ABO血型反定型试剂红细胞配制 SOP

S006红细胞ABO血型(反定型)鉴定标准化操作规程 (2)

红细胞ABO 血型（反定型）鉴定标准化操作规程一、目的为保证血液及血液成分的红细胞ABO 血型在临床上同型输注，确保临床输血安全、有效，根据《临床输血技术规范》第十五条特制定本标准化操作规程。

二、方法采用试管法检测红细胞ABO 血型（反定型）。

三、原理用已知的A1、B、O标准红细胞测定被检者血清中有无相应的抗A或抗B抗体，结合正定型结果判断ABO血型。

四、适用范围适用于输血前患者与献血者红细胞ABO血型(反定型)确认。

五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、试剂1、试剂名称：人ABO血型反定型用红细胞试剂盒；2、试剂生产厂家：上海血液生物医药有限公司；3、批准文号：国药准字S2*******；4、包装规格：A1、B、O试剂各1支，10ml/支；5、贮藏条件；2-8℃保存，不能冰冻。

6、有效期：自检定合格之日起2个月；7、试剂性能：外观、溶血率%、特异性、抗原性均符合检定规程要求。

七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。

2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。

3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。

4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。

八、操作步骤1、取10mmx60mm洁净小试管3支，分别标明A1型细胞、B型细胞、O型细胞，用滴管分别加入受检者血清1滴于试管，再分别用滴管加入A1、B、O型试剂红细胞悬液1滴。

2、，摇动试管，立即以1000rpm离心1min或3400rpm离心15s。

3．先观察是否有溶血，溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染；将试管轻轻摇晃，使沉于管底的红细胞浮起，观察细胞扣情况，并判断凝集强度（见下表）。

如肉眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。

红细胞ABO血型（反定型）结果凝集强度判断对照表红细胞凝集反应描述凝集强度镜下可见少数红细胞凝集，而绝大多数红细胞仍呈分散混合凝集外观分布溶血，上清液中有游离血红蛋白溶血红细胞凝集成一大块，血清清晰透明4+红细胞凝集成数小块，血清尚清晰3+红细胞凝块分散成许多小块，周围可见到游离红细胞2+肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞1+镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细±胞镜下未见凝集，红细胞均匀分布阴性4、ABO 血型（反定型）表现型反应格局表九、质量控制 1、对新进批号的试剂应作亲和力与效价验定。

正反定型卡使用SOP(1)

长春博迅生物技术有限责任公司ABO.RhD血型定型试剂卡标准操作程序（SOP）一、准备工作（一）微柱凝胶试剂卡的准备：观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡放置室温（18－25℃）平衡，再用专用离心机离心5分钟。

（二）检测标本的准备：1．红细胞悬液的制备：取被检者压积红细胞10微升，加入1.0－1.2毫升红细胞稀释液，外观应为均匀淡红色，无絮状物和血块。

2．血清标本的制备：采集被检对象静脉血，放入含兔脑粉或其它促凝剂的试管中，10分钟后离心，取上清；或者静脉血采入无抗凝剂试管中，4℃放置 12小时，或37℃放置2小时后离心，2000r/min,10分钟，取上清（该上清不得有絮状物或沉淀）。

二、操作步骤1. 将准备好的ABO.RhD血型定型试剂卡做好标记。

2. 将待检者红细胞悬液分别加入第1至第4管中，每管50ul。

3. 将待检者血清分别加入第5和第6管中，每管50ul。

4. 将已知的A型和B型红细胞0.8%浓度悬液或0.8%浓度ABO血型反定型红细胞试剂，每管50ul分别加入第5和第6管。

5. 即刻使用专用离心机离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟），取出肉眼判定结果。

结果判定：阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。

阴性结果：被检红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部。

血型判定：三、注意事项1. 检测标本必须为抗凝血。

2. 红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。

尽可能应用当日采集的新鲜血做本试验。

如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本是否可以做本实验。

3. 血清标本：血清标本必须充分去纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍阴性红细胞沉淀，呈假阳性反应。

4. 如在微柱凝胶管中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所致溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员报告并讨论。

ABO及RH(D)血型鉴定SOP

ABO和RH（D）血型鉴定操作规程一、目的：规范ABO和RH（D）血型鉴定操作，保证临床用血的安全性及有效性。

二、适用范围：适用于血库ABO和RH（D）血型鉴定三、所需材料和设备：1、材料：抗-A、抗-B、抗-D试剂、A、B、O型反定型试剂红细胞，生理盐水，滴管，患者标本。

2、设备：离心机，显微镜。

四、操作规程1、试管法：（1）取洁净试管3支，分别标明抗A、抗B及抗D，分别加入抗A、抗B 及IgM抗D单克隆血清各1滴于试管底部，再用滴管分别加入受检者5％红细胞生理盐水悬液1滴，轻摇混匀。

（2）另取洁净试管3支，分别标明A、B和O，用滴管分别加入受检者血浆1滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B和O型5％试剂红细胞悬液1滴，轻摇混匀。

（3）立即以1000r/min离心1分钟后将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集（溶血）现象。

如肉眼不见凝集，应将反应物取置于玻片上，再以低倍显微镜检查。

（4）观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，有助于A、B亚型，类B或嵌合体血型的发现。

2、玻片法：(1) 取血型鉴定专用玻璃板一块，在凹孔旁分别标明抗A、抗B及抗D，分别加入抗A、抗B及抗D单克隆血清1滴，再各加受检者5％红细胞悬液1滴，混匀。

(2) 标明A、B及O细胞，分别加入受检者血浆1滴，再各加入A、B及O型试剂红细胞悬液1滴，混匀。

编制人王渊审核人钟剑版本号第二版颁布日期2018年1月1日编制人王渊审核人钟剑版本号第二版颁布日期 2018年1月1日 (3) 轻轻转动玻板，使血清与红细胞充分混匀，连续15分钟以肉眼观察有无凝集（溶血）反应。

有需要时也可用低倍显微镜观察结果。

(4) Rh （D ）血型鉴定时应作阳性对照及阴性对照。

3、结果判断：单克隆血清＋受检者红细胞受检者血型受检者血浆＋试剂红细胞抗A 抗B 抗D A 细胞 B 细胞 O 细胞＋ — ＋/－ A 型 Rh （D ）＋/－－＋－－＋＋/－ B 型 Rh （D ）＋/－＋－－－－＋/－O 型Rh （D ）＋/－＋＋－＋＋＋/－ AB 型 Rh （D ）＋/－－－－4、凝集强度判断：4+ 红细胞凝集成一大块，背景清晰透明； 3+ 红细胞凝集成数小块，背景尚清晰；2+ 红细胞凝块分散成许多小块，背景可见到游离红细胞； 1+ 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞；+- 镜下可见数个红细胞凝集在一块，周围有许多游离红细胞；混合外观凝集是指镜下可见少数红细胞凝集，而绝大多数红细胞仍分散分布；- 阴性镜下未见凝集，红细胞均匀分布。

abo反定型红细胞悬液的配制方法

ABO反定型红细胞悬液的配制方法1. 简介ABO血型系统是根据人体红细胞膜表面的抗原而划分的，主要有A型、B型、AB型和O型四种血型。

在输血过程中，正确选择合适的血型是非常重要的，以避免发生血型不相容的严重反应。

ABO反定型红细胞悬液是一种用于血型鉴定、抗体筛查以及输血前交叉试验的实验试剂。

2. 材料准备为了制备ABO反定型红细胞悬液，我们需要准备以下材料：•柱层离心管•离心机•A型血液样本•B型血液样本•AB型血液样本•O型血液样本•生理盐水3. 配制步骤3.1. 血型鉴定试验步骤血型鉴定是确定一个人的血型的过程，在配制ABO反定型红细胞悬液之前，我们需要进行该测试。

1.将柱层离心管标记为A、B、AB、O，分别代表后续实验中不同血型。

2.取一定量的A型血液样本，加入一个标记为A的柱层离心管中。

3.取一定量的B型血液样本，加入一个标记为B的柱层离心管中。

4.取一定量的AB型血液样本，加入一个标记为AB的柱层离心管中。

5.取一定量的O型血液样本，加入一个标记为O的柱层离心管中。

6.将加入血液样本的柱层离心管放入离心机中，以1500 rpm离心10分钟，分离红细胞。

3.2. ABO反定型红细胞悬液配制步骤完成血型鉴定步骤后，我们可以开始配制ABO反定型红细胞悬液了。

1.取出离心机中的柱层离心管，将上清液倒入不同的干净离心管中。

2.分别向每个离心管中加入适量的生理盐水，用于稀释上清液。

3.轻轻摇匀离心管，确保红细胞充分分散在生理盐水中。

4.将离心管放入离心机中，以1500 rpm离心10分钟。

5.丢弃上清液，保留红细胞沉淀。

6.向红细胞沉淀中加入适量的生理盐水，用于洗涤红细胞。

7.轻轻摇匀离心管，离心3分钟，丢弃上清液。

8.重复步骤7，洗涤至少3次，以去除多余的血浆成分。

9.最后一次洗涤后，加入适量的生理盐水，使红细胞悬浮。

10.将悬浮的红细胞转移至一个干净的离心管中。

4. 结论通过以上配制步骤，我们成功制备了ABO反定型红细胞悬液。

输血技术操作规范(SOP)

输血科技术操作规范第一节 ABO血型鉴定操作规程【目的】正确鉴定血型，保障患者的输血安全。

【范围】所有送检需要鉴定ABO和RhD血型的标本。

【职责】输血科负责临床患者的血型鉴定。

【程序】ABO血型鉴定（1）原理：根据ABO血型分类原则，即红细胞上带有什么抗原就称什么血型、同一个体内抗原与抗体互补。

根据含某抗原的红细胞与含相应抗体的血清混合可使红细胞发生凝集，反之不发生凝集的原理，利用分型血清或分型红细胞鉴别血型，前者称为正定型（又称红细胞定型），后者称为反定型（又称血清定型）。

通过正反定型可准确鉴别ABO 血型。

（2）试管法a)取洁净小试管（内径10mm×60mm）5支，分别标明抗-A，抗-B，A细胞、B细胞和O细胞。

b)抗-A,抗-B管中分别按标记加入相应抗体血清2滴，并加入受检者3%～5%红细胞悬液1滴，混匀。

c)A、B和O细胞管分别按标记加入相应3%～5%标准红细胞盐水悬液1滴，并加入受检者血清2滴，混匀。

d)以1500r/min离心1min。

e)轻轻摇动试管，肉眼观察有无凝集现象，必要时须用低倍镜检查。

（3）微柱凝胶法（卡式血型鉴定）a)将代待检标本配成（0.5%～0.8%）红细胞生理盐水悬液。

b)将微柱凝胶卡标号。

c)正定型：将待检红细胞标本分别加入第一至第三支微管中，或第四至第六支微管中，每管50ul；d)带反定型的微柱卡：将待检红细胞标本分别加入第一至第三支微管中，第四至第六支微管中分别依次加入O型、A型、B型（0.5%～0.8%）标准红细胞生理盐水悬液后再加入待检血清，每次加50ul。

d)即刻使用专用离心机离心5min，2min900rpm,3min1500rpm,取出后判定结果。

(4)结果判定a)试管法正定型（细胞定型）反定型（血清定型）_____________________________________________ 受检者血型抗-A 抗-B A细胞 B细胞 O细胞+ O O + O AO + + O O BO O + + O O+ + O O O ABb)微柱凝胶法正定型（细胞定型）反定型（血清定型）_________________________________________________________ 受检者血型抗-A 抗-B DVI Ctl A细胞 B细胞+ O + O O + A,RhD+ O + + O + O B,RhD+O O + O + + O,RhD++ + + O O O AB,RhD+规格：抗A效价≥128；抗B效价≥128;抗D效价≥64【注意事项】1.严格按操作规程操作操作，认真核对标本并做好标记。

MEK―6318K稀释液配制ABO反定型试剂红细胞精品文档4页

MEK―6318K稀释液配制ABO反定型试剂红细胞很多医院在做ABO反定型试验时，常因ABO反定型试剂红细胞悬液有效期短，不能购买太多，从而导致试剂暂时短缺；另外红细胞悬液在保存或使用不当时也很容易失效，给临床工作带来诸多不便。

如果能用血细胞分析仪使用的稀释液来配成红细胞悬液来进行ABO反定型的检测，会给临床带来很大的便利。

现就其可行性进行研究。

1 资料与方法1.1主要试剂与仪器标准抗-A，抗-B血清，由长春博德生物技术有限责任公司提供；MEK-6318K稀释液（日本光电）、MEK-6318K血细胞分析仪（日本光电）、奥林巴斯医学显微镜（日本）。

血液混匀器（江苏康建）1.2反定型试剂红细胞的制备①分别取5人份健康同型新鲜Rh阳性的A、B、O型红细胞各0.5ml混合；②用无菌等渗生理盐水洗涤红细胞，3000r/min离心3min，共3次；③再用MEK-6318K稀释液洗涤2次，以充分置换红细胞中的生理盐水；④用三种稀释液配成4ml/dl的A、B、O三种血型试剂红细胞；⑤将三种试剂红细胞悬液混合分装在八只压灭菌的试管中，加上胶塞，置4±2℃保存。

每隔2d取一只样品进行检测。

1.3检测项目1.3.1细胞形态观察并计数在显微镜下观察红细胞的形态并用MEK-6318K血细胞分析仪测定红细胞的数量。

1.3.2溶血情况观察和上清液游离Hb（血红蛋白）测定肉眼观察A、B、O三种血型试剂上清液的颜色，初步判断试剂的溶血情况。

然后用MEK-6318K血细胞分析仪测定游离Hb含量。

1.3.3细菌生长情况观察将A、B、O三种血型试剂红细胞摇匀，取一接种环接种于血琼脂培养基上，置37℃温箱培养24h后观察是否有细菌生长。

1.3.4试剂的抗原性和特异性检测分别向含有100ulA、B、O三种血型试剂红细胞的试管中加入同一批号的标准抗-A，抗-B血清各100ul，混合均匀，1000r/min离心1min，轻轻摇动试管，使沉于管底的红细胞浮起，观察凝集强度的变化。

ABO血型反定型标准操作规程(SOP)

ABO血型反定型标准操作规程（SOP）一．【检验原理】用已知的AI,B,0细胞测定被检者血清中有无相应的抗A或抗B抗体,结合正定型结果判断ABO血型二．【样本要求】被检者血清或血浆三．【检验方法】（1）试管法1.取被检者血清(或血浆)各1滴(50ul)分别加于3支标记好的小试管中2.分别各加1滴(50ul)Al,B.0试剂红细胞3.摇动试管,离心,速度和时间可选以下二种之一：a)转速1000rpm,时间1分b)转速3400rpm,时间15秒4.先观察是否溶血(溶血可能是阳性结果,或者是细菌污染),然后轻轻摇晃,使细胞再悬浮起来。

5.观察凝集状况,并立即记录结果(2)微量板法1.在U型板三个孔内分别加入25-30u1的被检者血清(或血浆)2.每孔内分别加入与血清的等量的A1、B、0试剂红细胞3.混匀(手工振动混匀或机器混匀)4,离心,转速2000m,时间30秒(650G)注:不同的离心机、不同的微量板所需要的离心条件有所区别,正确实验的结果需要适当的离心,反应板应产生清晰的细胞扣及透亮的上清液5.检测溶血情况(溶血可能是阳性结果,或者是细菌污染)6.用震荡仪振动微量板，振动能使阳性反应出现凝集的细胞扣，而若是阴性结果反应很快则细胞扣消除7.记录结果：亦可使用酶标读数仪，与电脑连接可实现自动化检测。

四．【检验结果的解释】ABO血型表现型反应格局表．【检验方法的局限性】本实验必须与正定型一起进行,正反定型不一致须做进一步研究。

单独反定型结果不能作为判断血型的依据。

六．【注意事项】1.如果在反定型试验中,受检者的血清或血浆与0型红细胞试剂产生阳性反应,则需要添加自身对照试验。

如果自身对照为阳性,表明是自身冷凝集素导致。

如果自身对服为阴性,则表明被检者血清或血浆中可能存在AB0系统以外的其他系统的抗体干扰定型。

请按照相关试验方法解决上述定型。

2.本品如出现红细胞颜色变成暗紫色或红细胞发生凝集,出现菌落或溶血严重,则不能使用。

S006红细胞ABO血型(反定型)鉴定标准化操作规程

红细胞ABO血型（反定型）鉴定标准化操作规程一、目的为保证血液及血液成分的红细胞ABO血型在临床上同型输注，确保临床输血安全、有效，根据《临床输血技术规范》第十五条特制定本标准化操作规程。

二、方法采用试管法检测红细胞ABO血型（反定型）。

三、原理用已知的A1、B、O标准红细胞测定被检者血清中有无相应的抗A或抗B抗体，结合正定型结果判断ABO血型。

四、适用范围适用于输血前患者与献血者红细胞ABO血型(反定型)确认。

五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、试剂1、试剂名称：人ABO血型反定型用红细胞试剂盒；2、试剂生产厂家：上海血液生物医药有限公司；3、批准文号：国药准字S2*******；4、包装规格：A1、B、O试剂各1支， 10ml /支；5、贮藏条件；2-8℃保存，不能冰冻。

6、有效期：自检定合格之日起2个月；7、试剂性能：外观、溶血率%、特异性、抗原性均符合检定规程要求。

七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。

2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。

3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。

4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。

八、操作步骤1、取10mmx60mm洁净小试管3支，分别标明A1型细胞、B型细胞、O型细胞，用滴管分别加入受检者血清1滴于试管，再分别用滴管加入A1、B、O型试剂红细胞悬液1滴。

2、，摇动试管，立即以1000rpm离心1min或3400rpm离心15s。

3．先观察是否有溶血，溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染；将试管轻轻摇晃，使沉于管底的红细胞浮起，观察细胞扣情况，并判断凝集强度（见下表）。

如肉眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。

红细胞ABO血型（反定型）结果凝集强度判断对照表4、ABO血型（反定型）表现型反应格局表九、质量控制1、对新进批号的试剂应作亲和力与效价验定。

ABO血型鉴定正反定型试验方法

ABO血型鉴定正反定型试验方法
一、试剂和材料：
（一）单克隆抗A、抗B试剂（由试剂厂家提供）
（二）显微镜、载玻片
（三）A型、B型红细胞（本实验室制备的5%混悬液）
（四）EDTA抗凝的待测红细胞全血
（五）竹签
二、方法（玻片法）：
（一）正定型：
1.在一块干净的玻片上，间隔一定距离做好标记，分别滴一滴抗A和抗B试剂；
2.在每滴试剂中加一滴待测红细胞全血；
3.用竹签混匀试剂和红细胞，并使混合物直径＞15mm；
4.轻摇玻片，两分钟内观察结果，必要时可以在低倍镜下观察；
5.判读、解释并记录反应结果。

（二）反定型：
1.在玻片上间隔一定距离标明Ac和Bc字样。

分别滴加5%的A型红细胞悬液、B型红细胞悬液各一滴；
2.在玻片每滴红细胞悬液上滴加待测血清各一滴；
3.混匀（同正定型）；
4.轻摇玻片，两分钟内观察结果，必要时可以在低倍镜下观察；
5.判读、解释并记录反应结果。

6.结合正反定型反应结果、判定血型，见表1
表1 ABO血型正反定型试验结果判定
三、附注：
（一）表中“O”表示无凝集，“+”表示凝集，一般都是3-4个+的强凝集反应；
（二）2分钟后红细胞仍呈均匀混悬状态是阴性反应；
（三）若得到弱的或可凝集反应结果，该标本应用试管法重新试验；
（四）由于新生儿在出生4~6个月内，血浆中的ABO抗体活动太弱，并且含有来自母亲的抗体，故新生儿血型只能由检测红细胞抗原的正定型来测定其ABO血型；
（五）做正定型时，还可加一抗A、B血清（O型人血清），以检测ABO弱抗原；做反定型时可以加试一O型红细胞，借以证实是否有不规则抗体的存在。

血型鉴定反定型细胞配制操作作业指导书

血型鉴定反定型细胞（A、B细胞）悬液配制操作作业指导书
1、目的
配比已知血型细胞（A、B型）用于血型鉴定反定型细胞
2.原理
ABO血型鉴定：根据红细胞膜表面有无A抗原和（或）B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型4钟。

可利用红细胞凝集试验，通过正反定型确定ABO血型。

所谓正定型，是指用标准抗A、抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或（和）B抗原；所谓反定型，是指用标准A型细胞和B型细胞来测定血清中有无相应的抗A和（或）抗B
3.样品类型
EDTA-K2抗凝血（合血时A、B型辫子最佳）
4.操作步骤
4.1将已知A、B型细胞装入干净试管内
4.2离心机（2500r）离心5min
4.3用干净吸头吸弃上清液直至肉眼不见血浆
4.4加入5ml低离子液，摇匀，离心机（2500r）离心5min，干净吸头吸弃上清液，重复洗涤红细胞3次
4.5取两只干净塑料管，标记A、B并加入低离子液，按0.5%-0.8%配制洗涤红细胞悬液，摇匀。

5.计划措施
5.1离心时注意转速（离心力）和时间设置
5.2离心后观察有无溶血，凝露，乳糜等，如有慎用
5.3配比后的反定型细胞需做验证试验，用已知A、B型做血型鉴定
5.4反定细胞需尽快使用，如细胞溶血弃用
输血科
2021年4月3日（修订）。

人abo血型反定型用红细胞试剂盒说明书

人abo血型反定型用红细胞试剂盒说明书人 ABO 血型反定型用红细胞试剂盒是一种用于鉴定人 ABO 血型的试剂盒。

以下是一个简要的说明书：
1. 产品名称：人 ABO 血型反定型用红细胞试剂盒
2. 用途：用于人 ABO 血型的反定型检测
3. 原理：基于红细胞表面抗原的特异性，通过与抗体的反应来确定血型
4. 试剂盒组成：
（1）Anti-A 试剂：含有抗 A 抗体的试剂
（2）Anti-B 试剂：含有抗 B 抗体的试剂
（3）质控细胞：用于质量控制的已知血型红细胞
5. 使用方法：
（1）采集受检者的血液样本，并分离出血清。

（2）将 Anti-A 和 Anti-B 试剂分别加入到两个干净的试管中。

（3）向每个试管中加入一滴受检者的血清。

（4）轻轻混匀试管，观察是否有凝集反应。

（5）如果出现凝集反应，则说明受检者的血型为相应的抗体对应的血型。

（6）如果没有出现凝集反应，则需要进一步进行其他检测以确定血型。

6. 注意事项：
（1）本试剂盒仅供体外诊断使用。

（2）在使用前，请仔细阅读产品说明书，并按照说明进行操作。

（3）试剂盒应在 2-8°C 下保存，避免冻结。

（4）请勿使用过期的试剂盒。

（5）在使用过程中，应严格遵守无菌操作规程。

1。

abo反定型红细胞悬液的配制方法

abo反定型红细胞悬液的配制方法
ABO反定型红细胞悬液是一种常用的血型鉴定试剂，其配制方法如下：
1. 材料准备
需要准备的材料包括：ABO血型鉴定试剂盒、生理盐水、A、B、O型红细胞悬液。

2. 悬液配制
将A、B、O型红细胞悬液分别加入生理盐水中，使其浓度为0.8%。

将A型红细胞悬液与B型红细胞悬液混合，制成A、B型红细胞悬液。

将O型红细胞悬液加入生理盐水中，使其浓度为0.4%。

将A、B型红细胞悬液与O型红细胞悬液混合，制成ABO反定型红细胞悬液。

3. 质量控制
配制好的ABO反定型红细胞悬液需要进行质量控制。

首先，需要对悬液进行外观检查，确保无明显沉淀和变色。

其次，需要进行质量控制
试验，如抗人球蛋白试验和抗人全血凝集试验，以确保悬液的质量符
合要求。

4. 储存和使用
配制好的ABO反定型红细胞悬液应储存在2-8℃的冰箱中，避免阳光直射和震动。

在使用前需要将悬液充分混匀，避免沉淀和凝集。

总之，ABO反定型红细胞悬液的配制需要严格按照操作规程进行，以确保悬液的质量符合要求。

在使用过程中，也需要注意质量控制和储存条件，以保证血型鉴定结果的准确性。

ABO血型分型操作规程sop

ABO血型分型操作规程sop
1．项目名称：ABO血型分型
2．方法：玻片法
3．试剂：抗A、抗B血型定型试剂（单克隆抗体）
上海市血液中心生产
含抗A、抗B血型定型试剂各10ml
成分：分泌抗人A型和抗人B型血型抗原单抗的杂交瘤细胞培养上清液。

4．原理：A型红细胞膜上含有A抗原，B型红细胞膜上含有B抗原。

AB型红细胞膜上含有A、B两种抗原。

O型红细胞膜上不含有抗原。

抗A、抗B分型试剂与受检者的红细胞混合时，可发生凝集，结果判定见下表：
5．操作步骤：将抗A分型试剂、抗B分型试剂各一滴，分别滴于玻璃片A、B两处。

分别取等体积待检血样于抗A分型市集和抗B分型试剂处，用不同的竹签将市集与血样混匀，同时不停的摇动玻璃片并观察血球凝集的出现
6．注意事项：1。

调匀后就不要用竹签搅动，以免影响大凝块的形成。

2．如发现检定结果与交叉合血结果不符，应进行反定型。

3.对含有较多自身凝集素的受检者，需用37度生理盐水洗涤受检者红细胞2—3次，然后鉴定。

7．标本要求病人准备：新鲜静脉血或末梢血.采血应顺利，不应有溶血和凝块。

对病人无特殊要求，特殊病人由临床医生告知注意事项8. 参考文献：
1)全国临床检验操作规程（第3版）
2)厂商说明书
9. 编写者：
制定日期：
修改日期：
科主任对规程认可：。

ABORHD血型质控品使用SOP

标准操作程序（SOP）一、用途本试剂盒用于长春博迅生物技术有限责任公司生产的ABO、RhD血型定型检测卡（单克隆抗体）（12人份/盒）、ABO血型反定型试剂盒（人血红细胞）（0.8%）的室内质量控制。

二、准备工作将质控品和反定细胞从冰箱取出后平衡至室温。

三、操作步骤1.取4张待检微柱凝胶卡做好标记；2.将样本1分别加入第1张卡的1-4孔中，各1滴（50μl）；3.将样本3加入第1张微柱凝胶卡的Ac、Bc孔内各1滴（50μl），分别在标记孔内加入0.8%A1、B标准红细胞各1滴（50μl）。

4.将样本2分别加入第2张卡的1-4孔中，各1滴（50μl）；5.将样本4加入第2张微柱凝胶卡的Ac、Bc孔内各1滴（50μl），分别在标记孔内加入0.8%A1、B标准红细胞各1滴（50μl）；6.将样本5加入第3张卡的1~4孔内，将样本6加入第4张卡的3~4孔内。

7.用该试剂卡的专用离心机离心，判定结果。

结果判定：1．本产品为非定值质控品，反应格局表中所提供的结果仅为定性结果，因此建议各实验室对每批号的产品自行建立相应的参考值。

2．质控品检测结束后，用户应将检测结果与参考值进行比较，阳性质控结果与预期结果比较出现超过1+凝集强度的差异，或阴性质控出现阳性结果时，均视为失控。

失控后要分析查找原因，必要时重复实验，确认失控原因消除后开展正常检测工作。

样本1 + 0 +样本2 0 + +样本3 0 +样本4 + 0样本5 0 0 +样本6 / / 0“0”代表阴性，“/”代表不确定, “+”代表阳性。

四、注意事项1.本产品作为室内质控品，仅供临床实验室进行质量控制，不用于临床检测结果的判断。

2.使用时应轻拿轻放，避免剧烈振荡。

3.室内质控品严禁在室温长期存放，室内质控完毕后立即将剩余试剂放在2~8℃储存。

4.如红细胞质控品发生凝集，出现菌落或严重溶血，请不要使用；若红细胞质控品出现轻微溶血，可使用生理盐水对其进行洗涤，重新悬浮后使用。

输血科ABO血型鉴定操作规程

ABO血型鉴定标准操作规程【目的】正确鉴定血型，保障患者的输血安全。

【范围】所有送检需要鉴定ABO血型的标本。

【职责】配发血室负责临床患者的血型鉴定。

【原理】根据ABO血型分类原则，即红细胞上带有什么抗原就称什么血型、同一个体内抗原与抗体互补。

根据含某抗原的红细胞与含相应抗体的血清混合可使红细胞发生凝集，反之不发生凝集的原理，利用分型血清或分型红细胞鉴别血型，前者称为正定型（又称红细胞定型），后者称为反定型（又称血清定型）。

通过正反定型可准确鉴别ABO血型。

【标本采集和处理】1、标本采集：EDTA-K2或EDTA-K3抗凝静脉血2mL。

标本保存：室温放置不超过6小时，4℃保存不超过72小时，无溶血,无凝块及明显乳糜。

【设备与试剂】1、人ABO血型反定型用红细胞试剂盒①包装规格：每盒内装有Al,B,0试剂各1支，IOml/支②主要组成成分：Al型、B型、。

型红细胞。

③储存条件及有效期：2-8°C储存，不能冰冻；有效期2个月。

2、ABO>RhD血型检测卡（微柱凝胶）①包装规格：2人份/卡，12卡/盒。

②储存条件及有效期：18-25℃避光保存，自检定合格之日起12个月。

3、抗A抗B血型定型试剂（单克隆抗体）①包装规格：10ml。

②储存条件及有效期：2-8℃避光保存；储存条件下有效期为24个月。

4、红细胞悬液：取标本离心后压积红细胞与生理盐水配制（试管法为3%-5%；微柱凝胶法为0∙5%-0∙8%）.5、BaSo2005-2>BaSo2002-2型医用低速离心机：珠海贝索生物技术有限公司。

6、TD-3A型血型血清学用离心机：长春博研科学仪器有限责任公司。

【操作步骤】1、试管法①正定型：a）取洁净小试管（内径IOnIm义60mm）3支，分别标明抗-A,抗-B。

b）抗-A,抗-B管中分别按标记加入相应抗体血清1滴，并加入受检者3%~5%红细胞悬液1滴，混匀。

c）放入BaSo2002-2型离心机以3400r∕min离心15秒。

(完整版)ABO血型鉴定正反定型试验方法

ABO血型鉴定正反定型试验方法
一、试剂和材料：
（一）单克隆抗A、抗B试剂（由试剂厂家提供）
（二）显微镜、载玻片
（三）A型、B型红细胞（本实验室制备的5%混悬液）
（四）EDTA抗凝的待测红细胞全血
（五）竹签
二、方法（玻片法）：
（一）正定型：
1.在一块干净的玻片上，间隔一定距离做好标记，分别滴一滴抗A和抗B试剂；
2.在每滴试剂中加一滴待测红细胞全血；
3.用竹签混匀试剂和红细胞，并使混合物直径＞15mm；
4.轻摇玻片，两分钟内观察结果，必要时可以在低倍镜下观察；
5.判读、解释并记录反应结果。

（二）反定型：
1.在玻片上间隔一定距离标明Ac和Bc字样。

分别滴加5%的A型红细胞悬液、B型红细胞悬液各一滴；
2.在玻片每滴红细胞悬液上滴加待测血清各一滴；
3.混匀（同正定型）；
4.轻摇玻片，两分钟内观察结果，必要时可以在低倍镜下观察；
5.判读、解释并记录反应结果。

6.结合正反定型反应结果、判定血型，见表1
表1 ABO血型正反定型试验结果判定
三、附注：
（一）表中“O”表示无凝集，“+”表示凝集，一般都是3-4个+的强凝集反应；
（二）2分钟后红细胞仍呈均匀混悬状态是阴性反应；
（三）若得到弱的或可凝集反应结果，该标本应用试管法重新试验；
（四）由于新生儿在出生4~6个月内，血浆中的ABO抗体活动太弱，并且含有来自母亲的抗体，故新生儿血型只能由检测红细胞抗原的正定型来测定其ABO血型；
（五）做正定型时，还可加一抗A、B血清（O型人血清），以检测ABO弱抗原；做反定型时可以加试一O型红细胞，借以证实是否有不规则抗体的存在。

ABO血型反定型试剂红细胞配制(SOP)

7.4经多批次定型试剂鉴定确认血型无误方可使用，并作好明显标记。
7.5悬浮在含有葡萄糖等保存液的抗凝剂中。
9．注意事项
9.1特异性鉴定，阴性必须在显微镜下观察，包括红细胞形态。
9.2每次使用前必须观察溶血现象，并配制成5％左右的红细胞悬液。
9.3不使用时必须4℃保存。
9.4配制必须符合《实验室质量管理规范》和《生物安全守则》的规定。操作时必须戴手套、穿工作衣，严格执行消毒隔离制度。所有样品、废液、废弃物都应按污物处理程序进行。
ABO血型反定型试剂红细胞配制（SOP）
1．目的
规范ABO血型反定型检测试剂红细胞配制的操作，以保证该实验在工作中能够正常进行，确保检测结果的准确性。
2样。
2.2科主任监督该规程的执行。
3．适用范围
本规程适用于中心血库检验室ABO血型反定型检测试剂红细胞配制的操作工作。
4.材料与设备
5.1注射器
5.2试管
5.3离心机
注：ISO2000不允许从血袋的小辫上留取红细胞样本。
6.检测环境
6.1温度：23-27℃
6.2相对湿度：30-70%
7．方法步骤
7.1选取的样本分别定型并且准确无误。
7.2选取每型至少10人份的同型细胞等量混合，越多越好。
7.3用足量的生理盐水至少洗三遍，最后一遍压积必须扣干。
9.2应严格按照以上操作步骤进行。
11质量记录
11.1《检验室污物处理记录》
11.2《试剂配制记录》

标准红细胞配置操作规程

标准红细胞配置操作规程标准红细胞用于测定ABO血型(反定型)，可以验证正定型结果的准确性，也可以纠正正定型时发生的错误，避免事的发生。

以下介绍标准红细胞的配置规程：1 搜集新鲜的A型、B型、O型血标本各3份以上。

最好是抗凝血，以便可以吸取较多的红细胞。

2 取三支洁净10cm×150mm试管标上“A”“B’’“O”等字样，根据平时工作量需要，分别将三份或以上A型血的适量红细胞吸入标有“A”字样的试管中。

B型、O型依次类推。

3 用生理盐水加入上述三支试管进行洗涤，洗涤时需加入生理盐水2／3 试管以上，并且要轻轻地充分摇匀，然后以3000转／rain离心5min，弃去上清液。

4 重复第3步骤三次，使红细胞充分洗清。

5 将上法取得的红细胞再用生理盐水配制成5％的红细胞悬液，每10ml加1滴甲醛溶液。

即得用于反定型的标准红细胞。

可在4"C冰箱中保存2w。

ABO-Rh正反定型血型定型操作规程

A B O-R h正反定型血型定型操作规程-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIANABO-Rh正反定型血型定型操作规程一、项目名称、检验方法名称1．项目名称：ABO-Rh正反定型血型定型2．检验方法名称：柱凝集二、方法学原理该试剂卡是基于柱凝集的原理而设计。

正常具有抗原的人红细胞将与相应的抗体发生凝集反应，BioVue血型诊断试剂卡的微柱中含有玻璃珠介质和试剂。

加入红细胞并将试剂卡离心后，发生凝集的红细胞会被阻挡在玻璃珠的上面，而未凝集的游离红细胞则会在离心力的作用下通过玻璃珠之间的间隙到达微柱的底部。

三、试剂卡品牌、代号、包装规格、内含物1．试剂卡品牌：美国强生奥索(Ortho-Clinical Diagnostica,Inc)2．代号：BioVue -ABO/Rh-Reverse3．包装规格：400卡/箱试剂卡（707100）；100卡/箱试剂卡（707155）4．试剂成分：BioVue ABO-Rh正反定型血型诊断试剂卡有6根微柱组成，每一柱中含有缓冲液，其成分为牛血清蛋白，大分子增强剂以及％叠氮钠，0.01M的EDTA.成分描述第一柱：抗－A试剂抗－A鼠单克隆(lgM)抗体混和；蓝色染料第二柱：抗－B试剂抗－B鼠单克隆(lgM)抗体混和；黄色染料第三柱：抗－D试剂（抗RH）抗－D人单克隆(lgM)抗体第四柱：质控优化增强剂，用于血型检测的质控对照第五，第六柱：反定型稀释液优化增强剂，用于反定型血型检测5．试剂的储存与效期：储存条件： 2～25℃环境中保存。

请勿将试剂存放在自动除霜的冰箱中，也不要冷冻保存。

并且不要放在离热源（如孵育箱、辐射器、大型设备、冰箱、冰柜等）很近或阳光直射的地方。

效期：试剂盒上有记载四、仪器品牌、型号BioVue专用离心机；BioVue专用孵育器五、样本的采集与准备：在采集标本前对病人/献血者无特殊要求，血液采集应符合相关的技术标准及管理规范。