ABO血型反定型试剂红细胞配制(SOP)

ABO血型反定型操作规程

宁晋县中西医结合医院ABO血型反定型操作规程
一．项目名称ABO 血型反定型
二．方法试管法
三．检验原理用已知的A1、B、O红细胞测定被检者血清中有无相应的抗A或抗B抗体，结合正定型结果判断ABO血型。

四．试剂上海血液生物医药有限公司
A1型、B型、O型红细胞
五．仪器离心机
六．标本采集采集受检者不抗凝或EDTA抗凝的全血2-3ml，分离血清或血浆
七．操作：
1 取试管3支，用记号笔分别标注A1、B、O。

2 在3支标记好的试管中各加入受检者血清（或血浆）各一滴（50ul）。

3 在3支试管中分别加入A1、B、O 试剂红细胞一滴（50ul）。

4 轻摇试管，均匀。

用离心机3400转离心15秒。

5 先观察是否溶血（溶血可能是阳性结果，或是细菌污染），然后轻轻摇晃，使
细胞再悬浮起来。

6 观察凝集情况，并记录结果。

八．检验结果的解释
ABO血型表现型反应格局表
正定性反定型
血型
抗A试剂抗B试剂A细胞B细胞O细胞
+ - - + - A
- + + - - B
- - + + - O
+ + - - - AB
九．检验方法的局限性
本实验必须与正定性一起进行。

单独反定型结果不能作为判断血型的依据。

十．注意事项
如果在反定型实验中，受检者的血清或血浆与O型红细胞试剂产生阳性反应，则需要添加自身对照实验。

如果自身对照为阳性，表明是自身冷凝集素导致。

如果自身对照为阴性，则表明被检者血清或血浆中可能存在ABO系统以外的其他系统抗体干扰定型。

检验科ABO及RH血型标准操作规程

检验科ABO及RH血型标准操作规程1.【目的】确保红细胞ABO及RH(D)血型鉴定试验的准确性，防止误定型，特制定本规程。

2.【职责】2.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

2.2本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。

3.【样本类型及实验前准备】3.1样本类型：EDTA -K2抗凝管采集血液2ml (标本应新鲜，注意避免污染)3.2患者准备：患者处于安静状态精神、体力、情绪等因素的影响较小。

3.3容器添加剂类型：EDTA -K2抗凝管3.4实验试剂：1.ABO： 1. 1抗A、抗B和抗AB血型定型试剂。

1.25%A、B及O型试剂红细胞悬液。

1.3受检者血清。

1.4受检者5%红细胞盐水悬液。

2.RH 2.1IgG型抗D标准血清。

2.25%D阳性红细胞生理悬液。

2.3 5%D阴性红细胞生理悬液。

4.【测定原理】ABO血型鉴定：生理盐水凝集法一试管法常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的情况判定血型。

常用的方法有：①正向定型：用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。

②反向定型：用已知血型的标准红细胞检查血清中的未知抗体。

结果判定：凡红细胞出现凝集者为阳性，呈散在游离状态为阴性。

RH鉴定：红细胞RH表型可用特殊的具有抗D、C、c、E和e抗血清来鉴定。

虽然Rh血型系不能在盐水介不能在盐水介质中与红统中有许多种抗原，但常规只用抗D血清检查有无D抗原。

Rh(D)抗体属于IgG类，细胞发生凝集，因此必须采用低离子强度盐水试验或酶介质法。

5.【操作步骤】ABO鉴定步骤：1.试管架每一竖排准备2只试管，分别为抗A，抗B试管。

2.标本接收后进行标号，对应相应的试管标号。

3.分别加入A，B型标准血清和受试者的红细胞悬液各两滴，混匀后离心2分钟。

4.取出试管后用手指轻弹试管底，若沉淀物成团漂起，表示发生凝聚现象；若试管内沉淀物恢复悬液状态，表示无凝集现象。

S006红细胞ABO血型(反定型)鉴定标准化操作规程 (2)

红细胞ABO 血型（反定型）鉴定标准化操作规程一、目的为保证血液及血液成分的红细胞ABO 血型在临床上同型输注，确保临床输血安全、有效，根据《临床输血技术规范》第十五条特制定本标准化操作规程。

二、方法采用试管法检测红细胞ABO 血型（反定型）。

三、原理用已知的A1、B、O标准红细胞测定被检者血清中有无相应的抗A或抗B抗体，结合正定型结果判断ABO血型。

四、适用范围适用于输血前患者与献血者红细胞ABO血型(反定型)确认。

五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、试剂1、试剂名称：人ABO血型反定型用红细胞试剂盒；2、试剂生产厂家：上海血液生物医药有限公司；3、批准文号：国药准字S2*******；4、包装规格：A1、B、O试剂各1支，10ml/支；5、贮藏条件；2-8℃保存，不能冰冻。

6、有效期：自检定合格之日起2个月；7、试剂性能：外观、溶血率%、特异性、抗原性均符合检定规程要求。

七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。

2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。

3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。

4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。

八、操作步骤1、取10mmx60mm洁净小试管3支，分别标明A1型细胞、B型细胞、O型细胞，用滴管分别加入受检者血清1滴于试管，再分别用滴管加入A1、B、O型试剂红细胞悬液1滴。

2、，摇动试管，立即以1000rpm离心1min或3400rpm离心15s。

3．先观察是否有溶血，溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染；将试管轻轻摇晃，使沉于管底的红细胞浮起，观察细胞扣情况，并判断凝集强度（见下表）。

如肉眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。

红细胞ABO血型（反定型）结果凝集强度判断对照表红细胞凝集反应描述凝集强度镜下可见少数红细胞凝集，而绝大多数红细胞仍呈分散混合凝集外观分布溶血，上清液中有游离血红蛋白溶血红细胞凝集成一大块，血清清晰透明4+红细胞凝集成数小块，血清尚清晰3+红细胞凝块分散成许多小块，周围可见到游离红细胞2+肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞1+镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细±胞镜下未见凝集，红细胞均匀分布阴性4、ABO 血型（反定型）表现型反应格局表九、质量控制 1、对新进批号的试剂应作亲和力与效价验定。

ABO血型反定型试剂红细胞配制(SOP)

7.4经多批次定型试剂鉴定确认血型无误方可使用，并作好明显标记。
7.5悬浮在含有葡萄糖等保存液的抗凝剂中。
9．注意事项
9.1特异性鉴定，阴性必须在显微镜下观察，包括红细胞形态。
9.2每次使用前必须观察溶血现象，并配制成5％左右的红细胞悬液。
9.3不使用时必须4℃保存。
9.4配制必须符合《实验室质量管理规范》和《生物安全守则》的规定。操作时必须戴手套、穿工作衣，严格执行消毒隔离制度。所有样品、废液、废弃物都应按污物处理程序进行。
ABO血型反定型试剂红细胞配制（SOP）
1．目的
规范ABO血型反定型检测试剂红细胞配制的操作，以保证该实验在工作中能够正常进行，确保检测结果的准确性。
2样。
2.2科主任监督该规程的执行。
3．适用范围
本规程适用于中心血库检验室ABO血型反定型检测试剂红细胞配制的操作工作。
4.材料与设备
5.1注射器
5.2试管
5.3离心机
注：ISO2000不允许从血袋的小辫上留取红细胞样本。
6.检测环境
6.1温度：23-27℃
6.2相对湿度：30-70%
7．方法步骤
7.1选取的样本分别定型并且准确无误。
7.2选取每型至少10人份的同型细胞等量混合，越多越好。
7.3用足量的生理盐水至少洗三遍，最后一遍压积必须扣干。
9.2应严格按照以上操作步骤进行。
11质量记录
11.1《检验室污物处理记录》
11.2《试剂配制记录》

操作规程(SOP)

ABO血型鉴定（正定型法）标准操作规程1.目的规范ABO鉴定实验，确保ABO血型鉴定结果的准确。

2.适用范围发血室，血型血清学实验室。

3.职责具有初级以上职称（检验），在血型鉴定和交叉配血工作岗位的工作人员有权执行本规程。

出现血型鉴定结果本人无法判定，不能发出实验结果时，应当向上一级职称的检验人员或直接向本部门负责人报告并寻求技术上指导和帮助。

4.监督交叉配血试验审核者及实验室负责人监督工作人员是否遵从此项规程。

5.原理根据IgM类特异性血型抗体与红细胞上特异性抗原结合能够出现凝集反应的原理，用已知IgM类特异性标准抗血清与被检红细胞在盐水介质中反应，若出现凝集现象，表明被检红细胞膜上有与血型抗体相对应的抗原，从而判断和鉴定被检者的血型。

6.材料（1）抗A、抗B血型定型试剂（单克隆抗体）规格：10ml/支保存：于2-8℃避光保存，有效期内使用效价：≥1﹕128包装：抗A抗B各一支/盒塑料瓶有效期：自成品鉴定合格之日起1年。

批准文号：国药准字S1*******厂商：长春博德生物技术有限责任公司（2）受检者3%-5%红细胞盐水悬液。

（3）经过校准的台式离心机。

7.操作5%被检红细胞生理盐水悬液制备；抗凝血离心或红细胞自然沉降后取下层红细胞2滴于小试管中，加入生理盐水2ml用尖滴管将红细胞与生理盐水充分混匀，2500r/min离心3min后弃去上清液，重复洗涤3次后，自管底吸取1滴压迹红细胞加入19滴生理盐水中，此即为5%的红细胞生理盐水悬液。

（1）平板法（玻片法）标记玻片或白瓷板取洁净的玻片或白瓷板1块，用蜡笔划出小格，做好编号标记抗A、抗B。

加标准抗血清在玻片或白瓷板已标记的区域内分别滴加抗A、抗B 标准抗血清1滴。

加被检红细胞悬液在滴加抗A、抗B标准抗血清的小格中分别加被检者5%的红细胞生理盐水悬液各1滴，不断摇动玻片或白瓷板，使血清与红细胞充分混匀，室温放置15-30min。

观察结果先轻轻摇动玻片，肉眼观察有无颗粒状凝集及凝集程度，再用低倍镜观察，判定阴阳性及阳性程度。

ABO血型鉴定正反定型试验方法

ABO血型鉴定正反定型试验方法正定型试验是通过将被测血清与已知的A和B抗原的红细胞混合反应来确定被测血型。

具体步骤如下：1.准备供试者的血液样本。

采集一个血液样本，可以是静脉血或者指尖血。

2.分别将供试者的血液样本分为两个离心管中。

在两个离心管中加入等量的稀释液，使血液与稀释液比例为1：2，充分混合。

3.在一个离心管中加入已知含有A抗原的红细胞悬液，同时在另一个离心管中加入已知含有B抗原的红细胞悬液。

充分混合。

4.将两个离心管分别离心，离心后可观察到两个离心管中红细胞的沉淀情况。

5.如果被试者的血清与含有A抗原的红细胞混合后沉淀，说明被试者具有B血型。

如果与含有B抗原的红细胞混合后沉淀，说明被试者具有A 血型。

如果与两者都沉淀，说明被试者具有AB血型。

如果与两者都未发生沉淀，说明被试者具有O血型。

反定型试验是通过将被测血清与已知的A和B型抗体的红细胞混合反应来确定被测血型。

具体步骤如下：1.准备供试者的血液样本。

采集一个血液样本，可以是静脉血或者指尖血。

2.分别将供试者的血液样本分为两个离心管中。

在一个离心管中加入已知含有A型抗体的红细胞悬液，同时在另一个离心管中加入已知含有B 型抗体的红细胞悬液。

充分混合。

3.将两个离心管分别离心，离心后可观察到两个离心管中红细胞的沉淀情况。

4.如果被试者的血清与含有A型抗体的红细胞混合后沉淀，说明被试者具有B血型。

如果与含有B型抗体的红细胞混合后沉淀，说明被试者具有A血型。

如果与两者都沉淀，说明被试者具有AB血型。

如果与两者都未发生沉淀，说明被试者具有O血型。

在正定型试验和反定型试验中，如果在任意一次实验中发生了沉淀反应，就能确定被试者的血型。

如果在正定型试验和反定型试验中都未发生沉淀反应，则需要重新进行试验或者采用其他额外的手段来鉴定个体的血型。

需要注意的是，血型鉴定是一种简单、安全、快速且可靠的方法，但在特殊情况下，如婴儿出生后的一段时间内，由于母婴免疫传递可以导致血型存在变化。

ABO血型鉴定SOP文件

ABO血型鉴定SOP文件1. 原理根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。

A型红细胞膜上含有A抗原，B型红细胞膜上含有B抗原，AB型红细胞膜上含有A、B抗原，抗A、抗B试剂是分别针对A抗原和B抗原的特异性抗体。

可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。

所谓正定型，是用已知的抗A、抗B试剂与受检者的红细胞混合时，与抗A试剂发生凝集者即为A 型，与抗B分型试剂发生凝集者即为B型，与抗A、抗B试剂均发生凝集者即为AB型，与抗A、抗B试剂均不凝集者即为O型。

所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗－A 或/和抗－B。

2. 标本采集2.1 标本种类：新抽取的抗凝血或手指末梢血和血清。

2.2 标本要求：2.2.1 抗凝剂：如用抗凝血，多主张用EDTA K2（㎎/dL）抗凝。

2.2.2 用手指末梢血作血型检测时，最少样品量为100ul，如手指有冻疮，则主张采耳垂血。

3. 标本储存：2小时内完成实验，室温放置下不超过8小时，4℃-8℃保存不超过48小时。

4. 标本运输：室温运输5. 标本拒收标准：细菌污染、溶血标本不能作测定6. 试剂6.1 试剂名称：ABO血型检测试剂6.2 试剂生产厂家：上海血液生物医药有限责任公司6.3 试剂组成试剂1：抗A分型试剂（蓝色），效价1：128，2℃-8℃避光保存，室温放置不宜过久。

试剂2：抗B分型试剂（黄色），效价1：128，2℃-8℃避光保存，室温放置不宜过久。

试剂3：5％A、B及O型红细胞盐水悬液，自制。

配制方法：分别采取已知A、B、O三种血型的红细胞，经盐水洗涤3次，以压积红细胞配成不同浓度的红细胞悬液。

红细胞悬液的配制悬液浓度（％）压积红细胞（滴）盐水（滴）2 5 10 20 11112ml（40）0.8ml（16）0.4ml（8）0.2ml（4）为了防止红细胞悬液敏感性不一致，可随机采取3个或以上的健康成人血液，按A、B、O型分别混合后，按上法制备。

MEK―6318K稀释液配制ABO反定型试剂红细胞精品文档4页

MEK―6318K稀释液配制ABO反定型试剂红细胞很多医院在做ABO反定型试验时，常因ABO反定型试剂红细胞悬液有效期短，不能购买太多，从而导致试剂暂时短缺；另外红细胞悬液在保存或使用不当时也很容易失效，给临床工作带来诸多不便。

如果能用血细胞分析仪使用的稀释液来配成红细胞悬液来进行ABO反定型的检测，会给临床带来很大的便利。

现就其可行性进行研究。

1 资料与方法1.1主要试剂与仪器标准抗-A，抗-B血清，由长春博德生物技术有限责任公司提供；MEK-6318K稀释液（日本光电）、MEK-6318K血细胞分析仪（日本光电）、奥林巴斯医学显微镜（日本）。

血液混匀器（江苏康建）1.2反定型试剂红细胞的制备①分别取5人份健康同型新鲜Rh阳性的A、B、O型红细胞各0.5ml混合；②用无菌等渗生理盐水洗涤红细胞，3000r/min离心3min，共3次；③再用MEK-6318K稀释液洗涤2次，以充分置换红细胞中的生理盐水；④用三种稀释液配成4ml/dl的A、B、O三种血型试剂红细胞；⑤将三种试剂红细胞悬液混合分装在八只压灭菌的试管中，加上胶塞，置4±2℃保存。

每隔2d取一只样品进行检测。

1.3检测项目1.3.1细胞形态观察并计数在显微镜下观察红细胞的形态并用MEK-6318K血细胞分析仪测定红细胞的数量。

1.3.2溶血情况观察和上清液游离Hb（血红蛋白）测定肉眼观察A、B、O三种血型试剂上清液的颜色，初步判断试剂的溶血情况。

然后用MEK-6318K血细胞分析仪测定游离Hb含量。

1.3.3细菌生长情况观察将A、B、O三种血型试剂红细胞摇匀，取一接种环接种于血琼脂培养基上，置37℃温箱培养24h后观察是否有细菌生长。

1.3.4试剂的抗原性和特异性检测分别向含有100ulA、B、O三种血型试剂红细胞的试管中加入同一批号的标准抗-A，抗-B血清各100ul，混合均匀，1000r/min离心1min，轻轻摇动试管，使沉于管底的红细胞浮起，观察凝集强度的变化。

ABO血型反定型标准操作规程(SOP)

ABO血型反定型标准操作规程（SOP）一．【检验原理】用已知的AI,B,0细胞测定被检者血清中有无相应的抗A或抗B抗体,结合正定型结果判断ABO血型二．【样本要求】被检者血清或血浆三．【检验方法】（1）试管法1.取被检者血清(或血浆)各1滴(50ul)分别加于3支标记好的小试管中2.分别各加1滴(50ul)Al,B.0试剂红细胞3.摇动试管,离心,速度和时间可选以下二种之一：a)转速1000rpm,时间1分b)转速3400rpm,时间15秒4.先观察是否溶血(溶血可能是阳性结果,或者是细菌污染),然后轻轻摇晃,使细胞再悬浮起来。

5.观察凝集状况,并立即记录结果(2)微量板法1.在U型板三个孔内分别加入25-30u1的被检者血清(或血浆)2.每孔内分别加入与血清的等量的A1、B、0试剂红细胞3.混匀(手工振动混匀或机器混匀)4,离心,转速2000m,时间30秒(650G)注:不同的离心机、不同的微量板所需要的离心条件有所区别,正确实验的结果需要适当的离心,反应板应产生清晰的细胞扣及透亮的上清液5.检测溶血情况(溶血可能是阳性结果,或者是细菌污染)6.用震荡仪振动微量板，振动能使阳性反应出现凝集的细胞扣，而若是阴性结果反应很快则细胞扣消除7.记录结果：亦可使用酶标读数仪，与电脑连接可实现自动化检测。

四．【检验结果的解释】ABO血型表现型反应格局表．【检验方法的局限性】本实验必须与正定型一起进行,正反定型不一致须做进一步研究。

单独反定型结果不能作为判断血型的依据。

六．【注意事项】1.如果在反定型试验中,受检者的血清或血浆与0型红细胞试剂产生阳性反应,则需要添加自身对照试验。

如果自身对照为阳性,表明是自身冷凝集素导致。

如果自身对服为阴性,则表明被检者血清或血浆中可能存在AB0系统以外的其他系统的抗体干扰定型。

请按照相关试验方法解决上述定型。

2.本品如出现红细胞颜色变成暗紫色或红细胞发生凝集,出现菌落或溶血严重,则不能使用。

S006红细胞ABO血型(反定型)鉴定标准化操作规程

红细胞ABO血型（反定型）鉴定标准化操作规程一、目的为保证血液及血液成分的红细胞ABO血型在临床上同型输注，确保临床输血安全、有效，根据《临床输血技术规范》第十五条特制定本标准化操作规程。

二、方法采用试管法检测红细胞ABO血型（反定型）。

三、原理用已知的A1、B、O标准红细胞测定被检者血清中有无相应的抗A或抗B抗体，结合正定型结果判断ABO血型。

四、适用范围适用于输血前患者与献血者红细胞ABO血型(反定型)确认。

五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、试剂1、试剂名称：人ABO血型反定型用红细胞试剂盒；2、试剂生产厂家：上海血液生物医药有限公司；3、批准文号：国药准字S2*******；4、包装规格：A1、B、O试剂各1支， 10ml /支；5、贮藏条件；2-8℃保存，不能冰冻。

6、有效期：自检定合格之日起2个月；7、试剂性能：外观、溶血率%、特异性、抗原性均符合检定规程要求。

七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。

2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。

3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。

4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。

八、操作步骤1、取10mmx60mm洁净小试管3支，分别标明A1型细胞、B型细胞、O型细胞，用滴管分别加入受检者血清1滴于试管，再分别用滴管加入A1、B、O型试剂红细胞悬液1滴。

2、，摇动试管，立即以1000rpm离心1min或3400rpm离心15s。

3．先观察是否有溶血，溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染；将试管轻轻摇晃，使沉于管底的红细胞浮起，观察细胞扣情况，并判断凝集强度（见下表）。

如肉眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。

红细胞ABO血型（反定型）结果凝集强度判断对照表4、ABO血型（反定型）表现型反应格局表九、质量控制1、对新进批号的试剂应作亲和力与效价验定。

标准红细胞配置操作规程

标准红细胞配置操作规
程
IMB standardization office【IMB 5AB- IMBK 08- IMB 2C】
标准红细胞配置操作规程标准红细胞用于测定ABO血型(反定型)，可以验证正定型结果的准确性，也可以纠正正定型时发生的错误，避免事的发生。

以下介绍标准红细胞的配置规程：
1搜集新鲜的A型、B型、O型血标本各3份以上。

最好是抗凝血，以便可以吸取较多的红细胞。

2取三支洁净10cm×150mm试管标上“A”“B’’“O”等字样，根据平时工作量需要，分别将三份或以上A型血的适量红细胞吸入标有“A”字样的试管中。

B型、O型依次类推。

3用生理盐水加入上述三支试管进行洗涤，洗涤时需加入生理盐水2／3试管以上，并且要轻轻地充分摇匀，然后以3000转／rain离心5min，弃去上清液。

4重复第3步骤三次，使红细胞充分洗清。

5将上法取得的红细胞再用生理盐水配制成5％的红细胞悬液，每10ml加1滴甲醛溶液。

即得用于反定型的标准红细胞。

可在4"C冰箱中保存
2w。

ABO.RhD血型定型试剂卡标准操作程序（SOP）

ABO.RhD血型定型试剂卡标准操作程序（SOP）一、准备工作（一）微柱凝胶试剂卡的准备：观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡放置室温（18－25℃）平衡，再用专用离心机离心5分钟。

（二）检测标本的准备：1．红细胞悬液的制备：取被检者压积红细胞10微升，加入1.0－1.2毫升红细胞稀释液，外观应为均匀淡红色，无絮状物和血块。

2．血清标本的制备：采集被检对象静脉血，放入含兔脑粉或其它促凝剂的试管中，10分钟后离心，取上清；或者静脉血采入无抗凝剂试管中，4℃放置 12小时，或37℃放置2小时后离心，2000r/min,10分钟，取上清（该上清不得有絮状物或沉淀）。

二、操作步骤1. 将准备好的ABO.RhD血型定型试剂卡做好标记。

2. 将待检者红细胞悬液分别加入第1至第4管中，每管50ul。

3. 将待检者血清分别加入第5和第6管中，每管50ul。

4. 将已知的A型和B型红细胞0.8%浓度悬液或0.8%浓度ABO血型反定型红细胞试剂，每管50ul分别加入第5和第6管。

5. 即刻使用专用离心机离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟），取出肉眼判定结果。

结果判定：阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。

阴性结果：被检红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部。

三、注意事项1. 检测标本必须为抗凝血。

2. 红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。

尽可能应用当日采集的新鲜血做本试验。

如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本是否可以做本实验。

3. 血清标本：血清标本必须充分去纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍阴性红细胞沉淀，呈假阳性反应。

4. 如在微柱凝胶管中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所致溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员报告并讨论。

ABO血型反定型操作步骤

ABO血型反定型操作步骤
【检验方法】
一试管法：
1 取被检查者血清（或血浆）各1滴（50ul ）分别加入3支标记好的小试管中；
2 分别各加1滴(50ul )A1,B,O试剂红细胞；
3 摇动试管，离心，速度和时间可选以下二种之一；
A）转速1000rpm, 时间1分钟；
B）转速3400rpm, 时间15秒；
4 先观察是否溶血（溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染），然后轻轻摇晃，使细胞再悬浮起来；
5 观察凝集状况，并立即记录结果。

二微量板法
1在U型板三个孔内分别加入25--30ul的被检查血清（血浆）；
2 每孔内分别加入与血清的等量的A1，B,O试剂红细胞；
3 混匀（手工振动混匀或机器混匀）；
4 离心，转速2000rpm，时间30秒（650G）
注：不同的离心机，不同的微量板所需要的离心条件有所区别，正确实验的结果需要适当的离心，反应板应产生清晰的细胞扣及透亮的上清液。

5 检测溶血情况（溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染）；
6 用振荡仪振动微量板，振动能使阳性反应出现凝集的细胞扣，而若是阴性反应很快则细胞扣消除；
7 记录结果，亦可使用酶标读数仪，与电脑连接可实现自动化检测。

【检验结果的解释】
ABO血型表现型反应格局表
正定型反定型血型
抗A试剂抗B试
剂A 细胞 B 细
胞
O 细
胞
+ - - + - A - + + - - B - - + + - O + + - - - AB。

血型鉴定反定型细胞配制操作作业指导书

血型鉴定反定型细胞（A、B细胞）悬液配制操作作业指导书
1、目的
配比已知血型细胞（A、B型）用于血型鉴定反定型细胞
2.原理
ABO血型鉴定：根据红细胞膜表面有无A抗原和（或）B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型4钟。

可利用红细胞凝集试验，通过正反定型确定ABO血型。

所谓正定型，是指用标准抗A、抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或（和）B抗原；所谓反定型，是指用标准A型细胞和B型细胞来测定血清中有无相应的抗A和（或）抗B
3.样品类型
EDTA-K2抗凝血（合血时A、B型辫子最佳）
4.操作步骤
4.1将已知A、B型细胞装入干净试管内
4.2离心机（2500r）离心5min
4.3用干净吸头吸弃上清液直至肉眼不见血浆
4.4加入5ml低离子液，摇匀，离心机（2500r）离心5min，干净吸头吸弃上清液，重复洗涤红细胞3次
4.5取两只干净塑料管，标记A、B并加入低离子液，按0.5%-0.8%配制洗涤红细胞悬液，摇匀。

5.计划措施
5.1离心时注意转速（离心力）和时间设置
5.2离心后观察有无溶血，凝露，乳糜等，如有慎用
5.3配比后的反定型细胞需做验证试验，用已知A、B型做血型鉴定
5.4反定细胞需尽快使用，如细胞溶血弃用
输血科
2021年4月3日（修订）。

人abo血型反定型用红细胞试剂盒说明书

人abo血型反定型用红细胞试剂盒说明书人 ABO 血型反定型用红细胞试剂盒是一种用于鉴定人 ABO 血型的试剂盒。

以下是一个简要的说明书：
1. 产品名称：人 ABO 血型反定型用红细胞试剂盒
2. 用途：用于人 ABO 血型的反定型检测
3. 原理：基于红细胞表面抗原的特异性，通过与抗体的反应来确定血型
4. 试剂盒组成：
（1）Anti-A 试剂：含有抗 A 抗体的试剂
（2）Anti-B 试剂：含有抗 B 抗体的试剂
（3）质控细胞：用于质量控制的已知血型红细胞
5. 使用方法：
（1）采集受检者的血液样本，并分离出血清。

（2）将 Anti-A 和 Anti-B 试剂分别加入到两个干净的试管中。

（3）向每个试管中加入一滴受检者的血清。

（4）轻轻混匀试管，观察是否有凝集反应。

（5）如果出现凝集反应，则说明受检者的血型为相应的抗体对应的血型。

（6）如果没有出现凝集反应，则需要进一步进行其他检测以确定血型。

6. 注意事项：
（1）本试剂盒仅供体外诊断使用。

（2）在使用前，请仔细阅读产品说明书，并按照说明进行操作。

（3）试剂盒应在 2-8°C 下保存，避免冻结。

（4）请勿使用过期的试剂盒。

（5）在使用过程中，应严格遵守无菌操作规程。

1。

ABO血型鉴定正反定型试验方法(最新整理)

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ABO 血型鉴定正反定型试验方法
1、试剂和材料：
（1）单克隆抗 A、抗 B 试剂（由试剂厂家提供）
（2）显微镜、载玻片
（3）A 型、B 型红细胞（本实验室制备的 5%混悬液）
5. 判读、解释并记录反应结果。
（2）反定型：
1. 在玻片上间隔一定距离标明 Ac 和 Bc 字样。分别滴加 5%的 A 型红细胞悬液、B 型红细
胞悬液各一滴；
2. 在玻片每滴红细胞悬液上滴加待测血清各一滴；
3. 混匀（同正定型）；
4. 轻摇玻片，两分钟内观察结果，必要时可以在低倍镜下观察；
5. 判读、解释并记录反应结果。
6. 结合正反定型反应结果、判定血型，见表 1
表 1 ABO 血型正反定型试验结果判定
正定型
反定型
抗体试剂+红细胞标本
红细胞试剂+血清标本
血型
抗A
抗B
A 细胞
B 细胞
+
O
O
+
A
O
+
+
O
B
O
O
+
+
O
+
+
OOABFra bibliotek3、附注：
（1）表中“O”表示无凝集，“+”表示凝集，一般都是 3-4 个+的强凝集反应；（2）2 分钟后红细胞仍呈均匀混悬状态是阴性反应；（3）若得到弱的或可凝集反应结果，该标本应用试管法重新试验；（4）由于新生儿在出生 4~6 个月内，血浆中的 ABO 抗体活动太弱，并且含有来自母亲的抗体，故新生儿血型只能由检测红细胞抗原的正定型来测定其 ABO 血型；（5）做正定型时，还可加一抗 A、B 血清（O 型人血清），以检测 ABO 弱抗原；做反定型时可以加试一 O 型红细胞，借以证实是否有不规则抗体的存在。

人abo血型反定型用红细胞试剂盒说明书

人ABO血型反定型用红细胞试剂盒说明书随着医学技术的不断发展，人类对于血型的研究也日益深入。

ABO血型系统是最基本的血型系统之一，其中A、B、AB和O四种不同的血型为我们所熟知。

在医疗保健领域，人们需要经常进行血型鉴定和反定型，以确保输血或移植等医学行为的安全性。

而在这个过程中，使用红细胞试剂盒是非常重要的。

接下来，我将就人ABO血型反定型用红细胞试剂盒说明书的相关内容进行深入探讨。

我们需要了解红细胞试剂盒的作用和原理。

红细胞试剂盒是用于血型鉴定和反定型的临床试剂，其中包含了A和B血型抗原。

在进行血型鉴定和反定型时，我们会将被检测者的血液与试剂盒中的试剂进行混合反应，通过观察凝集和溶解的情况来判断血型。

而在实际应用中，我们还需要参考说明书中的操作方法和步骤，以确保测试结果的准确性和可靠性。

人ABO血型反定型用红细胞试剂盒说明书通常会包含以下内容：首先是试剂盒的基本信息，包括产品名称、规格、生产日期、有效期等。

其次是试剂盒的保存和运输，说明书会详细介绍试剂盒的保存条件和运输方式，以确保试剂盒在使用前后的质量稳定性。

接着是试剂盒的使用方法，说明书会一步一步地介绍如何进行血型鉴定和反定型的操作流程，包括加样方法、振荡方式、反应时间等。

再者是试剂盒的注意事项，例如在使用过程中需要特别注意的细节和操作技巧。

最后是试剂盒的质量控制，说明书还会介绍如何进行质量控制和质量评价，以确保测试结果的准确性和可靠性。

我个人认为人ABO血型反定型用红细胞试剂盒说明书中的操作步骤和质量控制是非常重要的。

在进行血型鉴定和反定型时，严格按照说明书中的操作步骤进行操作可以确保测试结果的准确性和可靠性。

进行质量控制也是非常关键的，只有在严格的质量控制下，测试结果才能具有较高的可靠性和准确性。

我在使用红细胞试剂盒时，始终严格按照说明书的要求进行操作，并重视质量控制的环节。

人ABO血型反定型用红细胞试剂盒说明书是我们进行血型鉴定和反定型必不可少的工具。

ABO血型分型操作规程sop

ABO血型分型操作规程sop
1．项目名称：ABO血型分型
2．方法：玻片法
3．试剂：抗A、抗B血型定型试剂（单克隆抗体）
上海市血液中心生产
含抗A、抗B血型定型试剂各10ml
成分：分泌抗人A型和抗人B型血型抗原单抗的杂交瘤细胞培养上清液。

4．原理：A型红细胞膜上含有A抗原，B型红细胞膜上含有B抗原。

AB型红细胞膜上含有A、B两种抗原。

O型红细胞膜上不含有抗原。

抗A、抗B分型试剂与受检者的红细胞混合时，可发生凝集，结果判定见下表：
5．操作步骤：将抗A分型试剂、抗B分型试剂各一滴，分别滴于玻璃片A、B两处。

分别取等体积待检血样于抗A分型市集和抗B分型试剂处，用不同的竹签将市集与血样混匀，同时不停的摇动玻璃片并观察血球凝集的出现
6．注意事项：1。

调匀后就不要用竹签搅动，以免影响大凝块的形成。

2．如发现检定结果与交叉合血结果不符，应进行反定型。

3.对含有较多自身凝集素的受检者，需用37度生理盐水洗涤受检者红细胞2—3次，然后鉴定。

7．标本要求病人准备：新鲜静脉血或末梢血.采血应顺利，不应有溶血和凝块。

对病人无特殊要求，特殊病人由临床医生告知注意事项8. 参考文献：
1)全国临床检验操作规程（第3版）
2)厂商说明书
9. 编写者：
制定日期：
修改日期：
科主任对规程认可：。

ABORHD血型质控品使用SOP

标准操作程序（SOP）一、用途本试剂盒用于长春博迅生物技术有限责任公司生产的ABO、RhD血型定型检测卡（单克隆抗体）（12人份/盒）、ABO血型反定型试剂盒（人血红细胞）（0.8%）的室内质量控制。

二、准备工作将质控品和反定细胞从冰箱取出后平衡至室温。

三、操作步骤1.取4张待检微柱凝胶卡做好标记；2.将样本1分别加入第1张卡的1-4孔中，各1滴（50μl）；3.将样本3加入第1张微柱凝胶卡的Ac、Bc孔内各1滴（50μl），分别在标记孔内加入0.8%A1、B标准红细胞各1滴（50μl）。

4.将样本2分别加入第2张卡的1-4孔中，各1滴（50μl）；5.将样本4加入第2张微柱凝胶卡的Ac、Bc孔内各1滴（50μl），分别在标记孔内加入0.8%A1、B标准红细胞各1滴（50μl）；6.将样本5加入第3张卡的1~4孔内，将样本6加入第4张卡的3~4孔内。

7.用该试剂卡的专用离心机离心，判定结果。

结果判定：1．本产品为非定值质控品，反应格局表中所提供的结果仅为定性结果，因此建议各实验室对每批号的产品自行建立相应的参考值。

2．质控品检测结束后，用户应将检测结果与参考值进行比较，阳性质控结果与预期结果比较出现超过1+凝集强度的差异，或阴性质控出现阳性结果时，均视为失控。

失控后要分析查找原因，必要时重复实验，确认失控原因消除后开展正常检测工作。

样本1 + 0 +样本2 0 + +样本3 0 +样本4 + 0样本5 0 0 +样本6 / / 0“0”代表阴性，“/”代表不确定, “+”代表阳性。

四、注意事项1.本产品作为室内质控品，仅供临床实验室进行质量控制，不用于临床检测结果的判断。

2.使用时应轻拿轻放，避免剧烈振荡。

3.室内质控品严禁在室温长期存放，室内质控完毕后立即将剩余试剂放在2~8℃储存。

4.如红细胞质控品发生凝集，出现菌落或严重溶血，请不要使用；若红细胞质控品出现轻微溶血，可使用生理盐水对其进行洗涤，重新悬浮后使用。

(完整版)ABO血型鉴定正反定型试验方法

ABO血型鉴定正反定型试验方法
一、试剂和材料：
（一）单克隆抗A、抗B试剂（由试剂厂家提供）
（二）显微镜、载玻片
（三）A型、B型红细胞（本实验室制备的5%混悬液）
（四）EDTA抗凝的待测红细胞全血
（五）竹签
二、方法（玻片法）：
（一）正定型：
1.在一块干净的玻片上，间隔一定距离做好标记，分别滴一滴抗A和抗B试剂；
2.在每滴试剂中加一滴待测红细胞全血；
3.用竹签混匀试剂和红细胞，并使混合物直径＞15mm；
4.轻摇玻片，两分钟内观察结果，必要时可以在低倍镜下观察；
5.判读、解释并记录反应结果。

（二）反定型：
1.在玻片上间隔一定距离标明Ac和Bc字样。

分别滴加5%的A型红细胞悬液、B型红细胞悬液各一滴；
2.在玻片每滴红细胞悬液上滴加待测血清各一滴；
3.混匀（同正定型）；
4.轻摇玻片，两分钟内观察结果，必要时可以在低倍镜下观察；
5.判读、解释并记录反应结果。

6.结合正反定型反应结果、判定血型，见表1
表1 ABO血型正反定型试验结果判定
三、附注：
（一）表中“O”表示无凝集，“+”表示凝集，一般都是3-4个+的强凝集反应；
（二）2分钟后红细胞仍呈均匀混悬状态是阴性反应；
（三）若得到弱的或可凝集反应结果，该标本应用试管法重新试验；
（四）由于新生儿在出生4~6个月内，血浆中的ABO抗体活动太弱，并且含有来自母亲的抗体，故新生儿血型只能由检测红细胞抗原的正定型来测定其ABO血型；
（五）做正定型时，还可加一抗A、B血清（O型人血清），以检测ABO弱抗原；做反定型时可以加试一O型红细胞，借以证实是否有不规则抗体的存在。