细胞。
细胞膜的识别与结合
细胞膜上的糖蛋白具有识别功能，能 够识别并结合其他细胞，形成细胞间 的连接。
动物细胞融合的方法
病毒诱导法
利用某些病毒（如仙台病毒）能 够感染细胞并促进细胞融合的特 性，将病毒与动物细胞混合培养
，诱导细胞融合。
化学诱导法
使用某些化学物质（如聚乙二醇 PEG）能够改变细胞膜的通透性 ，使得细胞易于融合。将化学物 质与动物细胞混合培养，诱导细
关注生物技术的伦理和法规问题，确保动物细胞融合与单 克隆抗体技术的研究和应用符合社会道德和法律规定。
THANK YOU
感谢观看
的细胞。
融合细胞培养
在适宜的培养条件下， 对融合细胞进行扩大培
养。
单克隆抗体实验方法与步骤
01
02
03
04
免疫小鼠
将特定抗原免疫小鼠，激发其 免疫反应。
细胞融合
取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤 细胞进行融合，形成杂交瘤细
胞。
杂交瘤细胞筛选
利用HAT培养基筛选杂交瘤细 胞，去除未融合的细胞和自身
融合的细胞。
06
结果分析与讨论
动物细胞融合实验结果分析
融合细胞形态观察
01
在显微镜下观察，可见到不同形态的融合细胞，包括多核细胞
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克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ A ）
A.经过免疫的B淋巴细胞 B.不经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋巴细胞
【例4】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下
列实验步骤中错误的是（ B ）
A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋 巴细胞
B．用纤维素酶×处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋 巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D．筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的 细胞群，培养后提取单克隆抗体
15、右图为某同学根据杂交瘤技术
的方法，设计的生产破伤风杆菌抗
①
体的实验方案。据图回答：
（1）该方案能达到预期效果吗 ？ 不能 。原因是
__没__有__将__抗__原__注__入__小__鼠__体__内__，__无__法__获_得 __产__生__专__一__抗__体__的_。B淋巴细胞
比较动、植物细胞杂交技术
比较项目 细胞融合 细胞融合 诱导手段 的原理 的方法
植物体 细胞杂交
用途
动物细 胞融合
单克隆抗体: 单个B细胞克隆产生的化学性质 单一、特异性强的抗体
人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。
物理法： 离心、电激、振动 诱导方法 化学法： 聚乙二醇(PEG)
生物法：灭活的病毒（特有的方法）
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合，形成杂交细胞 （细胞膜具有一定的流动性）
1.2动物细胞融合过程
为什么灭活的 病毒能作诱导剂？
灭活丧失感染性 保留融合活性
1.3动物细胞融合技术的意义和应用
治疗疾病和载抗 癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。
“生物导弹” ＝单克隆抗体＋药物
单抗导向，药物为弹头
动物细胞融合过程 两个过程
单克隆抗体制备过程
一个诱导细胞融合的新方法 －－灭活病毒
三个“一” 一个新细胞－－杂交瘤细胞
一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势
B 【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 （ ）
A.离心
B.灭活的病毒
C.电刺激
D.振动
【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（ A.具有原来两个或多个细胞的遗传信息
A
)
B.能无限增殖
C.可形成新个体
D.培养过程会贴壁
【例3】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融 合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单
目的获：得产生 相应抗体的B 细胞
（二选）：选 能产生所需专
一抗体的杂 交瘤细胞
体外培养 小鼠腹腔内培养
√ BB 、B瘤 、瘤瘤
（B、瘤）
（一选）选 择性培养基：
只有杂交 瘤细胞才
能存活
2.2单克隆抗体的应用 特异性强
单克隆抗体最主要的优点：灵敏度高
并能大量制备
诊断试剂——最广泛应用
准确、高效、简易、快速
公开课动物细胞融合与单克隆抗 体
有梦想，才会有创造！
如何实现人、 动物之间 细胞的融合 呢？
人—鼠 （想像图）
1.1动物细胞融合的概念
A细胞
B细胞
人工诱导
动物细胞融合（也称细胞杂
交）：是指两个或多个细胞融
合形成一个单核细胞的过程。
杂交细胞
原理： 细胞膜的流动性 （与植物细胞融合的基本原理相同）
意义：
突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交 成为可能
应用： 制备单克隆抗体（最主要的应用）
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生 物新品种培育等的重要手段
抗体的传统生产方法
抗原 反复注射动物
该法制备抗体的缺点： 产量低 纯度低
特异性差 灵敏度低
从动物的血清中分离抗体
1975年的实验室
一个美丽的发现
每个B淋巴细胞——只能分泌一种特异性抗体
进行无性繁殖（克隆）
但是体外
怎样大量
？ 获得单一 抗体
培养的细胞 不能无限增
殖
癌细胞
既能产生特异性抗体，
又能大量增殖的细胞
你的设想
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖
单克隆 动物细胞培养技术 杂交瘤细胞
抗体
动物细胞融合技术
既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞
（2）图中②为 细胞融合 过程 ，常用 灭活病毒 作为诱导剂。该
细胞继承了_双__亲__细__胞__的__遗__传__物__质____ ，因此不仅能分泌 特异__性__抗__体_____ ，还有 大量增殖 本领。
（3）该方案的目的是__制__备__单__克__隆__抗__体___________。
课后作业：
A.经过免疫的B淋巴细胞 B.不经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋巴细胞
【例4】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下
列实验步骤中错误的是（ B ）
A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋 巴细胞
B．用纤维素酶×处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋 巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D．筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的 细胞群，培养后提取单克隆抗体
15、右图为某同学根据杂交瘤技术
的方法，设计的生产破伤风杆菌抗
①
体的实验方案。据图回答：
（1）该方案能达到预期效果吗 ？ 不能 。原因是
__没__有__将__抗__原__注__入__小__鼠__体__内__，__无__法__获_得 __产__生__专__一__抗__体__的_。B淋巴细胞
比较动、植物细胞杂交技术
比较项目 细胞融合 细胞融合 诱导手段 的原理 的方法
植物体 细胞杂交
用途
动物细 胞融合
单克隆抗体: 单个B细胞克隆产生的化学性质 单一、特异性强的抗体
人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。
物理法： 离心、电激、振动 诱导方法 化学法： 聚乙二醇(PEG)
生物法：灭活的病毒（特有的方法）
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合，形成杂交细胞 （细胞膜具有一定的流动性）
1.2动物细胞融合过程
为什么灭活的 病毒能作诱导剂？
灭活丧失感染性 保留融合活性
1.3动物细胞融合技术的意义和应用
治疗疾病和载抗 癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。
“生物导弹” ＝单克隆抗体＋药物
单抗导向，药物为弹头
动物细胞融合过程 两个过程
单克隆抗体制备过程
一个诱导细胞融合的新方法 －－灭活病毒
三个“一” 一个新细胞－－杂交瘤细胞
一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势
B 【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 （ ）
A.离心
B.灭活的病毒
C.电刺激
D.振动
【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（ A.具有原来两个或多个细胞的遗传信息
A
)
B.能无限增殖
C.可形成新个体
D.培养过程会贴壁
【例3】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融 合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单
目的获：得产生 相应抗体的B 细胞
（二选）：选 能产生所需专
一抗体的杂 交瘤细胞
体外培养 小鼠腹腔内培养
√ BB 、B瘤 、瘤瘤
（B、瘤）
（一选）选 择性培养基：
只有杂交 瘤细胞才
能存活
2.2单克隆抗体的应用 特异性强
单克隆抗体最主要的优点：灵敏度高
并能大量制备
诊断试剂——最广泛应用
准确、高效、简易、快速
公开课动物细胞融合与单克隆抗 体
有梦想，才会有创造！
如何实现人、 动物之间 细胞的融合 呢？
人—鼠 （想像图）
1.1动物细胞融合的概念
A细胞
B细胞
人工诱导
动物细胞融合（也称细胞杂
交）：是指两个或多个细胞融
合形成一个单核细胞的过程。
杂交细胞
原理： 细胞膜的流动性 （与植物细胞融合的基本原理相同）
意义：
突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交 成为可能
应用： 制备单克隆抗体（最主要的应用）
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生 物新品种培育等的重要手段
抗体的传统生产方法
抗原 反复注射动物
该法制备抗体的缺点： 产量低 纯度低
特异性差 灵敏度低
从动物的血清中分离抗体
1975年的实验室
一个美丽的发现
每个B淋巴细胞——只能分泌一种特异性抗体
进行无性繁殖（克隆）
但是体外
怎样大量
？ 获得单一 抗体
培养的细胞 不能无限增
殖
癌细胞
既能产生特异性抗体，
又能大量增殖的细胞
你的设想
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖
单克隆 动物细胞培养技术 杂交瘤细胞
抗体
动物细胞融合技术
既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞
（2）图中②为 细胞融合 过程 ，常用 灭活病毒 作为诱导剂。该
细胞继承了_双__亲__细__胞__的__遗__传__物__质____ ，因此不仅能分泌 特异__性__抗__体_____ ，还有 大量增殖 本领。
（3）该方案的目的是__制__备__单__克__隆__抗__体___________。
课后作业：