沙门氏菌的生物学特性及鉴定要点

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取活菌与Vi抗血清,取加热菌与Vi抗血清,AFO多价抗血清分别进行 玻片凝集试验。
根据结果作如下分析: (1)活菌与Vi抗血清凝集,加热菌与Vi抗菌,按下述定 群用O7和O9抗血清定群; (2)活菌与Vi抗血清不凝集,可能属于AFO群意外的沙
门氏菌或其他菌属细菌,应进行全面生化试验定属,若符
合沙门氏菌属细菌特征,宜送专门机构鉴定; (3)加热菌也与Vi抗血清凝集,而与AFO多价O抗血清 不凝集者,可报告为阴性。
3.生化反应: 氧化酶(-),发酵葡萄糖,乳糖(-),TSI或KIA为 K/A,有动力,赖氨酸脱羧酶(+),硝酸盐还 原试验(+),大多菌主H2S(+)。 KIA:斜面(K),底层(A), H2S"(+)或(-)" MIU:动力(+),吲哚(-),脲酶(-)
4.鉴别要点: 4.1 本菌属特点:选择SS平板上无色透明、半 透明或中心黑色的菌落,TSI为K/A,H2S(+) 或(-),动力(+),氧化酶(-),脲酶(-) 符合上述特性者,可通过血清凝集试验做出诊 断。 4.2 与志贺菌属的鉴别:少数伤寒沙门氏菌在 TSI或KIA上H2S(-),动力不明显,易于志贺 氏菌相混淆,可用血清凝集试验相鉴别。
甲型副伤寒
乙型副伤寒 丙型副伤寒 伤寒沙门氏菌 其它沙门氏菌
K K K K K
A + -/+ A + ++ A + ++ A - +/A + +
6.血清凝集步骤
6.1 筛选: 取营养琼脂斜面(或KIA斜面)培养物与AFO多价抗血清作玻片凝试 验,若呈明显凝集,提示被检菌可能属于AFO6个0群范围内,再 按0抗原血清凝集定群。若与多价0抗血清不凝集,有如下3种可 能:(1),含有Vi抗原 (2),AFO群之外的沙门氏菌 (3),沙门氏菌以外的细菌,按下述方法进一步检验。 将营养琼脂斜面培养物用1ml无菌生理盐水或蒸馏水洗下,制成浓厚 菌液,再合成2份,1份不经处理,为洗菌液,另一份放100℃水 浴中30分钟,为加热菌液。
5.操作步骤
5.1 观察菌落特征,挑取可疑菌落做KIA,MIU 或TSI初筛。 5.2 血清学鉴定 5.3 从SS平板上挑取纯菌落,传统生化反应进行 菌落坚定。
5.4 初步鉴定
KIA 斜面、底层、产气、H2S MIU 动力、吲哚、脲酶 + + + + + 诊断血清凝集 AFO多价+ A+ AFO多价+ B+ AFO多价+ C+ Vi+ AFO多价+ D+ Vi+ AFO多价+ 肠炎+
6.2 定群
取O2(A群),O4(B群),O7(C1群),O8
(C2群),O9(D群),O3.10(E群),O11(F
群)分别进行玻片凝集试验。若与其中1种因子血 清凝集,可报告为阳性。
6.3 血清型分析:
菌群确定后先分析第1相鞭毛抗原,再分析第2相鞭毛 抗原。
A:第1相鞭毛抗原分析:根据菌群分析结果,分别选用第 1相鞭毛因子血清进行玻片凝集试验。
沙门氏菌的生物学特性 及鉴定要点
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沙门氏菌分为6个亚属,2200多个血清变型。 D群中的伤寒沙门氏菌是临床上最为重要的沙门 氏菌。 1. 形态与染色:革兰氏阴性杆菌,菌体细长,有 周鞭毛。 2. 培养特性:在麦康凯平板上35℃培养18~24 小时,形成无色、透明的菌落。SS平板上显无 色、透明菌落,但大部分菌落中央显黑色(产 H2S)
B:第2相鞭毛抗原分析:改用抗血清,通常是复合因 子(1,2,3,5,e,n,x,i,w)血清。 C:单相菌,若第1相已确定,可结合菌群分析及生化反 应结果判定血清型
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