中性蛋白酶水解核桃蛋白工艺

水酶法提取核桃油工艺

４０６）３０８
摘要：以核桃为原料，立一种以水酶法为核心的核桃油提取新工艺。研究表明，建最佳提油工艺为：用中性蛋白选
酶，酶量１加．酶解时间２ｈ酶解温度５，解ｐ７。在此奈件下提油率达８．２５％，．，５０℃ 酶Ｈ．５４４％。在上述影响因素中，酶的添加量为主要影响因素，次是酶解时间，次是酶解温度，解ｐ影响最小。其再酶Ｈ
ａｕｔｏｎｙ．％。ｔｍｐｒｔｒｆｈｄｏｙｉ０ ℃ ａｄｔ５ｈｙｒｌｓｓｐ．．Ｕｎｅｈｓｍｏｎｆｅｚｍｅ１５ｅｅａｕｅｏｙｒｌｓｓ５ｎｉ２．，ｈｄｏｙｉＨ７５ｍｅｄｒｔｅｅ
植物细胞结构，用水作溶剂，将油脂从蛋白中置换出来，使其中的油脂释放出来。与传统的压榨法和浸出
法相比，水酶法条件温和、温度低、以水为溶剂，且因而油品质量好、白质变性程度小，蛋有利于综合利用油料中的油脂和蛋白质，能耗也低。本试验通过研究水
－＝１４＝＝０
第１第０昌１３期卷
食品瓦研究与叩耵九司丌鼠开发
应技用术
水酶法提取核桃油工艺
温风亮龚琴胡兵。。
（．１内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司，陕西西安７０７；．１０５２湖北工业大学化学与环境工程学院，湖北武汉
（．ｎｅＭｎｏａｎｎｕｉｙＧｏｐＣ．ｔ，ｉｎ１０５Ｓａｎｉｈｎ；．ｈｍｓ＆Ｅｖｏｍｎ１ＩｎｒｏｇｌｇｉＤａ（ｒｕ）ｏＬｄＸ０７，ｈａｘ，ｉａ２ＣｅｉｒｉＭｅｒ，ａ７Ｃｔｙｎｉｎｅｔｒ

核桃的分离提纯实验方案

核桃中蛋白质的分离提纯核桃(Juglans regial L．)原产中亚，又叫胡桃、羌桃、万岁子等，系胡桃科核桃属植物。

我国栽培的核桃品种约有40 余种，各地均有分布。

核桃作为林业副产品，很有开发利用的价值。

核桃营养丰富，是世界“四大”干果之一。

据测定，每百克含蛋白质14.9 克，脂肪58.8 克，核桃中的脂肪71%为亚油酸，12%为亚麻酸，碳水化合物9.6 克，膳食纤维9.6 克，胡萝卜素30 微克，维生素E 43.21毫克，钾385 毫克，锰3.44 毫克，钙56 毫克，磷294 毫克，铁2.7 毫克，硒4.62 微克，锌2.17 毫克人。

就营养成分比较来说，核桃营养价值是大豆的8.5 倍，花生的6 倍，鸡蛋的12 倍，牛奶的25 倍，（1 斤核桃仁相当于5 斤鸡蛋或9 斤牛奶的营养价值）肉类的10 倍。

核桃仁在增进人体健康方面，是中药的重要辅料，有顺气补血，止咳化痰，润肺补肾，滋养皮肤等功能。

据有关资料记载历史上有许多老寿星和素食家也是把食用核桃作为养生美颜的主要果品。

近几年有些癌症患者，经常食用核桃，或核桃仁加工的副食品，明显有控制癌扩散的积极效能；现代医学又证明，经常食用核桃有降低血液中胆固醇和软化血管的作用。

核桃蛋白含量为14%～17%，其蛋白消化率可达87.2%。

主要由4类蛋白质构成, 即清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白, 分别占核桃蛋白总量6.81%、17.57% 、5.33% 和70.11% , 核桃蛋白中的醇溶蛋白有独特的氨基酸组成, 其中支链氨基酸和中性氨基酸含量较高, 是植物蛋白中少有的特色组成,据有极高的开发利用价值。

核桃蛋白含有18种氨基酸, 其中包括8种必需氨基酸, 且精氨酸、谷氨酸、组氨酸、酪氨酸等含量相对较高, 接近联合国粮农组织( FAO)和世界卫生组织(WHO )规定的标准, 它是一种很好的植物蛋白。

但目前理想的核桃蛋白保健食品在市场上并不多见，可见核桃蛋白极具开发价值。

核桃蛋白酶水解物的抑菌性能探讨

ａｔａｔｒａｃｖｔｆｈｄｏｙａｅｗｏｅＤＨｗｓ２％Ｗａｑａｏ０８ｐｔｓｉｍｒａｅａｄｎｓ．Ｔｅｍｉｉｍｎｉｃｅｌａｔｉｏｙｒｌｓｔｈｓａ８ｂｉｉｙＳｅｕｌｔ．％ｏａｓｕｓｂｔｎｉｉｅｎｈｎｍｕ
关键词：核桃蛋白；瓜蛋白酶木中性蛋白酶；水解物；茵性酶抑
中图分类号：２１０．３文献标识码：Ａ文章编号：６１６９（０８０ — ｏｏ伽４１７－８２２０）５０２．－
ＥｘｏａｉｎｏｈｎｂｃｅｉｌＡｃｉｉｙｏｚｍａｉｐｌｒｔｏｆｔｅＡｔａｔｒａｔｖｔｆＥｎｙｉｔｃＨｙｏｙａｅｏａｎｏｅｎｄｒｌｓｔｆＷｌｕｔＰｒｔｉ
ＬＵＺａ－ｉｇＨＡＧＣｉｉＺＵＹａＩｈｏｍｎ，ＵＮｕ－，ＨＯｕｎｊ
（ｅａｍｎｉｏｉｌｎｈｍｃｌｎｎｅｎｕｎｘｎｖｒｏｅｈｏｏｙＬｕｈｕＧａｇｉ４０６ＤｐｒｅｔｆＢｏｇｃｄＣｅｉｇｅｄ￣ＧａｇｉｉｓｆＴｃｎｌ，ｉｚｏ，ｕｎｘ５５０，ｔｏｌａａａＥｉＵｅｇ
四，・）食品与笈磅
ＳｉｈａＦｏａＦｅｍｅａｏｎｃｕｎｏｄｎｄｒｎｔｔｉ
第４４卷（５期）Ｖ１４，ｏ第ｏ４Ｎ．．５
核桃蛋白酶水解物的抑茵性能探讨 ★

核桃蛋白的分离纯化及功能性质的研究

核桃蛋白的分离纯化及功能性质的研究随着现代科学技术的发展，蛋白质已经成为现代生物学研究中非常重要的研究对象，在以它们构成和性质为基础的研究和开发被广泛应用。

核桃蛋白是一类非常重要的单元蛋白，具有多种生理活性。

本文旨在研究核桃蛋白的分离纯化及其机理性质。

一、核桃蛋白结构核桃蛋白是一种植物类乳糖酶，主要由两种可溶性蛋白组成：核桃抗性蛋白（NRT）和核桃糖酶（NE）。

NRT是一种65 kDa的肌动蛋白，它通过酶解作用分解能量类外源物质和非结构性抗原来支持核桃生长。

它以其独特的结构支持它的抗性和活性。

与NRT相比，NE是一种25 kDa的核苷酸酶，它可以水解糖苷键，以便提供能量到核桃细胞。

核桃蛋白的其它功能包括抗体反应，细胞因子合成和调节细胞凋亡等。

二、核桃蛋白的分离纯化核桃蛋白的分离纯化，需要使用一系列技术，包括柱层析、电渗透和膜过滤等方法。

层析可以分离和纯化核桃蛋白，而其纯度比电渗透稍低。

膜过滤是一种高纯度分离纯化方法，它可以有效地去除杂质和其它蛋白。

当核桃蛋白经过分离和纯化后，它可以用于生物化学分析和功能性研究。

三、核桃蛋白的功能性研究核桃蛋白具有多种生理活性，因此，很多研究者都想深入了解它的生理功能。

最近的研究表明，核桃蛋白可以增强机体的抗氧化能力，对对抗内在和外在的氧化应激具有重要作用；它还可以阻断放射性物质的吸收，具有显著的辐射防护作用；它还具有显著的抗细菌活性，可以抑制致病性细菌的生长和复制。

此外，核桃蛋白还具有抗肿瘤作用，可以降低细胞癌变的风险。

四、总结本文旨在研究核桃蛋白的分离纯化及其功能性质。

核桃蛋白是一类单元蛋白，由NRT和NE两种可溶性蛋白组成，具有多种生理活性，如抗氧化能力、辐射防护作用、抗细菌活性和抗肿瘤作用等。

核桃蛋白的分离纯化，需要使用技术，如柱层析、电渗透和膜过滤等，可以有效地去除杂质和其它蛋白，并可用于生物学分析和功能性研究。

鉴于其多种功能，核桃蛋白可能在科学研究和产业应用中发挥重要作用。

核桃蛋白酶解物的制备及抗氧化活性

核桃蛋白酶解物的制备及抗氧化活性陈宁;孙一;刘淑莹【摘要】采用碱性蛋白酶对核桃蛋白进行酶解,检测了所得酶解物的抗氧化能力,包括对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和羟基自由基(·OH)的清除能力；利用Sephadex G-25凝胶层析柱和反相柱对核桃蛋白酶解物进行分离纯化；采用液相色谱-质谱(LC-ESI-Q-TOF)联用方法测得抗氧化能力最强的多肽的序列为Ala-Gly-Gly-Ala,其还原力和还原型谷胱甘肽相当.%Many studies have reported that peptides from various food sources possess antioxidant activity. In the present study, walnut proteins were hydrolyzed using Alcalase 2. 4 L to obtain antioxidant peptides. The antioxidant activities of the hydrolysates were measured using 1, l-diphenyl-2-picryl hydrazyl ( DPPH) assay and hydroxyl radical scavenging activity( HRSA) assay. Then, walnut protein hydrolysates were purified sequentially by gel filtration and RP-HPLC. The sequence of the peptide with the highest antioxidative activity was identified to be Ala-Gly-Gly-Ala using RP-HPLC-ESI-MS, which was identified for the first time from walnut protein hydrolysates. The reducing power of the peptide was similar to that of L-glutathione reduced ( GSH). These results suggest that the peptide isolated from walnut protein hydrolysates is potent antioxidant and may be effectively used as food additives and as pharmaceutical agents.【期刊名称】《高等学校化学学报》【年(卷),期】2013(034)001【总页数】5页(P72-76)【关键词】核桃蛋白水解;抗氧化;纯化;抗氧化肽【作者】陈宁;孙一;刘淑莹【作者单位】中国科学院长春应用化学研究所,长春质谱中心,长春130022;中国科学院研究生院,北京100039;吉林省人参科学研究院,长春130117;中国科学院长春应用化学研究所,长春质谱中心,长春130022;吉林省人参科学研究院,长春130117【正文语种】中文【中图分类】O657核桃(Juglans regia L)又名胡桃，系胡桃科胡桃属植物，味甘，性温．核桃营养价值很高，日常生活中除少量新鲜食用和加工成休闲食品外，大部分用于榨油，榨油剩余的残粕中含有大量的蛋白质，但残粕的利用度却很低．核桃蛋白中含有18种氨基酸，其中有8种必需氨基酸，精氨酸和谷氨酸的含量很高［1～3］．蛋白质是人体所需的重要营养素之一，在人体内以氨基酸或肽的形式被消化吸收［4］．因此，充分利用好核桃蛋白，可提高核桃产品的附加值和竞争力．在生物体内，生物大分子的氧化是一个由自由基介导的必要的生理过程．但是过量的自由基则会给细胞带来伤害甚至死亡，导致癌症、中风、糖尿病及心肌梗塞等疾病的发生［5～11］．已有研究［12］表明，食物来源的生物活性肽具有在体内清除自由基的能力，并且比合成的抗氧化剂更安全．目前，对食物蛋白质来源的酶水解物的抗氧化性研究主要集中在大豆蛋白、小麦蛋白、鹿茸和鱼等［13～16］，而对核桃蛋白水解物抗氧化性的研究报道则较少．本文以碱性蛋白酶(Alcalase 2.4 L)水解核桃蛋白，对获得的水解产物进行了葡聚糖凝胶柱和反相层析分离纯化，测定了水解物对DPPH和羟自由基的清除能力，探讨了核桃蛋白水解物的抗氧化活性;对抗氧化能力强的多肽采用LC-ESI-Q-TOF鉴定了其一级序列．1 实验部分1．1 材料、试剂与仪器核桃购自长春沃尔玛超市;碱性蛋白酶Alcalase 2.4 L购自丹麦Novozymes公司;HPLC级乙腈购自美国Fisher公司;1，1-diphenyl-2-picryl hydrazyl(DPPH)，L-glutathione reduced(GSH)购自 Sigma公司．Waters Alliance 2695高效液相色谱系统;Waters 2996二极管阵列检测器;RRLC-Q-TOF 6520质谱仪(Agilent公司);ZORBAX Extend-C18色谱柱(1.8 μm，2.1 mm×150 mm，Agilent公司);多功能酶标仪(Tecan公司)．1．2 核桃蛋白酶解物的制备与分离纯化1．2．1 核桃蛋白的制备将核桃去皮粉碎过40目筛，用石油醚脱脂2次(料液体积比1∶10);用NaOH调节pH=9.0，于45℃孵育1 h，以3500 r/min转速离心30 min，取上清液调节pH=4.5后静置，以3500 r/min转速离心30 min，将沉淀用水洗至中性，冻干即得核桃蛋白．1．2．2 核桃蛋白酶解物的制备取一定量的核桃蛋白用水溶解(质量分数3%)，用0.5 mol/L NaOH调节反应体系pH=8.0，于50℃恒温振荡反应．将50℃预热的碱性蛋白酶(Alcalase 2.4 L)加入到反应体系中，启动酶解反应;反应过程中加入NaOH以维持反应体系的pH值．反应3 h后，于90℃水浴保持10 min，使酶失活;以3500 r/min转速离心30 min，上清液即为核桃蛋白酶解物．1．2．3 核桃蛋白酶解物的分离纯化将核桃蛋白酶解物用截留分子量(MWCO)为3000的超滤管进行超滤，超滤组分进行抗氧化实验．对核桃蛋白酶解物超滤后抗氧化强的组分进一步用Sephadex G-25凝胶层析柱分离纯化，收集各组分、冻干，进行抗氧化实验筛选．取Sephadex G-25纯化后抗氧化活性最强的组分进一步用HPLC纯化，收集各组分、冻干，进行抗氧化实验筛选．1．3 核桃蛋白酶解物的抗氧化活性研究1．3．1 DPPH清除能力(DRSA)实验参照文献［17，18］方法测定酶解物的DPPH清除能力，DPPH清除能力按下式计算:式中，As为蛋白酶解物的吸光度;Ab为样品背景的吸光度(不加DPPH);Ac为对照管的吸光度(水代替样品)．1．3．2 羟基自由基(·OH)清除能力(HRSA)实验参照文献［18，19］方法测定酶解物的羟基自由基清除能力，羟自由基清除能力按下式计算:式中，As为蛋白酶解物的吸光度;A1为损伤管的吸光度(水代替样品);A0为未损伤管的吸光度(水代替双氧水)．1．3．3 还原力的测定参照文献［19］方法，以酶解物还原三价铁为二价铁，用铁氰化钾检测二价铁，溶液在500 nm处有吸收，吸光度值与还原力成正比．1．4 核桃蛋白酶解多肽的序列鉴定将HPLC纯化后抗氧化活性最强的组分先用UPLC测定其纯度，再用LC-ESI-Q-TOF手段鉴定肽段的一级序列．UPLC条件:流动相A为超纯水［含0.1%甲酸(体积分数)］，流动相B为乙腈;梯度洗脱:5%～50%B(0～14 min);柱温30℃;流速0.3 mL/min;进样量10 μL．测序色谱条件:流动相A为超纯水［含0.1%甲酸(体积分数)］，流动相B为乙腈;梯度洗脱:5%～70%B(0～20 min)，70%B(20～25 min);柱温30℃;流速0.3mL/min;进样量10 μL．测序质谱条件:电喷雾正离子电离模式，质量扫描范围m/z 50～2000，气体温度350℃，干燥气流速9 L/min，喷雾气压0.28 MPa，毛细管电压3.5 kV，裂解电压150 V，锥孔电压65 V．利用Peaks Viewer 4.5软件(Bioinformatics Solutions Inc．)和手动计算相结合的方式鉴定多肽序列．2 结果与讨论2．1 核桃蛋白酶解物的分离与纯化利用超滤管超滤核桃蛋白酶解物后，用DPPH清除实验及羟基自由基清除实验来检测酶解物分子量分别大于和小于3000的组分的抗氧化活性．结果表明，酶解物分子量小于3000的组分具有更强的抗氧化能力，故取此组分进行下一步分离纯化．经Sephadex G-25分离纯化共获得4个主要洗脱峰F1，F2，F3和F4［图1(A)］;经抗氧化实验［图1(B)］发现F2具有更强的抗氧化活性．收集F2组分，冻干后进一步利用HPLC纯化［图2(A)］，发现F2-5抗氧化活性最强，多次收集，冻干．Fig．1 Separation of antioxidant peptides from active fraction of walnut protein hydrolysates after ultrafiltration by Sephadex G-25 gel filtration chromatography(A)and DRSA，HRSA of the eluted peaks(B)All the results are triplicates of mean±SD in(B)．Fig．2 RP-HPLC chromatography of antioxidant peptides from gel chromatography fraction 2(A)and DRSA，HRSA of the eluted peaks(B)All the results are triplicates of mean±SD in(B)．2．2 核桃蛋白酶解物的抗氧化活性DPPH自由基清除能力测定是一种常见的筛选和评价抗氧化剂活性的有效方法．DPPH是一种较为稳定的自由基，分子结构中有未成对电子，其乙醇溶液呈蓝紫色，在517 nm处有最大吸收值．当未成对电子被其它自由基电子配对后，吸收值降低，其褪色程度与所接受的电子数呈定量关系．当与抗自由基活性物质反应时，溶液颜色变浅，吸收值降低．吸收值越低表明该物质的抗自由基活性越强．羟基自由基清除力的测定选用邻二氮菲法，以H2O2/Fe2+体系通过Fenton反应产生羟自由基，总反应可表示如下:邻二氮菲-Fe2+水溶液被羟自由基氧化为邻二氮菲-Fe3+后，其515 nm吸收峰明显降低，根据以上原理，可以A515 nm变化反映羟自由基的氧化作用．图1(B)和图2(B)分别为核桃蛋白酶解物经过Sephadex G-25纯化后的4个组分(F1，F2，F3和F4)和组分F2经过HPLC分离纯化后各组分的DPPH和羟基自由基清除力测定结果．图1(B)显示，4个组分均具较好的DPPH和羟基自由基清除力，其中F2的抗氧化能力最强．图2(B)显示，F2-5的DPPH和羟基自由基清除力最强，收集多次冻干，分别用于测定还原力实验和多肽序列．Fig．3 Reducing power abilities of peptide F2-5，GSH and BHT used at different concentrationsAll the results are triplicates of mean±SD．图3为组分F2-5、阳性对照还原型谷胱甘肽(GSH)及二丁基羟基甲苯(BHT)的还原力实验结果．样品的抗氧化能力与还原力密切相关［14，19］，还原力越强则吸光度值越大．随着F2-5、谷胱甘肽和二丁基羟基甲苯浓度的增大，还原力逐渐增强;当F2-5浓度为1 mg/mL时还原力达到1.5，与谷胱甘肽相当，说明F2-5具有较好的还原力．2．3 核桃蛋白酶解多肽的序列鉴定将F2-5冻干样品用水溶解，先用液相色谱测定其纯度，结果显示谱图中(图4)只有1个峰，可见其为纯品;再利用液相色谱-质谱进行序列鉴定．MS/MS图谱利用专业软件Peaks的de novo功能进行分析，所得结果再手动计算确认，结果如图5所示．F2-5的氨基酸序列为 Ala-Gly-Gly-Ala．Chen等［6，20］和Sampath等［16，21］指出，活性肽中疏水性氨基酸有利于增加脂溶性，抑制油脂的氧化;甘氨酸的侧链只有1个氢原子，多肽骨架具有较高的灵活度，有利于增加多肽的抗氧化能力［22］，故本文中的活性肽也具有一定的抗氧化活性．Fig．4 RP-UPLC chromatogram of fraction F2-5Fig．5 MS/MS spectrum of the purified F2-53 结论核桃蛋白质通过碱性蛋白酶水解后得到的酶解物具有较强的抗氧化活性;经过多步分离纯化后得到多肽Ala-Gly-Gly-Ala，其还原力和谷胱甘肽相当．本文为进一步研究核桃多肽的抗氧化机理及核桃的深加工提供了一定的理论和实验依据，为核桃作为抗氧化的保健品及药品食品添加剂的开发提供了思路．参考文献【相关文献】［1］Martínez M．L．，Labuckas D．O．，Lamarque A．L．，Maestri D．M．，J．Sci．Food Agric．，2010，90(12)，1959—1967［2］ Blomhoff R．，Carlsen M．H．，Andersen L．F．，Jacobs D．R．Jr．，Br．J．Nutri．，2006，96，s52—s60［3］ Carvalho M．，Ferreira P．J．，Mendes V．S．，Silva R．，Pereira J．A．，Jerónimo C．，Silva B．M．，Food 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核桃蛋白的制备工艺

种氨基酸，中有８其种必需氨基酸，精氨酸和谷氨酸含量都相当高１因此如能有效地利用具有很高的经济２ｌ，价值。我国的核桃制品主要有核桃油、核桃乳、核桃
通信作者：胡兵（９８）男，１６一，副教授。
纤维素酶＞木瓜蛋白酶。通过单因素试验和正交试验得出水酶法提取核桃油的最佳工艺条件：选用中性蛋
国的核桃研究显得尤为重要。核桃榨完油后所剩的残粕中含有３０％以上的蛋白质，研究发现，在核桃蛋白中含有ｌ８
核桃粉、核桃干等，其深加工产品较少。为充分利用我
作者简介：胜利（９５）男（）工程师，刘１６一，汉，工程硕士，究方向研食品加工工艺。
Ｋｅｒｓｗａｎｔｍｅｌｗａｎｔｒｔｉ；ｉｓｌｔｏａｅｐｅｉｉｔｎｒｔｙｗｏｄ：ｌｕａ；ｌｕｏｅｎｄｓｏｕｉｎｒｔ；ｒｃｐｔｉａｅｐａｏ
目前世界核桃年产量９２万ｔ，我国年产３Ｏ万ｔ，占世界１ｔ／” ３。我国的核桃制品主要为核桃油、核桃乳、
Ｃｌｇ，ｂｉｉｅｓｙｏｅｈｏｏｙ，ｕａ３０８ＨｂｉＣｉａｏｌｅＨｕｅＵｎｖｒｉｆｃｎｌｇＷｈｎ４０６，ｕｅ，ｈｎ）ｅｔＴ
Ａｂｔａｔｓｒｃ：Ｄｉｃｓｈｒｃｓｏｄｔｎｆｔｅｐｅｒｔｎｏｌｕｙｗａｎｔｍｅ１ｓｕｓｔｅｐｏｅｓｃｎｉｉｓｏｈｒｐａａｉｆｗａｎｔｂｌｕａ．Ｕｓｎｈｅｈｏｆｏｏｉｇｔｅｍｔｄｏ

响应面法优化核桃ACE抑制肽的制备工艺研究

（Ｓａｉ）Ｅ／）ｒｔ．ＨｙｒｌｓｓｃｎｉｏｓｆｒｏｔｍａｏｄｏｙｉｏｄｔｎｏｐｉｌｉＡＣＥｉｈｂｔｎａｄＤＨｒｅｉｅｓｎｉｉｉｎｎｏｗｅｅｄｆｄｕｉｇａｎ
ｒｓｏｓｕｆｃｏｅ．Ｅ／ａｉｔ３４，ｐａ．１ｅｅａｕｅａ５，ａｄｅｚ — ｅｐｎｅｓｒａｅｍｄ１Ｓｒｔｏａ．３Ｈｔ６８，ｔｍｐｒｔｒｔ５ ℃ ｎｎｙ
ｈｙｒｙｉＤＨ）ａｄｏｌｓｓ（ｎｄＡＣＥｎｂｔｒｃｉｉｙｏｆｔｅＷＰＩｈｙｏｙｓｔｏｕｄｂｅｃｎｒｌｄｂｉｈｉｉｏｙａｔｖｔｈｄｒｌａｅｃｌｏｔｏｌｅｙｒｇａｉｎｏｆｔｒｅｐｒｃｓｏｉｉｓ（ｄｒｌｉｅｐｅａｕｅ，ｐＨｎｎｙｅｔｕｔａｅｅｕｌｔｏｈｅｏｅｓｃｎｄｔｏｎｈｙｏｙｓｓｔｍｒｔｒａｄｅｚｍｏｓｂｓｒｔ
６．４．７９
关键词：桃分离蛋白；Ｎｕｒｓ０８Ｉ；ＡＥ抑制肽；响应面法核ｅｔｅ．Ｃａ
中图法分类号：Ｏ．ＴＳ２１２文献标识码：Ａ
Ｏｐｔｍｉａｉｎｏｄｒｌｓｓｃｎｄｔｏｏｈｒｄｕｔｏｉｓｔｏｆｈｙｏｙｉｏｉｉｎｓｆｒｔｅｐｏｃｉｎ
摘要：以核桃分离蛋白为原料，Ｎｅｔａｅ０８Ｌ酶解制备高活性的ＡＣ用ｕｒｓ．Ｅ抑制肽．用反相采高效液相色谱（ＰＨＰ法测定酶解多肽的ＡＣＲ — ＩＣ）Ｅ抑制率，时以水解度和ＡＣ同Ｅ抑制率为考查指标，通过单因素试验及响应面试验设计，化了中性蛋白酶（ｕｒｓ．）解核桃分优Ｎｅｔｅ０８Ｌ酶ａ离蛋白的酶解工艺．结果表明：因素对水解度的影响顺序为ｐ各Ｈ＞温度＞ＥＳ对ＡＣ／，Ｅ抑制

水解角蛋白工艺流程说明

水解角蛋白工艺流程说明
水解角蛋白是一种重要的生物工程技术，在食品、医药和化妆
品等领域有着广泛的应用。

其工艺流程通常包括以下几个步骤：
1. 原料准备，首先需要准备角蛋白的原料，通常是从动物角质
中提取得到的。

原料的质量和纯度对最终产品的质量有着重要影响。

2. 预处理，原料角蛋白需要经过一系列的预处理步骤，例如清洗、粉碎、脱脂等，以去除杂质和提高原料的可加工性。

3. 水解反应，将经过预处理的角蛋白原料加入水解酶和适量的水，在一定的温度、pH条件下进行水解反应。

水解酶会将角蛋白分
解为较小的肽段和氨基酸。

4. 过滤和分离，水解反应结束后，需要对反应液进行过滤和分离，以去除未反应的原料残留物和水解酶。

通常采用离心、过滤等
方法进行分离。

5. 浓缩和干燥，经过分离得到的水解产物需要进行浓缩和干燥
处理，以得到成品。

通常采用膜分离、喷雾干燥等技术进行处理。

6. 成品包装，最后将水解角蛋白成品进行包装，通常采用密封包装，以保证其质量和稳定性。

需要注意的是，在整个工艺流程中，需要严格控制各个步骤的操作条件，包括温度、pH值、酶的用量等，以确保水解反应的高效进行和产物的质量稳定。

另外，对废水的处理和资源回收也是工艺流程中需要重点考虑的环节，以减少对环境的影响。

总的来说，水解角蛋白工艺流程涉及到多个环节，需要严格控制和操作，以确保最终产品的质量和安全性。

核桃蛋白有限酶解增溶改性的工艺研究

酶用旦０．４％。最佳条件下制备的改性核桃蛋白的水解度仅为３．２５％，而氮溶指数从８．７４％显著提升到
７８．１６％。
关键词
核桃蛋白蛋白酶
有限酶解
溶解性
工艺优化
中图分类号：ＴＱ４３２．２
核桃蛋白有限酶解增溶改性的工艺研究
沈敏江 ’ 王文辉刘丽刘红芝王强
（中国农业科学院果树研究所，兴城１２５１００）
（中国农业科学院农产品加工研究所／农业部农产品加工综合性重点实验室，北京１００１９３）
１０Ｕ／ｇ）、胰蛋白酶（２．５ × １０Ｕ／ｇ）：诺维信公司；复合蛋白酶（５．０×１０Ｕ／ｇ）、风味蛋白酶（２．０×１０Ｕ／ｇ）、
木瓜蛋白酶（５．０×１０Ｕ／ｇ）：北京索莱宝科技有限
因此，选择合适的蛋白酶，控制较低的水解度，同时提高蛋白质的溶解性成为生产工艺中需要解决的
技术问题。
天冬氨酸和精氨酸的含量明显高于其他氨基酸，对人体生理作用具有重要的功能Ｊ。我国的核桃主要
用于榨油，而榨油后核桃饼粕大部分用作饲料，很少
白粉。
用于食品加工中，附加值低。核桃粕中蛋白质量分
数高达５６％，核桃蛋白主要由谷蛋白、球蛋白、清蛋白和醇溶蛋白组成，分别占总蛋白的７０．１１％、

不同处理条件对核桃蛋白特性的影响

不同处理条件对核桃蛋白特性的影响不同处理条件对核桃蛋白特性的影响摘要：核桃是一种常见且营养丰富的坚果，其中的核桃蛋白是其重要的营养成分。

核桃蛋白在不同的处理条件下，如温度、酸碱、加工方法等，会发生一系列的变化，包括结构、功能和稳定性等方面。

本文将探讨不同处理条件对核桃蛋白特性的影响，并对其潜在应用进行展望。

关键词：处理条件，核桃蛋白，结构，功能，稳定性。

一、引言核桃是一种营养丰富的坚果，富含蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素和矿物质等营养成分。

其中的核桃蛋白在人体生理功能、食品加工和功能性食品等领域具有广泛的应用潜力。

然而，核桃蛋白的特性受到不同处理条件的影响，因此了解这种影响对于最大化发挥核桃蛋白的功能和应用具有重要意义。

二、温度对核桃蛋白特性的影响温度是影响蛋白质结构和功能的重要因素之一。

研究表明，在不同温度下处理核桃蛋白，可以改变其构型和功能。

在低温下，核桃蛋白的溶胀性增加，其构型更加紧密。

而高温处理会导致核桃蛋白的部分失活和降解，其溶胀性和构型也会发生改变。

此外，温度还与核桃蛋白的稳定性密切相关。

在适宜的温度下处理核桃蛋白，可以增强其稳定性和抗氧化性能。

三、酸碱对核桃蛋白特性的影响酸碱条件对核桃蛋白结构和功能的影响也十分显著。

在酸性条件下，核桃蛋白的水解和降解反应会增加，导致其功能的损失。

而碱性条件下，核桃蛋白的氨基酸残基会发生脱去，使得其溶解度增加。

此外，酸碱条件还可以改变核桃蛋白的电荷分布，从而影响其亲水性和亲脂性。

四、加工方法对核桃蛋白特性的影响核桃蛋白的加工方法也会对其特性产生一定的影响。

例如，高速搅拌和超声处理可以使核桃蛋白分子更加分散，并提高其稳定性和乳化性能。

而加热处理则有助于提取核桃蛋白中的抗氧化物质，增强其抗氧化活性。

此外，不同的加工方法还能改变核桃蛋白的颗粒大小和分布情况，从而影响其稳定性和口感。

五、核桃蛋白的潜在应用了解不同处理条件对核桃蛋白特性的影响对于其潜在应用具有指导意义。

水酶法同时提取核桃仁油脂及水解蛋白的工艺研究

关键词：核桃油；核桃蛋白；水酶法
中图分类号：Ｔ２１２＋５Ｓ０．文献标识码：Ａ文章编号：１０２１（０００ — １１～５０６— ５３２１）１０３０
Ｔｈｔｄｎａｕｏｓｅｚｍａｉｘｒｃｉｎｐｏｅｓｏｅｓｕｙｏｑｅｕｎｙｔｅｔａｔｒｃｓｆｃｏ
ｗａｌｕｉａｄｗａｌｕｒｔｉｙｏｌｓｔｓｎｔｏｌｎｎｔｐｏｅｎｈｄｒｙａｅ
ＳｈａｇｚｉＬＩＪａｇ，ＬＩＹｉｄｎＨＩＳｕｎ－ｈ，ｉｎＵ－ｏｇ，ＬＩＺｈｅ
（ｏｄＣｌｇｆｈｈｚＵｉｒｔ，Ｓｉｅｉ３０３Ｆｏｏｅｅｏｉｅｉｎｖｓｙｈｈｚ８２０）ｌＳｅｉ
淀粉酶与中性蛋白酶组成的复合酶的酶解效果进行了比较，确定中性蛋白酶的酶解效果最佳。在确定中性蛋
白酶的作用下，研究了酶解温度、ｐＨ、酶的添加量、固液比对油脂提取率的影响。最后通过正交试验得出水
ｓｏｅｈｔｔｅｎｕｒ —ｐｏｅｓｓｔｅｂｓｎｙ．Ｓｃｎｈｗｄｔａｈｅｔａｌｒｔａｅｗａｈｅｔｚｍｅｅｅｏｄ，ｔｅｉｆｅｃｓｏｍｐｒｔｒ，ｐ，ｔｅｅｚｍｅｄｈｎｌｎｅｆｔｕｅｅａｕｅＨｈｎｙｓａ－
酶法提取核桃油脂的最佳工艺条件为：酶解温度６￣ｏｃ，蛋白酶添加量为１５（／，酶解ｐ为６０．％ｍｍ）Ｈ．，料

坚果核桃蛋白的提取及纯化

坚果核桃蛋白的提取及纯化摘要铁蛋白（ｆｅｒｒｉｔｉｎ）是一种铁结合和存储蛋白，广泛存在于动物、植物和微生物体内，是生物体内的一种保守性较高的多功能多亚基蛋白。

植物铁蛋白作为专门的贮铁蛋白，是植物光合作用和固氮等生化反应的铁源，不仅调节体内铁的含量，而且是一种重要的胁迫反应蛋白，调控铁生物功能，在植物的发育、抵抗氧化损害等方面发挥重要的作用。

本文坚果核桃仁为原料，采用盐析、DEAE-cellulose52弱阴离子柱层析、聚丙稀酰胺葡糖凝胶等技术手段对核桃铁蛋白进行了分离、纯化。

即用经粉碎核桃蛋白粗提取液先用MgCl2和柠檬酸钠晶体进行盐析，离心得到的铁蛋白粗提取液经过透析袋透析后接用DEAE-cellulose52弱阴离子交换柱层析和凝胶层析的方法进行纯化。

关键词核桃仁铁蛋白柱层析纯化Abstract Ferritin (ferritin) is a kind of iron and storage protein, widely exists in animals, plants and microbes in the body, is a kind of conservative higher organisms of multi-tasking and protein. Plant ferritin as special iron storage protein, is a plant biochemical reactions such as photosynthesis and nitrogen fixation of source of iron, not only adjust the content of iron in the body, and is an important stress response proteins that regulate biological functions of iron, in plant growth and resistance to oxidation damage, etc. play an important role. Nuts, walnut kernel as raw material, this paper adopts the salting-out, DEAE - cellulose52 weakly anionic column chromatography, polypropylene technology means such as milling amine glucose gel on walnut iron protein separation and purification. Box after smashing walnut protein crude extract with MgCl2 and sodium citrate crystals first salting-out, centrifugal ferritin from crude extract after dialysis, dialysis bag or move DEAE - cellulose52 weak anion exchange column chromatography and sub analysis method for purification of coagulation.Keywords English walnut seed Ferritincolumn chromatographypurification第一章绪论1.1 坚果核桃的概述核桃，原产于近东地区，又称胡桃、羌桃，与扁桃、腰果、榛子并称为世界著名的“四大干果”。

酶解条件对核桃多肽抗氧化活性的影响

ＫＯＮＧＬｉｎｇ－ｍｉｎｇ，ＬＩＦａｎｇ，ＺＯＮＧＹｕ－ｘｉａ，ＷＥＩＱｉ－ｃａｉ。，ＹＡＮＧＨａｉ－ｙａｎ ’
（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｏｄａｎｄｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，ＸｉｎｊｉａｎｇＡｇｉｒｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｑｉ８３００５２，Ｘｉ￣ｉａｎｇ，Ｃｈｉｎａ；
ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓｐｒｏｄｕｃｔｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ，ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｎａｎｔｉ — ｏｘｉｄａｔｉｖｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓｐｒｏｄｕｃｔｈａｖｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｅｆｆｅｃｔ．Ｔｈｅｍｏｓｔｓｕｉｔａｂｌｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｗａｓ：ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ５０ｏＣ，ｔｉｍｅ１２０ｍｉｎ，ｐＨ８，ｓｕｂｓｔｒａｔｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ３％，ａｎｄａｄｄｉｎｇａｍｏｕｎｔｏｆｅｎｚｙｍｅ３％．Ｕｎｄｅｒｔｈｅｓｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ

核桃肽免疫调节作用的研究

调节剂迫在眉睫。
（记录为 B），调节 pH 至 10 于室温提取 2h；B 完成第一次提取
核桃（Juglans regia L）又名胡桃，属于四大坚果之一，具有后，滤液待用，滤渣继续进行提取；A 完成二次提取后，滤渣弃
很高的营养药用价值[5]，在我国古医药书籍中有明确记载，李时去，滤液倒入等量的核桃粕（记录为 C），调节 pH 至 10 于室温
营养价值，副产物脱脂核桃粕常被作为饲料和肥.1.2”项下蛋白酶解液使用孔径为
排放污染环境，附加值较低。前期工作中，我们开发了核桃肽的 0.1滋m 的微滤膜进行过滤，透过液再经 5000Dalton 超滤膜处理
制备工艺，是由脱脂核桃粕经蛋白提取、酶解、纯化、浓缩、干燥后，透过液在 80oC 下浓缩至固体含为 3.4%时，进行喷雾干燥，
等完成，制备工艺简便、绿色环保、适合工业生产，使脱酯核桃粕进口温度为 140oC，出口温度为 55益耀65益，得到淡黄色核桃肽
得到开发利用[10]。研究表明，核桃肽具有抗氧化、抗疲劳、降血粉，产率为 21wt%，测得肽含量为 81wt%。
压、提高记忆力的功效，但对于在免疫调节方面的研究尚未见文 1.2.2 肽含量测定
苏 185 核桃购自和田天力沙生药物开发有限公司，符合 2015 版胞悬浮液稀释至 5伊105cells/mL，并使终体积为 36mL，其中含
特勒-托利多公司），人外周血单核细胞（HPBMC）购自瑞士 1.2.3 对细胞内炎症免疫因子的影响：将 10滋g/mL anti-CD3 包
LONZA 公司，Human Th1/Th2/Th17 Kit 购自美国 BD 公司。阿克被于 6 孔板（200滋L/孔），4益静置 18耀24h。活化 HPBMC，使用细

核桃蛋白中性蛋白酶水解物的制备及其抗氧化活性研究

刘昭明，黄翠姬，孟陆丽，黄娟娟，巫俊良广工院物化工系广柳４０（西学生与学程，西州５０）５６
摘要［目的］究制备核桃蛋白水解物的最佳Ｘ艺条件及水解物的抗氧化活性。［法］研－方以核桃蛋白为底物，用正交试验研究制备采其中性蛋白酶水解物的工艺条件，通过测定自由基清除能力研究酶水解物的抗氧化活性。［结果］制备核桃蛋白酶水解物的最优工艺条件为：温度４０℃ 、底物浓度４酶浓度４００Ｕｇｐ％、０／、Ｈ值８０核桃蛋白酶水解物的水解度与其对羟自由基（Ｈ・和超氧阴离子自由基．；Ｏ）（：・的清除能力有关，水解度为２．％时对羟自由基（Ｈ・和超氧阴离子自由基（・的清除率分别为１．％和５．％。［０）其４２Ｏ）０）７０２０结论］用Ｓｐｄｘ．凝胶柱层析对水解度为２．％的酶水解物进行分离，采ｅｈｅ２Ｇ５４２得到了Ａ、、Ｂｃ和Ｄ４种肽混合物，中，其肽混合物ｃ的自由
４０℃ ，ｓｂｔｔｏｃ．ｏ％，ｎｙｅｃｎｎｆ０／，ｐａｕｆ．．Ｔｅｈｄｏｙｉｄｇｅｆｈｙｒｌｓｔｏｗａｕｒｔａｅｕｓａｅｃｎｎｆｒ４ｅｚｍｏｃ．ｏ００ＵｇＨｖｌｅｏ０ｈｙｒｌｓｅｒｅｏｅｈｄｏｙａｆｍｌｔｏｅｓ４８ｓｔｅｒｎｐ
ｗｓｒｌｔｄｔｉｃｖｎｉｇａｔｉｎｈｄｏｙｅａｉａＯＨ・）ｎｕｅｏｉｅａｉｎｆｅｒｄｃｌ（ａｅａｔｓａｅｇｎｃｉｔｏｙｒｘｌｒｅｒｄｃｌ（ｅｏｓｖｙｆａｄｓｐｒｘｄｎｏｅａｉａＯ２・），ｎｈｎｉｙｒｌｓｓｄ— ｒａｄｗｅｓｈｄｏｉｅｔｙｇｅａ４２，ｉｃｖｎｉｇｒｔｓｏｙｒｘｌｒｅｒｄｃｌ（ｒｅｗｓ２．％ｔｓａｅｇｎａｅｎｈｄｏｙｅａｉａＯＨ・）ｎｕｃｏｉｅａｉｒｅｒｄｃｌ（２・）ｗｒ７Ｏａｄ５．％ｓｆａｄｓｐｒｘｄｎｏｆａｉａＯｎｅｅｅ１．％ｎ２０ｒｓ．［ｏｃｓｎＴｅｈｄｏｓｅｈｃｙｒｙｉｄｇｅａ２．％ｗｓｅａｔｙＳｐｄｘＧ２ｅｆｔｔｎｃｒｍｔｒｐｙａｄｅｐＣｎｌｉ］ｈｙｒｌａｉｈｄｏｓｅｒｗｓ４２ｕｏｙｔｗｈｌｓｅａｓｐｒｅｂｅｈｅ－ｇｌｉｒｉｈｏａｇａｈ，ｎａｄ５ｌａｏｏ

中性蛋白酶水解核桃蛋白工艺

Ｖ２．ｇ烟酸１ｇ尼克酸１圜核桃蛋白由４Ｂ０１ｍ、５．ｍ、０．ｍｇ。０
品加工研究所，广东湛江５４０）２０１
摘要：究中性蛋白酶对核桃蛋白的水解作用，研分析ｐ温度、Ｈ、水解时间、底物浓度、酶量对水解度的影响，加并采
ｐ．、Ｈ６温度４、００ｏ水解时Ｃ
用正交试验对其进行优化。定中性蛋白酶水解核桃蛋白制备核桃多肽的最佳水解条件确
关键词：桃蛋白；核中性蛋白酶；解度水
间３、．ｈ底物浓度００．加酶量７５１ｋｔ以每克底物计）在此条件下核桃蛋白质水解度为４．７％、０ａ（ｎ，８３％。５
ＳｕｎＰｒｐｒｔｏｏａｎｐｔｄｓｆｏＥｎｚｍａｉｄｏｙｉｆＮｅｔａｏｅｓｔｄｙｏｅａａｉｎｆＷｌｕｔＰｅｉｅｒｍｙｔｃＨｙｒｌｓｓｏｕｒｌＰｒｔａｅＦＡＮａｇｕ，ＫＡＮａＦｎ－ｙＨｕｎ，ＸＵｈｎＷＵ，ＧＵＯ－ｎ，Ｓａ— ＬｉＨＥｎｉ，ＨＡＮｉｐｎｇＲｕ－ｘＺｈ－ｉｚ
７８
２１０１年１１月第３２卷第１１期
ＦｏｅａｃｎｅｅｐｎｏｄＲｓｒｈｄｖｌｍｅｔｅＡＤｏ
食品研究与开发
应用技术
中性蛋白酶水解核桃蛋白工艺
范方，，，，
（．１西南林业大学西南山地森林资源保育与利用省部重点实验室，云南昆明６０２；．５２４２中国热带农业科学院农产

核桃蛋白酶解物

核桃蛋白酶解物
核桃蛋白酶解物通常是指通过酶解过程获得的核桃蛋白分解产物。

酶解是一种生物化学反应，利用酶（酶是一种生物催化剂）来加速蛋白质的水解过程，将蛋白质分解成较小的肽段、氨基酸和其他生物分子。

核桃蛋白酶解物可能包含以下特性和应用：
1.易消化：酶解过程可以将核桃蛋白质分解为较小的片段，使其
更易于被人体消化吸收。

2.改善口感：酶解可以改变蛋白质的结构，从而影响其口感和质
地，使得核桃蛋白更加适合用于某些食品制品。

3.提高生物利用度：酶解后的蛋白质可能更容易被人体吸收利用，
因为较小的片段更容易通过消化系统。

4.添加到食品中：核桃蛋白酶解物可以作为食品添加剂，用于增
强食品的营养价值、口感和质地。

5.保健品和运动营养：酶解蛋白质通常被添加到保健品和运动营
养产品中，以提供易于消化的蛋白质源，并支持身体的修复和
生长。

6.调味料：酶解物可能具有一定的风味特性，可用作食品调味料，
增强产品的口感和风味。

请注意，具体的核桃蛋白酶解物可能会根据生产过程和产品设计的不同而有所差异。

如果您对特定产品或成分的详细信息感兴趣，建议查看产品标签、生产商提供的信息或与相关专业人士进行咨询。

核桃酶的作用是什么意思

核桃酶的作用是什么意思核桃酶是一种酶类蛋白质，主要存在于核桃中。

它在食品加工和医学领域有着重要的作用。

在食品加工中，核桃酶可以帮助加速食物的消化和吸收，有助于促进人体的新陈代谢，提高身体的免疫力。

在医学领域，核桃酶也被广泛应用于各种治疗和预防疾病的方法中。

接下来，我们将详细介绍核桃酶的作用及其在食品加工和医学领域的应用。

一、核桃酶的作用。

1. 促进食物消化和吸收。

核桃酶可以帮助分解食物中的蛋白质、碳水化合物和脂肪，加速食物的消化和吸收。

它能够促进人体对营养物质的吸收，提高身体的能量水平，增强身体的抵抗力。

2. 促进新陈代谢。

核桃酶可以帮助加速人体的新陈代谢，促进体内废物的排出，有助于保持身体的健康状态。

它还可以帮助调节人体的内分泌系统，提高身体的免疫力。

3. 抗氧化作用。

核桃酶具有很强的抗氧化作用，可以帮助清除体内的自由基，减少细胞的氧化损伤，延缓衰老，有助于保持身体的健康状态。

二、核桃酶在食品加工中的应用。

1. 食品添加剂。

核桃酶可以作为一种食品添加剂，用于加工肉类制品、面包、酱料等食品中。

它可以帮助加速食物的消化和吸收，提高食品的营养价值，增强食品的口感和口味。

2. 酿造工艺。

在酿造工艺中，核桃酶可以帮助加速酒类、酱油等食品的发酵过程，提高食品的品质和口感。

3. 面包烘焙。

在面包烘焙过程中，核桃酶可以帮助加速面团的发酵，提高面包的松软度和口感。

三、核桃酶在医学领域的应用。

1. 消化系统疾病。

核桃酶可以帮助促进消化系统的消化和吸收，有助于预防和治疗消化系统疾病，如胃炎、胃溃疡等。

2. 心血管疾病。

核桃酶具有很强的抗氧化作用，可以帮助清除体内的自由基，减少血管的氧化损伤，有助于预防和治疗心血管疾病，如高血压、动脉硬化等。

3. 免疫系统疾病。

核桃酶可以帮助调节人体的免疫系统，提高身体的抵抗力，有助于预防和治疗免疫系统疾病，如过敏性疾病、自身免疫性疾病等。

四、注意事项。

1. 过量摄入核桃酶可能会导致消化不良、腹泻等不适症状，因此在食用含有核桃酶的食品时，应适量食用，不宜过量。

中性蛋白酶

5.4医药工业中的应用
在医药工业中蛋白酶被用于制备药剂,如伤口清创的药膏、烧伤疤痕软化、消炎消肿、祛痰等。中性蛋白酶具有广泛的多样性和底物特异性,使其在研发高效治疗药剂方面优势明显。来自米曲霉的中性蛋白酶可被用作消化助剂,纠正某种裂解酶缺陷病症。梭菌胶原酶或枯草杆菌蛋白酶联合广谱抗生素用于治疗烧伤和创伤。由枯草芽孢杆菌产生的中性金属蛋白酶能特异性的水解纤维蛋白和胶原蛋白,所以广泛应用于皮肤病学上。
3、中性蛋白酶的分类：
中性蛋白酶根据催化机制和活性中心蛋白酶功能基团不同可以分为丝氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶以及金属蛋白酶四大类。 3.1 丝氨酸蛋白酶
丝氨酸蛋白酶催化底物蛋白质水解时通常有两个步骤。在水解过程中,随着氨基酸的丢失和肽链的断裂还形成共价酶-肽复合物的中间二聚体。然后脱去酰基,通过水对中间体的亲核攻击,从而使底物肽键水解。大部分的丝氨酸蛋白酶都形成一个典型的Ser—His—Asp的三联体结构,也有少量以丝氨酸作为催化基础。
中性蛋白酶
中性蛋白酶
1、中性蛋白酶的定义：
指能够在中性或弱酸、弱碱性环境中作用的一类蛋白酶，其最适作用pH介于6.0～7.5,能催化蛋白质肽键水解，具有催化反应速度快,无工业污染,反应条件适应性宽等优点。
2、工作机理：
中性蛋白酶能在中性条件下水解食品中蛋白质的肽键，释放氨基酸或者多肽。在酒精、葡萄酒、果汁、啤酒和黄油生产中，添加中性蛋白酶可澄清发酵液中的雾气。酵母在发酵阶段的生长可以通过悬浮蛋白质转化的氨基酸来加以促进，从而加速发酵并提高产量。
5.2 皮革工业中的应用
皮革加工包括浸透、去毛和软化等过程，传统的工艺主要采用化学方法处理，在加工过程中不可避免地会使用到强腐蚀性物质，既不利于生产，也容易导致环境污染。酶替代化学药品在提高皮革质量与减少环境污染证明是颇有成效的。蛋白酶主要被用于选择性的水解皮肤中的非胶质组分与去除非纤维蛋白,如清蛋白与球蛋白等。将蛋白酶应用于皮革工业中,可以减少浸泡时间。中性蛋白酶酶制剂的选择依赖于矩阵蛋白（如弹性蛋白和角蛋白）的特异性,酶用量取决于被处理皮革的软硬。酶制剂在皮革制品加工中的应用不仅有利于减少环境的污染而且还能节约能源。

核桃分离蛋白酶解产物结构与功能的变化

核桃分离蛋白酶解产物结构与功能的变化程赞;赵晓燕;张晓伟;王萌;刘红开;虎海防【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】2022(47)6【摘要】核桃蛋白是优质植物蛋白,但其溶解度较低,限制了其在食品中的应用。

为拓宽核桃蛋白的应用范围,采用不同的蛋白酶(碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶)对核桃分离蛋白进行酶解,然后分析不同蛋白酶酶解产物的水解度、二级结构和功能性(溶解性、吸水性、吸油性、乳化特性和起泡特性)。

结果表明:碱性蛋白酶酶解产物的水解度最高,为22.16%,其次是木瓜蛋白酶的,为20.06%,而胰蛋白酶的最低,为13.95%;FTIR结果显示这5种蛋白酶酶解产物的二级结构中均以β-折叠及β-转角为主;在pH 7.0时,与核桃分离蛋白的吸水性(2.36 g/g)和吸油性(4.65 g/g)相比,5种蛋白酶酶解产物的吸水性和吸油性分别提高了11.58~17.15 g/g和7.58~15.44 g/g;与核桃分离蛋白相比,在不同pH(2~12)下,5种蛋白酶酶解产物的溶解度显著提高;在不同的pH和NaCl浓度下,5种蛋白酶酶解产物的乳化特性和起泡特性也不同。

从提高蛋白功能性角度考虑,碱性蛋白酶为核桃分离蛋白的最佳酶解用酶。

【总页数】7页(P85-91)【作者】程赞;赵晓燕;张晓伟;王萌;刘红开;虎海防【作者单位】济南大学食品科学与营养系;新疆林业科学院【正文语种】中文【中图分类】TS229;TQ93【相关文献】1.核桃蛋白酶解产物的特性研究2.抗坏血酸对大豆分离蛋白酶解产物功能特性影响研究3.大豆分离蛋白酶解产物功能特性的研究4.不同水解度对核桃分离蛋白酶解物功能特性的影响5.豌豆分离蛋白酶解产物的乳化特性及抗氧化性研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。