精原干细胞的分离.

精原干细胞的分离、纯化和初步鉴定

薛振华1刘国世1，2史建民1王梁1田秀芝1王永彬1

侯保民3田见晖1，2曾申明1，2朱士恩1，2

（1. 中国农业大学动物科学技术学院，北京 100094；

2. 农业生物技术国家重点实验室，北京 100094；

3. 内蒙古兴安盟科右中旗草原工作站，内蒙古巴彦胡舒 029400）

摘要对达兰仔猪睾丸精原细胞及精原干细胞进行了体外分离、纯化和初步鉴定。对8 d达兰仔猪的睾丸实质组织，采用Ⅳ型胶原酶、透明质酸酶和胰酶组合消化法分离精细管细胞，制备单细胞悬液，用Percoll 不连续密度(11%、19%、27%、35%和43%)梯度法纯化精原细胞；对纯化后的细胞培养12 h ，细胞贴壁后进行碱性磷酸酶(AKP)染色鉴定，初步确定精原干细胞及其比例。结果表明：所获精细管细胞悬液中活细胞和死细胞所占的比率分别为9265%和735%，平均每克睾丸可获得417×107个细胞；精原细胞主要分布于19%～27%的Percoll 梯度带中，经纯化后其纯度为4762%，精原干细胞占该带细胞的比例为552%。因此，采用组合酶消化，结合Percoll 不连续密度梯度离心法分离的达兰仔猪的精原细胞不但能够满足体外培养的需要，还可以做为精原干细胞移植的研究材料。

关键词达兰猪；精原干细胞；分离；纯化；精原细胞

DA-6对草莓叶绿体光化学反应和Rubisco活性的影响

单守明1刘国杰1李绍华2苗鹏飞1

（1农学与生物技术学院, 北京 100094；

2北京植物研究所, 北京 100093）

摘要以草莓为试材，研究叶面喷施二烷氨基乙醇羧酸酯（DA-6）对叶绿体光化学反应和Rubisco活性的影响。结果表明，处理14 d后，10和20 mg/L DA-6分别使草莓叶片净光合速率提高了7.6%和16.4%，同时还提高了叶绿素含量、叶绿体Hill反应、光合磷酸化活性和Mg2+ATPase活性，并使Rubisco活性各提高了7.9%和16.9%。40 mg/L的DA-6降低了叶片的光合作用速率、叶绿素含量、叶绿体光化学反应和Rubisco活性。试验结果表明，叶面喷施DA-6能调节草莓叶片叶绿体光化学反应和Rubisco活性，并同时

影响叶片的净光合作用速率。

关键词二烷氨基乙醇羧酸酯(DA6)；草莓；光合作用；叶绿体；1,5/加氧酶(Rubisco) ABA在植物细胞抗氧化防护过程中的作用

许树成1，2丁海东2鲁锐2石犇2马芳芳2

(1．阜阳师范学院生命科学学院，安徽阜阳 236032；

2．南京农业大学生命科学学院，南京210095）

摘要水分胁迫是一种影响植物生长发育、限制作物产量的重要环境因子，植物激素脱落酸（ABA）在调节植物对水分胁迫响应的过程中起重要作用。ABA不仅可以通过诱导气孔关闭来调节植物水分代谢，而且可以通过诱导脱水耐性蛋白的表达来增强植株对水分胁迫的抗性。越来越多的证据表明，ABA增强水分胁迫耐性的作用与其诱导的抗氧化防护系统有关。本文综述了ABA诱导活性氧产生、抗氧化防护酶基因表达、抗氧化防护酶活性增强方面的新进展，进一步分析了NADPH氧化酶、激酶磷酸化反应、Ca2+与活性氧之间的“交谈”在ABA诱导的抗氧化防护反应中的作用,认为:ABA诱导的抗氧化作用在植物细胞内的信号转导途径是网络，而不是直线通路，蛋白激酶磷酸化反应是H2O2传递信号的主要方式。

关键词脱落酸(ABA)；抗氧化防护；活性氧（ROS）；信号转导；水分胁迫

响应面法优化降胆固醇马红球菌F21-1的发酵培养基

蒋丹丹张彬梁志宏牛天贵

（中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京 100083）

摘要采用响应面方法，对能够高效降解胆固醇的马红球菌F211的发酵培养基进行优化。在前期比较试验已筛选出碳源、氮源及表面活性剂最佳组合的基础上，通过Box Behnken设计法对这3个因素进行响应面分析，以胆固醇降解率为响应值作响应面和等高线图。结果表明，马红球菌F211降解胆固醇发酵培养基添加物最佳成分配比为：胆固醇为1.49 g/L，蛋白胨为791 g/L，Tween80为282 mL/L。培养基成分优化后，马红球菌F211菌株胆固醇降解率(87.80%) 提高了22.53％。

关键词马红球菌F211；响应面分析法；Box Behnken设计；优化

苹果和梨属间杂交及其幼胚挽救研究

孙亮冷平

（中国农业大学农学与生物技术学院，北京 100094）

摘要以富士苹果为母本、‘金二十世纪’梨和京白梨为父本进行属间杂交试验，以未授粉正常管理的果实为对照对授粉果实进行生物学观察，并对幼胚进行挽救培养。结果发现，以‘金二十世纪’梨为父本的杂交果坐果率为，以京白梨为父本的未坐果；杂交果实前期发育快，果实大于对照，后期发育慢，果实小于对照；果形指数前期小于对照，后期大于对照。授粉后60 d杂种幼胚先接种在

蔗糖50 g/L+ 琼脂7 g/L培养基上，接种后先置于冰箱中4℃暗培养60 d再置于25 ℃条件光照培养，待子叶转绿膨大或胚根伸长后，转接到蔗糖30 g/L + 琼脂7 g/L 培养基上培养7~10 d；没有抽生芽点的合子胚转移至

+ 蔗糖30 g/L + 琼脂7 g/L培养基上40~60 d可以生芽。

关键词苹果；梨；远缘杂交；胚挽救；果实发育

桃不同种质资源成熟果实葡萄糖、果糖含量比例研究赵剑波1，2，3姜全3郭继英3陈青华3李绍华2

（1农学与生物技术学院，北京 100094；

2植物研究所，北京 100093；

3林业果树研究所，北京 100093）

摘要以北京市农林科学院林业果树研究所国家桃种质资源圃144份桃资源为试验材料，利用高效液相色谱仪于2003、2004连续2年对其成熟果实的葡萄糖、果糖含量进行了测定。发现其中104份果实的葡萄糖和果糖含量比例接近1,包括91个育成品种、1个近缘种山桃和12个地方品种。另外，40份种质中的38份果实的葡萄糖和果糖含量比为138~2221，为低果糖类型，其中包括2个原产中国的桃的近缘种，4个野生种质和23个桃地方品种，说明在野生桃中存在低果糖基因。由于果糖在甜风味中贡献最大，因此在选择桃野生种质或地方品种作为杂交育种亲本时，可优先考虑葡萄糖/果糖接近1的桃种质，例如：乌桃、