还原糖的测定方法国标
还原糖测定法ZBX66040—87
还原糖测定法ZB X 66040中华人民共和国专业标准,还原糖测定法ZB X 66040—87Determination of reduced sugar━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━1 亚铁氰化钾快速法1.1 试剂与溶液1、费林氏甲液称取分析纯硫酸铜(CuSO4·5H2O)15g及四甲基蓝(次甲基蓝) 0.05g,用蒸馏水溶解,淀容至1000mL。
2、费林氏乙液称取分析纯酒石酸钾钠50g,分析纯氢氧化钠54g及分析纯亚铁氰化钾4g,用蒸馏水溶解,定容至1000mL。
3、乙酸锌溶液:称取21.9g乙酸锌,加3ml冰乙酸,加水稀释至100ml.4、亚铁氰化钾溶液:称取10.6g亚铁氰化钾,加水溶解并稀释至100ml5、0.1%葡萄糖标准溶液精确称取在105℃烘2~3h至恒重的分析纯无水葡萄糖1.000g,放入100mL烧杯中,用蒸馏水溶解,定容至1000mL,为防染菌,可加5mL浓盐酸后再定容。
1.2 测定方法1.2.1 样品处理及吸取精确吸取样品10mL,用蒸馏水稀释定容至100mL,摇匀吸取稀释液1mL进行测定。
稀释度及吸取量根据含糖量可予增减。
1.2.2 空白滴定精确吸取费林甲、乙液各5mL放入150mL锥形瓶中,加蒸馏水10mL。
再用滴定管加入0.1%葡萄糖标准液9mL。
摇匀在电炉(或煤气灯)上加热,使其在2min内沸腾,沸腾30s后,匀速滴入0.1%葡萄糖标准液至蓝色消失即为终点。
记录沸腾前后共耗用葡萄糖液毫升数(A)。
1.2.3 预备滴定精确吸取费林甲、乙液各5mL,放入150mL锥形瓶中,加蒸馏水10mL,再加1mL10%样品稀释液。
根据样品含糖量的高低(估计数),可用糖液滴定管先加入一定量的0.1%葡萄糖液(空白滴定耗用葡萄糖液一般在10mL以上),摇匀加热,沸腾30S后,匀速滴入0.1%葡萄糖液,至蓝色消失即为终点,记下沸腾前后共耗用0.1%葡萄糖标准液毫升数,作正式滴定时参考用。
还原糖的检验方法和具体步骤
还原糖的检验方法和具体步骤如下:
1. 检验方法:使用班氏试剂或斐林试剂检测还原糖。
首先观察试剂的颜色变化,然后加入待测样品,将试管放入水浴加热的烧杯中。
2. 具体步骤:
(1)在试管中加入2ml待测样品溶液。
(2)向试管中加入5滴班氏试剂或斐林试剂。
(3)将试管放入水浴加热的烧杯中,观察颜色变化。
如果试管中出现砖红色沉淀或蓝色沉淀,则说明待测样品中含有还原糖。
这是因为班氏试剂或斐林试剂主要用于检测还原性糖,如葡萄糖,而葡萄糖在加热条件下会与组织中的蛋白质生成砖红色沉淀。
此外,斐林试剂还可以与醛基反应生成蓝色沉淀。
需要注意的是,检测还原糖需要待测样品中的还原糖与试剂发生反应,因此需要确保待测样品溶液是新鲜的、未被污染的。
此外,检测过程中需要控制好温度、时间等条件,以确保实验结果的准确性。
还原糖的测定方法_国标.pdf
食物中还原糖的测定方法:高锰酸钾滴定法和直接滴定法。
一、高锰酸钾滴定法1.原理样品经除去蛋白质后,其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜,加硫酸铁后,氧化亚铜被氧化为铜盐,以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐,根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量,再查表得还原糖量。
2.适用范围,本法适用于所有食品中还原糖的测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖的非还原性糖类物质的测定。
3.仪器(1)滴定管(2) 25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚(3)真空泵(4)水浴锅4.试剂除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。
6 mol/L盐酸:量取50ml盐酸加水稀释至100 ml。
甲基红指示剂:称取10mg甲基红,用100ml乙醇溶解。
5 mol/L氢氧化钠溶液:称取20g氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml。
碱性酒石酸铜甲液:称取硫酸铜(CuSO4·5H2O),加适量水溶解,加硫酸,再加水稀释至500ml,用精制石棉过滤。
碱性酒石酸铜乙液:称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠,加适量水溶解,并稀释至500ml,用精制石棉过滤,贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
精制石棉:取石棉先用3mol/L盐酸浸泡2~3天,用水洗净,再加L氢氧化钠溶液浸泡2~3天,倾去溶液,再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时,用水洗净。
再以3 mol/L 盐酸浸泡数小时,以水洗至不呈酸性。
然后加水振摇,使成微细的浆状软县委,用水浸泡并贮存于玻璃瓶中,即可用做填充古氏坩埚用。
L高锰酸钾标准溶液。
1mol/L氢氧化钠溶液:称取4g 氢氧化钠,加水溶解并稀释至100ml。
硫酸铁溶液:称取50g硫酸铁,加入200ml水溶解后,慢慢加入100ml硫酸,冷却后加水稀释至1L。
3mol/L盐酸:量取30ml盐酸,加水稀释至120ml。
5. 操作方法样品处理:乳类、乳制品及含蛋白质的食品:称取约~ 2 g固体样品(吸取2~10 ml液体样品),置于250 ml容量瓶中,加50 ml水,摇匀。
还原糖的测定直接滴定法(GB法)
Y f ( A, K , L,)
• 投入的生产要素
• 最大产出量
⑵
生产函数模型的发展
从20年代末,美国数学家Charles Cobb和经济 学家Paul Dauglas提出了生产函数这一名词, 并用1899-1922年的数据资料,导出了著名的 Cobb-Dauglas生产函数。
1928年 Cobb, Dauglas 1937年 Dauglas,Durand 进型 1957年 Solow 进型 1960年 Solow 生产 函数
酒石酸钾钠氢氧化钠亚铁氰化钾?甲乙液分别贮存测定时甲乙液等体积混合硫酸铜氢氧化钠氢氧化铜chohchohcoonacuoh2hchccoonacookcookoocu2h2ochohchohcoona2h2ocookcohchoh4ch2oh2coohchoh4ch2ohcu2ohchccoonacookoocu2h2o2cohchoh4ch2ohsnnh3c2nch32clh2o蓝色coohchoh4ch2ohshnnh3c2nch32hcl无色高锰酸钾滴定法cu2还原糖cufe3cufe2cu2mno4fe2fe3mno22高锰酸钾溶液需标定称取草酸钠高锰酸钾溶液需标定称取草酸钠gb1289基准物105干燥2h存于干燥器中01g准确至00002g溶于50ml水中再加硫酸溶液水中再加硫酸溶液3210ml将此溶液加热至7585用配制好的高锰酸钾用配制好的高锰酸钾35滴定溶液呈现粉红色且1min不褪色为终点滴定结束时滴定结束时溶液温度在60以上同时作空白试验
⑵ 规模报酬
所有要素的产出弹性之和
规模报酬不变
规模报酬递增
规模报酬递减
为什么经常将规模报酬不变作为生产函数必 须满足的条件?
食品中总糖的测定国标的方法
食品中总糖的测定国标的方法一、糕点、糖果中还原糖的测定1、直接滴定法1)原理:样品经除去蛋白质后,在加热条件下,直接滴定经标定的碱性酒石酸铜溶液,还原糖将二价铜还原为氧化亚铜。
以亚甲基蓝为指示剂,在终点稍过量的还原糖将蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝,根据试样所消耗的体积计算还原糖的含量。
直接滴定法已经过多次改进,只要严格遵守实验条件,分析结果的准确度和重现性是能够满足定量分析的要求。
2)试剂①费林氏剂甲液:称取15g硫酸铜(CuSO4·5H2O)及0.05g四甲基蓝,溶于水中并稀释至1000ml。
②费林氏剂乙液:称取50g酒石酸钾钠及75gNaOH,溶于水中,再加入4g亚铁氰化钾,完全溶解后,用水稀释至1000ml,贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
③乙酸锌溶液:称取乙酸锌结晶21.9g,加3ml冰醋酸,加水溶解至100ml。
④106g/l亚铁氰化钾溶液。
⑤葡萄糖标准溶液:准确称取1.0000g经过96±2℃干燥2h的纯葡萄糖,加水溶解后加入5mlHCl,并以水稀释至1000ml。
此溶液每1ml相当于1.0mg葡萄糖。
3)操作方法①样品处理:准确称取样品(粉碎后的)2.5~5.0g置于250ml容量瓶中,加水50ml,摇匀后慢慢加入5ml乙酸锌溶液,混匀后再慢慢加入5ml亚铁氰化钾溶液,振摇,加水定容并摇匀后静置30min,用干滤纸过滤,弃去初始滤液,过滤液备用。
②标定碱性酒石酸铜溶液:吸取 5.00ml碱性酒石酸铜甲液及5.00ml碱性酒石酸铜乙液,置于250ml锥形瓶中,加水10ml,加入玻璃珠3粒,从滴定管加约9ml标准葡萄糖液,使其在2min内加热至沸。
趁热以0.5滴/s的速度继续滴加糖液,直至溶液颜色刚好褪去为终点,记录消耗葡萄糖液的体积。
平行操作3次,得m平均消耗葡萄糖液的体积。
计算每10ml(甲、乙各5ml)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(mg),即m=v×c式中m——10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(mg)v——标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积c——葡萄糖标准溶液的浓度(mg/ml)③样品溶液的预测定:吸取费林氏甲、乙液各5ml,置于150ml 三角瓶中,加水10ml、玻璃珠2粒,控制在2min内加热至沸,趁沸以先快后慢的速度,从滴定管中加样液,趁沸以0.5滴/s的速度继续滴定至蓝色刚好褪去为终点,记录消耗样液的体积。
NYT 1751-2009 甜菜还原糖的测定
中华人民共和国农业行业标准NY/T 1751—2009甜菜还原糖的测定Determination of reducing sugar in sugar beet root2009-04-23发布2009-05-20实施前 言本标准由中华人民共和国国国部种植国管理司提出并归口。
本标准起草单位:国国部甜菜品质监督检验测试中心、中国国国科学院甜菜研究所。
本标准主要起草人:周芹、吴玉梅、耿贵、吴庆峰、倪洪涛、周建朝。
甜菜还原糖的测定1 范围本标准规定了甜菜块根中还原糖含量的测定方法。
本标准适用于甜菜块根中还原糖含量的测定。
2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 10496—2002 糖料甜菜3 原理在沸腾条件下,还原糖与过量奥夫尼尔试剂反应生成相当量的Cu2 O沉淀,冷却后加入盐酸使溶液呈酸隆,并使Cu2O沉淀溶解。
然后加入过量碘溶液进行氧化,用硫代硫酸钠溶液滴定过量的碘,其反应式如下:硫代硫酸钠标准溶液空白试验滴定量减去其样品试验滴定量得到一个差值,由此差值便可计算出还原糖的量。
4 试剂与溶液除非另有说明,在分析中仅使用确认的分析纯试剂,试验用水应符合GB 6682规定的三级水要求。
4.1 粉状碳酸钙(CaCO3)。
4.2 广泛pH试纸。
4.3 冰乙酸(CH3COOH)。
4.4盐酸(HCl )。
4.5盐酸溶液(6 mol/L):吸取50.0 mL盐酸幔慢加入100 mL容量瓶中,用水定容至刻度。
4.6 盐酸溶液(1 mol/L):吸取84 mL盐酸慢慢加入500 mL水,用水定容至1 000 mL容量瓶中。
4.7 碘化钾溶液(250g/L):称取碘化钾(KI)25.0 g,溶于水,移人100 mL容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。
还原糖的测定方法_国标
还原糖的测定方法(1)食物中还原糖的测定方法:高锰酸钾滴定法和直接滴定法。
一、高锰酸钾滴定法1.原理样品经除去蛋白质后,其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜,加硫酸铁后,氧化亚铜被氧化为铜盐,以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐,根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量,再查表得还原糖量。
2.适用范围GB5009.7-85,本法适用于所有食品中还原糖的测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖的非还原性糖类物质的测定。
3.仪器(1)滴定管(2)25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚(3)真空泵(4)水浴锅4.试剂除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。
4.1 6 mol/L盐酸:量取50ml盐酸加水稀释至100 ml。
4.2 甲基红指示剂:称取10mg甲基红,用100ml乙醇溶解。
4.3 5 mol/L氢氧化钠溶液:称取20g氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml。
4.4 碱性酒石酸铜甲液:称取34.639g 硫酸铜(CuSO4·5H2O),加适量水溶解,加0.5ml硫酸,再加水稀释至500ml,用精制石棉过滤。
4.5 碱性酒石酸铜乙液:称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠,加适量水溶解,并稀释至500ml,用精制石棉过滤,贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
4.6 精制石棉:取石棉先用3mol/L盐酸浸泡2~3天,用水洗净,再加2.5mol/L氢氧化钠溶液浸泡2~3天,倾去溶液,再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时,用水洗净。
再以3 mol/L 盐酸浸泡数小时,以水洗至不呈酸性。
然后加水振摇,使成微细的浆状软县委,用水浸泡并贮存于玻璃瓶中,即可用做填充古氏坩埚用。
4.7 0.1000mol/L高锰酸钾标准溶液。
4.8 1mol/L氢氧化钠溶液:称取4g 氢氧化钠,加水溶解并稀释至100ml。
4.9 硫酸铁溶液:称取50g硫酸铁,加入200ml水溶解后,慢慢加入100ml硫酸,冷却后加水稀释至1L。
4.10 3mol/L盐酸:量取30ml盐酸,加水稀释至120ml。
食品中总糖、还原糖的测定
食品中转化糖(总糖)、还原糖的测定1安全性评估谨防试剂灼伤:加入碱性酒石酸铜甲乙液、20%氢氧化钠和2%盐酸试剂时,需佩戴一次性乳胶手套。
谨防玻璃割伤:使用前检查玻璃仪器外观完好无损,使用时注意轻拿轻放,清洗时,需佩戴防割手套。
谨防高温烫伤:滴定时,调节滴定管滴定速度的手需佩戴涂脂手套/一次性乳胶手套,且不裸露手腕皮肤,双手不碰及电陶炉表面。
2 目的规范食品中转化糖(总糖)、还原糖的检测流程,确保检测结果的准确性。
3 范围适用于各类食品中转化糖(总糖)、还原糖的测定。
4 依据参照GB 5009.7 - 2016食品安全国家标准食品中还原糖的测定、GB 5009.8 - 2016食品安全国家标准食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定。
5 检测原理还原糖(直接滴定法):试样经除去蛋白质后,在加热条件下,以亚甲基蓝作指示剂,滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(用葡萄糖标准溶液标定),根据样品液消耗体积计算还原糖含量。
转化糖(总糖)(酸水解-莱茵-埃农氏法):试样经除去蛋白质后,其中蔗糖经盐酸水解转化为还原糖,再按还原糖测定,根据样品液消耗体积计算转化糖(总糖)含量。
注:①为消除氧化亚铜沉淀对滴定终点观察的干扰,在碱性酒石酸铜乙液中加入少量亚铁氰化钾,使之与Cu2O生成可溶性的无色络合物,而不再析出红色沉淀,其反应如下:Cu2O↓+K4Fe(CN)6+H2O=K2Cu2Fe(CN)6+2KOH②碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别贮存,用时才混合,否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀,使试剂有效浓度降低。
6 试剂和仪器:实验室三级用水6.1 试剂2 %盐酸溶液,20 %氢氧化钠溶液,碱性酒石酸铜溶液:碱性酒石酸铜甲液(以下简称A 液)(硫酸铜+亚甲基蓝)+碱性酒石酸铜乙液(以下简称B液)(酒石酸钾钠+氢氧化钠+亚铁氰化钾),乙酸锌溶液(219 g/L),亚铁氰化钾溶液(106 g/L),葡萄糖标准溶液。
《还原糖的测定方法国标》
《还原糖的测定方法_国标》还原糖的测定方法_国标一、范围本标准规定了用斐林试剂比色法测定试样中还原糖的含量。
本标准适用于所有食物样品中还原糖的测定。
二、原理还原糖与斐林试剂在加热条件下生成砖红色沉淀,通过与标准曲线对比,可以得出样品中还原糖的含量。
三、试剂和材料斐林试剂:甲液(称取14.3g硫酸铜(CuSO4·5H2O)和0.05g次甲基蓝(C13H16N3OClS)溶于水中,定容至100ml)、乙液(称取173g酒石酸钾钠(C4H4O6NaK·4H2O)和50g氢氧化钠溶于水中,定容至500ml)。
使用时将甲液、乙液等体积混合。
四、仪器和设备1.实验室用粉碎机2.水浴锅3.消煮炉或普通炉灶(能调节温度)4.容量瓶(100ml)5.移液管(10ml)6.比色管(10ml)7.试管(25ml)8.三角瓶(250ml)9.定时钟五、样品制备1.固体样品:取样品适量,用粉碎机粉碎,然后称取约0.2g样品置于试管中。
2.液体样品:直接取适量样品置于试管中。
3.在每个试管中加入4ml斐林试剂,充分混匀后静置10min。
4.将试管中的溶液倒入三角瓶中,加入约80ml水稀释,加热至沸后保持1min。
5.用移液管向每个试管中加入1ml样液,摇匀后置于试管架上。
6.在温度达到要求时将试管放入水浴中加热,同时开启计时器。
当时间达到要求时立即取出试管,用自来水冷却至室温。
7.将冷却后的溶液用移液管倒入比色管中,再加入约1ml的样液摇匀。
8.将比色管置于比色槽中,与标准曲线进行比色,得出样品的含量。
9.将整个测定过程中每个环节的时间、温度等条件记录下来,以便后续分析。
六、结果分析通过与标准曲线对比,可以得出样品中还原糖的含量。
计算公式为:含量=测定管吸光度÷校准管吸光度×标准品浓度。
其中吸光度需要在一定波长下测定。
同时需要注意实验过程中操作条件的控制,以保证结果的准确性。
如果操作条件不稳定或样品复杂性较高,需要进行适当调整或采取其他适合的方法进行测定。
还原糖的测定直接滴定法(GB法.
COONa
H (CHOH)4 CH2OH
C
O N + N(H3C)2 S
蓝色
N (CH3)2Cl
+
-
+
H2O
COOH (CHOH)4 CH2OH
H N
+
N(H3C)2 S
无色
+ HCl N (CH3)2
+
高锰酸钾滴定法
Cu2+ + 还原糖 MnO4- + Fe2+
高锰酸钾溶液需标定 称取草酸钠(GB1289基准物,105℃干燥2h,存于干燥器中) 0.1g,准确至0.0002g,溶于 50mL水中,再加硫酸溶液 (3.2)10mL,将此溶液加热至75~85℃,用配制好的高锰 酸钾(3.5)滴定,溶液呈现粉红色且1min不褪色为终 点,滴 定结束时,溶液温度在60℃以上, 同时作空白试验。
COOK CHOH Cu(OH)2 + CHOH COONa
COOK HC HC
O O
Cu+2H 2O
COONa
COOK HC 2 HC
O O
C Cu+2H2O +
O 2
COOK CHOH CHOH COONa COOH + (CHOH)4 CH 2OH + Cu2 O
H (CHOH)4 + 2H2O CH2 OH
Cu+ Fe3+ + MnO2
Fe3+ + Cu+ = Fe2+ + Cu2+
萨氏(Somogyi)法
Cu2+ + 还原糖
2Cu+ + I2 = 2Cu2+ = I2 + 2 Na2S2O3
27食品中还原糖的测定
>100 g/L(甜黄酒)
浓缩橙汁
蔗糖(复原后)≤50g/kg
还原糖
• 还原糖:葡萄糖、果糖、乳糖和麦芽糖 • 在糖类中,分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离
半缩醛羟基的双糖都具有还原性
原理
• 将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合,立即生成 天蓝色的氢氧化铜沉淀,这种沉淀很快与酒石酸钾钠反 应,生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。
石酸钾钠铜反应,生成红色的氧化亚铜沉淀 继续滴定,待二价铜全部被还原后,稍过量的还原糖把次甲基蓝还原,溶液
由蓝色变为无色,即为滴定终点 根据样液的消耗量可以算出还原糖的含量。 滴定过程中颜色的变化
蓝色 红色 蓝色 无色
试验流程
1、费林试剂的标定 2、样品溶液的预测定 3、样品溶液测定
样品预处理
注意事项
• (1)热源强度应控制在使反应液在2min内沸腾,滴定 速度为每1d/2s,总沸腾时间为3min。
• (2)滴定时不能随意摇动锥形瓶,更不能把锥形瓶从热 源上拿下来滴定,以防止空气进入反应溶液中。
• (3)为了提高测定的准确度,要求用哪种还原糖表示结 果就用相应的还原糖标定碱性酒石酸铜溶液,如用葡萄 糖表示结果就用葡萄糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液。
镇江香醋(4.5%, 5.0%,5.5%, 6.0%)
还原糖(以葡萄糖计)≥2.00,≥2.20, ≥2.30,≥2.50 g/100mL
蜂蜜
葡萄糖和果糖≥60 g/100g; 蔗糖≤10g/100g(野桂花蜜),
≤10g/100g(其他蜂蜜)
黄酒
总糖含量≤15.0g/L(干黄酒), 15.1g/L~40.0 g/L(半干黄酒), 40.1 g/L~100 g/L(半甜黄酒),
还原糖含量测定国标标准(一)
还原糖含量测定国标标准(一)还原糖含量测定国标标准•还原糖含量介绍•国家标准制定背景•标准制定的目的和意义•标准制定的内容•标准实施的作用•总结与展望还原糖含量介绍还原糖是指糖类物质被加热或者酸处理后的糖。
还原糖含量是食品中存在的糖类物质,是食品中营养成分的一个重要指标之一。
国家标准制定背景为了规范食品中还原糖含量的测定方法,加强对食品中还原糖含量的管理,我国于2016年制定了《食品还原糖测定》国家标准。
标准制定的目的和意义该标准的制定,旨在规范食品还原糖含量的测定方法,保障食品安全和消费者权益。
标准制定的内容该标准主要包括以下内容: 1. 术语和定义; 2. 试剂和仪器的要求;3. 样品的制备;4. 还原糖含量的测定方法;5. 结果计算和报告。
标准实施的作用该标准实施后,对于食品企业、食品检测机构以及消费者都有着重要的意义: 1. 对于食品企业:规范还原糖含量的测定方法,提高产品质量,满足国家食品安全标准。
2. 对于食品检测机构:统一测定方法和判定标准,提高检测精度和结果的可靠性。
3. 对于消费者:保证食品安全和消费权益,促进食品市场健康有序的发展。
总结与展望国家标准制定的目的在于保障公众健康和食品安全,对于加强对食品还原糖含量的监管和控制,具有重要的推动作用。
未来还需进一步完善标准体系,加强监督管理,保障食品安全和消费者权益。
还原糖含量测定方法根据国家标准《食品还原糖测定》的规定,测定还原糖含量的方法分为两种,一种是硫酸铜法,另一种是二氧化氮法。
两种方法具体步骤如下:硫酸铜法测定方法1.样品制备:将样品磨碎并过筛,取0.5克到1克的样品加入容量为100毫升的三角瓶中,加入适量蒸馏水。
2.加入试剂:加入5毫升的硫酸铜溶液,摇匀后加入2毫升的10%的钠碱溶液(约为200克/升),直至底部出现暗蓝色固体沉淀,再加入10毫升的钠饮料溶液(约为400克/升),摇匀。
3.加入蓝色还原剂:加入5毫升的蓝色还原剂,摇匀后再加入1毫升的蒸馏水,摇匀。
还原糖的测定方法_国标
还原糖的测定方法(1)食物中还原糖的测定方法:高锰酸钾滴定法和直接滴定法。
一、高锰酸钾滴定法1.原理样品经除去蛋白质后,其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜,加硫酸铁后,氧化亚铜被氧化为铜盐,以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐,根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量,再查表得还原糖量。
2.适用范围GB5009.7-85,本法适用于所有食品中还原糖的测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖的非还原性糖类物质的测定。
3.仪器(1)滴定管(2)25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚(3)真空泵(4)水浴锅4.试剂除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。
4.1 6 mol/L盐酸:量取50ml盐酸加水稀释至100 ml。
4.2 甲基红指示剂:称取10mg甲基红,用100ml乙醇溶解。
4.3 5 mol/L氢氧化钠溶液:称取20g氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml。
4.4 碱性酒石酸铜甲液:称取34.639g 硫酸铜(CuSO4·5H2O),加适量水溶解,加0.5ml硫酸,再加水稀释至500ml,用精制石棉过滤。
4.5 碱性酒石酸铜乙液:称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠,加适量水溶解,并稀释至500ml,用精制石棉过滤,贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
4.6 精制石棉:取石棉先用3mol/L盐酸浸泡2~3天,用水洗净,再加2.5mol/L氢氧化钠溶液浸泡2~3天,倾去溶液,再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时,用水洗净。
再以3 mol/L 盐酸浸泡数小时,以水洗至不呈酸性。
然后加水振摇,使成微细的浆状软县委,用水浸泡并贮存于玻璃瓶中,即可用做填充古氏坩埚用。
4.7 0.1000mol/L高锰酸钾标准溶液。
4.8 1mol/L氢氧化钠溶液:称取4g 氢氧化钠,加水溶解并稀释至100ml。
4.9 硫酸铁溶液:称取50g硫酸铁,加入200ml水溶解后,慢慢加入100ml硫酸,冷却后加水稀释至1L。
4.10 3mol/L盐酸:量取30ml盐酸,加水稀释至120ml。
项目46食品中还原糖的测定
任务四:检验结果的数据处理
项目名称
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
接样日期
检验依据
锥形瓶标记(标定)
V0初
标定
V0终
V0
10mL酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的量 m1=c0×V0
酒石酸铜溶液当量平均值m1
样品质量m
锥形瓶标记(正式滴定)
V初
正式滴定
V终
V
计算公式
葡萄糖含量(g/100g) 平均值(g/100g)
标准规定分析结果的精密度 本次试验分析结果的精密度
❖ 硫酸铜和氢氧化钠溶液—50~75mL样液加入10mL硫酸铜溶液和4mL氢 氧化钠溶液。
❖ 费林试剂法选用乙酸锌和亚铁氰化钾作为澄清剂,各5mL ❖ 注意: ❖ ①乙酸锌和亚铁氰化钾混合形成白色的氰亚铁酸锌沉淀,能使溶液中的
蛋白质等共同沉淀下来。
❖ ②采用中性醋酸铅做澄清剂时,澄清后的样液中残留有铅离子,在测定 过程中加热样液时,铅能与还原糖(特别是果糖)结合生成铅糖化合物, 结果使测得的还原糖含量偏低。因此必须除铅。
1g/L葡萄糖标准溶液的配制
❖ 精确称取1.0000g经过98~100℃干燥2h至恒重的纯 葡萄糖 ,加水溶解后移入到1000mL的容量瓶中,加 入5ml盐酸(防止微生物生长),用水稀释到1000mL。
❖ (此溶液葡萄糖浓度相当于1.0mg/mL)
❖ 仪器:
25mL的酸式滴定管、可调电炉、150mL锥形 瓶4个、10mL量筒、5mL移液管2根、 250mL容量瓶1个、250mL锥形瓶2个、漏斗 2个、50mL烧杯1个
注:样品预处理的原则:除去样品中的蛋白质、淀粉、脂肪等干扰成分。
任务三、样品还原糖含量测定
1、费林试剂的标定 2、样品溶液的预测定 3、样品溶液测定
《还原糖的测定方法_国标》
《还原糖的测定方法_国标》还原糖是利用还原性固体物质与硫酸酸作用而形成的糖类物质,是各种天然糖和蔗糖等碳水化合物的主要成分。
还原糖的测定方法主要包括酚酞法和锁紫法两种。
一、酚酞法1.原理还原糖在酸性溶液中能够与酚酞形成红色络合物,按照这个特性可以利用测定还原糖的含量。
酚酞法是将酚酞加入葡萄糖溶液,并加入硫酸,使葡萄糖反应生成邻磺酸基苯甲醛,酚酞与邻磺酸基苯甲醛产生红色络合物,根据颜色变化来测定还原糖的含量。
2.步骤(1)样品处理:将样品取适量加入标准瓶中,加入适量蒸馏水稀释。
(2)试剂溶液制备①酚酞指示剂:0.1%酚酞水溶液,加入适量氢氧化钠溶液调节其pH值到8左右;②还原剂:0.05mol/L的亚硫酸钠溶液。
(3)测定操作①在滴定管中加入5ml淀粉指示液;②将50ml试剂用热水浴加热至60℃,在加热的过程中不断振荡,直到试剂完全溶解;③加入3ml样品,再加入1.5ml的硫酸;④加入恰好的量的还原剂,至混合溶液变成淡绿色,继续振荡至反应彻底;⑤从头部滴入酚酞指示液,直至溶液变为粉色,记录滴定管体积。
(4)计算还原糖的质量浓度二、锁紫法1.原理锁紫法是一种定量测定还原糖的方法,其原理是利用还原性糖在酸性条件下氧化生成醛酸物质,再与锁紫剂作用形成深紫色络合物,根据反应色深与被测样品中还原糖含量成正比关系的特点,来定量测定还原糖的含量。
2.步骤(1)样品前处理:将样品取适量加入到锥形瓶中加入适量蒸馏水稀释,搅拌溶解。
(2)试剂溶液制备①锁紫试剂:将0.2g锁紫用少量水样吸湿后加入10mL浓氢氧化钠(4mol/L),用水稀释到100ml,在加入5ml浓硫酸搅拌,备用;②还原剂:0.05mol/L的亚硫酸钠溶液。
(3)操作流程①在锥形瓶中加入1ml锁紫试剂和30ml蒸馏水;②加入3ml样品后加入2ml还原剂,充分搅拌均匀;③经过10分钟左右,样品溶液颜色变为紫色,放置待沉淀,用滤纸滤掉沉淀;④将过滤后的溶液转移到光度计试样池,用蒸馏水稀释至标线;⑤根据光度计读数计算样品中还原糖的质量浓度。
还原糖测定
还原糖测定实验六饮料中国还原糖含量的测定—直接滴定法(GB/T5009.7—2003第一法)教学目的要求:基本知识点1、掌握直接滴定测定还原糖的原理、基本过程和操作关键。
2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。
重点:1、熟练称量、定容、滴定等基本操技术2、直接滴定测定还原糖的原理、基本过程和操作关键。
难点:直接滴定测定还原糖的原理和控制要点课时教学方案:复习与提问:1、检查实验准备情况,(1)实验内容;(2)实验仪器与试剂有哪些?(3)直接滴定测定还原糖的步骤。
2、直接滴定测定还原糖的注意事项和控制要点【引入新课】一、目的要求1、理解直接滴定法测定还原糖的原理及操作要点;2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。
二、实验原理试样经除去蛋白质后,在加热条件下,以次甲基蓝作指示剂,滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液),还原糖将溶液中的二价铜还原成氧化亚铜。
以后稍过量的还原糖使次甲蓝指示剂褪色,表示终点到达。
根据试样溶液消耗体积,计算还原糖量。
反应方程式如下:CuSO4+2NaOH=Cu(OH)2↓+Na2SO4COONa COONa︱∣CHOH CHO╲∣+Cu(OH)2= ∣Cu +2H2OCHOH CHO╱∣∣COOK COOKCOONa COONa∣CHO ∣CHOHCHO╲∣CHOH ∣2∣Cu +(CHOH)4 +2H2O=2 ∣+ (CHOH)4+Cu2O↓CHO╱∣CHOH ∣∣CH2HO ∣CH2OHCOOK COOK亚甲蓝氧化型+还原糖——→亚甲蓝还原型(蓝色) (无色)三、实验试剂(GB/T5009.7-2003食品中还原糖的测定)1、盐酸。
2、碱性酒石酸铜甲液:称取15g硫酸铜( CuSO4?5H2O) 及0.05g次甲基蓝,溶入水中并稀释至1000mL。
3、碱性酒石酸铜乙液:称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠,溶于水中,再加入4g亚铁氰化钾,完全溶解后,用水稀释至1000mL,贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
还原糖的测定方法_国标
还原糖得测定方法(1)食物中还原糖得测定方法:高锰酸钾滴定法与直接滴定法。
一、高锰酸钾滴定法ﻫ1、原理样品经除去蛋白质后,其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜,加硫酸铁后,氧化亚铜被氧化为铜盐,以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成得亚铁盐,根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量,再查表得还原糖量. ﻫ2、适用范围ﻫGB5009、7-85,本法适用于所有食品中还原糖得测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖得非还原性糖类物质得测定。
3、仪器(1)滴定管ﻫ(2)25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚(3)真空泵ﻫ(4)水浴锅4、试剂除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。
4、1 6mol/L盐酸:量取50ml盐酸加水稀释至100 ml。
4、2 甲基红指示剂:称取10mg甲基红,用100ml乙醇溶解. ﻫ4、35mol/L氢氧化钠溶液:称取20g氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml。
4、4 碱性酒石酸铜甲液:称取34、639g 硫酸铜(CuSO4·5H2O),加适量水溶解,加0、5ml硫酸,再加水稀释至500ml,用精制石棉过滤。
ﻫ4、5 碱性酒石酸铜乙液:称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠,加适量水溶解,并稀释至500ml,用精制石棉过滤,贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
ﻫ4、6精制石棉:取石棉先用3mol/L盐酸浸泡2~3天,用水洗净,再加2、5mol/L氢氧化钠溶液浸泡2~3天,倾去溶液,再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时,用水洗净。
再以3mol/L 盐酸浸泡数小时,以水洗至不呈酸性。
然后加水振摇,使成微细得浆状软县委,用水浸泡并贮存于玻璃瓶中,即可用做填充古氏坩埚用. ﻫ4、7 0、1000 mol/L高锰酸钾标准溶液。
4、8 1mol/L氢氧化钠溶液:称取4g 氢氧化钠,加水溶解并稀释至100ml。
ﻫ4、9硫酸铁溶液:称取50g硫酸铁,加入200ml水溶解后,慢慢加入100ml硫酸,冷却后加水稀释至1L。
还原糖的测定
(1)提取液得制备常用得提取剂有水与乙醇溶液,提取液得制备方法要根据样得性状而定,但应遵循以下原则: ﻫ①取样量与稀释倍数得确定,要考虑所采用得分析方法得检测范围、一般提取经净化与可能得转化后,每毫升含糖量应在0。
5~3、5mg之间,提取10克含糖2%得样品可在100毫升容量瓶中进行;而对于含糖较高得食品,可取5~10克样品于250毫升容量瓶中进行提取。
②含脂肪得食品,如乳酪, 巧克力,蛋黄酱及蛋白杏仁糖等,通常需经脱脂后再以水进行提取。
一般以石油醚处理一次或几次,必要时可以加热、每次处理后,倾去石油醚层(如分层不好,可以进行离心分离),然后用水提取。
③含大量淀粉与糊精得食品,如粮谷制品,某些蔬菜,调味品,用水提取会使部分淀粉,糊精溶出,影响测定,同时过滤也困难,为此,宜采用乙醇溶液提取。
乙醇溶液得浓度应高到足以使淀粉与糊精沉淀,通常用70~75%得乙醇溶液。
若样品含水量较高,混合后得最终浓度应控制在上述范围内、提取时可加热回流,然后冷却并离心,倾出上清液,如此提取2~3次,合并提取液,蒸发除去乙醇。
用乙醇溶液作提取剂时,提取液不用除蛋白质,因为蛋白质不会溶解出来。
④含酒精与二氧化碳得液体样品,通常蒸发至原体积1/3~1/4,以除去酒精与二氧化碳、但酸性食,在加热前应预先用氢氧化钠调节样品溶液至中性,以防止低聚糖被部分水解。
●⑤提取固体样品时,为提高提取效果,有时需加热,加热温度一般控制在。
40~50℃,一般不超过80℃,温度过高时右溶性多糖溶出,增加下步澄清工作得负担,用乙醇做提取剂,加热时应安装回流装置。
(2)提取液得澄清作为澄清剂必需具备以下几点要求:①能较完全地除去干扰物质②不吸附或沉淀被测糖分,也不改变被测糖分得理化性质③过剩得澄清剂应不干扰后面得分析操作,易于除掉。
常用三种澄清剂:中性醋酸铅[Pb(CHCOO)2•3H2O]乙酸锌与亚铁氰化钾溶液硫酸铜与氢氧化钠溶液澄清剂得用量ﻫ样液除铅2食品中还原糖得测定ﻫ直接滴定法、3高锰酸钾法、4萨氏法、5碘量法● 2.1 直接滴定法●(1)原理●(2) 适用范围●(3) 试剂●(4) 测定方法●(5) 结果计算●(6) 说明与讨论(1) 原理将一定量得碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合,立即生成天蓝色得氢氧化铜沉淀,这种沉淀很快与酒石酸钾钠反应,生成深蓝色得可溶性酒石酸钾钠铜络合物。
还原糖的测定国标法
直接滴定法测还原糖1.实验原理实验经除去蛋白质后,在加热条件下,以亚甲基蓝为指示剂,滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(用还原糖标准溶液标定),根据样品液消耗体积计算还原糖含量。
2.实验药品与试剂硫酸铜、亚甲基蓝指示剂、酒石酸钾钠、氢氧化钠、乙酸锌、冰乙酸、亚铁氰化钾、葡萄糖、氢氧化钠溶液(40g/L)碱性酒石酸铜甲液:称取15g硫酸铜及0.05g亚甲蓝加适量水溶解至1000ml碱性酒石酸铜乙液:称取50g酒石酸钾钠与75g氢氧化钠,加适量水溶解,再加4g亚铁氰化钾,完全溶解后稀释至1000ml,贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
盐酸溶液:量取50ml盐酸加水稀释至100ml。
葡萄糖标液:称取1.0g干燥2h后的葡萄糖,加水溶解并加入5ml盐酸,并以水稀释到1000ml,此溶液每毫克相当于1.0mg葡萄糖。
3.仪器25ml滴定管、250 ml容量瓶、150ml锥形瓶、玻璃珠、真空泵、电子天平、可调电炉(带石棉板)4.实验步骤4.1 样品处理:一般食品是称取粉碎后的样品2.5~5g或吸取5~25g液体样品,置于250ml容量瓶中,加50ml水,摇匀。
加入5ml 乙酸锌溶液及5ml亚铁氰化钾溶液,加水至刻度,混匀。
静置30min,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,滤液备用。
4.2标定碱性酒石酸铜溶液:吸取5.0g碱性酒石酸铜甲液及乙液,于150ml锥形瓶中加水10ml,加入玻璃珠两粒,从滴定管滴加约9ml葡萄糖或其他还原糖标液,控制在2min内加热至沸,趁热以1滴/2s的速度继续滴加葡萄糖或其他还原糖标液至蓝色刚好褪去,即为终点,记录消耗体积,平行测定3次并取平均值,计算每10ml酒石酸铜溶液(甲、乙各5ml)相当于多少葡萄糖或其他还原糖的质量(mg)。
4.3试样溶液预测:吸取5.0g碱性酒石酸铜甲液及乙液,于150ml锥形瓶中加水10ml,加入玻璃珠两粒,控制在2min内加热至沸,保持沸腾以先快后慢的速度,从滴定管中滴加试样溶液,病保持溶液沸腾状态,待溶液颜色变浅时,以1滴/2秒的速度滴定,直至蓝色刚好褪去即为终点,记录样液消耗体积。
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还原糖的测定方法(1)食物中还原糖的测定方法:高锰酸钾滴定法和直接滴定法。
一、高锰酸钾滴定法1.原理样品经除去蛋白质后,其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜,加硫酸铁后,氧化亚铜被氧化为铜盐,以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐,根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量,再查表得还原糖量。
2.适用范围GB5009.7-85,本法适用于所有食品中还原糖的测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖的非还原性糖类物质的测定。
3.仪器(1)滴定管(2)25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚(3)真空泵(4)水浴锅4.试剂除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。
4.1 6 mol/L盐酸:量取50ml盐酸加水稀释至100 ml。
4.2 甲基红指示剂:称取10mg甲基红,用100ml乙醇溶解。
4.3 5 mol/L氢氧化钠溶液:称取20g氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml。
4.4 碱性酒石酸铜甲液:称取34.639g 硫酸铜(CuSO4·5H2O),加适量水溶解,加0.5ml硫酸,再加水稀释至5 00ml,用精制石棉过滤。
4.5 碱性酒石酸铜乙液:称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠,加适量水溶解,并稀释至500ml,用精制石棉过滤,贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
4.6 精制石棉:取石棉先用3mol/L盐酸浸泡2~3天,用水洗净,再加2.5mol/L氢氧化钠溶液浸泡2~3天,倾去溶液,再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时,用水洗净。
再以3 mol/L 盐酸浸泡数小时,以水洗至不呈酸性。
然后加水振摇,使成微细的浆状软县委,用水浸泡并贮存于玻璃瓶中,即可用做填充古氏坩埚用。
4.7 0.1000mol/L高锰酸钾标准溶液。
4.8 1mol/L氢氧化钠溶液:称取4g 氢氧化钠,加水溶解并稀释至100ml。
4.9 硫酸铁溶液:称取50g硫酸铁,加入200ml水溶解后,慢慢加入100ml硫酸,冷却后加水稀释至1L。
4.10 3mol/L盐酸:量取30ml盐酸,加水稀释至120ml。
5. 操作方法5.1 样品处理:5.1.1 乳类、乳制品及含蛋白质的食品:称取约0.5~2 g固体样品(吸取2~10 ml液体样品),置于250 ml容量瓶中,加50 ml水,摇匀。
加入10 ml碱性酒石酸铜甲液及4 ml1mol/L氢氧化钠溶液,加水至刻度,混匀。
静置3 0min,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,滤液备用。
(注:此步骤目的是沉淀蛋白)5.1.2 酒精性饮料:吸取100 ml样品,置于蒸发皿中,用1 mol/L氢氧化钠溶液中和至中性,在水浴上蒸发至原体积1/4后(注:如果蒸发时间过长,应注意保持溶液pH为中性),移入250 ml容量瓶中。
加50 ml水,混匀。
以下按5.1.1自"加10ml碱性酒石酸铜甲液"起依法操作。
5.1.3 含多量淀粉的食品:称取2~10 g样品,置于250 ml容量瓶中,加200 ml水,在45℃水浴中加热1 h,并时时振摇。
(注意:此步骤是使还原糖溶于水中,切忌温度过高,因为淀粉在高温条件下可糊化、水解,影响检测结果。
)冷却后加水至刻度,混匀,静置。
吸取200 ml上清液于另一250 ml容量瓶中,以下按5.1.1自"加10ml碱性酒石酸铜甲液"起依法操作。
5.1.4 含有脂肪的食品:称取2~10 g样品,先用乙醚或石油醚淋洗3次,去除醚层。
加入50ml水混匀,以下按5.1.1自"加10ml碱性酒石酸铜甲液"起依法操作。
5.1.5 汽水等含有二氧化碳的饮料:吸取100 ml样品置于蒸发皿中,在水浴上除去二氧化碳后,移入250 ml容量瓶中,并用水洗涤蒸发皿,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀后,备用。
5.2 样品测定:吸取50ml处理后的样品溶液,于400ml烧杯中,加入25ml碱性酒石酸铜甲液及25ml乙液,于烧杯上盖一表面皿,加热,控制在4min内沸腾,再准确煮沸2min,乘热用铺好石棉的古氏坩埚或G4垂融坩埚抽滤,并用60℃热水洗涤烧杯及沉淀,至洗液不成碱性为止。
(注:还原糖与碱性酒石酸铜试剂的反应一定要在沸腾状态下进行,沸腾时间需严格控制。
煮沸的溶液应保持蓝色,如果蓝色消失,说明还原糖含量过高,应将样品溶液稀释后重做。
)将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400ml烧杯中,加25 ml硫酸铁溶液及25ml水,用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解,以0.1mol/ L高锰酸钾标准液滴定至微红色为终点。
同时吸取50ml水,加与测样品时相同量的碱性酒石酸铜甲、乙液,硫酸铁溶液及水,按同一方法做试剂空白实验。
6. 计算:X1=(V-V0)×N×71.54 (1)式中:X1--样品中还原糖质量相当于氧化亚铜的质量,mg;V--测定用样品液消耗高锰酸钾标准液的体积,ml;V0--试剂空白消耗高锰酸钾标准液的体积,ml;N--高锰酸钾标准溶液的浓度;71.54--1ml 1mol/L高锰酸钾溶液相当于氧化亚铜的质量,mg。
根据(1)式中计算所得氧化亚铜质量,查附表"氧化亚铜质量相当于葡萄糖、果糖、乳糖、转化糖的质量表",再计算样品中还原糖含量。
X2=(m1×V2)∕(m2×V1)×(100∕1000)(2)式中:X2--样品中还原糖的含量,g/100g(g/100ml);m1--查表得还原糖质量,mg;m2--样品质量(或体积),g(ml);V1--测定用样品处理液的体积,ml;V2--样品处理后的总体积,ml。
7.举例:称取某食物样品3.00g,经过处理后用水定容至250ml。
取50ml进行测定,消耗0.1003 mol/L高锰酸钾标准液5. 20ml,同时测试剂空白为0.36ml,则样品中还原糖质量相当于氧化亚铜的质量为:X1(mg)=(5.20-0.36)×0.1003×71.54 = 34.73查表得还原糖质量为相当于葡萄糖16.22 mg,样品中还原糖含量(以葡萄糖计)为:X2(g/100g)=(16.22×250)∕(3.00×50)×(100∕1000)= 2.708.注释:本法用碱性酒石酸铜溶液作为氧化剂。
由于硫酸铜与氢氧化钠反应可生成氢氧化铜沉淀,氢氧化铜沉淀可被酒石酸钾钠缓慢还原,析出少量氧化亚铜沉淀,使氧化亚铜计量发生误差,所以甲、乙试剂要分别配制及贮藏,用时等量混合。
还原糖的测定方法(2)二、直接滴定法1.原理样品经除去蛋白质后,在加热条件下,直接滴定已标定过的费林氏液,费林氏液被还原析出氧化亚铜后,过量的还原糖立即将次甲基蓝还原,使蓝色褪色。
根据样品消耗体积,计算还原糖量。
2.适用范围GB5009.7-85,本方法适用于所有食品中还原糖的检测。
检出限0.1mg。
3.主要仪器滴定管4.试剂除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。
(1)费林甲液:称取15 g硫酸铜(CuSO4·5H2O),及0.05 g次甲基蓝,溶于水中并稀释至1 L。
(2)费林乙液:称取50 g酒石酸钾钠与75 g氢氧化钠,溶于水中,再加入4 g亚铁氰化钾,完全溶解后,用水稀释至500 ml,贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
(3)乙酸锌溶液:称取21.9 g乙酸锌,加3 ml冰乙酸,加水溶解并稀释至100 ml。
(4)亚铁氰化钾溶液。
称取10.6g亚铁氰化钾,用水溶解并稀释至100ml。
(5)盐酸。
(6)葡萄糖标准溶液:精密称取1.000 g经过80 ℃干燥至恒量的葡萄糖(纯度在99%以上),加水溶解后加入5 ml盐酸,并以水稀释至1 L。
此溶液相当于1 mg/ml葡萄糖。
(注:加盐酸的目的是防腐,标准溶液也可用饱和苯甲酸溶液配制)5.操作方法5.1样品处理:5.1.1乳类、乳制品及含蛋白质的食品:称取约0.5~2 g固体样品(吸取2~10 ml液体样品),置于100 ml容量瓶中,加50 ml水,摇匀。
边摇边慢慢加入5 ml乙酸锌溶液及5 ml亚铁氢化钾溶液,加水至刻度,混匀。
静置30 mi n,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,滤液备用。
(注意:乙酸锌可去除蛋白质、鞣质、树脂等,使它们形成沉淀,经过滤除去。
如果钙离子过多时,易与葡萄糖、果糖生成络合物,使滴定速度缓慢;从而结果偏低,可向样品中加入草酸粉,与钙结合,形成沉淀并过滤。
)5.1.2酒精性饮料:吸取50 ml样品,置于蒸发皿中,用1 mol/L氢氧化钠溶液中和至中性,在水浴上蒸发至原体积1 /4后,移入100 ml容量瓶中。
加25 ml水,混匀。
以下按4.1.1自"加5 ml乙酸锌溶液"起依法操作。
5.1.3含多量淀粉的食品:称取2~5 g样品,置于100 ml容量瓶中,加50 ml水,在45℃水浴中加热1 h,并时时振摇(注意:此步骤是使还原糖溶于水中,切忌温度过高,因为淀粉在高温条件下可糊化、水解,影响检测结果。
)。
冷后加水至刻度,混匀,静置。
吸取50 ml上清液于另一100 ml容量瓶中,以下按4.1.1自"5 ml乙酸锌溶液"起依法操作。
5.1.4汽水等含有二氧化碳的饮料:吸取50 ml样品置于蒸发皿中,在水浴上除去二氧化碳后,移入100 ml容量瓶中,并用水洗涤蒸发皿,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀后,备用。
(注意:样品中稀释的还原糖最终浓度应接近于葡萄糖标准液的浓度。
)5. 2标定费林氏液溶液:吸取5.0 ml费林氏甲液及5.0 ml乙液,置于150 ml锥形瓶中(注意:甲液与乙液混合可生成氧化亚铜沉淀,应将甲液加入乙液,使开始生成的氧化亚铜沉淀重溶),加水10 ml,加入玻璃珠2粒,从滴定管滴加约9 ml葡萄糖标准溶液,控制在2 min内加热至沸,趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液,直至溶液兰色刚好褪去并出现淡黄色为终点,记录消耗的葡萄糖标准溶液总体积,平行操作三份,取其平均值,计算每10 ml(甲、乙液各5 ml)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(mg)。
(注意:还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化,恢复成原来的蓝色,所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态,并且避免滴定时间过长。
)5.3样品溶液预测:吸取5.0 ml费林氏甲液及5.0 ml乙液,置于150 ml锥形瓶中,加水10 ml,加入玻璃珠2粒,控制在2 min内加热至沸,趁沸以先快后慢的速度,从滴定管中滴加样品溶液,并保持溶液沸腾状态,待溶液颜色变浅时,以每秒1滴的速度滴定,直至溶液兰色褪去,出现亮黄色为终点。
如果样品液颜色较深,滴定终点则为兰色褪去出现明亮颜色(如亮红),记录消耗样液的总体积。
(注意:如果滴定液的颜色变浅后复又变深,说明滴定过量,需重新滴定。