斐林试剂与双缩脲试剂的使用释疑
探究斐林试剂和双缩脲试剂的使用条件
实验材料：新鲜去皮的梨汁、生豆浆、熟豆浆。 实验试剂：斐林试剂 （甲液：质量浓度 0.1g/mL NaOH 溶液；乙液：质量浓度 0.05 g/mL CuSO4 溶液）、 双缩脲试剂（A 液：质量浓度 0.1 g/mL NaOH 溶液；B 液：质量浓度 0.01 g/mL CuSO4 溶液）、质量分数 8%的 盐酸、蒸馏水等。 器具：试管、试管架、试管夹、烧杯、量筒、滴管、酒 精灯、三脚架、石棉网、打火机等。 4 方法步骤及现象（表 1、表 2）
用顺序对实验结果有一定影响，但都能出现砖红色沉 淀，可能是待测液中的有机酸会中和一些 NaOH，使 产生的 Cu(OH)2 不足，所以 2 号试管砖红色沉淀会少 些。1、3 号试管现象说明斐林试剂实为新制的 Cu(OH)2 悬浊液，不需提供酸性环境，加入盐酸会将新的 Cu (OH)2 分解，致使还原糖无法和斐林试剂反应，所 以无砖红色沉淀。从 1、4 号试管现象可知，加热方式 不同对实验结果有一定影响，水浴加热比直接用酒精 灯加热更理想，受热更均匀，也更安全。1、5 号试管说 明只加乙液实验无法进行，即还原糖不能单纯的与 Cu2+发生反应并生成砖红色沉淀。
→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→
表 3 不同浓度的 KNO3 溶液质壁分离及复原情况
KNO3 溶液浓 度/g·mL-1
0.01
0.03
0.05
0.07
引流法难易 易
易
程度
易
易
质壁分离程 不分离 分离较明显 度
分离明显 分离明 显
斐林试剂和双缩脲氏试剂过程
斐林试剂和双缩脲氏试剂过程
斐林试剂和双缩脲氏试剂都是生物化学实验中常用的试剂，它们分别用于检测可溶性还原糖和蛋白质。
斐林试剂是由氢氧化钠和硫酸铜组成的混合溶液，使用时需要现配现用。
检测可溶性还原糖时，将斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入待测样液，水浴加热后出现砖红色沉淀。
这个反应需要加热，有时不加热也会发生反应。
双缩脲氏试剂是由氢氧化钠和硫酸铜组成的另一种混合溶液，用于检测蛋白质或多肽。
使用时，先加入双缩脲试剂A液（氢氧化钠溶液）1mL，摇匀后再加入双缩脲试剂B液（硫酸铜溶液）3~4滴，摇匀后观察现象。
这个反应不需要加热，只要摇匀即可。
如果出现紫色反应，就说明有蛋白质或多肽存在。
两种试剂的成分和使用方法不同，需要注意区分。
斐林试剂和双缩脲氏试剂都是用来检测生物组织中特定化合物的存在，是生物化学实验中常用的重要工具。
斐林试剂和双缩脲试剂区别
斐林试剂和双缩脲试剂区别斐林试剂和双缩脲试剂，这两个名字听上去挺专业的，但其实它们在生物化学实验中扮演着不同的角色。
今天咱们就来聊聊这俩试剂的区别，顺便看看它们各自的用途，保证让你听了之后对它们有个更清晰的认识。
一、斐林试剂1.1 介绍斐林试剂，乍一听可能觉得是某种神秘的药水，其实它是用来检测还原糖的。
简单来说，就是可以帮助我们找到像葡萄糖、果糖这样的糖分。
这个试剂的成分主要是铜离子，跟还原糖反应后，会变成红色沉淀。
你能想象那种鲜艳的红色吗？简直像是实验室里的小火焰，瞬间点亮了整个试管！1.2 反应原理在实验中，我们把斐林试剂和样品混合后加热，糖分会把铜离子还原成一氧化铜，从而形成红色沉淀。
这就是为什么我们说它可以检测还原糖。
真的是一目了然，一看就明白！而且反应非常迅速，让人有种“哇，这下可真是找到了”的感觉。
二、双缩脲试剂2.1 介绍再说说双缩脲试剂。
这可是个大名鼎鼎的家伙，主要用来检测蛋白质的存在。
你没听错，蛋白质！无论是肉类、豆类，还是奶制品，里面都有它的身影。
这个试剂的原理可比斐林试剂复杂些，但也并不是难以理解。
2.2 反应原理双缩脲试剂中含有铜离子，当它遇到蛋白质的时候，铜离子会跟蛋白质中的肽键结合，从而形成一种紫色复合物。
你可以想象一下，试管里的液体从清澈变成了优雅的紫色，瞬间增添了几分神秘感。
这种变化就像魔法一样，令人惊叹。
2.3 检测过程在检测的过程中，首先将样品和双缩脲试剂混合，轻轻摇晃，再静置一会儿。
然后，你就能看到颜色的变化。
这种直观的反应不仅方便快捷，还让人感觉实验充满了乐趣，仿佛每一次操作都在为你揭示一个秘密。
三、二者的区别3.1 检测对象斐林试剂专注于还原糖，而双缩脲试剂则是蛋白质的“侦探”。
它们的工作性质截然不同，一个是甜蜜的糖分，一个是构成生命的蛋白质。
这样一来，在实验室中，我们需要根据不同的目标选择不同的试剂，像是挑选合适的工具来完成一项工作。
3.2 颜色变化除了检测对象，颜色变化也是两者最大的区别。
浅议斐林试剂与双缩脲试剂的使用
浅议斐林试剂与双缩脲试剂的使用斐林试剂和双缩脲试剂是两种常见的生物试剂，它们在化学反应和生物实验中发挥着重要的作用。
以下是关于这两种试剂的详细讨论：一、斐林试剂斐林试剂是由硫酸铜溶液和氢氧化钠溶液混合而成的，它是一种氧化还原反应指示剂。
在斐林试剂中，硫酸铜溶液中的铜离子被还原成亚铜离子，而氢氧化钠溶液中的氢氧根离子被氧化成氢氧根离子。
当斐林试剂与醛基或酮基反应时，它们会发生氧化还原反应，产生砖红色沉淀。
这个反应可以用来检测醛基或酮基的存在。
斐林试剂的使用方法是将斐林试剂滴加到待测溶液中，然后加热至沸腾。
如果待测溶液中存在醛基或酮基，斐林试剂就会与其发生反应，产生砖红色沉淀。
需要注意的是，斐林试剂只能用来检测醛基或酮基的存在，不能检测其他类型的有机化合物。
二、双缩脲试剂双缩脲试剂是一种用来检测蛋白质的生物试剂。
它由氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液混合而成。
当双缩脲试剂与蛋白质反应时，会形成紫色络合物。
这个反应可以用来检测蛋白质的存在。
双缩脲试剂的使用方法是将双缩脲试剂滴加到待测溶液中，然后搅拌均匀。
如果待测溶液中存在蛋白质，双缩脲试剂就会与其发生反应，形成紫色络合物。
需要注意的是，双缩脲试剂只能用来检测蛋白质的存在，不能检测其他类型的有机化合物。
三、斐林试剂和双缩脲试剂的比较斐林试剂和双缩脲试剂都是生物实验中常用的试剂，它们在检测有机化合物方面有着不同的应用。
斐林试剂主要用于检测醛基或酮基的存在，而双缩脲试剂主要用于检测蛋白质的存在。
此外，斐林试剂和双缩脲试剂的成分也有所不同，斐林试剂主要由硫酸铜溶液和氢氧化钠溶液混合而成，而双缩脲试剂主要由氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液混合而成。
四、使用斐林试剂和双缩脲试剂的注意事项在使用斐林试剂和双缩脲试剂时，需要注意以下几点：1.斐林试剂和双缩脲试剂都有一定的腐蚀性，使用时要注意安全。
2.斐林试剂和双缩脲试剂的成分中含有重金属离子，如果误食或长时间接触可能会对人体健康造成影响，因此在使用时要避免直接接触皮肤或吸入蒸汽。
斐林试剂和双缩脲试剂区别
斐林试剂和双缩脲试剂区别
斐林试剂和双缩脲试剂都是化学试剂，常用于检测蛋白质和肽类等化合物。
它们的作用原理和使用方法有所不同，具体区别如下：
1. 作用原理不同
斐林试剂是一种酸性试剂，它可以与肽键中的氨基酸残基中的酰胺键发生反应，生成紫色的复合物。
这种复合物可以吸收特定波长的紫外线，因此可以用于检测蛋白质和肽类等化合物的存在。
双缩脲试剂则是一种氧化剂，它可以氧化肽键中的二肽键，生成紫色的氧化产物。
这种产物也可以吸收特定波长的紫外线，因此可以用于检测蛋白质和肽类等化合物的存在。
2. 使用方法不同
斐林试剂的使用方法比较简单，只需要将待测样品与试剂混合后，观察是否生成紫色复合物即可。
如果出现紫色，则说明样品中含有蛋白质或肽类等化合物。
双缩脲试剂的使用方法则比较繁琐，需要先将待测样品加入到缩脲试剂中，然后加入氢氧化钠溶液使其碱性增加，最后再加入氯化铜溶液进行氧化反应。
反应完
成后，需要用氢氧化钠溶液调节溶液的酸碱度，使其pH值在7左右，然后再用紫外分光光度计测定吸光度值，从而判断样品中是否含有蛋白质或肽类等化合物。
综上所述，斐林试剂和双缩脲试剂虽然都可以用于检测蛋白质和肽类等化合物，但其作用原理和使用方法有所不同。
在实际应用中，需要根据具体的实验要求和样品特性选择合适的试剂进行检测。
斐林试剂和双缩脲试剂使用方法
斐林试剂和双缩脲试剂使用方法斐林试剂是一种常用的化学试剂，可以用于检测还原糖和某些还原物质的存在。
使用方法：1. 准备样品：将待测样品溶解或悬浮在水中，并确保样品中没有明显的杂质。
2. 取少量样品：使用滴管或移液器取一定量的样品，通常为2-3滴。
3. 加入斐林试剂：将取得的样品滴加到一片白色的反应杯或试管中，然后滴加2-3滴斐林试剂。
4. 搅拌混合：用玻璃棒或试管摇杆轻轻搅拌混合样品和试剂，确保均匀混合。
5. 观察颜色变化：观察样品溶液的颜色变化。
正常情况下，如果样品中存在还原糖或还原物质，溶液颜色会变为深蓝色或蓝紫色。
双缩脲试剂也是一种常用的化学试剂，用于测定蛋白质的浓度。
使用方法：1. 准备标准曲线：使用已知浓度的蛋白质制备一系列浓度不同的蛋白质标准溶液，并将其分别标记。
2. 取少量标准溶液：使用移液器将一定量的标准蛋白质溶液移至白色的反应杯或试管中。
3. 加入双缩脲试剂：向标准溶液中滴加2-3滴双缩脲试剂。
4. 搅拌混合：使用玻璃棒或试管摇杆轻轻搅拌混合样品和试剂，确保均匀混合。
5. 显色：将反应杯或试管放置在恒温槽中，加热反应溶液至一定温度（通常为60-70°C），保持一定时间（通常为15-30分钟），使显色反应充分进行。
6. 冷却：将反应杯或试管取出恒温槽，放置冷却至室温。
7. 吸光度测量：使用分光光度计将样品的吸光度测量于一定波长下（通常为562nm）。
8. 绘制标准曲线：将不同浓度标准溶液的吸光度值作为纵坐标，对应的浓度值作为横坐标，绘制标准曲线。
9. 测定样品浓度：使用同样的方法和条件，测定待测样品的吸光度，并根据标准曲线确定样品中蛋白质的浓度。
斐林试剂和双缩脲试剂使用方法
斐林试剂和双缩脲试剂使用方法下载温馨提示：该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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再谈斐林试剂和双缩脲试剂的应用
乳 白 色 变 紫 色 乳 白 色 变 紫 色 紫 色
５ 号
６ 号 ７ 号
８ 号
２ｍＬ ０１ｇｍ Ｏ ． ／ Ｌ Ｎａ Ｈ
４ ０叭 ｇｍＬ Ｃ Ｓ 滴 ． ／ ｕ Ｏ ２ ｍＬ０ １ｇｍＬ Ｎ Ｏ ． ／ ａＨ
颜 色 变 化 砖 红 色
砖 红 色 砖 红 色 砖 红 色 砖 红 色
６ 号 ７ 号
２ｍＬ苹 果 汁 ２ｍＬ苹 果 汁
２ ｍＬ０ １ｇｍＬ Ｎ Ｏ ． ／ ａＨ ２ｍＬ ０ １ｇｍＬ Ｎ ＯＨ ． ／ ａ
４ ００ ／ ｕ Ｏ 滴 ．５ｇｍＬ Ｃ Ｓ ４ ．１ｇｍＬ Ｃ Ｓ Ｎ ＂ ００ ／ ｕ Ｏ
加 热
加 热
砖 红 色
不 变
２ ｍＬ ０ １ ｇｍＬ ＨＣ ． ／ １
８号 试 管 ： ２ｍＬ ０１ｇｍＬ的 Ｎ Ｏ 与 ２ｍＬ００ ／ 将 ． ／ ａＨ ５ｇｍＬ的 Ｃ Ｓ 合 ， 夜 后 颜 色 变 成 黑 色 （ 化 生 成 了 氧 化 铜 Ｃ Ｏ） 分 别 在 １ 、４ｈ、 ｕＯ 混 过 氧 ｕ ， ２ｈ ２ ３ ４ ６ ７ ６ｈ、８ｈ、０ｈ、２ｈ将 其 与 苹 果 汁加 热 ， 能 产 生 砖 红 色 沉 淀 。 都
重 要 内容 ． 培 养 学 生 动 手 能 力 、 造 能 力 、 造 性 思 是 创 创 维 和 发 散 性思 维 的重 要 手 段 。教 师 应尽 可 能 多地 让 学
察 、 验 操 作 、 学 思 维 等方 面 能力 的 发 展 ， 能 促 进 实 科 也 学 生 尊 重事 实 ． 持 真理 的科 学 态 度 的形 成 。 坚 连 续 ３年 ． 者 带 领 学 生 开 展 了 以 “ 林 试 剂 和 笔 斐
第 ２次 加 人 物 ２ｍＬ００ ／ ｕ Ｏ ．５ ｇｍＬ Ｃ Ｓ ４
斐林试剂和双缩脲试剂的使用探讨
斐林试剂和双缩脲试剂的使用探讨
钟琼宛;陈健辉
【期刊名称】《中学生物教学》
【年(卷),期】2024()2
【摘要】基于斐林试剂检测还原糖和双缩脲试剂检测蛋白质的反应原理,按照不同的配方与反应条件设置不同实验。
结果表明:在可溶性还原糖的鉴定实验中,出现砖红色沉淀的时间与水浴温度、水浴时间以及可溶性还原糖溶液的浓度均有关系;与配方中是否有酒石酸钾钠没有明显差异。
在双缩脲试剂鉴定蛋白质实验中,在碱性条件下,产生紫色的深浅与Cu2+含量有关。
【总页数】3页(P70-72)
【作者】钟琼宛;陈健辉
【作者单位】广州大学生命科学学院
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
【相关文献】
1.图示法在生物教学中的应用--图示法区别斐林试剂和双缩脲试剂的使用方法
2.“斐林试剂和双缩脲试剂”使用的再研究
3.探究斐林试剂和双缩脲试剂的使用条件
4.斐林试剂与双缩脲试剂的使用释疑
5.斐林试剂、双缩脲试剂使用原理与思考
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斐林试剂和双缩脲试剂区别
斐林试剂战单缩脲试剂辨别之阳早格格创做1、试剂的浓度战配造要领分歧4CuSO 溶液.使用前临时配造，正在2mL 的甲液中滴进4滴～5滴乙液，振荡使混同匀称后即可.4CuSO 溶液.分别配造佳A 液战B 液即可.2、试剂的效率战审定本理分歧斐林试剂：效率：可审定可溶性还本糖.本理：甲液战乙液混同后爆收2)OH (Cu 重淀，2)OH (Cu 取含醛基（—CHO ）的可溶性还本糖，正在加热条件下反应，将2)OH (Cu 还本为砖黑色的O Cu 2重淀.单缩脲试剂：效率：可审定蛋黑量溶液.本理：正在碱性溶液（NaOH ）中，单缩脲（22CONH NH NCO H --）能取+2Cu 反应，产死紫色络合物.由于蛋黑量分子中含有许多取单缩脲结构相似的肽键（—CO —NH —），果此，蛋黑量皆不妨取单缩脲试剂爆收反应而使溶液浮现紫色.3、试剂的使用要领分歧斐林试剂：使用时现配现用，要火浴加热.如果斐林试剂搁置一段时间，果2)Cu重淀正在溶液底部而无法使用.(OH使用时，甲液战乙液没有身分别加进到待测液中，可则，待测液（苹果构造样液）中的有机酸会中战NaOH，使爆收的2)Cu缺累而效率审定.(OH单缩脲试剂：使用时，单缩脲试剂A液战单缩脲试剂B液要分别先后加进到待测液中，没有需要加热.单缩脲试剂A液战单缩脲试剂B液没有成以混同后再加进待测液.如先混同，则会爆收2)Cu重淀而无 2Cu爆收.加进的单缩脲试OH(剂B液（4Cu( CuSO）也没有克没有及过量，可则蓝色的2)OH 会覆盖爆收的紫色.4、反应中出现的颜色分歧斐林试剂审定可溶性还本糖，出现的颜色变更为：浅蓝色→棕色→砖黑色.待测液加进刚刚配造的斐林试剂，溶液是浅蓝色；火浴加热后，一部分2)CuCu被还本为砖黑色的OOH(2，溶液浮现二种颜色的混同色——棕色；随着反应的完毕，2)Cu局部OH(被还本为OCu2，溶液呈砖黑色.单缩脲试剂审定蛋黑量，出现的颜色变更为：无色→浅蓝色→紫色.加进单缩脲试剂A液，溶液无色；再加进单缩脲试剂B液，有 2Cu产死，溶液呈浅蓝色；振荡匀称后，反应完毕，溶液呈紫色.。
斐林试剂和双缩脲试剂区别
斐林试剂和双缩脲试剂区别斐林试剂和双缩脲试剂是常见的有机合成试剂，它们在有机化学合成过程中起着重要的作用。
虽然这两种试剂在名称上看起来相似，但它们在性质和应用方面存在一些区别。
下面将详细介绍斐林试剂和双缩脲试剂的区别。
1. 斐林试剂：斐林试剂是一种常用的有机合成试剂，化学名称为三氟乙酸溴化物（bromodifluoroacetic acid）。
斐林试剂外观为无色至淡黄色晶体，可溶于有机溶剂如醚、醇和酯。
它的分子式为C2BrF3O2，分子量为195.93 g/mol。
斐林试剂具有较高的反应活性和较强的电子亲和力，可与芳香化合物或叔胺进行取代反应。
在有机合成中，斐林试剂常用于引入三氟甲基（CF3）基团，以改变化合物的性质和增强其活性。
斐林试剂在制药、农药和材料科学领域得到广泛应用。
2. 双缩脲试剂：双缩脲试剂是一类含有二个缩脲基团的有机化合物，也称为双脲试剂。
常见的双缩脲试剂有四甲基双缩脲（TMTU）和二甲基双缩脲（DMTU）。
它们外观为白色至浅黄色晶体，可溶于水、醇和醚溶剂。
双缩脲试剂的分子式和分子量根据具体化合物而有所不同。
双缩脲试剂具有良好的活化作用和亲核取代反应性质。
它们常用于有机合成中的胺基保护、氨基酸活化和酰胺的合成等反应。
双缩脲试剂在药物合成、材料科学和有机化学研究领域得到广泛应用。
3. 区别：斐林试剂和双缩脲试剂在性质和应用方面存在以下区别：- 反应活性与特性：斐林试剂具有较高的反应活性和电子亲和力，广泛应用于芳香化合物的取代反应。
而双缩脲试剂则主要应用于胺基保护和氨基酸活化等反应，具有良好的活化作用和亲核取代反应性质。
- 分子结构与组成：斐林试剂的化学结构为三氟乙酸溴化物，含有溴、氟和氧元素。
而双缩脲试剂则是一类含有二个缩脲基团的有机化合物，结构上不包含卤素元素。
- 溶解性与适用溶剂：斐林试剂溶解性较好，可溶于有机溶剂如醚、醇和酯。
而双缩脲试剂也具有良好的溶解性，可溶于水、醇和醚溶剂。
斐林试剂和双缩脲试剂区别-互联网类
斐林试剂和双缩脲试剂区别－互联网类关键信息项：1、试剂组成成分斐林试剂：氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液双缩脲试剂：氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液（浓度不同）2、检测对象斐林试剂：还原糖双缩脲试剂：蛋白质3、反应原理斐林试剂：还原糖中的醛基在加热条件下将氢氧化铜还原为氧化亚铜双缩脲试剂：在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜离子形成紫色络合物4、使用方法斐林试剂：甲液和乙液等量混合均匀后再注入待测液，且需水浴加热双缩脲试剂：先加 A 液创造碱性环境，摇匀后加 B 液5、颜色变化斐林试剂：浅蓝色→棕色→砖红色沉淀双缩脲试剂：无色→浅蓝色→紫色11 斐林试剂的详细介绍斐林试剂主要由氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液组成。
其中，氢氧化钠溶液为斐林试剂提供了碱性环境，硫酸铜溶液中的铜离子在后续与还原糖反应中起着关键作用。
111 斐林试剂检测还原糖的原理还原糖具有醛基，在斐林试剂提供的碱性环境和加热条件下，醛基能够将氢氧化铜中的二价铜离子还原为氧化亚铜，从而产生砖红色沉淀。
112 斐林试剂的使用步骤使用时，需要将斐林试剂的甲液（氢氧化钠溶液）和乙液（硫酸铜溶液）等量混合均匀后再注入待测液。
之后，进行水浴加热，观察是否产生砖红色沉淀来判断待测液中是否存在还原糖。
12 双缩脲试剂的详细介绍双缩脲试剂同样包含氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液，但硫酸铜溶液的浓度与斐林试剂有所不同。
121 双缩脲试剂检测蛋白质的原理蛋白质中的肽键在碱性条件下能与铜离子形成紫色络合物，这是双缩脲试剂检测蛋白质的基础。
122 双缩脲试剂的使用方法首先加入双缩脲试剂 A 液（氢氧化钠溶液），创造碱性环境，摇匀后再加入双缩脲试剂 B 液（硫酸铜溶液），观察颜色变化。
13 斐林试剂和双缩脲试剂的颜色变化对比斐林试剂在与还原糖反应时，颜色变化依次为浅蓝色、棕色，最终形成砖红色沉淀。
而双缩脲试剂在与蛋白质反应时，颜色从无色变为浅蓝色，最终呈现紫色。
131 颜色变化差异的原因斐林试剂的颜色变化是由于还原糖与氢氧化铜的反应过程中，铜离子的价态和形态发生改变。
人教版新教材高中常见生物药品及试剂使用注意事项总结
人教版新教材高中常见生物药品及试剂使用注意事项总结1.斐林试剂（甲液：质量浓度为0.1g/ml 的NaOH溶液，乙液：质量浓度为0.05g/ml 的CuSO4）：将斐林试剂甲液和乙液等量混合，再将混合后的斐林试剂注入待测组织样液，50-65℃水浴加热约2min，如待测组织样液中存在还原糖，则由蓝色转为砖红色沉淀。
2.双缩脲试剂（A液：质量浓度为0.1g/ml 的NaOH，B液：质量浓度为0.01g/ml的 CuSO4）：向待测液中先注入双缩脲试剂A液1ml，摇匀，再向其中加入双缩脲试剂B液4滴，摇匀。
如待测组织样液中存在多肽或蛋白质，则由浅蓝色转为紫色。
3.质量浓度为0.01g/ml的苏丹Ⅲ染液：取在花生子叶薄片上滴2-3滴苏丹染液，用吸水纸吸去染液，再滴加1-2滴体积分数为50%的酒精溶液，洗去浮色。
检测脂肪，可将脂肪染成橘黄色。
4.碘液：鉴定淀粉，淀粉遇碘液变蓝。
5.健那绿（活性染色剂）：用于检测线粒体，使线粒体染色呈蓝绿色。
6.酒精：①体积分数为50%的酒精溶液：在苏丹Ⅲ染液检测脂肪实验中用于洗去浮色。
②70%的酒精溶液：用于菊花组织培养实验中对操作者双手、超净工作台台面及流水冲洗后的外植体消毒。
③体积分数为95%的酒精溶液：和质量浓度为15%的盐酸等体积混合，作为解离液，可用于解离根尖，使细胞分散开来；在低温诱导植物细胞染色体数目变化实验中，用于洗去卡诺氏液。
④预冷的95%的酒精溶液：DNA不溶于酒精，尤其是不溶于体积分数为95%的预冷酒精，而细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，据此可以用于DNA的粗提取。
⑤100%的酒精溶液（无水乙醇）：用于色素的提取。
7.盐酸：①盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂的跨膜运输。
②盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离，便于DNA与染色剂的结合。
③物质的量浓度为0.01mol/L的盐酸：用于影响酶活性的条件实验；用于模拟生物体维持pH 稳定实验。
④质量浓度为15%的盐酸：和体积分数为95%的酒精溶液等体积混合作为解离液，可用于解离根尖，使细胞分离开来。
关于“斐林试剂”和“双缩脲试剂”使用规则的实验探究
关于“斐林试剂”和“双缩脲试剂”替代使用的实验探究——以高中生物第一册教材实验一为例毛彬彬 (湖南省平江县第四中学 414511)高中生物（必修·人教版）第一册教材P.17中的“生物组织中还原糖、蛋白质的鉴定”实验中对“斐林试剂”和“双缩脲试剂”的使用作了如下要求：（1）用斐林试剂鉴定还原糖时，必须将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后使用，切勿分别加入生物组织样液中进行检测。
（2）用双缩脲试剂鉴定蛋白质时，先向蛋白稀释液中加入A液（2mL），摇荡均匀，再加B液3~4滴。
从上述实验操作要求看，使用斐林试剂时必须先将甲液和乙液混合后加入组织样液中；而使用双缩脲试剂时必须先加A液（NaOH溶液）后加B液（CuSO4溶液）；两种试剂不能替代使用。
而且，有的资料认为，在双缩脲反应中，先加CuSO4溶液后加NaOH溶液，产生的Cu(OH)2的蓝色会掩盖紫色反应。
但是笔者在教学中发现，许多学生在未按上述操作要求的情况下也可以出现明显的颜色反应。
针对此问题笔者在实验教学过程中，指导学生对以下3个问题进行了初步的探究：（1）斐林试剂分先后加入对结果是否有影响？（2）双缩脲试剂能否不分先后，或先混合后加入对结果是否有影响？（3）斐林试剂和双缩脲试剂能否相互替代使用？1实验探究实验目的：探究“斐林试剂”和“双缩脲试剂”的使用实验材料：苹果组织样液蛋清稀释液斐林试剂甲液(0.1g/mL的NaOH溶液) 乙液(0.05g/mL的CuSO4溶液)双缩脲试剂A液(0.1g/mL的NaOH溶液) B液(0.01g/mL的CuSO4溶液)1.1 可溶性还原糖与斐林试剂和双缩脲试剂的反应1.1.1实验步骤：（1）取六只洁净试管分别加入2mL苹果组织样液，编号为①~⑥。
（2）①号管加甲液和乙液的混合液；②号管先加甲液，后加乙液；③号管先加乙液，后加甲液；④号管加A液和B液的混合液；⑤号管先加A液，后加B液；⑥号管先加B液，后加A液（试剂用量标准：甲液、A液均为2mL；乙液、B液均为4滴。
斐林试剂、双缩脲试剂和班氏试剂比较
斐林试剂、双缩脲试剂和班氏试剂比较[折叠]斐林试剂和双缩脲试剂的成分相同，但二者的使用方法及原理不尽相同。
斐林试剂和班氏试剂都是检验还原性糖的试剂，二者的使用方法及原理、成分也有区别，下面就从这几种试剂的使用原理、成分及使用方法等方面做一简单总结。
1. 斐林试剂和双缩脲试剂斐林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液和CuSO4溶液组成，但二者有如下三点不同：（1）溶液浓度不同斐林试剂中NaOH溶液称为斐林试剂甲，其浓度为0.1g/ml,CuSO4溶液称为斐林试剂乙，其浓度为0.05g/ml；双缩脲试剂中NaOH溶液（双缩脲试剂A）的浓度为0.1g/ml，CuSO4溶液（双缩脲试剂B）的浓度为0.01g/ml。
（2）使用原理不同斐林试剂是新配制的Cu(OH)2溶液，它在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的Cu2O沉淀，可用于鉴定可溶性还原糖的存在。
用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）。
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂，发生的是双缩脲反应。
双缩脲反应实质是在碱性环境下的Cu2+与双缩脲试剂发生的紫色反应。
而蛋白质分子中含有很多与双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）结构相似的肽键，所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应，可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。
（3）使用方法不同斐林试剂使用时，先将NaOH溶液和CuSO4溶液混合（将4-5滴CuSO4溶液滴入2mLNaOH溶液中），而后立即使用：双缩脲试剂使用时，先加入NaOH 溶液2mL），振荡摇匀，造成碱性的反应环境，然后再加入3~4滴CuSO4溶液，振荡摇匀后观察现象。
2. 斐林试剂和班氏试剂关于斐林试剂和班氏试剂，可用下面的例题引出其异同点：例：你可用什么方法，检验人的尿液中是否含有糖？答案：方法一：在试管中加入人的尿液0.1mL，加入班氏糖定性试剂1mL，混合均匀后，将试管放入盛有开水的烧杯中，加热煮沸1min~2min，若试管中溶液在加热后产生了砖红色沉淀，说明尿液中含有糖。
探究斐林试剂和双缩脲试剂的使用条件
探究斐林试剂和双缩脲试剂的使用条件作者：郭卫华来源：《中学生物学》2016年第01期人教版高中生物必修1的“生物组织中还原糖、蛋白质的鉴定”实验对“斐林试剂”和“双缩脲试剂”的使用作了要求：①斐林试剂鉴定还原糖时，必须将甲液和乙液混合均匀后使用，切勿分别加入生物组织样液中进行检测。
②双缩脲试剂鉴定蛋白质时，先向蛋白稀释液中加入A液（1 mL），均匀，再加入B液3～4滴。
针对平时学生实验时反映出的很多问题，笔者进行了探索，旨在探究剂的使用条件，改进实验，确保实验顺利完成。
1 实验目的尝试探究斐林试剂、双缩脲试剂的使用条件，进一步将本实验完善，为日后教学工作的改进奠定基础。
2 实验原理可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2O 沉淀。
葡萄糖+Cu（OH）2葡萄糖酸+Cu2O↓（砖红色）+H2O;蛋白质+双缩脲试剂→紫色。
蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。
蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。
3 材料、试剂、器具实验材料：新鲜去皮的梨汁、生豆浆、熟豆浆。
实验试剂：斐林试剂（甲液：质量浓度0.1g/mL NaOH溶液;乙液：质量浓度0.05 g/mL CuSO4溶液）、双缩脲试剂（A液：质量浓度0.1 g/mL NaOH溶液;B液：质量浓度0.01 g/mL CuSO4溶液）、质量分数8%的盐酸、蒸馏水等。
器具：试管、试管架、试管夹、烧杯、量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、打火机等。
4 方法步骤及现象（表1、表2）5 对实验现象的分析由表1的1、2号试管现象可看出，斐林试剂的使用顺序对实验结果有一定影响，但都能出现砖红色沉淀，可能是待测液中的有机酸会中和一些NaOH，使产生的Cu（OH）2不足，所以2号试管砖红色沉淀会少些。
1、3号试管现象说明斐林试剂实为新制的Cu（OH）2悬浊液，不需提供酸性环境，加入盐酸会将新的Cu（OH）2分解，致使还原糖无法和斐林试剂反应，所以无砖红色沉淀。
斐林试剂与双缩脲试剂的比较(终审稿)
斐林试剂与双缩脲试剂的比较文稿归稿存档编号：[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-斐林试剂与双缩脲试剂的比较1.主要区别2.典型例题赏析例1.现提供新配置的斐林试剂甲液（0.1g/mlNaOH溶液）、乙液（0.05g/mlCuSO溶液）、蒸馏水，则充分利用上述试剂及必需的实验用4具，能鉴别出下列哪些物质（）①葡萄糖?②蔗糖?③胰蛋白酶?④DNA?A.只有①B.①和②C.①和③D.②、③和④错解：A?分析：一般只看到了斐林试剂甲液（0.1g/mlNaOH溶液）、乙液溶液）可以鉴定还原性糖,所以选A。
而忽略了婓林试剂（0.05g/mlCuSO4乙液可被蒸馏水稀释到0.01g/ml?CuSO溶液，即双缩脲试剂B液，故可4以来鉴定蛋白质。
正解：主要考查审题的细心认真程度，“蒸馏水”是关键词。
婓林试剂甲液、婓林试剂乙液可以来鉴定葡萄糖等可溶性还原性糖，而蔗糖不是还原性糖。
婓林试剂和双缩脲试剂的成分区别是：斐林试剂甲液=双缩脲试剂A液，都是0.1g/ml?NaOH溶液；斐林试剂乙液和双缩脲试剂B液成溶液，但浓度不同，分别是0.05g/ml、0.01g/ml。
根据题分都是CuSO4意，双缩脲试剂B液可以通过蒸馏水和斐林试剂乙液来稀释而成。
故答案选C。
例2．在下列四个试管中分别加入一些物质，甲试管：豆浆；乙试管：氨基酸溶液；丙试管：牛奶和蛋白酶；丁试管：人血液中的红细胞和蒸馏水。
上述四个试管中加入双缩脲试剂振荡后，有紫色反应的是（）A．甲、丁B．甲、乙、丁C．甲、乙、丙D．甲、丙、丁错选：C?分析：很多学生误认为氨基酸含有肽键，能被双缩脲试剂鉴定成紫色。
而红细胞中没有蛋白质。
正解：豆浆和牛奶的主要成分是蛋白质。
牛奶在蛋白酶的催化作用下，分解成多肽。
蛋白酶的本质是蛋白质。
人成熟的红细胞中含有血红蛋白，把它放在清水中，会吸水胀破，血红蛋白会释放出来。
甲乙丙试管中加入双缩脲试剂，能出现紫色。
斐林试剂与双缩脲试剂的使用释疑
斐林试剂与双缩脲试剂的使用释疑王升友(江苏省赣榆县城头中学，222131)中学生物教学，2003年第6期在教学过程中，发现许多学生对于用斐林试剂鉴定可溶性还原糖与用双缩脲试剂鉴定蛋白质的实验中存在着许多疑难问题，为便于学生理解和掌握，现归纳总结如下：1可溶性还原糖鉴定及蛋白质的鉴定原理不同1 1可溶性还原糖鉴定原理可溶性还原糖如葡萄糖、果糖、麦芽糖等的分子内都含有游离的具有还原性半缩醛羟基，当与新配制的一定浓度的Ｃｕ(ＯＨ)2悬浊液混合后，在加热的条件下，将Ｃｕ(ＯＨ)2还原为砖红色的Ｃｕ2Ｏ沉淀，而还原性糖本身则被氧化为相应的有机酸。
以葡萄糖为例的反应式如下：1 2蛋白质的鉴定原理在碱性溶液中，双缩脲能与Ｃｕ2+作用，形成紫色或紫红色的络合物。
故双缩脲试剂可鉴定双缩脲的存在，而蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键。
因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。
2斐林试剂与双缩脲试剂的配制与使用不同2 1斐林试剂的配制甲液：质量浓度为0 1ｇ·ｍＬ-1的ＮａＯＨ溶液乙液：质量浓度为0 05ｇ·ｍＬ-1的ＣｕＳＯ4溶液使用时临时配制，将4滴～5滴乙液滴入2ｍＬ甲液中，振荡混合均匀后即可使用。
2 2双缩脲试剂的配制取10ｇＮａＯＨ放入量筒内加水至100ｍＬ，待充分溶解后倒入试剂瓶中配制成质量浓度为0.1ｇ·ｍＬ-1的ＮａＯＨ溶液，瓶口塞上胶塞，贴上标签，写上试剂Ａ。
取1ｇＣｕＳＯ4放入量筒中，加水至100ｍＬ，待充分溶解后倒入试剂瓶中配制成质量浓度为0.01ｇ·ｍＬ-1的ＣｕＳＯ4溶液，瓶口塞上胶塞，贴上标签，写上试剂Ｂ。
使用时，先向试管中加入2ｍＬ试剂Ａ，摇荡均匀，再向试管中加入3滴～4滴试剂Ｂ，摇荡均匀即可。
3反应过程中，出现的颜色变化及原因不同3 1用斐林试剂鉴定还原糖的实验因先加入刚配制的Ｃｕ(ＯＨ)2，故溶液变成浅蓝色;加热后，部分Ｃｕ(ＯＨ)2被还原为砖红色的Ｃｕ2Ｏ，因二者混合故呈现棕色;随着反应的继续进行，Ｃｕ(ＯＨ)2被全部还原为Ｃｕ2Ｏ，故而出现砖红色的沉淀。
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斐林试剂与双缩脲试剂的使用释疑
王升友(江苏省赣榆县城头中学，222131)
中学生物教学，2003年第6期
在教学过程中，发现许多学生对于用斐林试剂鉴定可溶性还原糖与用双缩脲试剂鉴定蛋白质的实验中存在着许多疑难问题，为便于学生理解和掌握，现归纳总结如下：
1可溶性还原糖鉴定及蛋白质的鉴定原理不同
1 1可溶性还原糖鉴定原理
可溶性还原糖如葡萄糖、果糖、麦芽糖等的分子内都含有游离的具有还原性半缩醛羟基，当与新配制的一定浓度的Ｃｕ(ＯＨ)2悬浊液混合后，在加热的条件下，将Ｃｕ(ＯＨ)2还原为砖红色的Ｃｕ2Ｏ沉淀，而还原性糖本身则被氧化为相应的有机酸。
以葡萄糖为例的反应式如下：
1 2蛋白质的鉴定原理
在碱性溶液中，双缩脲能与Ｃｕ2+作用，形成紫色或紫红色的络合物。
故双缩脲试剂可鉴定双缩脲的存在，而蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键。
因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。
2斐林试剂与双缩脲试剂的配制与使用不同
2 1斐林试剂的配制
甲液：质量浓度为0 1ｇ·ｍＬ-1的ＮａＯＨ溶液
乙液：质量浓度为0 05ｇ·ｍＬ-1的ＣｕＳＯ4溶液使用时临时配制，将4滴～5滴乙液滴入2ｍＬ甲液中，振荡混合均匀后即可使用。
2 2双缩脲试剂的配制
取10ｇＮａＯＨ放入量筒内加水至100ｍＬ，待充分溶解后倒入试剂瓶中配制成质量浓度为0.1ｇ·ｍＬ-1的ＮａＯＨ溶液，瓶口塞上胶塞，贴上标签，写上试剂Ａ。
取1ｇＣｕＳＯ4放入量筒中，加水至100ｍＬ，待充分溶解后倒入试剂瓶中配制成质量浓度为0.01ｇ·ｍＬ-1的ＣｕＳＯ4溶液，瓶口塞上胶塞，贴上标签，写上试剂Ｂ。
使用时，先向试管中加入2ｍＬ试剂Ａ，摇荡均匀，再向试管中加入3滴～4滴试剂Ｂ，摇荡均匀即可。
3反应过程中，出现的颜色变化及原因不同
3 1用斐林试剂鉴定还原糖的实验
因先加入刚配制的Ｃｕ(ＯＨ)2，故溶液变成浅蓝色;加热后，部分Ｃｕ(ＯＨ)2被还原为砖红色的Ｃｕ2Ｏ，因二者混合故呈现棕色;随着反应的继续进行，Ｃｕ(ＯＨ)2被全部还原为Ｃｕ2Ｏ，故而出现砖红色的沉淀。
颜色变化为：浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。
3 2用双缩脲试剂鉴定蛋白质的实验
加入双缩脲试剂Ａ，溶液为无色;加入双缩脲试剂Ｂ，因有Ｃｕ(ＯＨ)2生成，故呈现浅蓝色;振荡均匀后，由于反应的进行，出现紫色的络合物。
颜色变化为：无色→浅蓝色→紫色。
4实验过程中，应熟练掌握的问题
4 1斐林试剂为何要现配现用?因斐林试剂很不稳定，容易生成蓝色Ｃｕ(ＯＨ)2沉淀，所以应将甲液、乙液分别配制储存，使用时再临时配制。
4.2用斐林试剂鉴定时，为何不能先加入ＮａＯＨ，后加入ＣｕＳＯ4，而必须混合后再加入?因为若先
加入ＮａＯＨ，还原性糖中的还原性半缩醛羟基易被氧化而失去还原性，再加入ＣｕＳＯ4后不能产生Ｃｕ2Ｏ沉淀，只有将其先配成Ｃｕ(ＯＨ)2悬浊液，才可产生砖红色沉淀。
4 3在做该实验时，为何一般不选用双子叶植物的叶子和单子植物(如韭菜、鸢尾)的叶片?在双子叶植物中，光合作用的主要产物葡萄糖形成后合成为淀粉，暂时储存在叶子内，因此最好不用双子叶植物的叶片作实验材料;在单子叶植物如韭菜、鸢尾，并不将光合作用的初始产物转变为淀粉，因此叶内含有大量的可溶性还原糖，但是，由于叶片中叶绿素的颜色较深，对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用，导致实验现象不明显，因此也不选用单子叶植物的叶子。
5应注意的问题
5 1在使用双缩脲试剂时，为什么要先加入试剂Ａ，后加入试剂Ｂ?先加入试剂Ａ，造成碱性环境，而只有在碱性环境中，蛋白质才容易与Ｃｕ2+发生颜色反应。
5 2若加入试剂Ａ后，为什么只能加入3滴～4滴双缩脲试剂Ｂ，而不能加入过量?因为若加入过量的双缩脲试剂Ｂ，ＣｕＳＯ4在碱性溶液中生成大量的蓝色Ｃｕ(ＯＨ)2沉淀，会遮蔽实验中所产生的紫色，影响观察结果。