果蝇不同性状的观察
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科目遗传学实验题目果蝇的观察组别匙形翅
一、研究背景
果蝇(Drossphila)是遗传学试验中最常用的多年生物之一。属昆虫纲,双翅目,果蝇科,果蝇属。果蝇的染色体数目少(仅四对),具有许多自然的或诱发的可遗传突变性状,世代周期短(25℃下10~12天一代,个体小易于饲养,培养费用低廉,繁殖能力强,后代数目繁多,故被作为遗传学实验的典型模式生物。后续实验要作果蝇的杂交实验,需要大量的果蝇,本次实验可以学会识别果蝇的各种形状、区分果蝇的性别以及基本的饲养方法,为后续的实验打下基础。
黑腹果蝇(Drosophila melanogaster),果蝇科(Drosophilidae)果蝇属(Drosophila)昆虫。因其生活史短(在25℃左右温度下十天左右繁殖一代),繁殖力强(雌性可一次产下400个0.5毫米大小的卵),相对性状明显且可遗传,易于培养,培养成本低(酵母和细菌,腐烂水果),符合上述遗传学实验研究要求,同时因其染色体仅4对,基因组仅约165Mb,并且基因组超过60%的片段同人类疾病基因相似。故已将其作为一种常见的模式生物(model organism)大量使用在遗传学(genetics)和发育生物学(developmental biology)的研究。
二、实验目的
1、了解果蝇生活史,观察各发育阶段的形态特征
2、掌握麻醉瓶的使用,即果蝇麻醉技术
3、学会用肉眼(或解剖镜、显微镜)识别果蝇的性别,以及几种果蝇的特征(大
小、形态、条纹、性梳和外生殖器等);
4、了解实验室饲养果蝇的常识方法和所用器械
5、熟练观察果蝇几种突变性状,为果蝇杂交系列实验做准备。
三、实验器材
解剖镜、蓝色塑料板(10cm*10cm)一张、小毛笔、解剖针、麻醉瓶、培养皿、实
验室饲养的黑腹果蝇野生型及其突变体(在果蝇瓶,即指管内)、镊子、酒精灯
四、实验试剂
乙醚、70%乙醇水溶液(含脱脂棉)
五、实验步骤
1、麻醉果蝇
观察果蝇要先把果蝇麻醉,使之处于昏迷状态,便于观察。具体步骤如下:
(1)麻醉瓶灭菌
用70%的酒精擦拭麻醉瓶内壁,用镊子夹着在酒精灯上方烤干,注意镊子应与麻
醉瓶口大约成45°角,以免酒精高温产生的火舌产生伤害事件。
原因:做果蝇杂交实验时,转移、分拣果蝇需要无菌处理,否则将影响果蝇瓶中
酵母的生长,因而本次实验要求对其麻醉时需要灭菌。
(2)果蝇麻醉
将麻醉瓶冷却,用手背轻碰,直至不烫为止。拿出培养瓶,轻拍使果蝇震落到培
养基上。拔掉培养瓶的塞子,迅速将培养瓶口倒扣在麻醉瓶口上。向培养瓶瓶塞
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科目遗传学实验题目果蝇的观察组别匙形翅
中的棉团滴2至3滴乙醚,再次轻拍培养瓶,使果蝇掉入麻醉瓶内,当有足够数量的果蝇落入麻醉瓶内时,重新盖上塞子。部分果蝇向上爬,爬得越高摔得越狠,因为离乙醚最近,便会被麻醉,片刻,果蝇纷纷掉落瓶底。
原因:果蝇被麻醉了
2、果蝇的观察
将麻醉的果蝇置于解剖镜下,用小毛笔(最好不用解剖针)轻轻的拨动观察,使其处于解剖镜下最合适的姿势
原因:果蝇很脆弱,解剖针会损害其身体结构
(1)雌雄果蝇的辨别
①大小雌果蝇通常比雄果蝇大
②形态雌体腹部稍尖,较宽厚呈卵圆形;雄体腹部钝圆,相对窄小呈柱状。
③条纹雌体腹部背面有宽窄相近的5条黑色条纹;雄体腹背只有3条,上部条窄,最后1条宽且延伸至腹部腹面,呈一明显黑斑。
④性梳果蝇胸足跗节共有5个亚节。雄体第一对胸足跗节的第一亚节基部有一梳状黑色鬃毛结构,称谓“性梳”。雌体没有性梳。
⑤生殖器雄体外生殖器色深,雌体色浅。
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科目遗传学实验题目果蝇的观察组别匙形翅
六、附:
(一)注意事项
1、配制培养基时要将(玉米粉)及(琼脂和绵白糖)分开煮。
2、转移果蝇时要防止果蝇飞走。
3、麻醉果蝇时要掌握麻醉尺度,需要用活体时,不可以麻醉过度使果蝇致死。实
验后不用的果蝇要及时处死,不可放飞。
4、防止事故发生(燃烧、爆炸、摔瓶等)
(二)果蝇培养基的制备
玉米培养基配方:
A:糖6.2g,琼脂0.62g,水38ml,煮沸溶解;
B:玉米粉8.25g,水38ml。煮沸溶解;
将A、B混合调制成糊状,加0.5ml丙酸,即可分装到灭菌的培养瓶中。冷却凝固后在表面撒少量酵母粉。
七、思考题
1.果蝇的生活史分几个阶段?
答:分为6个阶段。
以25℃为例,从卵开始约4至5天,变为一龄幼虫,再一天变为二龄幼虫,再一天变为三龄幼虫,紧接着一天变成蛹,经历3到4天成为成虫。
卵:卵白色,长椭圆形,长约0.5mm,在背面的前端伸出一对触丝,它能使卵附着在柔软的食物上,不至于深陷到食物中去。
幼虫:幼虫从卵中孵化出来后,经过两次蜕皮到第三龄期,体长可达4~5mm。
在解剖镜下观察可见一端稍尖为头部,并且有一黑点即口器;稍后有一对半透明的唾腺,每条唾腺前有一条唾腺管向前延伸,然后会合成一条导管通向消化道。
神经节位于消化道前端的上方。
蛹:幼虫生活四天左右即化蛹,化蛹前从培养基中爬出附在瓶壁上,渐次形成一个棱形的蛹。起初颜色淡黄、柔软,以后逐渐硬化,变为深褐色,这就显示即将羽化了。
成虫:成虫的前8个小时内没有繁殖能力,因而找处女蝇应在这个时期。之后成虫交配,又将经历新的一轮周期。
2.你如何准确鉴定果蝇的雌雄个体?要领是什么?
①大小雌果蝇通常比雄果蝇大
②形态雌体腹部稍尖,较宽厚呈卵圆形;雄体腹部钝圆,相对窄小呈柱状。
③条纹雌体腹部背面有宽窄相近的5条黑色条纹;雄体腹背只有3条,上部条
窄,最后1条宽且延伸至腹部腹面,呈一明显黑斑。
④性梳果蝇胸足跗节共有5个亚节。雄体第一对胸足跗节的第一亚节基部有一
梳状黑色鬃毛结构,称谓“性梳”。雌体没有性梳。
⑤生殖器雄体外生殖器色深,雌体色浅。
3.将野生型和几种突变型性状观察的结果填表。
答:见上页表格