牛肉膏蛋白胨培养基的制备与灭菌
实验五 牛肉膏蛋白胨培养基的制备及高压蒸汽灭菌
实验五牛肉膏蛋白胨培养基的制备及高压蒸汽灭菌一实验目的：掌握培养基的配制原则与方法；熟悉手提式高压灭菌器的使用方法和注意事项；二实验材料：器材：试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅等。
试剂：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂等三实验原理：牛肉膏蛋白胨培养基：是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供细菌生长繁殖之用。
高压蒸汽灭菌：主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。
将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。
待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽，关闭排气阀继续加热。
此时蒸汽不溢出，压力增大，沸点升高，获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性，而达到灭菌的目的。
四实验步骤：1.牛肉膏蛋白胨培养基的制备（1）称量准确称取各种成分。
一些不易称量的成分如牛肉膏，可用玻璃棒取出放称量纸上称量，然后连同称量纸一起放入烧杯中。
（2）溶解向烧杯内加入所需的水量，将牛肉膏用水洗下后，加热搅拌全溶后稍放冷。
（4）调pH值精密pH试纸测定其pH值，并用NaOH调至所需pH值（5）分装根据不同需要，可将配好的培养基分装入配有棉塞的试管或三角瓶内。
注意分装时避免培养基挂在瓶口或管口上引起杂菌污染。
如液体培养基，应装试管高度的1/4左右；固体培养基装试管高度的1/5左右；装入三角瓶的量以三角瓶容量的一半为限。
（6）包扎试管扎成捆。
纸上表明培养基的名称、配制日期等。
（7）灭菌培养基用0.1Mpa高压蒸汽灭菌15~20min，五注意事项1.要严格按配方配制。
2.调pH不要过头。
3.高压灭菌要注意物品不要过多，加热后排除冷空气，到时降压回零取物。
配方：牛肉膏：1.5g 蛋白胨5.0g 氯化钠2.5g水500mL 琼脂 7.5g pH 7.2。
培养基的配制及灭菌实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除培养基的配制及灭菌实验报告篇一：培养基的制备与灭菌实验报告(详细)一、实验题目：培养基的制备与灭菌二、实验目的：1、明确培养基的配置原则，掌握配置方法。
2、了解灭菌的原理，学习掌握灭菌器的使用方法。
三、实验器材：1、药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
2、仪器：三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
四、实验原理：1、培养基的制备包括一下几种成分：（1）水分：主要成分。
（2）n源：包括无机氮和有机氮。
（3）c源：主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
（4）无机盐：如nacl、Kh2po4等。
微量元素：cu、K、mg、s、p、Zn。
有些还需要添加“生长因子”，通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的，选用不同的培养基，但有机物总量不得超过15%，盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类：按成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途：基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌，防止营养物质中的微生物富集。
3、灭菌：用理化手段杀灭一切微生物的营养体，包括芽孢和孢子，在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
（1）高压蒸汽灭菌：将物品放入封闭的加压灭菌器，加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽，将冷空气排尽，压力上升，使水沸点变高，导致菌体蛋白质变性，一般0.1mpa、121℃、15~30min可以彻底灭菌，本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基，110℃、30min。
（2）干热灭菌：微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温，所以含水量小，不利于蛋白质受热变性，所以温度高，时间长。
（3）紫外灭菌：诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DnA复制。
（4）过滤除菌：实验室中用微孔滤膜（孔径一般为0.22μm）。
除病菌需更小。
五、实验步骤：1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gnacl放入烧杯，加入100mL水，用玻璃棒搅匀溶解，移入三角瓶，并加入1.5g琼脂。
无菌技术实验报告实验结果
无菌技术实验报告实验结果实验目的：本实验旨在通过无菌技术的操作，培养无菌条件下的微生物，以验证无菌技术的重要性和有效性，并掌握无菌操作的基本技能。
实验材料：1. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基2. 灭菌器材：高压蒸汽灭菌锅、酒精灯、接种环3. 无菌器材：无菌培养皿、无菌移液枪、无菌手套4. 微生物：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌实验方法：1. 培养基的制备与灭菌：按照标准配方配制牛肉膏蛋白胨培养基，使用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌。
2. 无菌操作环境的准备：使用酒精灯火焰消毒工作台，确保操作环境的无菌状态。
3. 接种：在无菌条件下，使用无菌移液枪将待测微生物接种到培养基中。
4. 培养：将接种后的培养皿置于恒温培养箱中，设定适宜的温度进行培养。
5. 观察与记录：定期观察培养皿中微生物的生长情况，并记录数据。
实验结果：1. 培养基灭菌后，未发现任何微生物生长，证明培养基灭菌彻底。
2. 在无菌操作条件下，接种后的培养皿中，大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均表现出良好的生长特性，菌落形态和数量均符合预期。
3. 观察到大肠杆菌菌落呈圆形、光滑、半透明，金黄色葡萄球菌菌落呈圆形、表面粗糙、黄色。
4. 通过对照组（未进行无菌操作的培养皿）与实验组的比较，发现对照组中出现了多种非目标微生物的污染，而实验组则未出现污染现象。
结论：通过本次无菌技术实验，验证了无菌技术在微生物培养中的重要性。
实验结果表明，在严格的无菌操作条件下，可以有效避免微生物培养过程中的污染，确保实验结果的准确性。
同时，实验也加深了对无菌操作技能的理解和掌握，为今后的微生物学研究打下了坚实的基础。
建议：1. 在进行无菌操作时，应严格遵守无菌操作规程，确保操作环境的无菌状态。
2. 定期对实验器材进行灭菌处理，以避免因器材污染导致的实验误差。
3. 在实验过程中，应详细记录实验条件和观察结果，以便对实验结果进行准确的分析和评估。
实验三牛肉膏蛋白胨培养基的制备、微生物的分离与纯化
实验三牛肉膏蛋白胨培养基的制备、微生物的分离与纯化
，必须原创
牛肉膏蛋白胨（Bacto-Proteose-Peptone，由蛋白质和多种水解物组成）培养基是分
离和纯化微生物的优质培养基，它可为微生物提供养分、气味和增强细胞代谢的稳定性，
有利于微生物的成长和繁殖，因此被广泛应用于细菌的鉴别、分离、纯化研究。
本实验介
绍牛肉膏蛋白胨培养基的制备、微生物的分离与纯化。
1、配制牛肉膏：将牛肉的去油干片以40倍的水为底料，煮沸约30min，冷却至室温
后用离心设备至0.75—1％的浊度；
2、添加蛋白质：分别将卵白袋、硝酸蛋白、胱蛋白分别以大约6:2:2的比例添加到
牛肉膏液中，再将二次离心液收集并稀释成1:200；
3、添加添加剂：用 0.1N 的 NaOH 调盐，加入 0.2 ％的 Na2CO3、1.0 ％的 K2HPO4 和 0.007 ％的 MnCl2，使液体 pH 值为7.2 ± 0.2。
二、微生物的分离与纯化：
1、微生物的分离：将牛肉膏蛋白胨作为培养介质，以碗杯离心法将培养基放在26-28℃的恒温器中培养24-48h；
2、筛选：用滤筛得到培养液粒子，将其留在高性能液相色谱仪（HPLC）上；
3、纯化：用不同浓度的氯化钾，盐酸混合溶液或二乙醇胺溶液去除悬浮粒子，再用
离子交换树脂法去除其他污染物，萃取物可用电泳分离成单体；
4、鉴定：根据抗原或抗体鉴定微生物，将其分类编号。
三、结论：
经过牛肉膏蛋白胨培养基的制备、微生物的分离与纯化实验，成功地实现了牛肉膏蛋
白胨培养基的制备、微生物的分离与纯化。
通过该实验，我们可以进一步学习、提高分离
微生物的能力，为临床抗感染药物的研究提供有力的支持。
制备牛肉膏蛋白胨培养基
注意事项（微视频）
/Home/PlayMedia/89353
答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之 间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板 培养微生物。
（二）纯化大肠杆菌
平板划线法 稀释涂布平板法
实验视频
思考与讨论：
•
平板划线操作过程中
•
⑴为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在
划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？
•
•
⑵在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？
倒平板技术
/Home/PlayMedia/224468
1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时， 才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的 温度？
答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶， 感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可 以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
•
•
⑶在作第二次以及其后的划线操作是赤什么总是从上一次划线的
末端开始划线？
•
•
注意事项（微视频）
/Home/PlayMedia/37015
下列有关平板划线操作的叙述不正确的是 C
A.第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在 的微生物污染培养物
B.每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结 束后，接种环上残留的菌种
检测：
1、培养基一般都含有
四类营养成分 2、常用的消毒和灭菌方法有
对于下列材料和用具，选择合适的 消毒或灭菌方法。
培养基、接种环、培养皿、吸管、牛奶、实 验操作者的双手
三、实验操作
（一）制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌）
实验视频
制备培养基的过程中有哪些注意的
牛肉膏蛋白胨培养基的制备及高压蒸汽灭菌讲义
实验一牛肉膏蛋白胨培养基的制备及高压蒸汽灭菌一、目的要求1．明确培养基的配制原理。
2．通过对牛肉膏蛋白胨培养基的配制，掌握配制培养基的一般方法和步骤。
3．了解高压蒸汽灭菌的基本原理及应用范围。
4．学习高压蒸汽灭菌的操作方法。
二、基本原理牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。
它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。
其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源，磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源，而NaCl 提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌，因此，要用稀酸或稀碱将其PH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。
牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下：牛肉膏3g 蛋白胨10g NaCl5g 琼脂15—20g 水1000mlpH7.4—7.6三、器材牛肉膏，蛋白胨，NaCl，琼脂；1mol/L NaOH，1mol/L HCl；试管，三角烧瓶，烧杯，量筒，玻棒，培养基分装器，扭力天平，牛角匙，高压蒸汽灭菌锅，pH试纸（pH5.5—9.0），棉花，牛皮纸，记号笔，麻绳，纱布等。
四、操作步骤1．称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。
也可放在称量纸上，称量后直接放入水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。
蛋白胨很容易吸潮，在称取时动作要迅速。
另外，称药品时严防药品混杂，一把牛角匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净、擦干，再称取另一药品，瓶盖也不要盖错。
2．溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。
牛肉膏蛋白胨培养基配方
牛肉膏蛋白胨培养基配方
配方：
1.牛肉膏粉：10克
2.蛋白胨：10克
3.氯化钠：5克
4.水：1000毫升
制备过程：
1.将牛肉膏粉、蛋白胨和氯化钠加入烧杯中。
2.加入适量的水，充分搅拌，直到完全溶解。
3.将溶液转移到一个大容量瓶中。
4.加入适量的水，使总体积达到1000毫升。
5.用盖子或气密塞封闭瓶口，避免细菌的污染。
6.将培养基在121摄氏度的高压灭菌器中高压灭菌20分钟。
7.灭菌后，将培养基冷却至室温，并存储在4摄氏度的冰箱中。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种富含营养物质的培养基，适用于广泛的细菌种类。
牛肉膏提供了蛋白质、胆碱和其他有机物质，支持细菌的生长。
蛋白胨是由动物和植物的蛋白质消化得到的营养物质，富含氨基酸，可提供能量和生长因子。
氯化钠提供细菌所需的离子平衡。
制备好的牛肉膏蛋白胨培养基可用于分离和培养广谱细菌。
在培养细菌时，可以向培养基中添加其他适当的抗生素或指示剂来选择特定的细菌
菌种。
此外，还可以向培养基中添加其他营养物质，如血清、糖类、氨基酸等，以增强培养基的适用性，满足特定细菌的生长需求。
总结：
牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的细菌培养基，它以富含营养的牛肉膏和蛋白胨为基础，提供了细菌所需的能量、氨基酸和生长因子。
配方简单，制备过程相对简单，适用于广泛的细菌菌种的培养。
根据具体的实验需求，可以对配方进行适当的修改和补充，以提高培养基的适用性和选择性。
培养基的制备实验总结
培养基的制备实验总结一、实验题目：培养基的制备与灭菌二、实验目的：1、明确培养基的配置原则，掌握配置方法。
2、了解灭菌的原理，学习掌握灭菌器的使用方法。
三、实验器材：1、药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
2、仪器：三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
四、实验原理：1、培养基的制备包括一下几种成分：（1）水分：主要成分。
（2）N源：包括无机氮和有机氮。
（3）C源：主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
（4）无机盐：如NaCl、KH2PO4等。
微量元素：Cu、K、Mg、S、P、Zn。
有些还需要添加“生长因子”，通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的，选用不同的培养基，但有机物总量不得超过15%，盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类：按成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途：基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌，防止营养物质中的微生物富集。
3、灭菌：用理化手段杀灭一切微生物的营养体，包括芽孢和孢子，在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
（1）高压蒸汽灭菌：将物品放入封闭的加压灭菌器，加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽，将冷空气排尽，压力上升，使水沸点变高，导致菌体蛋白质变性，一般0.1MPa、121℃、15~30min可以 __灭菌，本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基，110℃、30min。
（2）干热灭菌：微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温，所以含水量小，不利于蛋白质受热变性，所以温度高，时间长。
（3）紫外灭菌：诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。
（4）过滤除菌：实验室中用微孔滤膜（孔径一般为0.22μm）。
除病菌需更小。
五、实验步骤：1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gNaCl放入烧杯，加入100mL水，用玻璃棒搅匀溶解，移入三角瓶，并加入1.5g琼脂。
牛肉膏蛋白胨培养基的配制与灭菌
目录
• 牛肉膏蛋白胨培养基的简介 • 牛肉膏蛋白胨培养基的配制 • 牛肉膏蛋白胨培养基的灭菌 • 牛肉膏蛋白胨培养基的应用 • 总结与展望
01
牛肉膏蛋白胨培养基的简介
定义与用途
定义
牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用 的基础培养基，以牛肉膏和蛋白 胨为主要成分。
用途
常用于培养细菌，如大肠杆菌、 沙门氏菌等。
组成成分
牛肉膏
提供细菌生长所需的碳源、氮源、维生素和矿物质。
蛋白胨
提供细菌生长所需的氮源和维生素。
氯化钠
维持培养基渗透压，调节细菌生长环境。
琼脂
凝固培养基，形成固体培养基。
培养基的理化性质
pH值
适宜细菌生长的pH值为7.2-7.4。
渗透压
适当的渗透压有利于细菌的生长和繁殖。
营养成分
牛肉膏和蛋白胨提供了丰富的营养成分，满足细 菌生长所需。
加入琼脂粉
将溶解好的琼脂粉加入上 述溶液中，继续加热并搅
拌至完全溶解。
01
02
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称量试剂
按照配方比例称取适量的节pH值
使用酸或碱调节培养基的 pH值至7.2-7.4。
灭菌处理
将配制好的培养基分装到 灭菌的培养皿或试管中，
进行高压蒸汽灭菌。
注意事项
避免交叉污染
在配制过程中，要避免培养基与 其他物品接触，以免交叉污染。
储存与使用
配制好的培养基应储存于干燥、 阴凉处，避免阳光直射；在使用 前应检查培养基是否有杂菌污染 。
01
严格控制pH值
pH值对细菌的生长有重要影响 ，应确保培养基的pH值在合适 的范围内。
培养基的制备实验报告
培养基的制备实验报告篇一：《培养基的制备与消毒灭菌》实验报告《培养基的制备与消毒灭菌》实验报告实验目的1.学习和掌握配制培养基（以牛肉膏蛋白胨培养基的配制为例）的一般方法和原理。
2.了解消毒和灭菌的原理，掌握常用灭菌方法的操作步骤。
实验原理培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界中．微生物种类繁多，营养类型多样，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多。
但是，不同种类的培养基中，一般应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素等。
不同微生物对PH要求不一样．雷菌和酵母的培养基的pH一般是偏酸性的，而细菌和放线菌的培养基的pH一般为中性或微碱性的(嗜碱细菌和嗜酸细菌例外)。
所以配制培养基时，都要根据不同微生物的要求将培养基的pH调到合适的范围。
此外，由于配制培养的各类营养物质和容器等含有各种微生物，因此，已配制好的培养基必须立即灭菌．如果来不及灭菌，应暂存冰箱内，以防止其中的微生物生长繁殖而消耗养分和改变培养的酸碱度所带来不利的影响。
高压蒸气灭菌是将持灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅套间的水沸腾而产生蒸气。
待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀．继续加热，此时由于蒸气不能道出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。
导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供作微生物生长繁殖之用。
基础培养基含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。
其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素，蛋白胨主要提供氮源和维生素，而NaCl提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂，琼脂在常用浓度下96℃时溶化，实际应用时，一般在沸水浴中或下而垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。
培养基的制备与灭菌实验报告详细
培养基的制备与灭菌实验报告详细集团文件版本号：（M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988）一、实验题目：培养基的制备与灭菌二、实验目的：1、明确培养基的配置原则，掌握配置方法。
2、了解灭菌的原理，学习掌握灭菌器的使用方法。
三、实验器材：1、药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
2、仪器：三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
四、实验原理：1、培养基的制备包括一下几种成分：（1）水分：主要成分。
（2）N源：包括无机氮和有机氮。
（3）C源：主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
（4）无机盐：如NaCl、KH2PO4等。
微量元素：Cu、K、Mg、S、P、Zn。
有些还需要添加“生长因子”，通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的，选用不同的培养基，但有机物总量不得超过15%，盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类：按成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途：基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌，防止营养物质中的微生物富集。
3、灭菌：用理化手段杀灭一切微生物的营养体，包括芽孢和孢子，在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
（1）高压蒸汽灭菌：将物品放入封闭的加压灭菌器，加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽，将冷空气排尽，压力上升，使水沸点变高，导致菌体蛋白质变性，一般0.1MPa、121℃、15~30min可以彻底灭菌，本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基，110℃、30min。
（2）干热灭菌：微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温，所以含水量小，不利于蛋白质受热变性，所以温度高，时间长。
（3）紫外灭菌：诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。
（4）过滤除菌：实验室中用微孔滤膜（孔径一般为0.22μm）。
培养基制备实验实训报告
一、实验目的1. 理解培养基制备的基本原理和方法。
2. 掌握牛肉膏蛋白胨培养基的配制过程。
3. 学习培养基消毒和灭菌的操作技术。
4. 熟悉实验室无菌操作规范。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的必需物质，它为微生物提供碳源、氮源、水、无机盐和生长因子等营养物质。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的通用培养基，适用于多种微生物的培养。
三、实验材料与仪器材料：- 牛肉膏- 蛋白胨- 氯化钠- 琼脂- 蒸馏水- pH试纸- 灭菌剂仪器：- 电子天平- 烧杯- 玻璃棒- 锥形瓶- 高压灭菌锅- 无菌操作台- 移液管- 研钵- 玻璃珠四、实验步骤1. 称量：称取牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g，放入烧杯中。
2. 溶解：加入适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌至完全溶解。
3. 调节pH：使用pH试纸测定溶液的pH值，调节至7.4-7.6。
4. 加琼脂：称取琼脂15g，加入锥形瓶中，加入适量蒸馏水，加热溶解。
5. 混合：将溶解好的琼脂溶液倒入含有牛肉膏蛋白胨溶液的烧杯中，用玻璃棒搅拌均匀。
6. 分装：将混合好的培养基分装到锥形瓶中，每瓶约100mL。
7. 灭菌：将锥形瓶放入高压灭菌锅中，121℃灭菌15分钟。
8. 冷却：将灭菌后的培养基取出，待冷却至50-60℃。
9. 倒平板：将冷却后的培养基倒入无菌平皿中，用玻璃棒轻轻搅拌，使培养基均匀铺平。
10. 凝固：待培养基凝固后，进行无菌试验。
五、实验结果与分析实验过程中，成功制备了牛肉膏蛋白胨培养基，并进行了无菌试验。
结果表明，培养基制备过程符合无菌操作规范，无污染现象。
六、实验讨论1. 在培养基制备过程中，应注意称量准确，避免误差。
2. 溶解过程中，应充分搅拌，确保各成分均匀分布。
3. 调节pH值时，应使用pH试纸，避免使用pH计。
4. 灭菌过程中，应严格控制时间，避免过度灭菌或灭菌不足。
5. 倒平板过程中，应避免产生气泡，影响平板质量。
七、实验总结本次实验成功制备了牛肉膏蛋白胨培养基，并掌握了培养基制备的基本原理和方法。
实验三 培养基的制备
实验三培养基的制备、灭菌及微生物的分离与纯化实验三培养基的制备、灭菌及微生物的分离与纯化一、实验目的1. 了解配制培养基的一般方法和步骤；掌握牛肉膏蛋白胨培养基、高氏1号培养基和马丁培养基的制备方法。
2. 了解灭菌的原理，掌握高压蒸气灭菌的操作方法。
3. 掌握严格的无菌操作技术，掌握从土壤中分离微生物的方法。
二、实验内容1．学习牛肉膏蛋白胨培养基、高氏1号培养基和马丁氏培养基的配制。
2．学习高压蒸气灭菌的操作方法。
3．学习用稀释法分离细菌、放线菌和霉菌；用平板划线方法分离微生物。
4．学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术。
三、实验材料和用具牛肉膏、蛋白胨、琼脂、可溶性淀粉、葡萄糖、孟加拉红、链霉素、1mol/L NaOH、lmol/L HClKNO3、NaCl、K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O、4.5mL无菌水6管，10%酚液，49.5mL无菌水(带玻璃珠)1瓶。
土壤样品、试管、培养皿、移液管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、称量纸、牛角匙、pH试纸、棉花、报纸、记号笔、线绳、纱布、酒清灯等。
电炉、立式高压蒸气灭菌锅、手提式高压蒸气灭菌锅、超净工作台等。
四、操作步骤（一）培养基的制备1．牛肉膏蛋白胨培养基的配制牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。
其配方如下：牛肉膏3g，蛋白胨10g，Nacl5g，琼脂15～20g，水1000mL，PH7.4～7.6（1）称药品：按实际用量计算后，按配方称取各种药品放入大烧杯中。
牛肉膏可放在小烧杯中称量，用热水溶解后倒入大烧杯。
蛋白胨极易吸潮，故称量时要迅速。
（2）加热溶解：在烧杯中加入少于所需要的水量，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒搅拌，待药品完全溶解后再补充水分至所需量。
若配制固体培养基，则将称好的琼脂放入己溶解的药品中，再加热融化，此过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，最后补足所失的水分。
实验一 微生物培养基的制备与灭菌
实验一微生物培养基的制备与灭菌（8课时）一、目的要求1、学习配制微生物培养基的一般方法和步骤。
2、掌握高压蒸汽灭菌的原理和操作方法。
二、基本原理正确掌握培养基的配制方法是从事微生物学实验工作的重要基础。
由于微生物种类及代谢类型的多样性，因而用于培养微生物的培养基的种类也很多，它们的配方及配制方法虽各有差异，但一般培养基的配制程序却大致相同，例如器皿的准备，培养基的配制与分装，棉塞的制作，培养基的灭菌，斜面与平板的制作以及培养基的无菌检查等基本环节大致相同。
三、实验材料1、药品：牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂粉、1mol/L的NaOH和1mol/L HCl溶液。
2、仪器及玻璃器皿：电子天平、高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、酒精灯、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿和玻璃棒等。
3、其他物品：药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花、报纸、线绳和注射器等。
四、操作步骤（一）玻璃器皿的洗涤玻璃器皿在使用前必须用洗涤剂洗刷干净，然后用自来水冲净，置于烘箱中烘干后备用。
（二）牛肉膏蛋白胨培养基的配制1、培养基配制（1）称量：按培养基配方计算出各成分的用量，然后用电子天平进行准确称量后倒入一烧杯中。
注意：称量药品时，一定要用称量纸而不能用滤纸。
称药品用的药匙不要混用，称完药品应及时盖紧瓶盖。
（2）溶解：用量筒称量所需体积的水（根据实验需要可用自来水或蒸馏水），倒入烧杯中，用玻璃棒搅动溶解即可。
（3）调pH：一般用pH试纸测定培养基的pH，可用1mol/L NaOH或1mol/L HCl溶液进行调节。
调节pH时，应逐滴加入NaOH或HCI溶液，防止局部过酸或过碱，破坏培养基中成分。
边加边搅拌，并不时用PH试纸测试，直至达到所需pH为止。
注意：pH值不要调过头，以免回调而影响培养基内各离子的浓度。
2、制备液体培养基（1）用量筒准确量取20ml培养基，倒入100ml三角瓶中，塞好棉塞，用报纸包好瓶口并用棉线包扎好，灭菌。
注意：倒溶液时不要把瓶口沾湿。
培养基的制备实验报告材料
培养基的制备实验报告材料（文章一）：培养基的制备与灭菌实验报告(详细)（一）、实验题目：培养基的制备与灭菌（二）、实验目的：（1）、明确培养基的配置原则，掌握配置方法。
（2）、了解灭菌的原理，学习掌握灭菌器的使用方法。
（三）、实验器材：（1）、药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
（2）、仪器：三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
（四）、实验原理：（1）、培养基的制备包括一下几种成分：（1）水分：主要成分。
（2）N源：包括无机氮和有机氮。
（3）C源：主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
（4）无机盐：如NaCl、KH2PO4等。
微量元素：Cu、K、Mg、S、P、Zn。
有些还需要添加“生长因子”，通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
（2）、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的，选用不同的培养基，但有机物总量不得超过15%，盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类：按成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途：基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌，防止营养物质中的微生物富集。
（3）、灭菌：用理化手段杀灭一切微生物的营养体，包括芽孢和孢子，在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
（1）高压蒸汽灭菌：将物品放入封闭的加压灭菌器，加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽，将冷空气排尽，压力上升，使水沸点变高，导致菌体蛋白质变性，一般0.1MPa、121℃、15~30min可以彻底灭菌，本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基，110℃、30min。
（2）干热灭菌：微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温，所以含水量小，不利于蛋白质受热变性，所以温度高，时间长。
（3）紫外灭菌：诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。
（4）过滤除菌：实验室中用微孔滤膜（孔径一般为0.22μm）。
除病菌需更小。
牛肉膏蛋白胨培养基制备实验报告
牛肉膏蛋白胨培养基制备实验报告
学习制备牛肉膏蛋白胨培养基的方法，了解牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂等的作用和用途。
实验原理：
牛肉膏：牛肉膏是从生牛肉中提取的富含营养物质的肉汁，富含氨基酸、矿物质和其他生长因子。
蛋白胨：是一种从鸡蛋中提取的高营养物质，富含多种必需氨基酸和维生素。
氯化钠：是必须添加到培养基中以提供细菌和其他细胞所需的盐类和离子。
琼脂：是一种由红藻属海藻制成的胶质，用于固化液态培养基并在固态培养基上生长细胞。
实验材料：
牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、三角瓶、试管等。
实验步骤：
1. 倒入500毫升的去离子水至三角瓶中。
2. 加入5克牛肉膏和5克蛋白胨，用玻璃棒搅拌均匀。
3. 加入5克氯化钠和2克琼脂，再次搅拌均匀。
4. 将三角瓶放入水浴中，加热至琼脂完全溶解。
5. 关闭火源，将溶液冷却至50℃左右。
6. 倒入培养基到试管中，每个试管约5毫升。
7. 放置试管直至琼脂凝固。
实验结果与分析：
制备完成的牛肉膏蛋白胨培养基呈明亮的黄色透明液体，琼脂凝固后成为浅黄色的固态培养基。
该培养基富含多种必需的营养物质，可满足多种细菌和其他微生物生长的需要，可用于多种微生物培养和研究。
实验中需要注意的问题：
1. 避免使用破损的琼脂；
2. 加热时要注意温度的控制；
3. 做好无菌操作，防止细菌和其他微生物的污染。
牛肉膏蛋白胨培养基的制备与灭菌
牛肉膏蛋白胨培养基的制备与灭菌一、实验目的：1、学习并掌握培养基配制的原理，掌握配制牛肉膏蛋白胨培养基的方法和步骤。
2、学习并了解高压蒸汽灭菌的原理和操作技术。
二、实验原理：（一）微生物分离与纯化1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备与灭菌牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。
其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源，磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源，而NaCl提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在下面垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。
由于这种培养基多用于培养细菌，因此，要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。
三、实验仪器和试剂1、仪器：分析天平；锥形瓶；移液管；高温电炉；容量瓶；烧杯；无菌培养皿；pH试纸；胶头滴管；玻璃试管；酒精灯；高压蒸气锅；玻璃棒；2、试剂：牛肉膏；蛋白胨； NaCl ；琼脂；蒸馏水；四、实验步骤：（一）分离纯化制备试验菌种的菌悬液1、培养基的配置配置牛肉膏蛋白胨的液体培养基，待培养基冷却后进行分装。
将分装完毕后的培养基进行高压蒸汽灭菌；①称量：按试验用微生物培养基配方，逐一称取各种药品放入烧杯中。
液体培养基配方：②溶解：将去蒸馏水加入到上述烧杯中使各种成分溶解，难溶的物质，例如蛋白胨、加热促进其溶解，待全部溶解后，加水补足加热蒸发的水量。
制备固体培养基，加热融化琼脂时要不断的搅拌，避免琼脂糊底烧焦。
③调节pH值；初配好的培养基往往不能符合所需要的pH值，故需用pH试纸检测，并以一定浓度的盐酸溶液和氢氧化钠溶液调节培养基溶液pH值至7—8。
④分装：将调节好pH值的培养基分装于十支试管和两个锥形瓶中(注意防止培养基沾污管口或瓶口，避免浸湿橡皮塞塞引起杂菌污染)。
分装液体培养基时，每支试管装的量为试管高度的1/3～1/2，锥形瓶中各加入250—300ml培养基。
培养基的制备实验总结
培养基的制备实验总结篇一：《培养基的制备与消毒灭菌》实验报告《培养基的制备与消毒灭菌》实验报告实验目的1.学习和掌握配制培养基（以牛肉膏蛋白胨培养基的配制为例）的一般方法和原理。
2.了解消毒和灭菌的原理，掌握常用灭菌方法的操作步骤。
实验原理培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界中．微生物种类繁多，营养类型多样，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多。
但是，不同种类的培养基中，一般应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素等。
不同微生物对PH要求不一样．雷菌和酵母的培养基的pH一般是偏酸性的，而细菌和放线菌的培养基的pH一般为中性或微碱性的(嗜碱细菌和嗜酸细菌例外)。
所以配制培养基时，都要根据不同微生物的要求将培养基的pH调到合适的范围。
此外，由于配制培养的各类营养物质和容器等含有各种微生物，因此，已配制好的培养基必须立即灭菌．如果来不及灭菌，应暂存冰箱内，以防止其中的微生物生长繁殖而消耗养分和改变培养的酸碱度所带来不利的影响。
高压蒸气灭菌是将持灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅套间的水沸腾而产生蒸气。
待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀．继续加热，此时由于蒸气不能道出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。
导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供作微生物生长繁殖之用。
基础培养基含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。
其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素，蛋白胨主要提供氮源和维生素，而NaCl提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂，琼脂在常用浓度下96℃时溶化，实际应用时，一般在沸水浴中或下而垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。
牛肉膏蛋白胨培养基的注意事项
牛肉膏蛋白胨培养基的注意事项1. 温度控制：牛肉膏蛋白胨培养基的温度是非常重要的。
一般来说，它的适宜温度为37°C，这是大部分微生物生长的最佳温度。
温度过高或过低都可能影响微生物的生长和代谢活动。
因此，在制备和使用培养基时，需要严格控制温度，并使用恒温设备来维持恒定的温度。
2. 消毒处理：在制备牛肉膏蛋白胨培养基之前，需要对使用的实验器具、培养基成分等进行彻底的消毒处理，以防止细菌、真菌等污染。
一般来说，常用的消毒方法包括高温蒸汽灭菌、紫外线照射或化学消毒剂的使用。
在消毒处理时，要确保彻底而有效地杀灭潜在的污染源。
3. pH调节：牛肉膏蛋白胨培养基的pH值对于微生物的生长和代谢活动也是非常重要的。
一般来说，大部分微生物的生长pH范围为6.5-7.5，因此，在制备培养基时，需要调节pH至适宜范围。
调节pH可以使用酸碱溶液，例如盐酸或氢氧化钠溶液，并使用pH计进行准确测量。
4. 存储条件：制备好的牛肉膏蛋白胨培养基需要适当的存储条件，以确保其质量和效果。
一般来说，培养基应存放在冷暗的地方，避免阳光直射和高温环境。
打开后的培养基应密封保存，以防止空气中的细菌和真菌的污染。
在存放过程中，还需要注意避免震动和摇晃，以免影响培养基的稳定性。
5. 使用时注意无菌操作：在使用牛肉膏蛋白胨培养基时，需要进行无菌操作，以防止外界的细菌和真菌污染。
这包括使用消毒的培养皿、试管和培养具，穿戴合适的实验室衣物和手套，并在无菌操作台上进行操作。
同时，注意使用无菌的移液器和培养基取样工具，避免直接接触空气和其他污染源。
总结：牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的培养基，但在使用时需要注意温度控制、消毒处理、pH调节、存储条件和无菌操作等方面的注意事项。
这些措施能够确保培养基的质量和效果，同时防止外界的污染源对微生物的影响，从而保证实验结果的准确性和可靠性。
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牛肉膏蛋白胨培养基的制备与灭菌
一、实验目的：
1、学习并掌握培养基配制的原理，掌握配制牛肉膏蛋白胨培养基的方法和步骤。
2、学习并了解高压蒸汽灭菌的原理和操作技术。
二、实验原理：
（一）微生物分离与纯化
1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备与灭菌
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。
其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源，磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源，而NaCl提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在下面垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。
由于这种培养基多用于培养细菌，因此，要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。
三、实验仪器和试剂
1、仪器：
分析天平；锥形瓶；移液管；高温电炉；容量瓶；烧杯；无菌培养皿；pH试纸；胶头滴管；玻璃试管；酒精灯；高压蒸气锅；玻璃棒；
2、试剂：
牛肉膏；蛋白胨；NaCl ；琼脂；蒸馏水；
四、实验步骤：
（一）分离纯化制备试验菌种的菌悬液
1、培养基的配置
配置牛肉膏蛋白胨的液体培养基，待培养基冷却后进行分装。
将分装完毕后的培养基进行高压蒸汽灭菌；
①称量：按试验用微生物培养基配方，逐一称取各种药品放入烧杯中。
液体培养基配方：
②溶解：将去蒸馏水加入到上述烧杯中使各种成分溶解，难溶的物质，例如蛋白胨、加热促进其溶解，待全部溶解后，加水补足加热蒸发的水量。
制备固体培养基，加热融化琼脂时要不断的搅拌，避免琼脂糊底烧焦。
③调节pH值；初配好的培养基往往不能符合所需要的pH值，故需用pH试纸检测，并以一定浓度的盐酸溶液和氢氧化钠溶液调节培养基溶液pH值至7—8。
④分装：将调节好pH值的培养基分装于十支试管和两个锥形瓶中(注意防止培养基沾污管口或瓶口，避免浸湿橡皮塞塞引起杂菌污染)。
分装液体培养基时，每支试管装的量为试管高度的1/3～1/2，锥形瓶中各加入250—300ml培养基。
分装完毕后，将试管及锥形瓶用橡皮塞塞紧，防止高压蒸汽灭菌时管内压力过大冲开。
⑤包扎：加塞后，在全部试管胶塞外包裹双层报纸，并用棉绳捆扎好，同样的，将两个锥形瓶也用同样的方法包扎好。
最后，用记号笔注明培养基名称，日期。
2、灭菌
本试验采用高压蒸气灭菌法。
①加水，立式锅是直接加水至锅内底部隔板以下1/3处。
②把需灭菌的器物放入锅内(器物不要装得太满，否则灭菌不彻底)，
关严锅盖(对角式均匀拧紧螺旋)，打开排气阀。
③启动电源开关。
④待炉内水沸腾后，蒸气将炉内冷空气驱净，关闭排气阀。
⑤升压，升温。
关闭排气阀以后，锅内成为密闭系统，蒸气不断增加，压力计和温度计的指针上升，当压力达到1.05kg/cm2(温度为121℃)即灭菌开始，这时开、关电源，保证压力维持在1.05 kg/cm2，20min左右。
⑥中断热源，达到灭菌时间要求后停止加热，任其自然降压，当指针回到“0”时，打开排气阀(排气阀不能过早打开，否则培养基因压力突降，温度没下降而翻腾冲到棉塞处，既损失培养基又沾污了棉塞)。
⑦揭开锅盖，取出器物，分装至无菌培养皿中，静置。
⑧二十四小时后观察是否有菌种出现。
六、试验结论
据观察，培养皿中没有菌种产生，说明本次实验的操作合格，没有大问题出现，实验成功。
（附图）
10级水环境检测与保护
周超。