生物实验报告-坐骨神经腓肠肌标本制备
实验02 坐骨神经-腓肠肌标本的制备.
实验二 坐骨神经-腓肠肌标本的制备
[实验目的与要求]
1.学习蛙类动物单毁髓与双毁髓的方法。 2.学习并掌握蛙类坐骨神经-腓肠肌标本以及腓
肠肌的制备方法。 3.了解电刺激的极性法则。
[实验动物与器材]
蟾蜍，常用的手术器械（手术剪、手术镊、手术刀、 金冠剪、眼科剪、眼科镊、毁髓针和玻璃分针） ， 解剖盘，蛙板，铜锌弓，培养皿，污物缸步骤]
1.将蟾蜍单毁髓和双毁髓 2.制备坐骨神经-腓肠肌标本 ①先制备后肢标本 ②分离两后肢 ③分离坐骨神经 ④游离腓肠肌 ⑤分离股骨头或胫腓骨头 ⑥检验标本
[实验结果]
你制备的坐骨神经-腓肠肌标本机能正常吗？如 何检验标本的机能？
[分析讨论] 如何保持坐骨神经-腓肠肌标本的正常机能？ [结论]
[实验注意事项]
1.毁随要彻底；毁髓时不要将蟾蜍对着其他同学，
防止刺破的耳后腺毒液射入其他同学眼中。 2.操作过程中不可将剥皮后的标本同皮肤、内脏等
弃物放在一起。 3.制作标本的过程中要经常用任氏液湿润标本。 4.分离神经时，不能过度牵拉或用手术器械夹持神
经。
[思考题]
剥去皮肤的后肢能用自来水冲洗么,为什么？
生理学实验1 蛙坐骨神经腓肠肌标本的制备
生理学实验1 蛙坐骨神经腓肠肌标本的制备一、目的和原理蛙或蟾蜍等两栖类动物的一些基本生命活动与温血动物近似，但其离体组织所需的生活条件比较简单，且易于控制，因此在生理学实验中常用其离体组织或器官作为实验标本。
例如：蛙或蟾蜍的坐骨神经腓肠肌标本，可用来观察和研究兴奋性、兴奋过程、刺激引起兴奋的条件、兴奋在神经-肌接头处的传递、肌肉收缩的特点等多种生理现象，所以，制备坐骨神经-腓肠肌标本，是生理学实验的一项基本操作技术。
本实验的目的是：学习并掌握制备坐骨神经-腓肠肌标本的方法，为以后的神经肌肉实验打下基础。
二、实验对象蛙或蟾蜍三、器材和用品蛙板、蛙针、蛙钉、剪刀（2把）、镊子（2把）、玻璃针、锌铜弓、培养皿、滴管、棉线、棉球、尸体盘（以上用品合称蛙类解剖器械一套）及任氏液。
四、方法与步骤1．破坏脑脊髓选一活泼健壮的蛙或蟾蜍，用清水冲洗干净。
左手握蛙，用食指下压吻端，拇指按压背部，使头前俯；右手持蛙针由吻端沿正中线向尾端触划，所触到的凹陷处即是枕骨大孔所在部位。
将蛙针由此垂直刺入皮下，再将针尖折向前方，经枕骨大孔进入颅腔，左右搅动捣毁脑组织（图1-1）。
然后将蛙针退出至刺入点皮下，再将针尖向后插入椎管捣毁脊髓。
图1-12．剪除前部躯干及内脏在骶髂关节以上1厘米处用粗剪刀剪断脊柱，并将前部躯干及所有内脏一并剪去，仅保留一段腰骶部脊柱和后肢。
在所留脊柱的腹侧两旁可看到坐骨神经丛。
剪下的部分置于尸体盘内。
3．剥皮左手捏住脊柱断端，右手捏住断端边缘的皮肤，向下剥掉后肢的全部皮肤，标本置于盛有任氏液的培养皿中待用，皮肤弃去。
洗净双手和器械，以免蛙或蟾蜍皮肤的分泌物损害神经和肌肉。
4．分离两后肢将下肢标本腹侧向上用蛙钉固定于蛙板上，用玻璃针沿脊柱两侧分离两条坐骨神经；在两条坐骨神经下各穿一线，于靠近脊柱处将其分别结扎，并在扎线与脊柱之间剪断神经；左手用结扎线提起坐骨神经，右手持剪刀或玻璃针向下游离，直至坐骨神经出盆腔处；将游离的两条坐骨神经分别置于两侧大腿的肌肉上。
坐骨神经腓肠肌标本制备实验结论
坐骨神经腓肠肌标本制备实验结论一、实验目的二、实验原理三、实验步骤四、实验结果五、实验结论一、实验目的本次实验的主要目的是通过坐骨神经腓肠肌标本制备，了解人体肌肉组织的结构和特点。
同时，通过对标本制备过程中各个步骤的操作，掌握标本制备技能和方法。
二、实验原理1. 坐骨神经腓肠肌标本制备原理坐骨神经腓肠肌标本制备是指将动物或人体组织切割成薄片并进行染色处理，使其能够在显微镜下观察。
在这个过程中，需要进行以下几个步骤：（1）取样：从动物或人体中取出需要观察的组织样品。
（2）固定：将组织样品放入固定液中进行固定处理。
（3）包埋：将固定后的组织样品放入包埋剂中进行包埋处理。
（4）切片：将包埋后的组织样品切成薄片。
（5）染色：将切片进行染色处理，使其能够在显微镜下观察。
2. 坐骨神经腓肠肌结构原理坐骨神经腓肠肌是人体下肢的一部分，由坐骨神经支配。
它主要由三个部分组成：大腿后侧的半膜状肌、半腱状肌和小腿后侧的胫长伸肌。
这三个部分都是由肌纤维束组成的，每个束内又包含有许多个单独的肌纤维。
三、实验步骤1. 取样：从动物或人体中取出需要观察的组织样品。
2. 固定：将组织样品放入10%福尔马林液中进行固定处理，固定时间为24小时。
3. 包埋：将固定后的组织样品放入包埋剂中进行包埋处理，包埋时间为48小时。
4. 切片：将包埋后的组织样品切成厚度为5微米左右的薄片。
5. 染色：将切片进行染色处理，常用染色方法有HE染色法和Masson染色法等。
本次实验采用HE染色法进行染色处理。
6. 封片：将染好色的切片放入玻璃片上，加上封片胶，用玻璃片盖住，使其能够在显微镜下观察。
四、实验结果经过以上步骤的操作，制备出了坐骨神经腓肠肌标本。
在显微镜下观察到了肌纤维束组成的三个部分：半膜状肌、半腱状肌和胫长伸肌。
每个束内又包含有许多个单独的肌纤维。
五、实验结论通过本次实验，我们了解到了坐骨神经腓肠肌标本制备的基本步骤和操作方法，并且通过观察标本结构，掌握了人体肌肉组织的结构和特点。
生物实验报告-坐骨神经腓肠肌标本制备
生物实验报告-坐骨神经腓肠肌标本制备
本实验旨在通过制备坐骨神经腓肠肌标本的过程，掌握基础的组织学实验技能，同时加深对神经肌肉解剖结构的理解。
材料与方法：
材料：成年大鼠标本、无水乙醇、石蜡、光学显微镜、麻醉手套、组织取样器、组织取样盒、理化试管架等。
1.准备标本
用麻醉手套将成年大鼠净化神经集中于坐骨神经下1-2厘米范围内，然后将腓肠肌标本从骨骼中取出。
2.固定标本
将取出的腓肠肌标本置于10%的无水乙醇中固定24小时；
3.去水
从10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%到80%的无水乙醇渐次去除，每步时间为1小时；
4.透明
将固定去水的腓肠肌标本分别置于50%敌敌畏-乙醇溶液、70% 敌敌畏-乙醇溶液和100% 敌敌畏透明液溶液中，每步时间为2小时，至标本彻底透明。
5.包埋
取出已透明的腓肠肌标本，置于石蜡组织取样盒中，根据实验需求，选择合适的包埋方向。
6.取薄片
将石蜡包埋的腓肠肌标本取出，用微型切片机切制厚度为5微米的切片，将切片拉直后在干净的水晶片上展开。
7.染色与制成玻片
用哈里斯血液染色将切片染色，脱色后洗净水片后，在水晶片上滴几滴覆盖剂，然后用平凡玻片将组织接口反过来盖住薄片，压紧即可。
实验成果：
经过制备和染色后，我们取得了成年大鼠坐骨神经腓肠肌的标本，通过光学显微镜的观察与检测，我们发现该标本包含完整的腓肠肌结构及肌纤维分离范围。
切片上清晰可见腓肠肌内有明显的核团和细胞质呈透明状，同时染色后肌纤维呈现出红色，血管呈现出蓝色，系统性地展示了腓肠肌肌纤维和血管位置的分布情况。
结论与意义：。
坐骨神经-腓肠肌标本制备
坐骨神经-腓肠肌标本制备骨骼肌单收缩及其总和以及Powerlab实验系统的使用二、实验目的：1. 学习蛙类动物单毁髓与双毁髓方法，并掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
2. 了解电刺激的极性法则和方法，学习肌肉收缩的记录方法。
3. 观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系、骨骼肌的单收缩过程和肌肉收缩的总和以及强直收缩现象, 了解肌肉收缩过程的时相变化以及刺激频率对骨骼肌收缩形式的影响。
三、实验原理：腓肠肌由许多肌纤维组成，刺激腓肠肌时，不同的刺激强度会引起肌肉的不同反应。
当刺激强度过小时，不引起肌肉发生收缩反应，此时的刺激为阈下刺激。
而能引起肌肉发生收缩反应的最小刺激强度，为阈刺激。
当全部肌纤维同时收缩时，则出现最大的收缩反应。
这时，即使再增大刺激强度，肌肉收缩的力量也不再随之加大，该刺激强度为最适刺激强度。
肌肉组织对于一个阈上强度的刺激，发生一次迅速的收缩反应，称为单收缩。
单收缩一般要经历潜伏期、收缩期和舒张期三个过程。
当同等强度的连续阈上刺激作用于标本时，则出现多个收缩反应的叠加，叫做强直收缩。
当后一收缩发生在前一收缩的舒张期，即发生不完全强直收缩；当后一收缩发生在前一收缩的收缩期，各自的收缩则完全融合，肌肉出现持续的收缩状态，即产生完全强直收缩。
四、实验材料：青蛙五、实验步骤：1. 制备坐骨神经-腓肠肌标本：1) 洗干净实验动物2) 双毁髓，剥制后肢，分离两后肢3) 分离坐骨神经4) 游离腓肠肌5) 分离股骨头6) 标本检验7) 电刺激极性法则的验证2. 连接实验装置：将换能器的输出线接至RM6240生理记录装置的2通道，电刺激信号接至肌槽的电极上。
然后把制备好的坐骨神经-腓肠肌标本股骨固定在肌槽上。
将固定肌肉的棉线另一端接在张力换能器上，保持适度松紧，将坐骨神经搭在肌槽的电极上。
3. 设置通道放大器和刺激器：1) 打开PowerLab电源，检查USB线连接2) 打开Chart5中文版3) 设置通道数为24) 设置通道2-桥式放大器：量程5mV,低通10Hz，调零5) 设置刺激器：刺激方式选脉冲，脉冲数1，手动方式，量程10V,振幅100mV,标记通道1，频率1Hz,持续时间1mS,4. 开始测试：1) 打开刺激器面板和点右下角”开始“按钮2) 点右上角调节采样速度（“走纸速度”）3) 菜单打开设置刺激器的脉冲数2个或5个，重新打开刺激器面板4) 调节走纸速度为400六、实验结果：图1. 蛙坐骨神经—腓肠肌标本图（二）坐骨神经-腓肠肌标本在Powerlab实验系统中所记录下的数据1.通过不断调整刺激强度，使肌肉收缩的幅度适中，记录单收缩的曲线（图2-1 ）。
实验一坐骨神经腓肠肌标本的制备、刺激强度和刺激频率与骨骼肌收缩反应的关系
2．在荐椎上方剪断皮肤和脊柱，弃其 头部和内脏，然后左手握住断开的脊柱 后部，右手向后撕裂皮肤，接着将两后 肢一分为二，即剪断耻骨联合（尾杆骨 留在一侧）纵向剪开脊柱。
3．分离坐骨神经：将一侧后肢的脊柱 端腹面向上，趾端向外侧翻转，使其 足底朝上。用大头针将标本固定，在 蛙板上用玻璃钩分离坐骨神经。 4．分离股骨 5．游离腓肠肌 6．用锌铜弓检验标本
（二）标本与仪器的连接
1、刺激强度与肌肉收缩的关系：点击桌 面RM6240并口2.0j→实验→肌肉神经→ 刺激强度对骨骼肌收缩的影响→手动点 击左侧，选择→显示刺激标注→强度（v） →记录键→开始刺激→记录键→存盘。
2、刺激频率与肌肉收缩的关系： 实验→肌肉神经→刺激频率对骨骼肌收 缩的影响→常规实验→手动：点击左侧， 选择→显示刺激标注→频率[Hz]→点击 刺激器强度（修改数值）→记录键→开 始刺激→开始存盘 。
注意事项：
1 避免蟾蜍体表毒液和血液污染标版，压 挤、损伤和用力牵拉标本，不可用金属器 械触碰神经干。 2 在操作过程中，应给神经和肌肉滴加任 氏液，防止表面干燥，以免影响标本的兴 奋性
3 标本制成后须放在任氏液中浸泡数分 钟，使标本的兴奋性稳定，再开始实验 效肌肉收缩的关系”曲 线、编辑并打印结果；标出最适刺激强 度
2标记“刺激频率与肌肉收缩的关系”曲 线、编辑并打印结果；标出单刺激、不 完全强直收缩和完全强直收缩
五、预习报告
实验二 神经干动作电位的测定、神经 冲动传导速度的测定、坐骨神经不应期 的测定
实验一
坐骨神经腓肠肌标本的制备、刺激强度 和刺激频率与骨骼肌收缩反应的关系
哈尔滨师范大学生命科学与技术学院
实验目的
1、学习并掌握坐骨神经—腓肠肌标本 的制备方法。 2、观察刺激强度和收缩反应的关系。
坐骨神经-腓肠肌标本的制备
8、检验标本
01.
用经任氏液蘸湿的锌铜弓的两极，接触 神经，观察腓肠肌是否收缩！
02.
此标本用于神经干兴奋传导、神经-肌肉 接点的传递以及骨骼肌收缩等实验研究
பைடு நூலகம்意：
1. 保护标本——神经和肌肉：不用赃的皮肤碰标 本，不用自来水冲洗标本，不用金属接触神经以 及损伤肌肉。
2. 注意标本的完整，尤其注意保存股骨头一定的长 度
202X
坐骨神经——腓 肠肌标本的制备
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目的要求： 学习蛙类动物毁髓的方法 学习掌握蛙类腓肠肌及坐骨神经——腓肠肌标本的制备
步骤：
双毁髓
剥离后肢标本
分离两后肢
分离坐骨神经
分离股骨头
游离腓肠肌
检验标本
完整的神经肌肉标本应包括以下几个部分
1、首先准备手术所需的用品
动物瘫软如泥。
3、剥离后肢标本
动物腹面向上放置于蜡盘，手术镊轻轻提 起耻骨联合上方，剪开皮肤，再剪开体壁 肌肉，然后轻轻提起内脏，自耻骨部剪断 （勿伤脊神经），把内脏拨向头端，剪断 脊柱。然后一手捏住脊柱后端，另一手向 后撕剥皮肤，并除去头端肢体和内脏
4、分离两后肢
把去皮的后肢腹面向上置于玻璃板上， 于耻骨联合处按压刀刃，切开耻骨联合。 然后用金冠剪剪开两后肢相连的肌肉， 并纵向剪开脊柱。
5、分离坐骨神经
将一侧后肢的脊柱端腹面向上，趾端向外 侧翻转，使其足底向上，用固定针将标本 固定在玻璃板下面的蛙板上。用玻璃分针 分离坐骨神经。股部的坐骨神经在股二头 肌与半膜肌之间。
6、分离股骨头或胫腓骨头
动物小，留股骨头 1cm
动物大，留胫腓骨 头1cm
7、游离腓肠肌
生理学实验报告-《坐骨神经-腓肠肌标本的制备》
实验二-坐骨神经标本—腓肠肌标本的制备一、实验目的：1.学习蛙类动物单毁髓与双毁髓的方法。
2.学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本及腓肠肌的制备方法。
3.了解电刺激的极性法则。
二、实验原理：1、牛蛙作为实验动物的优势：离体实验是动物生理学主要的实验方法之一。
两栖动物是冷血动物，其基本生理机能与温血动物近似，而其离体组织器官维持活性所需要的条件比较简单，因此它常被选为生理学实验提供离体组织或器官的实验动物。
蟾蜍或青蛙坐骨神经—腓肠肌在任氏液中可维持生理活性数小时，在其基础上还可进一步制作神经干标本、腓肠肌标本，可用于研究肌肉收缩的特性，神经和肌肉的兴奋性、传导性，刺激与反应的关系，神经肌肉接头活动等生理活动及相关机制，甚至还可以用于药物筛选如抗疲劳药物的模型。
其中牛蛙人工养殖成本低产出率高，相对蟾蜍要更安全。
因此，本次实验选择牛蛙作为实验对象。
2、锌铜弓刺激检测标本活性的原理：锌铜弓在溶液中沾湿以后，锌的表面电离出正离子，里面形成负离子；而铜的表面电离出负离子,里面形成正离子。
当用锌铜弓接触活组织时，电流便沿着锌一活组织→铜的方向流动而产生刺激效应。
所以锌相当于正极,面铜相当于负极发挥刺激作用；当断开时，则发生相反的效应。
锌的金属电势比铜低，形成一定的电势差（就相当于有电压），锌铜弓是把一根锌棒和一根铜棒一端焊在一起，另一段分开，则接触样本（例如神经干）时，会引起样本局部去极化，引发动作电位。
三、实验器材：牛蛙，常用手术器械（手术剪、手术镊、手术刀、金冠剪、眼科剪、眼科镊、毁髓针、玻璃分针)，蜡盘，蛙板（木质或硬泡沫塑料），玻璃板，固定针，锌铜弓，培养皿或不锈钢盘，污物缸，滴管，纱布，粗棉线，任氏液。
四、实验流程和步骤：1.牛蛙的双毁髓一手握住牛蛙，背部向上。
用拇指压住牛蛙的背部，食指按压其头部前端，使头端向下低垂；另一手持毁髓针，由两眼之间沿中线向后触划，当触及两耳中间的凹陷处（此处与两眼的连线成等边三角形）时，持针手即感觉针尖下陷，此处即是枕骨大孔的位置。
实验1 蛙坐骨神经––––腓肠肌标本制备
实验1 蛙坐骨神经––––腓肠肌标本制备、分析探讨刺激频率对肌肉收缩的影响【课程名称】【实验名称】【实验性质】【器材】蟾蜍或蛙；任氏液；二道生理记录仪、双脉冲刺激器、肌槽、常规手术器械、玻璃分针、毁髓针、锌铜弓、解剖盘、烧杯、滴灌、任氏液等。
【实验目的】1.学习坐骨神经–腓肠肌标本的制备方法。
2.分析探讨刺激频率对肌肉收缩的影响。
【实验原理】刺激坐骨神经能引起腓肠肌产生收缩。
在其他条件不变情况下，不断增大刺激频率可引起肌肉收缩形式发生改变。
若刺激频率较小，两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩和舒张所持续的时间（即单收缩）时，肌肉收缩表现为一连串的单收缩；若增大刺激频率，使两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩的收缩期时间，而小于单收缩时，肌肉呈现不完全强直收缩；若继续增加刺激频率，使两次刺激间隔时间小于一次肌肉收缩的收缩期时间，肌肉则表现出完全强直收缩。
【实验步骤】1、双毁髓：左手握蟾蜍，背部向上。
用食指按压其头部前端，拇指压住躯干的背部，使头向前俯；右手持毁髓针，由两眼之间中线向后方划触，触及两耳后腺之间的凹陷处即是枕骨大孔的位置。
将毁髓针由凹陷处垂直刺入枕骨大孔，然后针尖向前刺入颅腔，在颅腔内搅动，以毁脑组织。
再将毁髓针退至枕骨大孔，针尖转向后方，与脊柱平行刺入椎管，以捣毁脊髓。
脊髓彻底捣毁时，可看到蟾蜍后肢突然蹬直，然后瘫软，此时的动物为双毁髓动物。
2、剥制后肢标本：左手持手术镊提起两前肢之间背部的皮肤，右手持手术剪横向剪断皮肤，然后往后肢方向撕剥皮肤。
剪开腹壁肌肉，用手术镊提起内脏，翻向头部，在看清支配后肢的脊神经发出部位后，于其前方剪断脊柱。
3、分离两后肢：将去皮的后肢腹面向上置于解剖盘上，右手持金冠剪纵向剪开脊柱，再剪开耻骨联合，使两后肢完全分离。
4、分离坐骨神经：将一侧后肢的脊柱端腹面向上，用玻璃分针沿脊神经向后分离坐骨神经，股部沿腓肠肌正前方的股二头肌和半膜肌之间的裂缝，找出坐骨神经，剪断盖在上方的梨状肌，完全暴露坐骨神经，剪去支配腓肠肌之外的分支，再剪去脊柱及肌肉，只保留坐骨神经发出部位的一小块脊柱骨。
生物实验报告腓肠肌标本
一、实验目的1. 学习并掌握青蛙坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
2. 观察腓肠肌的形态结构，了解其基本组织构成。
3. 掌握神经肌肉兴奋性的检测方法，观察神经刺激对肌肉收缩的影响。
二、实验原理青蛙作为一种常用的实验动物，其坐骨神经-腓肠肌标本具有以下特点：1. 腓肠肌体积较大，易于观察。
2. 坐骨神经与腓肠肌紧密相连，便于观察神经对肌肉的影响。
3. 腓肠肌在任氏液中可以保持生理活性，便于观察肌肉收缩。
实验过程中，通过破坏青蛙的脑和脊髓，使其失去意识，然后进行坐骨神经-腓肠肌标本的制备。
制备过程中，需要观察腓肠肌的形态结构，并检测神经刺激对肌肉收缩的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：青蛙、任氏液、手术剪、手术镊、眼科镊、玻璃分针、蛙板、蛙钉、细线、培养皿、滴管、电子刺激器。
2. 实验仪器：显微镜、解剖镜、电子刺激器、放大镜。
四、实验步骤1. 青蛙的处死与固定：取青蛙一只，用自来水冲洗干净。
左手握住青蛙，使其背部向上，用大拇指或食指使头前俯。
右手持探针由头颅后缘的枕骨大孔处垂直刺入椎管，然后将探针改向前刺入颅腔内，左右搅动探针，捣毁脑组织。
接着将探针抽回至进针处，再向后刺入脊椎管，反复提插捣毁脊髓。
此时如青蛙四肢松软，呼吸消失，表明脑和脊髓已完全破坏。
2. 坐骨神经-腓肠肌标本的制备：在骶髂关节水平以上1～2cm处剪断脊柱，左手握住青蛙后肢，用拇指压住骶骨，使青蛙头与内脏自然下垂。
右手持手术剪，沿脊柱两侧剪除一切内脏及头胸部，留下后肢。
用手术剪和眼科剪仔细分离坐骨神经和腓肠肌，用细线将腓肠肌两端固定在蛙板上。
3. 神经肌肉兴奋性的检测：将电子刺激器连接到坐骨神经上，调节刺激强度和频率，观察腓肠肌的收缩情况。
记录不同刺激强度和频率下腓肠肌的收缩幅度和频率。
4. 观察腓肠肌的形态结构：在显微镜下观察腓肠肌的横切片，观察其形态结构，包括肌纤维、肌束、血管等。
五、实验结果与分析1. 腓肠肌的形态结构：在显微镜下观察到腓肠肌由肌纤维组成，肌纤维呈长条状，相互平行排列。
坐骨神经-腓肠肌标本制备
使用轮转式切片机将组织切成薄片，调整切片厚度以满足实验要求。
染色
染色液选择
根据实验需要选择适当的染色液，如苏木素-伊红染色液 （H&E）、Masson三色染色液等。
染色过程
将切片放入染色液中，按照染色液的要求进行染色处理，以 便更好地观察组织结构和细胞形态。
03 结果观察
显微镜观察
观察神经纤维的排列和结构
结果对比
结果解释
02
03
Байду номын сангаас
结果应用
将实验结果与预期结果进行了对 比，分析了实验误差产生的原因。
对实验结果进行了详细的解释， 阐明了实验现象背后的原理和机 制。
探讨了实验结果在现实生活和生 产中的应用前景，为后续研究和 应用提供了参考。
实验改进与优化
实验方法优化
针对实验过程中存在的问题和不足，提出了 改进措施和方法，以提高实验效率和准确性 。
实验设备升级
针对实验设备的局限性和不足，提出了设备升级和 改进的建议，以提高设备的性能和稳定性。
实验流程完善
针对实验流程的缺陷和不足，提出了完善和 优化的建议，以使实验流程更加合理和高效 。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
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02 实验步骤
取材
取材前准备
01
确保实验环境清洁，准备好所需器材和试剂，如手术刀、镊子、
固定液、脱水剂、包埋剂等。
选取适宜的坐骨神经-腓肠肌标本
02
选择健康、新鲜的动物，如小白鼠或大白鼠，并确保所选标本
无病变或损伤。
剥离组织
03
使用手术刀和镊子仔细剥离坐骨神经和腓肠肌周围的脂肪和结
生理学实验 坐骨神神经腓肠肌标本制备
实验一 坐骨神经腓肠肌标本制备【实验目的】掌握坐骨神经腓肠肌标本的制备技术，为以后有关实验打下基础。
【实验原理】两栖类的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似， 而其离体组织所需的生活条件 比较简单，易于建立、控制和掌握。
因此在实验中常用蟾蜍或蛙的坐骨神经腓肠肌标本来观 察兴奋与兴奋性的一些规律以及骨骼肌的收缩特点等。
所以坐骨神经腓肠肌标本的制备是生 理实验的一项基本操作技术。
【实验对象】蟾蜍或蛙。
【实验材料】两栖类手术器械 1套(粗剪刀、组织剪、眼科剪、组织镊、眼科镊、金属探针、玻璃 分针、蛙板)、手术线、蛙尸缸、滴管、平皿、锌铜弓、任氏液。
【实验步骤】1． 破坏脑和脊髓取蟾蜍 1 只，用自来水冲洗干净。
左手握住蟾蜍，用拇指按压背部，食指按压头部 前端使其头部前俯，右手持金属探针在头前缘沿正中线向尾端触划，所触划到的头部后 端的凹陷处，即为枕骨大孔所在部位。
在此处将金属探针垂直刺入皮肤，有突破感后再 将金属探针折向前经枕骨大孔刺入颅腔，左右搅动捣毁脑组织；然后将金属探针回抽至 枕骨大孔处，转向后刺入脊椎管，反复提插捣毁脊髓。
此时如蟾蜍的四肢松软，呼吸运 动消失，表示脑和脊髓已完全破坏，否则应按上法再行捣毁。
2． 剪除躯干上部及内脏如图 1－1 所示，在骶髂关节位置用左手将蟾蜍提起，在骶髂关节水平以上 0.5～l 厘米处用粗剪刀剪断脊柱，然后将粗剪刀尖向下深入体腔沿躯干两侧剪开皮肤，使蟾蜍 头、上肢与内脏自然下垂，将其一并剪除弃去，仅留后肢、骶骨、脊柱及紧贴于脊柱两 侧的坐骨神经。
在整个剪除过程中注意勿损伤神经。
3． 剥皮左手用组织镊夹紧或用手直接捏住脊柱断端(注意：不要夹住或接触神经)，右手捏，将标本放在盛有任氏液 住其上的皮肤边缘，用力向下剥掉全部后肢皮肤（见图 1－2）的平皿中。
将手及用过的粗剪刀、组织镊等全部手术器械洗净，再进行下述步骤。
4． 分离两腿用镊子从背位夹住脊柱将标本提起，剪去向上突出的骶骨(注意勿损伤坐骨神经)，然后沿正中线用粗剪刀将脊柱分为两半，并从耻骨联合中央剪开两侧大腿，然后将分离的两条腿浸于盛有任氏液的平皿中备用。
坐骨神经腓肠肌标本制备实验结论
坐骨神经腓肠肌标本制备实验结论【知乎文章格式】坐骨神经腓肠肌标本制备实验结论1. 引言坐骨神经腓肠肌标本制备是生物学研究中常用的重要实验之一。
通过掌握该实验的结果和结论，我们可以更好地理解腓肠肌的结构与功能，以及与坐骨神经的关系。
本文将对坐骨神经腓肠肌标本制备实验的结论进行深入探讨，并分享我对该实验的观点和理解。
2. 实验方法回顾在进行坐骨神经腓肠肌标本制备实验前，我们需要准备一具成年小鼠标本。
将小鼠安乐死并取出下肢部分。
根据实验设计的要求，切割开腓肠肌，暴露坐骨神经。
接下来，将坐骨神经和腓肠肌分离，并制备成适当大小的标本。
可选地对标本进行染色或其他后续处理。
3. 实验结论通过坐骨神经腓肠肌标本制备实验，我们可以得出以下结论：3.1. 标本制备的合理性在进行标本制备实验时，需要确保充分保留腓肠肌和坐骨神经的完整性。
只有在标本保持完整的前提下，才能准确观察和研究腓肠肌的结构和功能。
在实验中应尽量避免对标本进行过多的切割和处理。
3.2. 标本观察结果标本制备实验的观察结果显示，腓肠肌呈细长的形态，由多束肌纤维组成。
坐骨神经与腓肠肌相连接，通过神经末梢向肌纤维传递信号。
腓肠肌标本的形态和结构对进一步研究其功能提供了必要的基础。
3.3. 实验注意事项在进行坐骨神经腓肠肌标本制备实验过程中，有几个重要的注意事项需要考虑。
实验操作应细致谨慎，以免对标本造成破坏。
在标本制备过程中，应避免应力过大或过度牵拉，以免影响标本的完整性。
在实验时还需要注意保持实验环境的卫生和洁净，以减少污染对实验结果的干扰。
4. 我的观点和理解在我看来，坐骨神经腓肠肌标本制备实验是一项重要且有意义的研究方法。
通过观察和研究标本，我们可以更全面地了解腓肠肌的结构特点和功能特性，为进一步深入研究提供必要的基础。
我认为在进行标本制备实验时，我们应注重细节和准确性。
只有确保标本的完整性和质量，才能得到可靠的实验结果。
注意实验操作中的细致和规范，可以减少人为因素对实验结果的影响。
生物实验报告坐骨神经腓肠肌标本制备
⽣物实验报告坐⾻神经腓肠肌标本制备⽣物实验报告姓名：班级：⽇期：同组者：实验序号：实验题⽬：坐⾻神经-腓肠肌标本的制备实验⽬的：1.学习蛙类动物双毁髓的实验⽅法。
2．学习并掌握坐⾻神经-腓肠肌标本的制备⽅法。
实验原理：两栖类动物的离体组织所需要的⽣活条件⽐较简单，易于控制和掌握。
因此在⽣理实验中常⽤蟾蜍的坐⾻神经——腓肠肌标本来观察兴奋性、兴奋过程、刺激强度、刺激频率与肌⾁收缩反应的⼀些规律以及⾻骼肌的收缩特性等。
实验对象：蟾蜍实验器材：常规⼿术器械（粗剪⼑、⼿术剪、眼科剪、⼿术镊、眼科镊）蛙板、蛙钉、探针、锌铜⼸、玻璃分针、培养⽫、任⽒液、滴管、⼿术线等。
实验⽅法及步骤：1、破坏脑脊髓部位枕⾻⼤孔。
如果蟾蜍四肢松软，呼吸消失，表⽰脑脊髓已完全破坏，否则按上述⽅法再进⾏捣毁。
2、剪去躯⼲上部及内脏在骶髂关节前1 cm处⽤⾦冠剪（粗剪）剪断脊柱（可在下肢前端）。
沿脊柱切⼝向下剪开两侧腹部⽪肤⾄耻⾻处，将头、前肢、内脏及腹部软组织全部剪掉，放于污物盘，只保留下端脊柱和下肢。
在腹侧脊柱两旁可看到腰骶神经丛。
注意切勿触及或损伤坐⾻神经。
3、剥后肢⽪肤左⼿持镊⼦夹住脊髓断端，右⼿捏住断端边缘，剥掉全部后肢⽪肤。
将标本放于盛有任⽒液的培养⽫内，将⼿和⼿术器械洗净。
4、分离两腿⽤⾦冠剪剪去尾⾻杆（骶⾻），沿脊椎中线将脊柱剪开，再沿耻⾻联合正中央剪开两侧⼤腿，使两腿完全分离（切勿伤及神经），将两腿浸于任⽒液中。
5、游离坐⾻神经取⼀后肢，腹⾯向上（背位），固定于蛙板上，沿脊柱侧⽤玻璃分针轻轻勾起坐⾻神经，逐⼀剪去神经分⽀⾄股端。
⽤⾦冠剪剪断脊柱，只保留⼀⼩段椎⾻⽚与坐⾻神经相连。
将标本改为背⾯向上（腹位）固定，⽤镊⼦提起梨状肌，剪断，⽤玻璃分针将坐⾻神经⼩⼼勾⾄背部。
再沿坐⾻神经沟（半膜肌和股⼆头肌的肌间缝）分离坐⾻神经。
⽤镊⼦夹住与神经相连的脊椎⾻，提起神经，⽤眼科剪将神经分⽀及结缔组织膜顺序剪断，将神经⼀直游离到腘窝处。
实验1坐骨神经腓肠肌标本制备【实验目的】掌握蛙类的捉拿和破坏脑
实验1 坐骨神经腓肠肌标本制备【实验目的】掌握蛙类的捉拿和破坏脑脊髓的方法，掌握坐骨神经腓肠肌标本的制备技术、获得兴奋性良好的标本。
【实验原理】蟾蜍及蛙类的一些基本生命活动与哺乳动物相似，又因其离体组织在短时间内所需的生活条件简单，易于控制和掌握，因此在实验中常用蟾蜍或蛙的坐骨神经腓肠肌标本来观察兴奋和兴奋性、刺激与反应及肌肉收缩等基本生理现象。
因而制备坐骨神经腓肠肌标本是生理学实验中必须掌握的一项基本技能。
【实验对象】蟾蜍或青蛙。
【实验用品】蛙类手术器械一套，（普通剪刀、手术剪刀、眼科剪、组织镊子、眼科镊子、探针、锌铜弓、玻璃分针、蛙板、玻璃板、蛙钉）任氏液、方瓷盘、培养皿、棉线、纱布、滴管等。
【实验步骤】1.破坏脑和脊髓取蟾蜍一只，用左手握住蟾蜍，食指按压头部前端，拇指按压背部，使头部前俯；右手持金属探针由头端沿中线向尾方划触、触及凹陷处即枕骨大孔的所在。
将探针由凹陷处垂直刺入2~3mm，刺破皮肤即入枕骨大孔，这时将探针尖端水平转向头方，向前探入颅腔内，然后向各方搅动探针，以捣毁脑组织。
脑组织捣毁后，将探针退出；再由枕骨大孔刺入，并水平转向尾方，与脊髓平行刺入椎管，来回抽动探针以彻底破坏脊髓。
当动物四肢肌肉的紧张性完全消失时，提示脑和脊髓完全破坏（见图2-1）。
2.剪除躯干上部及内脏在骶髂关节水平以上1～1.5cm处剪断脊柱。
左手握止蟾蜍后肢、用拇指压止骶骨，使蟾蜍头与内脏自然下垂，右手持普通剪刀（严禁用手术剪剪骨骼），沿脊柱两侧剪除一切内脏及头胸部，留下后肢、骶骨、脊柱以及紧贴于脊柱两侧的坐骨神经。
剪除过程中注意勿损伤坐骨神经。
3.剥皮左手握紧脊柱断端（注意不要握住或压迫神经），右手捏住其上的皮肤边缘、用力向下剥掉全部后肢的皮肤（图2-2 ）4.清洗把剥皮后的标本放在盛有任氏液的培养皿中。
将手及用过的剪刀、镊子等全部手术器械洗净，再继续下面步骤。
注意剥皮后的标本不能用自来水冲洗。
5.分离两腿用镊子夹住脊柱标本背面朝上，剪去向上突起的尾骨（注意勿损伤坐骨神经）。
坐骨神经-腓肠肌标本制备
第九章实验内容实验1 坐骨神经-腓肠肌标本的制备【实验目的】掌握制备坐骨神经-腓肠肌标本的操作技术，为此后有关的神经肌肉实验打下基础。
【实验原理】蛙或两栖类动物的一些基本生命活动及生理功能与温血动物近似，而且其离体组织需要的生活条件非常简单，易于控制和掌握。
因此在生理学实验中，坐骨神经-腓肠肌标本是研究神经肌肉生理最常用的对象，经常用来研究神经肌肉的兴奋性、刺激与反应的规律、肌肉收缩的特点、兴奋性的周期性变化等。
【实验器材和药品】蛙类手术器械一套（金属探针1根，粗剪刀、眼科剪刀各1把，圆头镊子、眼科镊子各1把，玻璃分针2根），蛙板和玻璃板各1块，培养皿，滴管，废物缸、锌铜弓，丝线，棉花；任氏液。
【实验对象】蟾蜍或蛙。
【实验方法和步骤】1．破坏脑和脊髓（常用的有三种方法）(1) 俯式捣毁法：是最常用的方法。
以左手持蟾蜍，将其腹面朝向手心，前肢夹在食指和中指之间固定，后肢夹在无名指和小指之间固定，并用拇指按压蟾蜍头部使之下俯30~40度角；然后右手持金属探针沿蟾蜍头部的中线下划，可触及一凹陷处即为枕骨大孔（图9-lA）。
将探针从枕骨大孔垂直刺入1~1.5mm，再向前刺入颅腔，左右搅动（可感觉到探针与颅骨壁的碰击），破坏脑组织；再将探针退回至进针处，但不拔出而是转向后方刺入椎管，破坏脊髓。
(2) 仰式捣毁法：将蟾蜍仰卧于蛙板上，拉开下颌，右手持探针在颅底两眼之间向前下刺入颅腔，用探针在颅腔内向四周捣毁脑组织，然后将探针退至粘膜下，针尖向后平行刺入椎管内以破坏脊髓。
(3) 横断脊柱后捣毁法：左手持蟾蜍，右手持粗剪刀，在两腋窝稍下横断脊柱，然后在脊柱呈白色的脊髓断面处，向上插入探针破坏脑，再向下插入探针破坏脊髓。
以上方法破坏脑和脊髓成功后，蟾蜍出现四肢（尤其是后肢）瘫软，并常有尿失禁现象。
2．剪去躯干上部及内脏用粗剪刀在两侧腋部稍下（或在骶髂关节以上1.5 ~ 2cm处）剪断脊柱（图9- 1B），用左手握住蟾蜍后肢，拇指按压骶骨，使蟾蜍头部及内脏自然下垂；避开腰骶神经丛后，右手用粗剪刀沿脊柱两侧剪开腹壁，在耻骨联合处将躯干上部及内脏剪掉，弃入废物缸内。
生物实验报告-坐骨神经腓肠肌标本制备
坐骨神经腓肠肌标本的制备和神经干动作电位的观察与传导速度的测定一、实验目的：1.学习蛙类动物双毁髓的实验方法。
2.学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
3.观察蛙坐骨神经干复合动作电位的基本波形，并了解其产生的原理。
4.学习蛙和蟾蜍离体神经干上神经冲动传导速度的方法和原理。
二、实验材料：1.实验对象：蟾蜍2.实验器材：常规手术器械（粗剪刀、手术剪、眼科剪、手术镊、眼科镊）蛙板、蛙钉、探针、锌铜弓、玻璃分针、培养皿、任氏液、滴管、手术线、PC机、信号采集处理系统、神经屏蔽盒等。
三、实验原理：神经干在受到有效刺激以后可以产生复合动作电位，标志着神经发生兴奋。
如果在离体神经干的一段施加刺激，从另一端引导传来的神兴奋冲动，可以记录出双相电位，加入在引导的两个电极之间将神经干麻醉或损伤，阻断其兴奋传导能力，这时候记录出的动作电位就成为单相电位。
神经细胞的动作电位是以全或无的方式产生的。
但是，复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的增加而增大的。
如果在远离刺激点的不同距离处分别引导离体神经干动作电位，两引导点之间的距离为m，在两引导点分别引导出的动作电位的时相差为s。
即可按照公式v=m/s来计算出兴奋的传导速度。
蛙类的坐骨神经干属于混合性神经，其中包含有粗细不等的各种纤维，其直径一般为3-29um,其中直径最粗的有髓纤维为A类纤维，传导速度在正常室温下为35-40 m/s。
神经每兴奋一次极其在兴奋以后的回复过程中，其兴奋性都要经历一次周期性的变化，其全过程依次包括绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期4个时期。
为了测定坐骨神经在发生一次兴奋以后兴奋性所发生的周期性变化，首先要给神经施加一个条件性刺激引起神经兴奋，然后在前一兴奋及其恢复过程不同时相再施加一个测试性刺激，用于检查神经的兴奋阈值和所引起的动作电位的幅度，以判定神经兴奋性的变化。
四、实验方法及步骤：1、坐骨神经干标本制备（1）破坏脑与脊髓：取蛙一只，用自来水冲洗干净，左手持蛙，用食指下压其吻部，拇指按压在其骶髂关节下方，使其头尽量前俯，右手持探针沿两眼之间中线向后方轻划，至触及头颈部正中的凹陷处，即为枕骨大孔的位置。
坐骨神经腓肠肌实验报告
一、实验目的1. 理解坐骨神经与腓肠肌的解剖结构和生理功能。
2. 掌握坐骨神经腓肠肌标本的制备方法。
3. 观察并分析坐骨神经刺激对腓肠肌收缩的影响。
4. 了解神经肌肉传导的基本原理。
二、实验原理坐骨神经是人体最粗大的神经，起源于腰骶神经丛，主要负责下肢的感觉和运动功能。
腓肠肌位于小腿后侧，是下肢的重要肌肉之一，主要功能是屈膝和伸踝。
在实验中，通过电刺激坐骨神经，可以观察腓肠肌的收缩反应，从而了解神经肌肉的传导过程和肌肉收缩的机制。
三、实验材料与仪器1. 实验动物：蟾蜍或青蛙2. 实验仪器：手术剪、手术镊、手术刀、眼科剪、眼科镊、毁髓针、蛙板、固定针、滴管、培养皿、玻璃分针、锌铜弓、污物缸、粗棉线、任氏液、电子刺激器3. 实验药品：生理盐水、肾上腺素四、实验步骤1. 制备坐骨神经腓肠肌标本- 将实验动物麻醉后，固定于蛙板上。
- 用手术剪剪开皮肤，暴露坐骨神经和腓肠肌。
- 使用毁髓针破坏坐骨神经的髓鞘，使神经传导功能减弱。
- 将腓肠肌从骨骼上分离，保留其与坐骨神经的连接。
- 将腓肠肌和坐骨神经放入任氏液中，保持标本的生理活性。
2. 观察坐骨神经刺激对腓肠肌收缩的影响- 将锌铜弓分别连接在坐骨神经和腓肠肌上。
- 使用电子刺激器对坐骨神经进行电刺激。
- 观察腓肠肌的收缩反应，记录收缩幅度和持续时间。
- 改变刺激强度和频率，观察腓肠肌的收缩反应。
3. 分析实验结果- 比较不同刺激强度和频率下腓肠肌的收缩反应。
- 分析坐骨神经刺激对腓肠肌收缩的影响，探讨神经肌肉传导的原理。
五、实验结果1. 在低强度刺激下，腓肠肌出现短暂的收缩反应。
2. 随着刺激强度的增加，腓肠肌的收缩幅度和持续时间逐渐增大。
3. 当刺激强度达到一定阈值时，腓肠肌出现最大收缩反应。
4. 改变刺激频率，观察腓肠肌的收缩反应，发现低频率刺激时，腓肠肌收缩幅度较大；高频率刺激时，腓肠肌收缩幅度减小。
六、实验结论1. 坐骨神经刺激可以引起腓肠肌的收缩反应。
生物实验报告坐骨神经腓肠肌标本制备
坐骨神经腓肠肌标本得制备与神经干动作电位得观察与传导速度得测定一、实验目得:1.学习蛙类动物双毁髓得实验方法、2。
学习并掌握坐骨神经—腓肠肌标本得制备方法。
3.观察蛙坐骨神经干复合动作电位得基本波形,并了解其产生得原理。
4.学习蛙与蟾蜍离体神经干上神经冲动传导速度得方法与原理、二、实验材料:1.实验对象:蟾蜍2、实验器材:常规手术器械(粗剪刀、手术剪、眼科剪、手术镊、眼科镊)蛙板、蛙钉、探针、锌铜弓、玻璃分针、培养皿、任氏液、滴管、手术线、PC机、信号采集处理系统、神经屏蔽盒等。
三、实验原理:神经干在受到有效刺激以后可以产生复合动作电位,标志着神经发生兴奋。
如果在离体神经干得一段施加刺激,从另一端引导传来得神兴奋冲动,可以记录出双相电位,加入在引导得两个电极之间将神经干麻醉或损伤,阻断其兴奋传导能力,这时候记录出得动作电位就成为单相电位、神经细胞得动作电位就是以全或无得方式产生得。
但就是,复合动作电位得幅值在一定刺激强度下就是随刺激强度得增加而增大得。
如果在远离刺激点得不同距离处分别引导离体神经干动作电位,两引导点之间得距离为m,在两引导点分别引导出得动作电位得时相差为ｓ。
即可按照公式ｖ=m/s来计算出兴奋得传导速度、蛙类得坐骨神经干属于混合性神经,其中包含有粗细不等得各种纤维,其直径一般为3-29um,其中直径最粗得有髓纤维为A类纤维,传导速度在正常室温下为35－4０ m/ｓ。
神经每兴奋一次极其在兴奋以后得回复过程中,其兴奋性都要经历一次周期性得变化,其全过程依次包括绝对不应期、相对不应期、超常期与低常期４个时期。
为了测定坐骨神经在发生一次兴奋以后兴奋性所发生得周期性变化,首先要给神经施加一个条件性刺激引起神经兴奋,然后在前一兴奋及其恢复过程不同时相再施加一个测试性刺激,用于检查神经得兴奋阈值与所引起得动作电位得幅度,以判定神经兴奋性得变化。
四、实验方法及步骤:1、坐骨神经干标本制备(1) 破坏脑与脊髓:取蛙一只,用自来水冲洗干净,左手持蛙,用食指下压其吻部,拇指按压在其骶髂关节下方,使其头尽量前俯,右手持探针沿两眼之间中线向后方轻划,至触及头颈部正中得凹陷处,即为枕骨大孔得位置。
坐骨神经腓肠肌标本制备实验报告
坐骨神经腓肠肌标本制备实验报告
实验目的：
本实验的目的是为了熟练掌握坐骨神经腓肠肌标本制备的方法，了解其组织结构和功能。
实验原理：
坐骨神经腓肠肌是人体大腿部一个较为重要的肌肉，其向下延伸直至小腿后面，在这个过程中穿过髁突下缘成为胫后神经。
在制备坐骨神经腓肠肌标本时，需先用剪刀将腓肠肌清晰地分离出来，然后用解剖刀将腓肠肌割开，取出其中间的神经和血管，最终在显微镜下观察其组织结构。
实验步骤：
1.将新鲜坐骨神经腓肠肌标本取出，清洗干净。
2.用清水将腓肠肌表面的杂质和污物清洗干净。
3.用手按压腓肠肌，找到神经和血管的位置。
4.用剪刀沿着神经和血管的位置将腓肠肌分离。
5.用解剖刀将腓肠肌割开，取出其中间的神经和血管。
6.将标本置于显微镜下，调节放大倍数，观察其组织结构。
实验结果：
在实验中制备的坐骨神经腓肠肌标本中，可以观察到神经和血管的位置和分布情况，以及腓肠肌纤维和肌肉组织的结构和排列方式。
实验结论：
通过本实验，我们可以熟练掌握坐骨神经腓肠肌标本制备的方法，了解其组织结构和功能，为进一步研究坐骨神经腓肠肌在生理和病理情况下的作用提供了基础。
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坐骨神经腓肠肌标本的制备和神经干动作电位
的观察与传导速度的测定
一、实验目的：
1.学习蛙类动物双毁髓的实验方法。
2.学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
3.观察蛙坐骨神经干复合动作电位的基本波形，并了解其产生的原理。
4.学习蛙和蟾蜍离体神经干上神经冲动传导速度的方法和原理。
二、实验材料：
1.实验对象：蟾蜍
2.实验器材：常规手术器械（粗剪刀、手术剪、眼科剪、手术镊、眼科镊）蛙板、蛙钉、探针、锌铜弓、玻璃分针、培养皿、任氏液、滴管、手术线、PC机、信号采集处理系统、神经屏蔽盒等。
三、实验原理：
神经干在受到有效刺激以后可以产生复合动作电位，标志着神经发生兴奋。
如果在离体神经干的一段施加刺激，从另一端引导传来的神兴奋冲动，可以记录出双相电位，加入在引导的两个电极之间将神经干麻醉或损伤，阻断其兴奋传导能力，这时候记录出的动作电位就成为单相电位。
神经细胞的动作电位是以全或无的方式产生的。
但是，复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的增加而增大的。
如果在远离刺激点的不同距离处分别引导离体神经干动作电位，两引导点之间的距离为m，在两引导点分别引导出的动作电位的时相差为s。
即可按照公式v=m/s来计算出兴奋的传导速度。
蛙类的坐骨神经干属于混合性神经，其中包含有粗细不等的各种纤维，其直径一般为3-29um,其中直径最粗的有髓纤维为A类纤维，传导速度在正常室温下为35-40 m/s。
神经每兴奋一次极其在兴奋以后的回复过程中，其兴奋性都要经历一次周期性的变化，其全过程依次包括绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期4个时期。
为了测定坐骨神经在发生一次兴奋以后兴奋性所发生的周期性变化，首先要给神经施加一个条件性刺激引起神经兴奋，然后在前一兴奋及其恢复过程不同时相再施加一个测试性刺激，用于检查神经的兴奋阈值和所引起的动作电位的幅度，以判定神经兴奋性的变化。
四、实验方法及步骤：
1、坐骨神经干标本制备
（1）破坏脑与脊髓：
取蛙一只，用自来水冲洗干净，左手持蛙，用食指下压其吻部，拇指按压在其骶髂关节下方，使其头尽量前俯，右手持探针沿两眼之间中线向后方轻划，至触及头颈部正中的凹陷处，即为枕骨大孔的位置。
用探针在凹陷处垂直刺入枕骨大孔，再将其针尖转向前刺入颅腔，左右搅动探针，彻底捣毁脑组织；然后缓慢地把探针退至枕骨大孔处，将其转向后方，与脊柱平行捻动探针使其刺入整个椎管，彻底捣毁脊
髓。
彻底捣毁脊髓时，可看到动物后肢突然蹬直，然后瘫软。
（2）剪去躯干上部及内脏
在骶髂关节前1 cm处用金冠剪（粗剪）剪断脊柱（可在下肢前端）。
沿脊柱切口向下剪开两侧腹部皮肤至耻骨处，将头、前肢、内脏及腹部软组织全部剪掉，放于污物盘，只保留下端脊柱和下肢。
在腹侧脊柱两旁可看到腰骶神经丛。
注意切勿触及或损伤坐骨神经。
（3）剥后肢皮肤
左手持镊子夹住脊髓断端，右手捏住断端边缘，剥掉全部后肢皮肤。
注意不要握住或接触坐骨神经。
将全部皮肤剥除后，把标本置于盛有任氏液的培养皿中。
将手和手术器械洗净，以免皮肤分泌物、血液污染神经标本。
（4）分离两腿
在任氏液里把标本上的血迹冲洗干净，用镊子从背位夹住脊柱将标本提起，剪去向上突出的骶骨（避开坐骨神经），然后沿正中线用粗剪刀将脊柱分为两半，再从耻骨联合中央剪开两后肢。
将已分离的标本浸入盛有任氏液的培养皿中。
（5）制备坐骨神经标本
取出一侧下肢，用蛙钉固定于蛙板上，固定时要注意使坐骨神经和腓肠肌朝上。
先用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经，神经干应尽可能分离的长一些。
要求上自脊髓附近的主干，下沿腓总神经或胫神经一直分离至踝关节附近止。
坐骨神经在膝关节后分为胫神经和腓神经两支，如要制备腓神经，则在分叉的下端将胫神经剪断，膝关节附近
的腓神经表面有肌肉和筋膜覆盖，仔细分离并沿腓肠肌沟一直下行分离至跟踺，然后将棉线用任氏液浸泡后，在脊髓侧坐骨神经起始处和跟腱处将神经结扎，在结扎的外侧将神经干剪断，制成坐骨神经-腓神经标本。
另外，也可保留胫神经而将腓神经剪断，制成坐骨神经-胫神经标本。
将制备好的神经干标本浸于任氏液中数分钟，待其兴奋性稳定后开始实验。
注意在分离过程中，应把神经周围的结缔组织去除干净，并把神经的细小分支剪断，但要注意不要用金属器械碰触神经，也不要对神经过度牵拉。
实验期间应不断滴加任氏液使神经保持湿润。
制备好的标本应如下：
图1 坐骨神经腓肠肌标本示意图
2、神经干动作电位的观察
（1）连接实验装置：将刺激电极连接刺激输出，记录电极连接到1通道和2通道，注意避免接触不良或连接错误，注意地线的连接。
（2）将神经标本置于神经屏蔽盒的电极上将神经的近中枢端置于刺激电极上，外周端置于记录电极上。
（3）进入生物信号采集处理系统，设置参数进行测定。
五、实验结果及讨论：
1.神经干动作电位：
所测得蟾蜍坐骨神经干复合动作电位图如下，神经干受刺激后，记录的动作电位即为双相动作电位。
2.神经干动作电位的传导速度测定
本实验采用两个通道同时记录由两对引导电极记录下的动作电位来计算动作电位传导速度。
先分别测量从刺激伪迹到两个动作电位起始点的时间，设上线为t1，下线为t2，求出t2-t1的时间差值。
然后再测量标本屏蔽盒中两对引导电极起始电极之间的距离d，则神经冲动的传导速度V＝d/(t2-t1)。
通过实验，我们测得t1=1.9ms，t2=2.2ms，d=1cm，V＝33.33m/s。
相比标准值（35-40）来说偏低，可能因为神经纤维放置时间过长，不够湿润而使传导速度下降。
六、注意事项：
1、在制备标本时，避免过度牵拉神经，不可用手或金属器械触碰神经干。
2、避免动物皮肤分泌物（蟾酥、血液等）污染神经和肌肉，也不要用水冲洗，以免影响组织机能。
3、制备标本时，要随时用任氏液润湿神经和肌肉，防止干燥。
4、分离神经时，一定要把周围结缔组织剥离干净。
5、实验要迅速，以免时间过长影响标本活性（兴奋性）。
（学习的目的是增长知识，提高能力，相信一分耕耘一分收获，努力就一定可以获得应有的回报）。