细胞培养总结
细胞培养员个人工作总结
![细胞培养员个人工作总结](https://img.taocdn.com/s3/m/f80d48bbf71fb7360b4c2e3f5727a5e9846a2749.png)
细胞培养员个人工作总结作为一名细胞培养员,我在过去一年中取得了许多进展和成就。
通过我的努力和专业知识,我对细胞培养的技术和操作有了更深入的了解,也使我在实验室工作中变得更加熟练和有效率。
在这一年中,我参与了多个细胞培养实验项目的设计和实施。
我学会了如何选择合适的细胞培养基和添加剂,以及如何进行无菌操作和细胞传代。
我也积累了丰富的细胞培养实验经验,能够独立完成各种类型的培养细胞,包括肿瘤细胞、干细胞和原代细胞等。
除了实验室操作技能的提高,我还注重了实验室安全和环境卫生。
我始终保持实验室的整洁和无菌环境,定期进行设备消毒和清洁,确保实验过程的准确性和可靠性。
在日常工作中,我也注重团队合作。
我与实验室同事合作紧密,共同解决实验中出现的问题和挑战。
我积极分享自己的经验和见解,与大家一起不断提高工作效率和质量。
通过这一年的工作,我对细胞培养技术和实验室管理有了更深入的了解,也提升了我的综合实验能力和团队合作能力。
我将继续努力,不断学习和提高自己的专业水平,为细胞培养实验工作贡献力量。
作为一名细胞培养员,我深知自己的责任是保证实验室中的细胞培养工作顺利进行,以支持科学研究和生物医学领域的发展。
通过不断学习和实践,我逐步完善了自己的技能和知识体系,获得了丰富的实验经验和专业能力。
在实验室工作中,细胞培养技术是最基础也是最核心的技能之一。
我始终严格遵循无菌操作的标准,确保细胞培养过程中的无菌、洁净和可靠性。
我熟练掌握了细胞传代和培养基配制等操作技能,能够有效地处理不同类型细胞的培养需求。
在肿瘤细胞的培养中,我理解了细胞株的特性和应用,有效地控制了细胞培养的质量和稳定性。
除了技术和操作方面的提升,我也不断完善自己的理论知识,并一直关注行业动态和前沿技术。
我积极参加各类学术讲座和学术会议,结合实验室工作实际需求,不断学习和探究最新的细胞培养技术和方法。
我了解到了一系列先进的培养技术和细胞处理工具,如细胞冷冻和解冻技术、细胞分选技术等,这些技术的应用有助于提高细胞培养效率和保证细胞的生物学特性。
细胞培养毕业实习报告总结
![细胞培养毕业实习报告总结](https://img.taocdn.com/s3/m/893cac8448649b6648d7c1c708a1284ac950055c.png)
毕业实习报告总结:细胞培养首先,我要感谢我的导师和实验室的同事们,他们在我的实习期间给予了我无私的帮助和指导。
通过这次实习,我对细胞培养这一领域有了更深入的了解,也积累了宝贵的实践经验。
细胞培养是生物医学和生物技术领域中重要的实验技术,它通过模拟细胞在体内的生长环境,使细胞在体外继续生长和繁殖。
在实习期间,我学习了细胞培养的基本原理和操作技术,包括细胞的复苏、传代、胰蛋白酶消化、细胞计数、铺板等步骤。
我也了解了细胞培养中常用的仪器设备,如二氧化碳培养箱、显微镜、细胞计数仪等。
在实习过程中,我不仅掌握了细胞培养的基本技能,还参与了一些具体的实验项目。
我参与了一项关于细胞凋亡的研究,通过细胞培养技术,我成功地培养了所需细胞,并进行了凋亡实验。
通过观察细胞形态的变化和流式细胞术的分析,我得出了实验结果,并协助导师进行了数据分析和论文撰写。
这个过程中,我不仅学习了实验设计和数据分析的方法,还提高了自己的实验操作能力。
在实习期间,我也遇到了一些挑战和困难。
例如,细胞培养过程中细胞的生长速度较慢,有时需要耐心等待。
另外,细胞的复苏和传代过程中,也有一些技巧需要掌握。
通过请教导师和同事,我逐渐克服了这些困难,并取得了较好的实验结果。
通过这次实习,我不仅学到了专业知识和技能,还锻炼了自己的团队合作和沟通能力。
在实验室中,我与同事们共同合作,互相学习和帮助。
我们也定期进行实验室会议,分享实验进展和心得体会,这让我感受到了团队合作的重要性。
总之,这次细胞培养实习是一次非常宝贵的学习经历。
我不仅掌握了细胞培养的基本技能,还参与了一些具体的实验项目,并取得了较好的研究成果。
同时,我也学会了团队合作和沟通的能力。
我相信这次实习对我未来的学术研究和职业发展将产生积极的影响。
细胞培养技术员工作总结
![细胞培养技术员工作总结](https://img.taocdn.com/s3/m/78c93373178884868762caaedd3383c4bb4cb48b.png)
细胞培养技术员工作总结总结一细胞培养一.基本理论概论原代培养:也叫初代培养,指直接从体内取出的细胞、组织和器官进行的第一次的培养。
传代培养:将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养。
细胞系:原代培养物成功传代后,则称之为细胞系。
(如细胞系的生存期有限,则称之为有限细胞系;已获无限繁殖能力能持续生存的细胞系,称连续细胞系或无限细胞系。
)细胞株:通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。
培养类型:细胞培养,组织培养,器官培养。
细胞生长的方式:贴附生长,悬浮生长培养细胞的形态(形态不一定,环境改变形态可能改变):成纤维性型细胞,上皮型细胞(单层膜样生长),游走性细胞(游散生长,常有伪足跟突起)二.培养过程及要点(切记无菌操作)(一)工作环境的处理1.实验进行前,无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30-60分钟灭菌,以70%酒精擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟后,才开始实验操作。
每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。
实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%酒精擦拭无菌操作抬面。
操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作。
2.实验用品以70%酒精擦拭后才带入无菌操作台内。
实验操作应在台面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。
无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。
3.小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。
勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。
容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45?角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
吸管口切勿碰到容器瓶口4.工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。
对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台(至少Classll)。
细胞实验要点总结
![细胞实验要点总结](https://img.taocdn.com/s3/m/08e33a331611cc7931b765ce050876323012746e.png)
细胞实验要点总结引言细胞实验是研究细胞生物学和分子生物学的重要手段之一,通过对细胞的培养、处理和观察,可以深入研究细胞的结构、功能和相互作用。
本文将总结细胞实验中的关键要点,包括细胞培养、细胞处理和细胞观察等方面,以便研究人员在进行细胞实验时能够正确操作并获得可靠的结果。
一、细胞培养细胞培养是细胞实验的基础,良好的细胞培养条件对实验结果的准确性和可重复性起着至关重要的作用。
以下是细胞培养的关键要点:1. 细胞的来源选择在进行细胞实验前,需要选择合适的细胞系。
常用的细胞系有Hela细胞、293T细胞等。
选择细胞系时应考虑细胞特性、来源及适应性等因素。
2. 细胞培养基的选择细胞培养基应选择适合细胞生长和实验需要的培养基,常用的细胞培养基有DMEM、RPMI-1640等。
培养基中应添加适量的培养基补充物,如胎牛血清(FBS)、青年公牛血清等。
3. 培养条件的控制在细胞培养过程中,需要控制好温度、湿度、CO2浓度等条件。
一般细胞培养箱内的温度保持在37摄氏度,湿度保持在95%左右,CO2浓度保持在5%。
4. 无菌操作细胞培养需要在无菌条件下进行。
操作前应做好消毒,并佩戴无菌手套、面罩等防护用品。
培养器具、培养基等都应进行预处理,并确认无菌后使用。
二、细胞处理细胞处理是细胞实验中的关键步骤,包括细胞的处理、转染、感染等。
以下是细胞处理的要点:1. 细胞处理方法选择根据实验的需要,选择合适的细胞处理方法,如细胞刺激、细胞转染、细胞感染等。
不同的方法对细胞的处理方式和处理时间有不同的要求。
2. 转染试剂的优化在进行细胞转染实验时,需要优化转染试剂的浓度和转染条件。
根据实验的需要,选择适当的转染试剂,并进行试剂浓度的调优实验。
3. 细胞处理时间控制在进行细胞处理时,需要控制好处理时间,避免处理时间过长或过短对细胞产生影响。
处理时间应根据实验的需要和细胞的特性来确定,一般根据先前的文献资料或进行预实验来确定最佳处理时间。
细胞培养技术总结
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细胞的生长特点
体外培养的细胞,按其生长方式可分为贴壁型和 悬浮型。 贴壁细胞的主要代表是成纤维细胞,一般在接种 后24h内贴壁,刚开始时细胞多呈圆形,随贴 壁时间延长,逐渐伸展成梭形或多边形。传代 后的成纤维细胞12h开始贴壁,24h内完全贴壁。 上皮细胞型、游走细胞型和多形型都属于贴壁 型细胞。 悬浮型细胞包括血液白细胞和癌肿瘤细胞,不需 要附着于底物而于悬浮状态下生长良好。
四、细胞的冻存与复苏
• 细胞冻存和复苏的基本原则:慢冻快融, 可以最大限度的保存细胞活力。 • 目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作 保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的 通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分 渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从 而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。 • 冻存的细胞浓度:正常人的成纤维细胞浓 度: 5×106~1×107细胞/ml
细胞生长的三个阶段
• 潜伏期 :细胞接种后先悬浮在培养液中,此时细胞 质回缩,胞体呈圆球形,继续培养便开始贴壁, 24h内便可长满瓶壁。 • 对数生长期 :细胞增殖最旺盛的时期,随细胞数量 不断增多,生长空间逐渐减少,最后细胞互相接触 汇成一片。 • 停滞期:细胞数量达到饱和密度之后,停止增殖, 细胞数量不再增加,但仍有代谢活动,因而培养液 中的营养逐渐耗尽,代谢产物积累,此时需要分离 培养即传代,否则细胞会中毒,发生形态改变或者 脱落死亡,故传代应在细胞长满瓶壁80%的时候传 代最好。
注:细胞培养液要贮存在4℃冰箱,避免光照, 试验前放入37℃水浴中温热。
加血清的高糖培养液存放期为六个月,期间 谷氨酰胺会分解,若细胞生长不佳,可以 再添加适量谷氨酰胺。 环境条件:95%空气和5%CO2 的气体; 温度:37℃
三、细胞的消化传代
成纤维细胞生长至高密度时,须分殖至新的培养瓶中, 一般稀释比例为1:3 至1:6。 1.PBS缓冲液、0.25%的胰蛋白酶和含10%的DMEM预先 放入37℃水浴中温热; 2.倒掉培养瓶内旧的培养液,加入4~6ml PBS缓冲液洗 涤残留培养液; 3.加入2~3ml胰蛋白酶,放入37℃ CO2孵箱中消化2~3 分钟,镜检观察,如有细胞间隙变大,细胞质回缩 现象,加入培养液终止消化。 4.用吸管轻轻吹打瓶壁,使细胞脱落制成悬液,加入 离心管中,800rpm离心5min; 5.倾去上清液,加少量培养液重悬细胞,计数后调整 细胞浓度为1×107 /ml,在新的或者灭菌好的培养瓶 加入6ml左右新鲜培养液,将调整好浓度的细胞液 滴入培养瓶中,混匀,做好标记,放入37℃ CO2孵 箱培养。隔天换液。
细胞培养心得
![细胞培养心得](https://img.taocdn.com/s3/m/9c558cf90242a8956bece47c.png)
养了很久的细胞,有一些经验和体会总结一下,和大家分享一下。
关于如何把细胞养的形态很好更漂亮。
1.不同的细胞,喜欢的环境是不一样的。
这个不仅仅是说培养基的不同,还有就是细胞生长的空间密度问题。
有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。
这种一般是属于生长速度慢的细胞。
譬如内皮细胞。
而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。
尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。
并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。
如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。
所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。
2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。
这个其实是有一个方法可以改善的。
对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。
这时侯再开始正式的消化、吹打。
(巨噬细胞我们只吹打,不消化的)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。
10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。
选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml 新培养基再轻轻洗一次。
然后加入完全培养基培养。
后续观察细胞生长情况以及形态。
我称之为“二传”。
呵呵。
如果一次效果还不理想,可重复多次。
直到找到细胞完美形态。
其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。
喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。
反之亦然。
这个是我师兄发明的,谢谢他了。
细胞培养个人工作总结范文
![细胞培养个人工作总结范文](https://img.taocdn.com/s3/m/46f7b912814d2b160b4e767f5acfa1c7ab00827d.png)
细胞培养个人工作总结范文细胞培养是生物学实验中非常重要的一个环节,我在进行细胞培养工作中取得了一些经验和收获,现做以下总结:首先,在进行细胞培养实验时,我要保证实验室环境的洁净,经常对实验设备进行消毒和清洁,以防止细菌或其他有害物质的污染。
同时,在进行细胞培养时,要注意无菌操作,避免外界微生物的污染。
其次,我在培养细胞过程中,掌握了种植细胞的最佳条件和方法。
比如,在细胞培养的过程中,我严格控制培养基的pH值、营养物质的添加和细胞密度的控制,以保证细胞的健康生长和增殖。
另外,在细胞培养过程中,我也注意到了细胞的形态学变化和生长速度等指标的监测和记录,及时发现细胞的异常情况,以便及时调整培养条件。
最后,我在细胞培养实验中,还积累了大量的实践经验和技能,这些都将对我今后的科研工作产生积极的影响。
总而言之,通过细胞培养的个人工作总结,我进一步加深了对细胞培养工作的理解,提高了细胞培养技能,为今后的科研工作奠定了更加扎实的基础。
希望在今后的科研工作中,我能够不断积累经验,提高专业素养,为科学研究做出更多的贡献。
在细胞培养的工作实践中,我还学会了如何选择合适的细胞培养基和添加剂,以促进细胞的健康生长。
同时,我也学会了如何判断细胞的状态和纯度,并且掌握了一些常见的检测方法和技术,如细胞计数、细胞鉴定、细胞凋亡检测等。
这些技能不仅为我日常的细胞培养工作提供了坚实的保障,也为我未来的科研探索和学术研究奠定了基础。
在进行细胞培养的工作中,我还注意到了实验中的一些常见问题和解决方法。
比如,细胞在培养过程中出现的感染、细胞质纺锤体形成异常、细胞黏附不良等情况,这些都需要我们认真研究问题的根源,并采取相应的措施解决。
通过对实验过程中遇到的问题进行分析和总结,我得以不断提高自己的动手能力和解决问题的能力,使得我在工作中更加得心应手。
在实验的过程中,我发现了培养过程中一些可能的改进点。
比如,改进培养基的配方、优化培养条件、探索新的细胞培养技术等,这些都是我在细胞培养工作中不断努力的方向。
细胞培养实验总结总结
![细胞培养实验总结总结](https://img.taocdn.com/s3/m/6a404dd15ff7ba0d4a7302768e9951e79a896940.png)
细胞培养实验总结引言细胞培养是现代生物学研究中常用的实验技术之一,它可以模拟体内环境,为研究细胞的生理生化过程提供便利。
本文对进行的细胞培养实验进行总结,包括实验目的、实验步骤、实验结果及讨论等内容。
实验目的本次实验的主要目的是通过细胞培养技术培养和观察细胞生长情况,了解细胞培养过程中的操作步骤和注意事项。
同时,通过添加不同培养基成分,探究对细胞生长和分化的影响。
实验步骤1.准备实验器材和培养基:将所需的培养基放置在无菌工作台上,同时清洗好所有需要使用的培养器皿和器械,保持无菌状态。
2.细胞传代:将上一代培养的细胞用无菌吸管吸取,移至新的培养器皿中,加入新鲜准备好的培养基。
细胞传代的目的是保持细胞的生长状态和纯度。
3.细胞观察:将培养器皿放置在显微镜下,使用适当倍率进行观察。
检查细胞的生长状况和细胞数量是否符合预期。
4.添加培养基成分:根据实验设计,可以在相应的培养器皿中加入不同的培养基成分,例如细胞分化因子、抗生素等。
目的是观察添加不同成分后细胞的生长和分化变化。
5.细胞采集:当细胞达到一定的生长密度时,可以进行细胞采集。
用无菌吸管吸出细胞悬液,将其置于离心管中,并进行离心处理,获取细胞沉淀。
6.分析实验结果:对培养的细胞进行计数、生长速率分析等统计,观察实验结果是否符合预期。
实验结果根据实验步骤和操作要求,我们成功地进行了细胞培养实验,并获得了一系列实验结果。
首先,观察到细胞在培养基中显示出良好的生长状态。
细胞数量逐渐增多,呈现典型的细胞周期。
观察到细胞的形态变化,细胞逐渐变大,细胞贴壁生长良好。
这说明培养基的成分和培养条件对细胞的生长具有重要影响。
其次,实验中添加了不同的培养基成分,包括细胞分化因子和抗生素。
观察到加入细胞分化因子后,部分细胞呈现出明显的分化现象,形成不同的细胞类型。
而加入抗生素后,观察到细胞数量减少,并且呈现出不同程度的细胞死亡。
这说明细胞分化和细胞存活受到培养基成分的影响。
细胞培养员的工作总结
![细胞培养员的工作总结](https://img.taocdn.com/s3/m/a8e5c4775627a5e9856a561252d380eb629423a3.png)
细胞培养员的工作总结
作为一名细胞培养员,我深知这项工作的重要性和复杂性。
在细胞培养领域,
我们的工作是至关重要的,因为细胞培养是许多生物医学研究和药物开发的基础。
在这篇文章中,我将总结一下作为一名细胞培养员的工作内容和重要性。
首先,作为一名细胞培养员,我们的主要工作是负责培养和维护各种类型的细胞。
这包括从动物组织中分离细胞、培养细胞、检测细胞的健康状况以及进行细胞传代。
这些工作需要高度的技术和实验操作技能,因为细胞的生长和健康状况对于后续的实验结果至关重要。
其次,细胞培养员需要严格遵守实验室的操作规程和安全标准。
在细胞培养实
验室中,我们需要确保实验室的清洁和无菌操作,以防止细胞培养过程中的污染。
此外,我们还需要定期检查和维护实验室设备,确保其正常运行。
另外,作为一名细胞培养员,我们还需要与其他研究人员密切合作。
我们需要
根据研究项目的需求,为科研人员提供高质量的细胞培养服务,并确保实验结果的准确性和可重复性。
因此,良好的沟通和团队合作能力也是我们工作中的重要素质。
最后,作为一名细胞培养员,我们需要不断学习和更新自己的知识和技能。
细
胞培养技术是一个不断发展和更新的领域,我们需要及时了解最新的实验方法和技术,以提高我们的工作效率和实验质量。
总的来说,作为一名细胞培养员,我们的工作是非常重要和复杂的。
我们需要
具备扎实的实验操作技能、严格的实验室管理能力、良好的沟通和团队合作能力,以及不断学习和更新自己的知识和技能。
只有这样,我们才能为生物医学研究和药物开发做出更大的贡献。
细胞培养员工作总结范文(3篇)
![细胞培养员工作总结范文(3篇)](https://img.taocdn.com/s3/m/37b6e2b1370cba1aa8114431b90d6c85ed3a887d.png)
第1篇一、前言细胞培养技术作为生物技术领域的基础性技术,在医学、生物学、制药等多个领域发挥着重要作用。
作为细胞培养员,我在过去的工作中,不仅积累了丰富的实践操作经验,也深刻体会到了细胞培养技术在科研和产业中的重要性。
现将我的工作总结如下:一、工作内容1. 细胞培养操作(1)细胞复苏:按照标准操作流程,对冻存细胞进行复苏,确保细胞活力。
(2)细胞传代:根据细胞生长状态,进行细胞传代,保证细胞数量。
(3)细胞冻存:将细胞按照一定比例分装,进行冻存,以便后续实验需求。
(4)细胞培养条件调控:控制温度、湿度、二氧化碳浓度等,确保细胞生长环境稳定。
(5)细胞培养质量监控:定期检测细胞活力、生长状态等,确保细胞质量。
2. 细胞实验(1)细胞实验设计:根据实验目的,设计实验方案,包括实验材料、实验方法、实验步骤等。
(2)细胞实验操作:按照实验方案,进行细胞实验操作,包括细胞接种、培养、处理、检测等。
(3)实验数据记录与分析:对实验数据进行记录、整理、分析,得出实验结论。
3. 实验室管理(1)实验室环境维护:保持实验室干净、整洁,确保实验环境安全。
(2)实验室仪器设备维护:定期检查、保养实验仪器设备,确保其正常运行。
(3)实验室耗材管理:合理采购、使用实验室耗材,降低成本。
二、工作心得1. 严谨的工作态度细胞培养员的工作要求严谨,从细胞复苏到实验操作,每一个环节都关系到实验结果的准确性。
因此,在工作中,我始终保持严谨的态度,严格按照操作规程进行实验,确保实验数据的可靠性。
2. 持续学习,提升技能细胞培养技术不断更新,作为细胞培养员,我深知自己需要不断学习,提升自己的技能。
在工作中,我积极参加各类培训,学习新的实验技术和方法,提高自己的业务水平。
3. 团队协作,共同进步细胞培养员的工作往往需要团队协作完成,我深知团队的力量。
在工作中,我与同事们相互支持、相互学习,共同解决实验中的问题,共同提高。
4. 注重细节,追求完美细胞培养实验过程中,细节决定成败。
细胞培养员的工作总结
![细胞培养员的工作总结](https://img.taocdn.com/s3/m/466d60fd64ce0508763231126edb6f1aff00710f.png)
细胞培养员的工作总结
作为一名细胞培养员,我的工作主要是负责细胞培养和维护,以及实验室中相
关实验的支持工作。
在这个岗位上,我需要具备丰富的细胞生物学知识和实践经验,以确保细胞的健康生长和实验的顺利进行。
首先,细胞培养是实验室中非常重要的一项工作。
我需要根据实验要求选择合
适的细胞系,并进行细胞的传代和培养。
这包括细胞的分离、传代、培养基的配制和更换等工作。
在这个过程中,我需要时刻监测细胞的状态,确保它们处于最佳的生长状态,以满足实验的需要。
其次,我还需要参与实验室中的相关实验工作。
这可能包括细胞实验、蛋白质
表达和纯化等实验。
在这些实验中,我需要配合实验设计,准备实验所需的试剂和材料,并确保实验过程中细胞的健康状态。
同时,我还需要及时记录实验数据并进行分析,为实验结果的准确性提供支持。
除此之外,作为一名细胞培养员,我还需要负责实验室中的细胞库管理工作。
这包括细胞的存储、管理和更新,以及相关信息的记录和整理。
这些工作的完成,能够为实验室的日常工作提供有力的支持。
总的来说,作为一名细胞培养员,我需要具备扎实的细胞生物学知识和实践经验,以及细致认真的工作态度。
通过我的努力,能够确保实验室中的细胞培养和实验工作顺利进行,为科研工作的顺利开展提供有力的支持。
希望通过我的努力,能够为科学研究事业贡献自己的一份力量。
细胞培养年度总结范文(3篇)
![细胞培养年度总结范文(3篇)](https://img.taocdn.com/s3/m/feaa62009a6648d7c1c708a1284ac850ad02048f.png)
第1篇一、前言随着生物科学技术的不断发展,细胞培养技术在医学、生物学、药物研发等领域发挥着越来越重要的作用。
在过去的一年里,我国细胞培养技术取得了显著成果,为我国生物科技事业的发展做出了重要贡献。
现将本年度细胞培养工作总结如下:一、工作回顾1. 技术研究与创新(1)成功研发了新型细胞培养支架,提高了细胞贴壁生长能力,为细胞培养提供了更好的条件。
(2)优化了细胞培养培养基配方,提高了细胞生长速度和稳定性。
(3)创新了细胞培养方法,实现了细胞在高密度培养条件下的稳定生长。
2. 项目实施(1)承担了多项国家级、省部级细胞培养相关科研项目,取得了良好的研究成果。
(2)与国内外知名高校、科研院所建立了良好的合作关系,共同开展细胞培养技术研究。
(3)积极参与国内外学术交流活动,推广我国细胞培养技术。
3. 人才培养与团队建设(1)组织开展了细胞培养技术培训,提高了团队成员的专业技能。
(2)选拔优秀人才参加国内外学术会议,拓宽了团队成员的视野。
(3)加强团队内部沟通与协作,形成了良好的团队氛围。
二、工作亮点1. 成功培养了多种细胞系,为我国生物科技事业提供了丰富的细胞资源。
2. 在细胞培养技术领域取得了一系列创新成果,为相关研究提供了有力支持。
3. 培养了一批高素质的细胞培养技术人才,为我国生物科技事业的发展奠定了基础。
三、存在问题及改进措施1. 存在问题(1)细胞培养技术设备更新换代较慢,影响实验结果的准确性。
(2)部分细胞培养技术人才储备不足,制约了细胞培养技术的发展。
(3)细胞培养技术在国际竞争中的地位有待提高。
2. 改进措施(1)加大资金投入,更新细胞培养技术设备,提高实验水平。
(2)加强人才培养,提高细胞培养技术人才的整体素质。
(3)积极参与国际合作,提升我国细胞培养技术在国际竞争中的地位。
四、展望展望未来,细胞培养技术在医学、生物学、药物研发等领域将发挥更加重要的作用。
我们将继续努力,不断提高细胞培养技术水平,为我国生物科技事业的发展贡献力量。
细胞培养员工作总结范文
![细胞培养员工作总结范文](https://img.taocdn.com/s3/m/593fd76ecdbff121dd36a32d7375a417866fc1b2.png)
细胞培养员工作总结范文
细胞培养员工作总结。
作为一名细胞培养员,我深知这项工作的重要性和挑战。
在过去的一年里,我
不断学习和成长,积累了丰富的经验,也遇到了许多困难和挑战。
在这篇文章中,我将总结一下自己在细胞培养工作中的经验和体会。
首先,作为一名细胞培养员,我需要具备扎实的细胞生物学知识和技能。
我不
仅要了解细胞的生长和分裂规律,还要熟悉细胞培养的操作流程和注意事项。
在工作中,我时刻保持对细胞状态的关注,及时调整培养条件,确保细胞的健康生长。
其次,细胞培养工作需要高度的耐心和细心。
在培养细胞的过程中,我经常需
要进行细致的操作,比如更换培养基、观察细胞形态等。
这些工作需要我时刻保持专注,不能有丝毫马虎。
同时,我也需要有耐心,因为细胞培养是一个需要长时间的过程,不能急于求成。
另外,细胞培养工作还需要具备良好的团队合作能力。
在实验室中,我经常需
要与其他同事合作,共同完成实验任务。
我们需要相互配合,互相帮助,确保实验的顺利进行。
同时,我也要和上级领导保持良好的沟通,及时汇报工作进展和遇到的问题。
总的来说,细胞培养员是一项需要综合能力的工作,需要具备扎实的专业知识、耐心细心的工作态度,以及良好的团队合作能力。
在今后的工作中,我将继续努力学习,不断提升自己的细胞培养技能,为科研工作做出更大的贡献。
细胞培养个人工作总结
![细胞培养个人工作总结](https://img.taocdn.com/s3/m/ae9ec5b5f605cc1755270722192e453610665bc8.png)
细胞培养个人工作总结在过去的几个月中,我一直在实验室进行细胞培养工作,并取得了一些令人满意的成果。
在这段时间里,我克服了很多挑战,积累了许多宝贵的经验,我认为有必要进行一次个人工作总结。
首先,我在细胞培养方面取得了一定的技术进步。
我熟练掌握了细胞培养的基本操作流程,包括细胞传代、细胞分离和细胞冻存等技术。
我还学会了如何对细胞进行鉴定和检测,确保它们的健康和纯度。
其次,我在实验室管理和协作方面也有所提高。
我学会了如何合理安排实验时间,避免交叉污染和实验失败。
我还跟实验室的同事们建立了良好的合作关系,我们互相学习,共同进步,取得了很好的研究成果。
最后,我在实验设计和结果分析方面也有了不小的进步。
通过参与实验方案的设计和实施,我积累了丰富的实验经验,提高了自己的科研水平。
同时,我还学会了如何正确地分析实验结果,总结经验教训,不断完善自己的工作。
总的来说,这段时间的细胞培养工作对我来说是一次宝贵的经历。
通过努力学习和实践,我取得了一些成绩,也积累了一些经验。
我相信在未来的工作中,我会继续努力,不断提高自己的专业能力,为科研事业贡献我的一份力量。
在细胞培养的工作中,我还遇到了一些挑战和困难,但通过努力和不断的实践,逐渐克服了这些问题。
其中一个挑战是细胞培养的环境和条件对细胞生长的影响。
在实验室中,细胞培养需要严格控制温度、湿度和细菌的污染,以确保细胞的生长环境符合其生长的要求。
我通过认真观察和实验不断调整培养条件,最终找到了适合细胞生长的最佳条件。
另外一个挑战是细胞传代过程中的技术要求,细胞培养中需要进行细胞的传代操作,以维持细胞的生长状态。
但在传代过程中,需要非常细致和精确的操作,以避免引入细菌或其他微生物的污染,同时要确保细胞的生长和分裂情况。
在实验过程中,我通过不断的练习和借鉴他人的经验,逐渐掌握了传代操作的技术要领,取得了令人满意的效果。
在实验设计和结果分析方面,我也遇到了一些困难。
由于细胞培养实验的复杂性和实验结果的多样性,对实验结果的分析需要细致入微和严谨的态度。
细胞原代培养实验总结
![细胞原代培养实验总结](https://img.taocdn.com/s3/m/2a893f2f4531b90d6c85ec3a87c24028915f8583.png)
细胞原代培养实验总结引言细胞培养是生物科学研究中重要的技术手段之一,通过培养细胞,可以进一步研究细胞的生物学特性,了解其生长规律、代谢特征以及相应的分子机制。
本文将对细胞原代培养实验进行总结,包括实验的过程、关键步骤以及一些经验和技巧。
实验过程材料准备进行细胞原代培养实验,需要准备一系列实验材料,包括培养基、细胞培养酶、培养皿、离心管等。
在准备材料时,需要保证其纯度和质量,以确保实验的可靠性和重复性。
细胞分离首先,从组织或者细胞源中获得待培养的原代细胞。
通过消化组织或细胞样本,使用适当的酶或消化液,将细胞从组织中分离出来。
分离的细胞可以经过离心等方法获得。
细胞传代将分离得到的原代细胞进行传代是细胞培养实验中的重要步骤。
传代可以使细胞得以继续生长和繁殖,以获得足够数量的细胞用于后续实验。
传代的时机需要根据细胞的生长速度和需求进行判断,并在合适的时机进行。
细胞培养将原代细胞和传代细胞置于培养皿中,加入适量的培养基和其他必需的添加剂,建立细胞培养体系。
细胞培养过程需要一定的条件,包括适宜的温度、湿度、气体氛围等。
培养皿需要在无菌条件下操作,以避免细菌或其他微生物的污染。
鉴定和检测进行细胞原代培养实验后,需要对培养的细胞进行鉴定和检测,以验证其纯度和活性。
常用的方法包括细胞形态观察、细胞计数、细胞存活率检测、细胞周期分析等。
这些检测方法可以帮助研究者了解细胞的状态和特征,为后续的实验设计提供参考数据。
关键步骤细胞分离的优化细胞分离是细胞原代培养实验中的关键步骤之一。
为了获得较高的细胞分离效率,可以优化分离条件,如调整消化液的浓度和作用时间,选择合适的分离方法等。
此外,在分离过程中需要注意对细胞的机械刺激要尽量避免,以减少细胞的损伤和死亡。
培养基的选择和优化培养基是细胞培养实验中至关重要的因素之一,直接影响到细胞的生长和活性。
根据不同细胞类型的要求,选择适合的基础培养基,并根据实验需要添加相应的添加剂,如生长因子、血清、抗生素等。
细胞培养个人工作总结报告
![细胞培养个人工作总结报告](https://img.taocdn.com/s3/m/63f8febb846a561252d380eb6294dd88d1d23d60.png)
细胞培养个人工作总结报告一、前言在过去的一年里,我有幸参与了细胞培养实验室的工作,在此期间,我不仅掌握了细胞培养的基本技能,还对细胞生物学有了更深入的了解。
在此,我将对我在细胞培养工作中的个人总结进行汇报,以期为今后的研究和工作提供借鉴。
二、工作内容1. 细胞培养基本技能的掌握在实验室中,我先后接受了细胞培养基本技能的培训,包括细胞的复苏、传代、悬浮、贴壁生长等。
通过对不同细胞系的培养,我熟练掌握了细胞培养的操作流程,并学会了使用细胞培养箱、显微镜等实验设备。
2. 细胞生物学实验操作在细胞培养的基础上,我参与了多项细胞生物学实验,如细胞增殖实验、细胞周期检测、 Western blot等。
通过这些实验,我对细胞生物学的研究方法有了更深入的了解,为今后的研究打下了坚实的基础。
3. 团队协作与交流在实验室工作中,我充分体会到团队协作的重要性。
与导师、同学间的密切配合,使我在解决问题和分享成果时取得了很大的进步。
此外,我还积极参加实验室的学术交流活动,拓宽了自己的学术视野。
三、工作收获1. 技能提升通过细胞培养工作的实践,我熟练掌握了细胞培养的基本技能,提高了自己的实验操作能力。
同时,我也学会了如何查阅文献、设计实验、分析数据,为今后的研究工作奠定了基础。
2. 学术成长在实验室的工作中,我参与了多项细胞生物学实验,积累了丰富的实验经验。
此外,我还学会了如何撰写实验报告、发表学术论文,为今后的学术生涯打下了基础。
3. 团队协作能力的培养在实验室中,我与导师、同学紧密合作,共同推进实验项目的进展。
通过团队协作,我学会了如何与他人沟通、解决问题,提高了自己的团队协作能力。
四、工作展望在今后的工作中,我将继续深入研究细胞生物学领域,提高自己的专业素养。
同时,我将充分发挥团队协作精神,与他人共同推进实验室的研究工作。
此外,我还计划积极参与国内外学术交流,拓宽自己的学术视野,为我国细胞生物学研究贡献力量。
五、结语通过一年的细胞培养工作,我不仅在技能和学术上取得了显著的进步,还培养了团队协作能力。
细胞培养员的工作总结
![细胞培养员的工作总结](https://img.taocdn.com/s3/m/b01e9a45df80d4d8d15abe23482fb4daa58d1dc4.png)
细胞培养员的工作总结
作为一名细胞培养员,我的工作涉及到细胞培养的各个方面,包括细胞的培养、传代、检测和记录等。
在这个过程中,我需要严格遵守实验室的操作规程,确保细胞培养的质量和稳定性。
首先,我需要准备培养基和其他所需的试剂和材料。
然后,我会从冷冻保存的
细胞中解冻并进行传代,以确保细胞的健康和活力。
在培养的过程中,我需要定期观察细胞的形态和生长状态,及时调整培养条件,以保证细胞的正常生长和增殖。
除了细胞的培养,我还需要进行细胞的检测和分析,包括细胞的纯度、活性和
稳定性等。
这些检测需要使用各种细胞生物学和分子生物学的实验技术,如细胞计数、细胞染色、PCR等。
通过这些检测,我可以及时发现细胞的异常情况,并采
取相应的措施进行处理。
在工作中,我也需要做好实验记录和数据整理工作,确保实验数据的准确性和
可靠性。
同时,我也需要与其他实验人员和研究人员进行合作,共同完成科研项目和实验任务。
总的来说,作为一名细胞培养员,我需要具备扎实的细胞生物学和实验技术的
知识,严格遵守实验室的操作规程,细心观察和记录实验数据,保证实验的顺利进行。
同时,我也需要具备团队合作的精神,与其他实验人员和研究人员进行良好的沟通和合作,共同完成科研任务。
希望通过我的努力,能为科学研究和医学发展做出一些贡献。
细胞培养的心得体会
![细胞培养的心得体会](https://img.taocdn.com/s3/m/176119fd998fcc22bcd10d5f.png)
篇一:细胞培养心得1、寄运细胞或者接收细胞,都要做好充足的准备;如果是让其它实验室寄运细胞,或者寄给别人细胞,细胞应该如何处理是主要考虑的问题。
假设细胞在途中要经过48小时,那么可以待细胞长到50%的密度时处理细胞,即将细胞培养瓶内加满培养液,拧紧瓶盖,用封口膜封紧瓶口;然后将培养瓶放进泡沫盒,用纸或泡沫将盒内空间填满,使培养瓶不能随意移动。
因此要确定准备好以下物品:透气的细胞培养瓶;封口膜;足量的培养液;放细胞培养瓶的泡沫盒及填充物;除了细胞的处理,还要注意以下几点:1)提前跟快递公司人员联系,要上门取货(大多快递公司都可以,顺丰确实算是好些;近来觉得韵达速度也很快)2)时间安排(细胞处理尽量安排在下午,因为快递公司一般来说都是晚上统一发货,要是早晨处理细胞交给快递公司,细胞还没上路呢,就已经在培养箱外待了一天);1)细胞的铺板:以96孔板为例,做细胞实验的同学看文献可能注意到,有较多的文献中提到细胞接种数量是5000个/孔;最初我也是按照这个数量来铺板的,实际上这个接种数量偏高;假设给药时间是48小时,发现空白对照孔中会有细胞无法贴壁,因为太满了,被挤出来了。
如此,则会因为接种密度原因,而不能准确反映细胞的正常生长情况及给药组作用情况。
2)给药:对于水溶性药物就不讲了,只讲难溶于水,而且虽然溶于dmso,但向dmso加水后也会析出的药物;有人是这样做的,在ep管中用dmso溶解药物作为母液,然后用细胞培养液将母液梯度稀释成各个浓度,药物有析出,成结晶了,可能都沉了,严重不均一了,这浓度就没法衡量了;用培养液,在ep管中用dmso梯度稀释药物成各个梯度浓度,然后直接加到含培养液的96孔中,假设96孔中培养液为197微升,那么加药的体积只能是3微升或者小于3微升。
我觉得可以这么做,操作会更麻烦,难度上稍大了点,但不是不能做。
有些药物常温下难溶于水,可能加热溶解性会很好,由于专业涉及面不同,很多人会忽略这方面。
细胞培养大总结范文
![细胞培养大总结范文](https://img.taocdn.com/s3/m/4459627a366baf1ffc4ffe4733687e21af45ff89.png)
细胞培养大总结范文细胞培养是一种在体外条件下培育和繁殖细胞的技术,它已成为生物学、医学和药物研发的重要工具。
通过细胞培养,研究人员可以对细胞的生理活动、生长和分化等过程进行研究。
在本文中,我们将对细胞培养的步骤、技术和应用进行总结。
细胞培养的步骤主要包括:细胞准备、培养液制备、细胞种植、培养和观察。
首先,研究人员从动物或植物组织中获得细胞样本,并通过离心等方法将细胞分离出来。
然后,培养基是细胞培养中必不可少的组成部分,它提供了细胞所需的营养物质和环境因子。
接下来,将细胞种植在预先准备好的培养皿或培养瓶中,在适当的温度和湿度条件下进行培养。
在培养的过程中,需要定期更换培养基,以保持细胞的正常生长和代谢。
最后,通过显微镜或其他方法对细胞进行观察和分析。
细胞培养中使用的培养基通常包括营养基、生长因子、抗生素和血清。
营养基是培养基中提供能量和物质的主要成分,常见的营养基有DMEM、RPMI-1640和MEM等。
生长因子是指能促进细胞增殖和分化的蛋白质,例如表皮生长因子(EGF)和基本纤维生长因子(bFGF)。
抗生素的添加有助于防止细菌和真菌的污染。
血清是一种重要的培养基补充物,其中含有细胞黏附蛋白、生长因子和其他生物活性物质。
细胞培养的技术包括原代培养、细胞系培养和细胞凋亡检测。
原代培养是从组织中直接分离的细胞进行的短期培养,通常使用酶消化的方法分离细胞,并将其种植在培养皿中。
细胞系培养是指长期培养和传代的细胞,如HEK293和HeLa细胞系。
细胞系培养可以提供大量的细胞用于实验和研究。
细胞凋亡是一种程序性细胞死亡,通过检测DNA片段化和细胞膜外翻等指标可以判断细胞是否发生凋亡。
细胞培养在多个领域中得到了广泛的应用。
在基础研究中,细胞培养可以用于探索细胞生理学、分子生物学和免疫学等领域。
研究人员可以通过调节培养条件和添加适当的生长因子来模拟体内环境,研究细胞的生长、分化和转化等过程。
在药物研发中,细胞培养可以用于药物筛选和毒理学研究。
细胞培养_年度总结范文(3篇)
![细胞培养_年度总结范文(3篇)](https://img.taocdn.com/s3/m/6de20f79fbd6195f312b3169a45177232f60e42b.png)
第1篇一、前言在过去的一年里,我国细胞培养技术取得了显著的进步,不仅在基础研究方面取得了丰硕成果,而且在临床应用上也取得了重要突破。
本年度总结旨在回顾过去一年的工作,总结经验,分析不足,为下一年的工作提供参考。
二、年度工作回顾(一)基础研究方面1. 细胞培养技术优化与创新本年度,我们针对传统细胞培养技术存在的不足,开展了一系列的优化与创新工作。
主要包括:(1)开发新型细胞培养基,提高细胞生长速度和活力;(2)改进细胞培养设备,提高细胞培养的稳定性和安全性;(3)优化细胞传代方法,降低细胞污染风险。
2. 细胞模型构建与应用本年度,我们成功构建了多种细胞模型,包括肿瘤细胞模型、神经细胞模型、心肌细胞模型等。
这些细胞模型在基础研究、药物筛选、疾病机制研究等方面发挥了重要作用。
3. 细胞培养相关基础研究本年度,我们围绕细胞培养技术开展了多项基础研究,包括细胞信号传导、细胞周期调控、细胞凋亡等。
这些研究成果为细胞培养技术的进一步发展奠定了基础。
(二)临床应用方面1. 细胞治疗技术发展本年度,我国细胞治疗技术取得了显著进展,包括:(1)干细胞移植治疗血液系统疾病;(2)间充质干细胞治疗骨关节疾病;(3)免疫细胞治疗肿瘤。
2. 细胞治疗临床试验本年度,我们积极参与了多项细胞治疗临床试验,包括干细胞移植、免疫细胞治疗等。
这些临床试验为细胞治疗技术的临床应用提供了有力支持。
(三)人才培养与交流1. 人才培养本年度,我们培养了一大批细胞培养领域的专业人才,包括本科生、研究生和博士后。
这些人才为我国细胞培养技术的发展提供了有力支持。
2. 学术交流本年度,我们积极参加国内外学术交流活动,与国内外同行分享研究成果,拓展学术视野。
三、年度工作亮点(一)研究成果丰硕本年度,我们共发表高水平论文50余篇,其中SCI论文30余篇。
这些研究成果为我国细胞培养技术的发展提供了有力支持。
(二)人才培养成果显著本年度,我们培养的本科生、研究生和博士后在国内外学术竞赛中取得了优异成绩。
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细胞培养学习总结
--贴壁细胞培养技术
一、细胞培养一般流程:
㈠、复苏:
1、实验前做好相关准备工作(水浴锅37℃;超净工作台的无菌环境;准备
好实验相关仪器和试剂)。
2、把冻存管从液氮灌中取出来,立即投入37℃(≦40℃)水浴锅中,晃动
冻存管,使液体在1min以内全部融解(关键步骤),用酒精棉擦拭其外壁,放到超净工作台里。
3、把上述细胞悬液吸到15ml的离心管中,加入适量培养基,(用培养基把
冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来,转移时不要直接倒,以防污染),1000转离心1-3min(可根据所培养细胞调整)。
4、吸弃上清液,加适量培养基把细胞吹散成细胞悬液,转移到培养瓶中,
加适量完全培养基(常为覆盖培养瓶底面即可)。
5、标好细胞种类和日期、培养人名字等,放到CO2培养箱中培养,细胞贴
壁后再换培养基。
6、注意观察细胞生长状态,及时换液或传代。
㈡、换液:
1、实验前做好相关准备工作(超净工作台的无菌环境;准备好实验相关仪
器和试剂)。
2、取出培养瓶,用75%酒精消毒后放入超净实验台。
3、吸弃旧培养液,用适量(如2ml)PBS(磷酸盐缓冲液)清洗细胞(可根
据细胞状态洗1-2遍,一般从没有细胞的那一侧倒掉)。
4、加入适量新鲜完全培养基,放回培养箱继续培养。
㈢、传代:
1、实验前做好相关准备工作(超净工作台的无菌环境;准备好实验相关仪
器和试剂)。
2、取出培养瓶,用75%酒精消毒后放入超净实验台。
3、吸弃旧培养液,用适量(如2ml)PBS(磷酸盐缓冲液)清洗细胞(可根
据细胞状态洗1-2遍)。
(前面步骤同换液)
4、加适当的胰蛋白酶(0.05%)(能覆盖细胞就行),放入细胞培养箱中消化
1-2min(根据不同类型细胞而定)。
5、细胞都变圆后加如入等体积的完全培养基终止消化。
6、用滴管缓慢吹打细胞,使细胞都悬浮起来成细胞悬液,吸到15ml的离心
管中,1000转离心1-3min。
7、倒掉上清液,加1-2ml完全培养基,将细胞吹散成单个细胞。
8、根据细胞浓度把细胞传到几个培养瓶中,加入适量完全培养基(一般癌
细胞一个培养瓶分2个),放回培养箱中继续培养。
㈣、冻存:
1、实验前做好相关准备工作(预先配置好冻存液放入4℃保存,常为
10%DMSO+90%血清,配制过程中加入DMSO要缓慢,且边滴边摇;超净工作台的无菌环境;准备好实验相关仪器和试剂)。
2、取出培养瓶,用75%酒精消毒后放入超净实验台。
3、吸弃旧培养液,用适量(如2ml)PBS(磷酸盐缓冲液)清洗细胞(可根
据细胞状态洗1-2遍)。
4、加适当的胰蛋白酶(0.05%)(能覆盖细胞就行),放入细胞培养箱中消化
1-2min(根据不同类型细胞而定)。
5、细胞都变圆后加入等体积的完全培养基终止消化。
6、用滴管缓慢吹打细胞,把细胞都悬浮起来成细胞悬液,吸到15ml的离心
管中,1000转离心1-3min。
(同细胞传代中步骤)
7、倒掉上清液,加入预制的冻存液制成细胞悬液,分装到灭菌的冻存管中,
(注意不要加满,预留其结冰后的空间,一般1.8ml的冻存管加入≦1.5ml 的细胞悬液)。
8、写明细胞种类、冻存日期。
放入4℃冰箱30min,-20℃冰箱30min,-80℃
冰箱过夜,最后放入液氮罐中保存。
一、细胞培养注意事项:
注意无菌操作,以防细胞污染,定期检查培养箱、超净台,按时观察细
胞状态,实验过程中注意保护自身安全。
㈠、注意无菌操作
1、实验进行前,超净工作台以紫外灯照射30-60 min灭菌,并开启操
作台风扇运转30min后,才开始实验操作。
2、实验进行前,实验人员应穿戴好实验服,口罩,手套。
3、所有拿进实验台的物品都应用75%酒精消毒。
4、在酒精灯10cm内进行操作,开盖或封盖前应用酒精灯灼烧灭菌,
但注意对有滤膜的培养瓶不应灼烧,以免细胞污染。
5、每次尽量只处理一个细胞株,以免发生细胞间污染。
6、实验结束后,处理好废液,用75%酒精擦净台面,开启紫外,照射
5min以上。
㈡、定期检查项目
1、培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水,
每周更换)。
2、CO2钢瓶之CO2压力。
3、超净工作台内之气流压力,定期更换紫外线灯管及HEPA (高效空
气净化)过滤膜,预滤网(300 小时/预滤网,3000 小时/HEPA)。
㈢、观察细胞状态:
1、正常状态下,细胞贴壁生长,当培养液颜色变淡时,应换液。
对于
培养基中添加酚红指示剂的,若紫色变深,则应检查CO2供应,若
颜色变黄,则可能是换液或传代频率太低。
2、当培养瓶中细胞覆盖率达80%以上时,应传代。
3、若发现很浑浊,且有许多漂浮死细胞时,可能细胞被污染,应丢弃
被污染细胞并对培养箱进行灭菌操作。
二、所需设备
CO2培养箱(最好是内置紫外灯);超净工作台;倒置显微镜;液氮罐;
低速离心机;恒温水浴锅;冰箱(-80℃)、(4℃及-20℃);高压灭菌锅;
电热鼓风干燥箱;
三、所需仪器及试剂及易耗品
1、仪器:培养瓶(最好是带滤膜);酸缸;滴管;胶头;离心管(15ml、
50ml);酒精灯;打火机;废液缸(烧杯500ml);冻存管;封口膜;
镊子;标记笔;棉花;
2、试剂:基础培养基(RTMI-1640培养基;MEM培养基;DMEN培养
基;无血清培养基等);血清(小牛血清、胎牛血清、马血清等);
胰酶(trypsin-EDTA solution);PBS(磷酸缓冲盐溶液);DMSO(二
甲基亚砜);双抗(青霉素钠+链霉素);
3、易耗品:手套(透明手套;橡胶手套);口罩;(另白大褂)
四、仪器回收利用:
滴管、离心管清洗流程,
1、滴管清洗过程:
酸泡(1星期)--清水冲洗(20遍)--超声洗涤20min(2遍)--去离
子水冲洗(10遍以上)--晾干—烘箱干燥—高压灭菌—烘箱干燥
2、离心管清洗过程
洗衣粉水泡(1星期)--清水冲洗(10遍以上)--去离子水冲洗(10
遍以上)--晾干—烘箱干燥—高压灭菌—烘箱干燥。