糖化血红蛋白标准化及检测方法比较
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亚基的氮端缬氨酸主链氨基的糖化概率最高， 因此体内大部分糖基化血红蛋白为β 亚基氮端
缬氨酸与葡萄糖的加合物，该物质被命名为 HbA1c。
检测方法学分类
根据Ghb和非 GHb带电不同 1、离子交换层析 2、电泳法 3、等电点聚焦法
基于Hb上糖基化 基团的结构特点
1、亲和层析 2、免疫法 3、酶法 4、显色法
Bayer 拜安时手持式糖化检测仪
检测方法：酶法
全血经溶血处理后，用特异蛋白内切 酶将Ｈｂ酶解消化成果糖氨基酸，再 经果糖氨基酸氧化酶作用下产生过氧 化氢（H2O2），H2O2的浓度与血液中 GHb的含量呈正比。 H2O2在过氧化物 酶的作用下与相应的色原耦联，发生 颜色变化，根据其变化程度可得H2O2 浓度，进而得知样本中GHb的含量。
检测方法：免疫法
比浊法：又有胶乳凝集法和免疫比浊 法两种。可实现和自动化分析仪很好 地结合起来，具有快速、准确、特异 性强、重复性好、灵敏度高、线性范 围宽等优点，可以使用自动化分析仪 进行批量检测。
检测方法：免疫法
免疫层析法：免疫层析法操作简便易 行、快速准确、试剂稳定。更易于实 现POC检测，有助于医生即时获悉患 者血糖水平，并及时给予患者医疗指 导，以避免糖尿病诊断和治疗的延误， 未来有着较为广阔的应用前景。
积水医疗酶法生化试剂
糖化血红蛋白检测标准化
●IFCC法：2007 年国际临床化学联合会(IFCC) 重新明确了HbA1c 的命名、 性质、单位: 全称为β 链血红蛋白β链N 末端脱氧果糖基血红蛋白; 特 别强调HbA1c 测定的是“物质分数”，而不是“质量分数”; 推荐使 用( mmol /mol) 作为HbA1c 的单位，此建议为HbA1c 结果数据提供了 非常明确的计量单位，可溯源到溯源链的最高等级国际单位制。
SEBIA蛋白质电泳仪
检测方法：等电点聚集法
在聚丙烯酞凝胶中加入载体两性介 质（如ampholin）的薄板上形成一 个由阳极到阴极逐渐增加的pH梯度。 溶血液中各个组分将移动到各自等 电点的pH位置上，这样就得到比一 般电泳法更好的分划效果和比较集 中的色带。
GE Ettan IPGphor 3等电聚焦电泳仪
检测方法：毛细管电泳法
毛细管电泳能分离检测糖化血红蛋 白和血红蛋白的变异体，样品用量 少、操作简便、重复性好、省时、 高效。 完全自动化操作，简单易用，在减 少人为误差的基础上，重复性也得 到了极大提高。
SEBIA全自动高压液相毛细管电泳仪
检测方法：琼脂凝胶电泳法
Hb于酸性缓冲液条件下(pH6.0)，在 琼脂糖凝胶上的电泳迁移取决于Hb 在凝胶上的吸附情况及其所带的电 荷。HbA0因其Ｎ末端的缬氨酸残 基对凝胶的负电荷有高度的亲和力， 因此它的迁移速率减慢。HbA1c因 它所连接的糖的阻断作用，不可再 与凝胶结合，利用HbA1c和HbA0对 凝胶的亲和力不同，导致的电泳迁 移速率也不同，通过电泳将各成分 分开。
血红素
血红蛋白HbA由两个α亚基和两个β亚基组成，α和β亚 基上都有糖化位点，其中β亚基第1位缬氨酸主链氨基 糖化率最高。
血红素
α亚基 β亚基
血红素 血红素
HbA1c 糖基化位点结构图
根据糖种类，糖基化血红蛋白可分为葡萄糖糖 化、果糖糖化及乳糖糖基化血红蛋白等。人体 内游离的葡萄糖含量远高于其他糖类物质，β
HbA 2 (???? )
HbF (???? )
非糖化Hb HbA0
95%
1-3.5%
<2%
HbA1
糖化Hb
87-89%
HbA1a
<1%
6-8%
HbA1b
<1%
HbA1c
4%-6%
GHb是指结合了任何形式 碳水化合物的血红蛋白， 血红蛋白与糖基发生非酶 促，形成了不可逆的复合 物。
糖Hale Waihona Puke Baidu血红蛋白的形成
行业 PPT 模板： www.1ppt.com/hangye/
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PPT 图表下载： www.1ppt.com/t
ubiao/
PPT 教程： www.1ppt.com/powerpoint/
Excel
教程： www.1ppt.com/exce
l/
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检测方法：离子交换层析
主要有高效液相色谱法( high performance liquid chromatography， HPLC) 和手工微柱法。此方法是基 于血红蛋白β 链N 末端缬氨酸糖化 后所带电荷不同而建立。在中性 pH条件下，HbA1c 携带的正电荷 相对较少，因此可通过离子交换 层析法将其与其他组分分离。
伯乐In2it糖化血红蛋白仪
Alere Afinion? AS100 Analyzer
检测方法：免疫法
化学发光法：又叫离子捕获法，采用 离子捕捉免疫分析法，应用抗原抗体 反应原理，联合荧光标记物，通过连 接带负电的多阴离子复合物，吸附到 带正电的纤维表面，经过一系列彻底 清洗等步骤后，测定荧光强度变化率， 计算浓度。
检测方法：亲和层析法
由交联了间氨基苯硼酸的琼脂糖珠作 为分离载体。当总的GHb通过载体时，
硼酸可与整合在血红蛋白分子中的葡 萄糖顺位二醇基发生可逆性结合，使 糖化的Hb选择性地结合于凝胶柱上， 其他非糖化Hb等随缓冲液流出；然
后用另一种含糖或多羟化合物的缓冲 液将GHb洗脱下来，利用两部分Hb本 身的颜色，在415nm条件下测定并计 算出亲和色谱所测的GHb。
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i/
糖化血红蛋白
标准化及不同检测方法的差异
基蛋生物 市场推广部
内容目录
1 2 3 4
糖化血红蛋白（GHB） 检测方法及产品示例 糖化血红蛋白标准化 常用检测方法之比较
糖化血红蛋白（GHb）
Hb 血红蛋白
成人血红蛋白分三种， HbA为主要成人Hb
HbA (?? ??)
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缬氨酸与葡萄糖的加合物，该物质被命名为 HbA1c。
检测方法学分类
根据Ghb和非 GHb带电不同 1、离子交换层析 2、电泳法 3、等电点聚焦法
基于Hb上糖基化 基团的结构特点
1、亲和层析 2、免疫法 3、酶法 4、显色法
Bayer 拜安时手持式糖化检测仪
检测方法：酶法
全血经溶血处理后，用特异蛋白内切 酶将Ｈｂ酶解消化成果糖氨基酸，再 经果糖氨基酸氧化酶作用下产生过氧 化氢（H2O2），H2O2的浓度与血液中 GHb的含量呈正比。 H2O2在过氧化物 酶的作用下与相应的色原耦联，发生 颜色变化，根据其变化程度可得H2O2 浓度，进而得知样本中GHb的含量。
检测方法：免疫法
比浊法：又有胶乳凝集法和免疫比浊 法两种。可实现和自动化分析仪很好 地结合起来，具有快速、准确、特异 性强、重复性好、灵敏度高、线性范 围宽等优点，可以使用自动化分析仪 进行批量检测。
检测方法：免疫法
免疫层析法：免疫层析法操作简便易 行、快速准确、试剂稳定。更易于实 现POC检测，有助于医生即时获悉患 者血糖水平，并及时给予患者医疗指 导，以避免糖尿病诊断和治疗的延误， 未来有着较为广阔的应用前景。
积水医疗酶法生化试剂
糖化血红蛋白检测标准化
●IFCC法：2007 年国际临床化学联合会(IFCC) 重新明确了HbA1c 的命名、 性质、单位: 全称为β 链血红蛋白β链N 末端脱氧果糖基血红蛋白; 特 别强调HbA1c 测定的是“物质分数”，而不是“质量分数”; 推荐使 用( mmol /mol) 作为HbA1c 的单位，此建议为HbA1c 结果数据提供了 非常明确的计量单位，可溯源到溯源链的最高等级国际单位制。
SEBIA蛋白质电泳仪
检测方法：等电点聚集法
在聚丙烯酞凝胶中加入载体两性介 质（如ampholin）的薄板上形成一 个由阳极到阴极逐渐增加的pH梯度。 溶血液中各个组分将移动到各自等 电点的pH位置上，这样就得到比一 般电泳法更好的分划效果和比较集 中的色带。
GE Ettan IPGphor 3等电聚焦电泳仪
检测方法：毛细管电泳法
毛细管电泳能分离检测糖化血红蛋 白和血红蛋白的变异体，样品用量 少、操作简便、重复性好、省时、 高效。 完全自动化操作，简单易用，在减 少人为误差的基础上，重复性也得 到了极大提高。
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检测方法：琼脂凝胶电泳法
Hb于酸性缓冲液条件下(pH6.0)，在 琼脂糖凝胶上的电泳迁移取决于Hb 在凝胶上的吸附情况及其所带的电 荷。HbA0因其Ｎ末端的缬氨酸残 基对凝胶的负电荷有高度的亲和力， 因此它的迁移速率减慢。HbA1c因 它所连接的糖的阻断作用，不可再 与凝胶结合，利用HbA1c和HbA0对 凝胶的亲和力不同，导致的电泳迁 移速率也不同，通过电泳将各成分 分开。
血红素
血红蛋白HbA由两个α亚基和两个β亚基组成，α和β亚 基上都有糖化位点，其中β亚基第1位缬氨酸主链氨基 糖化率最高。
血红素
α亚基 β亚基
血红素 血红素
HbA1c 糖基化位点结构图
根据糖种类，糖基化血红蛋白可分为葡萄糖糖 化、果糖糖化及乳糖糖基化血红蛋白等。人体 内游离的葡萄糖含量远高于其他糖类物质，β
HbA 2 (???? )
HbF (???? )
非糖化Hb HbA0
95%
1-3.5%
<2%
HbA1
糖化Hb
87-89%
HbA1a
<1%
6-8%
HbA1b
<1%
HbA1c
4%-6%
GHb是指结合了任何形式 碳水化合物的血红蛋白， 血红蛋白与糖基发生非酶 促，形成了不可逆的复合 物。
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检测方法：离子交换层析
主要有高效液相色谱法( high performance liquid chromatography， HPLC) 和手工微柱法。此方法是基 于血红蛋白β 链N 末端缬氨酸糖化 后所带电荷不同而建立。在中性 pH条件下，HbA1c 携带的正电荷 相对较少，因此可通过离子交换 层析法将其与其他组分分离。
伯乐In2it糖化血红蛋白仪
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检测方法：免疫法
化学发光法：又叫离子捕获法，采用 离子捕捉免疫分析法，应用抗原抗体 反应原理，联合荧光标记物，通过连 接带负电的多阴离子复合物，吸附到 带正电的纤维表面，经过一系列彻底 清洗等步骤后，测定荧光强度变化率， 计算浓度。
检测方法：亲和层析法
由交联了间氨基苯硼酸的琼脂糖珠作 为分离载体。当总的GHb通过载体时，
硼酸可与整合在血红蛋白分子中的葡 萄糖顺位二醇基发生可逆性结合，使 糖化的Hb选择性地结合于凝胶柱上， 其他非糖化Hb等随缓冲液流出；然
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糖化血红蛋白
标准化及不同检测方法的差异
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糖化血红蛋白（GHB） 检测方法及产品示例 糖化血红蛋白标准化 常用检测方法之比较
糖化血红蛋白（GHb）
Hb 血红蛋白
成人血红蛋白分三种， HbA为主要成人Hb
HbA (?? ??)
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