兽药残留测定样品的预处理(精)
汇总｜兽药残留检测前处理类型
汇总｜兽药残留检测前处理类型由于兽药残留种类繁多、在样品中残留水平低、基质复杂、干扰物质多等，使样品前处理技术，即分离纯化技术成为兽药残留分析的重点和难点。
目前，兽药残留的样品前处理方法主要有液液萃取、固相萃取、固相微萃取、免疫亲和色谱、分子印迹、超临界流体萃取、基质固相分散技术、微波辅助萃取、凝胶渗透色谱和超声波辅助提取等。
液液萃取液液萃取(liquid-liquid extraction， LLE)是利用待测物在两种互不相溶(或微溶)的溶剂中分配系数的不同而达到分离纯化的目的，是兽药残留分析中一种常用的前处理技术。
有国外学者将肉类样品用乙腈除蛋白，正己烷脱脂后，加乙酸乙脂液液萃取，利用超高效液相色谱串联质谱技术对肉中的24 种磺胺类药物残留进行了测定。
也有学者等运用液液萃取结合低温纯化技术作为前处理技术，测定了牛奶中大环内酯类抗生素，得到了良好的回收率。
液液萃取对实验条件和仪器要求不高，但操作繁琐、有机溶剂消耗大，污染严重，逐渐被一些新的前处理方法所取代。
固相萃取固相萃取(solid phase extraction， SPE)是目前兽药残留检测中最为常用的一种样品前处理技术。
它是利用固体吸附剂将样品中目标化合物吸附，使其与样品基质及干扰化合物分离，再用洗脱液洗脱下来从而达到分离和富集的目的。
固相萃取技术由于具有操作简单快速、消耗有机溶剂少、样品回收率高、易于自动化等优点，在样品前处理中得到广泛应用。
目前，固相萃取技术已可用在磺胺类、四环素类、阿维菌素类、氯霉素类、喹诺酮类、激素类、β -受体激动剂等多类兽药残留的定量分析中。
有学者采用固相萃取结合液相色谱方法测定了鸡肉组织中的喹诺酮类药物。
对比了Oasis HLB，Oasis MAX， SDB-RPS 三种不同填料固相萃取柱的萃取效率，最终得出SDB-RPS 填料的固相萃取柱的萃取效果最好。
固相微萃取固相微萃取(solid phase microextraction， SPME)技术是20 世纪90 年代兴起的一项新颖的样品净化富集技术，属于非溶剂型选择性萃取法。
43兽药残留检测标准操作规程-2008
43兽药残留检测标准操作规程-2008全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：43兽药残留检测标准操作规程-2008是国家制定的针对兽药残留检测的操作规程，旨在规范兽药残留检测工作，确保食品安全。
该规程对兽药残留检测的样品处理、方法选择、仪器设备、质控要求等方面进行了详细规定，为兽药残留检测工作提供了明确的操作指南。
一、引言兽药残留是指兽用药物在动物体内残留的物质，可能会通过食物链传播到人类体内，对人体健康构成潜在的危害。
加强对兽药残留的监测和检测是保障食品安全的重要措施。
43兽药残留检测标准操作规程-2008是在这一背景下制定的，旨在规范兽药残留检测工作，提高检测结果的准确性和可靠性。
三、样品处理1. 样品收集：收集的样品应代表性，取样时应注意避免污染，并确保样品的完整性和唯一性。
2. 样品预处理：根据检测方法的要求，对样品进行必要的预处理，如提取、净化、浓缩等。
3. 样品保存：处理完的样品需按要求保存，避免发生物质的降解和污染。
四、方法选择1. 根据检测的目的和要求选择适当的检测方法，如高效液相色谱法、气相色谱法、质谱法等。
2. 检测方法应具有较高的灵敏度、准确性和可靠性，且经过验证和确认。
五、仪器设备1. 使用优质的兽药残留检测仪器设备，保证检测结果的准确性和可靠性。
2. 对仪器设备进行定期维护和校准，保证其正常运行和准确性。
六、质控要求1. 建立质量管理体系，包括质检程序、质量控制方法、实验室管理、数据处理和记录等。
2. 实验操作中应严格按照标准操作程序进行，避免出现干扰和错误。
43兽药残留检测标准操作规程-2008为兽药残留检测提供了可操作的指导，确保了检测结果的可靠性和准确性，保障了食品安全和人体健康。
各兽药残留检测实验室和单位应严格依照规程执行，共同维护食品安全和公共健康。
【2000字】第二篇示例：43兽药残留检测标准操作规程-2008是中国国家标准委员会发布的标准操作规程，主要用于指导兽药残留检测的实验室操作。
兽药残留样品前处理技术
克仑特罗 莱克多巴胺 沙丁胺醇 特布他林
R1
R2
R3
R4
-Cl -H -CH2OH -OH
尿样
尿液的主要成分是水、尿素及盐类。 在所有体液样品中，尿样最容易获得，
并且样品最多，内含药物（母体药物
及代谢物）浓度高；正常尿液中仅含 微量蛋白质，不需要去蛋白处理。 尿中药物大多呈结合状态，主要以 葡萄苷酸和硫酸酯结合物存在，因 此无论直接测定或萃取分离之前， 都必须将结合态的药物水解，使药 物游离处理。
胞裂解、提取、净化等过程，不需要进行组织匀浆、沉淀、离心、pH调节和 样品转移等操作步骤，避免了样品的损失。
超临界流体萃取
超临界流体具有类似气体的较强穿透力和类似于液体的较大密度和溶 解度，具有良好的溶剂特性，可作为溶剂进行萃取、分离单体。
固相微萃取
固 相 微 萃 取 （ SPME ）
与固相萃取原理相似，其基 本原则也是“相似相溶原
酶水解
β- 葡糖苷酸酶可专门水解药物的葡萄糖醛酸苷， 芳基硫酸酯酶和磷酸酯酶分别水解药物的硫酸酯 和磷酸酯。也可用几种酶的混合物，将生物样品 中药物的葡萄糖醛酸酐及硫酸酯同时水解。
除蛋白质
蛋白质
生物样品如肝脏、肾脏、血浆等含 有大量的蛋白质，它们能结合药物， 因此对于某些药物检测，必须先将
与蛋白质结合的药物游离之后再作
基质固相分散技术
基质分散固相萃取（MSPD，matrix solid-phase dispersion），其原 理是将涂渍有C18等多种聚合物的担体固相萃取材料与样品一起研磨，得到半 干状态的混合物并将其作为填料装柱，然后用不同的溶剂淋洗柱子，将各种
兽药残留分析中样品前处理方法综述
兽药残留分析中样品前处理方法综述张俊升*，谭梅，杨建鸣，王琼，李良（云南省兽药饲料检测所，云南昆明650021）摘要：样品前处理方法是兽药残留分析的保障，文章介绍了八种目前国内常用的前处理方法：超声波辅助提取、超临界流体萃取、固相萃取、固相微萃取、微波辅助萃取、基质固相分散、加速溶剂萃取、免疫亲和色谱。
现代兽药残留分析方法通常包括样品前处理和测定方法两部分，测定技术是核心，而样品前处理方法是保障。
样品前处理的好坏直接影响到分析的各项指标、成本和效率，占用了将近70％的分析工作量。
兽药残留分析样品的前处理包括提取与净化。
提取是将样品中的目标物溶解分离出来的操作步骤，根据兽药的性质、样品种类、实验条件，可选用的常规提取方法有振荡法、索氏抽提法等。
由于某些样品组成复杂，提取后往往还需经过净化步骤以达到待测物与干扰杂质分离，净化的基本原理主要为液-液作用、液-固作用、液-气作用及化学反应。
柱层析法是最常用的净化方法之一，层析柱填料一般为弗罗里硅土、氧化铝以及活性炭。
经典的样品前处理方法不仅操作繁琐、费时，提取与净化效率低，容易引入误差，且需要使用大量有毒溶剂，另外由于对被测目标物质的最低检出限要求越来越低，其目标物质的稳定性也在随时间发生变化，这给分析测试带来了一定困难，因此亟需发展简单、快速、有效的样品前处理方法。
目前，为适应多种类大批量样品的快速分析，样品前处理的手段在不断更新，并且也逐渐向仪器化、自动化方向发展。
近年来发展较快的方法主要有超声波辅助提取(Sonication-assisted Extraction,SAE)法、超临界流体萃取(Supercritical Fluid Extraction,SFE)法、微波辅助萃取(Microwave Aided Extraction,MAE、固相萃取(Solid Phase Extraction,SPE)、固相微萃取(Sol-id-Phase M icroextraction,SPM E)等方法。
兽残分析中样品的采集、保存、制备与前处理技术及方法建立步骤
生鲜样品取样后应在0℃～4℃条件下24小时内 送达检测单位。
运输工具应保持清洁无污染。 防止贮存地点和装卸地点可造成的污染。
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1.4 样品制备
又称为样品预处理，主要指采样后至化 学分析前试样的准备工作。不属于化学 分析过程，仅是采样工作的继续。
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1.4.2 制样程序
领取样品:从相关部门领取需要制备的样品，观察样品 是否完好，如有腐败、变质、破损等非正常情况，应 及时向发样部门反映，并停止制样，保存样品。如样 品完好，则可开始制备样品。
制备样品:根据样品性质、状态，选择适当的制备方法 制备样品。
填写制样单:样品制备完毕后，应认真填写制样单，记 录制样过程，制样单的内容包括：样品名称、样品状 态、制样时间、制样间温度等。
动物数量（样本数，只）抽样数（个）
1000
1
10015000
3
500110000
5
10000
8
15
1.1.8 蜂蜜加工厂（场）取样
批量（件） ＜50 50－100 101－500 ＞501
最低取样数（件） 5 10 每增加100，增取5 每增加100，增取2
16
1.1.9 市场样品采集
鲜肉 若成堆产品，则在堆放空间的四角 和中间设采样点，每点从上、中、下三 层取若干小块混为一份样品；若零散产 品，则随机从3～5片胴体上取若干小块 混为一份样品。每份500～1500克。
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填写采样单的注意事项
采样单填写的内容应真实、详实； 应采用黑色钢笔或签字笔填写，字迹清
楚，不潦草，不得涂改； 采样单应填写完整，在采样人一栏至少
兽药残留检测样品前处理技术概要
三、分子印迹技术( MIT )
MIT在兽药残留分析领域已开始起步, 已成为该领域的一个新发展方向。 分子印迹聚合物( MIP) 对印迹分子具有高度选择性。研究者以氯霉素为模
板分子, 甲基丙烯酰胺为功能单体, 乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂, 采
用分子印迹技术, 通过光引发聚合制备了氯霉素分子印迹聚合物。结果表 明, 印迹聚合物较相应的非印迹聚合物对氯霉素的吸附速度更快, 吸附富 集性能更高, 光聚合较热聚合更好, 该分子印迹聚合物有望开发为新型固 相萃取材料, 可用于复杂生物样品中残留氯霉素的选择性富集净化过程。
免乳化现象并可实现自动动物性产品兽药残留样本处理过程大为简化, 自动化SPE 的使用真正实现了 样本残留的在线分析。随着SPE 技术逐步成熟, 其在动物性产品兽药残留检测 样本处理技术中将处于主要地位。
二、免疫亲和色谱(IAC)
IAC是利用连接有特异性抗体的基质做填料的一种固相萃取技术。 IAC的高选择性和高效性无疑使样本前处理大大简化，通常一次层析 即可使待测物得到高度净化和富集，并提供了待测物的定性信息； IAC可以与高效液相色谱法、气相色谱法等联合应用，使得更为高效、 灵敏和准确。
样本分离纯化技术
样品纯化是将待测物与提取液中的样本干扰杂质分离。前处理中纯
化的工作量最大, 但一个具有强大分离效能或高选择性检测能力的测定
体系可大大提高纯化的能力。兽药残留分析中常用的净化方法除经典的 液-液分配外, 还有固相萃取、免疫亲和色谱技术和分子印迹技术。
一、固相萃取( SPE)
SPE为近年发展起来的一种微量样品处理技术，主要用于复杂样品中微量或 痕量目标化合物的分离、纯化和浓缩。与传统的液-液萃取相比，它能显著减少 溶剂用量，减少样品预处理过程，加快样品处理速度, 消除某些干扰杂质，避
兽药残留检测样品前处理技术概要
兽药残留检测技术
兽药残留检测
概Байду номын сангаас
述
兽药残留分析是复杂混合物中痕量组分的分析技术，无论筛选性分
析或确证性分析, 残留分析都需要精细的微量操作手段和高灵敏的痕
量检测技术。目前在兽药残留分析领域所取得的重要进展或发展趋势 主要有：样品分离纯化技术的简单化、微型化和自动化, 提高了提取 或净化效率及自动化水平；在定量分析上的新技术如毛细管电泳、免 疫分析技术、生物传感器、各种联用技术等。
免乳化现象并可实现自动化，很有取代传统液-液萃取的趋势。SPE技术的出现
使动物性产品兽药残留样本处理过程大为简化, 自动化SPE 的使用真正实现了 样本残留的在线分析。随着SPE 技术逐步成熟, 其在动物性产品兽药残留检测 样本处理技术中将处于主要地位。
二、免疫亲和色谱(IAC)
IAC是利用连接有特异性抗体的基质做填料的一种固相萃取技术。 IAC的高选择性和高效性无疑使样本前处理大大简化，通常一次层析 即可使待测物得到高度净化和富集，并提供了待测物的定性信息； IAC可以与高效液相色谱法、气相色谱法等联合应用，使得更为高效、 灵敏和准确。
样本分离纯化技术
样品纯化是将待测物与提取液中的样本干扰杂质分离。前处理中纯
化的工作量最大, 但一个具有强大分离效能或高选择性检测能力的测定
体系可大大提高纯化的能力。兽药残留分析中常用的净化方法除经典的 液-液分配外, 还有固相萃取、免疫亲和色谱技术和分子印迹技术。
一、固相萃取( SPE)
SPE为近年发展起来的一种微量样品处理技术，主要用于复杂样品中微量或 痕量目标化合物的分离、纯化和浓缩。与传统的液-液萃取相比，它能显著减少 溶剂用量，减少样品预处理过程，加快样品处理速度, 消除某些干扰杂质，避
兽药残留检测项目
兽药残留检测项目本项目全面考察学生对高效液相色谱法检测禽畜肉中抗生素残留项目的实施过程中所涉及的样品预处理、样品检测（送至第三方检测机构进行，不作为考核点，但选手制备样品的回收率和RSD值将根据检测机构检测数据计分）、数据处理（提供统一打印图谱，考核选手根据图谱计算检测结果的能力）和离线色谱工作站操作4个环节的基本操作与过程的整体把握和运用能力以及在整个实验过程中的操作文明和操作安全意识。
本项目预处理现场操作要求每个参赛队员在2.5个小时内完成。
色谱工作站操作和数据处理分别要求在45分钟和60分钟内完成。
赛项为个人赛，包括农药残留检测、兽药残留检测、重金属污染检测共3个分项，每名选手分别选择其中一个项目进行比赛。
每位参赛选手可以有一名指导教师，参赛选手须为2016年新疆在籍同校高职学生。
以学校为单位组成参赛队，安排领队1名。
农残、兽残检测竞赛项目的试样前处理过程将由参赛人员现场操作完成（过程评分）。
试液的上机测定由赛项专家组安排第三方检测机构专家按规定统一进行（仪器操作不作为选手考核点）。
选手制备样品的回收率和RSD值将直接根据检测机构检测数据计分（结果评分）。
为了考核参赛选手图谱解读及数据处理能力，将提供统一的打印图谱，考核选手根据图谱计算回收率和RSD值等数据处理及正确填写检测记录单的能力（结果评分）。
此外，开展离线色谱工作站软件使用操作考核（色谱工作站软件由赛项专家组指定）（结果评分）。
重金属检测竞赛项目考察选手试样预处理（样品消解液由组委会提前准备好，样品消解不作为考核点）（过程评分）、上机测量（过程评分）、数据处理（结果评分）等全部过程。
竞赛流程（一）竞赛日程（二）竞赛各场次流程七、竞赛试题本赛项为公开试题项目。
八、竞赛规则1.限于竞赛场地设备等条件的制约，3个现场操作项目的竞赛需要分批进行，选手参加考试的批次和竞赛工位将通过抽签决定。
2.参赛选手必须带身份证和学生证，并佩带参赛证件，提前30分钟到候考室检录，在引导员带领下至相应赛场，按签号指定的位置就位，完成相应竞赛任务。
农残检测的样品采集和前处理方法
个对顶角的三角形； 5、任取其中两个三角形为样本； 6、将剩下的样本再混合均匀，再按以上方法 反复分取；直至最后剩下的两个对顶角三角 的样品接近所需试样重量为止。
二、样品处理原则
样品处理原则
① 小的或轻的样品 → 用四分法缩分成
1、样品的缩分 ②水和其他液体样品；过滤去除漂浮物、沉淀物和 泥土。一般最后预处理的液体样品体积为1000ml。 ③土壤 土壤样品先出去其中石块、动植 物残体等 杂物。超过5%，应该记录杂物质量。采用四分法缩分、 粉碎、过20目筛，最后预处理的样品重量为250-500g。
三、检测样品的采集和预处理
（二）、萃取装置
索氏萃取装置和K-D浓缩器
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3、残留农药的提取
1、索氏提取器 2、捣碎法：组织捣碎机；匀浆器 3、振荡法 4、超声波法 5、消化法
四、不同样品中残留农药的提取
1、水样 2、气体样品 3、植物和动物样品 4、土壤样品
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3、残留农药的浓缩技术
1、旋转蒸发法
（2）、采集量及采样部位
① 按照表2-2确定采样部位及采样量 ② 土壤样品采集0-15cm耕作层，每小 区设5-10个采样点，采样量不少于1kg。 ③ 水样多点取样约5000ml混匀后取 1000-2000ml
二、商品检验样品的采集
（1）、抽样 商品检测样品抽样必须按照国际或相关国家 规定。
① 认定抽样的总体，从总体中选择并取 出正确的总样品，将每一总样本减少到能能 满足分析技术要求的最低值。 （2）、采集
水相和絮状物
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（三）、液-液萃取步骤（3）
有机相
兽药残留的测定
兽药残留的测定
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三. 兽药残留分析技术概述
兽药残留分析技术的特点
待测物质浓度低 样品基质复杂，干扰物质多 兽药残留代谢产物多样或不明 动物种类多样，对药物代谢存在差异
兽药残留的测定
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对检测方法的要求
快速 高通量(high throughput) 定量 准确度和精确度(accuracy & precision) 确证(unequinocal identification) 法定的和QC
❖ 磺胺类药物在色谱柱上的保留值不仅受流动相的极性影响， 还会受磺胺类药物的解离形式的影响，因此，流动相的 pH值对色谱分离的效果起重要作用。
❖ 检测方法主要有UV，FLD，DAD，或者MS。其中UV检 测器是最常用的检测方法，波长一般在270-280 nm，有时 用255 nm。荧光检测（FLD）的激发波长一般为405-420 nm，发射波长一般为485-495 nm。二极管阵列检测 （DAD）常采用267、268或263 nm。MS由于其高特异性， 一般用于确证实验。
兽药残留的测定
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激素样作用
➢ 对内分泌功能的影响 ➢ 对生育能力的影响 ➢ 儿童性早熟
过敏反应
➢ 青霉素类、四环素类、磺胺类等
兽药残留的测定
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对人类肠道微生物的影响
➢ 破坏或抑制人体胃肠菌群中敏感菌的生长。 ➢ 导致条件性病原菌的大量繁殖或体外病原菌侵入肠道。 ➢ 改变肠道菌群的代谢活性，使菌群改变药物和食物固有活
❖ 欧盟第675/92号令中规定了，在肉类及牛奶中磺胺的最大残 留总量不得超过100 µg·kg-1；
❖ 日本要求的最高残留限量更严格，单个磺胺残留限量为20 µg·kg-1 ，最大残留总量不得超过100 µg·kg-1；
兽药残留检测-操作流程.
1.供试样品：根据公告（1025号公告）试料包括：供 试样品、空白样品、添加样品，样品需事先绞碎，建 议仅做供试猪肉样品，（将空白样品事先添加一定浓 度氟喹诺酮类药品，作为供试盲样）——因此中心需 事先购买试样，按照公告方法进行预实验，确定空白 样品，仪器灵敏度，选择盲样添加氟喹诺酮药品浓度 （本法检测限为20微克/千克，线性范围20微克/千克50020微克/千克）。——此步骤选手动作：称取样品 （2±0.05g） 2.样品提取：匀浆1 min--震荡5min--离心5min--残液 震荡5min--离心5min合并两次提取液，涡旋混匀。 3.样品净化：HLB小柱预洗--上样--淋洗--洗脱—滤膜 过滤
畜禽肉中氟喹诺酮类兽药残留的检测操作流程
竞赛内容具体分为三个环节，第一部分 为样品预处理，侧重采样、样品提取、样品净 化；第二部分为上机检测，统一由第三方检测 机构检测，不计分；第三部分为数据处理，测 定结果由参赛人员根据仪器测定数据（打印图 谱）进行数据处理计算，填写检测记录。
畜禽肉中氟喹诺酮类兽药残留的检测操作流程
定性分析 定量分析
总计
移液管的正确使用、固相萃取柱的 正确使用、正确过滤样品；熟练操 25% 作。
统一送检。
不计分
能够正确解读图谱。
10%
原始记录及时、规范、整洁；有效 数字准确；计算公式正确使用；考 30% 察回收率结果；考察精密度结果；
按规定着装；能够正确进行标识； 操作时间控制在规定时间里；注意 15% 操作文明；注意操作安全。
100%
谢谢
畜禽肉中氟喹诺酮类兽药残留的检测操作流程
第三环节为数据处理
项目
考核内容 样品预处理
畜禽肉中兽药残留的测定(精)
将固相萃取柱在固相萃取仪上安装好，用5mL的刻度吸管分两次、每次吸取3.0mL共6.0mL
的甲醇活化，再用5mL的刻度吸管分两次、每次吸取3.0mL共6.0mL的水进一步活化；取离心所得上清液5.0mL过柱；用水2.0mL清洗，挤干；用流动相2.0mL洗脱；并用5mL试管收集洗脱液；用2mL的一次性注射器吸取洗脱液，并将收集的洗脱液过0.22μm有机系膜，直接装在样品瓶中，做好标记，供色谱测定。
三、操作步骤
（一）称样
准确称取3份牛肉样品（事先粉碎成肉糜）2±0.05g于50mL具塞离心管中，记录数据。
（二）提取
准确移取20.0mL磷酸盐缓冲液在每份已称量好的牛肉样品中；将离心管置于漩涡振荡器上，中速振荡5min；用空离心管和纯化水在托盘天平上进行配平，然后高速离心（10000r，5min）；将上清液倒入25mL烧杯中，以备过柱用。
四、注意事项
1.计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。
2.空白试验：除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。
二、仪器、物品
分析天平，高效液相色谱仪（配荧光检测器），组织匀浆机，旋涡混合器，离心机，固相萃取柱，离心管，移液管。牛肉。
试剂：
1.5.0mol/L氢氧化钠溶液：取氢氧化钠饱和液28mL，加水稀释至100mL。
2.0.03mol/L氢氧化钠溶液：取5.0mol/L氢氧化钠液0.6mL，加水稀释至100mL。
（五）结果计算
式中X——试样中被测兽药残留量，ng/g；
Cs——对照溶液中相应药物的浓度，ng/mL；
A——试样溶液中相应药物的峰面积；
As——对照溶液中相应药物的峰面积；
m——试样质量，g；
兽药残留检测-操作流程.
定性分析 定量分析
总计
移液管的正确使用、固相萃取柱的 正确使用、正确过滤样品；熟练操 25% 作。
统一送检。不计分能够正 Nhomakorabea解读图谱。
10%
原始记录及时、规范、整洁；有效 数字准确；计算公式正确使用；考 30% 察回收率结果；考察精密度结果；
按规定着装；能够正确进行标识； 操作时间控制在规定时间里；注意 15% 操作文明；注意操作安全。
畜禽肉中氟喹诺酮类兽药残留的检测操作流程
第三环节为数据处理
项目
考核内容 样品预处理
采样 提取
考核重点
分值比 例
分析天平的正确使用；达到熟练程 度。
5%
移液管的正确使用、离心机的正确 使用；操作过程中不得污染试剂； 15% 熟练操作。
畜禽肉 中氟喹 诺酮类 兽药残 留的检
测
净化
数据处理
上机检测 其他操作
全面考察学生对高效液相色谱法检测禽畜肉中抗生素残留项目的实施过程中所涉及样品预处理样品检测样品的检测送至第三方检测机构进行不作为考核点结果数据处理等3个环节与过程的整体把握和运用能力以及在整个实验过程中的操作文明和操作安全意畜禽肉中氟喹诺酮类兽药残留的检测操作流程竞赛内容具体分为三个环节第一部分为样品预处理侧重采样样品提取样品净化
第一环节：样品预处理（侧重制样、样品提取、样品净化）
1.供试样品：根据公告（1025号公告）试料包括：供 试样品、空白样品、添加样品，样品需事先绞碎，建 议仅做供试猪肉样品，（将空白样品事先添加一定浓 度氟喹诺酮类药品，作为供试盲样）——因此中心需 事先购买试样，按照公告方法进行预实验，确定空白 样品，仪器灵敏度，选择盲样添加氟喹诺酮药品浓度 （本法检测限为20微克/千克，线性范围20微克/千克50020微克/千克）。——此步骤选手动作：称取样品 （2±0.05g） 2.样品提取：匀浆1 min--震荡5min--离心5min--残液 震荡5min--离心5min合并两次提取液，涡旋混匀。 3.样品净化：HLB小柱预洗--上样--淋洗--洗脱—滤膜 过滤
兽药残留检测样品制备.
贮存温度要求
毛发、尿、粪便等
样本的收集
取样方法 代表性原则、随机采样 各种标准规定
活体检测 一般采集毛发、血液、尿液和粪便
屠宰场取样 药物的靶组织 其他高浓度的样本：肝、肾、胆汁、注射部位 排泄物：尿液
样本的贮存
容器材料 一般为玻璃或塑料 硅烷化处理防止器皿壁对痕量残留组分的吸附 塑料吸附脂溶性物质 玻璃表面吸附碱性物质
兽药残留检测样品制备
兽药残留检测
兽药残留分析与检测
残留分析的样品 样品的前处理 残留检测方法
采样与样品制备 （样品预处理）
提取
净化
Hale Waihona Puke 样 品处分 离
浓缩
理
衍生化
分辨 测 定
检测
残留分析原理
残留分析的样品
可食性组织及产品
肝、肾、肌肉、脂肪、皮肤、血液 奶、蛋 其他加工食品
其他
兽残分析中样品的采集、保存、制备与前处理技术及方法建立步骤
1.1.11 抽样单填写
样品编号：格式为[动物品种代码]/[样 品种类代码]/[抽样日期]。 例：2001年7月10日抽取的牛肝样品第一 份，其编号为：B/L/010710-1。
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代码
动物 牛 品种 代码 B 羊 O 猪 P 鸡 C 肾 K 兔 R 鱼 F 蜂蜜 Be
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2 样品前处理
2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 概述 提取方法 净化方法 浓缩与富集 化学衍生化技术
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2.1 样品处理-概述
目的:将待测组分从样品基质中分离出来，并 达到仪器能够检测的状态。 主要作用包括:将药物从样品中释放出来、除 去样品中的干扰杂质、将待测组分转换为可检 测的形式、达到可检测的浓度范围和溶于可进 行分析的介质。 主要包括四项基本内容：提取、净化、浓缩、 衍生化。 分离或组分转移是贯穿整个样品处理过程的基 本问题：液-液萃取、固相萃取
200-500克 (取6只鸡全肝) 400-500克 (取5只兔全肝)
双肾各取1/2 （纵切）
6只鸡全肾 5只兔全肾
200克
50-100克 (6只鸡脂肪) 5只兔脂肪
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1.1.6 养殖场抽样数量
猪、羊（尿样、血液） 动物数量（样本数） 50 51100 抽样数（个） 5 8
1.3 样品保存运输
为确保被分析物的稳定性和样品的完整性，采 集的样品应由专人妥善保存，并在规定的时间 内送达检测单位。 取样后冻肉样应在冷冻状态下保存，蜂蜜： 10℃，禽蛋：0～4℃，牛奶：2～6℃条件下储 存。 生鲜样品取样后应在0℃～4℃条件下24小时内 送达检测单位。 运输工具应保持清洁无污染。 防止贮存地点和装卸地点可造成的污染。
兽残分析中样品的采集、保存、制备与前处理技术及方法建立步骤
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1.1.5 一个组织样品的组成
动物 牛 羊 猪 鸡 兔
肌肉 300-500克 300-500克 300-500克 300-500克 300-500克
3
1.1.1 抽样的基本原则
严格按照规定的程序和方法执行，确保 抽样工作的公正性和样品的代表性、真 实性。
4
1.1.2 人员
抽样人员不少于2人 抽样人员应经过专门的培训，具备相应
资质。 抽样人员应携带身份证、工作证、单位
介绍信、抽样单等文件。
5
1.1.3 工具
肉类：不锈钢刀具、自带封口的食品卫生塑料 包装袋、低温样品保存箱（盒）、一次性手套、 标签、盛放微生物检验用样品的灭菌容器等。
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鸡蛋
按批次分别在货件不同部位随机抽样 在50件以内者，抽检2件； 50至100件者，抽检4件； 101至500件者，每增加50件增抽1件（所
增不足50件者，按50件计）； 500件以上者，每增加100件增抽1件（所
增不足100件者，按100件计算）。
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1.1.9 市场样品采集
液体乳品 一般可采用虹吸法，或者用简 单的玻璃管按不同深度分层取样。对于 黏稠或含有固体悬浮或非均匀乳品应充 分搅匀，然后再进行取样。总量应不少 于500克。
蜂蜜 心 Hb H
鸡 兔 鱼 蜂蜜
C R F Be 肾 血液 尿液 蛋
KB 肺脑
UE 皮肤 毛发
Lu C S Ha
采样单填写
样品名称：所取样品的种类及部位。例：血样，全肝，背脊肉等。 动物品种：所取样品动物的名称。 年 龄：牛、羊按年计，猪按月计，兔、鸡按日计。 抽样基数：抽样当天的出栏率（养殖场）、屠宰量（屠宰厂）、
兽药残留分析中样品前处理技术
兽药残留分析中样品前处理技术作者：孙正阳张甜甜来源：《中国科技博览》2017年第20期[摘要]兽药残留分析中样品前处理技术对检测结果具有直接影响，是残留分析工作的关键步骤。
科学技术的发展让样品前处理技术不断进步，近年来更是出现了许多能有效减少样品前处理过程误差的新技术。
本文介绍了一些样品前处理新技术的基本原理及特点，并阐述了其在兽药残留分析中的应用。
[关键词]兽药残留；样品前处理技术；基本原理；应用中图分类号：S859.84 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2017）20-0385-01兽药残留监控是兽药研究、开发、使用及管理工作的重要内容。
兽药残留物的分离纯化由于残留物水平较低等原因难度较大，而样品前处理技术作为兽药残留分析的重要环节对检测结果具有关键性的影响。
一些新型的样品前处理技术具有样品量少、选择性优、自动化处理等优于传统技术的特点。
1 固相萃取（SPE）1.1 固相微萃取（SPME）固相萃取能通过固体吸附剂分离液体样品目标化合物与样品基质和干扰物，尔后利用洗脱液的洗脱作用分离和富集目标物。
固相萃取是兽药残留分析样品前处理的主要技术，其应用日益广泛，并随着科学技术的发展分化出了特殊固相萃取前处理技术。
固相微萃取作为特殊的固相萃取技术之一，具有样品、溶剂用量小，操作简便的优点，并同时具有萃取、浓缩、解吸、进样的功能。
固相微萃取的精密性、重现性、回收率均具有很好的水平，一些技术人员将固相微萃取技术和其他技术相结合检测水样中的农药、牛奶中药物残留，均获得了满意的结果。
1.2 基质固相分散萃取（MSPD）基质固相分散萃取也是固相萃取的一种，具有灵敏度高、准确度好、精密度高、操作步骤较少的优点，省略了组织匀浆、沉淀、离心、调节酸碱度、转移样品等操作。
基质固相分散萃取的基本原理是将吸附填料、样品混合后进行研磨，并在研磨物处于半干状态时进行装柱操作，然后进行洗脱，并对待测物进行收集、浓缩净化操作，最后进行仪器分析。
兽药残留分析中样品前处理技术研究进展
基质固相分散技术（MSPD）属于快速样品处理技术， 研磨涂渍有 C18 的多种聚合物的单体固相萃取材料与所 要检测的样品，将得到的混合物填充到萃取柱中，然后 采用不同的溶剂对其进行洗脱，对所要检测的药物分离 提取。该技术的最大优点是减少了传统前处理中需要对 样品进行匀化、提取和净化的过程，减少了沉淀、离心 和 pH 调节等过程，实现了对微量样品的检测。
关键词：兽药残留；前处理技术；研究 Nhomakorabea展Abstract：Sample pretreatment technology is the main method for the detection of veterinary drug residues, which is widely used in the field of drug analysis. With the development of pretreatment technology, several key technologies such as solid phase extraction technology, matrix solid phase dispersion technology, solid phase microextraction technology and membrane extraction technology appeared in recent years, which broadened the way of veterinary drug residue detection. In this paper, the development and application of these technologies are reviewed, the application scope and advantages of various technologies are discussed, and the prospect of pretreatment technology is prospected.
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二、取样
准确称取3份粉碎成肉糜的牛肉样品2±0.05g于50mL具塞离心管中，记录数据；举手示意，由裁判在样品中统一加入混合抗生素标准溶液。
三、提取
准确移取20.0mL磷酸盐缓冲液在每份已称量好的牛肉样品中；将离心管置于漩涡振荡器上，中速振荡5min；用空离心管和纯化水在托盘天平上进行配平，然后高速离心（10000r，5min）；将上清液倒入25mL烧杯中，以备过柱用。
《畜产品检测技术》单项技能实训指导书
实训项目名称
实训目的
1.熟练掌握固相萃取装置萃取样品
2..熟练规范操作移液管，并会使用涡旋器涡旋样品
一、样品前处理
样品前处理是指样品的制备和对样品中的待测组分进行提取、净化和浓缩的过程。样品前处理的目的是消除基质干扰，保护仪器，提高检测方法的灵敏度、选择性、准确度、精密度。
四、净化
将固相萃取柱在固相萃取仪上安装好，用5mL的刻度吸管分两次、每次吸取3.0mL共6.0mL的甲醇活化，再用5mL的刻度吸管分两次、每次吸取3.0mL共6.0mL的水进一步活化；取离心所得上清液5.0mL过柱；用水2.0mL清洗，挤干；用流动相2.0mL洗脱；并用5mL试管收集洗脱液；用2mL的一次性注射器吸取洗脱液，并将收集的洗脱液过0.22μm有机系膜，直接装在样品瓶中，做好标记，供色谱测定。