ABO血型反定型操作步骤
S006红细胞ABO血型(反定型)鉴定标准化操作规程 (2)
红细胞ABO 血型（反定型）鉴定标准化操作规程一、目的为保证血液及血液成分的红细胞ABO 血型在临床上同型输注，确保临床输血安全、有效，根据《临床输血技术规范》第十五条特制定本标准化操作规程。
二、方法采用试管法检测红细胞ABO 血型（反定型）。
三、原理用已知的A1、B、O标准红细胞测定被检者血清中有无相应的抗A或抗B抗体，结合正定型结果判断ABO血型。
四、适用范围适用于输血前患者与献血者红细胞ABO血型(反定型)确认。
五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、试剂1、试剂名称：人ABO血型反定型用红细胞试剂盒；2、试剂生产厂家：上海血液生物医药有限公司；3、批准文号：国药准字S2*******；4、包装规格：A1、B、O试剂各1支，10ml/支；5、贮藏条件；2-8℃保存，不能冰冻。
6、有效期：自检定合格之日起2个月；7、试剂性能：外观、溶血率%、特异性、抗原性均符合检定规程要求。
七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。
2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。
3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。
4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。
八、操作步骤1、取10mmx60mm洁净小试管3支，分别标明A1型细胞、B型细胞、O型细胞，用滴管分别加入受检者血清1滴于试管，再分别用滴管加入A1、B、O型试剂红细胞悬液1滴。
2、，摇动试管，立即以1000rpm离心1min或3400rpm离心15s。
3．先观察是否有溶血，溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染；将试管轻轻摇晃，使沉于管底的红细胞浮起，观察细胞扣情况，并判断凝集强度（见下表）。
如肉眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。
红细胞ABO血型（反定型）结果凝集强度判断对照表红细胞凝集反应描述凝集强度镜下可见少数红细胞凝集，而绝大多数红细胞仍呈分散混合凝集外观分布溶血，上清液中有游离血红蛋白溶血红细胞凝集成一大块，血清清晰透明4+红细胞凝集成数小块，血清尚清晰3+红细胞凝块分散成许多小块，周围可见到游离红细胞2+肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞1+镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细±胞镜下未见凝集，红细胞均匀分布阴性4、ABO 血型（反定型）表现型反应格局表九、质量控制 1、对新进批号的试剂应作亲和力与效价验定。
ABO和RH血型鉴定操作规程4
ABO和RH（D）血型鉴定操作规程一、目的：规范ABO和RH(D)血型鉴定操作，保证临床用血的安全性及有效性。
二、适用范围：适用于血库ABO和RH（D)血型鉴定三、所需材料和设备:1、材料：抗—A、抗—B、抗—D试剂、A、B、O型反定型试剂红细胞,生理盐水，滴管，患者标本。
2、设备：离心机，显微镜.四、操作规程1、试管法:（1）取洁净试管3支，分别标明抗A、抗B及抗D,分别加入抗A、抗B及IgM抗D 单克隆血清各1滴于试管底部，再用滴管分别加入受检者5％红细胞生理盐水悬液1滴,轻摇混匀。
（2）另取洁净试管3支，分别标明A、B和O，用滴管分别加入受检者血浆1滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B和O型5％试剂红细胞悬液1滴,轻摇混匀。
（3）立即以1000r/min离心1分钟后将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(溶血）现象。
如肉眼不见凝集,应将反应物取置于玻片上，再以低倍显微镜检查。
（4）观察结果时既要看有无凝集,更要注意凝集强度，有助于A、B亚型,类B或嵌合体血型的发现。
2、玻片法：(1) 取血型鉴定专用玻璃板一块，在凹孔旁分别标明抗A、抗B及抗D，分别加入抗A、抗B及抗D单克隆血清1滴，再各加受检者5%红细胞悬液1滴,混匀。
(2）标明A、B及O细胞，分别加入受检者血浆1滴,再各加入A、B及O型试剂红细胞悬液1滴，混匀.（3）轻轻转动玻板，使血清与红细胞充分混匀,连续15分钟以肉眼观察有无凝集(溶血)反应。
有需要时也可用低倍显微镜观察结果.(4) Rh（D）血型鉴定时应作阳性对照及阴性对照。
3、结果判断:4、凝集强度判断:4+ 红细胞凝集成一大块，背景清晰透明；3+ 红细胞凝集成数小块，背景尚清晰;2+ 红细胞凝块分散成许多小块,背景可见到游离红细胞；1+ 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞；+—镜下可见数个红细胞凝集在一块，周围有许多游离红细胞；混合外观凝集是指镜下可见少数红细胞凝集，而绝大多数红细胞仍分散分布；-阴性镜下未见凝集，红细胞均匀分布.5、报告实验结果，并保存受检标本：一般保存一周以上6、注意事项6。
新编O血型鉴定正反定型试验方法
新编O血型鉴定正反定型试验方法集团公司文件内部编码：（TTT-UUTT-MMYB-URTTY-ITTLTY-A B O血型鉴定正反定型试验方法一、试剂和材料：（一）单克隆抗A、抗B试剂（由试剂厂家提供）（二）显微镜、载玻片（三）A型、B型红细胞（本实验室制备的5%混悬液）（四）EDTA抗凝的待测红细胞全血（五）竹签二、方法（玻片法）：（一）正定型：1.在一块干净的玻片上，间隔一定距离做好标记，分别滴一滴抗A和抗B试剂；2.在每滴试剂中加一滴待测红细胞全血；3.用竹签混匀试剂和红细胞，并使混合物直径＞15mm；4.轻摇玻片，两分钟内观察结果，必要时可以在低倍镜下观察；5.判读、解释并记录反应结果。
（二）反定型：1.在玻片上间隔一定距离标明Ac和Bc字样。
分别滴加5%的A型红细胞悬液、B型红细胞悬液各一滴；2.在玻片每滴红细胞悬液上滴加待测血清各一滴；3.混匀（同正定型）；4.轻摇玻片，两分钟内观察结果，必要时可以在低倍镜下观察；5.判读、解释并记录反应结果。
6.结合正反定型反应结果、判定血型，见表1表1ABO血型正反定型试验结果判定三、附注：（一）表中“O”表示无凝集，“+”表示凝集，一般都是3-4个+的强凝集反应；（二）2分钟后红细胞仍呈均匀混悬状态是阴性反应；（三）若得到弱的或可凝集反应结果，该标本应用试管法重新试验；（四）由于新生儿在出生4~6个月内，血浆中的ABO抗体活动太弱，并且含有来自母亲的抗体，故新生儿血型只能由检测红细胞抗原的正定型来测定其ABO血型；（五）做正定型时，还可加一抗A、B血清（O型人血清），以检测ABO弱抗原；做反定型时可以加试一O型红细胞，借以证实是否有不规则抗体的存在。
ABO血型鉴定正反定型试验方法
ABO血型鉴定正反定型试验方法正定型试验是通过将被测血清与已知的A和B抗原的红细胞混合反应来确定被测血型。
具体步骤如下：1.准备供试者的血液样本。
采集一个血液样本，可以是静脉血或者指尖血。
2.分别将供试者的血液样本分为两个离心管中。
在两个离心管中加入等量的稀释液，使血液与稀释液比例为1：2，充分混合。
3.在一个离心管中加入已知含有A抗原的红细胞悬液，同时在另一个离心管中加入已知含有B抗原的红细胞悬液。
充分混合。
4.将两个离心管分别离心，离心后可观察到两个离心管中红细胞的沉淀情况。
5.如果被试者的血清与含有A抗原的红细胞混合后沉淀，说明被试者具有B血型。
如果与含有B抗原的红细胞混合后沉淀，说明被试者具有A 血型。
如果与两者都沉淀，说明被试者具有AB血型。
如果与两者都未发生沉淀，说明被试者具有O血型。
反定型试验是通过将被测血清与已知的A和B型抗体的红细胞混合反应来确定被测血型。
具体步骤如下：1.准备供试者的血液样本。
采集一个血液样本，可以是静脉血或者指尖血。
2.分别将供试者的血液样本分为两个离心管中。
在一个离心管中加入已知含有A型抗体的红细胞悬液，同时在另一个离心管中加入已知含有B 型抗体的红细胞悬液。
充分混合。
3.将两个离心管分别离心，离心后可观察到两个离心管中红细胞的沉淀情况。
4.如果被试者的血清与含有A型抗体的红细胞混合后沉淀，说明被试者具有B血型。
如果与含有B型抗体的红细胞混合后沉淀，说明被试者具有A血型。
如果与两者都沉淀，说明被试者具有AB血型。
如果与两者都未发生沉淀，说明被试者具有O血型。
在正定型试验和反定型试验中，如果在任意一次实验中发生了沉淀反应，就能确定被试者的血型。
如果在正定型试验和反定型试验中都未发生沉淀反应，则需要重新进行试验或者采用其他额外的手段来鉴定个体的血型。
需要注意的是，血型鉴定是一种简单、安全、快速且可靠的方法，但在特殊情况下，如婴儿出生后的一段时间内，由于母婴免疫传递可以导致血型存在变化。
S006红细胞ABO血型(反定型)鉴定标准化操作规程
红细胞ABO血型（反定型）鉴定标准化操作规程一、目的为保证血液及血液成分的红细胞ABO血型在临床上同型输注，确保临床输血安全、有效，根据《临床输血技术规范》第十五条特制定本标准化操作规程。
二、方法采用试管法检测红细胞ABO血型（反定型）。
三、原理用已知的A1、B、O标准红细胞测定被检者血清中有无相应的抗A或抗B抗体，结合正定型结果判断ABO血型。
四、适用范围适用于输血前患者与献血者红细胞ABO血型(反定型)确认。
五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、试剂1、试剂名称：人ABO血型反定型用红细胞试剂盒；2、试剂生产厂家：上海血液生物医药有限公司；3、批准文号：国药准字S2*******；4、包装规格：A1、B、O试剂各1支， 10ml /支；5、贮藏条件；2-8℃保存，不能冰冻。
6、有效期：自检定合格之日起2个月；7、试剂性能：外观、溶血率%、特异性、抗原性均符合检定规程要求。
七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。
2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。
3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。
4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。
八、操作步骤1、取10mmx60mm洁净小试管3支，分别标明A1型细胞、B型细胞、O型细胞，用滴管分别加入受检者血清1滴于试管，再分别用滴管加入A1、B、O型试剂红细胞悬液1滴。
2、，摇动试管，立即以1000rpm离心1min或3400rpm离心15s。
3．先观察是否有溶血，溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染；将试管轻轻摇晃，使沉于管底的红细胞浮起，观察细胞扣情况，并判断凝集强度（见下表）。
如肉眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。
红细胞ABO血型（反定型）结果凝集强度判断对照表4、ABO血型（反定型）表现型反应格局表九、质量控制1、对新进批号的试剂应作亲和力与效价验定。
ABO血型鉴定正反定型试验方法
ABO血型鉴定正反定型试验方法正定型试验方法：1.准备试验所需材料：A、B和O型血浆，还原血红蛋白（RBCs），生理盐水（PBS）和试管。
2.在试管中加入一定量的PBS。
3.取一滴A型血浆滴在PBS中的一根试管中，取另一滴B型血浆滴在PBS中的另一根试管中，取一滴O型血浆滴在PBS中的另一根试管中。
4.在每个试管中分别加入一滴RBCs。
5.轻轻摇晃每个试管，观察RBCs和血浆的反应。
反定型试验方法：1.准备试验所需材料：A、B和O型RBCs，A和B型血浆，抗人类血球定向凝集试验（AHG试剂），患者的血清和试管。
2.在试管中加入一定量的患者血清。
3.取一滴A型RBCs滴在血清中的一根试管中，取另一滴B型RBCs滴在血清中的另一根试管中，取一滴O型RBCs滴在血清中的另一根试管中。
4.分别制备三个试管，将A、B和O型RBCs与患者的血清混合。
5.将三个试管分别加入AHG试剂。
6.轻轻摇晃每个试管，观察RBCs和血清的反应。
分析结果：正定型试验的结果是通过观察每个试管中RBCs与血浆的反应来确定的。
如果A型血浆与A型RBCs在试验中凝集，B型血浆与B型RBCs在试验中凝集，而O型血浆不与任何RBCs发生凝集，则可以初步断定该患者的血型是A型、B型或O型。
反定型试验的结果是通过观察每个试管中RBCs与患者血清和AHG试剂的反应来确定的。
如果A型RBCs与患者血清和AHG试剂在试验中凝集，B型RBCs与患者血清和AHG试剂在试验中凝集，而O型RBCs与患者血清和AHG试剂不发生凝集，则可以最终确定该患者的血型。
总结：。
ABO血型反定型操作步骤
ABO血型反定型操作步骤
【检验方法】
一试管法：
1 取被检查者血清（或血浆）各1滴（50ul ）分别加入3支标记好的小试管中；
2 分别各加1滴(50ul )A1,B,O试剂红细胞；
3 摇动试管，离心，速度和时间可选以下二种之一；
A）转速1000rpm, 时间1分钟；
B）转速3400rpm, 时间15秒；
4 先观察是否溶血（溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染），然后轻轻摇晃，使细胞再悬浮起来；
5 观察凝集状况，并立即记录结果。
二微量板法
1在U型板三个孔内分别加入25--30ul的被检查血清（血浆）；
2 每孔内分别加入与血清的等量的A1，B,O试剂红细胞；
3 混匀（手工振动混匀或机器混匀）；
4 离心，转速2000rpm，时间30秒（650G）
注：不同的离心机，不同的微量板所需要的离心条件有所区别，正确实验的结果需要适当的离心，反应板应产生清晰的细胞扣及透亮的上清液。
5 检测溶血情况（溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染）；
6 用振荡仪振动微量板，振动能使阳性反应出现凝集的细胞扣，而若是阴性反应很快则细胞扣消除；
7 记录结果，亦可使用酶标读数仪，与电脑连接可实现自动化检测。
【检验结果的解释】
ABO血型表现型反应格局表
正定型反定型血型
抗A试剂抗B试
剂A 细胞 B 细
胞
O 细
胞
+ - - + - A - + + - - B - - + + - O + + - - - AB。
ABO-Rh正反定型血型定型操作规程
ABO-Rh正反定型血型定型操作规程一、项目名称、检验方法名称1．项目名称：ABO-Rh正反定型血型定型2．检验方法名称：柱凝集二、方法学原理该试剂卡是基于柱凝集的原理而设计。
正常具有抗原的人红细胞将与相应的抗体发生凝集反应，BioVue血型诊断试剂卡的微柱中含有玻璃珠介质和试剂。
加入红细胞并将试剂卡离心后，发生凝集的红细胞会被阻挡在玻璃珠的上面，而未凝集的游离红细胞则会在离心力的作用下通过玻璃珠之间的间隙到达微柱的底部。
三、试剂卡品牌、代号、包装规格、内含物1．试剂卡品牌：美国强生奥索(Ortho-Clinical Diagnostica,Inc)2．代号：BioVue -ABO/Rh-Reverse3．包装规格：400卡/箱试剂卡（707100）；100卡/箱试剂卡（707155）4．试剂成分：BioVue ABO-Rh正反定型血型诊断试剂卡有6根微柱组成，每一柱中含有缓冲液，其成分为牛血清蛋白，大分子增强剂以及0.1％叠氮钠，0.01M的EDTA.成分描述第一柱：抗－A试剂抗－A鼠单克隆(lgM)抗体混和；蓝色染料第二柱：抗－B试剂抗－B鼠单克隆(lgM)抗体混和；黄色染料第三柱：抗－D试剂（抗RH）抗－D人单克隆(lgM)抗体第四柱：质控优化增强剂，用于血型检测的质控对照第五，第六柱：反定型稀释液优化增强剂，用于反定型血型检测5．试剂的储存与效期：储存条件： 2～25℃环境中保存。
请勿将试剂存放在自动除霜的冰箱中，也不要冷冻保存。
并且不要放在离热源（如孵育箱、辐射器、大型设备、冰箱、冰柜等）很近或阳光直射的地方。
效期：试剂盒上有记载四、仪器品牌、型号BioVue专用离心机；BioVue专用孵育器五、样本的采集与准备：在采集标本前对病人/献血者无特殊要求，血液采集应符合相关的技术标准及管理规范。
含有或不含有抗凝剂的标本均可使用。
标本采集后应尽快进行检测。
如果实验不能立即进行，应将标本置于2－8℃保存。
ABO-Rh正反定型血型定型操作规程
A B O-R h正反定型血型定型操作规程-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIANABO-Rh正反定型血型定型操作规程一、项目名称、检验方法名称1．项目名称：ABO-Rh正反定型血型定型2．检验方法名称：柱凝集二、方法学原理该试剂卡是基于柱凝集的原理而设计。
正常具有抗原的人红细胞将与相应的抗体发生凝集反应，BioVue血型诊断试剂卡的微柱中含有玻璃珠介质和试剂。
加入红细胞并将试剂卡离心后，发生凝集的红细胞会被阻挡在玻璃珠的上面，而未凝集的游离红细胞则会在离心力的作用下通过玻璃珠之间的间隙到达微柱的底部。
三、试剂卡品牌、代号、包装规格、内含物1．试剂卡品牌：美国强生奥索(Ortho-Clinical Diagnostica,Inc)2．代号：BioVue -ABO/Rh-Reverse3．包装规格：400卡/箱试剂卡（707100）；100卡/箱试剂卡（707155）4．试剂成分：BioVue ABO-Rh正反定型血型诊断试剂卡有6根微柱组成，每一柱中含有缓冲液，其成分为牛血清蛋白，大分子增强剂以及％叠氮钠，0.01M的EDTA.成分描述第一柱：抗－A试剂抗－A鼠单克隆(lgM)抗体混和；蓝色染料第二柱：抗－B试剂抗－B鼠单克隆(lgM)抗体混和；黄色染料第三柱：抗－D试剂（抗RH）抗－D人单克隆(lgM)抗体第四柱：质控优化增强剂，用于血型检测的质控对照第五，第六柱：反定型稀释液优化增强剂，用于反定型血型检测5．试剂的储存与效期：储存条件： 2～25℃环境中保存。
请勿将试剂存放在自动除霜的冰箱中，也不要冷冻保存。
并且不要放在离热源（如孵育箱、辐射器、大型设备、冰箱、冰柜等）很近或阳光直射的地方。
效期：试剂盒上有记载四、仪器品牌、型号BioVue专用离心机；BioVue专用孵育器五、样本的采集与准备：在采集标本前对病人/献血者无特殊要求，血液采集应符合相关的技术标准及管理规范。
ABORHD血型定型检测试剂卡操作步骤
ABO/RHD血型定型检测试剂卡操作步骤
1、ABO/RhD血型定型检测试剂卡有六个凝胶管。
其中第一管为抗A凝胶，
第二管为抗B凝胶，第三管为抗D凝胶，第四至第六管为中性胶。
2、用生理盐水将待检者压积红细胞配置成0.8~1%浓度，分别加入第一至
第三管和第六管微管中，每管50ul。
3、将A型、B型反定型红细胞试剂用生理盐水配置成0.8~1%浓度，分别
加入到第四、第五管微管中，每管50ul。
4、将待检者血浆分别加入第四至第六微管中，每管25ul。
5、混匀后置专用离心机离5分钟。
6、离心结束后，取出观察判定结果并记录。
【阳性判断值】阳性结果反应强度：红细胞位于胶表面为4+强阳性反应。
红细胞悬浮在胶中为1+~3+弱阳性反应，越靠近胶底部颗粒越小。
红细胞全部沉积在微管底部为阴性。
ABO和Rh (D) 血型鉴定操作规程(盐水法)
ABO和Rh (D）血型鉴定操作规程（盐水法）一．目的规范ABO/Rh （D) 血型鉴定的操作流程;保证临床用血的安全性及有效性。
二．职责血库技术人员负责ABO和Rh (D）血型鉴定。
三．适用范围适用于血库ABO和Rh（D）血型鉴定血标本。
四．所需材料和设备1。
材料抗—A、抗—B、抗—D试剂、A、B、O型反定型试剂红细胞、生理盐水、小试管、滴管、患者血标本。
2.设备普通离心机、显微镜、血型血清学专用离心机。
五．操作步骤1。
将标本2000r/分钟离心2分钟,使标本血浆/血清与红细胞分离，并吸取红细胞配制3％悬液。
2。
取小试管3支，分别标明-A、抗-B、抗-D，用滴管分别加抗—A、抗—B、抗—D试剂各2滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者3％红细胞悬液1滴，混匀。
3.另取小试管3支,分别标明A、B、O细胞，用滴管分别加入受检者血清2滴于试管底部,再分别以滴管加入3% A、B、O型试剂红细胞悬液1滴，混匀.4。
以1000r/分钟离心1分钟.5。
将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集（或溶血）现象,如肉眼不见凝集,应将反应物倒在玻片上，再以显微镜检查。
6. ABO血型结果判定（见下表)：ABO血型结果判断分型试剂+受检者红细胞（正定型）受检者血清+试剂红细胞(反定型）抗-A 抗—B A细胞 B细胞 O细胞血型注:“＋" 凝集；“－" 不凝集7.Rh（D）血型判定: 红细胞与抗-D试剂凝集为Rh (D) 阳性无凝集为Rh阴性。
8.凝集强度判断标准：4+ 红细胞凝集成一大块，背景清晰透明；3+ 红细胞凝集成数小块，背景尚清晰；2+ 红细胞凝块分散成许多小块,背景可见到游离红细胞；1+ 肉眼可见大颗粒,周围有较多游离红细胞；±镜下可见数个红细胞凝集在一块，周围有许多游离红细胞；混合外观凝集(Mixed Field， MF）是指镜下可见少数红细胞凝集，而绝大多数红细胞仍分散分布;－（阴性）镜下未见凝集,红细胞均匀分布。
ABO血型反定型试剂红细胞配制(SOP)
7.5悬浮在含有葡萄糖等保存液的抗凝剂中。
9．注意事项
9.1特异性鉴定，阴性必须在显微镜下观察，包括红细胞形态。
9.2每次使用前必须观察溶血现象，并配制成5％左右的红细胞悬液。
9.3不使用时必须4℃保存。
9.4配制必须符合《实验室质量管理规范》和《生物安全守则》的规定。操作时必须戴手套、穿工作衣，严格执行消毒隔离制度。所有样品、废液、废弃物都应按污物处理程序进行。
Байду номын сангаасABO血型反定型试剂红细胞配制（SOP）
1．目的
规范ABO血型反定型检测试剂红细胞配制的操作，以保证该实验在工作中能够正常进行，确保检测结果的准确性。
2．职责
2.1操作者负责试验操作，并作好相关记录及留样。
2.2科主任监督该规程的执行。
3．适用范围
本规程适用于中心血库检验室ABO血型反定型检测试剂红细胞配制的操作工作。
9.2应严格按照以上操作步骤进行。
11质量记录
11.1《检验室污物处理记录》
11.2《试剂配制记录》
4.材料与设备
5.1注射器
5.2试管
5.3离心机
注：ISO2000不允许从血袋的小辫上留取红细胞样本。
6.检测环境
6.1温度：23-27℃
6.2相对湿度：30-70%
7．方法步骤
7.1选取的样本分别定型并且准确无误。
7.2选取每型至少10人份的同型细胞等量混合，越多越好。
7.3用足量的生理盐水至少洗三遍，最后一遍压积必须扣干。
abo正反定型操作流程
abo正反定型操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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abo正反定型操作步骤
abo正反定型操作步骤一、概述ABO血型正反定型操作是确定个体血型的重要方法，主要基于红细胞凝集实验和酶法鉴定原理。
本操作步骤将详细介绍正反定型的全过程，包括试剂和器材的准备、取样、标记、红细胞悬液制备以及结果观察等。
二、血型鉴定原理1.红细胞凝集实验：利用不同血型抗原抗体反应的原理，通过观察红细胞是否凝集来判断血型。
2.酶法鉴定：通过酶处理红细胞表面的抗原，使其性质发生改变，再与相应抗体结合，从而确定血型。
三、正定型操作步骤1.准备试剂和器材：准备好抗A、抗B标准血清、已知A、B型标准红细胞、受检者血液样本等。
同时需要准备的器材包括显微镜、离心机、滴管等。
2.取样：从受检者体内抽取适量血液样本。
3.标记试剂：分别标记抗A、抗B标准血清，便于后续观察。
4.红细胞悬液制备：将受检者血液样本与已知A、B型标准红细胞分别制备成红细胞悬液。
5.观察结果：将标记好的抗A、抗B标准血清分别与受检者红细胞悬液混合，观察是否发生凝集反应。
根据凝集反应的情况判断受检者的血型。
四、反定型操作步骤1.准备试剂和器材：准备好已知A、B型标准血清、受检者血液样本等。
同时需要准备的器材包括显微镜、离心机、滴管等。
2.取样：从受检者体内抽取适量血液样本。
3.标记抗体：分别标记已知A、B型标准血清，便于后续观察。
4.细胞悬液制备：将受检者血液样本制备成红细胞悬液。
5.观察结果：将标记好的已知A、B型标准血清与受检者红细胞悬液分别混合，观察是否发生凝集反应。
根据凝集反应的情况判断受检者的血型。
五、结果判断与分析根据正反定型的结果，综合判断受检者的血型。
若正反定型结果不一致，可能存在异型输血、血型变异或实验室误差，需进一步核实。
六、注意事项1.所有试剂和器材必须清洁无菌，避免污染。
2.取样时应注意安全，防止交叉感染。
3.操作过程中应严格遵守无菌操作规程，避免人为污染。
4.观察结果时，应仔细辨别红细胞凝集情况，避免误判。
ABO血型鉴定的标准操作程序
ABO血型鉴定的标准操作程序【目的】用于ABO血型的鉴定。
【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报请专业组长及科主任签字后生效。
【方法原理】根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原，将血型分为A型，B型，AB型及O型4种。
可利用红细胞凝集实验，通过正，反定型准确鉴定ABO血型，正定型：是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原；反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗A或/和抗B。
【样本要求】毛细血管血或血常规真空采血管抗凝血（内有EDTA-K2抗凝剂）；婴幼儿可采用颈外静脉，用抽完后立即混匀，防止标本凝固。
【试剂】1、抗A、抗B血型定型试剂，上海血液生物医药有限责任公司生产2、A、B及O型红细胞悬液试剂，上海血液生物医药有限责任公司生产【操作程序】1、试管法1.1取洁净小试管2支，分别标明抗A、抗B，用滴管分别加抗A、抗B。
分型血清各1滴于试管底部，再分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴，混匀。
1.2另取洁净小试管2支，分别标明A、B细胞。
分别加入受检者血清1滴于试管部，再分别加入A、B型5%试剂红细胞悬液1滴，混匀。
1.3 立即以 10r/min 离心 1min。
1.4将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集，如肉眼未见凝集，应将反应倒于玻片上，再以低倍镜检查。
1.5观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度。
1.6凝集强度判断标准：4+红细胞凝集成一大块，血清清晰透明3+红幼儿凝集成数小块，血清尚清晰2+红细胞凝块分散成许多小块，周围可见游离红细胞1+肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞士镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞MF即混合外观(mixed field )，指镜下可见少数红细胞凝集，而绝大多数红细胞仍呈分散分布- 阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。
1.7按表报告受检者红细胞ABO血型。
对ABO血型鉴定正反定型不符标准操作规程的建立及探讨
对ABO血型鉴定正反定型不符标准操作规程的建立及探讨ABO血型鉴定是临床血型鉴定中必不可少的部分。
准确的ABO血型鉴定结果对于输血、器官移植等临床操作具有重要意义。
正反定型不符是指血型鉴定的阴、阳性反应不能直接对应，这种情况可能会对临床诊断和治疗带来风险。
因此，建立并完善ABO血型鉴定正反定型不符标准操作规程是非常重要的。
一、建立标准操作流程1.标本采集和保存：采集新鲜的全血标本，并使用抗凝剂稳定血细胞。
2.血型鉴定试剂准备：准备正、反血型鉴定试剂，确保试剂在保质期内并适当储存。
3.正定型操作：将待测血清与正血型鉴定试剂混合，在37摄氏度下孵育，根据试剂说明书进行判读，记录结果。
4.反定型操作：将待测红细胞与反血型鉴定试剂混合，在37摄氏度下孵育，根据试剂说明书进行判读，记录结果。
5.结果解读：根据正、反定型试剂的判读结果，确定待测血型。
二、探讨正反定型不符的原因1.血型抗体：正反定型不符可能是由于患者血液中存在一些非ABO抗体引起的。
这些抗体可能是自然存在的，也可能是由于输血或妊娠等因素而导致的。
2.检测方法：检测方法的不准确或不规范也可能导致正反定型不符。
例如，试剂配制不当、试剂储存不当、操作人员技术不熟练等情况都可能影响结果准确性。
3.标本问题：标本质量差、污染或保存不当也可能导致不符结果。
因此，在标本采集和保存上需要严格控制。
三、对正反定型不符的处理1.重新操作：如果正反定型不符，可以尝试重新操作，确保操作的准确性和标本的质量。
2.进一步检测：对于较为复杂的正反定型不符情况，可以进行进一步的检测，如使用更敏感的试剂或进行酶解试验、直接抗人球蛋白试验等。
3.抗体鉴定：如果正反定型不符，可以对患者的血清进行抗体鉴定，以寻找可能存在的异常抗体。
四、实施质量控制措施1.核对操作：在操作过程中，需要进行核对，确保正确操作。
2.质控样本：使用质控样本进行质量控制，确保试剂和操作的准确性。
3.参与外部质量控制：参与外部质量控制活动，与其他实验室比对结果，提高实验室水平。
血型反定型实验报告
血型反定型实验报告引言血型反定型是一种常见的实验方法，用于确定血液中是否存在特定的抗原和抗体。
在人类血型系统中，A和B两种主要抗原与相应的抗体反应，有四种血型：A型、B型、AB型和O型。
本实验旨在通过血型反定型实验确定样品中的主要抗原和抗体之间的反应。
材料与方法材料：- 姓氏为张的A型血液样本- 姓氏为李的B型血液样本- 姓氏为王的AB型血液样本- 姓氏为赵的O型血液样本- A抗体试剂- B抗体试剂- 嗜碱性物质：酒精- 手套- 玻璃滴管- 玻璃试管- 显微镜和载玻片方法：1. 戴上手套，准备玻璃滴管和玻璃试管。
2. 使用玻璃滴管，分别将姓氏为张、李、王和赵的血液样本，分别滴入四个不同玻璃试管中。
3. 在三个试管中添加相应的抗体试剂，其中一个试管仅加入生理盐水作为阴性对照。
4. 将试管轻轻摇匀，确保血液样本与抗体试剂充分混合。
5. 使用玻璃滴管，从每个试管中取出一滴混合液，滴到不同的载玻片上。
6. 添加一滴酒精到每个载玻片上，使血液样本充分接触酒精。
7. 使用显微镜，观察每个载玻片中血液样本的凝集反应情况，并记录。
结果观察到的实验结果如下：实验样本A抗体试剂B抗体试剂反应结果- :-: : -:姓氏为张的血液样本+ - 凝集姓氏为李的血液样本- + 凝集姓氏为王的血液样本+ + 无凝集姓氏为赵的血液样本- - 无凝集分析与讨论根据实验结果可以得出以下结论：- 姓氏为张的血液样本对A抗体试剂呈现凝集反应，说明该血液样本中存在A 抗原。
- 姓氏为李的血液样本对B抗体试剂呈现凝集反应，说明该血液样本中存在B 抗原。
- 姓氏为王的血液样本对A和B抗体试剂均没有凝集反应，说明该血液样本中既不存在A抗原，也不存在B抗原，符合AB血型。
- 姓氏为赵的血液样本对A和B抗体试剂均没有凝集反应，说明该血液样本中既不存在A抗原，也不存在B抗原，符合O血型。
通过本实验可以准确确定血液样本的血型类型，为输血和器官移植等医疗操作提供了重要的依据。
输血科ABO血型鉴定操作规程
ABO血型鉴定标准操作规程【目的】正确鉴定血型，保障患者的输血安全。
【范围】所有送检需要鉴定ABO血型的标本。
【职责】配发血室负责临床患者的血型鉴定。
【原理】根据ABO血型分类原则，即红细胞上带有什么抗原就称什么血型、同一个体内抗原与抗体互补。
根据含某抗原的红细胞与含相应抗体的血清混合可使红细胞发生凝集，反之不发生凝集的原理，利用分型血清或分型红细胞鉴别血型，前者称为正定型（又称红细胞定型），后者称为反定型（又称血清定型）。
通过正反定型可准确鉴别ABO血型。
【标本采集和处理】1、标本采集：EDTA-K2或EDTA-K3抗凝静脉血2mL。
标本保存：室温放置不超过6小时，4℃保存不超过72小时，无溶血,无凝块及明显乳糜。
【设备与试剂】1、人ABO血型反定型用红细胞试剂盒①包装规格：每盒内装有Al,B,0试剂各1支，IOml/支②主要组成成分：Al型、B型、。
型红细胞。
③储存条件及有效期：2-8°C储存，不能冰冻；有效期2个月。
2、ABO>RhD血型检测卡（微柱凝胶）①包装规格：2人份/卡，12卡/盒。
②储存条件及有效期：18-25℃避光保存，自检定合格之日起12个月。
3、抗A抗B血型定型试剂（单克隆抗体）①包装规格：10ml。
②储存条件及有效期：2-8℃避光保存；储存条件下有效期为24个月。
4、红细胞悬液：取标本离心后压积红细胞与生理盐水配制（试管法为3%-5%；微柱凝胶法为0∙5%-0∙8%）.5、BaSo2005-2>BaSo2002-2型医用低速离心机：珠海贝索生物技术有限公司。
6、TD-3A型血型血清学用离心机：长春博研科学仪器有限责任公司。
【操作步骤】1、试管法①正定型：a）取洁净小试管（内径IOnIm义60mm）3支，分别标明抗-A,抗-B。
b）抗-A,抗-B管中分别按标记加入相应抗体血清1滴，并加入受检者3%~5%红细胞悬液1滴，混匀。
c）放入BaSo2002-2型离心机以3400r∕min离心15秒。