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食品中蛋白质的测定实验报告

食品中蛋白质的测定实验报告

1. 目得掌握凯氏定氮法测蛋白质得原理、操作、条件、注意事项。

2. 原理蛋白质就是含氮有机化合物。

食品与硫酸与催化剂一同加热消化,使蛋白质分解.分解得氨与硫酸结合生成硫酸铵。

然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后在以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸得消耗量计算含氮量再乘以换算系数,即为蛋白质含量。

3. 试剂3.1 浓硫酸、硫酸铜、硫酸钾,所有试剂均用不含氮得蒸馏水配制3.2 混合指示液1份(1 g/L )甲基红乙醇溶液与5份1g/L溴甲酚氯乙醇溶液临用时混合。

也可用2份甲基红乙醇溶液与1份1g/L次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。

3.3 氢氧化钠溶液(400g/L)3.4 标准滴定溶液硫酸标准溶液[C(1/2H2S 04)=0、0500mol/L ]或盐酸标准溶液[c (HCI)0、0500mol/L]3.5 硼酸溶液(20g/L)4. 仪器定氮蒸馏装置5. 样品全蛋( 2。

47g)6. 操作6.1 样品处理准确称取2—5g 半固体样品,小心移入干燥洁净得500mL 凯氏烧瓶中,然后加入研细得硫酸铜0 . 5 g,硫酸钾1 0g与浓硫酸2 0mL,轻轻摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以4 5°角斜放于加有石棉网得电炉上,小火加热, 待内容物全部炭化后,泡沫完全消失后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色呈请透明后,再继续加热0、5h,取下放冷,慢慢加入20mL水。

放冷后,移入100mL 容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用。

取与处理样品相同得硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。

6.2 连接装置装好定氮装置,于水蒸气发生器内装水至2/3处,加甲基红指示剂数滴及少量硫酸,以保持水呈酸性,加入数滴玻璃珠以防暴沸,用调压器控制,加热至水沸腾。

6.3蒸馏、吸收及滴定向接收瓶(锥形瓶)内加入10m L20g/L硼酸溶液及混合指示剂1 —2滴,并使冷凝管得下端插入液面下。

蛋白物质鉴定实验报告

蛋白物质鉴定实验报告

一、实验目的1. 掌握蛋白质的鉴定方法。

2. 学会使用双缩脲试剂进行蛋白质鉴定实验。

3. 了解蛋白质鉴定实验的原理及注意事项。

二、实验原理蛋白质是由氨基酸组成的大分子化合物,具有复杂的结构和多种生物学功能。

蛋白质的鉴定主要基于其特有的氨基酸序列和空间结构。

本实验采用双缩脲试剂鉴定蛋白质,原理如下:在碱性条件下,蛋白质分子中的肽键与Cu2+离子发生反应,形成紫红色的络合物。

络合物的颜色深浅与蛋白质的浓度成正比,从而实现蛋白质的定量分析。

三、实验材料1. 蛋白质样品:鸡蛋清、牛奶、豆奶等。

2. 双缩脲试剂:A液(含0.1g/mL NaOH溶液)、B液(含0.01g/mL CuSO4溶液)。

3. pH试纸、试管、移液器、滴管、白瓷板等。

四、实验步骤1. 准备样品:分别取鸡蛋清、牛奶、豆奶等蛋白质样品,用蒸馏水稀释至适当浓度。

2. 检测蛋白质含量:取3支试管,分别加入0.5mL鸡蛋清、牛奶、豆奶样品,再加入1mL蒸馏水。

3. 添加双缩脲试剂:向每支试管中加入1mL A液,摇匀。

4. 观察颜色变化:静置5分钟,观察溶液颜色变化。

5. 比色:取3支试管,分别加入1mL A液、B液,摇匀。

将上述样品试管与比色管进行比对,观察颜色深浅。

五、实验结果与分析1. 鸡蛋清、牛奶、豆奶样品在加入双缩脲试剂后,溶液颜色均呈紫红色,说明蛋白质含量较高。

2. 比色结果显示,鸡蛋清样品颜色最深,牛奶次之,豆奶最浅。

这可能是因为鸡蛋清中的蛋白质含量最高,牛奶次之,豆奶最低。

六、实验讨论1. 本实验中,双缩脲试剂对蛋白质的鉴定具有较高的灵敏度,能够有效区分不同蛋白质样品。

2. 实验过程中,应注意pH值对蛋白质鉴定的影响。

本实验采用碱性条件,有利于蛋白质与Cu2+离子发生反应。

3. 实验结果受蛋白质样品浓度、试剂比例等因素影响。

在实验过程中,应严格控制这些因素,以确保实验结果的准确性。

七、实验结论通过本实验,我们掌握了蛋白质的鉴定方法,学会了使用双缩脲试剂进行蛋白质鉴定实验。

蛋白质含量测定实验报告

蛋白质含量测定实验报告

蛋白质含量测定实验报告
实验目的:测定样品中蛋白质的含量。

实验原理:
蛋白质是生物体中重要的营养成分,其含量的测定对于食品、生物化学研究等都具有重要意义。

本实验采用双氧水法测定蛋白质的含量。

双氧水法原理是将双氧水与被测物中的蛋白质发生氧化反应,生成到氨基酸的过氧化氢,过氧化氢再与钼酸铵生成深蓝色化合物。

根据形成的深蓝色化合物的吸光度与蛋白质的含量成正比关系,可以通过比色法测定样品中蛋白质的含量。

实验步骤:
1. 将待测样品和标准蛋白质溶液分别取1ml到不同的试管中。

2. 加入4ml双氧水试剂,混匀。

3. 在室温下放置20分钟。

4. 加入适量的硫酸试剂,混匀。

5. 在60℃水浴锅中恒温加热10分钟。

6. 冷却至室温。

7. 分别将标准蛋白质溶液和待测样品溶液吸取1ml到比色皿中。

8. 用比色皿中的溶液分别测定吸光度,以比色皿中双氧水试剂为参比。

9. 根据标准曲线计算待测样品中蛋白质的含量。

实验结果:
根据吸光度测定值和标准曲线得到待测样品中蛋白质的含量为X mg/ml。

实验讨论:
蛋白质的含量测定是一项常见的实验,通过双氧水法可以快速准确地测定样品中蛋白质的含量。

在实验过程中,应注意操作的准确性和实验条件的控制,避免测定误差的产生。

此外,标准曲线的制备和测定结果的分析也是关键步骤,应进行仔细的处理和验证。

实验结论:
经过测定,得到待测样品中蛋白质的含量为X mg/ml。

蛋白质含量测定实验报告

蛋白质含量测定实验报告

一、实验目的1. 理解并掌握考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的原理和操作步骤。

2. 学习使用分光光度计进行比色分析。

3. 通过实验,掌握蛋白质含量测定的实际操作,提高实验技能。

二、实验原理考马斯亮蓝法是一种快速、简便的蛋白质定量方法。

该法基于蛋白质与考马斯亮蓝G-250染料的结合,蛋白质含量与染料结合程度呈线性关系。

通过测定溶液在特定波长下的吸光度,可以计算出蛋白质的含量。

实验原理:蛋白质分子中的肽键在碱性条件下能与考马斯亮蓝G-250染料发生结合,形成有色的复合物。

该复合物在特定波长下有特征性吸收峰,其吸光度与蛋白质含量呈线性关系。

三、实验材料1. 蛋白质标准品(如牛血清白蛋白)。

2. 考马斯亮蓝G-250染料。

3. 6.0mol/L NaOH溶液。

4. 双蒸水。

5. 分光光度计。

6. 试管、移液器、吸管等实验器材。

四、实验步骤1. 标准曲线制作:将不同浓度的蛋白质标准品配制成溶液,分别加入考马斯亮蓝G-250染料,在特定波长下测定吸光度,绘制标准曲线。

2. 样品处理:取待测样品,按照一定比例稀释,加入考马斯亮蓝G-250染料,在特定波长下测定吸光度。

3. 数据处理:根据标准曲线,计算待测样品中的蛋白质含量。

五、实验结果与分析1. 标准曲线制作:根据实验数据,绘制标准曲线,得出线性方程。

2. 样品处理:取待测样品,按照一定比例稀释,加入考马斯亮蓝G-250染料,在特定波长下测定吸光度。

3. 数据处理:根据标准曲线,计算待测样品中的蛋白质含量。

实验结果显示,待测样品中的蛋白质含量为XX g/L。

六、实验讨论1. 实验过程中,应注意操作规范,避免污染和误差。

2. 在制作标准曲线时,应选择合适的浓度范围,保证线性关系良好。

3. 待测样品的稀释倍数应根据实际浓度选择,以保证在检测范围内。

4. 在测定吸光度时,应注意仪器校准和操作,避免误差。

七、实验总结本次实验通过考马斯亮蓝法测定了待测样品中的蛋白质含量,实验结果准确可靠。

[精品]食品中蛋白质的测定实验报告

[精品]食品中蛋白质的测定实验报告

[精品]食品中蛋白质的测定实验报告
实验原理:
蛋白质是组成细胞的主要成分之一,也是组成食物的重要营养成分之一。

蛋白质在酸性条件下,能与双氨基苯酚(Folin-Ciocalteu试剂)反应,在蓝色复合物的形成下吸光度增加。

利用这一现象可以测定蛋白质的含量。

实验步骤:
1. 食品的预处理
取适量的食品,如鸡蛋、瘦肉、豆腐等,先将食品在研钵中打碎,然后加入适量的蒸馏水,混合均匀,并将混合液倒入过滤纸筒中,收集澄清液并备用。

2. 制备标准曲线
取不同浓度的牛血清蛋白标准溶液(0.1ug/mL、0.2ug/mL、0.4ug/mL、0.6ug/mL、0.8ug/mL),各加入1mL NaOH(0.1mol/L)及2.5mL双氨基苯酚溶液,室温下混合放置,15min后加入 2mLNa2CO3溶液(0.2mol/L),混合均匀,最后用蒸馏水定容至25mL。

利用分光光度计测定吸光度值,制备标准曲线。

3. 测定样品
4. 计算样品中蛋白质的含量
根据标准曲线求出样品中蛋白质的含量。

实验结果:
样品 | 吸光度值 | 蛋白质含量(g/100g)
---|---|---
鸡蛋 | 0.21 | 12.56
瘦肉 | 0.55 | 20.00
豆腐 | 0.45 | 8.90
通过该实验,我们成功地测定了食品中蛋白质的含量,结果表明瘦肉的蛋白质含量最高,豆腐的蛋白质含量最低。

这有助于我们选择更健康的食物。

同时,我们还注意到样品的吸光度值与蛋白质含量呈正相关,这也说明了利用双氨基苯酚对蛋白质进行测定的可行性。

食品中蛋白质含量测定(凯氏定氮法)

食品中蛋白质含量测定(凯氏定氮法)

实验:食品中蛋白质含量测定(凯氏定氮法)一、目的与要求1、学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理。

2、掌握凯氏定氮法的操作技术,包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等。

二、实验原理蛋白质是含氮的化合物。

食品与浓硫酸和催化剂共同加热消化,使蛋白质分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵,留在消化液中,然后加碱蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后,再用盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量来乘以蛋白质换算系数,即得蛋白质含量。

三、仪器与试剂(一)试剂(所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制)1、硫酸铜(CuSO4·5H20)2、硫酸钾3、浓硫酸(密度为1.8419g/L)4、2%硼酸溶液(20g/L)5、40%氢氧化钠溶液(400g/L)6、0.01mol/L盐酸标准滴定溶液。

7、混合指示试剂:0.1%甲基红乙醇溶液1份,与0.1%溴甲酚绿乙醇溶液5份临用时混合。

(二)仪器微量定氮蒸馏装置:如图3-所示。

图3-微量凯氏定氮装置1、电炉;2、水蒸气发生器(2L平底烧瓶);3、螺旋夹a;4、小漏斗及棒状玻璃塞(样品入口处);5、反应室;6、反应室外层;7、橡皮管及螺旋夹b;8、冷凝管;9、蒸馏液接收瓶。

四、实验步骤1、样品消化称取样品约0.3g(±0.001g),移入干燥的100mL凯氏定氮烧瓶中,加入0.2g硫酸铜和6g硫酸钾,稍摇匀后瓶口放一小漏斗,加入20mL浓硫酸,将瓶以450角斜支于有小孔的石棉网上,使用万用电炉,在通风橱中加热消化,开始时用低温加热,待内容物全部炭化,泡沫停止后,再升高温度保持微沸,消化至液体呈蓝绿色澄清透明后,继续加热0.5h,取下放冷,小心加20mL水,放冷后,无损地转移到100mL容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,加水定容至刻度,混匀备用,即为消化液。

一般消解温度都设在240度及240度以上,如果想快速消解可以适当提高温度甚至可以用最大温度进行消解试剂空白实验:取与样品消化相同的硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸,按以上同样方法进行消化,冷却,加水定容至100mL,得试剂空白消化液。

测蛋白质含量实验报告

测蛋白质含量实验报告

测蛋白质含量实验报告
《测蛋白质含量实验报告》
摘要:本实验旨在通过测定不同食物中蛋白质含量的实验,探讨不同食物的营养成分。

实验结果表明,豆类食物中蛋白质含量最高,而糖类食物中蛋白质含量最低。

这一结果对于人们合理膳食具有一定的指导意义。

引言:蛋白质是人体生命活动所必需的营养成分之一,它对于维持人体正常的生理功能具有重要作用。

因此,了解不同食物中蛋白质含量的差异,对于合理膳食具有重要意义。

实验方法:本实验选取了豆类、肉类、奶类和糖类食物四种常见食物,通过酸水解法测定其蛋白质含量。

具体操作步骤为:首先将不同食物样品分别加入硫酸和酚酸,然后在高温下进行水解反应,最后用比色法测定水解产物中蛋白质的含量。

实验结果:经过实验测定,豆类食物中蛋白质含量最高,达到25%,其次是肉类食物,含量在20%左右;奶类食物蛋白质含量在15%左右;而糖类食物中蛋白质含量最低,仅为5%左右。

讨论:通过本实验结果可以看出,不同食物中蛋白质含量存在明显差异。

豆类食物中蛋白质含量最高,因此适合作为蛋白质的补充来源;而糖类食物中蛋白质含量较低,不宜作为蛋白质的主要来源。

因此,人们在日常饮食中应根据实际情况选择不同的食物,以保证蛋白质的摄入量。

结论:本实验通过测定不同食物中蛋白质含量,得出了豆类食物中蛋白质含量最高,而糖类食物中蛋白质含量最低的结论。

这一结果对于人们合理膳食具有一定的指导意义,有助于人们更加科学地选择食物,保证蛋白质的摄入量,维
持身体健康。

蛋白质含量测定实验报告

蛋白质含量测定实验报告

蛋白质含量测定实验报告一、实验目的。

本实验旨在通过测定食物中蛋白质含量的方法,掌握蛋白质的测定原理和操作技能,加深对蛋白质的认识,为日常饮食提供科学依据。

二、实验原理。

本实验采用了比色法测定蛋白质含量。

比色法是根据蛋白质与双酚类物质在碱性条件下生成紫色化合物的原理,利用紫外可见光谱法测定其吸光度,从而计算出蛋白质的含量。

三、实验步骤。

1. 样品制备,将食物样品研磨成粉末状。

2. 蛋白质提取,取适量样品加入提取液,振荡离心,收集上清液。

3. 比色反应,将提取液与试剂混合,待反应完成后进行测定。

4. 吸光度测定,用紫外可见光谱仪测定吸光度。

5. 计算蛋白质含量,根据吸光度值计算出样品中蛋白质的含量。

四、实验结果。

经过实验测定,得出食物样品中蛋白质含量为Xg/100g。

五、实验分析。

通过本次实验,我们了解了蛋白质含量测定的原理和方法,掌握了比色法测定蛋白质含量的操作技能。

同时,也发现不同食物样品中蛋白质含量的差异,为我们科学合理地进行日常饮食提供了参考。

六、实验总结。

蛋白质是人体生命活动的重要组成部分,合理摄入足够的蛋白质对维持身体健康至关重要。

通过本次实验,我们不仅学会了测定蛋白质含量的方法,也增加了对蛋白质的认识,为我们的健康饮食提供了科学依据。

七、实验感想。

本次实验让我深刻认识到蛋白质在日常饮食中的重要性,也让我对科学实验有了更深的理解和体会。

希望通过今后的学习和实践,能够更好地运用所学知识,为自己和他人的健康提供帮助。

八、参考文献。

1. 《食品分析实验指导》,XXX,XXX出版社,XXXX年。

2. 《食品化学与分析》,XXX,XXX出版社,XXXX年。

以上就是本次蛋白质含量测定实验的报告内容,希望对大家有所帮助。

蛋白质含量的测定实验报告

蛋白质含量的测定实验报告

蛋白质含量的测定实验报告一、实验目的。

本实验旨在通过测定食品中蛋白质含量的方法,掌握蛋白质含量的测定原理和操作技能,为食品质量的检验提供科学依据。

二、实验原理。

蛋白质含量的测定方法有多种,本实验采用的是经典的凯氏试剂法。

该方法是利用碱性铜溶液与蛋白质中的蛋白质结合成紫色沉淀,通过比色计算出蛋白质含量。

三、实验仪器和试剂。

1. 仪器,量筒、烧杯、比色皿、分析天平等。

2. 试剂,凯氏试剂、蛋白质标准品、硫酸铜溶液、碱液等。

四、实验步骤。

1. 样品制备,将待测样品称取适量,加入适量的硫酸铜溶液,摇匀后放置一段时间。

2. 沉淀分离,将沉淀转移到预先称量的滤纸上,用水洗涤至无碱性铜试剂残留。

3. 沉淀溶解,将沉淀与少量硫酸铜溶液混合,加入碱液溶解。

4. 比色计算,用比色皿盛放试液,通过比色计算出蛋白质含量。

五、实验结果。

通过实验测得样品的蛋白质含量为XXg/100g。

六、实验分析。

根据实验结果,可以初步判断样品的蛋白质含量符合标准要求。

但需要注意的是,蛋白质含量的测定结果受到多种因素的影响,如样品制备不均匀、操作不规范等,因此在实际应用中还需要结合其他分析方法进行综合判断。

七、实验结论。

本实验通过凯氏试剂法测定了样品的蛋白质含量,结果表明样品的蛋白质含量符合标准要求。

但仍需注意实验操作的规范性,以确保结果的准确性和可靠性。

八、实验总结。

通过本次实验,我们掌握了蛋白质含量的测定方法和操作技能,提高了对食品质量检验的能力,为今后的实验和工作积累了经验。

以上就是本次蛋白质含量的测定实验报告,希望对大家有所帮助。

食品中蛋白质的测定实验报告

食品中蛋白质的测定实验报告

食品中蛋白质的测定实验报告食品中蛋白质的测定实验报告引言:蛋白质是构成生物体的基本营养成分之一,对人体的生长发育和维持正常功能起着重要作用。

因此,准确测定食品中蛋白质含量对于评估食品的营养价值具有重要意义。

本实验旨在通过测定食品中蛋白质的含量,探究不同食品样品中蛋白质的差异。

材料与方法:1. 实验仪器:显微镜、离心机、分光光度计、电子天平等。

2. 实验试剂:硫酸铜溶液、碱式碘化钾溶液、稀硫酸溶液、双氯苯酚溶液等。

3. 样品准备:选取不同食品样品,如鸡蛋、牛奶、豆腐等。

4. 实验步骤:a. 样品预处理:将样品进行研磨或切碎,以增加样品与试剂的接触面积。

b. 蛋白质提取:将样品加入适量的稀硫酸溶液中,使用离心机进行离心分离。

c. 硫酸铜法测定:取一定量的蛋白质提取液,加入硫酸铜溶液和碱式碘化钾溶液,观察溶液颜色变化。

d. 分光光度计测定:将上述溶液转移到分光光度计中,测定其吸光度。

e. 通过标准曲线计算:制备不同浓度的蛋白质标准溶液,测定吸光度,并绘制标准曲线。

结果与讨论:通过以上实验步骤,我们成功测定了不同食品样品中蛋白质的含量,并绘制了标准曲线。

根据实验结果,我们发现不同食品样品中蛋白质含量存在显著差异。

首先,我们发现鸡蛋中蛋白质含量最高,这与其作为高蛋白食物的常识相符。

鸡蛋是一种优质蛋白质的来源,含有人体所需的多种氨基酸。

因此,适量食用鸡蛋可以提供人体所需的蛋白质,并满足身体的生理需求。

其次,牛奶中蛋白质含量也较高。

牛奶是一种常见的蛋白质来源,富含乳清蛋白和酪蛋白,具有较高的生物活性。

牛奶中的蛋白质对于人体的骨骼生长和免疫系统的健康起着重要作用。

因此,适量饮用牛奶可以提供必要的蛋白质和营养物质。

另外,豆腐中蛋白质含量也相对较高。

豆腐是一种常见的植物蛋白食品,富含大豆异黄酮和植物雌激素。

豆腐中的蛋白质对于人体的心血管健康和预防乳腺癌具有一定的保护作用。

因此,适量食用豆腐可以提供植物蛋白和其他营养物质。

食品中氨基酸及蛋白质的测定(实验报告)

食品中氨基酸及蛋白质的测定(实验报告)

测定食品中的蛋白质---2013.3.25组员:***实验目的:(1)会测定食品中粗蛋白的含量。

(2)明确常见的食品蛋白质含量,以及测定原理。

实验原理:将被检样品加入浓硫酸,以硫酸铜,硫酸钾为催化剂共同加热消化食品中蛋白质分解为氨,并与硫酸结合成硫酸铵,通过碱化蒸馏,使氨分离出来,用硼酸吸收形成硼酸按后,再用盐酸标准溶液滴定,根据消耗的标准盐酸的体积,通过换算系数,可测定食品中蛋白质的含量。

实验仪器:凯氏烧瓶、可调式电炉、定氮蒸馏装置试剂:①硫酸铜CuSO4.5H2O ②硫酸钾③硫酸(密度为1.8149g/L)④40g/L 硼酸溶液⑤混合试剂;1g/L甲基红乙醇溶液与1g/L亚甲基蓝乙醇溶液,用时按2:1的比例混合。

实验步骤:数据处理:标定0.1000mol /L 盐酸标准溶液微量蒸馏按下式计算:X=⨯⨯⨯⨯-10010m c0.014)(0V V F 100⨯式中 X 食品中蛋白质质量分数,%;V 滴定试样时消耗盐酸标准滴定溶液的体积,mL;V 0 空白试验时消耗盐酸标准滴定溶液的体积mL ;C 盐酸标准滴定溶液的浓度; 0.014 氮的毫摩尔质量,g/mmol; m 试样的质量,g;F 氮换算蛋白质的系数。

注意事项:①本实验对蛋白质含量进行测定,因样品中常含有核酸、生物碱、含氮类脂以及含氮色素等非蛋白质的含氮化合物,故结果称为粗蛋白质含量。

②为减少实验误差,所有试剂溶液应用无氨蒸馏水配置。

③消化过程要不断转动凯氏烧瓶,以利于附着在烧瓶上的固体残渣被洗下,促进其消化;同时为防止造成氮损失,不要用强火,应保持缓和沸腾。

④样品中含脂肪或糖较多,消化过程中易产生大量泡沫,为防止泡沫外溢,在消化开始时用小火加热,并时时摇动,并可以加入少量辛醇、液体石蜡或硅油消泡剂,并控制热源强度。

⑤一般消化至呈透明后,继续消化30min即可,但对于含有特别难以氨化的氮化合物的样品,如含赖氨酸、组氨酸、色氨酸、酪氨酸或脯氨酸等时,呈较深绿色。

蛋白质测定的实验报告

蛋白质测定的实验报告

一、实验目的1. 掌握蛋白质测定的原理和方法。

2. 熟悉实验操作步骤和注意事项。

3. 通过实验,提高实验技能和数据分析能力。

二、实验原理蛋白质是生物体内重要的生物大分子,具有多种生物学功能。

蛋白质的测定方法主要有凯氏定氮法、双缩脲法、比色法等。

本实验采用双缩脲法测定蛋白质含量。

双缩脲法基于蛋白质分子中的肽键与铜离子反应生成紫红色络合物,其颜色深浅与蛋白质含量成正比。

通过测定该络合物在特定波长下的吸光度,可以计算出蛋白质含量。

三、实验材料与试剂1. 实验材料:鸡蛋清、牛奶、豆奶等蛋白质样品。

2. 试剂:(1)双缩脲试剂A:称取硫酸铜0.1g,溶解于100ml蒸馏水中。

(2)双缩脲试剂B:称取酒石酸钾钠0.5g,溶解于100ml蒸馏水中,加入10g 氢氧化钠。

(3)标准蛋白质溶液:称取牛血清白蛋白0.1g,溶解于100ml蒸馏水中,配制成1mg/ml的标准蛋白质溶液。

(4)0.1mol/L氢氧化钠溶液。

四、实验仪器1. 电子天平2. 移液器3. 721分光光度计4. 烧杯5. 试管6. 滴管五、实验步骤1. 样品制备:取适量蛋白质样品,加入蒸馏水稀释至一定浓度。

2. 标准曲线绘制:分别取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml标准蛋白质溶液于试管中,加入2ml双缩脲试剂A,摇匀,静置2min。

然后加入2ml双缩脲试剂B,摇匀,静置2min。

以蒸馏水为空白,于540nm波长下测定吸光度。

以蛋白质浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。

3. 样品测定:分别取0.2ml样品溶液于试管中,按照步骤2的操作进行测定。

以蒸馏水为空白,于540nm波长下测定吸光度。

4. 结果计算:根据标准曲线,计算样品中蛋白质含量。

六、实验结果与分析1. 标准曲线绘制:根据实验数据,绘制标准曲线,计算相关系数R²,验证标准曲线的线性关系。

2. 样品测定:根据标准曲线,计算样品中蛋白质含量,并与理论值进行比较。

食品中蛋白质的测定

食品中蛋白质的测定
食品中重要环节。蛋白质是以氨基酸为构成单元的大分子含氮化合物,测定其含量对于产品质量控制、食品配方优化等至关重要。文档中详细介绍了蛋白质的测定方法,其中凯氏定氮法被作为重点介绍,该方法通过测定样品中的氮含量来推算蛋白质含量,具有准确度高、适用范围广的优点。此外,分光光度法和燃烧法也被提及作为补充测定方法。在测定过程中,蛋白质系数是一个重要参数,它表示一份氮素相当于多少份蛋白质,不同种类食品的蛋白质系数有所不同。通过测定样品中的氮素含量,并结合蛋白质系数,可以准确计算出样品中的蛋白质含量。这些测定方法的应用不仅有助于我们了解食品的营养成分,还为食品工业生产过程控制和经济核算提供了重要依据。

食物中蛋白质测定实验

食物中蛋白质测定实验
凯氏定氮法:通过测定样品中的氮含量来计算蛋白质含量 双缩脲法:通过测定样品中的肽键数量来计算蛋白质含量 紫外吸收法:通过测定样品在280nm处的吸光度来计算蛋白质含量 质谱法:通过测定样品的质量和电荷比来计算蛋白质含量
实验步骤
样品处理
样品采集:选择新 鲜、无污染的样品
样品保存:低温、 避光、密封保存
实验重复性:进行多次实验,确保实验 结果的可靠性
实验结果分析:对实验结果进行深入分 析,避免片面解读
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收集:取出离心管,倒掉上清液,收集 沉淀物
再溶解:将沉淀物重新溶解在缓冲液中, 用于后续分析
蛋白质测定
测定条件:设置测定条件, 包括温度、时间、波长等。
样品处理:称取适量样品, 加入适量缓冲液,搅拌均匀。
测定过程:将样品放入测定 仪,按照设定条件进行测定。
数据处理:将测定结果进行 数据处理,得到蛋白质含量。
A:样品溶液的吸光度
B:空白溶液的吸光度
C:样品溶液的体积
结果表示:蛋白质含量以 克/100克表示
误差分析
实验误差来源:仪 器误差、操作误差、 环境误差等
误差计算方法:绝 对误差、相对误差、 标准偏差等
误差处理方法:剔 除异常值、重复实 验、提高实验条件 等
误差分析结果:对 实验结果的准确性 和可靠性进行评估
再次离心分离:将洗 涤液与提取液分离, 得到纯化的蛋白质。
干燥:将纯化的蛋白 质干燥,得到蛋白质 粉末。
蛋白质沉淀
样品处理:将样品溶解在缓冲液中,搅 拌均匀
加样:在离心管中加入适量蛋白质溶液
沉淀:加入适量的沉淀剂,如硫酸铵或 硫酸钠,使蛋白质沉淀
离心:将离心管放入离心机中,以一定 的转速离心,使沉淀物沉淀到底部

食品蛋白测定实验报告

食品蛋白测定实验报告

一、实验目的1. 掌握凯氏定氮法测定蛋白质的原理和操作技术。

2. 熟悉样品处理、消化、蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等实验步骤。

3. 通过实验,了解食品中蛋白质含量的重要性,以及如何保证实验结果的准确性。

二、实验原理凯氏定氮法是一种经典的蛋白质测定方法,其原理基于蛋白质中的氮含量。

具体步骤如下:1. 样品与浓硫酸、硫酸铜、硫酸钾等试剂混合,加热消化,使蛋白质分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。

2. 将消化液碱化,蒸馏使氨游离,用硼酸吸收。

3. 最后用盐酸标准溶液滴定硼酸溶液,根据消耗的酸量计算出蛋白质含量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:鸡蛋、牛奶、面粉等食品样品。

2. 仪器:凯氏定氮装置、电子天平、滴定管、烧杯、试管等。

四、实验步骤1. 样品处理:准确称取一定量的食品样品,加入适量水,搅拌均匀。

2. 消化:将处理好的样品与浓硫酸、硫酸铜、硫酸钾等试剂混合,放入凯氏烧瓶中,加热消化至溶液呈透明状态。

3. 蒸馏:将消化液转移至蒸馏装置中,加热蒸馏,使氨游离并进入硼酸吸收液中。

4. 滴定:用盐酸标准溶液滴定硼酸吸收液,根据消耗的酸量计算出蛋白质含量。

五、实验结果与分析以鸡蛋样品为例,实验结果如下:| 样品名称 | 样品质量 (g) | 消化液体积 (mL) | 滴定液体积 (mL) | 蛋白质含量 (%) || :-------: | :-----------: | :--------------: | :--------------: | :--------------: || 鸡蛋 | 1.000 | 10.00 | 20.00 | 12.5 |根据实验结果,该鸡蛋样品的蛋白质含量为12.5%。

六、实验讨论1. 实验过程中,样品的处理和消化是关键步骤,需要严格控制反应条件,以确保实验结果的准确性。

2. 蒸馏过程中,需要注意控制蒸馏速度,避免氨气逸出,影响实验结果。

3. 滴定过程中,需要准确读取滴定液的消耗量,并注意滴定终点,以确保实验结果的可靠性。

测蛋白质含量实验报告

测蛋白质含量实验报告

一、实验目的1. 熟悉蛋白质含量测定的原理和方法;2. 掌握双缩脲法和凯氏定氮法测定蛋白质含量的操作步骤;3. 了解不同方法测定蛋白质含量的优缺点;4. 培养实验操作能力和数据处理能力。

二、实验原理1. 双缩脲法:蛋白质分子中含有大量彼此相连的肽键(-CO-NH-),在碱性溶液中能与Cu2+发生双缩脲反应,生成紫红色络合物。

此反应和两个尿素分子缩合后生成的双缩脲(H2N-OC-NH-CO-NH2)在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色的反应相似,故称之为双缩脲反应。

这种紫红色络合物在540nm处的吸光度与蛋白质含量在一定范围内呈正比关系。

2. 凯氏定氮法:蛋白质中的氮含量相对稳定,约为16%左右。

通过凯氏定氮法测定样品中的氮含量,再乘以 6.25,即可得到蛋白质含量。

该方法包括样品的消化、蒸馏、滴定等步骤。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:鸡蛋清、牛肉、花生、大豆、玉米粉等蛋白质样品;标准蛋白质溶液;NaOH溶液;双缩脲试剂;凯氏定氮试剂等。

2. 实验仪器:分光光度计、电子天平、移液器、试管、锥形瓶、凯氏烧瓶、电炉、蒸馏装置、滴定管等。

四、实验步骤1. 双缩脲法(1)配制标准蛋白质溶液:准确称取一定量的标准蛋白质,用蒸馏水溶解并定容至100ml,得到浓度为1mg/ml的标准蛋白质溶液。

(2)制备样品溶液:准确称取一定量的蛋白质样品,用蒸馏水溶解并定容至10ml,得到浓度为0.1mg/ml的样品溶液。

(3)测定吸光度:分别取标准蛋白质溶液和样品溶液各1ml,加入2ml双缩脲试剂,混匀后放置10分钟,用分光光度计在540nm处测定吸光度。

2. 凯氏定氮法(1)样品消化:准确称取一定量的蛋白质样品,加入适量的浓硫酸和硫酸钾,放入凯氏烧瓶中,加热消化至无色透明。

(2)蒸馏:将消化后的溶液转移到蒸馏装置中,加入适量的浓氢氧化钠溶液,加热蒸馏,用硼酸溶液吸收蒸馏出的氨气。

(3)滴定:待吸收完全后,用0.1mol/L盐酸标准溶液滴定至终点,记录消耗的盐酸体积。

蛋白质含量的测定实验报告

蛋白质含量的测定实验报告

蛋白质含量的测定实验报告蛋白质含量的测定实验报告引言:蛋白质是生命体内最基本的组成部分之一,对于维持生命活动具有重要作用。

因此,准确测定蛋白质含量对于生物学、医学等领域的研究具有重要意义。

本实验旨在通过一系列的实验步骤,准确测定样品中蛋白质的含量。

实验材料和方法:1. 实验材料:- 样品:选择具有高蛋白含量的食品样品,如鸡蛋、牛奶等。

- 试剂:含有蛋白质的测定试剂盒,如BCA试剂盒。

- 标准品:含有已知蛋白质含量的标准品。

2. 实验步骤:1) 样品预处理:将样品加热至一定温度,使蛋白质变性,以便更好地释放出蛋白质。

2) 标准曲线制备:取一系列已知浓度的标准品,按照试剂盒说明书的要求进行处理,制备标准曲线。

3) 样品处理:将经过预处理的样品与试剂盒中的试剂混合,按照说明书的要求进行反应。

4) 光度测定:使用分光光度计测定反应液的吸光度,并与标准曲线进行比较,计算出样品中蛋白质的含量。

结果与讨论:通过实验测定,我们得到了样品中蛋白质的含量。

根据实验数据,我们可以得出以下结论:1. 样品与标准品的比较:通过与标准品的比较,我们可以确定样品中蛋白质的相对含量。

如果样品的吸光度与标准品相近,说明样品中蛋白质含量较高;反之,如果吸光度较低,则说明样品中蛋白质含量较低。

2. 实验误差的影响:在实验过程中,存在一定的误差。

这些误差可能来自于样品的处理过程、试剂的质量以及实验操作的技巧等方面。

因此,在进行实验时,需要注意控制这些误差,以保证测定结果的准确性和可靠性。

3. 实验结果的应用:蛋白质的测定结果可以应用于许多领域。

例如,在食品工业中,可以通过测定食品样品中的蛋白质含量来评估其营养价值;在医学研究中,可以通过测定体液中的蛋白质含量来诊断疾病。

结论:通过本实验,我们成功地测定了样品中蛋白质的含量。

在实验过程中,我们掌握了一系列的实验技巧和操作步骤,并了解了蛋白质测定的原理和应用。

蛋白质的测定对于生物学和医学等领域的研究具有重要意义,通过准确测定蛋白质含量,我们可以更好地理解生命活动的机制,促进科学的发展和进步。

食品中蛋白质的测定实验报告

食品中蛋白质的测定实验报告

食品中蛋白质的测定实验报告一、实验目的准确测定食品中蛋白质的含量,掌握常见的蛋白质测定方法及原理,评估食品的营养价值和质量。

二、实验原理蛋白质是含氮的有机化合物。

食品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出,而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。

然后加碱蒸馏,使氨蒸出,用硼酸吸收后再以标准盐酸或硫酸溶液滴定。

根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量。

三、实验材料与仪器(一)材料1、牛乳、鸡蛋、大豆等食品样品。

2、浓硫酸(比重 184)。

3、硫酸铜、硫酸钾。

4、 40%氢氧化钠溶液。

5、 2%硼酸溶液。

6、混合指示液:1 份 01%甲基红乙醇溶液与 5 份 01%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。

7、 005mol/L 盐酸标准溶液。

(二)仪器1、消化炉。

2、定氮蒸馏装置。

3、凯氏烧瓶(500ml)。

4、容量瓶(100ml、500ml)。

5、移液管(10ml、20ml)。

6、酸式滴定管(50ml)。

四、实验步骤(一)样品消化1、准确称取 02 20g 固体样品或 2 5g 半固体样品或吸取 10 20ml 液体样品(约相当氮 30 40mg),移入干燥的 500ml 凯氏烧瓶中,加入 02g 硫酸铜、3g 硫酸钾及 20ml 浓硫酸,摇匀。

2、将凯氏烧瓶以 45°角斜支于有小孔的石棉网上。

用电炉小心加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色澄清透明后,再继续加热 05h。

取下放冷,小心加 20ml 水,放冷后,移入 100ml 容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用。

(二)蒸馏与吸收1、按图装好定氮蒸馏装置。

在水蒸气发生瓶内装水至约三分之二处,加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入数粒玻璃珠以防暴沸,加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。

2、向接收瓶内加入 10ml 2%硼酸溶液及混合指示液 1 滴,并使冷凝管的下端插入液面下。

实验八 食品蛋白质含量测定

实验八  食品蛋白质含量测定

实验八食品中蛋白质含量测定1.实验目的(1)学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理。

(2)掌握凯氏定氮法的操作技术,包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等。

2.实验原理2.1消解蛋白质是含氮的化合物。

食品与浓硫酸在催化剂作用下共同加热消化,使蛋白质分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵而留在消化液中,然后加碱蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后,再用盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量来乘以蛋白质换算系数,即得蛋白质含量。

因为食品中除蛋白质外,还含有其它含氮物质,所以此蛋白质称为粗蛋白。

NH2(CH2)2COOH+13H2SO4=(NH4)2SO4+6CO2+12SO2+16H2O浓硫酸将有机物炭化后为碳、氢与氮,将形成的碳氧化:2H2SO4+C(Δ)=CO2+2H2O+2SO2↑生成的二氧化硫将氧化态的氮还原为氨而自身被氧化为三氧化硫,氨随之与硫酸反应生成硫酸铵,H2SO4+2NH3=(NH4)2SO4在消解试验中,为了加速蛋白质的分解,缩短消解时间,常常加入下列物质:(1)硫酸钾:一般浓硫酸的沸点为340℃,但加入硫酸钾后,硫酸不断分解,水不断溢出引起硫酸钾浓度不断增加,沸点因此而增加。

K2SO4+H2SO4=KHSO4KHSO4(Δ)=K2SO4+H2O↑+SO3但硫酸钾浓度不能太大,否则消化温度过高会引起铵盐的热分解而释放出氨,(NH4)2SO4(Δ)=(NH4)2SO4+NH3↑2KSO4(Δ)=2H2O+2NH3↑+2SO3↑除了可以添加硫酸钾之外,也可以加入硫酸钠、氯化钾等以提高溶液温度,但效果要差于硫酸钾。

(2)硫酸铜:硫酸铜可以催化反应。

可以采用的催化剂除了硫酸铜外,还可以加入氧化汞、汞、硒粉以及二氧化钛等,但考虑效果、价格以及污染等原因外,最常用的还是硫酸铜,同时可以加入少量的过氧化氢、次氯酸钾等作为氧化剂以加速有机物的氧化,反应机理为:2CuSO4(Δ)= Cu2SO4+O2↑+SO2↑C+CuSO4(Δ)= Cu2SO4+CO2↑+SO2↑H2SO4+Cu2SO4(Δ)= 2CuSO4+2H2O↑+SO2↑此反应不断进行,如溶液没有褐色生成(Cu2SO4颜色)而呈现清澈的蓝绿色,说明有机物已经全部被消解完毕。

肉与肉制品中蛋白质含量的测定Word版

肉与肉制品中蛋白质含量的测定Word版

第一部分 肉与肉制品化学指标测定实验实验三 肉与肉制品中蛋白质含量的测定(凯氏定氮法)一、原理在凯氏定氮过程中,样品中的蛋白质和其他有机成分在催化剂存在下,被硫酸消化,总有机氮转化成硫酸铵,然后碱化蒸馏,中和消化液使氨游离,并将氨蒸馏至硼酸溶液中形成硼酸铵,用标准酸溶液滴定,测出样品转化后的氮含量。

由于非蛋白组分中也含有氮,所以此方法的分析结果为样品中的粗蛋白含量。

二、试剂所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制1.硫酸铜,消化过程中加入硫酸铜是为了增加反应速度,硫酸铜可以起催化剂的作用。

2.硫酸钾,在消化过程中添加硫酸钾,它可与硫酸反应生成硫酸氢钾,可提高反应温度(纯硫酸沸点330℃,添加硫酸钾后,可达400℃),加速反应过程。

3.硫酸。

4.2%硼酸溶液。

5.混合指示剂,1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。

也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基兰乙醇溶液临用时混合。

6.0.05N 硫酸标准溶液或盐酸标准溶液。

三、仪器凯氏定氮蒸馏装置,分析天平,凯氏烧瓶,酸式滴定管,容量瓶(100mL ),量桶(100mL ),20mL 吸管,托盘天平,10mL 吸管,三角烧瓶。

四、操作方法1.样品处理精密称取0.2-2.0g 固体样品或2-5g 半固体样品或吸取10-20mL 液体样品(含氮量5~80mg ),准确至0.0002g ,肉及肉制品取样量为0.8-1.2克。

移入干燥的100mL 或500mL 定氮瓶中,加入0.2g 硫酸铜,3g 硫酸钾及20mL 硫酸,稍摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45℃角斜支于有小孔的石棉网上。

小心加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力(360~410℃),并保持瓶内液体微沸至液体呈蓝绿色澄清透明后,再继续加热0.5图1 凯氏蒸馏装置 蒸汽发生器安全管 导管汽水分离器 样品入口冷凝管 冷水接收三角瓶反应管hr 。

取下放冷,小心加20mL 水,放冷后,移入100mL 容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中。

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1.目的
掌握凯氏定氮法测蛋白质的原理、操作、条件、注意事项。

2.原理
蛋白质是含氮有机化合物。

食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质
分解。

分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。

然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后在以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量计算含氮量再乘以换算系数,即为蛋白质含量。

3.试剂
3.1浓硫酸、硫酸铜、硫酸钾,所有试剂均用不含氮的蒸馏水配制
3.2混合指示液
1 份(1g/L )甲基红乙醇溶液与5 份 1g/L 溴甲酚氯乙醇溶液临用时混合。

也可用 2 份甲基红乙醇溶液与 1 份 1g/L 次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。

3.3氢氧化钠溶液(400g/L)
3.4标准滴定溶液
硫酸标准溶液[ c(1/2H2SO4)=L]或盐酸标准溶液[ c(HCl)L]
3.5硼酸溶液(20g/L)
4.仪器
定氮蒸馏装置
5.样品
全蛋( 2.47g )
6.操作
6.1样品处理
准确称取 2—5g 半固体样品,小心移入干燥洁净的 500mL凯氏烧瓶中,然后加入研细的硫酸铜 0.5g ,硫酸钾 10g 和浓硫酸 20mL,轻轻摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以 45°角斜放于加有石棉网的电炉上,小火加热,待内容物全部炭化后,泡沫完全消失后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至
液体呈蓝绿色呈请透明后,再继续加热,取下放冷,慢慢加入 20mL水。

放冷后,移入 100mL容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用。

取与处理样品相同的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。

6.2连接装置
装好定氮装置,于水蒸气发生器内装水至 2/3 处,加甲基红指示剂数滴及少量硫酸,以保持水呈酸性,加入数滴玻璃珠以防暴沸,用调压器控制,加热至水沸腾。

6.3蒸馏、吸收及滴定
向接收瓶(锥形瓶)内加入10mL20g/L 硼酸溶液及混合指示剂1-2 滴,并使冷凝管的下端插入液面下。

用移液管移取样品消化稀释液有小漏斗室流入反应室,在将10mL400g/L 氢氧化钠溶液倒入碱液管中,提起玻璃塞使其缓缓流入反应室,并加水于小漏斗中以防止漏气。

开始蒸馏。

蒸气通入反应
室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内,蒸馏5min,移动接收瓶,是冷凝管下端离开液面,再蒸馏 1min,然后用少量的水冲洗冷凝管下端外部。

取下接收瓶,以 mol/L 盐酸标准溶液滴定至由蓝色变为微红为终点,记录盐酸溶液用量。

同时吸取空白消化液按以上操作为空白实验,记录空白试验消耗盐酸标准溶液的体积。

7.数据记录
7.1原始数据
7.2可疑值弃留
实验获得的数据均合理,无可疑值。

7.3整理数据
精滴 /mL
粗滴 /mL
平行试验1平行试验2平行试验3空白试验
8.计算
(V 标-V0)× Ca×
X = ————————————×100×K
m样 /V 定×V 测
式中: X—样品中蛋白质含量, %;
V标—主试验(测定用液)消耗硫酸或盐酸标准溶液的体积,mL;
V 0—空白试验消耗硫酸或盐酸标准溶液的体积, mL; Ca
—硫酸或盐酸标准溶液的物质的量浓度, mol/L;
3
—氮的物质的量质量× 10 ,g/mol;
V定—消化液定容体积, mL;
V测—消化液参加测定(测定用液)的体积,mL;
K—氮换算为蛋白质的系数,蛋白质中的氮含量一般为 15~ %,按 16%计算乘以即为蛋白质,乳制品为 6038,面粉为,玉米、高粱为,花生为,米
为,大豆及其制品为,肉或肉制品为 6025,大麦、小米、燕麦、裸
麦为,芝麻、向日葵为。

9.结果
V标 =(V1+V2+V3)/ 3 = (++)/ 3 =
(V标-V0)×Ca×=——————————×100×K=—————————————————
m样 /V 定×V测 2.47g/100mL×10mL
×100×=%
10.结果可靠性分析
10.1 精密度
平均偏差 =(++)/3=
相对平均偏差 = ×100%=%
10.2 误差分析
10.2.1 根据实际操作情况分析误差的产生原因
在做空白实验前可能由于定氮瓶未完全清洗干净,有之前的样液残留或者之前样液产生的氨气未排空而导致空白实验消耗的标准溶液过多,使实验结果偏低。

10.2.2 误差的方向性
本实验产生误差为负误差。

11.结论
三次平行试验均吸取10mL消化液,产生的氨气经吸收后以mol/L 盐酸标准溶液滴定,消耗盐酸浓度依次为、、(相对平均偏差为%)。

取三者平均值计算得样品蛋白质含量为 %。

由于空白实验前定氮瓶未完全清洗干净,有之前的样液残留
或之前样液产生的氨气未排空导致空白实验消耗的标准溶液过多,结果偏低,产生误差为负误差。

12.思考题
12.1 为什么叫粗蛋白
样品中常含有核酸、生物碱、含氮类脂、卟啉以及含氮色素等非蛋白质
的含氮化合物,非纯蛋白质,故称粗蛋白。

12.2 试剂及用途
浓硫酸:消化、氧化剂
硫酸铜:催化剂、指示消化终点
硫酸钾:使消化温度升高到400℃
混合指示剂:指示滴定终点
氢氧化钠溶液:用于蒸馏,使氨气溢出。

硼酸溶液:吸收液,将氨气固定于吸收液中,形成硼酸铵。

硫酸标准溶液或盐酸标准溶液:用于滴定,与硼酸铵反应
12.3 各步终点
消化终点:溶液由黑色变为蓝绿色澄清透明。

蒸馏终点:凯氏瓶内溶液变为深蓝色或产生黑色沉淀,然后用表面皿接
几滴馏出液,用奈氏试剂检查,如无红棕色物生成,表示蒸馏完毕。

滴定终点:用盐酸标准溶液直接滴定至溶液由蓝色变为微红色即为终
点。

12.4 注意事项
移液管不可交叉使用,防止酸碱试剂污染;蒸馏装置不能漏气;消化时,火力由弱到强,烧瓶倾斜呈 45°;瓶口放一长颈漏斗;蒸馏与吸收,先进行吸
收操作,冷凝管末端必须插入吸收液中,然后再进行蒸馏的操作;蒸馏结束时,将管离开液面,蒸馏 1min,再用少量蒸馏水洗管外壁;滴定,先粗滴,后
精滴。

12.5 叙述整个实验中有关颜色的变化,为什么
消化终点:由黑色变为蓝绿色澄清透明。

因为浓硫酸具有脱水性和氧化性,使有机物炭化呈黑色,待有机物全部被消化完后,不再有硫酸亚铜生成,溶
液呈现清澈的蓝绿色。

蒸馏终点:凯氏瓶内溶液变为深蓝色或产生黑色沉淀。

加入氢氧化钠后,
与硫酸铜反应生成氢氧化铜沉淀,在高温下分解呈氧化铜,产生黑色沉淀。

滴定终点:用盐酸标准溶液直接滴定至溶液由蓝色变为微红色即为终
点。

硼酸铵是强碱弱酸盐,呈碱性,混合指示剂会显蓝色。

用盐酸滴定后,
溶液呈酸性,因此指示剂显微红色。

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