、氨基酸纸层析分离鉴定_
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1.本实验中滤纸的作用是什么?
滤纸作为惰性支持物的分配层析,滤纸纤维上羟基具有亲水性,吸附一层水作为固定相,有机溶剂作为流动相。
2.实验中作为固定相和流动相的物质分别是什么?
固定相是水,流动相是正丁醇
3.R f值的含义、影响因素?
Rf=物质斑点(浓度中心)移动的距离/溶剂前缘移动的距离=a/b,即溶质在滤纸上的移动速度。
物质的结构、性质、容积系统、层析滤纸的质量和层析温度等。4.R f值为多少范围内可以确定为同一物质?
在两Rf值之差绝对值小于0.05可以确定为同一物质。
5.层析滤纸和普通滤纸有什么区别?
层析滤纸,组成该滤纸的纤维素是亲水物质,能形成水相和展层溶剂的两相系统,被分离物质在两相中的分配保持平衡关系。层析滤纸材质较普通滤纸材质比较均匀、机械强度好、有一定的纯度、纤维松紧适宜。
6.为什么要平衡?平衡剂和扩展剂是同一物质吗?
平衡剂起到使纸层析上吸附的溶剂达到饱和的作用,平衡后得到的斑点比较圆整。平衡剂和扩展剂不是同一物质。
7.用手直接接触滤纸会引起什么不良后果,为什么?
会使手上的杂质蛋白质污染滤纸,造成实验的误差。
8.缝制的纸筒如果两边缘相靠会造成什么后果?
会出现毛细现象,使边缘的层析液上升加快,出现的不是一条直线。
9.为避免实验结果出现“拖尾”现象,实验操作中应注意哪些环节?在点的时候,多点几次,每次的量要控制,点下一次的时候,前面一次的点样要吹干。
10.标记滤纸不能使用油性笔,为什么?
因为油性的会溶解与有机溶剂,会溶于正丁醇。