序列超速离心分离血浆脂蛋白
血脂的生物化学检验练习题
血脂的生物化学检验练习题一、单选题1、HDL中存在的主要载脂蛋白是（）A、ApoAB、ApoB100C、ApoCD、ApoEE、Apo(a)正确答案：A2、血浆脂类的运输形式是（）A、脂蛋白B、载脂蛋白C、糖蛋白D、球蛋白E、免疫球蛋白正确答案：A3、试述血浆脂蛋白超速离心法，脂蛋白密度由大到小顺序是（）A、LDL、VLDL、CM、HDLB、HDL、LDL、VLDL、CMC、VLDL、LDL、HDL、CMD、CM、VLDL、LDL、HDLE、HDL、VLDL、LDL、CM正确答案：B4、下列各种脂蛋白中，TG含量最多的脂蛋白是（）A、CMB、VLDLC、LDLD、HDLE、Lp(a)正确答案：A5、胆固醇是下列化合物体物，但除外（）A、胆汁酸B、细胞膜C、雄激素D、雌激素E、胰岛素正确答案：E6、下列各种脂蛋白中，能够抑制纤溶酶活性的脂蛋白是（）A、VLDLB、LDLC、HDLD、Lp(a)E、MDL正确答案：D7、运输内源性甘油三脂的脂蛋白主要是下列哪一种（）A、CMB、VLDLC、LDLD、HDLE、Lp（a）正确答案：B8、下列哪一项是肝脏清除胆固醇的主要方式（）A、转变成类固醇B、转变成维生素DC、在肝细胞内转变成胆汁酸D、合成低密度脂蛋白E、转变成粪固醇正确答案：C9、不属于血浆脂蛋白组成成分的是（）A、糖脂B、磷脂C、胆固醇D、载脂蛋白E、三酯甘油正确答案：A10、载脂蛋白B族中主要成分是（）A、ApoB48B、ApoB75C、ApoB100D、ApoB41E、ApoB36正确答案：C11、目前常规检验方法中通常测定下述何种物质来反映人体内HDL的含量（）A、HDL中的甘油三酯B、HDL中的胆固醇C、HDL中的磷脂D、HDL中的载脂蛋白E、HDL中的脂蛋白（α）正确答案：B12、密度最低的脂蛋白是（）A、CMB、前β－LρC、β－LρD、α－LρE、HDL正确答案：A13、脂蛋白各组份中密度最低的是（）A、LDLB、HDLC、IDLD、CME、VLDL正确答案：D14、运输内源性胆固醇的脂蛋白主要是下列哪一种（）A、HDLB、VLDLC、LDLD、CME、Lp（a）正确答案：C15、1970年以后世界卫生组织把高脂蛋白血症分为几型（）A、2型B、5型C、6型D、7型E、8种正确答案：C16、下列哪项比值降低表示心血管疾病危险度加大（）A、ApoAⅠ/ApoAⅡB、ApoAⅡ/ApocⅢC、ApoB/ApoCⅠD、ApoAⅠ/ApoBE、ApoAⅡ/ApoB正确答案：D17、LDL中存在的主要载脂蛋白是（）A、ApoAB、ApoB100C、ApoCD、ApoE正确答案：B18、脂肪酸主要是以下列何种形式运输的（）A、与LDL结合的形式B、与VLDL结合的形式C、与球蛋白结合的形式D、与CM结合的形式E、与脂蛋白结合的形式正确答案：E二、多选题1、下列哪些不是脂蛋白参与胆固醇的逆向转运（）A、CMB、VLDLC、LDLD、HDLE、Lp(a)正确答案：ABCE2、下列关于HDL的叙述正确的是（）A、主要在肝中合成B、肾不能合成C、将外周组织的游离胆固醇转运到肝内处理D、主要结合蛋白为ApoA1E、LCAT通过转醋化反应将基中的游离胆固醇转化成胆固醇酯正确答案：ACDE3、关于Lp（a）叙述正确的是（）A、Lp（a）是动脉粥样硬化的独立危险因子B、Lp（a）含有ApoB100和Apo（a）C、Apo(a)与纤溶酶原具有高度同源性D、Lp（a）在脂蛋白电泳时多位于α与前-β脂蛋白之间E、Apo(a)可从Lp（a）上脱落下来，剩下仅含ApB100的颗粒称LDL 正确答案：ABCD4、对LDL描叙错误的是（）A、运输内源性胆固醇B、运输内源性甘油三酯C、运输外源性胆固醇D、运输外源性甘油三酯E、既有内源性胆固醇，又有外源性胆固醇正确答案：BCDE5、胆固醇是下列哪些化合物体物（）B、细胞膜C、雄激素D、雌激素E、胰岛素正确答案：ABCD6、下列哪些脂蛋白不具有抗动脉粥样硬化作用（）A、LDLB、β-VLDLC、ox-LDLD、HDLE、Lp(a)正确答案：ABCE7、下列哪些不是肝脏清除胆固醇的主要方式（）A、转变成类固醇B、转变成维生素DC、在肝细胞内转变成胆汁酸D、合成低密度脂蛋白E、转变成脂肪正确答案：ABDE8、不能反映HDL水平的载脂蛋白是（）A、ApoA IB、ApoAⅡC、ApoBD、ApoCⅠE、ApoCⅢ正确答案：BCDE三、填空题1、血浆脂蛋白密度分离法的VLDL相当于电泳法的（）正确答案：前β－Lρ2、与动脉粥样硬化发生率呈负相关的脂蛋白是（）正确答案：HDL3、载脂蛋白B是何种脂蛋白的主要蛋白南（）正确答案：LDL4、与动脉粥样硬化发生率呈负相关的脂蛋白是（）正确答案：HDL5、脂蛋白各组份中密度最大的是（）正确答案：HDL6、将乳糜血浆放置4℃环境中过奖，次晨血浆出现“奶油样”上层，说明下列何种脂蛋白增多（）正确答案：CM7、HDL中存在的主要载脂蛋白是（）正确答案：A18、载脂蛋白AI是下列哪种脂蛋白的主要结构蛋白（）正确答案：HDL。
血浆脂蛋白亚组分检测方法的研究进展与评价
·161·血浆脂蛋白亚组分检测方法的研究进展与评价潘富根 浙江大学医学院附属第四医院 浙江义乌 322000摘 要：血浆脂蛋白存在许多亚组分型，如脂蛋白残留颗粒（RLP）、脂蛋白a[Lp（a）]、高密度脂蛋白（HDL）亚型（HDL2，HDL3））和颗粒浓度，例如小而密低密度脂蛋白颗粒（sd-LDL-P）等，在心血管疾病（CVD）的进展中起关键作用。
其类型和数量与CVD 风险和治疗选择密切相关。
本文将综述目前实验室中血浆脂蛋白亚组分检测方法的研究进展。
关键词：血浆脂蛋白 亚组检测 研究进展血浆脂蛋白是异质的血液颗粒，在体内运输或吸收特定的脂质，因此在脂质代谢、信号转导和调节中起着至关重要的作用。
LDL和HDL大小及颗粒浓度是预测未来CVD风险的重要检测指标[1]。
目前有许多分离、测量和定量脂蛋白的新方法，为早期筛查相关疾病和风险评估提供了全面的数据。
本文对既往应用检测方法及相关的新型检测方法进行综述。
1 LDL相关检测1.1…电泳法主要脂蛋白被定量检测，并且不同的脂蛋白变化也可以直接观察到。
该方法是一种确定性测试，可检测III型高脂蛋白血症患者的特征性宽β带。
利用酶和免疫化学方法检测脂蛋白。
与自动化仪器相比，电泳法对脂蛋白的检测需要更多的人员和更高的技术要求，因此不适用于样品量大的常规实验室。
1.2…Friedward计算法（间接法）使用Friedward计算方法来检测TG<2,000…mg/L的样品中的LDL-C结果可靠。
TG浓度在2,000和4,000…mg/L之间的样品大多可靠。
TG>4,000…mg/L且存在木糖颗粒或III型高脂蛋白血症的患者样品结果不可靠。
尽管Friedward方法有很多局限性并有待改进，但仍被大多数常规临床实验室广泛使用。
1.3…均相法HDL-C均质方法问世后，日本科学Sugiuchi等首先报道使用均质测量LDLC。
该方法可以实现LDL-C检测的完全自动化。
两种血浆脂蛋白分类的方法
两种血浆脂蛋白分类的方法
血浆脂蛋白是指血液中的脂肪和蛋白质的结合物，它们是营养物质运输和代谢的重要载体。
以下是两种常见的血浆脂蛋白分类方法：
1. 电泳法(Electrophoresis)：电泳法是一种利用电场分离带电颗粒的技术，它可以用于分离和鉴定血浆脂蛋白。
在电泳过程中，血浆脂蛋白会根据其电荷和大小在电场的作用下移动到不同的位置，从而被分离和分类。
电泳法可以将血浆脂蛋白分为乳糜微粒(Chylomicron)、极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)等几大类。
2. 超速离心法(Ultra-centrifugation)：超速离心法是一种利用离心机分离和纯化颗粒的技术，它可以用于分离和鉴定血浆脂蛋白。
在超速离心过程中，血浆脂蛋白会根据其密度和大小在离心力的作用下沉淀到不同的位置，从而被分离和分类。
超速离心法可以将血浆脂蛋白分为乳糜微粒、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白等几大类。
以上两种方法都可以将血浆脂蛋白进行分类，但是它们的原理和应用略有不同。
在实际应用中，可以根据实验目的和要求选择合适的方法进行血浆脂蛋白的分离和鉴定。
血浆脂蛋白密度由低到高的顺序
问题：[单选] 正常血浆脂蛋白按照密度由低到高顺序的排列为（）A . VLDL-IDL-LDL-HDLB . CM-VLDL-IDL-LDLC . VLDL-CM-LDL-HDLD . VLDL-LDL-IDL-HDLE . CM-VLDL-LDL-HDL参考答案：E●参考解析由于脂蛋白的蛋白质和脂质的组成、比例不同，它们的颗粒大小、表面电荷及密度均有差异。
因此可用电泳法和超速离心法将它们分离。
用电泳法后，按迁移率的快慢依次分为。
α-脂蛋白、前β-脂蛋白、β-脂蛋白和位于点样原点的乳糜微粒四种。
α-脂蛋白最快，CM最慢。
用超速离心法，按密度高低依次分为高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)和乳糜微粒(GM)四种。
血浆脂蛋白：是指哺乳动物血浆（尤其是人血浆）中的脂蛋白复合物。
血浆脂蛋白可以将脂质（甘油三酸酯，磷脂，胆固醇）从一个器官转运到另一个器官。
血浆脂蛋白根据密度分类：（1）乳糜微粒（<0.95 g / cm3），密度非常低，可将甘油三酸酯和胆固醇酯从小肠运输到组织，肌肉和脂肪组织。
（2）VLDL（0.95-1.006g / cm3）在肝脏中产生，并将脂质转运至组织。
当VLDL转运至全身组织时，它会分解为三酰基甘油，载脂蛋白和磷脂。
最终，VLDL被转化为低密度脂蛋白。
（3）低密度脂蛋白（LDL，1.006-1.063g / cm3）将胆固醇运输到组织。
经过一系列复杂的过程，LDL与LDL受体结合并被细胞吞噬。
（4）肝脏中还会产生高密度脂蛋白（HDL，1.063-1.210 g / cm3），可能负责清除细胞膜上多余的胆固醇。
当血浆中的卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT）将脂肪酸残基从卵磷脂转移至胆固醇形成胆固醇脂质时，HDL将这些胆固醇脂质转运至肝脏。
肝脏将多余的胆固醇转化为胆汁酸。
组成结构脂蛋白中的脂与脂之间没有共价键。
它们中的大多数受脂质的非极性部分与蛋白质成分之间的疏水相互作用的束缚。
血浆脂蛋白的分类、产生部位、组成特点、功能6讲解学习
目录
血浆脂蛋白的分类 血浆脂蛋白的产生部位
血浆脂蛋白的组成特点 血浆脂蛋白的功能
血浆脂蛋白的分类
• 血浆脂蛋白是脂类在血浆中的存在与运输 形式。
• ㈠血浆脂蛋白的分类 • ⑴电泳法： • (2)超速离心法：
电泳法
• 电泳法：按血浆脂蛋白移动的 • 快慢可分为-脂蛋白、前-脂蛋白、 • -脂蛋白、CM。
CM的生理功能 运输外源性TG。
（二）极低密度脂蛋白
来源
VLDL是由肝脏合成的
肝细胞合成的TG 磷脂、胆固醇及其酯
代谢
+ apo B100、E
LPL VLDL
VLDL LPL、HL LDL 残粒
FFA
FFA
外周组织
LPL——脂蛋白脂肪酶 HL—— 肝脂肪酶
内 源 性 VLDL 的 代 谢
VLDL的生理功能： 运输内源性TG
（一）乳糜微粒
来源
小肠合成的TG
apo B48 、 AⅠ、
和合成及吸收的 +
AⅡ、 AⅣ
磷脂、胆固醇
代谢
血液 新生CM
成熟CM
FFA
外周组织
CM残粒 LPL
肝细胞摄取（ apoE受体）
LPL（脂蛋白脂肪酶）
• 存在于组织毛细血管内皮细胞表面 • 使CM中的TG、磷脂逐步水解，产生甘油、
FA及溶血磷脂等。
② 使胆固醇酯进入HDL内核逐渐增多
③ 使新生HDL成熟
成熟HDL可与肝细胞膜SR-B1受体结合 而被摄取。
胆固醇在肝内转变成胆汁酸或直接通过 胆汁排出体外。
胆固醇酯 部分由 HDL 转移到 VLDL 少量由 HDL 转移到肝
临床生物化学检验考试必备名解问答【超重点知识归纳】
胰岛素原被分解为胰岛素与31个氨基酸的C肽，二者以等摩尔数分泌入血，C肽虽然没有生物学活性但对于保证胰岛素的正常结构是必需的。C肽的半寿期约35min，比胰岛素更长，且其降解不在肝脏而在肾脏，肝脏的代谢可以忽略，所以与外周血胰岛素浓度相比，可更好地反映胰岛β细胞功能。而且C肽不受外源性胰岛素干扰，也不与胰岛素抗体反应
3.低血糖,,指血糖浓度低于空腹参考水平下限。低血糖由多种原因引起，其症状主要是由交感神经兴奋和脑缺血所致，临床分为空腹性低血糖和反应性低血糖。其诊断主要依据多次连续测定等其他相关指标。
4.反应性低血糖，一种临床疾病，病人在日常生活中有餐后症状，毛细血管血或动脉血浆葡萄糖浓度低于2.5～2.8mmol/L。
1.糖尿病,是一组由于胰岛素分泌不足或（和）胰岛素作用低下而引起的代谢性疾病，高血糖是其特征。长期高血糖将导致多种器官的损害、功能紊乱和衰竭，尤其是眼、肾、神经、心脏和血管系统。两种病理过程参与糖尿病的发病机制：胰腺ß细胞的自身免疫性损伤及机体对胰岛素的作用产生抵抗。
2.妊娠期糖尿病,指在妊娠期间任何程度的糖耐量减退或糖尿病发作。
2．C反应蛋白,在急性炎症病人血清中出现的可以结合肺炎球菌细胞壁C-多糖的蛋白质，是急性时相反应时极灵敏的指标，升高早且程度高。
3．急性时相反应蛋白,在炎症性疾病如手术、创伤、心肌梗死、感染、肿瘤等情况下，血浆中一系列浓度发生变化的蛋白质的总称，其中大部分蛋白质如AAT、AAG、Hp、Cp、CRP、C3和C4等浓度升高，PA、ALB和TRF等浓度下降。这些血浆蛋白质统称为急性时相反应蛋白
4．血浆运载蛋白,在血浆中能结合其他物质并对之起运输载体作用的蛋白质，如ALB、PA、HDL、LDL、TRF等。
血清高密度脂蛋白的超速离心、氧化修饰及DiI标志
（ ｘ ＨＤ ）标记 的 ＨＤ （ ｉ Ｈ Ｌ ｏ ． Ｌ； Ｌ ＤＩ Ｄ ）结合到体 外培 养的 Ｅ Ｖ．０ ． Ｃ ３４细胞 。 明 Ｄ Ｉ Ｄ 表 ｉ Ｈ Ｌ保持 了正常 脂蛋 白的配体功 ．
能 结 论 ： 方 法 缩 短 了超 速 离心 时 间 并 降 低 了标 记 成 本 ． 果 理 想 。 成 功 应 用 于 脂 蛋 白 受体 的研 究 。 本 效 可 关键词 脂 蛋 白类 ．Ｈ Ｌ 超 速 离 心 法 Ｄ 氧 化 ＤＩ ｉ
维普资讯
实用 医学 杂志 ２ ０ ０ ７年第 ２ 卷 第 ７ ３ 期
９７ ３
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基 础 研 究 ・
血清高密度脂蛋 白的超速离心 、 氧化 修 饰 及 ＤＩ 志 ｉ标
周 立尧 陈 爱华 宋旭 东
摘 要 目的 ： 讨一种方便 快捷 地从 血浆 中分 离高密度脂蛋 白（ Ｌ 及 氧化修饰 、 探 ＨＤ ） 荧光标记 的方法 。方法 ：
Ａ －ｕ ，Ｏ Ｇ Ｘｕ ｉ ａＳ Ｎ 一 ｈ
Ｄ ｐ ｒ ｎ ｏ ａｄｏａｃ ｌ ｉ ａｅ ， Ｚ ｕｉ ｇ Ｈ ｓｉ ｌ Ｓ ｕｈｒ ｄｃｌＵ ｉ ｒｉ ， ｅ ａｔ ｔ ｆＣ ｒｉ ｓｕ ｒＤｓｓ ｓ ｈｊ ｎ ｏｐｔ ， ｏｔｅｎＭｅ ｉ ｎ ｅｓｙ ｍｅ ｖ ａ ｅ ａ ａ ａ ｖ ｔ
ｃ ｌ ｃ ｌ ｒ ｄ ／ ｈ ｏ ｗｈ ｃ ｒ ｖ ｄ ｈ ｔ ｔ ｅ ｅｌ ｕ ｔ ｅ ｎ ｖ ｒ ， ｓ ｕ ｉ ｈ ｐ ｏ ｅ ｔ ａ ｈ Ｄｉ － ＩＨＤＬ ｈ ｄ ｔ ｅ ｎ ｒ ｌ ｉａ ｄ ｂ ｎ ｉ ｇ ｐ ｏ ｅ ｔ ｓ ｆ ｌ ｏ ｒ ｔ ｉ ． ． ａ ｈ ｏ ｍａ ｌ ｎ — ｉ ｄ ｎ ｒ ｐ ｒｉ ｏ ｉ ｐ ｏ ｅｎ ｇ ｅ ｐ Ｃｏ ｃｕ ｉ ｎ Ｔ ｉ ｍｅｈ ｄ ｓ ｏ ｅ ｓ ｔ ｅ ｔ ｆｕ ｒ ｃ ｎ ｒ ｕ ａｉ ｎ ａ ｄ ｔ ｅ ｃ ｓ ｏ ａ ｅｉ ｇ ａ ｄ ｃ ｕ ｄ ｂ ｐ ｌ ｄ ｉ ｈ ｎ ｌ ｓｏ ｈ ｓ ｔ ｏ ｈ ｒ ｎ ｈ ｍｅ ｏ ｈ ａ ｅ ｔ ｆ ｇ ｔ ｎ ｏ ｔ ｆ ｌ ｂ ｌ ｎ ｏ ｌ ｅ ａ ｐ ｉ ｎ ｔ ｅ ｔ ｉ ｉ ｏ ｈ ｎ ｅ
简述超速离心法血浆脂蛋白的种类及其功能
简述超速离心法血浆脂蛋白的种类及其功能
超速离心法血浆脂蛋白可分为四种：
1. 低密度脂蛋白(LDL)：LDL是一种脂蛋白，它主要负责将胆固醇从肝脏转运到全身其他组织和细胞，以满足各细胞的胆固醇需求，同时也是血液中胆固醇含量最多的脂蛋白。
2. 高密度脂蛋白(HDL)：HDL是一种脂蛋白，它主要负责将血液中多余的胆固醇从组织和细胞转运回肝脏，以减少血液中胆固醇的含量，同时也是血液中胆固醇含量最少的脂蛋白。
3. 中密度脂蛋白(VLDL)：VLDL是一种脂蛋白，它主要负责将肝脏合成的甘油三酯从肝脏转运到全身其他组织和细胞，以满足各细胞的甘油三酯需求，同时也是血液中甘油三酯含量最多的脂蛋白。
4. 载脂蛋白A1(ApoA1)：ApoA1是一种脂蛋白，它主要负责将血液中多余的甘油三酯从组织和细胞转运回肝脏，以减少血液中甘油三酯的含量，同时也是血液中甘油三酯含量最少的脂蛋白。
超速离心法分离血浆脂蛋白
超速离心法分离血清脂蛋白
取正常人混合血清,定量移入烧杯中,根据d = m P v ,用万分之一分析天平根据称量法测出血清初始密度do ,用干燥固体溴化钾调血清密度至1 300g P ml ,按Radding2Steining 公式计算需加入的干燥KBr 重量,公式如下:X = V o (dm2do)P1201312 ×d m 式中,V o 代表原血清毫升数,do 代表初始血清密度,dm代表需调定的血清密度,01312 为KBr 的比容(ml P g) ,X代表需加KBr 克数。
待固体溴化钾完全溶解后,将血清分别移至10 个透明的离心管中,再用滴管沿管壁小心铺加密度为11006 的氯化钠溶液约28 ml ,勿使界面混扰。
平衡后加盖封闭,小心放入55122Ti角度转头,置入Beckman L8255 型超速离心机中,选用慢加速工作程序,加速和减速时间均控制在45 min ,10 ℃,50 000 r P min ,离心5 h。
离心结束后,取出离心管,见血清脂蛋白已分层。
超速离心方法
超速离心方法
超速离心方法是一种常用的分离和纯化技术，其基本原理是利用物质在高速旋转时受到的离心力不同，从而实现物质的分离和纯化。
超速离心方法通常包括以下几个步骤：
1. 准备样品：将待分离的样品进行适当的预处理，如去除杂质、调整pH值等。
2. 选择合适的离心管：根据样品的性质和要求，选择合适的离心管，如超速离心管、固定角度离心管等。
3. 设定离心条件：根据样品的性质和要求，设定合适的离心速度、离心时间和温度等条件。
4. 进行离心：将样品放入离心机中，按照设定的条件进行离心。
5. 收集分离物：离心结束后，根据需要将上清液或沉淀物收集起来，进行后续的分析或纯化。
超速离心方法具有分离效果好、操作简便、适用范围广等优点，因此在生物学、医学、化学等领域得到了广泛应用。
例如，超速离心方法可以用于分离细胞器、病毒、蛋白质等生物大分子，也可以用于纯化DNA、RNA等核酸分子。
同时，超速离心方法还可以与其他技术相结合，如密度梯度离心、免疫沉淀等，以实现更为复杂和精确的分离和纯化。
需要注意的是，超速离心方法也存在一些缺点和限制。
例如，高速离心可能会对样品造成一定的损伤或变性，因此在选择离心条件和操作时需要注意。
此外，对于一些特殊的样品或分离要求，可能需要采用其他更为适合的分离和纯化技术。
血浆脂蛋白密度由低到高的顺序
血浆脂蛋白密度从低到高的顺序是CM-VLDL-LDL-HDL。
血浆脂蛋白是指哺乳动物血浆（特别是人）中的脂蛋白复合物。
血浆脂蛋白可以将脂质（三酰基甘油，磷脂和胆固醇）从一个器官转运到另一个器官，并且可以根据其密度分为乳糜颗粒，极低密度脂蛋白，低密度脂蛋白和高密度脂蛋白，主要包括电泳和超速离心。
血浆脂蛋白根据密度分类：（1）乳糜颗粒（<0.95g / cm3），密度很低，可将甘油三酸酯和胆固醇酯从小肠转运到组织，肌肉和脂肪组织。
（2）在肝脏中产生的极低密度脂蛋白VLDL（0.95-1.006g / cm3），将脂质转运至组织，当VLDL转运至全身组织时，会分解为三酰基甘油，载脂蛋白和磷脂，最终VLDL为转化为低密度脂蛋白。
（3）低密度脂蛋白（LDL，1.006-1.063g / cm3）将胆固醇转运到组织。
经过一系列复杂的过程，LDL与LDL受体结合并被细胞吞噬。
（4）高密度脂蛋白（HDL，1.063-1.210g / cm3）也产生于肝脏，可能是去除细胞膜上过多胆固醇的原因。
当血浆中的卵磷脂：胆固醇酰基转移酶（LCAT）将卵磷脂中的脂肪酸残基转移至胆固醇以产生胆固醇脂质时，HDL会将这些胆固醇脂质转运至肝脏。
肝脏将多余的胆固醇转化为胆汁酸。
（5）脂蛋白中的脂类和蛋白质之间没有共价键，但是它们中的大多数被脂类的非极性部分与蛋白质成分之间的疏水相互作用所束缚。
一般认为，血浆脂蛋白在颗粒表面具有相似的结构，呈球形，并且是极性分子，例如蛋白质和磷脂，因此它们是亲水性的。
非极性分子（如甘油三酸酯和胆固醇酯）隐藏在内部。
磷脂的极性部分可以与蛋白质结合，而非极性部分可以与其他脂质结合，后者充当蛋白质和脂质之间的桥梁，并使不溶性脂质固定在脂蛋白中。
磷脂和胆固醇在维持脂蛋白构型中都起着重要作用。
因此，脂蛋白是一种以TG和CE为核心的复合物，载脂蛋白，磷脂和游离胆固醇单层覆盖在表面，从而确保了水不溶性脂质可以在血浆中正常运输。
临床生化检验简答题
1．简述双缩脲法测定血清总蛋白的原理。
答：血清中蛋白质中相邻的肽键〔一CO—NH一〕在碱性溶液中能与二价铜离子作用产生稳定的紫色络合物。
此反响和双缩脲在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色的反响相似，因此将蛋白质与碱性铜的反响称为双缩脲反响。
生成的紫色络合物颜色的深浅与血清蛋白质含量成正比，故可用来测定蛋白质含量。
2．简述BCG法测定血清清蛋白的原理。
答：清蛋白具有与阴离子染料澳甲酚绿结合的特性，而球蛋白根本不结合这些染料，故可直接测定血清清蛋白。
血清清蛋白在pH4.2的缓冲液中带正电荷，在有非离子型外表活性剂存在时，可与带负电荷的染料BCG结合形成蓝绿色复合物，其颜色深浅与清蛋白浓度成正比。
与同样处理的清蛋白标准比拟，可求得血清中清蛋白含量。
3．血浆清蛋白具有哪些功能，测定血清清蛋白有哪些临床意义？答：血浆清蛋白具有以下生理功能。
(1)血浆中主要的载体蛋白，许多水溶性差的物质可以通过与清蛋白的结合增加亲水性而便于运输。
(2)维持血浆胶体渗透压。
(3)具有维持酸碱平衡的能力。
(4)重要的营养蛋白。
血浆清蛋白浓度测定的临床意义如下。
(1)低清蛋白血症常见于以下疾病。
①清蛋白合成缺乏：常见于急性或慢性肝脏疾病，但由于清蛋白的半寿期较长，因此，在局部急性肝病患者，其浓度降低可表现不明显；蛋白质营养不良或吸收不良也可造成清蛋白合成缺乏。
②清蛋白过度丧失：由于肾病综合征、慢性肾小球肾炎、糖尿病肾病、系统性红斑狼疮等，清蛋白由尿中损失，有时每天尿中排出蛋白达5g以上，超过肝脏的代偿能力；肠道炎症性疾病或肿瘤时，也可由肠道损失一定量的蛋白，从而引起血浆清蛋白含量下降；在烧伤及渗出性皮炎，可从皮肤丧失大量蛋白。
③清蛋白分解代谢增加：由组织损伤〔外科手术或创伤〕或炎症〔感染性疾病〕引起。
④清蛋白的分布异常：如门静脉高压时大量蛋白质尤其是清蛋白从血管内渗漏入腹腔。
肝硬化导致门脉高压导致腹水时，由予肝脏合成减少和大量漏入腹腔的双重原因。
《临床生物化学检验》第四章练习题及答案
《临床生物化学检验》第四章练习题及答案第四章脂质和脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验[A型题]1.经超速离心法，血浆脂蛋白自下面上分别是（）A. CM，VLDL，IDL，LDL，HDLB.HDL，LDL，IDL，VLDL，CMC .CM，VLDL，LDL，IDL，HDL D.HDL，IDL，LDL，VLDL，CME. HDL，LDL，IDL，CM，VLDL2.乳糜微粒中主要的载脂蛋白是（）A. Apo B48B. Apo B100C. Apo C IID .ApoE E. Apo(a)3. Apo B100的生理功能叙述正确的是（）A.是VLDL的结构蛋白B.是LDL受体的配体C.可作为HDL受体的配体D.参与合成装配和分泌富含胆固醇的VLDLE.不能调节LDL从血浆中的清除速率4.抗动脉粥样硬化的因子是（）A .CM B. VLDL C. LDL D. HDLE. Lp(a)5.血清ApoA- I水平可以直接反映（）A. CMB. LDLC. VLD LD. Lp(a)E. HDL6.血清Apo B水平可以直接反映（）A .CMB .LDL C.VLDL D. Lp(a) E .HDL7.可作为动脉粥样硬化独立的危险因素是（）A. CMB. LDLC.VLDLD. Lp(a) E .HDL8.有关ApoA -I错误的是（）A.是HDL的主要结构蛋白 B组织浓度最高C.与冠心病发病事呈正相关D.可直接反映HDL水平E.与ApoA-II 之比为3:19.富含胆固醇的是（）A. CMB.LDLC. VILDLD. Lp(a)E. HDL10.下列血浆脂蛋白运输内源性甘油三酯的是（）A. CMB. LDLC. VLDLD. Lp(a)E. HDL11. 下列哪项比值降低表示心血管疾病危险度加大（）A. ApoA-I/Apo A- II B .ApoA-I/Apo BC. Apo B/ApoC-ID. Apo A- II /ApoC-IIIE. ApoA- II /Apo B12. 下列脂蛋白中密度最低的是（）A.LDL B VLDL C. CM D. Lp(a) E HDL13. 下列脂蛋白中密度最高的是（）A. CM B . β-脂蛋白 C.前β-脂蛋白D. Lp(a) E .α-脂蛋白14.以下富含甘油三酯的脂蛋白是（）A. CM和VLDLB. LDL和HDLC. VLDI. 和HDLD. Lp(a)和CME.CM和HDL15. HDLC测定的参考方法是（）A.电泳法B.超速离心结合ALBK法C.匀相测定法D.聚乙烯硫酸沉淀法E.磷钨酸镁沉淀法16.下列运输外源性TG的血浆脂蛋白是（）A. CMB.LDLC.VLDLD. Lp(a)E. HDL17. 脂蛋白电泳时向正极迁移速度最快的是（）A. LDLB. CMC. VLDLD. Lp(a)E. HDL18. IV型高脂蛋白血症是指空腹血浆中（）A. CM升高B. LDL升高C. VLDL升高D. CM及VLDL同时升高E.HDL升高19. LDL受体可识别血浆LDL颗粒的（）A. Apo B48B. ApoA-IC. ApoB100D. ApoCE. Apo A- II20. 酶法测定胆固醇通常采用的波长是（）A. 540nmB. 630nm C:.280nm D.500nmE. 260nm21. 能活化脂蛋白脂肪酶的载脂蛋白是（）A. Apo A-IB. Apo A-IIC. Apo B100D. Apo B48E.Apo- II22. 血浆静置实验中观察上呈奶油状，下层透明，电泳呈原点深染的是（）A.I型高脂血症B. II型高脂血症C.III 型高脂血症D.IV刑高脂血症E.V型高脂血症23. .III 型高脂血症是指指空腹血浆中（）A. CM升高B. LDL升高C. VLDL 升高D. IDL升高 E .CM及VLDL升高24. 催化胆固醇酯化生成作用的酶主要是（）A.过氧化物酶B.卵磷脂胆固醇酰基转移酶C.肉毒碱脂酰转移酶D.脂蛋白蛋白脂肪酶E胆固醇酯酶25. 血清中的胆固醇在下列那种脂蛋白中含量最多（）A.CMB.LDLC.VLDL.D. Lp(a)E.HDL26.血清脂蛋白电泳与血清蛋白电泳在操作过程中的最大不同在于（）A.所用的电泳槽不同B.支持介质相同C.电泳支持介质不同D.电泳缓冲液不同E.所用的染料不同27.新生HDL不断接受何种脂类进人其内部从而转变为成熟型HDL（）A.磷脂B.脂蛋白C.游离脂肪酸D.甘油三酯E.胆固醇酯28.某患者的血标本检查结果为：TG 3. 78mmol/L，Chol 4.91mmol/L，前β-脂蛋白增高，β-脂蛋白正常,乳糜微粒阴性,血清乳状化,高脂蛋白血症分型为（）A. I 型高脂血症B. II 型高脂血症C.III型高脂血症D. IV型高脂血症E.V型高脂血症29. VLDL受体的配体是（）A.含Apo B100的脂蛋白B.含Apo E的脂蛋白C.含Apo C的脂蛋白D.含Apo A的脂蛋白E.含Apo J的脂蛋白30. I型清道夫受体的SRCR区域富含下列哪种氨基酸（）A.组氨酸B.半胱氨酸C.赖氨酸D.色氨酸E.胱氨酸31.清道夫受体有广泛的配体谱，其配体的共同特点是（）A.都为阴离子化合物B.都含有Apo AC.都含有Apo B100D.都含有Apo EE. 都含有Apo H32. LPL 在发挥其酶活性时所必需的辅因子是（）A. ApoA- IB. ApoA-IIC. ApoC-ID. ApoC-IIE. IDL33.能用于全自动生化分析仪上测定血浆脂蛋白的方法为街（）A.超速离心分离法B.沉淀分离法C.电泳分离法D.遮蔽直接测定法E.免疫分离法34. 能用于全自动生化分析仪上测定血浆载脂蛋白的方法为（）A.免疫扩散法B.免疫投射比浊法C.免疫火箭电泳法D.脂质抽提法E.离心法35. Apo E的哪种等位基因对冠状动脉硬化的发展有防护作用（）A. E4B.E3C. E2D. E1E. E736. 下列哪种染料能用于血清脂蛋白电泳分析实验（）A.丽春红B.考马斯亮蓝C.苏丹黑BD. 氨基黑10BE.油红[x型题]1.正常人空腹12小时后抽血做血清脂蛋白电泳，会出现哪几条电泳谱带（）A.CMB. β-脂蛋白C.前β-脂蛋白D. a-脂蛋白E. Lp(a)2. 下列哪几项是载脂蛋白的功能（）A. 构成并稳定脂蛋白的结构B.修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶的活性C.作为脂蛋白受体的配体D. 参与脂蛋白代谢过程E.引起AS3. Apo E具有基因多态性，常见的异构体有招电幼家会（）A. E1B.E2.C.E3D.E4E.E74. 下列哪几项是Apo E的生理功能（）A.是LDL受体的配体和肝细胞CM残粒受体的配体B.具有基因多态性，与个体血脂水平及动脉粥样硬化发生发展密切相关C.参与激活水解脂肪的酶类,参与免疫调节及神经组织的再生D.参与胆固醇的逆向转运E.参与TG转运5. 目前研究得最详尽的脂蛋白受体有隐项电（）A. LDL受体B. VLDL受体C. HDL受体D.清道夫受体E.激素受体6. LDL受体的配体是（）A.含ApoA的脂蛋白B.含ApoB100的脂蛋白C. 含ApoC的脂蛋白D.含ApoE的脂蛋白E.Lp(a)7. 下列哪些是清道夫受体的配体（）A.修饰的LDLB.某些磷脂C.细菌脂多糖D.某些糖类E.多聚次黄嘌呤核苷酸8.下列哪些酶是HDL代谢中的关键酶，对HDL的产生与转化有重要的作用（）A. LPLB. HLC. ALPD. LCATE. CETP9.根据1970年世界卫生组织对高脂蛋白血症的分型方案,对脂代谢素乱患者血清标本需进行哪些检测，才能确定其分型（）A.测定血清胆固醇浓度B. 测定血清甘油三酯浓度C.血清脂蛋白电泳图谱分析D. PAGEE.血清置于4℃过夜后，观察血清混浊程度10.一个血标本，经离心后上层血清呈云雾状混神，其原因可能是（）A.胆固醇增高B.甘油三酯增高C. 乳糜微粒存在D.磷脂增高E.胆固醇降低11. 下列哪些疾病会引起继发性高脂蛋白血症（）A.糖尿病对B.甲状腺功能低下症C. 库欣综合征D.肾病综合征E.癌症12.引起高HDL血症的主要原因有（）A. CETP活性降低B. CETP活性增高C. HL活性降低D. HL活性增高E. LPL活性降低13.下列哪些脂蛋白能增加动脉壁内胆固醇的内流和沉积（）A. HDLB. LDLC. β-VLDLD. ox-LDLE. Lp(a)14. 下列哪些脂蛋白是致动脉粥样硬化因素（）A.脂蛋白残粒B. 变性LDLC.B型LDLD. Lp(a)E. HDL15.用薄层层析法分析人的冠状动脉样硬化斑块样成分，检查出的脂质主要有（）A .胆固醇 B. 胆固醇酯 C.甘油三酯 D.游离脂肪酸 E.类胆固醇16.下列哪些方法是防治动脉粥样硬化性心脑血管疾病的重要措施（）A.降低血清胆固醇浓度B.降低血清甘油三酯浓度C.降低血清HDL浓度D. 降低血清LDL浓度E.降低血清Lp(a)浓度17.酶法测定血清总胆固醇浓度中用到的酶有（）A.甘油激酶B.胆固醇酯酶C.胆固醇氧化酶D.过氧化物酶E.丙酮酸激酶18. 下列哪些方法能用于检测Lp(a) （）A.免疫投射比浊法B.免疫散射比浊法C.酶联免疫吸附试当D.发射免疫测定法E.离心法19.下列哪几项是代谢综合征的特点（）A.低胰岛素血症B. 高甘油三酯血症C.高密度脂蛋白降低D.癔症E.高血压20.下列哪几项属于变性LDL.（）A.乙酰化LDLB.糖化LDLC. VLDLD. LDL-CE. ox-LDL。
超速离心高效液相色谱测定血清脂蛋白亚类和脂蛋白(a)胆固醇
测定存在很 多问题 ， 实验 室间结果 可比性差 ， 准化 难度很 大 。测 定脂 蛋 白（） 固醇［ 标 ａ胆 脂蛋 白（） 固醇］ ａ胆 水平 不仅 可 以避免
免疫测定 中由于脂蛋 白（） ａ 分子大小不等 所造成 的定量 不准确性 ， 而且 ， 由于各脂蛋 白浓度都 以胆 固醇表示 ， 可以将脂蛋 白（） ａ
上可能也是最可靠 的脂蛋 白分 离方法 ， 是一种物理分 离方 法， 影响 因素 最 少。但 由于脂蛋 白（） ａ 在较 大密度 范 围 内均有分布 ， 与 Ｈ Ｌ和 Ｌ Ｌ都有重 叠， Ｄ Ｄ 很难进行直接分 离。
本研 究用脯氨 酸解 离脂蛋 白（）或载脂蛋 白（ ）与 Ｂ ａ ａ 脂蛋 白的 可能 非共 价键 结合 ， ２巯基 乙醇（ Ｅ） 离脂蛋 白（）使 用 Ｍ 解 ａ，
首先血 清溶液在 脯氨酸存在 下， ，４ １０４的背景 密度超速 离心 ， 脂蛋 白（） ａ 分布在 离心管的底部 ； 然后用含 Ｍ 的 密度 液将 底 Ｅ
部组分的密度调 节至 １００ 再次超速 离心， ．４ ， 则解 离后的脂蛋 白（ ）ｄ＜１０６ 漂 浮到顶部组 分 ， Ｐ Ｅ测 定顶部 组分胆 固醇 即 ａ（ ．３ ） ＨＬ
为 脂 蛋 白（ ） 固 醇 内和 总变异 系数分别 为 １８ ％ ～２ １％和 ２ ８ ％ ～４ ２ ％。测 定脂蛋 白（ ） 固醇与免 ａ胆 ．４ 、７ ．５ ．９ ａ胆 疫比 浊法测定的脂蛋 白（） ａ质量 高度相 关（ ＝０９９ ） 脂蛋 白（ ） 固醇平 均约 占脂蛋 白（ ） ｒ ．０５ ， ａ胆 ａ 质量 的 ２ ％。脂蛋 白（ ） 固醇 ， ４ ａ胆
成为不含 载脂蛋 白（） ａ的脂蛋 白［ 脂蛋 白（－］ ａ 。分别 用多密度 超速 离心和序 列超速 离心 的方法证 明 了脂蛋 白（） 离前后 存 ） ａ解
超速离心法分离血浆脂蛋白
超速离心法分离血浆脂蛋白
超速离心法分离血清脂蛋白
取正常人混合血清,定量移入烧杯中,根据d = m P v ,用万分之一分析天平根据称量法测出血清初始密度do ,用干燥固体溴化钾调血清密度至1 300g P ml ,按Radding2Steining 公式计算需加入的干燥KBr 重量,公式如下:X = V o (dm2do)P1201312 ×d m 式中,V o 代表原血清毫升数,do 代表初始血清密度,dm代表需调定的血清密度,01312 为KBr 的比容(ml P g) ,X代表需加KBr 克数。
待固体溴化钾完全溶解后,将血清分别移至10 个透明的离心管中,再用滴管沿管壁小心铺加密度为11006 的氯化钠溶液约28 ml ,勿使界面混扰。
平衡后加盖封闭,小心放入55122Ti角度转头,置入Beckman L8255 型超速离心机中,选用慢加速工作程序,加速和减速时间均控制在45 min ,10 ℃,50 000 r P min ,离心5 h。
离心结束后,取出离心管,见血清脂蛋白已分层。
血清高密度脂蛋白的超速离心、氧化修饰及DiI标志
血清高密度脂蛋白的超速离心、氧化修饰及DiI标志周立尧;陈爱华;宋旭东【期刊名称】《实用医学杂志》【年(卷),期】2007(23)7【摘要】目的:探讨一种方便快捷地从血浆中分离高密度脂蛋白(HDL)及氧化修饰、荧光标记的方法.方法:采用一次性密度梯度超速离心法,经超速离心分离后获得HDL(10℃,50 000 r/min,5 h),并用Cu2+进行氧化修饰(37℃,50 μmol/L,24 h)及DiI进行荧光标记(37℃,15 mg/mL,15 h).结果:5 h内成功分离出脂蛋白,并氧化、标记了HDL;琼脂糖凝胶电泳、Bradford蛋白质定量及MDA测定证实其为纯度和浓度较高的HDL及氧化HDL(OX-HDL);标记的HDL(DiI-HDL)结合到体外培养的ECV-304细胞,表明DiI-HDL保持了正常脂蛋白的配体功能.结论:本方法缩短了超速离心时间并降低了标记成本,效果理想,可成功应用于脂蛋白受体的研究.【总页数】4页(P937-940)【作者】周立尧;陈爱华;宋旭东【作者单位】510282,广州市,南方医科大学珠江医院心血管内科;510282,广州市,南方医科大学珠江医院心血管内科;510282,广州市,南方医科大学珠江医院心血管内科【正文语种】中文【中图分类】R3【相关文献】1.血清总胆固醇与高密度脂蛋白胆固醇比值作为冠心病危险标志的意义 [J], 李璐;纪玲2.冠心病患者血浆氧化修饰低密度脂蛋白与血清高密度脂蛋白及其亚组分关系的研究(摘要) [J], 田庆印;潘其兴;邹明瑾3.高密度脂蛋白氧化修饰导致抗动脉粥样硬化功能异常 [J], 李小林;李建军4.氧化修饰高密度脂蛋白对大鼠颗粒细胞激素分泌的影响及相关机制 [J], 马金平; 李红娟; 李艳敏5.高密度脂蛋白及其亚型氧化修饰后对人脐静脉内皮细胞损伤及TFPI-1表达的影响 [J], 彭湘萍;姜志胜;任重;赵战芝;黄宜娥;唐志晗;刘录山因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
超速离心沉降法
超速离心沉降法
超速离心沉降法（High-Speed Centrifugation Precipitation Method）是一种分离和纯化分子的方法，可以用来纯化蛋白质、纤维素、核酸等分子。
它通过使用高速离心机来分离悬浮液中的不同成分，将较大的分子和细胞沉降到液体底部，而较小的分子会留在液体上层。
这种方法可以用来纯化大量的分子，并且通常比其他方法更快、更简单。
超速离心沉降法通常用于分离和纯化分子。
它是通过使用高速离心机来分离悬浮液中的不同成分，将较大的分子和细胞沉降到液体底部，而较小的分子留在液体上层来实现的。
这种方法可以用来纯化大量的分子，并且通常比其他方法更快、更简单。
超速离心沉降法的一个优点是可以在几分钟内完成分离和纯化过程。
它也不需要使用许多化学试剂，并且可以用来纯化不同种类的分子。
然而，超速离心沉降法也有一些缺点。
例如，如果分子的大小相差太大，可能会导致分离效率低下。
此外，超速离心沉降法也不能用来分离较小的分子，因为这些分子可能会被沉降到液体底部。
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序列超速离心分离血浆脂蛋白
[目的与要求]
了解超速离心分离技术的原理，掌握制备性分离血浆脂蛋白的方法。
[原理]
基本原理见第六章6.1、6.2节。
本实验采用正常人抗凝血浆，以NaBr为密度介质，利用各脂蛋白颗粒密度不同，经过序列超速离心大量制备各血浆脂蛋白，经透析脱盐、PEG20000浓缩后保存备用。
[操作步骤]
1．血浆制备：取献血员全血400mL，EDTANa2抗凝，1000rpm离心15min，分离
血浆。
根据血浆体积，加入0.015%的苯甲基氟磺酰（PMSF），防止脂蛋白变性。
2．CM和VLDL分离：血浆中加入适量的NaBr，调节密度至1.019g/ml，分置于离心管（38.5ml/管）中，加盖，用1.019g/ml密度液平衡，放入60Ti转头，在10℃下30，000rpm （100，000×g）离心20小时。
CM和VLDL浮于离心管上层，用吸管小心吸取。
3．LDL分离：下层溶液中加入适量的NaBr，调节密度至1.060g/ml，分置于离心管中，加盖，用1.060g/ml密度液平衡，放入60Ti转头，在10℃下40，000rpm（170，000×g）离心24小时。
LDL浮于离心管上层，用吸管小心吸取。
4．Lp（a）和HDL分离：下层溶液中加入适量的NaBr，调节密度至1.125g/ml，分
置于离心管中，加盖，用1.125g/ml密度液平衡，放入60Ti转头，在10℃下45，000rpm （225,000×g）离心24小时。
Lp（a）、HDL和少量LDL浮于离心管上层，用吸管小心吸取。
5．HDL分离：下层溶液中加入适量的NaBr，调节密度至1.21g/ml，分置于离心管中，加盖，用1.21g/ml密度液平衡，放入60Ti转头，在10℃下50，000rpm（280，000×g）离心24小时。
HDL浮于离心管上层，用吸管小心吸取。
下层含有总量的50%的游离apoA-Ⅳ，可用于分离apoA-Ⅳ。
6．透析：已分离好的各部分脂蛋白含有大量的NaBr，需要透析脱盐。
将各脂蛋白
溶液分别装入透析袋中，对抗0.01mol/L PBS（pH7.4）溶液透析过夜。
7．浓缩：将透析过夜的脂蛋白溶液连同透析袋一起放入盛有40%的PEG20000的
烧杯中，浓缩至适当体积。
[试剂]
1．NaBr
2．密度液：以NaBr与双蒸水配制，以比重计测定密度。
配制成1）1.019g/ml； 2）
1.060g/ml；3）1.125g/ml；4）1.21g/ml 四种密度液。
3．苯甲基氟磺酰（PMSF）
4． 0.01mol/L PBS（pH7.4） 5. 40% PEG20000
[材料]
1．比重计： 1.000-1.100g/ml和1.100-1.200g/ml比重计
2．离心管：聚碳酸酯厚壁离心管，Beckman
3．角度转头： 60Ti Beckman
4．超速离心机：Beckman LM-80
5.平衡天平。