猪败血型链球菌病与副猪嗜血杆菌病混合感染的诊治
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猪败血型链球菌病与副猪嗜血杆菌病混合感染的诊治近几年,猪链球菌病与副猪嗜血杆菌病的发生和危害日趋严重,而猪链球菌病又以败血型链球菌病为甚,往往在集约化猪场呈暴发流行,造成严重的经济损失。2009年10月上旬至2010年2月间,笔者诊治了南宁市郊、玉林等地多个猪场猪链球菌病与副猪嗜血杆菌病混合感染,现将诊治体会报告如下。
一、发病情况
笔者接到多个中小型养猪场的求诊电话,反映陆续出现突然死亡,发病率非常高,30-60公斤段小猪死亡率从30-80%不等。笔者从现场剖检、采集病料,经实验室检验,确定为一起败血型猪链球菌病与副猪嗜血杆菌病混合感染。
2、临床症状
在流行初期多见后躯软弱,两后肢交叉或并在一起支撑,难以站立甚至后躯麻痹,站立不稳,跛行,共济失调,后期有的呈犬坐姿势。呼吸急促,可听到喘息声,人为驱赶或触诊尖叫。有的出现抽搐、空嚼或昏睡等神经症状。体温41--42.0℃以上,呈稽留热,精神委顿,食欲不振或废绝,有浆液性或粘液性鼻液,眼结膜潮红,流泪,大便秘结或腹泻带血,尿黄或赤褐色,全身暗红色,喜卧有水的地方,部分病猪于耳尖、颈部、腹下、四肢内侧呈广泛性充血、潮红或紫斑。3、剖检病变
小猪体表常有大面积的淤血和淤斑死猪尸僵不全,大猪鼻或口中流出淡红色液体,剖开后见皮下结缔组织出血点,会咽软骨充血,气管黏
膜色红,并充满大量淡红色泡沫,颌下、肺门淋巴结肿大、出血,心包液增多、色淡黄,心外膜有时有少量出血点,胸膜、腹膜、心包膜、脑膜和关节滑膜有单个或多个浆膜面,出现浆液性、化脓性纤维蛋白渗出。当渗出的纤维在心包外膜凝集时,则在心外膜形成一层灰白色的绒毛,胸腔中渗出液中的纤维蛋白常在胸膜表面和心外膜上析出,形成一层纤维素性假膜,心内膜可见紫色出血条或出血点,血液凝固不良,脾脏比正常大2~4倍、质脆、结构模糊,肝门淋巴结肿大,胆囊充盈、胆囊壁呈胶冻样水肿,膀胱积尿、尿液浑浊、黏膜充血。
3、实验室检验
3.1 组织触片:无菌采集死亡病猪的心血、肝、脾、肾、淋巴结、肺,作心血涂片及各脏器的触片,染色镜检。结果:心血涂片中可见较纯的单个、成对或3--4个菌体排列成短链或7~10个长链状的圆形或椭圆形的球菌,有的形成长达50~80多个长链状球菌,但以成对排列较多,并且革兰氏染色呈紫色(阳性)。
3.2细菌分离培养:以上采集的病料混合研磨制成悬液,用划线法接种于血液琼脂平板培养基上,经37℃、24 h恒温培养,可在培养基表面形成生长良好、细小(O.5~1.0 mm)、灰白色半透明、圆形、光滑、凸起、湿润、边缘整齐的菌落,其周围有2.8~3.5 min界线分明的透明溶血圈,溶血圈在24 h后更明显,带有草绿色色素沉着,为α-溶血。经革兰氏染色镜检为阳性球菌,多数成单球或双球状,少数呈短链状。(1)将分离纯化的细菌与葡萄球菌共同接种培养可形成卫星现象。(2)将分离菌分别接种于普通巧克力琼脂斜面和经高压蒸汽
(120 30分钟)加热的巧克力琼脂斜面,于37 培养24小时,该菌在仅含X因子的高压巧克力琼脂斜面上生长良好。生化鉴定,细菌纯化培养后,分别接种系列生化培养基,结果表明,该菌不发酵碳水化合物,M.R.、V-P、醋酸铅试验呈阴性反应,硝酸盐还原试验阳性。
3.3 动物接种:用前述病料制成1:10匀浆悬液分别接种于健康仔猪、家兔和成年小鼠,腹腔注射,剂量分别为10 ml/Ok、2 ml/只和0.5 ml/只,结果,接种的仔猪、兔子和小鼠经46 h、38 h和22 h均死亡。分别将死亡仔猪、兔子和小鼠的肝脏抹片染色镜检,发现大量与原组织中相同的病原菌。
3.4生化特性:能发酵葡萄糖、蔗糖、乳糖、蕈糖、七叶苷、水扬苷、山梨醇。不分解菊糖、阿拉伯糖。0.1%美蓝牛乳、6.5%氯化钠,经60℃ 30 min培养,均不生长。
4、鉴别诊断
败血症型猪链球菌病易与急性猪丹毒、猪瘟、猪五号病相混淆,应注意区别。
4.1急性猪丹毒:采取脾、肾、血液涂片,染色镜检,可见到革兰氏阳性(呈紫色)小杆菌。
4.2急性猪瘟:皮肤和肾有密集的小出血点,有脓性结膜炎,无跛行状,病程较长,各种治疗无效。
4.3猪五号病:主要症状表现在蹄冠、蹄踵、蹄叉、副蹄和吻突皮肤、口腔胯部、颊部以及舌面粘膜等部位出现大小不等的水泡和溃疡,水泡也会出现于母猪的乳头、乳房等部位。病猪还有精神不振、体温升
高、厌食等症状,当病毒侵害蹄部时,蹄温增高,跛行明显,常导致蹄壳变形或脱落,病猪卧地不能站立。水泡充满清朗或微浊的浆液性液体,水泡很快破溃,露出边缘整齐的暗红色糜烂面,如无细菌继发感染,经1-2周病损部位结痂愈合。若蹄部严重病损则需3周以上才能痊愈。五号病对成年猪的致死率一般不超过3%。妊娠母猪可发生流产。剖检时,病猪咽喉、气管、支气管和胃粘膜有烂斑或者溃疡,小肠、大肠粘膜可见出血性炎症。仔猪心包膜有弥散性出血点,心肌切面有灰白色或淡黄色斑点或条纹,心肌松软似煮熟状。猪五号病的临床特征与猪水泡病、猪水泡性口炎、猪水泡疹极其相似,故应根据情况,及时送当地兽医院进行实验室诊断。
5.1 紧急接种疫苗:疫情发生后,a、紧急接种猪链球菌多价浓缩灭活苗。该苗采用多个血清型菌株作为制苗材料,克服了各地现行的弱毒或灭活单价苗抗原的片面性和局限性,对各型链球菌均有较好的免疫原性,所以更具有广泛的适用性。母猪于产前4周和产前2周各免疫一次,仔猪于30日龄和55日龄各免疫一次。采用现场分离的猪链球菌制成灭活苗(自家苗)免疫,也可获得满意的效果。B、免疫接种副猪嗜血杆菌多价油乳剂灭活苗(华中农业大学动物病毒室研制),先给母猪接种,通过初乳可使4周龄以内的仔猪获得保护力,仔猪4周龄时,再接种同样疫苗,使其产生免疫力(方法和剂量按说明)。必须注意HP·S血清型众多,如接种的疫苗所含血清型的种类与所发生的HP·S血清型相乎,则效果优良,否则会致免疫失败。
5.1.1自家血清的制备:用自制疫苗按免疫程序免疫育肥猪,一周后在注射10毫升;或用已康复的病猪,屠宰是无菌采集血液,分离血清并灭活细胞,病毒脱毒处理,在做无菌检验和动物试验,合格后置与4℃或-20℃保存备用。
使用方法:一个月龄的仔猪每头肌注自己血清15毫升,一周后再注射25毫升,必要时进行第三次注射,并在血清中加入长效缓释抗生素,可取得较好得疗效。其他较大得仔猪,可适当增加血清得用量。
5.2积极治疗病畜:将症状明显的病猪挑出,隔离治疗,据药敏试验挑选敏感药物进行治疗。不同猪场分离的链球菌与副猪嗜血杆菌,其抗生素敏感性不一样。同一猪场不同时期所分离的链球菌其抗生素的敏感性也不一样。一般情况下有较强敏感性的药物有:林可霉素、恩诺沙星、氧氟沙星、青霉素、磺胺间甲氧嘧啶钠、庆大霉素、复方新诺明、强力霉素等。由于病猪发病急,高热稽留,所以单用一种抗菌药物或单用退热药是不行的。而且用药要早,剂量要大,要连续用药。常用的治疗方法有:磺胺间甲氧嘧啶5份与TMPl份用倍量灭菌蒸馏水稀释作静脉注射,同时用倍量5%碳酸氢钠注射液静脉注射,或隆奥金典+头孢噻呋钠,为了提高疗效、促进食欲,辅助VC、复合VB 作肌肉注射。体温42.O℃以上时可配合使用安乃近、安痛定等解热镇痛药物。
5.3 药物预防性添加:在饲料中添加副链康(磺胺六甲)+败感(七清败毒颗粒)喂5天,呼诺原+败感喂7天、氧氟沙星、复方新诺明、