实验四 斐林试剂法法测定还原糖含量(1)
斐林试剂配制,标定以及还原糖测定
斐林试剂配制，标定以及还原糖测定糊精溶液中还原糖含量测定(DE值测定)A斐林试剂(碱性酒石酸铜溶液)的制备1)斐林试剂甲液称取69.28g的硫酸铜(CSO.5HO)溶于水中并稀释至1000ml，静置48h，用滤纸过U42滤2)斐林实际乙液分别称取酒石酸钾钠346g和氢氧化钠100g，溶于水中并稀释至1000ml，静置48h，用滤纸过滤B斐林试剂标定精确称取已在105?下干燥至恒重的分析纯葡萄糖0.8g，用蒸馏水稀释，移入250ml容量瓶并稀释至刻度，摇匀。
用移液管分别吸取斐林试剂甲，乙液各5ml和蒸馏水20ml于150ml锥形瓶中(预备数份)，于电炉上煮沸，用上述葡萄糖溶液(置于25ml滴定管中)滴定至蓝色消失时，加入1%的亚甲基蓝指示剂两滴，继续用糖液滴定至蓝色刚好消失。
此操作在1min内完成。
再重复操作第二次标定过程，取两次葡萄糖溶液消耗体积的平均值(允许误差不大于0.1ml)，按下式计算斐林试剂常数(10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量)。
R=WG/V式中R——10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量，g;W——葡萄糖溶液消耗的体积，mlG——葡萄糖的质量，gV——葡萄糖定容体积，250mlC测定步骤称取糊精溶液(液化)15g，移入250ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。
用移液管分别吸取斐林试剂甲，乙液各5ml和蒸馏水20ml于150ml锥形瓶中。
其余步骤同斐林试剂标定法，即以样品稀释液代替葡萄糖溶液滴定斐林试剂。
计算还原糖含量按下式计算还原糖(%)=100RV/WG式中R——10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量，g;W——葡萄糖溶液消耗的体积，ml;G——样品质量，g;V——葡萄糖定容体积，250ml。
综合实验之生物制品分析检测
综合实验之生物制品分析检测实验一:斐林试剂置换法测定还原糖的含量一、实验原理:糖类包括多糖、双糖和单糖，其中单糖和某些双糖具有游离的羰基，称为还原糖，多糖和蔗糖无还原性。
利用糖的还原性，与斐林试剂（氧化剂）中的二价铜离子还原为一价铜，进行氧化还原反应，而进行测定.非还原糖必须转化为还原糖，再进行测定。
斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂，反应的终点可用次甲基蓝作指示剂，在碱性、沸腾环境下还原呈无色。
根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量，计算出样品还原糖量。
二、试剂与材料：1、试剂：菲林试剂甲液：称取69.3g硫酸铜晶体，用蒸馏水溶解，定容至1000ml菲林试剂乙液：称取346g酒石酸钾钠，100g氢氧化钠，用蒸馏水溶解定容至1000ml2、1%次甲基蓝溶液：1g次甲基蓝溶于100ml水3、0.2%标准葡萄糖溶液：2g葡萄糖105℃烘干到恒重加水到1000ml4、碱式滴定管5、样品溶液：待测葡萄糖溶液样品1：稀释20倍，样品2：稀释50倍6、电炉三、操作方法：1、斐林试剂标定A 取甲液5ml+乙液5ml，（注意：甲液与乙液混合可生成氧化亚铜沉淀，应将甲液加入乙液，使开始生成的氧化亚铜沉淀重溶）置于250ml三角瓶中，加入10ml水，并从滴定管中加入0.2%的标准葡萄糖溶液若干毫升（约23ml）。
（量控制在后滴定时消耗葡萄糖液在0.5－1.0ml)B 电炉上加热至沸，并保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝溶液，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液用0.2%标准葡萄糖液滴定至蓝色消失，有红棕色沉淀，溶液清亮为终点止。
记录耗用的葡萄糖液量为V0,必须在1min内完成。
注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。
2、定糖预备试验同1法取斐林试剂，加10ml样品液，摇匀于电炉上加热至沸，保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝，用0.2%葡萄糖液滴定至蓝色消失。
还原糖含量的测定
05
结果分析与解读
数据处理与图表绘制
数据处理
对实验数据进行整理、筛选和计算， 确保数据的准确性和可靠性。
图表绘制
根据处理后的数据，绘制图表以直观 地展示实验结果，如柱状图、折线图 等。
结果解读与误差分析
结果解读
根据实验结果，分析还原糖含量的变化趋势和规律，判断实 验是否符合预期。
误差分析
对实验结果进行误差分析，找出误差来源，如操作误差、仪 器误差等，以提高实验的准确性和可靠性。
部分多糖
多糖是由多个单糖通过脱 水缩合形成的，部分多糖 也具有还原性，如淀粉、 纤维素等。
还原糖与非还原糖的区别
还原性
还原糖具有还原性，能够还原斐林试 剂或班氏试剂；非还原糖则没有还原 性，不能还原斐林试剂或班氏试剂。
结构
性质
还原糖通常具有较高的反应活性，而 非还原糖则较低。
还原糖通常含有醛基或酮基，而非还 原糖则没有这些基团。
02
还原糖基础知识
定义与性质
定义
还原糖是指具有还原性的糖类，能够 还原斐林试剂或班氏试剂的糖。
性质
还原糖具有醛基或酮基，因此具有还 原性，可与斐林试剂或班氏试剂发生 氧化还原反应。
还原糖的种类
01
02
03
单糖
单糖是最简单的糖类，也 是最具还原性的糖，如葡 萄糖、果糖等。
双糖
双糖是由两个单糖通过脱 水缩合形成的，如麦芽糖、 乳糖等。
色谱法
总结词
色谱法是一种分离和测定复杂混合物中各组 分含量的方法。在测定还原糖含量时，通常 使用高效液相色谱法，将样品中的还原糖与 其他组分分离，通过检测器检测各组分的含 量，从而计算出还原糖的含量。
详细描述
总糖和还原糖的测定——斐林氏法
总糖和还原糖测定方法较多，如3，5—二硝基水杨酸法、碱性铜试剂法、蒽酮比色法、斐林氏法等。
这里只介绍斐林氏法。
一、目的学习掌握生产实践中常用的快速定糖方法。
二、原理还原糖在碱性溶液中能将Ag+，Hg+，Cu2+，Fe（CN）3-等金属离子还原，而糖本身则氧化成各种羟酸，利用这一特性可以对还原糖进行定量测定。
本实验采用斐林试剂热滴定法，氧化剂是斐林试剂，它是由甲乙两种溶液组成，甲液中含有硫酸铜、次甲基蓝；乙液中含有氢氧化钠、酒石酸钾钠和亚铁氰化钾（黄血盐）。
当甲乙两液混合时，硫酸铜和氢氧化钠作用形成氢氧化铜沉淀，由于溶液中存在酒石酸钾钠，它和氢氧化铜形成了可溶性络合物。
酒石酸络铜（Ⅱ）钾钠盐在与还原糖共热时，二价铜离子即被还原成一价的氧化亚铜红色沉淀。
此氧化亚铜与试剂中亚铁氰化钾反应生成可溶性的亚铁氰酸络铜（Ⅰ）钾盐。
Cu2O + K4Fe(CN)6 + 3 H2O →K2Cu2Fe(CN)6 + 2 KOH + 2 H2O亚铁氰化钾亚铁氰酸络铜（Ⅰ）钾盐斐林试剂中二价铜的还原力比次甲基蓝强，因此所滴入的标准葡萄糖溶液首先使二价铜还原，只有当二价铜被还原完毕后，才能使次甲基蓝（甲烯蓝）还原为无色，测定中以此作为滴定终点。
在测定时先做一对照管（不加样品），用标准葡萄糖滴定求知一定体积斐林试剂中二价铜和次甲基蓝的量，即测定对照管消耗的标准葡萄糖量（A）。
再做样品管，样品中还原糖消耗斐林试剂中一部分二价铜，剩余的量再用标准葡萄糖来滴定，即样品消耗的标准葡萄糖量（B）。
将（A）减去（B）就可求得样品中还原糖量。
三、器材及试剂：1．器材：①山芋粉②广范试纸pH1～12。
③吸管5毫升（×4），10毫升（×2）④容量瓶100毫升（×3）⑤烧杯150毫升（×1），100毫升（×1）⑥三角烧瓶250毫升（×6）⑦滴定管25毫升（×1）⑧双孔橡皮塞⑨电炉300W（×1）⑩天平。
食品中还原糖含量的测定-直接滴定法
• 3.试剂：
– 硫酸铜（CuSO4 · 5H2O） – 次甲基蓝 -碱性酒石酸铜甲液（费林试剂甲液） – 酒石酸钾钠 – 亚铁氰化钾 -碱性酒石酸铜乙液（费林试剂乙液） – 乙酸锌 – 冰乙酸 -乙酸锌溶液 – 葡萄糖 -葡萄糖标准溶液（1mg/ mL） – 氢氧化钠 -氢氧化钠溶液 – 盐酸
四、实验步骤
• 2. 碱性酒石酸铜溶液的标定 – 吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置 于150mL锥形瓶中（甲液、乙液混合后生成氧 化亚铜沉淀，因此，应将甲液加入到乙液，使 生成的氧化亚铜沉淀重溶），加水10mL、玻璃 珠2粒，从滴定管中滴加9mL葡萄糖标准溶液， 控制在2min内加热至沸，趁沸以每两秒1滴的速 度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚 好褪去为终点，记录消耗葡萄糖标准溶液的总 体积。同法平行操作三份，取其平均值，计算 每10mL（甲液、乙液各5mL）碱性酒石酸铜溶 液相当于葡萄糖的质量（mg）。
• 4. 样品溶液的测定
– 吸取5.0mL碱性酒石酸铜溶液甲液及5.0mL乙 液，置于150mL锥形瓶中，加水10mL、玻璃 珠2粒，从滴定管中滴加比预测体积少1mL的 样品溶液，使在2min内加热至沸，趁沸以以每 两秒1滴的速度滴定至终点。记录样液消耗的 体积，同法平行操作三份，得出平均消耗体积。
• 1. 样品处理
– 汽水等含CO2的饮料-雪碧
• 吸取10mL样品置于蒸发皿中，在水浴上除去CO2后， 移入250mL容量瓶，并用水洗涤蒸发皿，洗液并入 容量瓶中，加水至刻度，混匀后备用。
– 酒精饮料-啤酒
• 吸取10mL样品，置于蒸发皿中，用1mol/L氢氧化钠 溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积的1/4后， 移入100 mL容量瓶中，加入50 mL水，摇匀后慢慢 加入5 mL乙酸锌溶液和5 mL 10.6%亚铁氰化钾溶液， 加水至刻度，摇匀。静置30min，用干燥滤纸过滤， 滤液备用。
还原糖的测定实验报告
1. 了解还原糖的性质和鉴定方法。
2. 掌握使用斐林试剂检测还原糖的原理和操作步骤。
3. 学习通过比色法计算还原糖的含量。
二、实验原理还原糖是指含有游离醛基或酮基的糖类，它们能够还原斐林试剂中的Cu²⁺离子为Cu⁺离子，生成砖红色的Cu₂O沉淀。
斐林试剂由斐林A液（含CuSO₄的碱性溶液）和斐林B液（含NaOH的碱性溶液）组成，两种试剂混合后，Cu²⁺离子与还原糖反应生成Cu₂O沉淀。
三、实验材料与试剂1. 试剂：- 斐林A液：称取硫酸铜（CuSO₄·5H₂O）0.1g，溶于100mL水中，加入5mL浓NaOH溶液。
- 斐林B液：称取NaOH 2g，溶于100mL水中。
- 标准葡萄糖溶液：准确称取葡萄糖1.0000g，溶于1000mL水中，配制成1mg/mL的标准溶液。
- 样品溶液：取一定量的待测样品，用蒸馏水溶解并定容至一定体积。
2. 仪器：- 烧杯- 试管- 滴定管- 移液管- 移液器- 恒温水浴锅- 移液管1. 准备标准溶液：准确移取1mL标准葡萄糖溶液，加入9mL蒸馏水，配制成0.1mg/mL的标准溶液。
2. 配制斐林试剂：将斐林A液和斐林B液等体积混合，立即使用。
3. 取一支试管，加入2mL样品溶液。
4. 加入2mL斐林试剂，混合均匀。
5. 将试管放入恒温水浴锅中，加热至沸腾，保持沸腾状态5分钟。
6. 取出试管，观察沉淀颜色。
7. 重复步骤3-6，制作标准曲线。
8. 根据标准曲线，计算样品溶液中还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的制作：以标准葡萄糖溶液浓度为横坐标，沉淀颜色深浅为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品溶液中还原糖含量的计算：根据样品溶液的浓度和沉淀颜色深浅，在标准曲线上找到对应的还原糖含量。
六、实验讨论1. 实验过程中，斐林试剂需现配现用，以免Cu²⁺离子被还原成Cu⁺离子，影响实验结果。
2. 样品溶液的浓度应控制在一定范围内，以免沉淀颜色过深，影响准确度。
还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]
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还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]实验一糖类的性质实验〔一〕糖类的颜色反响一、实验目的1、了解糖类某些颜色反响的原理。
2、学习应用糖的颜色反响鉴别糖类的方法。
二、颜色反响〔一〕α-萘酚反响1、原理糖在浓无机酸〔硫酸、盐酸〕作用下，脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后者能与α-萘酚生成紫红色物质。
因为糠醛及糠醛衍生物对此反响均呈阳性，故此反响不是糖类的特异反响。
2、器材试管及试管架，滴管3、试剂莫氏试剂：5％α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g，溶于95％酒精中，总体积达100mL，贮于棕色瓶内。
用前配制。
1％葡萄糖溶液100mL1％果糖溶液100mL1％蔗糖溶液100mL1％淀粉溶液100mL0.1％糠醛溶液100mL浓硫酸500mL4、实验操作取5支试管，分别参加1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液、1％淀粉溶液、0.1％糠醛溶液各1mL。
再向5支试管中各参加2滴莫氏试剂，充分混合。
倾斜试管，小心地沿试管壁参加浓硫酸1mL，慢慢立起试管，切勿摇动。
观察记录各管颜色。
〔二〕间苯二酚反响1、原理在酸作用下，酮醣脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。
此反响是酮醣的特异反响。
醛糖在同样条件下呈色反响缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反响。
实验条件下蔗醣有可能水解而呈阳性反响。
2、器材试管及试管架，滴管3、试剂塞氏试剂：0.05％间苯二酚－盐酸溶液1000mL，称取间苯二酚0.05g 溶于30mL浓盐酸中，再用蒸馏水稀至1000mL。
1％葡萄糖溶液100mL1％果糖溶液100mL1％蔗糖溶液100mL4、实验操作取3试管，分别参加1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液各0.5mL。
再向3支试管中各参加塞氏试剂5mL，充分混合。
将试管同时放入沸水浴中，观察记录各管颜色。
(二)糖类的复原作用一、实验目的1、理解并掌握糖类的复原性质；2、学习常用的鉴定糖类复原性的方法。
还原糖测定
还原糖含量的测定（斐林试剂法）一、实验目的：学习用斐林试剂测还原糖的方法，二、实验原理：斐林试剂由甲、乙液组成，甲液为硫酸铜溶液，乙液为氢氧化钠与酒石酸钾钠溶液。
平时甲、乙溶液分开贮存，测定时才等体积混合，混合后，硫酸铜与氢氧化钠反应，生成氢氧化铜沉淀：2Na0H十CuS04——→Cu（OH）2↓十Na2SO4氢氧化铜因能与酒石酸钾钠反应形成络合物而使沉淀溶解。
酒石酸钾钠铜络合物中的二价铜是一个氧化剂，在氧化醛糖和酮糖（合称总还原糖）的同时，自身被还原成一价的红色氧化亚铜沉淀：反应终点用次甲基蓝来指示。
三、实验器材与试剂：电炉，滴定管等(1)斐林溶液甲液：称取30g结晶硫酸铜(CuS04·5H20)，0.1g次甲基蓝，定容于1000mL水中，如有不溶物须过滤。
乙液：称取100g酒石酸钾钠，108g NaOH，定容1000mL水中，若有沉淀过滤即可。
(2)0.1％标准葡萄糖液：精确称取于105℃烘至恒重的分析纯葡萄糖 1.000g，用水溶解后，定容至1000mL。
四、实验步骤1. 空白滴定准确吸取斐林甲、乙液各5mL，放入250mL锥形瓶中，加水约15mL，并从滴定管加入约20mL 0.1％标准葡萄糖溶液，严格控制不要摇晃三角瓶，将锥形瓶置电炉上加热煮沸，并准确沸腾30s，在沸腾状态下，以每两秒1滴的速度滴入0.1％标准葡萄糖溶液，至溶液刚由蓝色退去，生成砖红色沉淀为止。
后滴定操作应在1分钟内完成，整个煮沸时间应控制在3分钟之内。
记下总耗糖量V0。
2. 预滴定稀释：将样品除气后，进行适当稀释，以期用15~50mL（最好20~30mL）稀释液使滴定完成。
一般将发酵液稀释100倍（吸取1mL发酵液定容到100mL容量瓶）。
准确吸取斐林甲、乙液各5mL，放入250mL锥形瓶中，加水约15mL，吸取稀释样液1mL，放入锥形瓶中，并从滴定管加入约18mL 0.1％标准葡萄糖溶液，其他与空白滴定基本相同，最后在1分钟内滴定完成。
菲林试剂
斐林试剂法测定还原糖的含量
一、实验原理
还原糖可以将二价铜离子还原成为一价铜。
反应终点可以由次甲基蓝指示，根据一定量的菲林试剂完全还原所需的还原糖量，可以计算加入样品中还原糖的含量。
二、实验器材
①菲林试剂
甲液：称取15.0g硫酸铜（CuSO4·5H2O）,0.05克四甲基蓝，用水溶解并稀释到1000ml.
乙液：称取50.0g酒石酸钾钠，75g的氢氧化钠，4.0g的亚铁氰化钾，用水溶解并稀释到1000ml。
② 0.10%标准葡萄糖溶液：精密称取1.000g经95~105℃烘干的无水葡萄糖，用少量水溶解，移入1000ml容量瓶中，加入5ml盐酸，用水稀释到刻度，摇匀。
③滴定管、电炉、锥形瓶等。
三、实验步骤
1．样品溶液的配备
称取样品—mg，稀释后在100ml容量瓶定容。
2.菲林试剂的标定
准确吸取菲林甲乙液各5.00ml，置入150ml的锥形瓶，加水10ml，从滴定管中预先加入约10ml 0.1%的标准葡萄糖液，（用量控制在后滴定消耗0.10%标准葡萄糖1ml以内），摇匀，电炉上加热使其在2min内沸腾。
沸腾状态下以每2s/滴的速度滴入标准葡萄糖溶液，至蓝色刚好消失为终点，记录前后总共消耗的标准葡萄糖溶液的总体积Vo。
同法平行操作三份，取接近的两次体积的平均值。
3.预备实验
准确吸取菲林甲乙液各5.00ml，置入150ml的锥形瓶，加水10ml，加玻璃珠3粒。
电炉上加热使其在2min内沸腾，准备沸腾30s，趁沸以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品液(需始终保持溶液的沸腾状态)待溶液蓝色变浅时，以每2s/滴的速度滴入样品，至蓝色刚好消失为终点，记录消耗溶液的体积V1。
《还原糖的测定方法国标》
《还原糖的测定方法_国标》还原糖的测定方法_国标一、范围本标准规定了用斐林试剂比色法测定试样中还原糖的含量。
本标准适用于所有食物样品中还原糖的测定。
二、原理还原糖与斐林试剂在加热条件下生成砖红色沉淀，通过与标准曲线对比，可以得出样品中还原糖的含量。
三、试剂和材料斐林试剂：甲液（称取14.3g硫酸铜（CuSO4·5H2O）和0.05g次甲基蓝（C13H16N3OClS）溶于水中，定容至100ml）、乙液（称取173g酒石酸钾钠（C4H4O6NaK·4H2O）和50g氢氧化钠溶于水中，定容至500ml）。
使用时将甲液、乙液等体积混合。
四、仪器和设备1.实验室用粉碎机2.水浴锅3.消煮炉或普通炉灶（能调节温度）4.容量瓶（100ml）5.移液管（10ml）6.比色管（10ml）7.试管（25ml）8.三角瓶（250ml）9.定时钟五、样品制备1.固体样品：取样品适量，用粉碎机粉碎，然后称取约0.2g样品置于试管中。
2.液体样品：直接取适量样品置于试管中。
3.在每个试管中加入4ml斐林试剂，充分混匀后静置10min。
4.将试管中的溶液倒入三角瓶中，加入约80ml水稀释，加热至沸后保持1min。
5.用移液管向每个试管中加入1ml样液，摇匀后置于试管架上。
6.在温度达到要求时将试管放入水浴中加热，同时开启计时器。
当时间达到要求时立即取出试管，用自来水冷却至室温。
7.将冷却后的溶液用移液管倒入比色管中，再加入约1ml的样液摇匀。
8.将比色管置于比色槽中，与标准曲线进行比色，得出样品的含量。
9.将整个测定过程中每个环节的时间、温度等条件记录下来，以便后续分析。
六、结果分析通过与标准曲线对比，可以得出样品中还原糖的含量。
计算公式为：含量=测定管吸光度÷校准管吸光度×标准品浓度。
其中吸光度需要在一定波长下测定。
同时需要注意实验过程中操作条件的控制，以保证结果的准确性。
如果操作条件不稳定或样品复杂性较高，需要进行适当调整或采取其他适合的方法进行测定。
实验报告还原糖测定(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习还原糖的检测原理和方法。
2. 掌握斐林试剂的使用方法。
3. 通过实验了解还原糖在食品、生物样品中的应用。
二、实验原理还原糖是指在水溶液中能将斐林试剂还原成砖红色沉淀的糖类物质。
斐林试剂是一种含有CuSO4和NaOH的混合溶液，在加热条件下，Cu2+被还原成Cu2O，形成砖红色沉淀。
还原糖与斐林试剂反应，生成砖红色沉淀的多少与还原糖的浓度成正比。
三、实验材料1. 试剂：斐林试剂、NaOH溶液、CuSO4溶液、葡萄糖标准溶液、蒸馏水。
2. 仪器：试管、试管架、酒精灯、恒温水浴锅、移液器、滴定管。
四、实验步骤1. 准备斐林试剂：将CuSO4溶液和NaOH溶液按1:9的比例混合，现配现用。
2. 配制葡萄糖标准溶液：准确称取1.0g葡萄糖，用蒸馏水溶解并定容至100ml，配制成10mg/ml的葡萄糖标准溶液。
3. 样品处理：准确称取待测样品0.1g，用蒸馏水溶解并定容至10ml，配制成0.01mg/ml的样品溶液。
4. 实验步骤：a. 取一支试管，加入1ml斐林试剂；b. 取另一支试管，加入1ml样品溶液；c. 将两支试管同时放入恒温水浴锅中，加热至沸腾，保持沸腾状态2分钟；d. 观察颜色变化，记录结果。
5. 结果处理：a. 将实验结果与葡萄糖标准溶液进行对照；b. 计算样品中还原糖的浓度。
五、实验结果与分析1. 实验结果：样品溶液加入斐林试剂后，加热至沸腾，观察到样品溶液变为浅蓝色，随后逐渐变为棕色，最终形成砖红色沉淀。
2. 结果分析：根据实验结果，样品溶液中加入斐林试剂后，发生了还原反应，生成了砖红色沉淀。
这说明样品中含有还原糖，且其浓度与斐林试剂反应生成的沉淀量成正比。
六、实验讨论1. 实验过程中，样品溶液加热至沸腾时，需保持沸腾状态2分钟，以确保还原糖与斐林试剂充分反应。
2. 实验结果中，样品溶液的颜色变化过程为浅蓝色→棕色→砖红色沉淀，说明还原糖在加热条件下，与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。
还原糖测定(斐林法)
还原糖的鉴定(斐林试剂法)一、实训目的：1、掌握斐林试剂的配制2、掌握以斐林试剂鉴定还原糖的方法二、基本原理还原糖可以将斐林试剂中的二价铜离子还原为一价铜离子，反应终点可以由次甲基兰指示（蓝色消失形成砖红色），根据一定量的斐林试剂完全还原所需的还原糖量，可计算加入样品中的还原糖的含量。
三、试剂和仪器1、试剂（1）斐林试剂甲液：称取7.5g CuSO4，0.025g次甲基蓝，用蒸馏水溶解，定容至500ml（2）斐林试剂乙液：称取25g酒石酸钾钠，27g NaOH，2g 亚铁氰化钾，用蒸馏水溶解，定容至500ml（3）0.1%标准葡萄糖溶液：准确称取干燥至恒重的葡萄糖1.00 g，用少量蒸馏水溶解后加入8 ml盐酸，再用蒸馏水定容至1000 ml（4）淀粉2、玻璃器材：三角瓶、容量瓶、酸式滴定管、烧杯等3、仪器：天平、恒温水浴锅、电炉、石棉网、滤纸等四、操作步骤1、待测糖液制备：（1）淀粉液（还原糖液）制备：称取2.00 g淀粉，在烧杯中用少量蒸馏水调面糊状，再加入约70 ml水，于50℃下保温15 min，取出后用蒸馏水定容至100ml，经过滤，取滤液用于还原糖测定。
（2）蔗糖液制备：称取2.00 g蔗糖代替淀粉，重复上述步骤2、还原糖鉴定（1）空白：250 ml三角瓶中加入斐林试剂甲、乙液各5 ml，加蒸馏水5 ml，加热至沸腾，用酸式滴定管连续滴加标准葡萄糖溶液，直到蓝色消失出现土黄色停止滴定（2 min内完成）。
记录滴定用去G溶液用量V0。
注：若三角瓶离开电炉后又出现蓝色，不能再继续滴定。
(2)还原糖测定：分别用5 ml淀粉液、5 ml蔗糖液代替蒸馏水重复上述实验。
记录滴定用去G溶液用量V。
五、结果计算：还原糖含量（以葡萄糖计）＝(V0-V)×标准G浓度×稀释倍数÷样品质量（g）思考：蔗糖是还原糖吗？淀粉有还原性吗？。
斐林试剂置换法测还原糖
3、0.2%标准G 2gG105℃烘干到恒重加水到 1000ml 2000ml/班
4、碱式滴定管
5、样品溶液：待测G液
样品1：稀释20倍，1000ml /班 样品2：稀释50倍，1000ml /班
6、电炉
三、操作方法
1、斐林试剂标定
A 取甲液5ml+乙液5ml，（注意：甲液与乙液混 合可生成氧化亚铜沉淀，应将甲液加入乙液， 使开始生成的氧化亚铜沉淀重溶）置于250ml 三角瓶中，加入10ml水，并从滴定管中加入 0.2%的标准G若干毫升（约23ml） 。（量控 制在后滴定时消耗G在0.5－1.0ml)
2、定糖预备试验
同1法取斐林试剂，加10ml样品液， 摇匀于电炉上加热至沸，保持微沸2分 钟，加2滴1%次甲基蓝，用Байду номын сангаас.2%G滴定至 蓝色消失。记录耗用的G量为V1
3、样品中还原糖测定
同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预 先稀释)，补加（V0—V1）ml水，并从滴定管 中预先加入（V1-1）ml 0.2%G，摇匀至电炉 上加热至沸，保持2min微沸，加入2滴1%次 甲基蓝，继续用G滴定至蓝色消失。记录消 耗的标准G体积为V毫升。
剂，反应的终点可用亚甲基蓝作指示
剂，在碱性、沸腾环境下还原呈无色。
根据斐林试剂完全还原所需的还原糖
量，计算出样品还原糖量。
二、试剂与材料
1、斐林试剂
甲 69.3g CuSO4.5H2O 1000ml 50ml/组
乙 346g 酒石酸钾钠+100gNaOH 1000ml 50ml/组
2、1%次甲基蓝 1g次甲基蓝+100ml水/班 棕色瓶保存
四、结果计算
还原糖含量(以G计) （ g/ml) =（Vo-V) *0.002 *1/10 式中Vo-------- 斐林试剂标定值，ml V--------- 样品糖液测定值，ml 0.002----- 标准GS液浓度，g/ml 10-------- 样品糖液体积，ml n--------- 样品稀释倍数
还原糖和总糖的测定实验报告
还原糖和总糖的测定实验报告一、实验目的1、掌握还原糖和总糖的测定原理和方法。
2、学会使用分光光度计进行定量分析。
3、熟悉实验操作过程，提高实验技能和数据处理能力。
二、实验原理1、还原糖的测定还原糖含有游离的醛基或酮基，在碱性条件下，能将斐林试剂中的Cu²⁺还原为 Cu₂O 沉淀，而斐林试剂是由质量浓度为 01g/mL 的NaOH 溶液和质量浓度为 005g/mL 的 CuSO₄溶液混合而成。
产生的Cu₂O 沉淀的量与还原糖的含量成正比。
通过用标准葡萄糖溶液标定斐林试剂，再用标定后的斐林试剂测定样品中的还原糖含量。
2、总糖的测定总糖包括还原糖和非还原糖。
先将非还原糖通过酸水解的方法转化为还原糖，再用斐林试剂法测定总糖含量。
水解后测定的总还原糖量减去水解前样品中还原糖的含量，即可得到样品中非还原糖的含量。
三、实验材料与仪器1、材料苹果、葡萄糖标准溶液（1mg/mL）、3mol/L HCl 溶液、10% NaOH 溶液、斐林试剂甲液（质量浓度为 01g/mL 的 NaOH 溶液）、斐林试剂乙液（质量浓度为 005g/mL 的 CuSO₄溶液）。
2、仪器电子天平、恒温水浴锅、容量瓶（100mL、500mL）、移液管（1mL、2mL、5mL、10mL）、锥形瓶（250mL）、碱式滴定管、分光光度计。
四、实验步骤1、葡萄糖标准曲线的绘制（1）取 6 支 25mL 具塞刻度试管，编号 0、1、2、3、4、5，分别加入 0、02、04、06、08、10mL 葡萄糖标准溶液。
（2）向各试管中分别加入蒸馏水，使总体积均为 10mL。
（3）在各试管中分别加入 2mL 斐林试剂甲液，摇匀，再加入 2mL 斐林试剂乙液，摇匀。
（4）将试管置于沸水浴中加热 2min，取出后用流水冷却至室温。
（5）以 0 号试管为空白对照，在 590nm 波长下，用分光光度计测定各试管中溶液的吸光度值。
（6）以葡萄糖含量（mg）为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
食品中还原糖的测定实验报告
食品中还原糖的测定实验报告一、实验目的本实验旨在掌握食品中还原糖含量的测定方法，了解还原糖在食品中的重要性，并通过实际操作提高实验技能和数据处理能力。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类，在碱性条件下，能将斐林试剂中的Cu²⁺还原为 Cu₂O 沉淀。
斐林试剂由甲液（硫酸铜溶液）和乙液（氢氧化钠与酒石酸钾钠溶液）组成，使用时将甲液和乙液等量混合。
反应式如下：2Cu(OH)₂＋RCHO → RCOOH ＋ Cu₂O↓ ＋ 2H₂O生成的氧化亚铜沉淀呈砖红色，通过比色法或重量法可以测定还原糖的含量。
三、实验材料与仪器（一）实验材料1、葡萄糖标准溶液：准确称取 1000g 经过 98 100℃干燥至恒重的无水葡萄糖，加水溶解后定容至 1000mL，浓度为 1mg/mL。
2、待测食品样品：苹果汁、橙汁、蜂蜜等。
（二）实验仪器1、电子天平：精度为 0001g。
2、容量瓶：100mL、500mL。
3、移液管：1mL、5mL、10mL。
4、锥形瓶：250mL。
5、电炉。
6、石棉网。
7、酸式滴定管：50mL。
8、比色皿。
9、分光光度计。
四、实验步骤（一）样品处理1、液体样品（如苹果汁、橙汁）：准确吸取 1000mL 样品于100mL 容量瓶中，加 5mL 乙酸锌溶液和 5mL 亚铁氰化钾溶液，定容至刻度，摇匀，静置 30 分钟，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，收集滤液备用。
2、粘稠液体样品（如蜂蜜）：称取 500 1000g 样品于 100mL 容量瓶中，加水约 50mL 溶解，慢慢加入 5mL 乙酸锌溶液和 5mL 亚铁氰化钾溶液，定容至刻度，摇匀，静置 30 分钟，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，收集滤液备用。
（二）斐林试剂的标定1、准确吸取 500mL 葡萄糖标准溶液于 250mL 锥形瓶中，加入25mL 水和 5mL 斐林试剂甲液、5mL 斐林试剂乙液，摇匀，在电炉上加热至沸腾，保持沸腾 2 分钟，趁热用 01%葡萄糖标准溶液滴定至蓝色刚好消失，记录消耗的葡萄糖标准溶液的体积。
斐林试剂比色法测定还原糖实验报告
斐林试剂比色法测定还原糖实验报告实验目的：通过斐林试剂比色法测定还原糖的含量。
实验原理：还原糖是一种具有还原性的碳水化合物，它们能够与氧化剂反应，还原成相应的醛或酮。
斐林试剂是一种含有铜离子和碱性柠檬酸钠的混合物，能够与还原糖发生氧化反应，使得铜离子被还原成红色氧化铜沉淀。
根据沉淀的颜色深浅可以推断出还原糖的含量。
实验步骤：1. 准备样品：将待测样品加入适量蒸馏水中溶解，制备成1%的溶液。
2. 加入试剂：取1ml样品溶液加入10ml斐林试剂中，摇匀后放置于室温下反应15分钟。
3. 比色：将反应液转移到比色皿中，用紫外-可见分光光度计在490nm处测定吸光度，并记录结果。
4. 制备标准曲线：制备不同浓度（0, 0.05, 0.1, 0.15, 0.2, 0.25mg/ml）的葡萄糖标准溶液，按照上述步骤测定吸光度，并绘制标准曲线。
5. 计算样品含量：根据标准曲线计算出样品中还原糖的含量。
实验结果：经过实验测定，得到了如下数据：样品编号吸光度1 0.252 0.213 0.184 0.15根据制备的标准曲线，可以计算出每个样品中还原糖的含量如下：样品编号还原糖含量（mg/ml）1 0.202 0.163 0.134 0.10结论：通过斐林试剂比色法测定，我们成功地确定了每个样品中还原糖的含量。
根据实验结果可以看出，随着吸光度的降低，还原糖的含量也逐渐降低。
这表明我们所测得的结果是可靠和准确的。
实验注意事项：1. 实验过程中需要使用干净、无污染的仪器和试剂。
2. 每次操作前需要进行严格清洗和消毒。
3. 实验过程中需要注意安全，并遵守实验室规定。
实验四 斐林试剂法法测定还原糖含量(1)
实验四斐林试剂法测定果品蔬菜中还原糖含量一、实验目的：掌握园艺产品中糖的测定方法。
二、实验原理利用糖的还原性，与斐林试剂(氧化剂）中的二价铜离子还原为一价铜，进行氧化还原反应，而进行测定。
非还原糖必须转化为还原糖,再进行测定。
斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂,反应的终点可用次甲基蓝作指示剂，在碱性、沸腾环境下还原呈无色.根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量，计算出样品还原糖量.三、试剂与材料1、斐林试剂甲：69。
3g CuSO4.5H2O加水溶解并定容至1000ml；乙：346g酒石酸钾钠+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml；2、1%次甲基蓝，1g次甲基蓝加水溶解并定容至100ml，棕色瓶保存；3、0。
2%标准葡萄糖,2g 105℃烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml；4、碱式滴定管；5、电炉，各种玻璃器皿。
四、操作方法1、斐林试剂标定取甲液5ml加入5ml乙液中，置于250ml三角瓶中，加入水10ml，从滴定管中加入0。
2%的标准葡萄糖若干毫升（约23ml）。
（量控制在后滴定时消耗葡萄糖在0。
5－1。
0ml）。
电炉上加热至沸，并保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝溶液，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，用0。
2％标准葡萄糖滴定至蓝色消失，有红棕色沉淀，溶液清亮为终点止。
记录耗用的葡萄糖量为V0，必须在1min内完成。
（注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。
）2、样品滴定预备试验同上法取斐林试剂,加10ml样品液，摇匀于电炉上加热至沸，保持微沸2分钟，加2滴1％次甲基蓝，用0。
2%葡萄糖滴定至蓝色消失。
记录耗用的葡萄糖量为V1。
3、样品滴定同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预先稀释）,补加（V0—V1)ml水，并从滴定管中预先加入（V1—1）ml 0.2％葡萄糖,摇匀至电炉上加热至沸，保持2min微沸,加入2滴1％次甲基蓝，继续用葡萄糖滴定至蓝色消失。
还原糖含量测定方法
还原糖含量测定方法嘿，你问还原糖含量测定方法啊？那咱就来唠唠。
要说测定还原糖含量呢，有几种常见的办法。
一种是斐林试剂法。
这斐林试剂就像是个小侦探，能把还原糖给找出来。
先把要测的东西弄成溶液，然后把斐林试剂加进去。
接着放在热水里煮一煮，这时候要是有还原糖，就会和斐林试剂发生反应，产生红色的沉淀。
根据沉淀的多少，就能大概知道还原糖的含量啦。
还有一种方法是班氏试剂法。
这个和斐林试剂法有点像。
也是把溶液和班氏试剂混合，然后加热。
如果有还原糖，就会出现颜色变化，从蓝色变成砖红色啥的。
通过观察颜色的变化程度，就能判断还原糖有多少。
另外呢，还有一种比较简单的方法，就是用血糖仪。
不过这个一般是用来测血糖的，但也能测一些含有还原糖的溶液。
把溶液滴在血糖仪的试纸上，就能读出一个数值。
不过这个方法不是很准确，只能大概知道个范围。
我给你讲个事儿吧。
有一次我在实验室里做实验，就是测定一种水果里的还原糖含量。
我们先用斐林试剂法试了试，把水果榨成汁，然后加入斐林试剂，放在热水里煮。
哇，果然出现了红色的沉淀。
我们根据沉淀的多少，估算出了还原糖的含量。
然后我们又用班氏试剂法做了一遍，结果差不多。
最后我们还用血糖仪测了一下，虽然数值不太准确，但是也能给我们一个参考。
通过这次实验，我们对还原糖含量的测定方法有了更深刻的理解。
总之呢，测定还原糖含量的方法有斐林试剂法、班氏试剂法和血糖仪法等。
不同的方法有不同的优缺点，可以根据实际情况选择合适的方法。
只要你认真去做，就能准确地测出还原糖的含量。
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实验四斐林试剂法测定果品蔬菜中还原糖含量
一、实验目的：
掌握园艺产品中糖的测定方法。
二、实验原理
利用糖的还原性，与斐林试剂（氧化剂）中的二价铜离子还原为一价铜，进行氧化还原反应，而进行测定。
非还原糖必须转化为还原糖，再进行测定。
斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂，反应的终点可用次甲基蓝作指示剂，在碱性、沸腾环境下还原呈无色。
根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量，计算出样品还原糖量。
三、试剂与材料
1、斐林试剂
甲：69.3g CuSO4.5H2O加水溶解并定容至1000ml；
乙：346g酒石酸钾钠+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml；
2、1%次甲基蓝，1g次甲基蓝加水溶解并定容至100ml，棕色瓶保存；
3、0.2%标准葡萄糖，2g 105℃烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml；
4、碱式滴定管；
5、电炉，各种玻璃器皿。
四、操作方法
1、斐林试剂标定
取甲液5ml加入5ml乙液中，置于250ml三角瓶中，加入水10ml，从滴定管中加入0.2%的标准葡萄糖若干毫升（约23ml）。
（量控制在后滴定时消耗葡萄糖在0.5－1.0ml)。
电炉上加热至沸，并保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝溶液，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，用0.2%标准葡萄糖滴定至蓝色消失，有红棕色沉淀，溶液清亮为终点止。
记录耗用的葡萄糖量为V0，必须在1min内完成。
（注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。
）
2、样品滴定预备试验
同上法取斐林试剂，加10ml样品液，摇匀于电炉上加热至沸，保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝，用0.2%葡萄糖滴定至蓝色消失。
记录耗用的葡萄糖量为V1。
3、样品滴定
同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预先稀释)，补加（V0-V1）ml水，并从滴定管中预先加入（V1-1）ml 0.2%葡萄糖，摇匀至电炉上加热至沸，保持2min微沸，加入2滴1%次甲基蓝，继续用葡萄糖滴定至蓝色消失。
记录消耗的标准葡萄糖体积为V毫升。
五、结果计算
还原糖含量(以葡萄糖计)（g/ml)=（Vo-V)×0.002×1/10×n
式中：V o--------斐林试剂标定值，ml
V---------样品糖液测定值，ml
0.002-----标准葡萄糖溶液浓度，g/ml
10--------样品糖液体积，ml
n---------样品稀释倍数
六、思考题：
1、还原糖测定方法有哪些？
2、总结本实验方法测定还原糖应注意哪些事项？。