第十一章 革兰氏阴性需氧杆菌

本法适 合于动物的大群检疫，主要用于绵羊 和山羊，其次为猪。
? 检测时，将布氏杆菌水解素0.2ml注射 于羊尾根皱襞部或猪耳根部皮内，24 及48h后各观察反应一次。
若注射部发 生红肿，即判为阳性反应。
此法对慢 性病例的检出率较高。
四、免疫防治我国目前用的疫苗： M5弱毒活菌苗 可用于牛、羊和鹿布病的预防。
病ห้องสมุดไป่ตู้牛流产，产出发育较为完全的死胎
病牛流产，产出发育不全的胎儿，全身肿胀，有出血斑
流产的胎儿及胎衣
胎衣水肿增厚，呈胶样浸润，子叶上有出血
感染羊阴囊胀大、水肿
病公猪睾丸肿大
病猪睾丸萎缩
病猪关节肿胀
三、微生物学诊断 布氏杆菌病常表现为慢性或隐性感染， 其诊断和检疫主要依靠血清学检查及 变态反应检查。
细菌学检查仅用于发生流产的动物和 其他特殊情况。
第十一章 革兰氏阴性需氧杆菌
第十一章 革兰氏阴性需氧杆菌
重要的革兰氏阴性需氧杆菌 布氏杆菌属 伯克氏菌属 假单胞菌属 波氏菌属 弗朗西斯菌属
第一节 布氏杆菌属（Brucella）布氏杆菌是多种动物和人布氏杆菌病的 病原。
该菌不仅危害畜牧生产，而且严 重损害人类健康，因此在医学或兽医学 领域都极为重视。
血清肝汤琼脂 形成无色透明、隆起、光滑、湿润、有光 泽、边缘整齐的圆形小菌落。
直径0.5～ 1.0mm。
（三）生化反应 本菌能分解尿素，能产生硫化氢。
根据 不同生物型产生硫化氢的情况、脲酶作 用时间和对碱性染料抑制作用的敏感性 不同，可鉴别不同种型的布氏杆菌。
（四）种和生物型种 流产布氏杆菌（Br.abortus） 型 1、2、3、4、5、6、7型马尔他布氏杆菌（Br.melitensis）猪布氏杆菌（Br.suis）1、2、3型1、2、3、4、5型绵羊布氏杆菌（Br.ovis）沙林鼠布氏杆菌（Br.neotomae） 犬布氏杆菌（Br.canis） 田鼠布氏杆菌（Br.microti） 牛布氏杆菌（Br.ovis） 海豹布氏杆菌（Br.pinnipediae） 海豚布氏杆菌（Br.cetacease）1个1个 1个 ？ ？ ？ ？
? 需氧，适温37℃，最适pH6.6～7.4。
? 流产布氏杆菌和绵羊布氏杆菌初代 分离时尚需5％～10％CO2环境。
培养特性 初次分离时生长缓慢，需5～10d甚至20～30d 才能长出菌落，但实验室传代保存的菌株， 培养48～72h即可生长良好。
肝汤肉汤 呈轻微浑浊生长，无菌膜。
但培养日久， 可形成菌环。
（五）抗原性 布氏杆菌具有A和M两种表面抗原，两 者的含量在不同的种型间有差异。
流 产布氏杆菌以A抗原为主，马尔他布氏 杆菌以M抗原为主，而猪布氏杆菌两种 抗原含量相近。
A抗原和M抗原分别能与相应的单相抗 血清发生凝集反应。
可用凝集试验鉴 别两种不同的抗原。
二、致病性 ? 本菌致布氏杆菌病，可感染60多种动 物，包括人类、各种家畜、野生哺乳 动物、啮齿动物、鸟类、爬虫类、两 栖类和鱼类。
一、主要生物学特性 （一）形态及染色球杆状或短杆状，长0.6～1.5μm，多单在。
不形成芽孢和荚膜，无鞭毛不运动。
革兰 氏染色阴性。
柯氏染色法 布氏杆菌呈红色，其他菌呈 绿色或蓝色。
布氏杆菌
（二）生长要求与培养特性 生长要求 ? 初代分离营养要求较高，培养基中 常需加入血清、血液、肝汤、葡萄 糖或泛酸钙和赤藓醇等。
? 细菌通过皮肤、口腔、眼结膜、阴道 粘膜等部位侵入体内。
? 多数动物为隐性感染。
? 实验动物中，豚鼠最易感，小鼠和家 兔也可感染。
本病特征 母畜 生殖器官和胎盘发炎，引起流产、不 孕和多种组织的慢性炎症（如慢性子 宫内膜炎、乳房炎、关节炎等）。
公畜 睾丸炎、副睾炎 幼畜 关节炎
流产母牛从阴道排出污灰色或棕红色有恶臭的分泌物
可疑病畜于3～4周后采血重检，如仍为 可疑反应，牛、羊即可按阳性处理；猪、 马则须视情况而定。
虎红平板凝集试验 取被检血清和虎红平板抗原各0.03ml， 滴加于玻板上，混匀，在4～10min内出 现任何程度凝集者即为阳性反应。
乳汁环状试验 为检查新鲜乳汁中抗体的方法，操作简 便，准确性较高，常被用于畜群布氏杆 菌病的监测。
2、用已知抗原检测抗体 动物感染该菌7～15d出现抗体，检测 抗体是布病诊断和检疫的主要手段。
方法： 玻板凝集试验 虎红平板凝集试验 乳汁环状试验 试管凝集试验 补体结合试验
试管凝集试验 操作按检疫规程进行。
? 牛、马、骆驼血清凝集价1:100时判为 阳性，1:50为可疑。
? 羊、猪、狗等血清凝集价1:50为阳性， 1:25为可疑。
补体结合试验 特异性和敏感性均较凝集试验高， 是慢性布氏杆菌病一种可靠的诊断 方法，已作为世界各国清除病畜的 必要手段。
规定1:10被检血清阻止溶血在50％ 以上，即为阳性反应。
因补体结合 反应的操作方法复杂，只在特殊情 况下才应用。
（三）变态反应检查 ? 变态反应现象一般在感染后的20～25d 出现，因此不宜作早期诊断。
皮下注射或气 雾免疫。
免疫期羊1年半，牛、鹿各为1年。
M90弱毒活菌苗 同M5弱毒活菌苗 。
S2弱毒活菌苗 可用于猪、羊、牛等动物，甚至可以接种怀孕 动物而不引起流产。
免疫方法采用饮水、气雾 和皮下注射3种。
免疫期猪为1年，牛和羊均为 2年。
第二节 伯克氏菌属（Burkholderia）是新建立的一个属，该属成员来自假单 胞菌属Ⅱ群，现有30多种细菌，对人畜 致病的主要有鼻疽伯克氏菌及伪鼻疽伯 克氏菌。
一、鼻疽伯克氏菌（B.mallei） 鼻疽伯克氏菌，原名鼻疽假单胞菌，惯 称鼻疽杆菌，为马、骡、驴等单蹄兽鼻 疽病的病原体，也能感染人及其他家畜 和多种野生动物。
此病可呈急性或慢性 经过，病变特征为皮肤、鼻腔粘膜、肺 脏及其他实质器官形成典型的鼻疽结节 和溃疡。
（一）细菌学检查 1、病料 流产胎儿的胃内容物、胎盘、羊水、阴 道分泌物、乳汁和尿液等。
2、诊断方法涂片 病料 分离培养 柯氏染色 纯培养 镜检 鉴定豚鼠血清抗体
（二）血清学检查 1、用已知抗体检测抗原 用已知抗体检查病料中的布氏杆菌， 或鉴定分离菌是否为布氏杆菌可用： 荧光抗体技术 反向间接血凝试验 间接炭凝集试验 免疫酶组化法