植物组织石蜡切片的制备与染色观察
石蜡切片免疫组化染色步骤
石蜡切片免疫组化染色步骤石蜡切片免疫组化染色是一种常用的实验技术，用于研究组织、细胞和分子的结构与功能。
它通过使用抗体与特定抗原相互结合，然后使用酶、免疫荧光等标记物来检测这种结合，从而实现可视化染色和定位目标分子的目的。
下面，我们将详细介绍石蜡切片免疫组化染色的步骤。
步骤一：蜡块去蜡石蜡切片通常是由固定的组织样本制备而成，这些样本在处理过程中会被包埋在石蜡中。
因此，第一步是将蜡块去蜡。
首先，将蜡块放在温水中加热，使蜡块软化。
然后，将蜡块用刮刀从玻片上刮下。
这样可以得到蜡块去蜡后的组织样本。
步骤二：样本再固定在蜡块去蜡后，为了更好地保持组织的完整性和稳定性，通常需要对样本进行再固定。
常用的再固定方法是将样本放入4%的中性缓冲福尔马林溶液中，在室温下固定4-24小时。
固定后，将样本从福尔马林中取出，用PBS（磷酸缓冲盐溶液）洗涤数次，以去除残余的福尔马林。
步骤三：切片制备在样本再固定后，需要将样本制备成切片。
首先，将组织样本放入甲醇中脱水，然后转移到乙醚中脱脂。
脱脂后，将样本放入苯骚酸乙酯中浸泡，使样本渗透均匀。
在苯骚酸乙酯中浸泡一段时间后，将样本转移到石蜡中浸泡。
石蜡具有很好的切片性能，可以更好地保持组织的结构。
最后，将样本放入石蜡包埋机中，进行加热和固化，制备成为石蜡块。
之后，使用旋转切片机将石蜡块切成4-6微米厚的切片。
切片后，将切片浸泡在热水中，使其展开并粘附在玻片上。
步骤四：抗原修复切片制备完毕后，需要对切片进行抗原修复。
抗原修复是为了使样本中的抗原能够更好地暴露出来，增加抗体的结合效率。
常用的抗原修复方法有热处理和化学处理两种。
热处理通常是将切片浸泡在含有缓冲盐的蒸馏水中，然后加热至高温（如95摄氏度）保持一定时间。
化学处理通常是将切片浸泡在含有抗原修复试剂的溶液中，如EDTA（乙二胺四乙酸二钠）溶液。
抗原修复的时间和条件需根据具体实验的要求来确定。
步骤五：非特异性结合阻断为了减少非特异性结合，需要对切片进行非特异性结合阻断。
植物切片相关实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解植物切片的制作过程及注意事项。
2. 掌握植物组织切片技术在植物学研究中的应用。
3. 通过观察植物切片，了解植物组织的结构特征。
二、实验原理植物切片技术是一种重要的植物学研究方法，通过将植物组织制成薄片，便于在显微镜下观察其结构特征。
本实验采用石蜡切片法，将植物组织固定、脱水、透明、包埋、切片、染色，最后进行封片。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：洋葱鳞片叶、马铃薯块茎、胡萝卜根等。
2. 仪器设备：切片机、显微镜、显微镜载物台、显微镜镜头、载玻片、盖玻片、酒精灯、酒精、二甲苯、甲醛、石蜡、刀片、剪刀、镊子、滴管、烧杯、滤纸等。
四、实验步骤1. 固定：将植物材料放入装有甲醛的烧杯中，浸泡24小时。
2. 脱水：将固定后的植物材料依次放入50%、70%、90%、95%、无水酒精中，每级酒精浸泡30分钟。
3. 透明：将植物材料放入二甲苯中，室温下浸泡，使组织透明。
4. 包埋：将透明后的植物材料放入熔化的石蜡中，使其成为石蜡块。
5. 切片：将石蜡块放入切片机中，切取5-10微米的薄片。
6. 染色：将切片放入染液中，如苏木精-伊红染色液，室温下染色30分钟。
7. 水洗：将染色后的切片用蒸馏水冲洗，去除多余的染液。
8. 封片：将冲洗后的切片用中性树胶封片，制成植物切片。
五、实验结果与分析1. 洋葱鳞片叶切片观察：- 表皮细胞：细胞呈长方形，排列紧密，细胞壁较厚，细胞核较大，染色较深。
- 保卫细胞：位于表皮层，呈肾形，细胞壁较薄，细胞核较小。
- 保卫细胞间隙：保卫细胞之间形成的空隙，有利于气体交换。
- 气孔：保卫细胞之间形成的开口，是气体交换的主要通道。
2. 马铃薯块茎切片观察：- 表皮细胞：细胞呈多边形，排列紧密，细胞壁较厚，细胞核较大。
- 薄壁组织：位于表皮下方，细胞较大，细胞壁较薄，含有丰富的营养物质。
- 维管束：由韧皮部和木质部组成，负责水分和养分的运输。
3. 胡萝卜根切片观察：- 表皮细胞：细胞呈长方形，排列紧密，细胞壁较厚，细胞核较大。
植物组织切片制作以及注意事项
植物组织石蜡切片的制作以及注意事项1 植物组织石蜡切片的制作方法⑴固定：用50%或70% FAA固定液（50%或70%酒精：甲醛：冰乙酸=16:1:1; 幼嫩材料用50 % FAA；老的材料用70%的FAA），置于4℃固定24 h。
⑵脱水：将固定液倒去，加入50%乙醇，室温静置30 min；重复一次，室温静置20 min。
换成1%番红O溶液(用70%酒精配制)，室温脱水染色过夜。
次日继续脱水，酒精浓度梯度和时间依次为：80% 乙醇1h、95% 乙醇1h、无水乙醇1h、40min（2次）。
⑶透明：1/2无水乙醇+二甲苯混合液1h，纯二甲苯1h、40 min（2次）。
最后加入少量二甲苯（浸没材料即可）和碎蜡，放入38℃温箱中过夜。
⑷浸蜡：将温箱温度调至56℃，计时1h；换成二级蜡1h；三级蜡（3次）各1h、1h、40min（从温度上升到56℃开始计时）。
⑸包埋：将带有材料的液体蜡倒入叠好的纸槽中，迅速放入冰水中使蜡凝固，防止气泡产生，以及凝蜡不匀。
⑹切片：修整蜡块，用Lica RM2126切片机切片，厚度5-10 μm。
⑺贴片: 在载玻片上涂少许粘片剂，将切好的蜡带放入温水中，捞至载玻片上，最后置于37℃恒温箱过夜烤片。
⑻脱蜡及染色：①番红-固绿对染ⅰ脱蜡：二甲苯60min，二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5 min、无水乙醇5 min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、1%番红室温过夜。
ⅱ染色：80%乙醇5 min，1%固绿（用95%酒精配制）迅速蘸一下，大约10s，直接放到95%乙醇5min 、无水乙醇5min、无水乙醇5min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5min、二甲苯5 min（2次）。
②甲苯胺蓝染色ⅰ脱蜡：二甲苯60 min、二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5 min、无水乙醇5 min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、70%乙醇5 min、50%乙醇5 min 、30%乙醇5 min、蒸馏水5 min。
植物组织机构石蜡切片的制备与染色观察
植物组织石蜡切片的制备与染色观察一．实验器具与试剂1.器具小培养皿、锡箔纸、尖头和平头镊子、剪刀、刀片、吸水纸、移液枪、1枪头、移液器和移液管、量筒（50，100，250，500）、废液瓶、水浴锅、酒精灯、三角瓶、真空锅、烘片箱、木筷、石蜡切片机、染色缸、载玻片、盖玻片、显微镜等2.试剂100%酒精、100%二甲苯、100%叔丁醇、石蜡块、蒸馏水、多聚甲醛、中性树胶、甲苯胺蓝（）染色剂等二. 实验步骤1.溶液配制10×溶液：（国药或生工）75.95g24.12H2O（国药）25.07g24.2H2O （国药） 4.68g充分溶解后，用（国药）调7.0，定容1000，高压灭菌25，4℃保存。
4%多聚甲醛固定液：1×1001 0.5水浴加热至60-70℃，在通风橱中加入4g多聚甲醛，待溶解后冷却至4℃，加入100µl的10%的浓硫酸调节为7.0。
2.材料准备⑴固定取幼嫩的植物材料，将植物组织剪成合适大小的小块，立即放入一个装有新配制的4%多聚甲醛固定液的小器皿中，固定液体积视材料多少而定，一般材料少时10材料较多时可放15，小器皿置于冰上。
上面用锡箔纸盖好后扎孔。
抽真空使得材料浸没其中（反复真空和非真空状态，并保固定液不要沸腾），待材料下沉到管底。
具体操作如下：①放置在冰上的器皿放入真空锅里，盖上锅盖，拧开盖上螺旋，拧紧侧面螺旋，打开开关当压力表上显示到0.2时可计时10分钟。
②关上锅盖螺旋，拧松侧面螺旋，外面空气会进入真空锅内，当内外压力相等时计时10分钟。
③再重复步骤①，换一次新的固定液，4℃过夜固定，但不要超过16h。
(2)漂洗用1×缓冲液（7.0）漂洗组织块2次，每次4℃放置30。
注意容易结晶可75℃水浴加热。
(3) 脱水在翻转下进行梯度乙醇和叔丁醇脱水：30%、40%、50%、60%、70%乙醇（此步可保存可过夜）、10%叔丁醇+20%水+70%乙醇、20%叔丁醇+10%水+70%乙醇、30%叔丁醇+70%乙醇、50%叔丁醇+50乙醇、70%叔丁醇+30%乙醇、90%叔丁醇+10%乙醇、100%叔丁醇（2次），30次。
植物石蜡切片法显微制片技术
取材
用锋利的刀片切取新鲜的植物材料，选定适宜的材料，立即固定。 取材的注意事项如下： （1）取材料要新鲜。动作要迅速，以免挤压损坏组织；取病理材料时，应设置
对照材料。 （2）所取材料大小要适当：根和茎一般直径≤5mm，切取成5-10mm小段；叶
片一般取过中脉处，切成2-5mm宽、5-8mm长。在切材料时，必须注意 刀片与中轴成直角，两切面平行，否则制成的切片细胞是斜的。 雌、雄 蕊一般不需分割。 （3）取材时间可根据切片要求有所区别。如：在进行植物发育的研究过程时， 需要找到细胞分裂相，一般在晴天的早晨9：00-10：00时取材，此时植 物细胞分裂活动较明显。 （4）取材不易过老，否则制片有难度（过老的材料须在滑走切片机上进行）； 对纵切的材料适当多取材，如根尖、茎尖等，因为切到材料正中的概率 较低。
（五）脱水
• 材料经洗涤后含有部分水分，会使材料分 解。而且透明剂与水是不相混合的，不利 于材料的透明和包埋等后期处理。因此需 用脱水剂逐渐除去材料中的水分，以便让 石蜡渗透进细胞。所以，脱水是制片的关 键环节。脱水剂要求能与水混合，而且能 与其他有机溶剂互相替代。
• 脱水必须在有盖的玻璃器皿中进行，防止 吸收空气中的水分；在更换高一级的脱水 剂时，最好不要移动材料，以免损坏材料。
• 浸蜡是一个渐进的过程，常用的正丁醇。
• 每次浸蜡的时间，视材料大小而调节。
（八）包埋
• 材料经过足够时间的浸蜡后，需包入蜡 块，以备切片。
• 操作方法：根据切片材料大小，确定所 需纸盒的尺寸，用表面光滑的磅纸预先 叠好纸盒。
（九）切片
• 即（二）固定
• 将已切好的材料尽快地浸入相当于材料10-15倍体积的固 定液中。借助固定液的作用，使细胞的新陈代谢瞬时停止， 并保持细胞或组织的形态构造及其内含物的状态不发生变 化。从而达到使组织变硬从而便于切片、增强内含物的折 光度、令细胞易于着色的目的，同时具有防腐作用。以新 鲜配制固定液效果较好。固定的时间依材料的种类、性质、 大小等而定。材料固定完毕，保存于加盖的容器内，贴上 标签。
石蜡的切片实验报告
一、实验目的1. 熟悉石蜡切片的制作过程。
2. 掌握石蜡切片的染色技术。
3. 了解石蜡切片在组织学研究和病理诊断中的应用。
二、实验原理石蜡切片技术是一种常用的组织学制片方法，其原理是将组织标本进行脱水、浸渍、浸蜡等处理，使其在石蜡中充分浸渍，然后用微型切片机将其切成薄片，最终制成组织学切片。
石蜡切片具有切片厚薄均匀、染色效果好、保存时间长等优点，是组织学研究和病理诊断的重要工具。
三、实验材料1. 实验动物：小白鼠2. 实验器材：石蜡切片机、显微镜、载玻片、盖玻片、染色缸、酒精灯、剪刀、镊子等3. 实验试剂：卡诺氏固定液、FAA固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、埃利希苏木精染液、1%伊红酒精溶液、1%盐酸酒精溶液等四、实验步骤1. 取材：取小白鼠肝脏组织，用剪刀剪成小块。
2. 固定：将剪好的组织块放入卡诺氏固定液中固定24小时。
3. 脱水：将固定好的组织块依次放入70%、80%、90%、95%、100%酒精溶液中，每级酒精溶液浸泡1小时，使组织逐渐脱水。
4. 透明：将脱水的组织块依次放入三个二甲苯溶液中，每缸浸泡1小时，使组织逐渐透明。
5. 浸蜡：将透明的组织块依次放入三个石蜡溶液中，每缸浸泡1小时，使组织完全浸渍在石蜡中。
6. 包埋：将浸好蜡的组织块放入熔蜡中，待石蜡凝固后取出，用剪刀修整蜡块。
7. 切片：将修整好的蜡块固定在石蜡切片机上，调整切片厚度为4微米，制成石蜡切片。
8. 展片：将切好的石蜡切片展平在载玻片上。
9. 脱蜡：将展平的石蜡切片依次放入二甲苯、无水乙醇中，使切片脱蜡。
10. 染色：将脱蜡后的切片放入苏木精染液中染色5-10分钟，然后放入1%盐酸酒精溶液中分化，最后放入伊红染液中复染30秒。
11. 封片：将染好的切片放入封片液中封片。
五、实验结果制作完成的石蜡切片在显微镜下观察，可见到肝脏组织的细胞结构，如细胞核、细胞质、血管等。
六、实验讨论1. 石蜡切片技术是组织学研究和病理诊断的重要工具，具有切片厚薄均匀、染色效果好、保存时间长等优点。
石蜡切片实验报告
石蜡切片实验报告一、实验目的本次实验旨在研究石蜡切片的制备方法及其在显微镜下的观察。
二、实验原理石蜡是一种固体烷基烃化合物，常用于组织学中的切片制备。
在制备石蜡切片时，需将所需组织样本固定于载玻片上，并使用石蜡作为嵌塑剂进行与样本的包埋。
待到石蜡固化后，便可使用石蜡切片机或手动微调器进行切片。
切片后，可对切片进行染色及显微镜观察。
三、实验步骤1、取一张干净的载玻片，涂上少量的胶水并晾干。
2、取所需组织样本进行处理。
如为植物组织，可直接在生长期较长的表皮或叶片上进行取样；如为动物组织，可通过手术操作或解剖等方法获取所需组织。
取出组织样本后，清洗干净并切成合适大小。
3、将固定好的组织样本倒入石蜡中，将组织样本包埋于石蜡内。
4、等待石蜡凝固，调整切片机或手动微调器，进行切片。
5、将石蜡切片玻片用甲苯或二甲苯进行脱蜡。
6、选择所需颜色及染料进行染色。
7、将染色后的玻片用苏木精固定，晾干后进行显微镜观察和取像。
四、实验结果通过本次实验，成功制备出石蜡切片，并选择了适合的颜色进行染色。
显微镜观察后，能够清楚地看到组织细胞、细胞核等结构，对于组织学研究具有很大的帮助。
五、实验结论本次石蜡切片实验证明了石蜡作为组织学研究中的嵌塑剂是非常重要的。
选择合适的嵌塑剂与染料，在切片之后可以得到良好的显微镜照片，有助于对细胞和组织的进一步分析和研究。
总之，石蜡切片制备是组织学研究的一个重要方法，这个实验的成功进行，不仅让我们深入理解了组织切片的制备过程，也提高了我们对组织细胞结构的深入认识。
植物组织石蜡切片的制作
• (1) 明胶液：这是粘片最常用的胶液，简便优良，配法 是100毫升纯水中，加明胶4毫克，加热熔化，过滤即 得。
• (2) 梅氏蛋白质： • 鸡蛋清 50ml • 甘 油 50m1 • 水杨酸纳 1g • 用蛋白与甘油搅拌，同时加入水杨酸纳，调匀过滤，
应用时以滤液15滴，放入纯水50毫升中即得。 • (3) Land氏液： • 阿拉伯胶 1克 • 重铬酸钾 0.2克 • 纯 水 100毫升
酒精、50%酒精、70%酒精、83%酒精、95%酒 精、100%酒精、二甲苯、中性树胶、2% 氨水、 爱氏苏木精染液。 • 3．实验器具：解剖器，双面刀片，青霉素小 瓶。
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• 四、实验步骤：
• 1．取材：依据生物组织取材的各项注意 事项。
• 2．固定：卡诺固定液、FAA固定液固定 24小时。
• 3．复水：卡诺固定液（1h）→50%酒精 （1h）→爱氏苏木精染液
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• 4．包埋：先提升恒温箱的温度至60℃， 换纯蜡3次，每次1-2h，用硬的电光纸、 牛皮纸叠纸盒，置于45-60℃的烫板上， 倒入材料，摆放好材料，把标签（正面 向外置于底部），补足石蜡，倒好后轻 轻的置于冷水盆中，注意底面要接触盆 中凉水，待石蜡全部凝固后可取出晾干， 也可在凉水盆中放置过夜。
• ⑨切下的蜡片是否良好，此时应先行检 查。
• ⑩切片工作结束后，仍将刀片用具擦拭 干净。
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• 3．贴片：贴附牢固，在染色时不易脱落； 是皱褶的蜡片伸展平整。
• 用具：载玻片、粘片剂、解剖刀、蒸馏 水、展片机及铐片机。
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• 材料切成薄片后，须将切片粘在玻璃片上，加 热展开，这叫粘片。
• 所用载玻片必须清洁才能使用。粘片时，需把 胶液(或称粘贴剂)置簿玻片上，再取切片，浮 置胶液上，然后置烘片台上，使切片展开烫平， 材料不现皱纹为度。最后将切片依次排好，用 滤纸吸去多余水分，同时以记号笔在玻片上编 号，放入温箱中烘干，温度30～40℃约1小时 即干。常用的胶液有下列三种：
实验时间石蜡切片及染色过程
实验时间石蜡切片及染色过程
石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。
苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片最常用的染色方法。
这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。
经过HE染色，细胞核被苏木素染成蓝紫色，细胞质被伊红染色呈粉红色。
实验步骤及注意事项
一、石蜡切片
1. 取材: 刀片要求锋利而薄,组织厚度约2—3mm, 大小1.5×1.5×0.2～0.3cm 为宜. 取材时间越快越好.
2. 固定: 组织取下后应立即放入 10%福尔马林(相当于 4%甲醛)固定.
注意：
(1) 固定液量应为组织块体积的 40 倍.
(2) 固定时间固定时间与使用的固定液种类和组织块大小, 温度等
有关. 一般为 3—24h.
(3) 固定温度大多可在室温固定, 在低温(4℃)时间应延长.
(4) 固定容器应大些.
3. 漂洗: 流水冲洗 2—10h.。
石蜡切片实验报告
石蜡切片实验报告石蜡切片是一种常用的组织学实验技术，已经被广泛应用于医学、生物学等领域。
本实验报告将详细介绍石蜡切片实验的步骤、原理以及实验中可能遇到的问题和解决方案。
第一部分：实验步骤石蜡切片实验的步骤主要包括标本制备、石蜡浸渍、切片和染色几个关键环节。
首先，我们需要收集适当的组织标本，如动物器官或植物组织。
这些标本需要经过固定处理，通常使用福尔马林进行固定，然后进行脱水和透明化处理，最终被浸渍进入石蜡中。
在石蜡浸渍的过程中，我们需要将标本逐渐浸入温度逐渐升高的石蜡中，以使其充分浸渍并软化。
这个过程中需要注意温度的控制，同时还要避免气泡的产生。
一旦标本被完全浸渍在石蜡中，我们可以使用石蜡切片机进行切片。
在切片过程中，我们需要调整切片机的切片厚度，通常为4-6微米。
此外，为了得到较好的切片质量，我们还需要确保刀片的锋利度和切片机的切片速度适当。
切片完成后，我们需要将切片置于载玻片上，并进行染色处理。
染色可以提高组织的对比度，使细胞和组织结构更加清晰可见。
常用的染色方法包括血液学染色、核染色和生物标记染色等。
第二部分：实验原理石蜡切片实验的原理是基于石蜡的高渗透性和易于切割的特点。
通过浸渍和固化过程，标本会充分浸泡在石蜡中，使其变得坚硬而易于切割。
切片机通过旋转刀片来切割标本，形成薄而均匀的切片。
石蜡切片实验的目的是为了观察和研究细胞和组织的结构。
通过切片和染色，我们可以清晰地看到细胞的形态、组织的排列以及细胞内的细胞器结构。
这对于研究疾病的发生机制、药物治疗的效果评估以及生物学基础研究等方面都具有重要意义。
第三部分：实验问题与解决方案在石蜡切片实验中，可能会遇到一些常见的问题，如切片不均匀、切片断裂或组织变形等。
这些问题可能会影响实验的结果和观察效果。
为了解决这些问题，我们可以在实验过程中采取一些措施。
首先，在标本制备过程中，我们可以控制好固定时间，避免过长或过短的固定时间导致的组织变形。
其次，在切片机操作过程中，我们需要确保刀片的锋利度和切片机的切片速度适当，以避免切片不均匀或切片断裂的问题。
山西中学组织学石蜡切片制作过程
山西中学组织学石蜡切片制作过程山西中学组织学石蜡切片制作过程石蜡切片制作是生物学实验中常用的技术手段之一，它可以将生物样品制作成薄片，以便进行显微镜观察和研究。
下面将详细介绍山西中学组织学石蜡切片的制作过程。
一、收集和处理样品1. 样品的选择：在进行石蜡切片制作之前，首先需要选择合适的组织样品。
山西中学通常会选择动植物的组织器官，如根、茎、叶、肌肉等。
2. 样品的固定：在采集到样品后，需要对其进行固定处理，以保持其原有的形态结构和细胞组织。
常用的固定剂有福尔马林、乙醛等。
3. 样品的脱水：固定后的样品需要将其中的水分逐渐去除，以便后续的浸渍和包埋。
脱水过程通常采用乙醇梯度浓度法，逐渐提高乙醇浓度，如70%、80%、90%和100%。
4. 样品的浸渍：脱水后的样品需要进行浸渍处理，以使其充分吸收石蜡。
浸渍一般采用二氯甲烷和石蜡的混合物，常用比例为1:1。
二、制作石蜡块1. 准备模具：将石蜡切片制作时需要的模具准备好，一般为方形或圆形的塑料模具。
2. 熔化石蜡：将石蜡块放入石蜡熔化器中，加热至石蜡完全熔化。
3. 倒入模具：将熔化的石蜡倒入模具中，待石蜡凝固成块后取出。
三、制作切片1. 切片机的准备：将石蜡块固定在切片机的切片台上，并调整切片机的切片厚度。
2. 切片：将切片刀沿着石蜡块的平面切割，得到薄片。
3. 转移切片：用切片刀将切下的薄片转移到水中，静置片刻，使其展开。
四、薄片处理1. 涂片：将展开的切片用刷子轻轻涂上一层胶水，以固定切片。
2. 干燥：将涂上胶水的切片放置在通风处自然晾干，使胶水完全干燥。
3. 上浆：将干燥的切片放入浆液中，使其充分吸收浆液。
4. 固化：将上浆后的切片放置在烘箱中加热，使浆液固化。
五、染色和封片1. 染色：将固化后的切片放入染色液中浸泡，使其染色。
2. 清洗：将染色后的切片用水冲洗，去除多余染色剂。
3. 脱水：将清洗后的切片依次放入乙醇梯度浓度的溶液中，使其脱水。
4. 封片：将脱水后的切片放入透明胶片中，再用热源加热胶片，使其封住切片。
石蜡切片的相关介绍
石蜡切片的相关介绍石蜡切片是一种常用的组织学研究技术，可以将生物样品切成极薄的切片，便于显微镜观察。
本文将介绍石蜡切片的原理、方法和应用。
原理石蜡切片的制作原理是将生物样品固定在石蜡中进行包埋，形成石蜡组织块，然后用微型切片机将石蜡组织块切成极薄的切片，并将切片染色，以便观察。
方法标本制备1.样品采集：根据需要采集样品，可以是动物组织、植物组织或其他生物体的某一部分，根据不同采集要求决定。
2.固定样品：将采集的样品放入一定体积的固定液中固定，常用的固定液包括福尔马林、戊二醛等。
3.脱水：将固定后的样品放入一定体积的酒精容器中进行脱水处理，分别使用不同浓度的酒精依次脱水。
4.渗透：将脱水后的样品放入一定体积的作用剂中进行渗透处理，作用剂包括丙烯酰胺、丙烯酰酸等。
5.包埋：将渗透后的样品放入一定体积的石蜡容器中进行包埋处理。
切片1.切片机设置：将切片机的温度、刀片、厚度等参数进行设置。
2.切片：将包埋好的样品放入切片机中进行切片，切片厚度一般为2~10微米。
3.切片传递：将切片沉淀在蒸馏水中，使用玻璃刀将切片转移到载玻片上去。
4.切片染色：使用不同染色剂（如血红蛋白染色剂、伊红染色剂等）对切片进行染色，便于观察。
应用石蜡切片是常用的组织学实验技术，广泛应用于医学领域和基础研究中，主要应用于以下几个方面：1.病理学诊断：通过切片对肿瘤、疾病等样本进行组织学分析，帮助医生判断疾病的类型和程度。
2.细胞学研究：通过切片对不同类型的细胞进行观察和分析，了解细胞结构和功能。
3.生物学研究：通过切片对生物体的不同部位进行观察和分析，了解生物组织和器官的结构和功能。
总之，石蜡切片是一项非常重要的生物组织学实验技术，为医学研究和诊断提供重要的手段。
石蜡切片的原理
石蜡切片的原理
石蜡切片是组织学中常用的一种制备技术，用于观察和研究生物组织的微观结构。
其原理可以分为以下几个步骤：
1. 组织采集：首先，需要将待观察的生物组织（例如动物、植物的器官或细胞等）进行采集和收集。
采集可以通过活体取材或者组织固定的方式进行。
2. 组织固定：为了保持组织的形态和结构不受损失，采集到的生物组织需要进行固定处理。
常用的固定方法包括用福尔马林（formalin）进行固定、液氮冷冻等。
3. 组织处理：固定后的生物组织需要进行一系列的处理步骤，以便使其能够被切割成薄片。
处理步骤包括去水化、透明化和浸渍。
4. 包埋：将处理后的组织用石蜡进行包埋，即将其浸入熔化的石蜡中。
石蜡可以提供支持和保护组织的结构，使得组织在切割过程中不会受损。
5. 切片：经过包埋的生物组织在石蜡硬化后，需要使用显微切片机进行切割。
切片机能够将包埋的生物组织切割成极薄的切片，常见的厚度约为4-6微米。
6. 染色：切片完成后，需要进行染色以增强对组织结构的观察。
常用的染色方法包括常规染色（如血液染色）和免疫组织化学染色等。
7. 观察和分析：最后，将染色后的切片放置在显微镜下观察，并使用显微镜和其他相关设备进行分析和研究。
通过石蜡切片技术，可以观察和研究生物组织的细胞结构、组织类型、细胞分化、病理变化等重要信息，对于医学诊断、疾病研究和药物开发等领域具有重要意义。
植物组织切片制作以及注意事项(精)
植物组织石蜡切片的制作以及注意事项1 植物组织石蜡切片的制作方法⑴固定:用50%或70% FAA固定液(50%或70%酒精:甲醛:冰乙酸=16:1:1; 幼嫩材料用50 % FAA;老的材料用70%的FAA,置于4℃固定24 h。
⑵脱水:将固定液倒去,加入50%乙醇,室温静置30 min;重复一次,室温静置20 min。
换成1%番红O溶液(用70%酒精配制,室温脱水染色过夜。
次日继续脱水,酒精浓度梯度和时间依次为:80% 乙醇1h、95% 乙醇1h、无水乙醇1h、40min(2次。
⑶透明:1/2无水乙醇+二甲苯混合液1h,纯二甲苯1h、40 min(2次。
最后加入少量二甲苯(浸没材料即可和碎蜡,放入38℃温箱中过夜。
⑷浸蜡:将温箱温度调至56℃,计时1h;换成二级蜡1h;三级蜡(3次各1h、1h、40min(从温度上升到56℃开始计时。
⑸包埋:将带有材料的液体蜡倒入叠好的纸槽中,迅速放入冰水中使蜡凝固,防止气泡产生,以及凝蜡不匀。
⑹切片:修整蜡块,用Lica RM2126切片机切片,厚度5-10 μm。
⑺贴片: 在载玻片上涂少许粘片剂,将切好的蜡带放入温水中,捞至载玻片上,最后置于37℃恒温箱过夜烤片。
⑻脱蜡及染色:①番红-固绿对染ⅰ脱蜡:二甲苯60min,二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5 min、无水乙醇5 min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、1%番红室温过夜。
ⅱ染色:80%乙醇5 min,1%固绿(用95%酒精配制迅速蘸一下,大约10s,直接放到95%乙醇5min 、无水乙醇5min、无水乙醇5min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5min、二甲苯5 min(2次。
②甲苯胺蓝染色ⅰ脱蜡:二甲苯60 min、二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5 min、无水乙醇5 min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、70%乙醇5 min、50%乙醇5 min 、30%乙醇5 min、蒸馏水5 min。
石蜡切片的制作及染色
石蜡切片的制作步骤（1）修块：剖检时摘取的睾丸和附睾组织样品在2.5%戊二醛-多聚甲醛混合固定液中固定24~48h后，用清水或低浓度的酒精将组织上的固定液清洗掉，用刀片将其修成3~5mm 厚，置于包埋框中。
（2）脱水、透明：将含有组织块的包埋框经梯度浓度逐升的酒精溶液（50%酒精→70%酒精→80%酒精→90%酒精→95%酒精）中进行脱水1h，然后顺次转入无水乙醇I、无水乙醇II和酒精二甲苯混合液中放置30min，再次分别置入二甲苯I和二甲苯II中进行透明5-10min左右。
（3）浸蜡、包埋：组织块充分透明后，将包埋框依次经过3中不同熔点的石蜡液（56~58℃石蜡I→56~58℃石蜡II→58~60℃石蜡III）中浸蜡1h，然后将组织块从包埋框中取出，放入自制的长方形纸盒中，灌入58~60℃石蜡，待其自然冷却后，修成适当大小的蜡块后准备切片。
（4）切片、展片：将涂有粘片剂的载玻片摆放在展片台上，磨面朝上，滴上适量清水；将蜡块置于切片机上切成4um厚的连续切片，将其放在清水上，高温将蜡膜展平，常温保存，以备染色。
HE染色步骤（1）石蜡切片依次入二甲苯I和二甲苯II中脱蜡10min；再经酒精二甲苯混合液及梯度浓度递减的酒精溶液（无水乙醇→95%酒精→90%酒精→80%酒精→70%酒精→50%酒精）至蒸馏水中；（2）Ehrlich苏木精染色10～15 min，蒸馏水洗；（3）0.5%盐酸酒精分色（5～10 s），以镜检为准；（4）自来水冲洗蓝化后，依次转入70%和80%酒精中；（5）伊红染色10~15s；（6）依次经95%酒精、无水乙醇I、无水乙醇II、酒精二甲苯混合液、二甲苯I、二甲苯II进行脱水；（7）中性树胶封片。
染色结果：胞核呈蓝紫色，胞质呈粉红色。
石蜡切片实验报告
石蜡切片实验报告
实验目的：
1. 掌握石蜡切片的制备方法；
2. 观察石蜡切片下细胞结构的形态变化。
实验器材：
1. 细胞样品（如植物组织或动物组织）；
2. 甲苯；
3. 石蜡；
4. 切片机；
5. 切片夹；
6. 显微镜。
实验步骤：
1. 准备样品：取一块大小适中的组织样品，将其固定在甲醛中。
2. 组织脱水：将固定的组织样品放入不同浓度的醇中，逐渐提高浓度，直至浓度达到100%的醇。
3. 渗透：将脱水后的组织样品浸泡在甲苯中，使其充分渗透。
4. 包埋：将渗透后的组织样品放入熔化的石蜡中，使其完全包埋，并将其固化。
5. 制备切片：将固化的组织样品放入切片机中，用切片夹固定，并使用切片刀将其切割成薄片。
6. 切片上染：将切片浸泡在甲醛中进行染色处理，使细胞结构更加鲜明可见。
7. 盖玻片：将染色后的切片移至玻片上，并在上方加一两滴甲醛。
8. 干燥：将盖玻片放入带有热盖玻片机中，将其加热至切片周
围甲醛完全蒸发。
9. 观察：将干燥后的切片放置在显微镜下，利用透明光源进行观察。
实验结果与讨论：
经过石蜡切片制备方法处理后的样品，能够更加清晰地观察到细胞的形态和结构。
石蜡切片使细胞得到了固定和保护，使细胞结构更加稳定，方便观察和研究。
同时，切片上染的染色处理也增强了细胞结构的对比度，使其更加明显可见。
结论：
石蜡切片制备方法可以有效地固定和保护细胞结构，使其在显微镜下观察得更为清晰和明确。
通过石蜡切片制备方法，可以进一步探究细胞结构和功能，为细胞学研究提供基础。
石蜡切片实验报告
石蜡切片实验报告石蜡切片实验报告实验目的：熟悉石蜡切片技术的操作方法，了解石蜡切片制备的过程，并观察切片的结构。
实验原理：石蜡切片是一种常用的组织学检查方法，常用于生物组织的切片制备。
石蜡可以通过渗透，浸渍和固化来固定生物组织，并使其变硬，便于切割。
切片制备过程中，石蜡会填充生物组织的间隙，使组织保持形状和结构，便于显微镜下的观察。
实验材料：1. 组织样本：动物组织片或植物组织片2. 10% 罗丹明B 染液3. 显微镜玻片和盖玻片4. 切片刀、切片夹、玻璃棒5. 石蜡实验步骤：1. 取出石蜡块并加热至熔化状态。
注意，石蜡的熔点通常在60-65°C。
2. 取出组织样本，并用10% 罗丹明B 染液浸泡片段10-15分钟，以染色组织。
3. 将熔化的石蜡倒入切片模具中，随后将组织样本放入石蜡中，确保完全浸没。
4. 将切片模具放入冷却器中，降温至室温，使石蜡凝固。
5. 取出切片模具，用切片刀将切片切下。
切割时，角度和刀的质量对切片质量都有影响，所以操作要尽量快速、准确。
6. 将切片用切片夹固定在显微镜玻片上。
7. 用玻璃棒平均地将切片摊开，以避免切片叠合。
8. 将切片放入加热板上烘干至石蜡融化。
9. 取出加热板，用盖玻片覆盖在切片上。
实验结果：通过显微镜观察切片，可以清晰地看到组织的细胞结构和细胞器，以及组织之间的关系。
切片的质量和染色效果会受到操作技术和实验条件的影响。
实验总结：本实验通过熟悉石蜡切片技术的操作方法，使我了解了石蜡切片制备的过程，并通过观察切片的结构，加深了对生物组织的了解。
同时，实验也提示了切片制备中的一些注意事项，例如切割角度和切片刀的质量对切片质量的影响等，这将为今后的实验操作提供有益的参考。
石蜡切片制作和HE染色实验报告
石蜡切片制作和HE染色实验报告实验目的：
1. 掌握石蜡切片制作的基本步骤；
2. 熟悉HE染色的操作方法；
3. 观察并分析实验结果。
实验材料和仪器：
1. 组织标本；
2. 石蜡切片机；
3. HE染色试剂盒；
4. 显微镜。
实验步骤：
1. 组织标本处理，将组织标本固定、脱水、透明化和浸渍石蜡；
2. 石蜡切片制作，使用石蜡切片机将处理好的组织标本切成薄片；
3. HE染色，将切片依次浸入hematoxylin染液、脱水、eosin
染液和透明剂中；
4. 实验结果观察，使用显微镜观察染色后的切片，记录并分析
细胞结构和染色效果。
实验结果：
1. 经过石蜡切片制作和HE染色处理后，观察到组织标本的细
胞结构清晰可见；
2. HE染色使细胞核染成蓝色，胞质染成粉红色，对比明显；
3. 实验结果符合预期，证明石蜡切片制作和HE染色操作正确。
实验总结：
通过本次实验，我掌握了石蜡切片制作和HE染色的基本操作方法，对细胞结构和染色效果有了更深入的了解。
在今后的实验中，我将继续加强实验操作技能，提高实验结果的准确性和可靠性。
植物组织石蜡切片制作
植物组织石蜡切片的制作一、实验目的1．熟练掌握石蜡切片的方法。
2．掌握永久制片的制作过程，为研究植物的内部结构奠定基础。
3．学会植物内部结构的比较研究方法。
二、实验器具与试剂1．器具石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻片等。
2．试剂10%番红水溶液、0.5%固绿（用95%的酒精配制）、酒精（100%、95%、80%、70%、50%）、二甲苯、蒸馏水、甘油、中性树胶等。
三、实验材料幼嫩植物各部分，根据季节选择材料。
四、实验内容与方法石蜡切片法是显微技术上最重要、最常用的一种方法。
它是把材料封埋在石蜡里面，用旋转切片机切片，可以切出很薄的切片。
凡是精细的工结构，大都用石蜡切片。
全都过程如下：1．固定 2．洗涤 3．脱水与硬化 4．脱酒精 2．封埋 6．切片7．粘片 8．脱蜡 9．染色 10．脱水 11. 透明 12．胶封（一）固定1．固定的意义：固定就是用药品把细胞杀死，使细胞的原生质凝固，死后不发生变化，尽可能保持原来的结构以供我们观察。
良好的固定剂，应是穿透力强，使细胞立刻致死，原生质全部凝固；不发生任何变形，增强折光率，并且不妨碍染色。
2．固定液的种类：固定液的种类很多，根据配制成分可划分为：(1) 简单固定液：以一种化学药品配制的固定液。
常用的简单固定液有：A．酒精即乙醇，用作固定液，常用纯酒精或95％酒精。
酒精穿透力强，固定时间常在1小时以内。
高浓度酒精有使材料收缩的作用。
70％的酒精可作保存液。
配制低度酒精必需要用普通酒精即95％的酒精，绝不可用纯酒精。
酒精为还原剂，不能与铬酸、锇酸、重铬酸钾等氧化剂配合。
酒精可使核酸，蛋白质及肝醣等发生沉淀，但能溶解脂肪及拟脂。
B．福尔马林即甲醛，具强烈刺激性的气味，纯净的甲醛，为无色透明液体。
固定用的浓度为4-10％甲醛也是强还原剂。
不能与铬酸、锇酸等氧化剂配合。
经固定后，材料变硬，通常不引起皱缩，但随后经过他种药剂处理时，就每每出现皱缩。
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植物组织石蜡切片的制备与染色观察
一．实验器具与试剂
1.器具
小培养皿、锡箔纸、尖头和平头镊子、剪刀、刀片、吸水纸、移液枪、1枪头、移液器和移液管、量筒（50，100，250，500）、废液瓶、水浴锅、酒精灯、三角瓶、真空锅、烘片箱、木筷、石蜡切片机、染色缸、载玻片、盖玻片、显微镜等2.试剂
100%酒精、100%二甲苯、100%叔丁醇、石蜡块、蒸馏水、多聚甲醛、中性树胶、甲苯胺蓝（）染色剂等
二. 实验步骤
1.溶液配制
10×溶液：
（国药或生工）75.95g
24.12H2O（国药）25.07g
24.2H2O （国药） 4.68g
充分溶解后，用（国药）调7.0，定容1000，高压灭菌25，4℃保存。
4%多聚甲醛固定液：
1×100
1 0.5
水浴加热至60-70℃，在通风橱中加入4g多聚甲醛，待溶解后冷却至4℃，加入100µl的10%的浓硫酸调节为7.0。
2.材料准备
⑴固定
取幼嫩的植物材料，将植物组织剪成合适大小的小块，立即放入一个装有新配制的4%多聚甲醛固定液的小器皿中，固定液体积视材料多少而定，一般材料少时10材料较多时可放15，小器皿置于冰上。
上面用锡箔纸盖好后扎孔。
抽真空使得材料浸没其中（反复真空和非真空状态，并保固定液不要沸腾），待材料下沉到管底。
具体操作如下：
①放置在冰上的器皿放入真空锅里，盖上锅盖，拧开盖上螺旋，拧紧侧面螺旋，打开开关当压力表上显示到0.2时可计时10分钟。
②关上锅盖螺旋，拧松侧面螺旋，外面空气会进入真空锅内，当内外压力相等时计时10分钟。
③再重复步骤①，换一次新的固定液，4℃过夜固定，但不要超过16h。
(2)漂洗
用1×缓冲液（7.0）漂洗组织块2次，每次4℃放置30。
注意容易结晶可75℃水浴加热。
(3) 脱水
在翻转下进行梯度乙醇和叔丁醇脱水：30%、40%、50%、60%、70%乙醇（此步可保存可过夜）、10%叔丁醇+20%水+70%乙醇、20%叔丁醇+10%水+70%乙醇、30%叔丁醇+70%乙醇、50%叔丁醇+50乙醇、70%叔丁醇+30%乙醇、90%叔丁醇+10%乙醇、100%叔丁醇（2次），30次。
补充：若没有叔丁醇，可替换一下步骤进行30%、40%、50%、60%、70%、80%、95%、100%乙醇，然后1/4二甲苯+3/4乙醇、1/2二甲苯+1/2乙醇、3/4二甲苯+1/4乙醇、100%二甲苯(2次)，每步均30 。
(4) 浸蜡
用刀片将石蜡块切成碎末，逐步加入到上述最后一步的材料中大约是1/4的量，37℃烘箱过夜；继续加石蜡，同时放入到42℃，待石蜡不继续熔化时放入到60℃烘箱中，等待全部融化后，将叔丁醇和石蜡的混合物换成纯蜡，每天上午下午（9点）各换纯蜡一次，持续3天。
(5) 包埋
最后将材料包埋备用。
在切片前将包埋块4℃冰箱中保存，可保存至少一年。
3.组织切片
⑴切片
将包埋的材料用切片机进行组织学切片，切成8μm厚度的连续的薄片，用刀片把蜡片切成合适的长度（能放在载玻片上即可）。
⑵展片和烘片
转入42℃的水中展片2-3，用氨基载玻片将其捞出，放置于42℃过夜烘片（烘过的片子可以再放干燥剂的条件下保存数周。
⑶脱蜡
将烘过的片子浸没在100%的二甲苯脱蜡两次，每次15；
⑷复水
梯度乙醇复水：100%、95%、85%、70%、60%、30%、水两次，每步3。
⑸染色
0.05% （甲苯胺蓝）染色37℃,30 。
染色时间不要太久，中间可以拿出来看一下。
然后把片子置于一个盛水的容器中，把片子浸入再提出，不要直接用水冲，直至水变清，拿出晾干。
二甲苯：无水乙醇=1：1 10 s 。
100%二甲苯2, 2次。
滴上1—2滴中性树胶（加拿大树胶）后盖上盖玻片（不要有气泡)。
⑹镜检观察。