银杏叶提取物总黄酮的提取分离及工艺的研究
银杏叶提取 黄酮类化合物提取工艺过程分析
银杏叶提取黄酮类化合物提取工艺过程分析
银杏黄酮有强烈的清除细胞内自由基的作用，能降低细胞的氧化代谢，对脑和四肢动脉血流失调引起的一系列心脑血管疾病有明显和独特的疗效。
传统银杏黄酮提取工艺过程分析如下：
在浸提、过滤工序，传统银杏黄酮提取工艺耗用大量的有机试剂、操作复杂，设备昂贵，试剂损耗较大，直接用水提取，具有成本低廉、提取工艺简单的特点。
在抽滤工序，过滤介质精度低，且属于死端过滤，滤液质量不稳定，会带入较多的杂质，且收率较低。
改进后的银杏黄酮提取工艺过程：
原料→预处理→浸提→过滤→陶瓷膜过滤→卷式膜浓缩→色谱分
离→浓缩→干燥→银杏叶提取物成品
采用管式陶瓷膜系统可直接将高温的浸提液进行错流过滤，得到澄清透明的水提液，将抽滤和离心分离二道工序合二为一。
根据色谱分离对水提液浓度的要求，可以采用卷式有机膜系统进行浓缩，并可对树脂洗脱液做进一步浓缩，从而大大降低了生产成本，提高了收率。
其浓缩液再进行减压浓缩，真空低温干燥。
银杏叶中黄酮类化合物的提取和制剂工艺研究
银杏叶中黄酮类化合物的提取和制剂工艺研究银杏叶是一种常见的中药材，具有多种药理作用，其中黄酮类化合物是其主要有效成分之一。
因此，提取和制剂工艺的研究对于银杏叶的开发和利用具有重要意义。
一、黄酮类化合物的提取工艺1.溶剂提取法溶剂提取法是目前应用最广泛的提取方法之一。
常用的溶剂有乙醇、乙醚、丙酮等。
其中，乙醇提取法是最为常用的一种方法。
其具体操作步骤为：将银杏叶粉末加入乙醇中，浸泡一定时间后，过滤得到提取液，再用旋转蒸发仪将溶剂蒸发，得到黄酮类化合物。
2.超声波提取法超声波提取法是一种新兴的提取方法，其优点是提取效率高、提取时间短、操作简便。
其具体操作步骤为：将银杏叶粉末加入水中，用超声波处理一定时间后，过滤得到提取液，再用旋转蒸发仪将溶剂蒸发，得到黄酮类化合物。
3.微波辅助提取法微波辅助提取法是一种快速高效的提取方法，其优点是提取效率高、提取时间短、操作简便。
其具体操作步骤为：将银杏叶粉末加入水中，用微波处理一定时间后，过滤得到提取液，再用旋转蒸发仪将溶剂蒸发，得到黄酮类化合物。
二、黄酮类化合物的制剂工艺1.胶囊剂胶囊剂是一种常见的制剂形式，其优点是服用方便、剂量准确、稳定性好。
其制剂工艺为：将黄酮类化合物与辅料混合均匀，填充进胶囊中，再进行封口，即可制成胶囊剂。
2.片剂片剂是一种常见的制剂形式，其优点是服用方便、剂量准确、稳定性好。
其制剂工艺为：将黄酮类化合物与辅料混合均匀，压制成片状，再进行包衣，即可制成片剂。
3.口服液口服液是一种常见的制剂形式，其优点是服用方便、剂量准确、吸收快。
其制剂工艺为：将黄酮类化合物与辅料混合均匀，加入适量的溶剂，搅拌均匀后进行过滤、灭菌，即可制成口服液。
总之，银杏叶中黄酮类化合物的提取和制剂工艺研究对于银杏叶的开发和利用具有重要意义。
在提取工艺方面，溶剂提取法、超声波提取法、微波辅助提取法等均有应用；在制剂工艺方面，胶囊剂、片剂、口服液等均是常见的制剂形式。
未来，随着科技的不断进步，银杏叶中黄酮类化合物的提取和制剂工艺也将不断完善，为人们的健康保驾护航。
银杏叶中黄酮的提取分离及测定1
四、实验步骤
3、测定：
(1)标准曲线的绘制： 精确称取芦丁标准样品50.0mg，置 于50mL烧杯中，加少量70%乙醇使之完全溶解，转入50mL容 量瓶中，再用70%乙醇定容至刻度，摇匀，得1.0mg/mL的芦 丁标准溶液，再分别吸取0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL芦 丁标准溶液置于 50mL 容量瓶中，按照下述方法配置显色溶液； 各 加 70 % 乙 醇 使 成 2 5mL ，然 后分别加入 5%N a N O2 溶液 1.5mL ，摇匀，放置 6min 后，再加 10%Al （ NO3 ） 3 溶液 1.5mL,摇匀，放置6min后，加NaOH溶液20mL,最后用蒸馏水 稀释至刻度（ 50mL ），摇匀，放置 15min 后，以不加芦丁的 试剂为空白，用紫外光分光光度计测定510.0nm处的吸光度。 以浓度c为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线，得到回 归方程。
四、实验步骤
1、粗提物： 称取干燥和粉碎的银杏叶粉末 50克，装入索氏提取器 的滤纸套袋中，在500ml圆底烧瓶内加入250ml60%乙醇， 用65-80℃水浴加热。连续提取3h左右，等叶子颜色变浅 可停止加热。待在虹吸管内冷凝液刚落下时，立即停止加 热，改成旋转蒸发器，减压蒸去溶剂即得棕黑色的银杏浸 液-液萃取法： 在500mL烧杯中，将银杏浸膏粗产物 加250mL去离子水，搅拌均匀，再将此溶液转移至分液漏 斗中，用 60mL 二氯甲烷萃取三次，取下层液，合并萃取 液。用无水NaSO4干燥。用旋转蒸发器蒸去二氯甲烷，蒸 馏剩余物为黄酮提取物。经干燥后称重，计算产率。
三、化学药品及仪器
1、化学药品 乙醇（20%、60%、70%） 二氯甲烷 无水硫酸钠 氢氧化钠溶液（0.5mol/L） 盐酸溶液（0.5mol/L） 银 杏叶粉末
正交试验优选银杏叶总黄酮提取工艺
样品的制备
含量测定
精密称取银杏叶提取250mg， 以20 mI 甲醇溶解，并定 容到 50 mI 容量瓶中，滤 过，备用。
精密吸取上述银杏叶提取 物样品5 mI，置25 mI 容 量瓶中，用甲醇并定容， 按标准曲线制备的方法测 定吸光度，计算含量
实施方法 ----正交试验设计
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
• 根据初步试验结果，参考有关文献并结合实际情况，选 用正交试验表安排试验，以提取溶剂乙醇的浓度、溶剂 用量（料液比）、提取时间（h）和提取次数为影响提取 物总黄酮含量的主要因素，每个因素取3 个水平，确立 因素水平表（见表l），取粉碎的银杏叶l00 g，以不同 浓度乙醇为溶剂，平行操作条件下，回流提取，合并提 取液，滤过，并测定计算总黄酮含量。
仪器与试药
• 仪器 UV -6010 紫外 -可见分光光度计（惠普上海分
析仪器厂）。
• 试药 银杏叶由广州市医药公司提供，经鉴定本品为银
杏科植物银杏 Ginkgo biIoba L. 的干燥全草；芦丁对 照品，中国药品生物制品检定所；其他试剂均为分析纯。
实施方法 ——银杏叶总黄酮的含量测定
标准曲线绘制 精密称取在 120 C减压干燥至恒重的芦丁 对照品 10. 0 mg ，加乙醇溶解，转入 50 mL 容量瓶中， 用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液（ 0. 2 mg/ mL），精密吸取该液 1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、 6. 0 mL ，分别置于 25 mL 容量瓶中，加水至 6 mL ，加 5%NaNO2 试液1. 0 mL，放置6 min，加10% Al（ NO3）3 试液 1. 0 mL，放置 6 min，加 10%NaOH试液10 mL，加 水至刻度，摇匀，放置 15 min 以相应试剂作空白，于 500 nm 处测定吸光度。以浓度（C）与吸光度（A）进行 线性回归，得回归方程为 A =0. 0043C +0. 0128 ， r = 0. 9998，（n = 6）。可见，在 1~6ug/ mI 浓度范围内 线性关系良好
银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺研究
验 " 研究了浸取温度 $ 乙醇含量和固液质量比对黄酮类化合物提取率的影响 % 结果显示温 度是影响提取率的主要因素 " 最佳工艺为浸取温度 K8 Q " 乙醇的体积分数为 F8X 和固液 质量比 >YF "银杏叶中黄酮类化合物的浸出率可达到 V!U%X % 关键词 银杏叶 & 黄酮类化合物 & 乙醇 & 提取 中图分类号 5Z!%DU
银杏黄酮提取工艺及纯化研究一、引言银杏黄酮作为一种天然的活性成分，具有广泛的生物活性和药用价值。
由于其在保健品和医药领域的广泛应用，银杏黄酮的提取工艺及纯化研究备受关注。
本文将对银杏黄酮的提取工艺以及纯化过程进行探讨。
二、银杏黄酮的提取工艺2.1 原料准备在进行银杏黄酮的提取前，首先需要准备好优质的银杏叶。
选取新鲜的银杏叶，通过去杂、洗净等处理方法，获得干燥均匀的原材料。
2.2 提取方法2.2.1 传统提取方法传统的银杏黄酮提取方法通常采用溶剂提取的方式。
具体步骤如下： 1. 将粉碎后的银杏叶与适量的有机溶剂（如乙醇）进行浸提。
2. 在适当的温度下，反复搅拌并浸提一定时间。
3. 过滤提取液，获得含有银杏黄酮的溶液。
4. 通过浓缩、脱色等步骤，得到纯化的银杏黄酮。
2.2.2 新型提取方法近年来，一些新型的银杏黄酮提取方法也得到了广泛应用。
如超声波辅助提取、微波辅助提取等。
这些新型提取方法具有高效、省时等特点，在提取工艺中发挥着重要的作用。
三、银杏黄酮的纯化研究3.1 纯化方法3.1.1 水相反萃取法水相反萃取法是一种常用的纯化方法，其步骤如下： 1. 将含有银杏黄酮的提取液与适量的水进行充分混合。
2. 静置一段时间，使得银杏黄酮被水相萃取。
3. 分离水相和有机相，得到含有高纯度银杏黄酮的水相。
3.1.2 分子筛吸附法分子筛吸附法是一种利用分子筛材料对银杏黄酮进行吸附的方法。
具体步骤如下：1. 将含有银杏黄酮的溶液与分子筛进行接触。
2. 利用分子筛对银杏黄酮进行吸附。
3. 通过适当的溶剂洗脱等步骤，得到高纯度的银杏黄酮。
3.2 精制技术3.2.1 重结晶技术重结晶技术是一种常用的精制技术，通过溶解和结晶的过程，使得杂质与银杏黄酮分离。
其步骤如下： 1. 将纯化后的银杏黄酮溶解于适量的溶剂中。
2. 加热溶液，使银杏黄酮充分溶解。
3. 慢慢降低温度，促使银杏黄酮结晶。
4. 过滤结晶物，获得重结晶的银杏黄酮。
银杏叶黄酮的提取纯化工艺研究
1、实验材料
银杏叶：采集于健康无病虫害的银杏树，清洗干净后晾干备用。
Hale Waihona Puke 2、提取方法将清洗晾干的银杏叶粉碎成细粉，称取一定量的细粉加入到80%乙醇溶液中， 在60℃下进行回流提取，每次提取时间为1小时，提取3次。将提取液过滤，回 收乙醇，并加入适量水稀释至适当浓度备用。
3、纯化方法
采用大孔吸附树脂法进行纯化。将备用液通过大孔吸附树脂柱，用水洗脱至洗 脱液接近无色，再用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇并加入适量水稀释 至适当浓度备用。
参考内容
引言
银杏叶是一种具有多种生物活性的天然植物，其提取物中含有丰富的黄酮类化 合物，如儿茶素、黄酮醇、黄烷醇等。这些化合物具有显著的抗氧化、抗炎、 抗肿瘤等生物活性。因此，研究银杏叶总黄酮的提取纯化及其抗氧化性能具有 重要意义。本次演示旨在探讨银杏叶总黄酮的提取纯化方法及其抗氧化性能。
材料与方法
4、抗氧化性能测定
采用DPPH自由基清除法测定抗氧化性能。取适量纯化后的银杏叶总黄酮溶液与 等体积的DPPH溶液混合，室温下放置30分钟，在517nm处测定吸光度A1。同时 以无水乙醇为空白样品的吸光度A0进行对照。以Vc为阳性对照。根据公式：清 除率=（A0-A1）/A0×100%，计算银杏叶总黄酮对DPPH自由基的清除率。
结论
本研究成功地探索了一种高效提取纯化银杏叶总黄酮的方法，并对抗氧化性能 进行了研究。实验结果表明，采用80%乙醇回流提取和过大孔吸附树脂纯化可 以得到高纯度的银杏叶总黄酮，并且对DPPH自由基具有较强的清除作用。这一 发现为开发高效安全的抗氧化药物提供了新的思路和方法。
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银杏叶黄酮的提取纯化工艺研究
01 引言
03 研究目的 05 结果与讨论
银杏叶中总黄酮提取工艺研究
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２ １２ 标 准 曲 线 的 绘 制 分 别 配 制 ６种 芦 丁 标 ．．
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准溶 液 于 ５ ０ ｎ 波 长 下 测定 吸 光 度 ， １ ｍ 乙醇 的体 积分 数为 ６ 的试 剂为空 白参 比液 ， 验 数据 见 ０ 试
表 ２ 。
分 析纯 。
１ ２ 试 验 方 法 ．
大， 而水 又将 降低水 提 液表 面 张力 ， 摇 后产 生持 振
久性 泡沫 而影 响 分离 ， 们 则 采用 不 同浓 度 的 乙 我
主要有 ：
１２ １ 总黄 酮含 量 的测 定 ． ．
醇 水 溶 液 提 取 所 测 样 品 中 的 银 杏 叶 黄 酮 。 根 据 银 杏 叶 中 主 要 活 性 成 分 黄 酮 的 特 性 ， 照 药 舆 原 有 依 的 提 取 方 法 ， 用 加 热 回 流 提 取 ， 单 因 素 试 验 的 采 在 基础 上 ， 出 影 响 因素 主要 有 ： 醇 的体 积 分数 、 得 乙 温 度 、 液 质 量 浓 度 、 取 时 问 。 采 用 Ｉ （ 正 料 提 ３） 交 表 优 化 提 取 条 件 ， 点 考 察 上述 四个 素 ， 总 重 以
仪 器 ：２ ７ １型 分 光 光 度 计 、 氏 提 取 器 、 分 索 万
之 一 电子天 平 。
１ ２ ２ 试验 设计 黄 酮类 化合 物 的提取 、 离通 ．． 分
常 以 甲醇 或 水 为 主 要 提 取 剂 ， 由 于 甲 醇 其 毒 性 但
芦 丁标 准 品 ： 化试剂 ， 海试剂 二 厂 ； 生 上 乙醇 ：
酮 含量 。
银 杏 叶 ： ０ ９年 ９月 采 于 陕 西 杨 凌 ， 龄 为 ２０ 树 ｌ ， ０ａ 每次采 收 的银 杏叶 都及 时放 人 ６ 一７ Ｏ Ｏ℃ 的 干 燥箱 中 干燥 ２ ， 粉 碎 装 人 广 口瓶 ， 处 保 ４ｈ 经 暗 存， 供提 取 、 测定 黄酮 用 。 ，
银杏叶中黄酮的提取原理及方法
银杏叶中黄酮提取及含量测定一、实验目的提取银杏叶中的总黄酮并测定其含量。
二、实验原理银杏系银杏科银杏属落叶乔木，银杏叶中含有多种生理活性成分，其中黄酮类化合物是重要的生理活性物质，具有保肝护肝、预防治疗心血管疾病、抗氧化、抗衰老等作用。
因此，将银杏叶作为高营养、保健功能价值的资源加以开发利用，这对于提高银杏叶综合利用率有重要意义。
银杏叶黄酮类化合物的提取方法目前研究的有水浸取法，成本低但浸取率低；有机溶剂浸取法中，乙醇浸取的效率高且无毒，是目前采用较多的方法；韩玉谦等采用超临界流体萃取法，在70%乙醇溶液中加热回流法和CO2 超临界流体萃取法提取银杏叶中的活性成分，银杏黄酮回收率为84 . 4 % ，是常规萃取法回收率的2倍多；乙醇超声波浸取法, 黄酮提取率可达到8 6 . 7 %。
银杏黄酮含量的测定常用分光光度法和高效液相色谱法。
分光光度法自20世纪9 0年代以来一直是用来测定银杏黄酮的一种重要方法, 由于其成本低、便于操作等特点, 是一种快捷有效的方法[1]。
本实验采用乙醇作溶剂进行索氏提取，建立了用Al(NO3)3显色法对芦丁标准品和银杏叶提取液进行光谱扫描测定银杏叶总黄酮含量的方法[2]。
三、实验仪器和试剂材料：银杏叶粉末50g试剂：标准芦丁样品，无水乙醇（600ml），50mlAl(NO3)3（0.1mol/L），乙醚，5%NaNO2溶液，10%AL(NO3)3，4%NaOH溶液。
仪器：紫外分光光度计、电子分析天平、水浴锅、烘箱、烧杯、容量瓶（100ml1个、50ml1个、10ml6个）、索氏提取器、减压蒸馏装置、锥形瓶、沸石等。
四、实验步骤1.1提取银杏叶中总黄酮（1）将银杏叶洗净, 在103℃下烘干至恒重,用研钵捣碎制得银杏叶粉（2）准确称取10.0g，置于索氏提取器中，按下列条件加热回流提取：乙醇浓度80％，料液比1：20(g／ml)，回流温度85℃，回流时间2 h，平行进行1~3次实验。
银杏叶提取黄酮及分离纯化
银杏叶提取黄酮及分离纯化组员：李佳辉、黄埔、赵超武一、实验目的1.掌握传统的溶剂提取法并对银杏中的黄酮进行提取2.掌握紫外分光光度计的应用，以及相关溶液的配置3.学会自主设计实验，培养团队合作精神二、实验原理⑴关于黄酮：银杏中最具药用价值的成分，有提高人体免疫力的作用；并且抗衰老、调节内分泌，还具有抗炎、抗真菌的作用；⑵实验需设置空白参比液，由文献资料可知芦丁标准液的最大波长大概为510nm;⑶本实验采用硝酸铝（氯化铝）法测定银杏叶总黄酮的质量浓度，因为黄酮类化合物可以与铝盐发生络合显色反应。
其主要原理为：在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在的条件下，黄酮类化合物与铝盐发生螯合反应，加入氢氧化钠溶液后，溶液显橙红色，在510nm（左右）处有吸收峰，且符合定量分析的朗伯—比尔定律（即A=kbc）一般与芦丁标准溶液比较定量。
先用亚硝酸钠还原黄酮类化合物，再加铝盐络合，最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环，生成2-羟基查尔酮而显色。
显色原理发生在黄酮醇类邻位无取代的邻二酚羟基部位，不具有邻位无取代的邻二酚羟基的黄酮类成分加入上述试剂时是不显色的。
（如二氢黄酮类化合物就不发生该显色反应）目前银杏叶黄酮的提取方法主要有：溶剂提取法、超临界流体萃取法（SFE法）、高速逆流色谱技术提取法（HSCCC)微波提取法、超色波提取法、酶提取法、分子烙印技术。
因溶剂提取法操作简单，所需试剂廉价易得，故通常使用此法来进行大规模生产。
其工艺流程如下：银杏叶—→粉碎—→NaOH-60%乙醇回流提取—→离心—→过滤—→滤液收集—→二次醇提—→合并两次滤液—→树脂吸附—→脱吸—→浓缩—→干燥—→提取物由于银杏叶黄酮中的类黄酮主要为芦丁，故用芦丁为对照物绘制标准曲线，并采用分光光度法进行测定。
三．实验材料及器材1.材料酸银杏叶、芦丁、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、95％乙醇、磷酸氢二钠、磷二氢钠、D101大孔吸附树脂、盐酸2.相关溶液的配制和树脂预处理0.20mg／mL芦丁标准溶液（500mL）、5％NaNO2（500mL）、10％AI(NO3)3（500mL）、1mol／LNaOH 、0.4mol／LNaOH（500mL）、0.4mol ／L HCl(500mL)、30%乙醇（500mL）30%乙醇（1）D101树脂预处理(500g)：商品树脂均残留惰性溶剂，故使用前根据应用需要，必须进行不同深度的预处理，在提取器内，加入高于树脂层10-20厘米的乙醇浸泡3—4小时，然后放净洗涤液，为一次提取过程。
银杏黄酮提取和精制工艺的研究
3 4 4.5 5 5.5 6 上样液 pH 值
2011 年第 4 期
文章编号：1002-1124（2011）04-0060-03
工
程
师 园
银杏黄酮提取和精制工艺的研究
地
韩学哲，王东双，安晓东，连运河
(1. 河北省天然色素工程技术研究中心，河北 邯郸 057250；2.晨光生物科技集团股份有限公司，河北 邯郸 057250)
摘 要：利用乙醇 - 水混合溶剂循环提取银杏叶中银杏黄酮。通过实验对提取工艺的条件进行了优化：
2.3 固液比对提取效果的影响
在提取 3 遍，提取时间 3h，提取温度 65℃条件
下，选取总固液比 1∶9，1∶15，1∶18 的条件,考察
固液比对提取银杏叶中总黄酮含量的影响, 以考察
提取完的渣中的含量检测提取率，结果见表 3。
表 3 固液比对黄酮提取率的影响 Tab.3 Effect of solid-to-liquid ratio to extraction ratio of
测定法：分别精密吸取上述对照品溶液与供试
2011 年第 04 期
韩学哲等：银杏黄酮提取和精制工艺的研究
61
品溶液，注入液相色谱仪，测定，分别计算 3 种黄酮 苷元的含量，以下式换算成总黄酮醇苷的含量。总 黄酮醇苷含量 = (槲皮素含量 + 山柰素含量 + 异鼠 李素含量)×2.51。
1.3 银杏黄酮的提取工艺过程
州理工大学化学工艺专业，主要研究方向：天然产物提 取。
工艺条件。
1 实验部分
1.1 仪器和试剂
Agilentl200 高效液相色谱仪(美国 Agilent 公司)。 银杏叶(从山东郯城收购)；乙醇(食品级)，其他 试剂均为分析纯。槲皮素，山萘酚,异鼠李素对照品 均购于上海同田生物技术有限公司。
银杏叶黄酮提取工艺
银杏叶黄酮提取工艺1. 导言银杏叶黄酮是银杏叶中的重要成分，具有抗氧化、抗炎、抗衰老等多种生物活性。
因此，提取银杏叶黄酮成为了一项重要的研究内容。
本文将介绍一种常用的银杏叶黄酮提取工艺，并深入探讨其原理、操作步骤和优化方法。
2. 银杏叶黄酮提取原理银杏叶黄酮主要存在于银杏叶的叶肉细胞中，其主要成分为黄酮类化合物，包括酮类、酚类、苷类等。
提取银杏叶黄酮的原理是利用溶剂提取和分离纯化的方法。
2.1 溶剂提取原理溶剂提取是将银杏叶中的黄酮类化合物溶解于适宜的溶剂中，利用溶剂与黄酮类化合物的亲和力差异来实现分离纯化的目的。
常用的溶剂包括乙酸乙酯、乙醇、醋酸等。
乙酸乙酯是一种非极性溶剂，对银杏叶黄酮有较好的溶解度，因此在提取过程中常用乙酸乙酯作为主要的溶剂。
2.2 分离纯化原理通过溶剂提取得到的提取液中含有多种化合物，想要得到纯度较高的银杏叶黄酮，则需要进行进一步的分离纯化。
常用的分离方法包括结晶法、色谱法等。
其中，色谱法是一种常见且效果较好的分离方法，能够对复杂的混合物进行高效、准确的分离。
3. 银杏叶黄酮提取工艺步骤银杏叶黄酮提取工艺主要分为原料处理、提取和分离纯化三个步骤。
3.1 原料处理原料处理是提取工艺中的第一步，其目的是准备好适宜的原料以用于后续的提取过程。
主要步骤包括银杏叶的采集、去杂质处理和干燥处理。
1.银杏叶的采集：选择生长健壮、无病虫害的银杏树，采摘新鲜健康的银杏叶。
2.去杂质处理：将采摘好的银杏叶进行清洗，去除叶片表面的杂质和尘土。
3.干燥处理：将清洗好的银杏叶进行晾晒或烘干处理，使其含水率在10%以下。
3.2 提取提取是银杏叶黄酮提取工艺的核心步骤，其目的是将银杏叶中的黄酮类化合物溶解到溶剂中。
1.将干燥处理好的银杏叶研磨成粉末状。
2.取一定量的银杏叶粉末，加入适量的乙酸乙酯作为溶剂。
3.进行搅拌浸泡，使溶剂与银杏叶充分接触。
4.进行过滤、浓缩，得到黄酮类化合物溶液。
3.3 分离纯化分离纯化是提取工艺的重要环节，通过对提取得到的溶液进行分离，可以得到纯度较高的银杏叶黄酮。
银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺研究
银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺研究
银杏叶中黄酮类化合物是一种重要的天然药物成分，具有广泛的药理
活性和丰富的医学价值。
因此，对银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺
进行研究具有重要的意义。
目前，银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺主要有以下几种：
1.超声波提取法
超声波提取法是一种新型的提取方法，具有高效、快速、环保等优点。
该方法利用超声波的机械作用和热效应，使银杏叶中的黄酮类化合物
迅速释放出来。
同时，超声波还可以破坏细胞壁，促进化合物的释放。
该方法提取效率高，但需要较高的设备成本。
2.水提取法
水提取法是一种传统的提取方法，具有简单、易操作、成本低等优点。
该方法利用水的溶解性，将银杏叶中的黄酮类化合物溶解出来。
但是，该方法提取效率较低，需要较长的提取时间。
3.超临界流体提取法
超临界流体提取法是一种新型的提取方法，具有高效、环保等优点。
该方法利用超临界流体的物理性质，将银杏叶中的黄酮类化合物迅速溶解出来。
该方法提取效率高，但需要较高的设备成本。
4.微波辅助提取法
微波辅助提取法是一种新型的提取方法，具有高效、快速等优点。
该方法利用微波的电磁波作用，使银杏叶中的黄酮类化合物迅速释放出来。
该方法提取效率高，但需要较高的设备成本。
综上所述，银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺有多种方法可供选择，每种方法都有其优缺点。
因此，在实际应用中，需要根据具体情况选择合适的提取方法，以达到最佳的提取效果。
响应面法优化提取银杏叶总黄酮的工艺研究
用 于 食 品 、化 妆 品 等 。为 了 更 好 的利 用 银 杏 叶 中 的 活 性 成 分 ，本 文 采 用 传 统 的 水 浸 提 法 提 取 总 黄 酮 。在 单 因
素实验基础上选取实验 因素与水平 ，根据 中心组合 （ ｏ Ｂ ｘ—Ｂ ｎ ｎｅ ）实验设 计原理采用 ３因素水平的响应面 ｅｈ ｋｎ 分析法 ，依据 回归分析确定各工艺条件 的影 响因子 ，以 Ｓ Ｄ的比活 力为响应值作 响应 面和等高线 。在分 析各 Ｏ 个因素的显著性和交互作用后 ，得 出最佳 工艺条件 为 ：温度 １＆Ｃ，料 液 比 １：１ ，浸提 ６ ｍｉ。在此工 艺条 ０ ０ ０ ｎ
ｔｏ ａ ｅ ｏ ａ ｏ ｏｄｓｗａ ．２ ８％ ． ｉ ｎ ｒ ｔ ｆｆ ｖ ｎ ｉ ｓ１ ７ ｒ ｃ ｅ ｏ ｏ ｇ ；ｏｔ ｉ ｔ ｎ ｙｗ ｒ ｓ ｉ ｋｏｌ ｖ ａｓｌ；ｆ ｏｏ ；ｒｓｏｓ ｕｆ ｅｍ ｔ ｄ／ ｙ ｐｉ ｚ ｉ ｅ ａ ｄ ａ ｈ ｏ ｍ ａｏ
ｉ ｅ ｉｎ ｕ ａ ｏｉ ｆ ｄ ，ｃｓ ｅ ｃ ｎ Ｏ ｎ Ｉ ｉｒｓａｃ ，ｔ ｃ ｖ ｏ ｐｎ ｎｓｎｇｎｇ ａｅ ａ ｘ ａ－ ｎｍ ｄｃ ｅ ｔ ｌ ｏ ｓ ｏｍ ｔ ｄ ． ｎｔ ｓｅｅｒｈ ｈ ａｔ ｅ ｍ ｏ ｅｔ ｉ ｉ ｋｏｌ ｖｓ ｓ ｔ ｃ ｉ ｂ ｓ ｎ ｏ ｉａ Ｓ ｏ ｈ ｅ ｉ ｃ ｅ ｗ ｅｒ ｔ ｙｗ ｔｒ Ｂ ｓｄｏ ｉｇ ｃ ｒｔ ｔ，ｔｅｏｔ ｕ ｘｒ ｔ ｎｃｎ ｉｏ ｓ ｆ ａｏｏｄ ｏ ｎ ｇ ａｅ ｅｅ ｂ ｅ ｂ ａ ． ａｅ ｎｓ ｌ ｆ ｔ ｓ ｄ ｅ ｎ ｅ ａ ｏ ｅ ｓ ｈ ｐｉ ｍ ｅｔ ｃｉ ｏ ｄ ｉ ｖｎｉｓ ｒｍ ｇ ｋｏｌ ｖｓ ｒ ｏ ｍ ａ ｏ ｔｎ ｏｆ ｌ ｆ ｉ ｅ ｗ
银 杏 叶 ，银 杏 科 植 物 银 杏 的 叶 ，又 名 白 果
银杏黄铜的提取工艺、性质和功能研究
银杏黄酮的提取工艺、性质和功能研究摘要目的从银杏叶中分离纯化出总黄酮，并用来做定性、定量分析及其功能研究。
方法采用超声提取法从银杏叶中提取总黄酮，再用硅胶柱层析法分离纯化，用镁粉、浓盐酸做定性分析，以NaNO2、Al(NO3) 3和NaOH为显色剂在510nm处测定其吸光值，分析其含量，用普鲁士蓝法进行总黄酮还原力的测定。
结果与镁粉、浓盐酸反应溶液颜色呈橙色，银杏叶提取液稀释10倍后测得吸光度0.147；稀释5倍时吸光度为0.262；不稀释时浓度为1.229，当样品浓度为0.04mg/ml时还原力最强。
结论用超声波辅助提取法、硅胶柱层析法能较快速的分离纯化出银杏叶中的总黄酮，银杏叶黄酮具有较强的还原力。
关键词银杏总黄酮；提取工艺；银杏黄酮功能前言银杏又名公孙树，为银杏科银杏属植物。
银杏叶中黄酮类化合物含量较高，为2.5%~5.91%，主要含有黄酮和银杏内酯等有效成分，其中银杏黄酮具有扩张血管，增加脑血管流量，降低脑血管阻力，改善脑血管循环功能，保护脑细胞，免受缺血损害扩张冠状动脉；防止心绞痛及心肌梗塞，抑制血小板活化因子、抗氧化，防止血栓形成，清除有害的氧化自由基，提高免疫力和调血脂等药理作用[1]。
对治疗心脑血管疾病，增加冠状动脉血流量，及治疗脑缺血、脑老化、老年痴呆症哮喘等有独特疗效[1]。
国内外相继有银杏叶黄酮新药投入市场。
1 实验仪器：紫外分光光度计、电子天平、超声波提取机、漏斗、滤纸、三角瓶、50ml 移液管、容量瓶、移液枪、烧杯等。
2 实验方法[2]2.1 银杏黄酮提取步骤：（一）采用超声提取法从银杏叶中提取总黄酮。
（二）称取100g磨碎的银杏叶，用1000ml 60％的乙醇溶解称取的银杏叶。
（三）在超声功率800Hz下提取，连续超声35min。
（四）提取液减压布式漏斗过滤，再旋转蒸发器浓缩回收乙醇。
2.2 柱层析方法2.2.1 硅胶的预处理13称取3g硅胶样品放入烧杯中，再放入烘箱中105℃，干燥40min。
银杏叶中黄酮类化合物的提取
随着时间的↑ 随着时间的↑黄 酮类化合物提取 4h之前 率↑ ，4h之前 时间↑ 时间↑提取率的 影响比较明显， 影响比较明显， 4h之后时间的 之后时间的↑ 4h之后时间的↑ 提取率增加变缓。 提取率增加变缓。
实验条件：温度 ℃ 浸取剂70%乙醇溶液 ；料液比 实验条件：温度80℃ ；浸取剂 乙醇溶液 料液比1:15
提取率 （ % ） 提取率（
三 、实验结果及讨论
料液比对提取率的影响：
90 85 80 75 70 65 1:10 1:15 1:20 1:25 1:40
↑ 1:15
料液比
随着料液比↑提取 随着料液比 提取 率也随之↑。 率也随之 。在 1:15之前，对提 之前， 之前 取率的影响比较 明显， 明显，在1:15之 之 后，对提取率影 响变小。 响变小。
芦丁的化学结构式
二、研究内容
测量波长的选取： 测量波长的选取：
1.5 1.2
0.9 0.6 0.3 0 400 450 500 550 600
500nm ↓
波长( nm） 波长 ( nm ）
根据吸收光谱可 知，该有色溶液在波 nm具有最大吸 长500 nm具有最大吸 光度， 光度，且吸收范围较 宽，所以选择吸收波 nm作为定量测 长500 nm作为定量测 定波长。 定波长。
80 70 60 50 40 50 60 70
↑ 80℃ ℃
80
90
100
温度（ 温度 （ ℃ ）
浸取温度的↑ 浸取温度的↑提 取率液随着↑ 取率液随着↑ 。 80℃之前提取率 ℃ 增加迅速， ℃ 增加迅速，80℃ 之后， 之后，温度对提 取率的影响变小。 取率的影响变小。
实验条件：时间 浸取剂70%乙醇溶液 ；料液比 实验条件：时间4 h ；浸取剂 乙醇溶液 料液比1:15
银杏叶总黄酮提取工艺研究进展及应用
银杏叶总黄酮提取工艺研究进展及应用摘要：本论文综述了银杏叶中总黄酮的提取方法，包括溶剂萃取法、超声辅助酶法、超临界二氧化碳萃取法等，在此基础上提出低共熔溶剂对银杏叶总黄酮的提取并进行了展望，以期为低共熔溶剂的提取提供借鉴和参考。
银杏(Ginkgo biloba L)为银杏科银杏属植物，据记载银杏叶的医药价值自宋朝起就得到重视，《日用本草》、《本草纲目》、《本草品汇精要》等书籍均对银杏叶的医药价值有所记载，其资源分布广泛，中国为银杏资源分布大国，占世界比重达到85%，其主要分布在中国贵州、四川、江苏等省区。
银杏叶含有丰富的类黄酮、乙二醇、多糖等活性物质，可用于食品、医药、生物农药等领域；具有抗菌、消炎功效，是生产生物农药的良好原料[1]。
1 银杏叶总黄酮传统提取工艺1.1 溶剂萃取法溶剂萃取法是较为常见的一种提取方法，以乙醇、甲醇等有机溶剂为萃取溶剂，从植物中提取总黄酮。
其基本原理是根据不同的黄酮的极性，选用不同的有机溶剂进行萃取。
溶剂萃取法相较于其他提取方法更为简单简便，但也具有易挥发，操作不当会发生爆炸等安全问题的缺点[2]。
徐桂花等[3]选择银杏叶作为研究对象，通过对其最佳提取工艺的的研究，当采用溶剂萃取法提取银杏叶总黄酮时的提取条件为液料比为40:1(mL/g)，乙酵体积分数为75%，于70℃下提取4h，此时总黄酮得率达1.084%。
1.2 超声辅助酶法在提取前先对银杏叶粉末用酶进行预处理，达到一种破除细胞壁加速黄酮释放的作用，再利用超声波的强震、强速度、强的超声波空化作用，使天然产物的细胞壁受到强烈的损伤，从而促进了黄酮的释放，促进药物的渗透速度，缩短了提取时间，增加了有效成分的利用率。
通过对超声波提取方法的研究，证明该方法的最佳超声时间为20分钟，可以避免由于长时间的超声波作用而引起的活性物质的分解，以及由于时间的推移引起的杂质的增多，从而降低了能量消耗，从而达到节能、省时、高效的目的[4]。
银杏叶中总黄酮的提取工艺研究
银杏叶中总黄酮的提取工艺研究银杏叶是一种常见的中药材，具有多种药理作用，其中总黄酮是其主要有效成分之一。
因此，提取银杏叶中的总黄酮具有重要的研究价值和应用前景。
本文将介绍银杏叶中总黄酮的提取工艺研究。
一、总黄酮的提取方法目前，常用的总黄酮提取方法主要有超声波法、微波法、超临界萃取法、水提法、乙醇提法等。
其中，乙醇提法是最常用的方法之一，其操作简单、成本低廉、提取效果较好。
二、提取工艺的优化1.提取溶剂的选择乙醇浓度是影响提取效果的重要因素之一。
一般来说，乙醇浓度越高，提取效果越好。
但是，过高的乙醇浓度会导致提取物中杂质含量增加，从而影响提取效果。
因此，需要在提取溶剂的选择上进行优化。
2.提取时间的控制提取时间是影响提取效果的另一个重要因素。
一般来说，提取时间越长，提取效果越好。
但是，过长的提取时间会导致提取物中杂质含量增加，从而影响提取效果。
因此，需要在提取时间的控制上进行优化。
3.提取温度的控制提取温度是影响提取效果的另一个重要因素。
一般来说，提取温度越高，提取效果越好。
但是，过高的提取温度会导致提取物中杂质含量增加，从而影响提取效果。
因此，需要在提取温度的控制上进行优化。
三、总结总黄酮是银杏叶中的主要有效成分之一，其提取工艺的优化对于提高提取效果具有重要的意义。
在提取工艺的优化过程中，需要选择合适的提取溶剂、控制提取时间和提取温度，以达到最佳的提取效果。
未来，还需要进一步深入研究银杏叶中总黄酮的提取工艺，以提高其应用价值。
银杏叶中总黄酮的提取
银杏叶中总黄酮的提取
1 银杏叶中总黄酮的提取
银杏叶是以银杏树(Ginkgo biloba L.)叶片为原料，是世界上著名的汉药，具有活血、散瘀、抗氧化和神经保护等功效。
其中，总黄酮是其最重要的活性成分之一，具有明显的保护神经及消除氧自由基的功效。
因此，总黄酮的提取技术对于银杏叶药材活性成分的研究具有重要意义。
2 材料与方法
银杏叶样品（湖南洞庭湖产）500克，70%乙醇(200mL)，6次甲醇-水混合溶剂，1次甲醇提取。
多相混合物高效液相色谱法，仪器模式为Agilent1220树脂柱（AgilentC18(250mm×4.6mm，5μm)），流动相为缓冲溶液：锂溶液50mmol/L，流速A=0.2mL/min，B=0.2mL/min;从低比重A=0%，到高比重B=25%，线性升温时间15min。
常规参数为254nm检测器，测定波长320nm处的量值;样品灌注量20μL。
3 结果
提取中，银杏叶中总黄酮的提取量为2.37g，其含量约为0.47%。
除此之外，还检测到银杏叶中其他成分，其中主要成分为黄酮类化合物RG3、G4。
4 结论
通过对银杏叶中总黄酮的提取，证明了多相混合物高效液相色谱法是一个实用的提取技术，能够在银杏叶中有效提取总黄酮。
这种技术无论在提取效率，还是提取纯度方面，都获得较高的效果。
银杏叶中黄酮的提取原理及方法
银杏叶中黄酮的提取原理及方法SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#银杏叶中黄酮提取及含量测定一、实验目的提取银杏叶中的总黄酮并测定其含量。
二、实验原理银杏系银杏科银杏属落叶乔木，银杏叶中含有多种生理活性成分，其中黄酮类化合物是重要的生理活性物质，具有保肝护肝、预防治疗心血管疾病、抗氧化、抗衰老等作用。
因此，将银杏叶作为高营养、保健功能价值的资源加以开发利用，这对于提高银杏叶综合利用率有重要意义。
银杏叶黄酮类化合物的提取方法目前研究的有水浸取法，成本低但浸取率低；有机溶剂浸取法中，乙醇浸取的效率高且无毒，是目前采用较多的方法；韩玉谦等采用超临界流体萃取法，在70%乙醇溶液中加热回流法和 CO2 超临界流体萃取法提取银杏叶中的活性成分，银杏黄酮回收率为84 . 4 % ，是常规萃取法回收率的2倍多；乙醇超声波浸取法, 黄酮提取率可达到 8 6 . 7 %。
银杏黄酮含量的测定常用分光光度法和高效液相色谱法。
分光光度法自20世纪 9 0年代以来一直是用来测定银杏黄酮的一种重要方法, 由于其成本低、便于操作等特点, 是一种快捷有效的方法[1]。
本实验采用乙醇作溶剂进行索氏提取，建立了用Al(NO3)3显色法对芦丁标准品和银杏叶提取液进行光谱扫描测定银杏叶总黄酮含量的方法[2]。
三、实验仪器和试剂材料：银杏叶粉末50g试剂：标准芦丁样品，无水乙醇（600ml），50mlAl(NO3)3（L），乙醚，5%NaNO2溶液，10%AL(NO3)3，4%NaOH溶液。
仪器：紫外分光光度计、电子分析天平、水浴锅、烘箱、烧杯、容量瓶（100ml1个、50ml1个、10ml6个）、索氏提取器、减压蒸馏装置、锥形瓶、沸石等。
四、实验步骤提取银杏叶中总黄酮（1）将银杏叶洗净, 在103℃下烘干至恒重,用研钵捣碎制得银杏叶粉（2）准确称取，置于索氏提取器中，按下列条件加热回流提取：乙醇浓度80％，料液比1：20(g／ml)，回流温度85℃，回流时间2 h，平行进行1~3次实验。
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分光光度法
液相色谱法
总黄酮 吸收度（Ａ）
含量（％）
三对照品 单对照品 测定法（％） 测定法（％）
０．６５４０
３２．７０
２６．５６
２５．９１
０．６２３０
３１．０２
２５．２５
２５．６０
０．６５１０
３２．４０
２５．９６
２５．２０
０．８１５０
４０．７０
３２．０２
３１．８０
０．７７４０
３８．６０
２９．５０
２９．０３
文献中有采用紫外可见分光光度法［６￣７］，也有采用高效液 相色谱法来测定银杏叶总酮的含量［８￣９］。我们在实验中，分别 采用紫外可见分光光度法和高效液相色谱法对银杏叶提取
物总黄酮进行含量测定：ＵＶ 测得总黄酮平均含量 ３３．８７％， ＨＰＬＣ 以三对照品法测得为 ２６．５７％，ＲＳＤ＝２．１２％。经分析与 比较认为，紫外可见分光光度法作为一种简便、准确的质量 控制方法，可应用于工厂的实际生产工作中。 1、材料与仪器 １．１、材料
０．５６１０
２７．８２
２０．１５
２０．７５
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黑龙江医药 Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｖｏｌ．２６ Ｎｏ．３ ２０１３
表 ２ 不同对照品测定银杏叶总黄酮含量结果
样本来源（６ 月中旬 三对照品
单对照品
采摘） 郑州 ４ 年幼苗 郑州 ３ 年幼苗 郑州 ２ 年幼苗 嵩县 ２０ 年以上 嵩县 ４ 年幼苗
２．２．１．２ 测定条件选择 以芦丁为对照品，取银杏叶提取物约 ０．０２ｇ 置于 １０ｍｌ
量瓶中，同上操作，以试液作空白，分别加入 ＮａＮＯ２ 溶液 （０．１－ ０．４ｍｌ），Ａ１ （ＮＯ３）３ 溶 液 （０．１－ ０．４ｍｌ） 和 ＮａＯＨ 溶 液 （０．５－ ４．０ｍｌ），测得的吸收度基本不变，说明黄酮类化合物与 三价铝离子形成的络合物是稳定的。在系统中分别加入芦丁
K ey wor ds：Ginkgo biloba Ｌ．； ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ； ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｇｒａｐｈ； ＨＰＬＣ； ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ； Ｒｅｆｉｎｉｎｇ ｐｒｏｃｅｓｓ．
银杏 Ginkgo biloba L．古代孑遗植物，其功效最早记载于 《神农本草经》，具有润肺、平喘、止咳等功效。系为银杏科银 杏属植物，又名公孙树，为我国特有树种。银杏叶为银杏的干 燥叶，其提取物中主要含有黄酮类化合物和二萜类化合物， 它们具有改善心脑血管循环、抑制血小板凝聚酶、抗菌、抗病 毒、抗癌等作用［１］。近年来有许多对银杏叶提取物的研究报道 ［２￣５］，为了充分开发我国丰富的银杏资源，探索一种操作稳定、 简便、有效成分提取完全、含杂质较少的工艺，我们以银杏叶 总黄酮的提取率为指标对银杏叶提取工艺和精制工艺进行 了深入的研究与探讨。旨在提高总黄酮的收率及产品的质 量。为工业化生产提供参考依据。
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阵列检测器，ＲＣＭＣ１８（８．０×１．０ｃｍ，粒度：５μｍ）径向加压柱 （美国 Ｗａｔｅｒｓ 公司）；树脂柱（有机玻璃柱，高 ５５ｃｍ，上端直 径 １１ ｃｍ，下端直径 ８ｃｍ）；ＣＬ－ ２５ 型蠕动泵（北京宣武超滤设 备厂）；ＰＴＧＣ Ｐｒｅｐ 超滤柱（美国 Ｍｉｌｉｐｏｒｅ 公司）。 2、实验方法与结果 ２．１、银杏叶提取物的制备
测定法（％） １．５０ １．７９ １．５８ ０．８５ １．５２
测定方法（％） １．５５ １．７４ １．５１ ０．８１ １．４７
２．３ 提取工艺条件的选择
２．３．１ 色谱条件
色谱柱：ＲＣＭＣ１（８ ８．０×１．０ｃｍ，粒度：５μｍ）径向加压柱； 流动相：甲醇 － ０．４％磷酸溶液（５５：４５）；流速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ；进样
效液相色谱法对提取物中的银杏叶总黄酮进行含量测定，并相互比较。选择一种快速、简便、准确的方法，作为银杏叶总黄酮
含量测定的常用方法，并加以推广应用。同时以高效液相色谱法为测量手段，以总黄酮的收率为指标，对银杏叶的提取与精制
工艺进行研究和探讨，确定了提取溶剂、时间、次数及浓缩、干燥温度等提取工艺参数，比较了树脂吸附一次洗脱和二次洗脱
以及超滤与树脂吸附相结合的精制工艺对产品质量及银杏叶总黄酮收率的影响。结果满意。
关键词：银杏叶；总黄酮；分光光度法；高效液相色谱法；提取工艺；精制工艺
中图分类号：TQ461
文献标识码：Ａ
文章编号：１００６－ ２８８２（２０１３）０３－ ４１７－ ０４
Study on the Extraction and Separation of Total Flavonoids from Ginkgo Biloba L. Extract
银杏叶提取物样品制备：精密称取银杏叶提取物 ０．１ｇ， 加甲醇 ２０ｍｌ 使其完全溶解，加入 １．５ｍｏｌ／Ｌ 盐酸 ２０ｍｌ，摇匀， 回流 ２ 小时，冷却，转入 ５０ｍｌ 量瓶中并用甲醇定容，过滤备 用。
银杏叶样品的制备：取银杏叶 １．５ｇ，在索氏提取器中用 甲醇提取 ８ 小时，６０℃以下浓缩至 １５ｍｌ，加入 １．５ｍｏｌ／Ｌ 盐酸 ２０ｍｌ，混匀，回流 ２ 小时，冷却，转入 ５０ｍｌ 容量瓶中并用甲醇 定容，过滤备用。 ２．２．２．３ 样品测定
含量 ２０ 倍的各种糖类如蔗糖、乳糖、葡萄糖，再测其收度，变 化也很小，说明糖类不干扰黄酮的测定。用试剂作空白消除 了显色前黄酮颜色的干扰。测试温度均为 ２５℃，以消除温度 对络合物稳性的影响。 ２．２．１．３ 样品的测定
精密称取银杏叶提取物约 ０．０２ｇ，置 １０ｍｌ 量瓶中加 ３０％ 乙醇溶液，按上述方法操作并用 ３０％乙醇定容，测定，用回归
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黑龙江医药 Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｖｏｌ．２６ Ｎｏ．３ ２０１３
银杏叶提取物总黄酮的提取分离及工艺的研究
刘雪飞
哈尔滨奥霖药业有限公司（１５０３００）
摘 要：本文首先是银杏叶提取物的制备，我们采用 ７０％乙醇热回流提取工艺提取银杏叶，用紫外可见分光光度法和高
Liu Xuefei Harbin Aolin Pharmaceutical.,ltd （150300）
Abstr act: Ｔｈｅ Ginkgo biloba Ｌ． ｅｘｔｒａｃｔ ｗｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ７０％ ｅｔｈａｎｏｌ ｔｈｅｒｍａｌ ｒｅｃｙｃｌｉｎｇ ｅｘｔｒａｃｔ ｆｒｏｍ G. biloba ｌｅａｖｅｓ． Ｗｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｔｈｅ ｌｅａｖｅｓ ｏｆ G. biloba ｂｙ ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ－ ｖｉｓｉｂｌｅ ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ ａｎｄ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ （ＨＰＬＣ） ｔｏ ｆｉｎｄ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅ ｍｅｔｈｏｄ， ｗｈｉｃｈ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄ ａｓ ａ ｒｅｇｕｌａｒ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｃｏｎｔｅｎｔ． Ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ G. biloba ｗａｓ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ ｕｓｉｎｇ ＨＰＬＣ， ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｏｃｅｓｓ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｓｕｃｈ ａｓ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒｅａｇｅｎｔｓ， ｔｉｍｅ ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ｃｏｎｄｅｎｓｉｎｇ ａｎｄ ｄｒｙｉｎｇ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓ ａｎｄ ｓｏ ｏｎ ｗｅｒｅ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｔｏ ａｃｑｕｉｒｅ ｈｉｇｈｅｒ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ． Ｗｅ ａｌｓｏ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｒｅｓｉｎ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ｔｈｅ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｕｌｔｒａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｒｅｓｉｎ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ａｎｄ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ Ｇ． ｂｉｌｏｂａ．
方程计算总黄酮的含量，结果见表 １。
２．２．２ 高效液相色谱法 ２．２．２．１ 色谱条件
色谱柱：ＲＣＭＣ１８（８．０×１．０ｃｍ，粒度：５μｍ）径向加压柱； 流动相：甲醇 － ０．４％磷酸溶液（５５：４５）；流速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ；进样 量：１０μ１；检测波长：３６０ｎｍ；柱温：２５℃。 ２．２．２．２ 样品的制备
量：１０μ１；检测波长：３６０ｎｍ；柱温：２５℃。外标法测定。
２．３．２ 样品的制备
银杏叶提取物样品制备：精密称取银杏叶提取物 ０．１ｇ，
加甲醇 ２０ｍｌ 使其完全溶解，加入 １．５ｍｏｌ／Ｌ 盐酸 ２０ｍｌ，摇匀，
银杏叶（河南省银杏科学技术开发中心提供）；银杏叶提 取物 （河南鲁山县银杏叶提取厂和本实验室提供）；ＤＭ１３０ 树脂（山东齐鲁抗生素厂）；芦丁、槲皮素（中国药品生物制品 检定所）；山柰酚、异鼠李素（Ｓｉｇｍａ 公司）；甲醇、乙醇、丙酮 （为工业原料或分析纯）；其它试剂均为分析纯。 １．２、仪器
ＵＶ－ ４６００ 型紫外可见分光光度计 （瑞典 Ｐｈａｒｍａｃｉａ 公 司）；高效液相色谱仪，配备有 ６００Ｅ 型泵系统，９６６ 型二极管
（１）三对照品测定方法 银杏叶提取物酸水解后主要为 ３ 中甙元：槲皮素、山柰 酚、异鼠李素，按上述色谱条件可将这 ３ 种甙元完全分开，用 外标法进行含量分析，以 ３ 个对照品对 ６ 份银杏叶提取物和 ５ 份银杏叶样品进行测定，结果见表 １，表 ２。 （２）单对照品测定法 标准曲线：将浓度分别为 ０．００５、０．０１、０．０２、０．０４、０．０６、 ０．０７ｍｇ／ 的槲皮素对照品溶液分别进样，以面积（Ａ）对相应的 进样量 Ｑ（μｇ） 计算回归方程：Ａ＝３．８００×１０６Ｑ＋１．５５０×１０４， ｒ＝０．９９９８，槲皮素 ０．０５－ ０．７０μｇ 范围内呈良好的线性关系。 按上述方法对银杏叶提取物及银杏叶样品总黄酮含量 测定，峰面积乘以校正因子 ２．５１，再求出含量，结果见表 １， 表 ２。 精密度测定：取浓度为 ０．０２ｍｇ／ｍｌ 的槲皮素对照品溶 液，按上述条件重复进样 ６ 次，每次 １０μｌ 测得其精密度 ＲＳＤ＝３．２％（ｎ＝６）。 回收率测定：精密称取银杏叶提取物 ０．１ｇ，加入槲皮素 对照品 ２ｍｇ，按上述方法测槲皮素的回收率，得平均回收率 为 ９７．９％，ＲＳＤ＝２．１２％（ｎ＝５）。 表 １ 分光光度法和液相色谱法测定银杏叶提取总黄酮 含量比较