精原干细胞的分离.
精原干细胞移植技术研究进展
精原干细胞移植技术研究进展精子发生是男性生殖细胞增殖、分化的过程,始于青春期并维持终生。
精原细胞尤其是精原干细胞是持续维持精子发生的关键因素。
个体内可因缺乏精原干细胞或放疗、化疗而导致生精细胞发育障碍或产生无功能性精子等原因引起不育。
新近发展的精原干细胞移植技术为研究精子发生机理提供了新的途径。
本文简要综述这项技术的发展过程、主要方法以及最新进展和应用前景。
1 精原干细胞移植技术分类及发展过程精原干细胞同源移植技术包括自体移植和同种异体移植。
这项技术始于1994年Brinster等[1]将可育小鼠的精原干细胞注射到不育小鼠的曲细精管使受体鼠产生了具有受精能力的精子并产出了正常后代,这是精原干细胞移植的首次重要突破。
Honaramooz等[2]在实验中,将猪的生殖细胞移入自身对侧的睾丸(自体移植)和无关另外一头猪的睾丸中(同种异体移植),结果两者都未对供者的生殖细胞发生明显免疫应答,但植入猪睾丸中的小鼠生殖细胞却很快被清除,故他们认为免疫耐受现象只限于同源移植。
1996年Clonthier等[3]将大鼠睾丸细胞显微注射到无免疫应答的重度综合免疫缺陷(severe-combined immunodeficient mice,SCID)的裸小鼠的睾丸中,睾丸干细胞会继续发育,并产生带有供体细胞种属的精子发生,取得了跨物种产生精子的重大突破。
1999年Ogawa等[4]将小鼠的睾丸细胞移植到大鼠的睾丸中获得成功。
Sofikitis[5]等认为人类睾丸细胞移入小鼠或大鼠可使25%的受体产生精子,这似乎表明灵长类生殖细胞或多或少比其它非啮齿类、非灵长类种属与啮齿类动物生精小管的微环境更相容。
Napano等[6]发现人的精原干细胞能在小鼠睾丸中至少可以存活六个月,且在移植后第一个月能保持增殖但不能分化。
这种现象0gawa等认为可能是由于小鼠内源性的支持细胞缺乏足够的能力来支持系统发育距离较远的物种。
但用睾丸组织块异位移植可部分解决上述问题,2002年Honaramooz等将新生小鼠、猪或羊的睾丸组织块(0.5-1mm3)移植到阉割的裸鼠的背部皮下,结果60% 以上的移植物存活,而且体积增大,并最终产生成熟的精子。
精原干细胞研究进展
精原干细胞研究进展精原干细胞是精子形成的前体细胞,具有自我增殖和多向分化潜能。
本文对精原干细胞的微环境、体外培养和冻存的研究现状进行综述。
标签:精原干细胞;微环境;体外培养中图分类号R321.2 文献标识码 B 文章编号1674-6805(2012)11-0148-02精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是位于睾丸曲细精管生精上皮基膜上的一群成体干细胞,具有高度自我增殖和多向分化潜能。
SSCs的终生扩增性和永生性是产生雄性生殖细胞的保证。
SSCs通过有序而严格调控的细胞增殖和分化,使精子发生的过程可以持续男性的一生,产生大量的精子。
现对近年来精原干细胞在增殖和冻存方面的研究成果做简要概述。
1 精原干细胞的微环境SSCs位于生精上皮基底部,是相对数量极少的一类细胞,据估计仅占睾丸精原细胞的0.03%。
如同小肠隐窝存在很多干细胞,SSCs既包括未分化的干细胞,也包括祖细胞,这两类细胞都在成年男性体内保持生殖能力。
有证据证明,根据被研究细胞的背景,SSCs的祖细胞具有与未分化SSCs相同的功能。
研究显示,SSCs龛境的结构和分子特征首先限制龛境内的SSCs[1]。
Sertoli细胞、基膜、小管周的肌样细胞构成睾丸SSCs龛框架或龛骨架,而这些框架或骨架围绕的空间形成的微环境称为龛境。
SSCs龛境简单定义为存在SSCs的曲细精管区域,在男性的一生中起支持SSCs增殖和自我更新的作用。
与其他干细胞类似,位于龛境中的SSCs可以维持其可塑性。
一旦离开龛境,SSCs 就会失去自我更新的能力,并且开始发生分化,最终形成成熟精子[2]。
曲细精管中,精原细胞的增殖、自我更新和分化说明基膜室是真正的SSCs龛境的分界区域。
基底膜的分子标志为鉴定和富集SSCs提供了基础。
曲细精管及其周围的间质组织由各种不同的细胞组成,为精子发生提供各种激素、生长因子和细胞因子。
合成和分泌的上述各种因子调节龛境SSCs的自我更新和增殖,离开龛境的SSCs会发生分化。
精原干细胞研究进展
精原干细胞研究进展宋瑞高;姚晓磊;石磊【摘要】Spermatogonial stem cells are oocytes of male mamals germ cells which not only can maintain the number of themselves but also can differentiate to spermatocyte. Spermatogonial stem cells are also closely related to the genetic background of the next male generation individuals. Therefore, the study of spermatogonial stem cells in the field of cell biology,medicine and transgene has broad application prospects. In this review,biological characteristics,isolation,purification,cultivation and transplantation of spermatogonial stem cells were discussed.%精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是各种雄性动物生殖细胞的母细胞,是一群具有自我更新和分化潜能的细胞,并且在雄性个体中精原干细胞与下一代的遗传背景密切相关。
因此,精原干细胞在细胞生物学、医学、转基因等领域的研究有着广阔的应用前景。
文章根据国内外相关研究进展,对精原干细胞的生物学特性、分离纯化与培养、移植等作一概述。
【期刊名称】《中国草食动物科学》【年(卷),期】2014(000)005【总页数】4页(P54-56,57)【关键词】精原干细胞;生物学特性;分离纯化;移植【作者】宋瑞高;姚晓磊;石磊【作者单位】山西农业大学动物科技学院,太谷 030801;山西农业大学动物科技学院,太谷 030801;山西农业大学动物科技学院,太谷 030801【正文语种】中文【中图分类】Q2哺乳动物雄性成体中的精子发生系统在雄性配子的产生和进化过程中起着基因传递的作用,这一系统的基础就是精原干细胞(spermatogonial stemcells,SSCs)。
牛精原干细胞研究进展
牛精原干细胞研究进展王春伟;扶晓波;吕妍;赵军;郭秋萍;张卫艺;胡建宏【摘要】精原干细胞(SSCs)是雄性生殖系干细胞,位于睾丸曲细精管基底膜上,具有自我更新和定向分化的潜能,是自然状态下出生后动物体内在整个生命过程中进行自我更新并能将基因传递至子代的惟一成体干细胞.本文在阐述精原干细胞发生的基础上,通过分析犊牛精原干细胞分离纯化、培养鉴定、冷冻保存和诱导分化的现状,分析了牛精原干细胞研究领域目前存在的主要问题,展望了牛精原干细胞的应用前景,以期为精原干细胞的研究提供参考.【期刊名称】《家畜生态学报》【年(卷),期】2013(034)010【总页数】4页(P6-9)【关键词】牛;精原干细胞;研究进展;存在问题;发展前景【作者】王春伟;扶晓波;吕妍;赵军;郭秋萍;张卫艺;胡建宏【作者单位】西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100【正文语种】中文【中图分类】S811.6精子发生是雄性动物终身产生大量精子的一个过程,其特点是由二倍体生殖细胞(精原干细胞)的单向分化,通过减数分裂形成精母细胞,最后产生单倍体配子精子[1]。
精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是哺乳动物出生后唯一能进行自我更新并将遗传信息传递给后代的具有像胚胎干细胞一样增殖和分化潜能的干细胞[2]。
精原干细胞的建立,不仅提供了一种新的工具来分析精子发生或干细胞的自我更新,同时也开辟了干细胞实际应用的新领域。
本文通过分析牛精原干细胞分离纯化、培养鉴定、冷冻保存和诱导分化的研究现状,指出目前存在的主要问题,并展望其应用前景,以期为精原干细胞的研究提供借鉴。
精原干细胞-是一种成体干细胞,具有自我更新及多向分化潜能
精原干细胞-是一种成体干细胞,具有自我更新及多向分化潜能精原干细胞-是一种成体干细胞,具有自我更新及多向分化潜能,已有研究表明,精原干细胞具有多向细胞分化的能力,将其体外扩增,可为细胞移植提供足够的来源,并可将其体外定向诱导为特异性细胞。
学术术语来源---小鼠精原干细胞体外培养诱导成骨的能力文章亮点:1 文章创新性的在体外分离、培养、纯化精原干细胞,并观察其在成骨细胞培养条件下的生物学特征变化,以期为治疗牙槽骨吸收、研制骨组织工程材料的种子细胞选择奠定实验基础。
2 实验结果提示精原干细胞在该诱导培养条件下具有成骨能力的趋势,这将为进一步研究成体干细胞的多向分化理论提供参考,同时也为深入研究精原干细胞向其他细胞转化提供了实验依据。
关键词:干细胞;培养;精原干细胞;成骨能力;诱导;生物学特性;种子细胞主题词:干细胞;成骨细胞;显微镜检查,荧光;培养基, 条件性摘要背景:精原干细胞具有自我更新及多向分化潜能,并可将其体外定向诱导为特异性细胞,提示精原干细胞亦可能具有向成骨细胞转化的可能性,但有关这方面的研究尚未见报道。
目的:观察小鼠精原干细胞在体外成骨细胞培养条件下的生物学特征变化。
方法:取生后15-20 d小鼠胫骨骨髓,分离、培养骨髓基质细胞,5 d后丝裂霉素C处理制备成饲养层;取生后七至八天小鼠睾丸,经酶消化后制成单细胞悬液并接种于饲养层上。
3 d后实验组和对照组分别用条件培养液和基本培养液进行诱导培养,通过倒置相差显微镜观察培养细胞生长状况及形态变化,并结合碱性磷酸酶染色、Ⅰ型胶原免疫荧光染色等方法进行结果检测。
结果与结论:实验组精原干细胞在条件培养液中较对照组细胞贴壁生长快,条件培养3-6 d后见细胞生长迅速,呈集落样增长,细胞立体感增强,细胞团、簇的大小继续增加,细胞外基质增多,但未见明显细胞间桥。
培养15 d后,对两组细胞进行碱性磷酸酶染色可见胞质、胞膜染为黑色,呈阳性。
在荧光显微镜下可见实验组细胞浆内出现绿色荧光,呈阳性荧光反应;对照组细胞呈阴性反应,说明实验组细胞Ⅰ型胶原染色阳性,这与成骨细胞的生物学特性相似。
精原干细胞的分离纯化方法
要 由支 持 细胞 及 S C 构 成 。 随 着 发 育 的 进 行 , s s 断 增 ss SC 不 殖 , 量 有 所增 加 , 同 时 又 分 化 为 大 量 不 同发 育 阶段 的 生 数 但
精 细 , 终 演 变成 精 子 ,S s 占生 精 上 皮 细胞 的 比例 也 最 SC 所 随之 下 降 。这 就 给 S C S s的 富 积 纯 化 带 来 了 困 难 。 例 如 , 小 鼠从 新生 到 5 2 d幼 崽 , s 数 量 增 加 了 6 4倍 , 成 年 ~1 S . 到
《小鼠精原干细胞分离、纯化与去分化研究》范文
《小鼠精原干细胞分离、纯化与去分化研究》篇一一、引言近年来,干细胞领域研究日渐受到科研工作者的广泛关注。
作为生命科学和医学领域中的研究热点,小鼠精原干细胞的研究不仅对于基础理论科学具有深远意义,还为人类生殖与发育疾病、再生医学等领域提供了重要研究依据。
本文将重点介绍小鼠精原干细胞的分离、纯化与去分化研究的相关内容。
二、小鼠精原干细胞的分离小鼠精原干细胞的分离是整个研究过程的首要步骤。
为了获取高质量的精原干细胞,我们需要从小鼠生殖系统中进行提取。
具体操作如下:首先,对小鼠进行安乐死并取其睾丸组织。
接着,采用机械法和酶解法相结合的方式对睾丸组织进行消化处理,释放出细胞。
然后,通过特定的培养基将处理后的细胞进行初步培养,使得精原干细胞得以在特定环境中增殖。
在此过程中,应尽可能去除其他类型的细胞和非必要的组织成分,以便后续纯化工作顺利进行。
三、小鼠精原干细胞的纯化精原干细胞的纯化是研究过程中的关键环节。
纯化目的主要是去除其他类型的细胞,以获取纯度较高的精原干细胞。
常见的纯化方法包括细胞贴壁法、流式细胞术和磁性微粒标记法等。
其中,流式细胞术具有高效率、高准确度的特点,可广泛应用于实验室中。
具体操作中,应依据细胞大小、表面标志物等特征选择合适的流式细胞仪参数,进行细胞分选。
通过反复纯化操作,可得到较高纯度的精原干细胞。
四、小鼠精原干细胞的去分化研究去分化研究是近年来干细胞领域的研究热点之一。
为了实现小鼠精原干细胞的去分化,我们需要对相关机制进行深入研究。
首先,要了解精原干细胞的分化过程和分化相关基因的表达情况。
然后,通过调控相关基因的表达、改变培养环境等方法,促使精原干细胞发生去分化现象。
在去分化的过程中,要密切关注细胞的形态变化、增殖能力以及多能性等指标的变化情况。
通过实验数据的分析,可以得出不同条件下精原干细胞的去分化效果及机制。
此外,我们还可以利用基因编辑技术对相关基因进行敲除或过表达,进一步探究去分化的分子机制。
精原干细胞体外培养研究进展
年代 就开始 了。截 至 目前 , 国科 研 院所 已 相 继 建 小 鼠胚胎 成 纤维 细胞 ) ME 小 鼠胚 胎 原代 成 纤维 我 、 F(
立 了小 鼠、 、 、 人 兔 山羊 、 山 羊 、 指 山猪 等精 原 干 绒 五 细胞 的体外 培 养体 系 , 国外 也 已先 后 建 立 了 牛精 在 细胞 ) 等作 饲 养层 以抑 制其 自发 分 化 , 持 其干 细胞 保 状 态 。Na a oM 等 [ 报道 , S O 饲养层 细胞上 , g n 5 ] 在 T
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动物 医学进展 ,0 8 2 ( ) 8 — 9 2 0 ,9 6 : 78
Pr gr s n V e e i r e ii o e s i t rna y M d cne
精 原 干 细 胞 体 外 培 养 研 究 进 展
唐 红 , 国庆 ,管 峰 。 张 宾 。 石 “ ,
原 干细胞 也是研 究减 数 分裂极 好 的 素 材 。 自从 精 原
干 细胞分 离及纯 化成 功并 展示 其 广 阔 的应用 前 景 以
改 良的 I M 培 养 基 更 适 宜 于 精 原 干 细 胞 的 生 MD
长[ 。
来, 各种 哺乳类 精 原 干 细胞 系 及 其 体 外 长 期 培 养 系 统 的建立 已成 为越来越 多学者 关 注 的热点 。
精原 干 细胞 ( p r tg na se c l , S s semao o il tm el S C ) s
培养 基 中 存 活 较 为 理 想 。Ia y rF 等[ 证 明 在 zd a 。
是 位于睾 丸 曲细精 管基 膜上 既能 自我更 新 维 持 自身
ME 中的细 胞 活 力 和增 殖 能 力 明显 高 于 K OM; M S 群体 恒定 , 又能 定 向分化 , 最终 产 生 精 子 的一类 原 始 Di mi 等[ 研 究 表 明将 提 纯 的猪 A 型精 原 干 细 r a G 3 ] 精 原细胞 [ 。精 原 干 细 胞 技 术 的 发 展 和应 用 , 深 胞 在 D M/ 1 1 ] 为 ME F 2和 KS OM 中 培 养 1 0 h后 , 2 在 人探 讨干细胞 状 态 的维持 、 自我更 新 的方式 、 殖 及 KS 增 OM 中 可 见 3 ~ 5 的 精 原 干 细 胞 , 在 O O 而 分化 过程 的启 动和调 控 等生物 学 机 制 的研 究 提供 有 DME F 2只 有很少 的存 活 。DME 是精 原干 细 M/ 1 M 效 途径 , 为一 种 极 为 有 用 的 生 物 学 方 法 , 时 , 成 同 精 胞 培养 中最 常用 的基 础 培养 基 , 而在 D M 基础 上 ME
鸡精原干细胞分离培养的影响因素
A s at O jcie ocmp r h f c o oai to sa dc l r ytmso p r tg na se cl S C ) bt c r b et T o aeteef t fi lt n me d n ut es se ns emao o i tm e s(S s v e s o h u l l
i Mehdl n .S ri li n t o S s l i utr yt I r 5 5 32dy n 1 ± 1 rset e n to ad3 uv a t adr e f C o n i cl e se Vwe 4. ± . asad3 % v me a S cngn u S m e 6 ep ci — v
对 S C 进行分离培养 。结果 : Ss 胶原酶 +胰蛋 白酶组合消化睾丸后 获得 的平均活细胞率显著地高于其余两种方法。在有和无
饲养层细胞存 在的条件下 ,S s D M 培养液 中存活的时 间分别为 65d 4 . , S C 在 ME . 和 55d显著地 长于在 T M19和 R MI60 C 9 R I4 中。在 6 种培养体系中 ,S s S C 在有饲养层体系Ⅳ中存活时间和碱性磷 酸酶 ( P 阳性克隆率分别为 (55 . ) AK ) 4. ±32 d和 3 ± l
关键词 鸡 ;精 原 干 细 胞 ; 离 ; 外 培 养 分 体
Ef e to if r ntio a i n m e h d n y t m so p r a o o i ls e el r m h c e f c fd f e e s l to t o sa d s s e n s e m t g n a tm c lsf o c i k n
l , 6 显著地高于其他 5 种培养体系。S ( s 在有饲养 层体 系Ⅳ中传 代传 至 l2和 3 时 , P阳性 克隆率分别 为 3 . 、 、 代 AK 16
精原干细胞研究进展
用 含未分 化的精 原干细胞 比例 较高 的动物模 型作 为供 体, 如维生素 A缺乏或患隐睾症 的动物 。 较早 的研究 常选用普通 的方法 ,如单位 重力 沉降 法 、牛血 清 白蛋 白梯度及单位重力速度 沉降法等分 离 纯 化精原 干细胞 。随着免疫学 的发展 和流式 细胞仪 的 应 用 ,分离纯化 精原 干细胞 的效 率得到很 大的提 高。
胞膜外存 在一些由胞质形成的小突起 ,圆形 的核 占整
个细胞的 9 %以上 , 内染色质呈强嗜碱性 , 0 核 染成深蓝
或蓝紫色 , 胞质弱嗜碱性 , 染成淡 蓝色 ; 而睾 丸体 细胞
都会越来越少 , 这样就使得分离纯化相对较为 困难 , 故 研究 中应该 2 或 多个 精原 干细胞 一起 存在 l E 个 l l 。H
据估计 ,睾丸 中的精原干细胞与全部生殖细胞 的 比例 约为 2 31 0 而且 随着 出生后 时间的延长 , ~: 0 , 00 精 原 干细胞分化形成各级生精细胞 ,其数量及所 占比例
染色 , 精原 细胞呈 圆形 , 细胞膜 多数光 滑 , 少数 细胞 的
作者简介 : 薛振华(9 3 )男 , 1 8 一 , 山东人 , 硕士 在读
通讯作者
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Re iw p r ・ ve Pa e s
精原干细胞研究进展
薛振华 , 《 5 国世 , l 王永彬 , 田见 晖, 曾申明 ( 中国农业大学动物科技 学院, 农业生物技术 国家重点 实验 室, 北京 10 9 ) 0 0 4
鼠宜选用 6 8日龄 的 , 鼠宜选用 9 1 ~ 大 ~ 0日龄 的 , 宜 兔 选用 3 5 龄的 , 宜选用 1 5 的嘲 牛宜选用 5 7 ~ 月 狗 ~ 岁 、 ~
鸡精原细胞分离与纯化初探
Ke r s: hik n;s r a o ni ioa in;c lur y wo d c c e pe m t go a; s lto ut e
精 原细胞 是雄 性 生 殖 细 胞 的母 细 胞 , 动 物一 在 生 中精原 细胞 一方 面能 自我 更新 产生新 的干 细胞 以 维 持 自身数 量 的恒 定 , 方 面能 够 在 自身基 因或 外 一
择 性 贴壁培 养 纯化精原 细胞 。结 果发现 : mg mL胶原 酶 +0 2 胰蛋 白酶 +0 2 胰 蛋 白酶 处 1 / .5 .5
理鸡 睾丸 组织 , 获得 的 细胞 总数 多达 5 8 O . ×1 个; ec l 离心后精 原 细胞主要 位 于 1 ~3 梯 P rol 9 5
b n s f 9 ~3 c l c r h ds emao o i atr ec l cn r u ai , nwh h s emao o i p r c t n w sa dt a d % o 1 5 ol t n i e p r tg na f rol e t fg t n i i p r tg na u f ai a d o e e c ep i o c i o 6 . % ; 2 o p r t g naw so tie f r ut e ui c t n b t c me t ut r. 6 4 8 % f emao o i a ba dat rh rp r i i yat h n l e s n ef fao a c u
精原细胞资料
精原细胞与其他生殖系统疾病
精原细胞与其他生殖系统疾病的关系
• 精原细胞发育异常可能影响生殖激素的分泌,导致其他 生殖系统疾病 • 精原细胞研究有助于了解其他生殖系统疾病的发病机制, 为治疗提供依据
精原细胞与生殖系统疾病的研究
• 精原细胞与前列腺疾病:精原细胞发育异常可能影响前 列腺的功能,导致前列腺疾病 • 精原细胞与性腺疾病:精原细胞发育异常可能影响性腺 的功能,导致性腺疾病
• 生殖嵴是胚胎发育时期形成生殖 系统的结构 • 精原细胞在此处形成,随后迁移 到睾丸
• 在哺乳动物中,精原细胞数量较 多,分布在曲细精管的基底部 • 在鸟类和爬行动物中,精原细胞 数量较少,分布在曲细精管的中部
精原细胞的分类与特点
精原细胞主要分为A型精原细胞和B型精原细胞
• A型精原细胞是生殖干细胞,具有自我更新能力 • B型精原细胞是生殖细胞,不具有自我更新能力
精原细胞的主要功能是生成精子
• 通过减数分裂产生单倍体的精子 • 精子与卵子结合,形成受精卵,实现生殖
精原细胞的研究对生殖医学具有重要意义
• 了解精原细胞的发育、分化和成熟过程,有助于治疗生殖系统疾病 • 精原细胞可以作为生殖干细胞,用于治疗不孕不育症 • 精原细胞的研究可以为性别选择和生殖技术研究提供理论支持
03
精原细胞与生殖系统疾病
精原细胞与精子发生异常
精子发生异常是指精子数量、形态和功能异常
• 精子数量减少:精原细胞增殖能力减弱,导致精子数量减少 • 精子畸形:精原细胞分化过程中出现异常,导致精子形态异常 • 无精子症:精原细胞发育异常,无法产生精子
精原细胞与精子发生异常的关系
• 精原细胞发育异常是导致精子发生异常的主要原因之一 • 精子发生异常可能影响生育能力,导致男性不育症
《2024年牛精原干细胞分离纯化及长期培养研究》范文
《牛精原干细胞分离纯化及长期培养研究》篇一一、引言随着干细胞研究领域的发展,特别是精原干细胞的深入探讨,牛精原干细胞因其在畜牧业、医药研发等领域具有广泛的应用潜力而受到重视。
精原干细胞具备自我更新能力和多向分化潜能,可被用于研究雄性生殖系统的发育机制,并有望在再生医学中发挥重要作用。
本文将就牛精原干细胞的分离纯化及长期培养进行详细的研究与探讨。
二、材料与方法1. 材料本实验所使用的牛精原干细胞取自健康成年公牛的睾丸组织。
实验过程中使用的试剂和耗材均需符合无菌、无热原等要求。
2. 方法(1)干细胞分离纯化:采用酶消化法对睾丸组织进行消化处理,获取单细胞悬液,通过密度梯度离心法及流式细胞仪等方法进行干细胞的分离纯化。
(2)长期培养:将纯化后的干细胞接种于特定培养基中,进行长期培养,观察其生长情况及分化能力。
三、实验结果1. 干细胞分离纯化通过酶消化法处理睾丸组织,获取的单细胞悬液中包含多种细胞类型。
经过密度梯度离心及流式细胞仪的分离纯化,成功获得较高纯度的牛精原干细胞。
2. 长期培养将纯化后的牛精原干细胞接种于特定培养基中,通过显微镜观察,干细胞在培养基中呈现良好的生长状态,具有较高的增殖能力。
经过一定时间的培养,干细胞仍保持其多向分化的潜能。
四、讨论本实验研究了牛精原干细胞的分离纯化及长期培养,实验结果表明,通过酶消化法、密度梯度离心及流式细胞仪等方法,可成功获取较高纯度的牛精原干细胞。
在特定培养基中,干细胞呈现良好的生长状态,具有较高的增殖能力及多向分化潜能。
这为进一步研究牛精原干细胞的生物学特性、功能及其在再生医学中的应用提供了有力支持。
在实验过程中,我们还需要注意以下几点:首先,实验所使用的试剂和耗材需符合无菌、无热原等要求,以确保实验结果的准确性;其次,流式细胞仪等仪器的操作需严格按照规范进行,以确保干细胞的分离纯化效果;最后,在长期培养过程中,需定期观察干细胞的生长状态及分化能力,以评估其生物学特性和应用潜力。
精原干细胞名词解释
精原干细胞名词解释
精原干细胞是一种早期的、多潜能的干细胞,它们具有从精原细胞衍生出所有类型细胞的潜力。
精原细胞是在胚胎发育早期形成的,它们能够分化成各种细胞类型,包括神经细胞、心脏细胞、肌肉细胞等。
精原干细胞主要存在于胚胎早期的内细胞团(内细胞团是形成胚胎的前体组织之一)。
在体外培养的条件下,精原干细胞可以无限制地自我复制,并且保持其多潜能特性,从而成为研究发育生物学、干细胞生物学以及治疗疾病的理想模型和工具。
精原干细胞研究的目标之一是利用其特殊的能力来生成特定类型的细胞,以用于治疗因组织器官损伤或疾病而导致的细胞功能丧失。
但是精原干细胞的应用仍面临一些挑战和伦理问题,因为获得精原干细胞常涉及胚胎毁灭和遗传改变等问题。
精原细胞的分类-概述说明以及解释
精原细胞的分类-概述说明以及解释1.引言1.1 概述精原细胞是生物体中非常重要的一类细胞,它们拥有着特殊的能力和功能。
精原细胞是发育成熟生殖细胞的起始细胞,其重要性不言而喻。
在细胞分化和生殖过程中,精原细胞起着至关重要的作用。
精原细胞的发现可以追溯到早期的生物学研究,但长期以来对于精原细胞的认识和分类仍然存在着许多争议。
随着科学的不断进步和发展,对精原细胞的分类也越来越清晰和明确。
根据发育特点和功能,精原细胞可以分为两类:原生精原细胞和次生精原细胞。
原生精原细胞包括胚胎内的原始精原细胞和胚胎外的鲸眼具精原细胞。
这些细胞具有较高的分化潜能,可以发育成为不同类型的生殖细胞。
而次生精原细胞则是在胚胎发育的过程中由原生精原细胞分化而来的细胞,它们的分化能力相对较低。
这种分类方式能够更好地描述精原细胞在发育过程中的演化和变化。
精原细胞的分类研究有助于我们更深入地了解其发育和功能特点,对疾病的研究和治疗也有着重要的意义。
在未来的研究中,我们可以进一步探索精原细胞的分类和特征,深入挖掘其潜在的应用价值,并为人类生殖健康和疾病治疗提供更多有益的启示。
文章结构部分的内容可以按照以下方式编写:1.2 文章结构本文将主要分为引言、正文和结论三个部分来探讨精原细胞的分类。
在引言部分,我们将对精原细胞及其重要性进行概述,并介绍本文的目的和结构,为接下来的内容做出铺垫。
正文部分将分为两个主要子节:精原细胞的来源和精原细胞的分类。
其中,我们将首先探讨精原细胞的来源,包括固有精原细胞和天生精原细胞等,以及它们在胚胎发育中的产生过程和特点。
然后,我们将详细介绍精原细胞的分类,包括根据细胞分化程度、功能和表型等方面的分类方法和标准。
通过对精原细胞的分类,我们可以更好地了解其在不同阶段和不同功能中的重要性和作用。
最后,在结论部分,我们将对本文的主要内容进行总结,并展望未来关于精原细胞分类方面的研究方向和意义。
我们希望通过本文的探讨,能够加深对精原细胞分类的理解,为相关领域的研究提供参考和指导。
哺乳动物精原干细胞的分子标记及调控
哺乳动物精原干细胞的分子标记及调控于萍;华进联【摘要】精原干细胞( spermatogonial stem cells,SSCs)是一群生活在睾丸特殊微环境中并能自我更新和具有多向分化潜能的细胞,是精子发生的基础.近年来,通过对SSCs表面的α6-和β1-整合素、CD9、GFRAI等主要标记分子,以及对GDNF、P1zf、泛素、LIF等决定SSCs自我更新和分化的多种细胞因子和基因的研究发现,目前在SSCs的分离、鉴定和生物学特性方面已获得新的成果.本文简述了目前哺乳动物SSCs主要的标记分子及自我更新与分化的调控机理,以期为该领域及其他干细胞研究提供一定的借鉴.【期刊名称】《四川动物》【年(卷),期】2012(031)004【总页数】6页(P679-683,687)【关键词】精原干细胞;调控机制;自我更新;分化【作者】于萍;华进联【作者单位】西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100;陕西省干细胞工程技术研究中心,陕西杨凌712100;农业部动物生物技术重点开放性实验室,陕西杨凌712100【正文语种】中文【中图分类】Q959.8;Q291Abstract:Spermatogonial stem cells(SSCs)are the foundation of spermatogenesis,a group of cells which live in a specialized niche and have multiple differentiation potentiality.Recently,α6-and β-integrin,CD9,GFRA1 and other main molecular makers are regarded as the specific markers of SSCs,as well as the discovery of a variety of cytokines and genes,such as GDNF,Plzf,ubiquitin,LIF,which determine the self-renewal and differentiation of SSCs.New achievements have been reached on SSCs separation,identification and biological characteristics.This paper reviews the main molecular makers and regulatory mechanism of self-renewal and differentiation of SSCs at present,and provides further guidance for future studies of other stem cells.Key words:spermatogonial stem cells(SSCs);regulatory mechanism;self-renewal;differentiation精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)位于雄性动物睾丸的曲细精管基膜上,是精子发生的基础。
精原干细胞的生物学特性
精原干细胞的生物学特性
张学明;李德雪;于家傲;岳占碰
【期刊名称】《细胞生物学杂志》
【年(卷),期】2006(28)1
【摘要】精原干细胞(spermatogonialstemcells,SSCs)是雄性生殖系干细胞,位于睾丸曲细精管基膜上,既具有自我更新潜能,又具有定向分化潜能,是自然状态下出生后动物体内在整个生命期间进行自我更新并能将基因传递至子代的唯一成体干细胞。
自SSCs移植技术建立以来,有关其分离、鉴定、培养、冻存、转基因操作及移植
等方面均已取得长足进步,使人们对其生物学特性有了更深入的了解。
根据最近的
相关进展,系统评述了SSCs的相关生物学特性,以期为该领域及其他干细胞研究提
供借鉴。
【总页数】5页(P37-41)
【关键词】精原干细胞;niche;自我更新;形态学;表型标记
【作者】张学明;李德雪;于家傲;岳占碰
【作者单位】吉林大学畜牧兽医学院;吉林大学第一医院
【正文语种】中文
【中图分类】Q954.434
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精原干细胞的分离、纯化和初步鉴定薛振华1刘国世1,2史建民1王梁1田秀芝1王永彬1侯保民3田见晖1,2曾申明1,2朱士恩1,2(1. 中国农业大学动物科学技术学院,北京 100094;2. 农业生物技术国家重点实验室,北京 100094;3. 内蒙古兴安盟科右中旗草原工作站,内蒙古巴彦胡舒 029400)摘要对达兰仔猪睾丸精原细胞及精原干细胞进行了体外分离、纯化和初步鉴定。
对8 d达兰仔猪的睾丸实质组织,采用Ⅳ型胶原酶、透明质酸酶和胰酶组合消化法分离精细管细胞,制备单细胞悬液,用Percoll 不连续密度(11%、19%、27%、35%和43%)梯度法纯化精原细胞;对纯化后的细胞培养12 h ,细胞贴壁后进行碱性磷酸酶(AKP)染色鉴定,初步确定精原干细胞及其比例。
结果表明:所获精细管细胞悬液中活细胞和死细胞所占的比率分别为9265%和735%,平均每克睾丸可获得417×107个细胞;精原细胞主要分布于19%~27%的Percoll 梯度带中,经纯化后其纯度为4762%,精原干细胞占该带细胞的比例为552%。
因此,采用组合酶消化,结合Percoll 不连续密度梯度离心法分离的达兰仔猪的精原细胞不但能够满足体外培养的需要,还可以做为精原干细胞移植的研究材料。
关键词达兰猪;精原干细胞;分离;纯化;精原细胞DA-6对草莓叶绿体光化学反应和Rubisco活性的影响单守明1刘国杰1李绍华2苗鹏飞1(1农学与生物技术学院, 北京 100094;2北京植物研究所, 北京 100093)摘要以草莓为试材,研究叶面喷施二烷氨基乙醇羧酸酯(DA-6)对叶绿体光化学反应和Rubisco活性的影响。
结果表明,处理14 d后,10和20 mg/L DA-6分别使草莓叶片净光合速率提高了7.6%和16.4%,同时还提高了叶绿素含量、叶绿体Hill反应、光合磷酸化活性和Mg2+ATPase活性,并使Rubisco活性各提高了7.9%和16.9%。
40 mg/L的DA-6降低了叶片的光合作用速率、叶绿素含量、叶绿体光化学反应和Rubisco活性。
试验结果表明,叶面喷施DA-6能调节草莓叶片叶绿体光化学反应和Rubisco活性,并同时影响叶片的净光合作用速率。
关键词二烷氨基乙醇羧酸酯(DA6);草莓;光合作用;叶绿体;1,5/加氧酶(Rubisco) ABA在植物细胞抗氧化防护过程中的作用许树成1,2丁海东2鲁锐2石犇2马芳芳2(1.阜阳师范学院生命科学学院,安徽阜阳 236032;2.南京农业大学生命科学学院,南京210095)摘要水分胁迫是一种影响植物生长发育、限制作物产量的重要环境因子,植物激素脱落酸(ABA)在调节植物对水分胁迫响应的过程中起重要作用。
ABA不仅可以通过诱导气孔关闭来调节植物水分代谢,而且可以通过诱导脱水耐性蛋白的表达来增强植株对水分胁迫的抗性。
越来越多的证据表明,ABA增强水分胁迫耐性的作用与其诱导的抗氧化防护系统有关。
本文综述了ABA诱导活性氧产生、抗氧化防护酶基因表达、抗氧化防护酶活性增强方面的新进展,进一步分析了NADPH氧化酶、激酶磷酸化反应、Ca2+与活性氧之间的“交谈”在ABA诱导的抗氧化防护反应中的作用,认为:ABA诱导的抗氧化作用在植物细胞内的信号转导途径是网络,而不是直线通路,蛋白激酶磷酸化反应是H2O2传递信号的主要方式。
关键词脱落酸(ABA);抗氧化防护;活性氧(ROS);信号转导;水分胁迫响应面法优化降胆固醇马红球菌F21-1的发酵培养基蒋丹丹张彬梁志宏牛天贵(中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京 100083)摘要采用响应面方法,对能够高效降解胆固醇的马红球菌F211的发酵培养基进行优化。
在前期比较试验已筛选出碳源、氮源及表面活性剂最佳组合的基础上,通过Box Behnken设计法对这3个因素进行响应面分析,以胆固醇降解率为响应值作响应面和等高线图。
结果表明,马红球菌F211降解胆固醇发酵培养基添加物最佳成分配比为:胆固醇为1.49 g/L,蛋白胨为791 g/L,Tween80为282 mL/L。
培养基成分优化后,马红球菌F211菌株胆固醇降解率(87.80%) 提高了22.53%。
关键词马红球菌F211;响应面分析法;Box Behnken设计;优化苹果和梨属间杂交及其幼胚挽救研究孙亮冷平(中国农业大学农学与生物技术学院,北京 100094)摘要以富士苹果为母本、‘金二十世纪’梨和京白梨为父本进行属间杂交试验,以未授粉正常管理的果实为对照对授粉果实进行生物学观察,并对幼胚进行挽救培养。
结果发现,以‘金二十世纪’梨为父本的杂交果坐果率为,以京白梨为父本的未坐果;杂交果实前期发育快,果实大于对照,后期发育慢,果实小于对照;果形指数前期小于对照,后期大于对照。
授粉后60 d杂种幼胚先接种在蔗糖50 g/L+ 琼脂7 g/L培养基上,接种后先置于冰箱中4℃暗培养60 d再置于25 ℃条件光照培养,待子叶转绿膨大或胚根伸长后,转接到蔗糖30 g/L + 琼脂7 g/L 培养基上培养7~10 d;没有抽生芽点的合子胚转移至+ 蔗糖30 g/L + 琼脂7 g/L培养基上40~60 d可以生芽。
关键词苹果;梨;远缘杂交;胚挽救;果实发育桃不同种质资源成熟果实葡萄糖、果糖含量比例研究赵剑波1,2,3姜全3郭继英3陈青华3李绍华2(1农学与生物技术学院,北京 100094;2植物研究所,北京 100093;3林业果树研究所,北京 100093)摘要以北京市农林科学院林业果树研究所国家桃种质资源圃144份桃资源为试验材料,利用高效液相色谱仪于2003、2004连续2年对其成熟果实的葡萄糖、果糖含量进行了测定。
发现其中104份果实的葡萄糖和果糖含量比例接近1,包括91个育成品种、1个近缘种山桃和12个地方品种。
另外,40份种质中的38份果实的葡萄糖和果糖含量比为138~2221,为低果糖类型,其中包括2个原产中国的桃的近缘种,4个野生种质和23个桃地方品种,说明在野生桃中存在低果糖基因。
由于果糖在甜风味中贡献最大,因此在选择桃野生种质或地方品种作为杂交育种亲本时,可优先考虑葡萄糖/果糖接近1的桃种质,例如:乌桃、香蕉桃、吊枝白、山桃、黄金蟠桃、小红花、长生蟠桃、白芒蟠桃、陈圃蟠桃、撒花红蟠桃、早生黄金、秋宝珠、莱山蜜等。
2年的试验结果表明,桃种质资源的特性稳定在葡萄糖/果糖接近1或低果糖型的类型,而低果糖型种质的葡萄糖/果糖值不同年份间差异较大。
关键词桃;葡萄糖/果糖;低果糖型;野生种质;地方品种无核白鸡心葡萄离体叶水势与叶柄木质部液流的关系马跃青1袁小艳2刘丽平3邓西民1(1.中国农业大学农学与生物技术学院, 北京 100094;2.中国农业大学水利与土木工程学院,北京 100083;3.中国农业大学后勤基建处,北京 100094)摘要以无核白鸡心葡萄(Vitis vinifera L.)离体叶为试材,研究了叶水势与叶柄木质部液流通量、液流速率和液流压力梯度之间的关系。
结果表明:0~-09 MPa范围内,在葡萄离体叶水势与叶柄木质部液流压力梯度(R2=0958 9)之间的关系比与叶柄木质部液流通量(R2=0668 4)和液流速率(R2=0694 6)之间的关系更密切;因此,通过测定叶柄木质部液流压力梯度有可能提供一种比较准确敏捷地监测植物叶动态水势的新方法。
关键词葡萄;叶水势;木质部;压力梯度;液流通量;液流速率甲基环丙烯对河套蜜瓜后熟和软化的影响韩育梅1,2张少英2徐莉莉1杨维1(1.内蒙古农业大学食品科学与工程学院,呼和浩特 010018;2.内蒙古农业大学农学院,呼和浩特 010018)摘要以河套蜜瓜(Cucumis melo L.cv. Hetao)为试材,研究了不同浓度的甲基环丙烯()对其后熟和软化的影响。
对达到采收成熟度的河套蜜瓜用10、30、100和300 nL/L的P熏蒸18 h 后,在20℃下贮藏。
结果表明:不同体积分数的对河套蜜瓜后熟和软化影响有显著差异。
100、300 nL/L的明显抑制了河套蜜瓜乙烯的合成和生理作用,与对照相比乙烯释放高峰和呼吸高峰推迟了6 d,乙烯高峰仅为对照的和,呼吸高峰为对照的和,可溶性固形物降解得到抑制,延迟了多聚半乳糖醛酸酶(PG)和半乳糖苷酶活性高峰出现的时间,有效延缓了河套蜜瓜硬度的下降速度。
体积分数为10、30 nL/L的对河套蜜瓜后熟和软化没有明显的抑制作用。
关键词河套蜜瓜甲基环丙烯;后熟;软化高温胁迫下外源水杨酸对百合抗氧化系统的影响陈秋明尹慧李晓艳义鸣放(中国农业大学农学与生物技术学院,北京 100094)摘要为研究外源水杨酸(SA)对百合高温胁迫下抗氧化系统的影响,用新铁炮百合‘雷山一号’(Reizah 1)扦插苗为材料,叶面喷施后,进行47℃高温胁迫24 h,观测植株形态及相关生理指标。
结果显示:与对照相比,经外源SA预处理后植株死亡率低于对照,延缓相对电导率值和丙二醛含量的增加,同时提高植株SOD、POD、GR活性及GSH 含量,但降低了CAT活性和AsA含量以及高温胁迫3 h后的APX活性。
这说明,高温胁迫下外源SA可以通过调节百合抗氧化系统,提高抗氧化系统酶的活性来增加其耐热性。
关键词百合;外源水杨酸;高温胁迫;抗氧化系统;耐热性日粮氮硫比对肉羊生产性能及养分代谢的影响张微1王润莲2高振刚1贾志海1朱晓萍1(1.中国农业大学动物科学技术学院,北京 100094;2.广东海洋大学动物科学系,广东湛江 524088)摘要研究日粮不同氮硫比对肉羊生产性能及养分代谢的影响。
选40只生长发育正常、体重相近()kg的6月龄杂交肉羊公羔,日粮添加4种不同含量硫(质量分数)(,N∶;,N∶;,N∶和,N∶),饲养40 d之后进行代谢测定。
结果表明:肉羊日粮中不同的含硫量和氮硫比对其生产性能和养分利用有明显的影响,含硫量为、氮硫比为的日粮明显促进肉羊的生长速度和饲料利用效率,并显著提高养分的表观消化率及蛋白利用率;其平均日增重和料重比分别为和(对照组为和),日粮DM、OM、NDF、ADF和蛋白利用率分别达、、、56和。
以羊草和苜蓿草为主的生长肉羊日粮中适宜的含硫量为、氮硫比为。
关键词绵羊;氮;硫;生产性能;养分代谢日粮铜水平对绒山羊血浆褪黑激素水平及产绒性能的影响孙江涛1,2张微1岳春旺3朱晓萍1贾志海1秦枫1(1.中国农业大学动物科学技术学院,北京 100094;2.延庆县动物卫生监督管理局,北京 102100;3.河北北方学院动物科学技术学院,河北张家口 075000)摘要为探讨微量元素铜促进绒山羊绒毛生长的机理,选择12只岁的慢速生绒期内蒙古绒山羊半同胞羯羊作为试验动物,对照组饲喂基础日粮含铜,DM,试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组为试验组,在基础日粮基础上分别添加10、20和30 mg/kg(DM)的铜,研究铜对绒山羊血浆褪黑激素(MT)水平及产绒性能的影响。