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细菌一般染色方法

细菌一般染色方法

细菌一般染色方法细菌染色是一种常用的实验技术,通过染色使细菌在显微镜下能够更清晰地观察和分析。

细菌染色通常分为简单染色、阴性染色和阳性染色三种方法。

一、简单染色方法:简单染色是最基础的细菌染色方法,主要是用一种染色剂来染色所有类型的细菌。

常用的染色剂有墨汁、甲基蓝、伊红等。

简单染色的步骤如下:1.取一片细菌涂片,将其干燥。

2.在涂片上滴加染色剂,覆盖整个片面。

3.将染色剂置于片上一分钟,用水冲洗。

4.用纸巾将涂片上的多余水份吸干。

5.镶片并观察。

简单染色可以使细菌呈现出斑点或条纹状,并能够区分一些基本形态和结构,但不能提供更多细菌信息。

二、阴性染色方法:阴性染色可使细菌显现为透明,而背景呈色的方法。

常用的阴性染色剂有阿里兹红、印度墨等。

阴性染色的步骤如下:1.将涂片上的细菌涂片均匀涂抹于载玻片上,使其成薄层。

2.滴加阴性染色剂到涂片上,使其均匀覆盖涂片表面。

3.用水冲洗染色液,并用纸巾擦干涂片。

4.镶片并观察。

阴性染色使背景呈色,使细菌透明,从而可以更清晰地观察其形态特征。

三、阳性染色方法:阳性染色可以使细菌显现为有色的圆点或杆状,常用的阳性染色剂有甲基蓝、伊红等。

阳性染色的步骤如下:1.将涂片上的细菌涂片均匀涂抹于载玻片上。

2.将染色剂滴加到涂片上,使其完全覆盖涂片。

3.置片5-10分钟,然后用水冲洗染色剂。

4.用纸巾将涂片上的多余水份吸干。

5.镶片并观察。

阳性染色可以染色细菌,使其呈现有色的形态,便于观察和鉴定。

此外,还有一些特殊染色方法,如革兰氏染色法、氢酒精酸快速染色法等。

革兰氏染色是一种经典的细菌染色方法,通过不同细菌细胞壁的染色性质来将其分为革兰阳性细菌和革兰阴性细菌。

该方法使用革兰紫染色剂和碘液,以及酒精和碳酸盐条件溶液进行染色处理。

氢酒精酸快速染色法是一种常用的快速染色方法,将细菌用甲基蓝染色液处理一段时间后,用酒精和酸性酒精进行洗涤和脱色,最后用伊红染色液着色。

这种方法可以快速地将细菌分为两种主要类型:革兰阳性细菌和革兰阴性细菌。

细菌标本片的制备及染色方法PPT精选文档

细菌标本片的制备及染色方法PPT精选文档
技能训练5 细菌标本片的制备及染色方法
1
实训目标
能利用不同的材料进行细菌标本片的制备 掌握常规的染色方法,并认识细菌的不同染色特性
2
仪器材料
酒精灯、接种环、载玻片、吸水纸、生理盐水、美 蓝染色液、革兰氏染色液、瑞氏染色液、染色缸、 染色架、洗瓶、显微镜、香柏油、乙醇乙醚、擦镜 纸、细菌培养物(大肠杆菌、葡萄球菌等)、细菌 病料、无菌镊子和剪刀、特种铅笔等
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(2)组织抹片的制作 待检尸体经无菌手术切开胸腹腔后,用经火焰灭菌的 镊子夹起组织,用灭菌剪刀剪下小块组织,将组织切 面在载玻片上等距离轻压几下,使其留有组织切面的 压迹。
11
(二)常用的细菌染色方法
1.美蓝染色法 2.革兰氏染色法 3.瑞氏染色法
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1.美蓝染色法
在已固定好的抹片 上,滴加适量美蓝染色 液覆盖涂面,染色2~ 3 min, 水 洗 , 吸 水 纸 轻压吸干或晾干和镜检, 结果菌体呈蓝色。
(2)卢戈氏碘液 碘1g、碘化钾2g、蒸馏水300ml。将碘化钾放入研钵 中,加入少量蒸馏水,使其溶解,再放入已磨散的碘片,徐徐加 水,同时充分磨匀,待碘片完全溶解后,把余下的蒸馏水倒入, 再装入瓶中。
(3)石炭酸复红稀释液 取碱性复红酒精饱和溶液(碱性复红10g溶于 95%酒精100ml中)1ml和5%石炭酸水溶液9ml混合,即为石炭酸 复红原液。再取原液10ml和90ml蒸馏水混合,即成石炭复红稀释 液。
14
3.瑞氏染色法
细菌抹片自然干燥后,滴加瑞氏染色液于涂片 上以固定标本,1~3min后,再滴加与染色液 等量的磷酸缓冲液或中性蒸馏水于玻片上,轻 轻摇晃使与染色液混和均匀,5min左右水洗, 干后镜检,结果菌体呈蓝色,组织细胞等物呈 其他颜色。

《细菌的革兰染色法》课件

《细菌的革兰染色法》课件
《细菌的革兰染色法》 PPT课件
通过本课件,我们将深入探索细菌的革兰染色法,包括该方法的概述、原理、 步骤和结果解读,以及其在医学和生物学领域的重要性和贡献。
革兰染色法的定义
革兰染色法是一种常用的细菌染色技术,用于将细菌分为革兰阳性菌和革兰 阴性菌两类,从而帮助确定细菌的形态特征和性质。
革兰染色法的历史和意义
革兰染色法的局限性和改进
适用性
革兰染色法对不同种类细菌的 适用性有限,对一些特殊菌株 无法发挥作用。
革兰阳性菌的染色
某些革兰阳性菌可能会出现未 染色或染色不明显的情况,增 加了结果解读的难度。
其他染色法和检测方 法
为了克服革兰染色法的局限性, 科学家们开发了其他染色法和 检测方法。
结语
重要性
革兰染色法作为一种常用技术, 对细菌学和医学领域做出了重要 贡献。
发展趋势和前景
对医学和生物学的贡献
随着科技的进步,革兰染色法将 继续发展并与其他检测方法结合, 提高细菌诊断的准确性和效率。
革兰染色法的研究和应用对细菌 病原体的诊断和治疗起到了至关 重要的作用。
3 环境监测
革兰染色法可用于监测水 和土壤中的细菌污染。
革兰染色的原理
革兰染色根据细菌细胞壁的结构差异进行分类,通过染色步骤的执行可区分出革兰阳性菌和革兰阴性菌。
革兰染色法的步骤
1
1. 用菌技术准备样品
收集细菌样品并进行培养和纯化。
2
2. 固定样品在载玻片上
将培养物涂抹在载玻片上,形成薄的细菌涂片。
历史
革兰染色法由丹麦细菌学家克里斯蒂安·格拉姆于1884年发现并提出。
意义
革兰染色法的应用广泛,对细菌分类和临床诊断起着重要作用。
贡献

实验 细菌的染色.ppt

实验 细菌的染色.ppt

复染色法:用两种或两种以上染色液进行 染色,有协助鉴别微生物的作用,故也称 鉴别染色法。常用的有:
革兰氏染色法、抗酸染色法、芽孢染色法、 荚膜染色法等。
2019-9-15
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革兰氏染色(Gram stain) 1984年,丹麦医生Gram采用革兰氏染色法细 菌细胞壁区分为两种类型:革兰氏阴性(G+) 和革兰氏阳性(G-)
2) 油镜使用完毕,切记按规定步骤擦干净, 否则可能损害镜头
3)擦油镜镜头方法:分三步 A)先用擦镜纸揩去 镜头上的香柏油 B)从双层瓶的下层沾少许二 甲苯滴在另一片擦镜纸上 ,擦拭镜头; C)再用 一小片擦镜纸擦去镜头上可能残留的二甲苯。
2019-9-15
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2、革兰氏染色
单染色法:只能观察微生物的大小、形状、 和细胞排列状况,但不能鉴别微生物以及 它的特殊构造等。
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思考题
简单染色:
(1) 你认为制备细菌染色标本时,尤其应该注意哪些环节? (2) 如果你的涂片未经热固定,将会出现什么问题?如果加热温度过高、
时间太长,又会怎样呢?
革兰氏染色: (1) 你认为哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性?其中最关键的环节
是什么? (2) 现有一株细菌宽度明显大于大肠杆茵的粗壮杆菌,请你鉴定其革兰
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2、干燥 室温自然干燥
操作步骤(continued)
3、固定
固定的目的: 1)使细胞质凝固,以固定细胞形态; 2)并使菌体牢固地附着在载玻片上。
固定方法: 热固定:涂面朝上,通过火焰数次 注意:温度不宜过高,以玻片背面不烫手为宜, 否则会改变甚至破坏细胞形态
2019-9-15
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细菌革兰氏染色PPT课件

细菌革兰氏染色PPT课件
细菌革兰氏染色ppt课件
目录
• 引言 • 革兰氏染色的基本原理 • 革兰氏染色的操作步骤 • 革兰氏染色的结果分析 • 革兰氏染色的应用和限制 • 结论
01 引言
目的和背景
目的
介绍革兰氏染色的原理、方法及应用,帮助学习者更好地了解和掌握这一基本 染色技术。
背景
革兰氏染色是细菌学中最经典、最常用的染色方法之一,通过对细菌的染色, 可以将其分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类,对于临床诊断和治疗具有 重要的指导意义。
结合其他技术
将革兰氏染色与其他技术如分子生 物学、免疫学等相结合,实现更精 确的细菌分类和鉴别。06Βιβλιοθήκη 结论总结革兰氏染色的重要性
临床诊断的关键工具
革兰氏染色是临床微生物实验室的基 本技术,用于快速识别细菌种类,对 准确诊断感染和选择合适的治疗方案 至关重要。
指导抗生素选择
科研的基础
在科研领域,革兰氏染色是研究细菌 种群结构、进化、生态和致病性的重 要手段。
染色
染色
用革兰氏染色液对固定后的涂片进行 染色,分别使用结晶紫、碘液和脱色 液进行初染、媒染和脱色处理。
染色注意事项
染色时应按照规定的步骤进行,避免 染色过度或不足,同时要确保染色液 的新鲜度和浓度适宜。
脱色
脱色
用脱色液对染色后的涂片进行脱色处理,以 去除菌体表面的结晶紫和碘液。
脱色注意事项
脱色时应控制脱色时间和脱色液的用量,避 免脱色过度或不足,影响染色效果。
革兰氏染色的工作原理
革兰氏染色利用了细菌细胞壁的成分 和结构对染料亲和性的差异,通过结 晶紫初染和碘液媒染后,由于细胞壁 组成成分对革兰氏染料的吸附能力不 同,酒精脱色时,细胞壁对染料的吸 附能力不同,从而导致被脱色的程度 不同,最终影响了复染后细菌的着色。

《细菌染色技术》课件

《细菌染色技术》课件
常用的脱色液有乙醇、丙酮等,脱色时间需要根据染色液和染色方法而定。
复染的目的是使染色后的细菌更加清晰可见,常用的复染液有稀释复红、稀释结晶 紫等。
干燥与镜检
干燥与镜检是细菌染色技术的最 后步骤,需要将染色完成的载玻 片干燥后进行显微镜检查,以便
观察染色效果和细菌形态。
干燥过程中需要注意避免过度加 热或干燥,以免影响染色效果。
01
02
03
04
简单染色法
利用单一染料对细菌进行染色 。
复染色法
利用两种或多种染料对细菌进 行染色,以便区分不同的细胞
结构。
荧光染色法
利用荧光染料对细菌进行染色 ,通过荧光显微镜观察。
特殊染色法
针对某些特殊性质或结构的细 菌,采用特殊的染色方法。
染色过程中的物理和化学变化
物理变化
染色过程中染料分子与细菌细胞 之间的相互作用,如吸附、渗透 等。
勤洗手
操作后应立即用肥皂和水彻底 清洗双手,确保个人卫生。
废弃物处理
使用过的培养物、染料和其他 废弃物应按照实验室规定进行
安全处理。
染色技术的优缺点和未来发展方向
优点
细菌染色技术是一种简单、快速、有效的细菌检测方法,能够直观地观察细菌的形态和结 构,有助于初步鉴定细菌种类。
缺点
染色技术需要人工操作,容易受到操作者主观因素的影响,且无法对细菌进行深入的分子 生物学鉴定。
《细菌染色技术》 ppt课件
REPORTING
目录
• 引言 • 细菌染色技术的基本原理 • 细菌染色技术的操作步骤 • 细菌染色技术的结果分析 • 细菌染色技术的注意事项和问题解决
PART 01
引言
REPORTING

《细菌的形态、染色》课件

《细菌的形态、染色》课件

杆菌
肠道杆菌
白喉杆菌
呈杆状,有鞭毛,无芽孢,革兰氏染 色阴性。
呈棒状,有鞭毛,无芽孢,革兰氏染 色阳性。
结核杆菌
呈杆状,有鞭毛,无芽孢,革兰氏染 色阳性。
螺形菌
钩端螺旋体
呈螺旋状卷曲,有鞭毛,无芽孢 ,革兰氏染色阴性。
梅毒螺旋体
呈螺旋状卷曲,无鞭毛,无芽孢 ,革兰氏染色阳性。
弧菌
• 霍乱弧菌:呈弧形或逗点状,有鞭毛,无芽孢,革兰氏染 色阴性。
察。
染色结果
发出荧光,便于观察细菌形态和 分布情况。
03 细菌染色技术的应用
在医学诊断中的应用
诊断感染性疾病
通过细菌染色技术,医生可以快速准确地诊断感染性疾病,如肺 炎、尿路感染等,为患者提供及时有效的治疗。
鉴别病原体种类
染色技术可以帮助医生鉴别病原体的种类,如细菌、病毒、真菌等 ,从而选择合适的药物进行治疗。
监测耐药性
染色技术还可以用于监测细菌的耐药性,帮助医生了解病菌对不同 抗生素的敏感性,制定合理的治疗方案。
在环境监测中的应用
1 2 3
检测水质污染
通过细菌染色技术,环境监测人员可以检测水体 中的细菌数量和种类,评估水质污染程度,为环 境保护提供科学依据。
监测空气污染
通过采集空气中的细菌样本,染色技术可以检测 空气中的细菌数量和种类,评估空气污染程度, 预防和控制空气污染。
自动化染色技术能够节省人力成本,提高工作效率,为实验室带来更高的效益。
新型染色技术的发展
随着科学技术的发展,新型染 色技术不断涌现,如荧光染色 、免疫染色和原位杂交染色等 。
新型染色技术具有更高的特异 性和灵敏度,能够更好地满足 临床和科研的需求。
新型染色技术能够提供更多的 信息,有助于深入了解细菌的 生物学特性和致病机制。

《细菌的单染色》课件

《细菌的单染色》课件

单染色技术的步骤
固定
使用固定剂将细胞或组织固定 在载玻片上,以防止染色过程 中细胞或组织脱落。
冲洗
使用适当的冲洗液将未结合的 染料冲洗掉,以获得清晰的染 色效果。
样品制备
将待染色的细胞或组织制备成 适合染色的涂片或切片。
染色
将染料与待染色的细胞或组织 混合,使其充分染色。
干燥
将染色后的样品干燥,以便在 显微镜下观察。
缺点
染色效果不稳定,有时会出现染色不均或染色过深过浅的情 况,影响观察效果。
单染色技术的发展趋势
自动化染色技术
随着自动化技术的发展,未来有 望实现自动化单染色,提高染色
效率和准确性。
多重染色技术
目前单染色技术只能显示一种颜 色,未来有望开发出多重染色技 术,实现多种颜色同时显示,提
高观察效果。
新型染色剂的开发
实验过程
观察步骤 1. 将染色后的载玻片放在显微镜下,调整焦距,观察细菌的染色情况。
2. 注意观察细菌的形态、大小、排列和染色深浅,记录实验结果。
实验结果分析
染色结果
美蓝或台酚兰染色后,细菌呈现深蓝色或浅蓝色,而背景呈现无色或淡黄色。
结果分析
通过观察染色后的细菌,可以初步判断细菌的种类和形态。例如,革兰氏阳性菌通常呈现紫色或深蓝色,而革兰 氏阴性菌则呈现淡蓝色或无色。此外,还可以观察到细菌的排列、形态和大小等特点,有助于进一步了解细菌的 生物学特性。
总结词
细菌的形态多样,结构简单,主要由细胞壁、细胞膜、细胞质和核区等部分组 成。
详细描述
细菌的形态主要有球状、杆状和螺旋状等,其结构主要由细胞壁、细胞膜、细 胞质和核区等组成,其中细胞壁是细菌特有的结构,对细菌具有保护和支持作 用。

细菌染色方法

细菌染色方法

细菌染色方法嘿,你问细菌染色方法呀?那咱就来好好聊聊。

这细菌染色可是个挺好玩的事儿呢,可以让咱看到平时看不到的小细菌。

先说说简单的革兰氏染色吧。

这就像给细菌穿衣服一样。

先把细菌涂在玻片上,用火烤一烤,让细菌固定在玻片上。

然后呢,倒上一种紫色的染料,让细菌泡在里面一会儿。

接着用水冲掉多余的染料。

再倒上一种碘液,让细菌再泡一会儿。

这时候细菌就变成紫色啦。

然后再倒上一种酒精,冲一冲。

如果细菌变成红色了,那就是革兰氏阴性菌;要是还是紫色,那就是革兰氏阳性菌。

还有芽孢染色。

这个有点复杂哦。

也是先把细菌涂在玻片上,固定好。

然后倒上一种叫孔雀绿的染料,加热让细菌染色。

染好后用水冲掉多余的染料。

再倒上一种番红染料,让细菌再泡一会儿。

这时候芽孢就会变成红色,而细菌的其他部分是红色或者粉红色。

另外呢,还有抗酸染色。

这个主要是用来染结核杆菌啥的。

也是把细菌涂在玻片上,固定好。

然后倒上一种叫石碳酸复红的染料,加热染色。

染好后用水冲掉多余的染料。

再倒上一种酸性酒精,冲一冲。

接着倒上一种亚甲蓝染料,让细菌再泡一会儿。

如果细菌变成红色了,那就是抗酸杆菌;要是蓝色,那就是非抗酸杆菌。

我给你讲个例子哈。

有一次,我们在实验室里做细菌染色。

大家都很好奇,不知道这些小细菌会变成啥样。

我们按照老师教的方法,一步一步地做。

有的同学染得很好,能清楚地看到细菌的形态和颜色。

有的同学就染得不太好,颜色不明显或者染错了。

不过大家都很开心,觉得这个实验很有趣。

通过这个实验,我们也更加了解细菌了。

所以啊,细菌染色方法有很多种,每种都有自己的特点。

大家可以根据需要选择合适的方法,来观察这些小小的细菌。

说不定会有很多惊喜哦。

细菌的染色方法

细菌的染色方法

细菌的染色方法细菌的染色方法主要有革兰氏染色,抗酸色法和特别染色法(包括英膜染色法,芽抱染色法,鞭毛染色法)1.革兰氏染色法:1)器材:金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,结晶紫染液,革兰氏碘液,0.4 %复红乙醇液,接种环,泗精灯,载玻片等。

2)方法:先制片,接着染色。

(1 )结晶紫染液染色1分钟,水冲洗;(2 )革兰氏碘液色1分钟;水冲洗;(3 ) 0.4 %复红乙醇液染色3秒钟,水冲洗,吸纸吸干后镜检。

2.抗酸染色法:1)器材:卡介苗与大肠杆菌和葡萄球菌的混合菌液,石炭酸复红,3 %的盐酸酒精,碱性美兰染液,接种环,酒精灯,载玻片等。

2)先制片一,接着染色。

(1 )石炭酸复红染液先沸水浴1 0分钟,滴加2 一3滴掩盖菌膜染色5分钟,水冲洗;(2 ) 3 %的盐酸酒精脱色3 0秒钟,水冲洗;(3 )碱性美兰复染3。

秒钟,水冲洗,吸水纸吸干后镜检.3.芽抱染色法:1)器材:破伤风杆菌厌氧培育物,5 %孔雀绿水溶液,0.5 %沙黄水溶液,载玻片,酒精灯等。

2)先制片,接着染色。

(1 )加孔雀绿染液2 — 3滴于小试管中,并使其与菌液混合匀称,然后将试竹放厂沸水浴的烧杯中,加热染色15分钟:(2 )涂片、固定:(3 )水冲洗,至到流出的水无绿色为止;(4)用0.5 %沙黄液复染2分钟,弃去多余的染液,吸水纸吸干镜检(此步骤不用水冲洗)。

4荚膜染色法:1)器材:肺炎球菌(小鼠腹腔液),石炭酸复红,9 5 %的乙醇,2 0 %鞅酸水溶液,0.8 %孔雀绿水溶液。

2)方法:(1 )石炭酸复红染色1分钟,水冲洗:(2)95 %乙醇短暂脱色(几秒钟为宜),水冲洗(3 ) 2 0 %糅酸溶液染色1 0分钟,水冲洗;(4 ) 0.8 %孔雀绿溶液染色1分钟,水冲洗,吸水纸吸干后镜检。

5.鞭毛染色法(镀银染色法)1)器材:变形杆菌新奇菌液,镀银染色法1液(糅酸5克,5 0%氯化铁2. 0ml, 1.5 %甲醛2. 0 ml, 1 %氢氧化钠1. 0 ml,蒸储水100 nd),糅银染色法2液(2 %硝酸银溶液,少量氨水)2)方法:(1 )糅银染色1液染色5分钟,水冲洗;(2 )糅银染色法2液染色1分钟,水冲洗,吸纸吸干后镜检。

微生物学实验细菌的简单染色和革兰氏染色(共7张PPT)

微生物学实验细菌的简单染色和革兰氏染色(共7张PPT)
微生物学实验细菌的简单染色和革兰氏染色
二、实验原理
1、细菌的简染色原理
①细菌菌体微小而透明,在普通光学显微镜下不易识别,必须通过染色来增加菌体的显示力, 从而更清楚地观察到其形态和结构。 ②在碱性、中性或弱酸性溶液中,细菌菌体通常带负电荷,而碱性染料在电离时,其分子的染 色局部带正电荷〔酸性染料的染色局部带负电荷〕,因此,碱性染料很容易与菌体结合而是菌 体着色。
2、细菌革兰氏染色的原理
G+菌和G-菌的细胞壁结构和组成有较大的区别。 G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高,类脂质含量少,经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小, 通透性降低,结晶紫-碘复合物被滞留在细胞内,因此细菌仍保存初染时的颜色,经番红复染后呈蓝紫 色。 G-菌细胞壁的外膜层富含类脂,而且其肽聚糖层次薄、交联度低;乙醇脱色时,细胞壁因类脂被 溶解而出现较大缝隙,使得菌体内的结晶紫-碘复合物较易渗出,而使菌体变成无色,再经番红 复染就成为红色。
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分枝杆菌属的细菌(包括结核分枝杆菌、 麻风分枝杆菌等)为抗酸性细菌,一般染 色法不易着色,须用抗酸染色法。
注意事项
涂片要略厚
加温染色或延长染色时间,加温时随时补加 染Hale Waihona Puke 液分枝杆菌呈红色(+)
其他细菌和背景为蓝色(-)。
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操作过程
取痰液→ 涂片(略厚)→干燥→固定 →
石炭酸复红加温染色8~10分钟后→
常用的细菌染色方法
革兰染色 抗酸染色 细菌基本形态结构观察
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细菌染色意义
由于细菌个体微小,基本上无色透明, 故将其用适当染料染色观察,方能显示 它的形态、大小、构造及染色特性等, 在细菌鉴别上有重要意义。 革兰染色是细菌学中使用最广泛的一种 染色方法,籍此染色法,可将所有细菌 区分为两大类。
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细菌染色方法及原理
常采用美蓝,结晶紫等碱性染料进行染色。 多数染料都是中性有机盐。据着色基的不同 可分为以下类型:
碱性染料(basic dye)—带正电染料。其阳离子 部分为发色基团,可与细胞中带负电的组分结合。 酸性染料(Acid dye)—带负电染料。其阴离子 部分为发色基团,可与细胞中带正电的组分结合。
基本形态
球菌 杆菌 弧菌
葡萄球菌
链球菌
革兰阳性
肺炎球菌
脑膜炎球菌 革兰阴性
特殊结构
芽孢 枯草杆菌,破伤风梭菌
荚膜 肺炎球菌
鞭毛 变形杆菌
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肺炎(双)球菌 荚膜
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染色步骤
(1)
(2)
结晶紫初染
(3)
1分钟水洗
卢戈碘液媒染
1分钟水洗
95%乙醇脱色
30秒水洗
(4)
复红复染
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9
30秒水洗吸干
结晶紫初染1分钟
水洗
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碘液媒染 1分钟
水洗
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12
酒精脱色 30秒
水洗
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13
复红复染 30秒
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水洗
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滤纸吸干 油镜镜检
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抗酸染色法(acid-fast stain)
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6
固定的目的和方法
使细菌的细胞凝固,使菌体与玻片粘得 更牢固 可改变菌体对染料的通透性 加热固定可杀死细菌,比较安全 固定的方法将制成的标本匀速通过火焰 三次
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革兰染色
染色:
初染(结晶紫) 媒染 (碘液) 脱色(酒精) 复染(复红)
滤纸吸干 油镜镜检
Crystal violet safranin
用3%的盐酸酒精脱色约1~2分钟,
脱色时轻摇玻片,直到涂片颜色脱去为 止
水洗后,用碱性美蓝复染1分钟→水洗,
印干 → 镜检
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结核分枝杆菌(M.tuberculosis)
形态:
细长,略弯曲的杆菌,多聚集成团。无鞭毛,芽胞。
染色性:
不易着色,抗酸染色阳性。菌体呈红色,背景中其他物质 蓝色。
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细菌基本形态结构观察
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革兰染色原理
细菌的等电点较低,约在pH 2~5之间, 故在中性、碱性或弱碱性溶液中,菌体 蛋白质电离后带负电荷,易与带正电荷 的碱性染料如龙胆紫及碱性复红等结合, 使细菌被染成紫色或红色。
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5
一、细菌染色标本片的制备
细菌染色检查,首先要进行细菌标本制 备。制备细菌标本一般包括涂片、干燥、 固定三步。
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