复方甘草片含量测定方法改进

表" 代号 " ( ! ) * 对照品回收率 # $ % 药典法 +, -) +, -* +, -) +, -) +, -* 改进法 ", ++ +, -+, -. +, -+, -两种方法测定结果比较 （&’ ） 样品中吗啡含量 药典法 +, !! +, !/ +, !* +, !/ +, !* 改进法 +, !0 +, !+, !. +, )+ +, !. （$ ） !"# 药典法 +, /( +, !! +, 0+ +, )" +, () 改进法 +, /. +, !" +, !/ +, (* +, (.
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讨论 药典法对洗脱试验操作的描述不够明确， 检验者往往误认为
这 是一次用足量的含 ($ 甲醇的 *$ 醋酸溶液洗脱至 * &3 量瓶， 样的洗脱很不完全。 表 " 中药典法的数据是笔者分 ! 次洗脱后得 （ 即对照品洗脱液与对照品溶 到的， 固相萃取柱对对照品的回收率 从改进法的数据 液的峰面积比值 ） 基本上都达不到要求， 约低 *$ 。 可以看出， 固相萃取柱对对照品的回收率较高， 样品中吗啡的含量 含量均在合格范围； 而药典法中有 ! 个厂家 比药典法高出约 "+$ ， 吗啡的含量不合格， ( 个厂家的含量为边缘值。 笔者考察了洗脱次数分别为 ! ， )， *， /， 0， .， -， "+ 时对照品的 回收率， 发现洗脱 * 次时回收率一般都可以达到 -0$ 以上， 但洗脱 再增加洗脱次数回收率也不再提高， 故 0 次以上时回收率达 --$ ， 洗脱次数宜为 0 次。 《中国药典 # 二部 % 》 中， 使用固相萃取柱对样品中的 (++* 年版 吗啡进行分离、 提取、 洗脱的尚有 - 个品种， 其中用 (+$ 甲醇的*$ 醋酸溶液洗脱的品种有阿片、 阿片粉、 阿桔片、 复方樟脑酊， 用 罂粟果提 "+$ 甲醇的 *$ 醋酸溶液洗脱的品种有罂粟果提取物、 取物 粉、 阿片 酊， 用 *$ 醋酸 溶 液洗 脱的 品 种有 复方 甘 草口 服溶 液、 阿片片 1 " 2 。 上述各品种中， 除洗脱液的比例或组分不同外， 其 固相萃取柱的处理条件和洗脱操作步骤基本一致， 固相萃取柱系 （ 统适用性试验的要求均一致 即均为洗脱液与对照品溶液色谱图 。 为此， 笔者建议： 中 吗 啡 峰 面 积 的 比 值 应 在 -0$ ? "+!$ 之 间 ） （ 因条件所限， 上述品种均可按文中改进后的洗脱方法进行操作 除复方甘草口服溶液外， 其他品种未能一一验证 ） 。 男， 广西南宁人， 主管药师， 硕 作者简介： 覃 志 高 # "-0) 5 % ， # 电话 % +00" 5 !-+)!0* 。 士， 研究方向为药物分析， 参考文献：
!""# 年第 $% 卷第 $& 期
药物鉴定
复方甘草片含量测定方法改进
覃志高 "， 李如栋 (， 陈志华 !
（", 广西壮族自治区南宁食品药品检验所， 广西 南宁 *!+++"； (, 武警广西总队医院医务处， 广西 南宁 广西 横县 *!+!++） !, 广西壮族自治区横县人民医院，
取柱中的洗脱更加完全， 改进方法的含量测定结果更接近真实含量。 结论 改进方法更准确。 关键词： 复方甘草片； 固相萃取； 含量测定； 吗啡 中图分类号： *("+, " ； *(+- . , " 文献标识码： / 文章编号： !%%0 ’ -(#! $ "%%( ) !0 ’ %%#! ’ %! 进样量也相应增加 " 倍， 其他 度” 的改进， 因稀释倍数均增加 " 倍， 操作不变。 改进方法后， 固相萃取柱对对照品的回收率较容易达 标， 从而确保样品测定结果更接近真实含量， 结果更令人满意。 !" $ 两种方法比较 结果见表 " 。
1 " 2 国家药典委员会 , 中华人民共和国药典 # 二部 % 1 F 2 , 北京： 化学工 业出版社 G (++* ： (.+ 5 (.(G )(" 5 )((G )!0,
$ 收稿日期： "%%& ’ % ’ %! )
中国药业 !"#$% &"%’(%)*+,#)%-.
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摘要： 目的 改进复方甘草片含量测定中固相萃取柱的洗脱方法。 方法 增加洗脱液的量， 并且进行分次洗脱。 结果 对照品、 样品在固相萃
1" 2 《 中国药典 （ 二部 ） 》 复方甘草片是 (++* 年版 收载的祛痰镇 咳药， 因含吗啡而不宜长期使用。 笔者在药品检验工作中发现， 用
现有的方法进行吗啡的含量测定， 结果往往偏低， 经过一定的改 进， 结果比较满意。 ! 仪器与试药 （日本岛津 ） ； 34 5 (+67 型高效液相色谱仪 68()+ 型电子天平 （ 精确到十万分之一 ） ； 吗啡对照品 9:;< 5 *++ 型超声波清洗机。 （ 中国药品生物制品检定所， ） （ 色谱纯 ） 批号为 ++!! 5 -.+* ； 甲醇 ， （分析纯 ） （代号为 " 5 * ， 超纯化水， 其他试剂 ； 复方甘草片 广州粤华 天津力生制药股份有限公司， 批号 药业有限公司， 批号 =>+/")- ； 武汉远大制药集团股份有限公司， 批 号 +0""+( 和 +/"""*. ； 国药集团工业有限公司， 批号 +0+)"/ ） 。 +.+(+( ； " !" # 方法与结果 药典法 固相萃取柱系统适用性试验： 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充 物， 以测定法中相同的处理条件和洗脱条件试验。 精密量取每 " &3 中含 +, +* &’ 的吗啡对照品 *$ 醋酸溶液 " &3， 置处理后的固相萃 摇匀。 分别精密 取柱上， 同法洗脱， 用 * &3 量瓶收集洗脱液至刻度， 量取该洗脱液与含量测定项下的对照品溶液各 "+ !3， 依次注入液 相色谱仪， 记录色谱图。 洗脱液与对照品溶液色谱图中吗啡峰面积 的比值应在 +, -0 ? ", +! 之间。 依次用甲醇 5 水 # ! @ " % 混合溶液 测定法： 取固相萃取柱 " 支， （ 取水适量， 再用 A= 约为 - 的氨水溶液 滴 "* &3 与水 * &3 冲洗， 加 氨 试 液 至 A= 为 - ） 冲 洗 至 流 出 液 A= 约 为 - ， 待用。 取 本 品 (+ 片， 精密称定， 研细， 精密称取约 "+ 片量， 置磨口锥形瓶中， 精密加 （/ &"+ ） 水 -+ &3， 超声处理 * &BC， 精密加稀盐酸 摇匀， 超声 "+ &3， 处理 (+ &BC 使吗啡溶解， 取出， 放至室温， 滤过， 精密量取 ", + &3， （ 上样 置上述固相柱上， 滴加氨试液适量使柱内溶液的 A= 约为 前另取同体积的续滤液预先调试， 以确定滴加氨试液的量 ） ， 摇匀， 待溶剂滴尽后， 用水 (+ &3 冲洗， 用含 ($ 甲醇的 *$ 醋酸溶液洗 脱， 用 * &3 量瓶收集洗脱液至刻度， 摇匀， 精密量取 (+ !3 注入液 相色谱仪， 记录色谱图。 另取吗啡对照品适量， 精密称定， 用含 ($ 甲 醇 的 *$ 醋 酸 溶 液 溶 解 并 定 量 稀 释 制 成 每 " &3 中 约 含 吗 啡 同法测定。 按外标法以峰面积计算， 即得， 含无水 +, +" &’ 的溶液， 吗啡 # 4"0 ="- DE! % 应为 +, !/ ? +, )) &’。 在药品检验工作中， 笔者发现， 药典法中固相萃取柱的洗脱经 常不完全， 对照品的回收率常达不到 -0$ ? "+!$ ， 测定结果往往 偏低。 !" ! 改进法 “用含 ($ 甲醇的 *$ 醋酸溶液分 0 在原药典法的基础上， 作了 （待上一次洗脱液滴尽后再进行下一次洗脱， 次洗脱 每次约 " &3） ， 用 "+ &3 量瓶收集洗脱液， 以含 ($ 甲醇的 *$ 醋酸溶液稀释至刻