基因工程基本原理

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什么是基因工程

什么是基因工程

什么是基因工程
一、什么是基因工程
基因工程(Gene Engineering)是一种技术,它可以改变物质基础的构造,使其形成新的基因组合,从而获得有意义的生物。

基因工程可以
让完全不同的物种合成出新物种,或者将不同物种的基因强行混合,
成功地让一些被认为在自然过程中不可能出现的新物种出现。

二、基因工程的基本原理
基因工程的基本原理是人工合成、改造、替换或者删除染色体的基因,在生物体的内部,精心操控它们来改变特质。

比如,可以用基因工程
在生物体内引入新基因,从而改变它们的某些性状,从而形成新物种、新性状或新能力。

同样,也能改变基因中某种成分,形成新物种。

三、基因工程在实践中的应用
(1)改性个体:基因工程可以调整体内基因水平,以便让体内特定的
特质性状得到发挥。

(2)编辑特质:基因工程可以根据所需改变,精确定位到特定的基因
的特定位点,再改变基因位置,最终让细胞发生变化。

(3)基因治疗:基因治疗是改变患有基因性疾病的患者的基因的技术,以改善疾病情况。

(4)转基因:转基因技术指的是将一种物种中的基因流入到另一种物
种中,从而改变或添加某种性质,如抗病性等。

四、基因工程的好处与弊端
(1)好处:基因工程可以帮助改变鉴定动物和植物的性能,用来生产
食物、药物、精馏植物等产品,帮助解决营养、病症,使物种在极端
环境发展。

(2)弊端:大量的基因重组可能引发不可预料的问题,产生致命的疾病,甚至影响人类基因。

有时,新基因对导入到一个物种中的其他生
命细胞产生负面影响。

基因工程基本工作原理

基因工程基本工作原理

基因工程基本工作原理
基因工程是一种通过改变生物体的基因来改变其性状和功能的技术。

基本工作原理包括以下几个步骤:
1. 选取目标基因:确定想要改变的性状或功能,并找到与其相关的基因序列。

2. 获得DNA序列:获取包含目标基因的DNA序列,可以通
过从细胞中分离DNA或使用现有的DNA库等方法来获得。

3. 基因克隆:将目标基因的DNA序列插入到一个DNA载体(如质粒)中。

质粒是一种环状DNA分子,可以在细胞中自
我复制。

4. DNA转化:将载有目标基因的质粒导入细胞中。

这可以通
过多种方法实现,例如化学处理、电穿孔或使用病毒载体等。

5. 基因整合:目标基因被细胞摄取后,可以将其整合到细胞的染色体中。

这个过程中,目标基因会与宿主DNA进行互补配对,并与染色体连接成一条连续的DNA链。

6. 表达和转录:一旦目标基因被整合到细胞的染色体中,细胞可以开始利用这个基因来合成特定的蛋白质。

这个过程涉及到基因的转录(将DNA转录成RNA)和翻译(将RNA转化为
蛋白质)。

通过以上步骤,基因工程可以实现对生物体基因的改造和定制,
从而赋予其新的性状和功能。

这项技术在农业、医学、工业等领域有着广泛的应用,例如改良作物、生产药物和生物材料等。

基因工程基本原理

基因工程基本原理

基因工程基本原理
基因工程基本原理:一个完整的基因克隆过程应包括:目的基因的获取,克隆基因载体的选择与改造,目的基因与载体的连接,重组DNA分
子导入受体细胞,筛选出含感兴趣基因的重组DNA转化细胞。

实现上述
过程需要一些重要的工具酶,如限制性内切核酸酶连接酶等。

限制性
内切核酸酶是一类识别DNA特意序列的内切核酸酶。

①目的基因的获取:
外源基因又称目的基因,来源于几种途径:化学合成、酶促合成c DNA,制备的基因组DNA及PCR技术。

细菌质粒、噬菌体和一些病毒DNA
均可被改造成基因克隆的载体。

②基因载体的选择与构建:
可作为基因载体的DNA分子有质粒DNA、噬菌体DNA和病毒DNA,它
们经适当改造后仍具有自我复制能力,或兼有表达外源基因的能力。

③外源基因与载体的连接:
连接方式有:黏性末端连接、平端连接和人工接头连接等。

④重组DNA导入宿主细胞:
外源DNA与载体在体外连接成重组DNA分子,需将其导入宿主细胞。

随受体细胞生长、增殖,重组DNA分子得以复制、扩增。

⑤重组体的筛选:
鉴定哪一菌落或嗜菌斑所含重组DNA分子确实带有目的基因,即可
得到目的基因的克隆,这一过程即为筛选或选择。

⑥克隆基因的表达:
在原核或真核表达体系中进行表达,获得所需要的蛋白质。

例题(单选):在分子生物学领域中,分子克隆主要是指:
A.DNA的大量复制
B.DNA的大量剪切
C.RNA的大量复制
D.RNA的大量剪切
E.反转录酶。

基因工程基本原理简介知识分享

基因工程基本原理简介知识分享

fragments
3. 1.25 U/ugDNA Bcl I
1. Bcl I 酶切纯化片段
4. Lamba DNA/Hind Ⅲ Marker
2. Lamba DNA/Hind Ⅲ Marker
图2. 基因组DNA Bcl I 酶切电泳
图3. 10~23kb DNA片段回收产物电泳
实验二、 家蝇卵黄蛋白基因组基因的克隆 和噬菌斑
可疑阳性克隆
噬菌斑原 位杂交
三次纯化
KW25 1
噬菌斑原 位杂交
阳性克隆
提取
目的DNA片段
Hind III
鉴定 XhoI
Southern Blot
λ-DNA
单酶切和 双酶切
亚克 隆
测序
序列分析
实验二结果 ➢2.1 特异性探针制备
制备了大小为768bp的地高辛标记的DNA片段特异性探 针,工作浓度为1:2000。
实验二结果 ➢2.3 mdYP基因组基因的克隆
获得了全长3991bp的基因组序列,包含1.7kb卵黄蛋白 基因组基因及其5’-调控区序列。
1 ACAGAATTTGCTATTTAGGTCTTATATTTCTCAGAGCAAAGAGCTGGGCTGCAGAGAGATTTATGACAACGCCGTTGTGTGGTGTATGTATATAGAAAGA 100 101 ATAGAAGAATTACTTTNCTTAGTTGTTTTTTAAATAATCCTGTCCAACAAATGTGTCCAATCCAATTCTTGTTTTATTGGTTTTATCCCTCCTTAATATT 200 201 AATCTTTTTGGTCTTATTGAATAATTATTGATTGTGGTGATTGCTGTCTCTACTTCGTTTGGTTTGGTTTGGTTGTCAGTTGCGAACGTTGGAAACAAAA 300 301 ATGAAAAACGTCCCAACGAAACGAATATGAAGGCCACAAAGGAATACCCGATAAAAAATAAACAGAAAGCAAAGACTCCGGGTACTCTGTTGTTTACGAA 400 401 TGAGACATGAGAGAATTGAACATCTTCACTAAAGAGCTCGGAATTAGTTACAAATTAAATTGAATTCGACGGTGCGGTGGCGACATGACAGACGGACGGGT 500 501 TGATGGATAGATAACGGCGTTGAGAGTGAATGTGTTGGCGTCTTGTCTCTATTGCAGGGTGATTCATATATTAGAAAATTTACAATGGAAAAGTGGTTAT 600 601 TTTAAATAAGAAATAATATATATATGATATATATGATGTTTGGGGAAAAAATATGAAAAGATTACACTCTTACCTCATTATCTTTACTAAAAAAGGTATT 700 701 TTATGTATAAAAGGCTTGCAAAGTCGAAGTCTATTCACAAAAGATTCGAAAACGGTAATAAATGATCCTTCAGCAAAATATTATTGGACAGTATTGGACA 800 801 ATTCAACGATAAAAAAGTCACATTAAAAAGTGCTTTAAAAATAATGGCGGTTGACTTTTTTGCAGTTTTTTTTTTATCTTACCCTTTATGTCTAAAACGG 900 901 ACATTTTCAAAGGAACCTTATTCTAAAAATCTCAAAATATATGGAAGAGGGGGTAACTTTCCTCCTCTATTTAGGTTACTTTCCGATGTAAATTTTCAAA 1000 1001 ACGCCATTACATTTGTCTTCTATTTTTAGCCCTACTTTCATAATCTACTAGATTATTTCAGTATTTTTTTGCACAGTGCAGGTGATGATATTGGATAATT 1100 1101 CTTATTGAGGAAAAAATTCCCCAGTAAGAATGGAGAATCGGGTTATGAAACAAGATTTTTTAATAATTTCATTAATTATTTATTTTTTGNTTCTATGATT 1200 1201 TTGTGTTTTTTTTTTTTTTTGAATATTATTTTGAAATAAAGTGAAATCGAAATCTTCTCCTTTTTAGGTTATTGATCTAAAATACAAGGCTATTGCCAAA 1300 1301 ATCATGTAATACAATATTTGCTGAAATAGGCCAAATCACTTCTCGCCCTCCGTTCTATTTTTGATGACAGTGAAGCATTATGCAAGCTTGTTTCAATTCT 1400 1401 CCCGCTTATCGTCACAACCTCTACAGATTTTGCAATTTACGTAAAGAAAAAGAAAAACGGCAAAATATTGAAAATGAAAATCAGCAAAAATCAAAAAAAT 1500 1501 TATCAGCAGTTCTCGCTGGACTCACCTGACGGTCTGATTAACTATTTTGCTGTGAAATGTTAAATTTATTTGATATAAATACCCCCAGTGGAAGCCAGTG 1600 1601 GAGGGTACATTTCACAAGTTAGAACATTCGGCTTAAGAAGTGCCCGTACGACTTTGGGAATTTTTGAAACTGACCGACAGAAGGATGAATCCATTGGGAG 1700 1701 TTTTGTGCTTTGTAGCCTTTGTGGCTGCCGGCGCCTTGGCCTCACAATCGCAGGACTACAGTCCAAAGCCAGCACATTGGCTGAAACCCACCGAATTGGA 1800 1801 GGCCACACCATCTTTGAATGAGCTCACCTTTGAGCAGCTGGAGAATATGCCATTGGAAAAGGGAGCCAAATTGATGCGTAAACTCTGTAAGTAGCCAGTC 1900 1901 AAGAATTTGGAAAAGACCTCCAATAATACAATTTCTCTCTTCTCTAGACCACCTGTCCCAAATCGACTACTCTGTGTCGCCCAACTTTGTGCCCAGTCCC 2000 2001 AGCAATGTCCCCGTCTACATTTTCAACAGCAAGGGTGAAAAAGAAACCTGCAACTTGAACAACTACGTCGACATTGCCAAGGAAAAGCCGAAATTTGGCG 2100

基因工程的原理是什么

基因工程的原理是什么

基因工程的原理是什么基因工程是一种利用生物技术手段对生物体进行基因组的改造和调控的技术,它的原理主要包括基因定位、基因克隆、基因转移和基因表达调控等几个方面。

基因工程的原理是通过对生物体的基因进行精准的编辑和调控,从而实现对生物体性状的改良和优化。

首先,基因工程的原理之一是基因定位。

基因定位是指通过一系列实验手段来确定目标基因在染色体上的具体位置,包括物理定位和遗传定位两种方式。

通过基因定位,科学家们可以准确地找到目标基因,并为后续的基因编辑和调控奠定基础。

其次,基因工程的原理还包括基因克隆。

基因克隆是指将目标基因从一个生物体中复制出来,并将其插入到另一个生物体中的过程。

通过基因克隆,科学家们可以获取大量目标基因的复制体,并进行进一步的研究和应用。

另外,基因工程的原理还涉及基因转移。

基因转移是指将目标基因从一个生物体转移到另一个生物体中的过程,可以是同种生物体之间的基因转移,也可以是跨种生物体之间的基因转移。

通过基因转移,科学家们可以实现对生物体基因组的改造和调控,从而获得具有特定性状的生物体。

最后,基因工程的原理还包括基因表达调控。

基因表达调控是指通过一系列的调控机制来控制目标基因的表达水平和表达时机,从而实现对生物体性状的精准调控。

通过基因表达调控,科学家们可以实现对生物体特定性状的增强或抑制,为农业、医药等领域的应用提供了可能。

综上所述,基因工程的原理主要包括基因定位、基因克隆、基因转移和基因表达调控等几个方面。

通过这些原理的应用,基因工程技术可以实现对生物体基因组的精准编辑和调控,为人类社会的发展和进步带来了巨大的潜力和可能性。

基因工程的原理和技术

基因工程的原理和技术
基因工程的原理和技术
基因工程的基本原理:
让人们感兴趣的基因(即目的基因)在宿主细 胞中稳定和高效的表达。根据不同的实验目的,目 的基因可以有很多种,如抗虫基因、抗病基因、抗 除草剂基因、人胰岛素基因和人干扰素基因等。因 此表达的产物各不相同。通过基因工程的基本操作 ,就能实现目标。
二、基因操作的基本步骤
第三步:将目的基因导入受体细胞
选择的关键是分析基因工程的最终目的,按转基因的目的来选择:
基因工程的 最终目的
得到大量特 殊蛋白质
得到转基因动物 得到转基因植物
常用的受 体细胞
大肠杆菌 等微生物
受精卵 植物体细胞
导入的方法
Ca2+处理法 显微注射法 农杆菌转化法
将目的基因导入微生物细胞
常选细菌 作受体细胞的原因:它 们繁殖力极强,生长速 度很快,短期内就会产 生大量后代,所以把目 的基因转入这些细菌, 就能在短时间内得到大 量的目的基因产物。
细菌的检测:
将每个受体细胞单独培养形成菌落,检测菌落中 是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的 菌落,保留有表达产物的进一步培养、研究。
无表达产物
无表达产物
有表达产物
无表达产物
多细胞生物的检测: 将每个受体细胞单独培养并诱导发育成完整个体, 检测这些个体是否表现出相应的性状。
例:抗虫棉检测
用棉铃饲喂棉铃虫,如虫吃后不 出现中毒症状,说明未摄入目的基 因或摄入目的基因未表达。
例:下列有关基因表达载体的构建说法正确的是( C ) A.限制性核酸内切酶的功能是切割各种DNA分子 B.基因工程中经常用到的酶只有DNA连接酶和限制性 核酸内切酶 C.将目的基因与载体结合的过程,实际上就是不同来 源的DNA重新组合的过程 D.具有粘性末端的目的基因片段插入质粒的切口处, 先形成磷酸二酯键,再形成氢键

基因工程基本原理及技术

基因工程基本原理及技术

【知识点】高中生物:基因工程核心知识汇总基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

一、基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术。

二、基因工程的原理及技术● 原理:基因重组技术● 基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。

(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。

(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。

2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较:①相同点:都缝合磷酸二酯键。

②区别:E•coliDNA连接酶来源于T4噬菌体,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。

(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。

DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。

3.“分子运输车”——载体(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。

②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。

③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。

(2)最常用的载体是质粒:它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。

(3)其它载体:噬菌体的衍生物、动植物病毒● 基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的获取1.目的基因是指:编码蛋白质的结构基因。

基因工程技术与应用知识点

基因工程技术与应用知识点

基因工程技术与应用知识点
1.基因工程技术的原理
基因克隆是指将感兴趣的基因从一个物种中剪切并插入到另一个物种
的DNA中。

首先,需要获得目标基因的DNA序列,然后通过PCR扩增得到
足够多的目标基因的DNA片段。

接下来,将目标基因的DNA片段与质粒进
行连接,形成重组质粒。

最后,将重组质粒导入宿主细胞中,使其进行复
制和表达。

这样,目标基因就被克隆到宿主细胞的基因组中。

转基因是指利用基因工程技术将外源基因导入目标细胞中,使其产生
新的功能或性状。

转基因主要通过两种方法实现:直接注射外源基因或利
用载体导入外源基因。

直接注射外源基因常用于转基因动物的制作,而利
用载体导入外源基因则常用于转基因植物的制作。

通过转基因技术,可以
实现农作物的抗虫、抗病、抗逆性增强,以及工业酶的大规模生产等。

2.基因工程技术的应用
农业领域:基因工程技术可以用于农作物的抗虫、抗病和抗逆性提高
等方面。

通过转基因技术,可以使植物表达抗虫蛋白,减少对农药的依赖;也可以导入外源基因,增强植物的抗逆性,使其在恶劣环境下仍能正常生长。

工业领域:基因工程技术可以用于工业酶的生产,如乳酸菌发酵生产
乳酸。

此外,基因工程还可以用于生物燃料的生产,如利用转基因酵母生
产乙醇。

基因工程的原理

基因工程的原理

基因工程的原理
基因工程是指通过改变、插入或删除生物体内的基因来改变其特性的技术。

基因工程的原理是利用基因的特性,将特定的基因插入到生物体内,使其产生新的特性或改变原有的特性。

基因工程的原理包括以下几个方面:
DNA分子的结构和功能:DNA是生命活动的基本单位,它负责储存和传递遗传信息。

DNA分子是由若干条碱基链组成,每条碱基链由若干种碱基构成,碱基之间通过碱基对键来连接。

基因的插入和表达:基因工程的基本原理是将特定的基因插入到生物体内,使其产生新的特性或改变原有的特性。

这通常需要使用含有目标基因的质粒,并利用载体将其插入到生物体内。

插入后,基因可能会被表达,即转录成 RNA 并翻译成蛋白质。

遗传工程技术:遗传工程技术是指在基因工程实验中使用的一系列技术,包括 DNA 合成、PCR 技术、DNA 酶切割和修饰技术、基因转换技术等。

这些技术可以
帮助研究人员操纵基因,使其能够被插入到生物体内。

载体技术:载体技术是指利用载体将目标基因插入到生物体内的技术。

载体可以是质粒、噬菌体、病毒等,它们可以在生物体内复制并传播目标基因。

载体技术是基因工程的重要组成部分,可以帮助研究人员将目标基因插入到特定的生物体内,并控制基因的表达。

染色体工程:染色体工程是指对生物体染色体的操作,包括插入、删除或改变染色体的基因。

染色体工程可以帮助研究人员了解染色体的结构和功能,并使用基因工程技术改变染色体的基因组成。

基因工程在医学、农业、生物制药等领域有广泛的应用,可以帮助研究人员改变生物体的特性,为解决各种问题提供新的思路和方法。

基因工程的基本原理

基因工程的基本原理

基因工程的基本原理基因工程的基本原理是在分子水平上直接操作遗传物质,通过改变生物体的基因组成,以获得人们所需的新性状或新产品。

这一技术的核心是DNA重组技术,即将所需的目的基因从供体生物的基因组中分离出来,经过必要的加工和处理后,与载体DNA连接,形成重组DNA分子。

然后将重组DNA分子引入受体细胞,通过筛选和鉴定,获得稳定表达目的基因的重组体克隆。

最后,通过对目的基因的表达和产物的纯化,获得所需的新产品或新性状。

基因工程的基本原理可以概括为以下几个步骤:获得目的基因:这是基因工程的第一步,需要从供体生物的基因组中分离出所需的目的基因。

常用的方法包括化学合成法、PCR扩增法、基因文库筛选法等。

构建重组DNA分子:将目的基因与载体DNA连接,形成重组DNA分子。

载体通常是一种能够自主复制的DNA分子,如质粒、病毒等。

连接过程需要用到限制性内切酶和DNA连接酶等工具酶。

引入受体细胞:将重组DNA分子引入受体细胞,常用的方法包括转化、转染、感染等。

受体细胞可以是原核生物、真核生物或细胞系等。

筛选与鉴定重组体克隆:通过选择性培养基或分子生物学方法,筛选出含有重组DNA 分子的细胞克隆,并进行鉴定。

鉴定方法包括PCR、测序、Southern杂交等。

目的基因的表达与产物纯化:在鉴定出正确的重组体克隆后,需要通过诱导表达或组成型表达等方式,使目的基因在受体细胞中表达。

然后通过对表达产物的分离纯化,获得所需的新产品或新性状。

总之,基因工程是一种在分子水平上直接改造遗传物质的技术,通过改变生物体的基因组成,实现对其性状和功能的定向改造和优化。

这一技术在医学、农业、工业等领域都有广泛的应用前景。

基因工程基本原理

基因工程基本原理

26
DNA双螺旋
4. 同一平面的碱 基在二条主链 间形成碱基对。 A-T、G-C。间 以氢键配对。 A-T间形成两 个氢键,G-C 间形成三个氢 键。
27
28
空 间 模 式 图
B-DNA
29
Gene Code
密码子表
30
中心法则
31
Tc
r
Ne
r
Sr
Psc101 R6-3 ECORI 连 接 酶
13
Diabetes specific medicine
——rhInsulin
Produced by genetic engineerin g,named recombinant Human Insulin
14
EPO
Red blood cells
15
Every people have about 24,000 genes,which decide people`s hair color, nose shape and so on.
41
DNA克隆 也称基因克隆或基因工程是指在体外对 DNA
分子按照既定的目的和方案,对 DNA进行剪切和
重新连接,然后把它导入宿主细胞,从而能够扩
增有关 DNA 片段,表达有关基因产物,进行 DNA
序列分析,基因治疗,研究基因表达的调节因子
(如启动子、增强子等),以及研究基因的功能
等。
42
3、限制性核酸内切酶( restriction
44
作用 与甲基化酶共同构成细菌的限制修
饰系统,限制外源DNA, 保护自身DNA。
45
46
命名
EcoR I
属 种 株 序
Escherichia coli RY13 大肠埃希菌RY13株中发现的 第一种限制新核酸内切酶

基因工程原理

基因工程原理

基因工程原理
基因工程是一门综合性的学科,涉及生物学、化学、生物化学、遗传学等多个
学科领域,是一种利用基因技术对生物体进行改良和改造的技术。

基因工程的原理主要包括基因的克隆、基因的表达和基因的编辑等方面。

首先,基因工程的原理之一是基因的克隆。

基因的克隆是指通过分子生物学技术,将感兴趣的基因从一个生物体中复制出来,并将其插入到另一个生物体中,使得这个生物体也具有相同的基因。

基因的克隆主要包括DNA的提取、DNA的切割、DNA的连接和DNA的插入等步骤。

通过这些步骤,可以获得大量相同的基因,并将其应用于生物体的改良和改造中。

其次,基因工程的原理还包括基因的表达。

基因的表达是指利用基因工程技术,使得特定的基因在目标生物体中得到表达,从而产生特定的蛋白质或其他产物。

基因的表达主要包括转录和翻译两个过程,其中转录是指将DNA转录成mRNA,而
翻译是指将mRNA翻译成蛋白质。

通过调控基因的表达,可以实现对生物体特定
性状的调控和改良。

最后,基因工程的原理还包括基因的编辑。

基因的编辑是指利用基因编辑技术,对生物体的基因组进行精准的编辑和改造。

目前常用的基因编辑技术包括
CRISPR/Cas9等,通过这些技术可以实现对特定基因的精准修饰和改造,从而实现对生物体性状的调控和改良。

总的来说,基因工程的原理主要包括基因的克隆、基因的表达和基因的编辑等
方面。

通过这些原理的应用,可以实现对生物体的精准改良和改造,为人类社会的发展和进步提供了重要的技术支持。

基因工程技术的不断发展和应用,将为人类社会带来更多的福祉和发展机遇。

基因工程的原理和技术

基因工程的原理和技术

2、形成重组DNA分子
限制性核酸 ①用一定的_________切割 内切酶 质粒,使其出现一个切 粘性末端 口,露出____________ 。 同一种限制性核酸内切酶 ②用_____________切割 含目的基因的DNA ,使其产生_____ 相同 的粘性末端 ____________。
切口 处, ③将切下的目的基因片段插入质粒的______ DNA连接酶 ,形成了一个重组 再加入适量___________ DNA分子(重组质粒)
农杆菌转化法
农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌,农杆 菌中细胞中含有Ti质粒,其上有一段T-DNA,农杆菌通过 侵染植物伤口进入细胞后,可将T-DNA插入到植物染色体 中。人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区,借助农 杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合,然后 通过植物组织培养技术,再生出转基因植株。
5、目的基因的表达
①检测转基因生物染色体的DNA 上是否插入了目的基因 检测 方法—— DNA分子杂交(DNA探针) (分子水平) ②检测目的基因是否转录出了mRNA 方法—— 分子杂交 ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 方法—— 抗原抗体杂交 个体水平 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等
程的叙述中,错误的是 ( A ) A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、限制性核酸内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由载体导入受体细胞 D、人工合成目的基因不用限制性内切酶
2.有关基因工程的叙述正确的是
(
D
)
A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成在细胞内完成 C.质粒都可以作为运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料
第一章
第二节
基因工程
基因工程的原理和技术

微生物的基因工程

微生物的基因工程

微生物的基因工程微生物是指体积微小、结构简单的生物体,如细菌、真菌等。

基因工程是利用基因技术对生物体的基因进行改造和调控的一项科学技术。

微生物的基因工程是基因工程领域中的一个重要分支,它通过对微生物的基因进行修改,可以实现对微生物的功能和特性进行精确控制,从而对人类生产和生活产生重要影响。

一、微生物基因工程的基本原理微生物基因工程的基本原理是利用生物体内的基因进行操作。

基因是生物体内传递遗传信息的单位,它决定了生物的特性和功能。

通过对微生物的基因进行修改和调控,可以改变微生物的生理特性和产生新的功能。

二、微生物基因工程的应用领域微生物基因工程在许多领域中都有广泛的应用。

以下是一些常见的应用领域:1. 药物生产:通过修改微生物的基因,使其能够产生具有疗效的药物。

例如,利用基因工程技术可以让细菌产生抗生素等药物,从而提高药物的生产效率和质量。

2. 农业领域:通过对农业微生物的基因进行工程改造,可以提高农作物的抗病性、耐盐碱性等特性,从而增加农作物的产量和质量。

3. 环境治理:利用微生物基因工程技术可以改变微生物的代谢途径,使其能够降解污染物,从而实现环境治理的目的。

4. 能源开发:微生物基因工程可以用于生物能源的开发和利用。

例如,通过对微生物的基因进行修改,可以使其具有产生生物燃料的能力。

5. 生物工程:微生物基因工程在生物工程领域有着重要的应用。

通过对微生物的基因进行改造,可以实现对微生物的功能和特性进行精确控制,从而实现生物工程的目的。

三、微生物基因工程的发展前景微生物基因工程在生物科技领域中具有重要的地位和广阔的发展前景。

随着基因工程技术的不断发展和进步,微生物基因工程将会在更多领域发挥作用。

1. 高效生产:微生物基因工程可以提高微生物的产量和产能,使生产过程更加高效和经济。

2. 新材料研发:微生物基因工程可以实现对微生物的功能进行改造,从而开发出新的材料和产品。

3. 环境保护:微生物基因工程可以用于环境治理和污染物降解,有助于改善环境质量。

基因工程实验原理

基因工程实验原理

基因工程实验原理
基因工程实验的原理是基于对生物体基因组的修改和重组,旨在增加或改变生物体的特性。

下面将介绍几种常见的基因工程实验原理:
1. 基因克隆:该实验原理是将所需基因从一个生物体中剪切并插入到另一个生物体的染色体上,使目标基因能够在新宿主中表达。

2. 限制性内切酶消化:该实验原理是利用限制性内切酶切割目标DNA,创建具有粘性末端的DNA片段。

然后,可以通过连接这些片段来构建重组DNA。

3. 反转录和cDNA合成:这个实验原理是利用逆转录酶将RNA转录成DNA,即cDNA(互补DNA),然后将其克隆到表达载体中。

4. 基因敲入和敲除:该实验原理是通过CRISPR/Cas9系统或其他方法,有针对性地切割或改写目标基因,从而敲除或敲入特定的DNA片段。

5. 转基因技术:这是将外源基因导入到目标生物体中,使其表达或增强特定的功能。

转基因技术的原理可以是通过基因枪、农杆菌介导的转化等手段。

这些实验原理是基因工程研究中常用的方法,可以用于改良农
作物、生产药物、开发生物燃料等领域。

在实验过程中,研究人员需要仔细设计实验方案,并根据具体需求选择适当的方法。

基因工程的基本原理

基因工程的基本原理

基因工程的基本原理基因工程是一种利用生物技术手段对生物体进行基因改造的技术。

它的基本原理是通过人为干预生物体的基因组,来改变生物体的遗传特征,从而达到改良生物体的目的。

基因工程的基本原理主要包括基因的克隆、基因的修饰和基因的表达等方面。

首先,基因的克隆是基因工程的重要基本原理之一。

基因的克隆是指将感兴趣的基因从一个生物体中分离出来,并通过体外复制技术进行扩增,得到大量的同一基因序列。

这样的基因序列可以用于后续的基因修饰和表达实验。

基因的克隆需要利用DNA重组技术,将目标基因插入到适当的载体中,然后将载体导入到宿主细胞中进行复制。

其次,基因的修饰也是基因工程的重要基本原理之一。

基因的修饰是指对目标基因进行特定的改变,以达到特定的目的。

常见的基因修饰包括基因敲除、基因敲入、基因突变等。

基因的修饰可以通过CRISPR/Cas9等基因编辑技术来实现,这些技术可以精确地对基因进行修改,从而改变生物体的遗传特征。

最后,基因的表达也是基因工程的重要基本原理之一。

基因的表达是指将目标基因导入到宿主细胞中,并使其在细胞内表达出目标蛋白。

基因的表达需要利用适当的启动子和终止子来调控基因的转录和翻译过程,从而实现目标基因的高效表达。

基因的表达可以通过转基因技术来实现,将目标基因导入到植物、动物或微生物中,使其表达出目标蛋白。

综上所述,基因工程的基本原理主要包括基因的克隆、基因的修饰和基因的表达等方面。

通过这些基本原理,可以对生物体的基因进行精确的改造,从而实现对生物体遗传特征的调控。

基因工程技术的发展将为农业、医学、生物制药等领域带来巨大的变革,有望为人类社会带来更多的福祉和发展机遇。

基因工程学的原理

基因工程学的原理

基因工程学的原理
基因工程学的原理是通过改变或操作生物体的基因来实现特定的目标。

主要的原理包括以下几个方面:
1. 基因克隆:通过将特定的基因从一个生物体中提取出来,然后将其插入到另一个生物体的基因组中,实现基因的复制和传递。

2. DNA重组:通过切割和重新组合DNA分子,将不同生物体的基因组合到一起,从而产生具有新特性的基因组。

3. 基因编辑:通过使用特定的工具,如CRISPR-Cas9系统,直接编辑生物体的基因序列,可以添加、删除或修改特定的基因片段。

4. 基因转导:将外源基因导入到目标生物体中,使其表达和产生特定的蛋白质或产物。

这些原理的应用使得科学家可以在生物体中引入新的功能基因,改变生物体的特征,如增强植物对病虫害的抵抗力、提高农作物的产量等。

此外,基因工程还可以用于生物医学研究和治疗,如基因治疗、基因诊断等。

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一、 A 型题
1. F因子从一个细胞转移至另一个细胞的基因转移过程称为
(A) 转导
(B) 转化
(C) 转座
(D) 转染
(E) 接合
2. 通过自动获取或人为地供给外源DNA使受体细胞获得新的遗传表型,称为
(A) 转化
(B) 转座
(C) 接合
(D) 转导
(E) 转染
3. 由插人序列和转座子介导的基因移位或重排称为
(A) 接合
(B) 转染
(C) 转导
(D) 转座
(E) 转化
4. 由整合酶催化、在两个DNA序列的特异位点间发生的整合称
(A) 位点特异的重组
(B) 同源重组
(C) 随机重组
(D) 基本重组
(E) 人工重组
5. 发生在同源序列间的重组称为
(A) 非位点特异的重组
(B) 位点特异的重组
(C) 基本重组
(D) 人工重组
(E) 随机重组
6. 限制性核酸内切酶切割DNA后产生
(A) 5’磷酸基和3’羟基基团的末端
(B) 5’磷酸基和3’磷酸基团的末端
(C) 5’羟基和3’羟基基团的末端
(D) 3’磷酸基和5’羟基基团的末端
(E) 以上都不是
7. 可识别并切割特异DNA序列的称
(A) 非限制性核酸外切酶
(B) 限制性核酸内切酶
(C) 限制性核酸外切酶
(D) 非限制性核酸内切酶
(E) DNA酶(DNase)
8. 在重组DNA技术中催化形成重组DNA分子的是DNA
(A) 解链酶
(B) 聚合酶
(C) 连接酶
(D) 内切酶
(E) 拓扑酶
9. 在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指
(A) 建立多克隆抗体
(B) 建立单克隆抗体
(C) 有性繁殖DNA
(D) 无性繁殖DNA
(E) 构建重组DNA分子
10. 在下述双链DNA序列(仅列出其中一条链序列)中不属于完全回纹结构的是
(A) GGAATTCC
(B) TGAATTCA
(C) AGAATTCT
(D) CGTTAAGC
(E) AGATATCT
11. 无性繁殖依赖DNA载体的最基本性质是
(A) 卡那霉素抗性
(B) 青霉素抗性
(C) 自我复制能力
(D) 自我表达能力
(E) 自我转录能力
12. 在已知序列的情况下获得目的DNA最常用的是
(A) 筛选cDNA文库
(B) 筛选基因组文库
(C) 化学合成法
(D) 聚合酶链式反应
(E) DNA合成仪合成
13. 重组DNA技术领域常用的质粒DNA是
(A) T病毒基因组DNA的一部分
(B) 细菌染色体外的独立遗传单位
(C) 细菌染色体DNA的一部分
(D) 真核细胞染色体外的独立遗传单位
(E) 真核细胞染色体DNA的一部分
14. 某限制性内切核酸酶按GGG▼CGCCC方式切割产生的末端突出部分含
(A) l个核苷酸
(B) 2个核苷酸
(C) 3个核苷酸
(D) 4个核苷酸
(E) 5个核苷酸
15. 某限制性内切核酸酶切割5’…GGGGGG▼AATTCC…3’序列后产生
(A) 5’突出末端
(B) 5’或3’突出末端
(C) 5’及3’突出末端
(D) 3’突出末端
(E) 平末端
16. 直接针对目的DNA进行筛选的方法是
(A) 氨苄青霉素抗药性
(B) 青霉素抗药性
(C) 分子杂交
(D) 分子筛
(E) 电泳
17. “克隆”某一目的DNA的过程不包括
(A) 重组DNA分子导人受体细胞
(B) 外源基因与载体的拼接
(C) 基因载体的选择与构建
(D) 筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞
(E) 表达目的基因编码的蛋白质
18. 表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是
(A) 酵母表达体系
(B) 原核表达体系
(C) E.coli表达体系
(D) 昆虫表达体系
(E) 哺乳类细胞表达体系
19. 不能用作克隆载体的DNA是
(A) 质粒DNA
(B) 噬菌体DNA
(C) 细菌基因组DNA
(D) 腺病毒DNA
(E) 逆转录病毒DNA
20. 克隆的基因组DNA可在多种系统表达,例外的是
(A) E.coli表达体系
(B) 昆虫表达体系
(C) 酵母表达体系
(D) COS细胞表达体系
(E) CHO细胞表达体系
二、 B 型题
(A) 位点特异的童组
(B) 同源重组
(C) 随机重组
(D) 自然重组
(E) 人工重组
21. 基本重组又称(A)(B)(C)(D)(E)
22. 由整合酶催化、发生在两DNA序列的特定位点间
23. 将目的基因与载体DNA拼接成重组DNA分子属于
(A) 基因载体的选择与构建
(B) 外源基因与载体的拼接
(C) 重组DNA分子导人受体细胞
(D) 筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞
(E) 表达目的基因编码的蛋白质
24. 产生嵌合DNA分子(A) (B)(C) (D) (E)
25. 可能应用限制性核酸内切酶
26. 获得DNA克隆
27. 应用转化、转染或感染技术
(A) 5’突出末端
(B) 3’突出末端
(C) 5’及3’突出末端
(D) 5’或3’突出末端
(E) 平末端
28. 某识别6核苷酸序列的限制性内切酶切割5’…AGCTG▼AATTC…3’产
生(A)(B)(C)(D)(E)
29. 某识别6核苷酸序列的限制性内切酶切割5’…CTGCA▼GAGTC…3’产

30. 某识别6核着酸序列的限制性内切酶切割5’…AGGTT▼AACAG…3’产生
.
(满分8分)
一,多选题
1,(1分)自然界基因转移可能伴发基因重组的有
2,(1分)在分子克隆中,目的DNA可来自
3,(1分)从基因组DNA文库或cDNA文库分离、扩增某一感兴趣基因的过
程就是
分)可用作克隆基因载体的DNA有
4,(1
5,(1分)将重组DNA分子导人受体细菌的方法有
6,(1分)下述序列属于完全回纹结构的是
7,(1分)下述操作可能用于DNA克隆过程的是
8,(1分)关于质粒DNA的叙述正确的是
四、填空题
1 .通过自动获取或人为地供给外源 _________ ,使细胞或培养的受体细胞获得新的 _________ ,这就是转化作用。

2 .由 _________ 和 _________ 介导的基因移位或重排,称为转座。

3 .基因重组有两种类型,即 _________ 和 _________ 。

4 .依赖整合酶、在两个 DNA 序列的 _________ 发生的整合称 _________ 。

5 .发生在同源序列间的重组称为 _________ ,又称 _________ 。

6 .一个完整的基因克隆过程应包括:目的基因的获取, _________ 的选择与改造, _________ 的连接,重组 DNA 分子导人受体细胞,筛选出含感兴趣基因的重组 DNA 转化细胞。

7 .限制性核酸内切酶是一类识别 _________ 的 _________ 核酸酶。

8 .科学家感兴趣的外源基因又称 _________ ,其来源有几种途径:化学合成,酶促合成 cDNA ,制备的基因组 DNA 及 _________ 技术。

9 .外源 DNA 离开染色体是不能复制的。

将 _________ 与 _________ 连接,构建成重组 DNA 分子,外源 DNA 则可被复制。

10 .根据采用的克隆载体性质不同,将重组 DNA 分子导人细菌的方法有 _________ 、 _________ 及感染。

五、名词解释题
1 . plasmid
2 . restriction endonuclease
3 , vector
4 . DNA cloning
5 .目的基因
6 .同源重组
7 . cDNA 文库
8 .基因组 DNA 文库
9 .回文结构
10 .转座
六、问答题
1 .简述基因位点特异的重组和同源重组的差别。

2 .何谓基因克隆?简述基因克隆的基本过程。

3 .何谓限制性核酸内切酶?写出大多数限制性核酸内切酶识 DNA 序列的结构特点。

4 .何谓目的基因?写出其主要来源或途径。

5 .解释质粒,为什么质粒可作为基因载体。

6 .解释基因载体,说出哪些 DNA 可作为基因的载体。

7 .简述 E . coli 和真核表达体系各自的优、缺点。

参考答案
四、填空题
1 . DNA ,遗传表型
2 .插人序列,转座子
3 .位点特异的重组,同源重组
4 .特异位点间,位点特异的
5 .同源重组,基本重组
6 .克隆基因载体,目的基因与载体
7 . DNA 特异序列,内切
8 .目的基因, PCR
9 .外源基因,载体
10 .转化,转染。

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